Subscribe to DeepL Pro to translate larger documents.

Visit www.DeepL.com/pro for more information.

TERB Lingkungan dan patologis

UKA
Faktor-faktor yang mempengaruhi
keberhasilan penetasan di dua
sarang penyu tempayan (Caretta
caretta)
Giudo Pietroluongo1 , Cinzia Centelleghe1🖂 , Giuseppe Sciancalepore1 , Luca Ceolotto1 ,
Patrizia Danesi2 , Davide Pedrotti1 & Sandro Mazzariol1
Dalam beberapa tahun terakhir, laporan mengenai daerah peneluran penyu tempayan (Caretta
caretta) di Mediterania telah meluas, bersamaan dengan adanya catatan baru mengenai sarang-
sarang yang berada di bagian utara garis pantai Italia, yaitu di Laut Tyrrhenian dan Laut Adriatik.
Daerah-daerah ini dicirikan oleh aktivitas manusia yang intensif, seperti pariwisata, perikanan, dan
lalu lintas laut, yang semuanya mungkin terlibat dalam pengaruh penggunaan habitat pesisir oleh
spesies laut. Ancaman antropis ini, selain ancaman alami dan perubahan karakteristik lingkungan
pantai, dapat mempengaruhi pertumbuhan mikroorganisme yang menyebabkan kegagalan
penetasan. Di antara mikroorganisme, infeksi jamur dari genus Fusarium (Link, 1809) dianggap
sebagai salah satu penyebab utama penurunan populasi penyu secara global. Pada musim panas
2021, infeksi
dua sarang penyu tempayan yang paling utara di dunia dipantau di sepanjang garis pantai Adriatik
Utara (Veneto, Italia). Catatan pertama ini berpotensi menjadi kandidat daerah yang cocok untuk
sebagian besar siklus hidup penyu tempayan dan dapat mewakili daerah peneluran penyu kecil yang,
menurut Prato dan rekan-rekannya, tidak diperhatikan karena kurangnya pemantauan khusus.
Fusariosis Telur Penyu (STEF) dianggap sangat mengganggu keberhasilan penetasan penyu di
bagian utara. Perubahan iklim dan dampak antropogenik telah dinilai sebagai salah satu bahaya
tertinggi bagi kesehatan penyu dan dapat berperan dalam perkembangan STEF. Perubahan
lingkungan, aktivitas manusia, dan patogen yang muncul perlu mendapat perhatian utama dalam hal
penelitian kesehatan dan manajemen konservasi.

Penyu tempayan, Caretta caretta (Linnaeus, 1758), merupakan spesies penyu yang paling banyak ditemukan di
Laut Tengah, mewakili populasi yang berbeda dengan ciri-ciri demografi dan genetik yang spesifik1,2 . Karena
kepentingan konservasinya, penyu ini terdaftar dalam berbagai konvensi internasional untuk perlindungannya
(Habitat Directive 92/43/CEE; Convention on International Trade of Endangered Species; Konvensi Bonn; Konvensi
Bern), dan telah ditetapkan sebagai "Rentan" dalam penilaian Daftar Merah International Union for Conservation of
Nature (IUCN).
Di Laut Mediterania, setiap tahun dilaporkan adanya aktivitas peneluran penyu tempayan dengan estimasi
lebih dari 8000 butir telur bertelur setiap tahunnya3 , terutama di wilayah paling timur (Yunani, Turki, Siprus, dan
Libya). Keberadaan aktivitas peneluran juga dilaporkan di sepanjang garis pantai Italia4 , dengan laporan yang
lebih sering terjadi di sepanjang garis pantai selatan (yaitu Calabria, Sisilia, Campania). Dalam beberapa tahun
terakhir, laporan aktivitas peneluran penyu tempayan telah meningkat dengan total 244 sarang pada tahun
2021 di Italia (tartapedia.it), bersamaan dengan perluasan wilayah peneluran di Laut Mediterania2, dan dengan
catatan baru tentang sarang di sebelah utara pesisir pantai Tyrrhenia dan Adriatik5,6. Daerah-daerah ini dicirikan
oleh aktivitas manusia yang lebih intensif, seperti pariwisata, perikanan, dan lalu lintas laut, yang semuanya
Laporan Ilmiah | (2023) 13:2938 | https://doi.org/10.1038/s41598-023-30211-z 1
Laporan Ilmiah
 mungkin n habitat pesisir oleh spesies laut7-12. Kegiatan antropis ini, selain ancaman alami, dapat mengganggu proses
terlibat bertelur, perkembangan embrio, kelainan karapas, dan kelangsungan hidup tukik di pantai13. Sebagai contoh,
www.nature.com/scientificreports
dalam selama tahap embrionik, keberhasilan penetasan dapat dipengaruhi oleh kombinasi beberapa faktor seperti
pengaruh gangguan manusia (seperti pembersihan pantai, kegiatan wisata), polusi, depredasi, erosi pantai, granulometri
penggunaa sedimen, akar tanaman

1Departemen Perbandingan Biomedis dan Ilmu Pangan, Universitas Padua, 35020 Legnaro, Italia. 2Istituto
Zooprofilattico Sperimentale delle Venezie (IZSVe), 35020 Legnaro, Italy.🖂 email: cinzia.centelleghe@unipd.it

Laporan Ilmiah | (2023) 13:2938 | https://doi.org/10.1038/s41598-023-30211-z 2

Laporan Ilmiah
www.nature.com/scientificreports/

invasi, curah hujan yang berlebihan, genangan air pasang, aliran gas, salinitas, kelembaban, dan infeksi patogen14-17.
Semua faktor tersebut dapat mempengaruhi parameter fisik yang penting untuk perkembangan embrio yang
sehat18 dan pertumbuhan mikroorganisme15 , seperti jamur dan bakteri, sehingga mengurangi keberhasilan
penetasan dan menyebabkan kematian embrio. Di antara mikroorganisme, infeksi jamur dari genus Fusarium
(Link 1809) dianggap sebagai salah satu penyebab utama menurunnya populasi penyu secara global15,19,20 yang
juga dikenal sebagai Fusariosis Telur Penyu (STEF). Anggota Fusarium spp. termasuk yang termasuk dalam
kompleks spesies F. solani (FSSC) dan kompleks spesies F. oxysporum telah diisolasi dari cangkang telur dan
jaringan embrio telur penyu yang gagal selama beberapa dekade, dengan beberapa hipotesis mengenai peran
ekologisnya mulai dari dekomposisi hingga patogenisitasnya21. Sekitar 75% dari fusariosis disebabkan oleh anggota
FSSC, dua spesies jamur yang berkerabat dekat, F. keratoplasticum dan F. falciforme22. Kedua spesies ini telah
diisolasi dari telur dan embrio yang belum berkembang dan dianggap sebagai agen penyebab STEF15,23,20 yang
menyebabkan kematian massal pada sarang penyu tempayan di sarang alami dan sarang yang telah direlokasi
di seluruh dunia15.
Penelitian ini melaporkan kasus dua lokasi peneluran penyu tempayan yang paling utara yang dilaporkan
sejauh yang kami ketahui, yang terjadi di sepanjang garis pantai Adriatik utara (Veneto, Italia) pada musim
panas 2021. Lebih lanjut, penelitian ini menjelaskan bagaimana STEF sangat mengganggu keberhasilan
penetasan penyu paling utara.

Hasil
Karakteristik sarang dan hasil reproduksi dijelaskan pada Tabel 1. Di Sarang 1, curah hujan dan pasang surut
air laut terus dipantau untuk segera menghadapi banjir di daerah tersebut dengan barikade permanen dan
tempat berlindung sementara. Data yang dikumpulkan dibandingkan dengan data pluviometrik tahun 2021
dari Badan Perlindungan Lingkungan Hidup Daerah mengonfirmasi adanya peningkatan curah hujan (+
32%) di Jesolo dibandingkan dengan periode 1993-2020.
Selama pemeriksaan di Sarang 1, 43 telur yang belum menetas, 1 embrio dan 2 telur yang sudah menetas
menunjukkan bukti nyata adanya fusariosis, termasuk perubahan warna merah muda yang tidak normal dan
perkembangan yang tidak sempurna (tahap akhir 23-31) (Gbr. 1). Tidak ada kelainan karapas yang tercatat
pada tukik maupun penyu yang belum menetas. Tidak ada temuan kotor lainnya yang dilaporkan selama
pemeriksaan post-mortem embrio yang dikumpulkan.
Telur yang terkena dampak terletak di pinggiran kopling, sedangkan telur yang menetas menempati bagian
inti. Telur tanpa kuning telur dan telur yang menetas (25) masing-masing menempati lapisan yang lebih
dalam dan inti ruang inkubasi.
Pemeriksaan mikroskopis embrio menunjukkan degenerasi seluler ringan hingga sedang pada semua
lapisan epidermis, sedikit mempengaruhi tingkat membran basal dan dermis superfisial, yang tampak edema
dan dengan serat kolagen yang tersusun longgar. Penebalan lapisan keratin yang menyebar parah dengan
pematangan keratinosit yang diawetkan (hiperkeratosis ortokeratosis) juga terlihat jelas (Gbr. 2a). Tidak ada
temuan histologis dan mikrobiologis lain yang konsisten dengan infeksi virus dan/atau bakteri yang dicatat
selama pemeriksaan embrio. Noda perak metenamin PAS dan Grocott menunjukkan adanya jamur yang luas

Sarang 1 Sarang 2
Karakteristik sarang
Koordinat 45.498279 N, 12.629747 E 44.953619 N, 12.536725 E
Masa inkubasi 68 ND
Jarak dari pantai (m) 2-50 20.25
Kemiringan pantai 0.9% 1.4%
Kedalaman ruang sarang (cm) 39 56
Kedalaman telur pertama (cm) 23 39
Lebar ruang sarang (cm) 24.5 36
Suhu rata-rata 25° C ND
Kelembaban rata-rata 72.6% ND
Jaring granulometri 0,250 mm 89.7% 90.2%
Substrat bersarang Pasir Pasir
Hasil reproduksi
Jumlah total telur 80 90
Telur yang menetas 9 82
Telur dengan kuning telur 25 7
Telur yang belum menetas 43 1
Telur dengan embrio 1 1
Telur yang terpotong-potong 2 0
Tukik mati 0 1
Tingkat keberhasilan penetasan 11.25% 91.1%
Tingkat keberhasilan kemunculan 11.25% ND
tukik
Rata-rata CCL topi (cm) 4.4 4.6*

Laporan Ilmiah | (2023) 13:2938 | https://doi.org/10.1038/s41598-023-30211-z 3

Laporan Ilmiah
www.nature.com/scientificreports/
Tabel 1. Karakteristik sarang dan hasil reproduksi dari dua sarang. Sarang 1 - Jesolo Lido, Sarang 2 - Scano
Boa. *Dihitung hanya dari 2 tukik yang ditemukan.

Laporan Ilmiah | (2023) 13:2938 | https://doi.org/10.1038/s41598-023-30211-z 4

Laporan Ilmiah
www.nature.com/scientificreports/

Gambar 1. Penampakan kasar sarang 1. Aspek makroskopis dari satu telur yang belum menetas (a) dan satu
embrio (b) dengan tanda-tanda infeksi F. oxysporum. Garis skala = 1 cm.

Gambar 2. Temuan mikroskopis sarang 1. Tampilan histologis dari bagian kulit embrio (a) yang
dipengaruhi oleh degenerasi multifokal sel epidermis dan hiperkeratosis ortokeratosis. (b) Pewarnaan PAS
menggarisbawahi
adanya berjuta-juta hifa septat bercabang hialin, berdiameter 2 hingga 7 μm dengan dinding tipis yang sebagian
besar sejajar yang menempel pada kulit, tertanam di dalam lapisan epidermis (tanda panah) dan di dermis
superfisial (tanda panah). (a): pewarnaan hematoksilin dan eosin, skala bar = 50 µm; (b): pewarnaan PAS, skala
bar = 20 µm.

pertumbuhan dengan berjuta-juta ragi dan hifa yang menempel pada cangkang telur dan kulit karapas yang
sedang berkembang, bercampur di dalam lapisan epidermis dan, dalam jumlah yang lebih sedikit, juga di
dalam dermis (Gbr. 2b). Banyaknya elemen hifa hialin ditandai dengan septasi, percabangan dikotomis
bersudut lancip atau acak, penyempitan pada titik-titik percabangan, dan dinding tipis paralel, konsisten
dengan Fusarium spp. Tidak ada infiltrasi inflamasi yang nyata yang terkait dengan temuan ini.
Kultur jamur yang diuji positif untuk jamur berserabut, tumbuh dari cangkang telur, embrio, dan kuning
telur yang menunjukkan pertumbuhan organisme Fusarium yang intensif. F. oxysporum diidentifikasi dengan
kemiripan 100% dengan melakukan blasting sekuensing 28S rRNA di database Genbank. Tingkat kematian
yang terkait dengan Fusarium spp. adalah 56,25%.

Diskusi
Keanekaragaman hayati laut dipengaruhi oleh perubahan yang berkaitan dengan pemanasan global dengan
berbagai cara. Di antara semua spesies, penyu pada semua tahap kehidupan sangat rentan terhadap perubahan
lingkungan dan aktivitas manusia24.
Dalam konteks perubahan iklim, pola migrasi, penggunaan habitat, rasio jenis kelamin, dan perkembangan
embrio dapat dipengaruhi oleh dampak peningkatan suhu25. Selain itu, dua peristiwa peneluran ini menambah
kekhawatiran mengenai tantangan dalam pengelolaan dan pemantauan sarang penyu dalam hal interaksi
dengan aktivitas manusia dan masalah kesehatan.
Dua sarang penyu yang dijelaskan dengan ini, episode yang dilaporkan di Wilayah Marche (Pesaro) pada
tahun 2019, dan dua di Liguria (Finale Ligure pada tahun 2021 dan Levanto pada tahun 2022), serta peningkatan
suhu laut yang terkonfirmasi di cekungan Adriatik26,27 berkontribusi dalam memperkuat hipotesis perluasan
aktivitas peneluran ke arah garis pantai utara Mediterania Barat pada periode 2010 - 20202,24. Dalam konteks ini,
Jesolo Lido dan Scano Boa dapat dianggap sebagai lokasi peneluran paling utara di Laut Mediterania yang
pernah dipantau dan, kemungkinan besar, di seluruh dunia28. Seperti yang ditunjukkan oleh data yang

Laporan Ilmiah | (2023) 13:2938 | https://doi.org/10.1038/s41598-023-30211-z 5

Laporan Ilmiah
www.nature.com/scientificreports/
dilaporkan pada Tabel 1, kedua sarang menunjukkan keberhasilan penetasan yang berbeda dengan hasil yang
lebih rendah (11%) di lokasi yang paling urban (Jesolo Lido) dibandingkan dengan rata-rata (66%) yang
dilaporkan di

Laporan Ilmiah | (2023) 13:2938 | https://doi.org/10.1038/s41598-023-30211-z 6

Laporan Ilmiah
www.nature.com/scientificreports/

Mediterania
Barat2. Kehadiran dan aktivitas manusia, seperti urbanisasi, persiapan wisata di pantai, dan polusi,
juga dapat membahayakan kelangsungan hidup embrio24,29.
Investigasi histopatologi menunjukkan adanya infeksi F. oxysporum di Sarang 1 yang dianggap sebagai
penyebab rendahnya keberhasilan penetasan tukik di area ini. Infeksi terdeteksi pada lapisan terdangkal dari
ruang inkubasi, sementara telur yang menetas menempati bagian terdalam dari inti sarang yang menunjukkan
bahwa mereka mungkin telah dilindungi oleh lapisan yang lebih dangkal. Selain itu, Sarang 1 dibandingkan
dengan Sarang 2 lebih dangkal, dengan komposisi substrat yang berbeda, kemiringan yang lebih rendah, dan
pengaruh pasang surut yang lebih kuat, sehingga faktor-faktor ini mungkin juga mempengaruhi keberhasilan
penetasan. Tidak ada perbedaan khusus yang dilaporkan pada ukuran tukik juga karena sedikitnya jumlah
tukik yang dipantau di Sarang 2.
Dalam ekosistem laut, prevalensi penyakit menular yang disebabkan oleh jamur telah meningkat secara
dramatis selama dua dekade terakhir, kemungkinan disebabkan oleh penularan patogen yang muncul ke
lingkungan baru dan laju perubahan iklim global yang cepat30,31 . Diantaranya, F. solani telah dikenal sebagai
jamur yang paling sering ditemukan pada penyakit mikotik penyu, dan biasanya diisolasi dan disebut sebagai
"kompleks spesies" yang terdiri dari lebih dari 60 spesies filogenetik15. Jamur ini dapat ditemukan dalam sistem
pencernaan penyu dan dapat mengkolonisasi telur selama proses pengendapannya, namun jamur ini juga
telah dilaporkan terdapat pada partikel-partikel mengambang dari jaringan tanaman, lumpur, dan plastik di
lautan yang terbawa oleh angin dan arus ke pantai tempat penyu bertelur32. Faktor lingkungan dapat membantu
penyebaran mikotik pada telur yang gagal bertelur: kejadian penyakit dan kematian sangat dipengaruhi oleh
genangan air pasang surut dan pasir dengan persentase lumpur dan lempung yang tinggi23. Daerah sarang 1
adalah pantai yang sangat urban dengan kisaran pasang surut yang besar seperti yang ditunjukkan oleh jarak
daerah sarang dari pantai (dari 2 hingga 50 m tergantung pada pasang surut) dan kemiringan yang landai yang
dibuat secara artifisial oleh pemeliharaan pantai dengan menggunakan pasir dari daerah pedalaman yang
berasal dari sungai, termasuk lumpur, tanah liat, dan bahan organik untuk mengatasi erosi pantai. Kegiatan
pemeliharaan pantai, yang terus-menerus dilakukan sejak awal musim semi di area Sarang 1, mungkin juga
berpengaruh pada keberhasilan penetasan33-29 . Selain itu, pembersihan yang dilakukan secara terus menerus
dengan menggunakan sistem mekanis dapat mempengaruhi keberhasilan penetasan dengan mendorong
terjadinya pengendapan yang lebih dangkal dan mengurangi dimensi sarang akibat pemadatan tanah, seperti
yang terlihat dari perbandingan dua pantai yang berbeda pada Tabel 135. Faktor-faktor lingkungan yang
disebutkan di atas (yaitu komposisi pasir dengan bahan organik, ruang sarang yang kecil dan dangkal,
kejadian pasang surut), selain berhubungan dengan keberhasilan penetasan yang lebih rendah, juga dapat
mempengaruhi perkembangan dan penyebaran FSSC36 yang telah diakui secara global sebagai potensi ancaman
global terhadap telur penyu37. Sebaliknya, sarang 2 berada di daerah yang lebih bebas dari aktivitas manusia dan
menunjukkan tingkat keberhasilan penetasan yang lebih tinggi (89%).
Sebagai kesimpulan, perubahan iklim dan dampak antropogenik telah dinilai sebagai salah satu bahaya
tertinggi bagi
kesehatan penyu dan membutuhkan perhatian tertinggi dalam hal penelitian dan pengelolaan konservasi38. Selain
itu, mengidentifikasi patogen potensial yang mengancam spesies penyu yang terancam punah, yang juga
dipengaruhi oleh pemanasan global dan aktivitas manusia, sangat penting untuk mengembangkan rencana
konservasi. Hasil penelitian ini berkontribusi pada hipotesis terbaru mengenai perluasan daerah peneluran
penyu tempayan yang terjadi di cekungan Mediterania, yang kemungkinan besar disebabkan oleh pemanasan
global2,24
.
Rekaman pertama aktivitas peneluran dan data historis penyu tempayan39 i n i berpotensi menjadikan Laut
Adriatik Utara sebagai daerah yang cocok untuk sebagian besar siklus hidup penyu tempayan, dan dapat
menjadi daerah peneluran penyu kecil seperti yang didefinisikan oleh Prato dkk. (2022), yang mungkin saja
tidak diketahui karena kurangnya pemantauan khusus4,40. Perluasan wilayah yang sangat urban, dengan beberapa
kegiatan antropis yang berdampak negatif terhadap keberhasilan penetasan tukik, membutuhkan cakupan
pemantauan yang lebih luas sebagai tindakan prioritas untuk konservasi penyu. Untuk mengatasi
kemungkinan ancaman ini, dialog antara pemangku kepentingan ekonomi dan konservasi harus difokuskan
pada rencana pengelolaan yang menjamin koeksistensi kegiatan ekonomi yang berkelanjutan dan konservasi
spesies yang terancam punah. Rencana-rencana ini harus mencakup: (1) pengembangan model kesesuaian
sarang, pemantauan waktu nyata, perlindungan sarang, dan inspeksi untuk mengatasi dampak negatif dari
kegiatan antropis; (2) strategi pengelolaan yang efektif untuk mengendalikan penyakit yang muncul termasuk
epidemiologinya23
; dan (3) kemungkinan penerapan praktik relokasi, meskipun masih belum jelas apakah
pendekatan seperti itu akan meningkatkan kontaminasi patogen atau membawa patogen, yang kemudian
meningkatkan risiko infeksi FSSC dan kematian pada telur penyu41.

Bahan dan metode

Lokasi bersarang dan pemantauan. Penelitian ini dilakukan di sepanjang garis pantai Veneto, di bagian
utara
Laut Adriatik bagian barat, Italia. Laut Adriatik Utara dianggap sebagai habitat penting untuk mencari makan
dan melewati musim dingin, terutama bagi penyu tempayan betina dewasa dan subdewasa39. Pantai berpasir dan
perairan dangkal membuat kawasan pesisir ini tidak pernah tercatat adanya aktivitas penyu bertelur. Pada
bulan Juli 2021, aktivitas peneluran penyu dilaporkan oleh penduduk setempat di Jesolo Lido (Venezia), salah
satu pantai wisata utama di Italia dengan
1.491.296 dan 1.738.396 wisatawan masing-masing pada bulan Juli dan Agustus 2021 (Data Statistik
Pariwisata Wilayah Veneto). Setelah pemeriksaan dan konfirmasi keberadaan sarang (Sarang 1), area tersebut
dilindungi dan dipantau secara sistem. Parameter lingkungan (suhu, kelembapan, cuaca, dan tren pasang
surut) terus dipantau untuk mencegah atau menghadapi banjir dan mencatat kemungkinan pengaruh
lingkungan terhadap keberhasilan penetasan. Kondisi cuaca dibandingkan dengan data historis dari Badan
Laporan Ilmiah | (2023) 13:2938 | https://doi.org/10.1038/s41598-023-30211-z 7
Laporan Ilmiah
www.nature.com/scientificreports/
Perlindungan Lingkungan Regional (ARPAV)42. Pada bulan September 2021, keberadaan tukik juga
dilaporkan di Scano Boa (Rovigo), pantai liar yang termasuk dalam Parco Regionale Veneto del Delta del Po
(WDPA 178.945; EUAP 1062). Sarang ini (Sarang 2) juga diperiksa dan dikonfirmasi. Setelah 13 hari dari
akhir periode penetasan, tidak ada penetasan, dan total 81 hari dari peneluran Sarang 1, kedua sarang
diperiksa, sesuai dengan pedoman kementerian Italia43. Karakteristik utama dan hasil reproduksi dicatat.

Laporan Ilmiah | (2023) 13:2938 | https://doi.org/10.1038/s41598-023-30211-z 8

Laporan Ilmiah
www.nature.com/scientificreports/

Pengumpulan dan karakteristik sampel sarang. Selama inspeksi, sampel pasir dikumpulkan
untuk analisis granulometri dan untuk menilai karakteristik lebih lanjut dari kedua sarang44. Semua telur dari
sarang dikumpulkan untuk menilai kemungkinan perubahan warna yang mungkin terjadi sebagai indikasi
adanya mikroorganisme15. Selanjutnya, telur-telur tersebut diperiksa untuk menentukan tahap perkembangan dan
karakteristik morfologi eksternal; telur-telur yang masih belum menetas akhirnya dibuka untuk menilai
keberadaan embrio yang mati sesuai dengan deskripsi oleh Miller dan koleganya45.

Investigasi post-mortem. Pemeriksaan kasar telah dilakukan pada embrio untuk menilai perubahan
patologis apa pun sesuai dengan prosedur post-mortem standar46,47.
Sampel cangkang telur, embrio dan kuning telur dari semua telur yang tidak menetas, baik yang
mengalami perubahan makroskopis maupun yang tidak mengalami perubahan makroskopis, serta dari 3
spesimen (1 embrio dan 2 telur yang pecah) yang tidak mengalami lesi makroskopis dikumpulkan untuk
analisis tambahan. Sampel dari cangkang telur, embrio dan kuning telur untuk pemeriksaan mikroskopis
difiksasi dalam formalin 10%, dibenamkan dalam parafin, dipotong pada 5 µm dan dipasang pada TOMO
Adhesion Microscope Slides (Matsunami Glass), diwarnai dengan hematoksilin dan eosin (HE) menggunakan
pewarnaan histo semi-otomatis (Leica Autostainer XL, Leica Biosystems Nussloch GmbH). Selain itu,
pewarnaan periodic acid-Schiff (PAS) dan pewarnaan perak metenamin Grocott dilakukan jika dicurigai
adanya infeksi jamur. Selain itu, pemeriksaan bakteriologis standar dilakukan secara rutin pada sampel kulit
telur segar, embrio, dan kuning telur yang disebutkan di atas.

Kultur jamur dan identifikasi spesies Fusarium. Karena temuan patologis kotor dari Sarang 1
konsisten dengan Fusariosis, sampel dari cangkang telur, embrio, dan kuning telur dikultur pada Sabouraud
dextrose agar dan diinkubasi pada suhu 25 ° C selama setidaknya 10 hari. Semua koloni jamur yang
diidentifikasi secara morfologi termasuk dalam genus Fusarium diproses lebih lanjut secara molekuler untuk
identifikasi pada tingkat spesies. DNA yang diekstraksi dari koloni Fusarium diamplifikasi dengan
menggunakan SYBR Green Real-Time PCR (rtPCR) dengan satu set primer yang menargetkan sebagian
domain D1-D2 dari gen 28S rRNA menggunakan primer NL1 / NL4 seperti yang telah dijelaskan sebelumnya48.
Semua amplikon disekuensing untuk identifikasi jamur dengan menggunakan Blast di database GenBank.

Etika terhadap hewan. Semua metode dilakukan sesuai dengan pedoman dan peraturan kementerian
Italia yang relevan (Linee guida for il recupero, soccorso, affidamento et gestione delle tartarughe marine ai fini
della rabilità dan per la manipolazione a scopi scientifici. ISPRA-MATTM, Manuali e Linee Guida 89, 2013).

Ketersediaan data
Semua data yang dihasilkan atau dianalisis selama penelitian ini disertakan dalam artikel yang dipublikasikan
ini.

Diterima: 28 September 2022; Diterima: 17 Februari 2023

Referensi
1. Wallace, B. P. dkk. Unit pengelolaan regional untuk penyu: Kerangka kerja baru untuk memprioritaskan konservasi dan
penelitian di berbagai skala. PLoS One 5(12), e15465 (2010).
2. Hochscheid, S. dkk. Perluasan daerah peneluran penyu tempayan di Mediterania: Fenologi, distribusi spasial dan implikasi
konservasi. Glob. Ecol. Conserv. 38, e02194 (2022).
3. Casale, P. dkk. Penyu Mediterania: Pengetahuan terkini dan prioritas konservasi dan penelitian. Membahayakan. Penelitian
Spesies.
36, 229-267 (2018).
4. Prato, O. O. dkk. Daerah peneluran penyu yang kecil dapat tetap tidak diketahui tanpa adanya pemantauan khusus: Kasus Pulau
Medi- teria terbesar (Sisilia, Italia). Animals 12, 1221 (2022).
5. De Silva, M. dkk. Laut Mediterania: Penyu Caretta caretta bertelur di garis lintang tinggi, pendekatan invasif minimal untuk
meningkatkan kelangsungan hidup mereka. Konferensi Mediterania ke-7 tentang Penyu Laut, Maroko, 18-21 Oktober (2022).
6. Masotti, C. dkk. Penyu di Liguria: kondisi terkini dan perspektif masa depan. Kongres Nasional III C.Re.Ta.M. (Pusat Rujukan
Nasional ence Kesejahteraan, Pemantauan dan Diagnostik Penyakit Penyu), Italia, 1-2 Desember (2022).
7. Depellegrin, D. dkk. Alat spasial multi-objektif untuk menginformasikan perencanaan tata ruang maritim di Laut Adriatik. Sci.
lingkungan Total. 609, 1627-1639 (2017).
8. Niavis, S. dkk. Mengungkap potensi transportasi laut untuk 'Ekonomi Biru' di Wilayah Adriatik-Ionia. Studi Kasus. Transp.
Kebijakan 5(2), 380-388 (2017).
9. Dimitriadis, C. dkk. Pengurangan rekrutmen populasi penyu yang disebabkan oleh cahaya malam: Bukti dari wilayah Mediterania.
Ocean Coast. Manag. 153, 108-115 (2018).
10. Vlachogianni, dkk. Sampah laut di pantai-pantai Laut Adriatik dan Laut Ionia: Penilaian kelimpahan, komposisi, dan
sumbernya. Mar. Pollut. Bull. 131, 745-756 (2018).
11. Fortuna, C. dkk. Koherensi jaringan Marine Natura 2000 Uni Eropa untuk spesies karismatik yang luas: Sebuah studi kasus
Mediterania. Depan. Mar. Sains. 5, 356 (2018).
12. Komisi Eropa 2021 "Potensi Perencanaan Tata Ruang Maritim di Laut Mediterania" Laporan Studi Kasus: Laut Adriatik .
13. Casale, P. & Margaritoulis, D. Penyu di Mediterania: Ancaman Distribusi dan Prioritas Konservasi (IUCN, 2010).
14. Santoro, M., Hernández, G., Caballero, M. & Garcı́a, F. Flora bakteri aerobik penyu hijau yang bertelur (Chelonia mydas) dari
Taman Nasional Tortuguero, Kosta Rika. J. Zoo Wildl. Med. 37, 549-552 (2006).
15. Sarmiento-Ramírez, J. dkk. Distribusi global dua patogen jamur yang mengancam penyu yang terancam punah. PLoS One 9,
e85853 (2014).
16. Durmuş, SH, Ilgaz, Ç, Gü çlü, Ö & Özdemir, A. Pengaruh perubahan suhu udara yang diprediksi terhadap suhu inkubasi, durasi
inkubasi, rasio jenis kelamin dan keberhasilan penetasan penyu tempayan. Anim. Biol. 61, 369-383 (2011).
17. Caracappa, S. dkk. Tangkapan insidental penyu tempayan (Caretta caretta) di sepanjang pantai Sisilia oleh perikanan rawai.
PeerJ 6, e5392 (2018).
18. Ackerman, R. A. Lingkungan sarang dan perkembangan embrio penyu. Dalam Biologi Penyu Jilid 1 (eds Lutz, P.L. & Musick,
Laporan Ilmiah | (2023) 13:2938 | https://doi.org/10.1038/s41598-023-30211-z 9
Laporan Ilmiah
www.nature.com/scientificreports/
J.A.) 83-106 (CRC Press, 1997).

Laporan Ilmiah | (2023) 13:2938 | https://doi.org/10.1038/s41598-023-30211-z 10

Laporan Ilmiah
www.nature.com/scientificreports/

19. Sáenz, V. dkk. Perspektif satu kesehatan untuk mengenali fusarium sebagai hal yang penting dalam praktik klinis. J. Fungi 6,
235. https://doi.org/10. 3390/jof6040235 (2020).
20. Cafarchia, C. dkk. Fusarium spp. pada penyu tempayan (Caretta caretta): Dari kolonisasi hingga infeksi. Dokter hewan. Pathol.
57(1), 139-146 (2020).
21. Phillott, AD & Parmenter, JC Pengaruh berkurangnya luas permukaan pernapasan terhadap kelangsungan hidup embrio penyu. J.
Exp. Zool.
289, 317-321 (2001).
22. Zhang, N. dkk. Anggota kompleks spesies Fusarium solani yang menyebabkan infeksi pada manusia dan tanaman yang umum
ditemukan di lingkungan. J. Clin. Microbiol. 44, 2186-2190 (2006).
23. Smyth, CW dkk. Mengungkap ekologi dan epidemiologi penyakit jamur yang baru muncul, fusariosis telur penyu (STEF). PLoS
Pathog. 15(5), e1007682 (2019).
24. Mancino, C., Canestrelli, D. & Maiorano, L. Menuju ke barat: Perluasan wilayah jelajah penyu tempayan di Laut Mediterania di
bawah perubahan iklim. Glob. Ecol. Conserv. 38, e02264 (2022).
25. Laloë, J. O., Cozens, J., Renom, B., Taxonera, A. & Hays, G. C. Perubahan iklim dan kematian tukik yang terkait dengan suhu di
lokasi peneluran penyu yang penting secara global. Glob. Change Biol. 23, 4922-4931 (2017).
26. García-Monteiro, S., Sobrino, JA, Julien, Y., Sòria, G. & Skokovic, D. Tren suhu permukaan di Laut Mediterania dari data
MODIS selama tahun 2003-2019. Reg. stud. Mar. Sci. 49, 102086 (2022).
27. Zampollo, A. dkk. Pemodelan ceruk musiman dan distribusi spasial penyu tempayan (Caretta caretta) di laut Adriatik dan Ionia
. Aquat. Conserv. Mar. Freshw. Ecosyst. 32(7), 1141-1155 (2022).
28. Sénégas, JB, Hochscheid, S., Groul, JM, Lagarrigue, B. & Bentivegna, F. Penemuan sarang penyu tempayan (Caretta caretta) di
bagian utara. Mar. Biodivers. Rec. 2, 1-4 (2009).
29. Patino-Martinez, J. dkk. Pantai berpasir ringan mendukung keberhasilan penetasan dan fenotipe tukik penyu tempayan. Depan.
Ecol. Evol. https://doi.org/10.3389/fevo.2022.823118 (2022).
30. Groner, ML dkk. Mengelola keadaan darurat penyakit laut di era perubahan yang cepat. Philos. Trans. R. Soc. B 371(1689),
20150364 (2016).
31. Harvell, D., Altizer, S., Cattadori, IM, Harrington, L. & Weil, E. Perubahan iklim dan penyakit pada satwa liar: Kapan inang
menjadi sangat penting ?. Ecology 90, 912-920 (2009).
32. Duncan, E. M. dkk. Konsumsi mikroplastik di mana-mana pada penyu laut. Glob. Perubahan Biol. 25(2), 744-752 (2019).
33. Grain, DA, Bolten, AB & Bjorndal, KA Pengaruh nutrisi pantai terhadap penyu: Tinjauan dan inisiatif penelitian. Restor. Ecol. 3,
95-104 (1995).
34. Rumbold, D. G., Davis, P. W. & Perretta, C. Memperkirakan efek dari nutrisi pantai terhadap peneluran penyu tempayan
Caretta caretta (penyu lekang) . Restor. Ecol. 9(3), 304-310 (2001).
35. Marco, A., Abella, E., Martins, S., López, O. & Patino-Martinez, J. Perilaku bertelur betina mempengaruhi kelangsungan hidup
tukik dan rasio jenis kelamin pada penyu tempayan: Implikasi untuk program konservasi. Ethol. Ecol. Evol. 30(2), 141-155
(2018).
36. Gleason, FH, Allerstorfer, M. & Lilje, O. Penyakit yang baru muncul pada penyu laut, terutama fusariosis telur penyu (SEFT),
yang disebabkan oleh spesies dalam kompleks Fusarium solani (FSSC). Mikologi 11(3), 184-194 (2020).
37. Bailey, JB, Lamb, M., Walker, M., Weed, C. & Craven, KS Deteksi patogen jamur potensial Fusarium falciforme dan F.
keratoplasticum pada telur penyu tempayan yang belum menetas menggunakan pendekatan molekuler. Membahayakan. Species
Res. 36, 111-119 (2018).
38. Mashkour, N. dkk. Analisis risiko penyakit pada penyu: Sebuah studi dasar untuk menginformasikan upaya konservasi. PLoS
One 15(10), e0230760 (2020).
39. Casale, P., Laurent, L. & De Metrio, G. Penangkapan penyu secara tidak sengaja oleh perikanan pukat Italia di Laut Adriatik utara.
Biol. Conserv. 119(3), 287-295 (2004).
40. Margaritoulis, D. Perkiraan aktivitas peneluran penyu tempayan secara keseluruhan di Yunani. Dalam Pros. Simposium Penyu
Internasional Internasional ke-18. Memorandum Teknis NOAA NMFS-SEFSC-436, 48-50 (2000).
41. Hoh, D. Z., Lin, Y. F., Liu, W. A., Sidique, S. N. M. & Tsai, I. J. Mikrobiota sarang dan kelimpahan patogen pada pembenihan
penyu.
Ekologi Jamur. 47, 100964 (2020).
42. ione-annua/2021https://www.arpa.veneto.it/arpavinforma/indicatori-ambientali/indicatori_ambientali/clima-e-rischi-
naturali/clima/precipitaz.
43. Mo, G., Montalto, F., Serangeli, M.T. & Duprè, E. Panduan garis untuk pemulihan, pemeliharaan, dukungan, dan gerakan
tartaruges kelautan hingga akhir masa pakai dan untuk manipulasi karya-karya ilmiah. ISPRA-MATTM, Manuali e Linee Guida
89 (2013).
44. Dick, R. P., Thomas, D. R. & Halvorson, J. J. Metode standar, pengambilan sampel, dan perlakuan awal sampel. Dalam Metode
untuk Menilai Kualitas Tanah Vol. 49 (eds Doran, JW & Jones, AJ) 107-121 (Madison, 1996).
45. Miller, JD, Mortimer, JA & Limpus, JC Kunci lapangan untuk tahap perkembangan penyu laut (Cheloniidae) dengan catatan di
perkembangan Dermochelys. Chelonian Conserv. Biol. 16(2), 111-122 (2017).
46. Orós, J., Torrent, A. Manual de necropsia de tortugas marinas. Ediciones del Cabildo de Gran Canaria, LasPalmas de Gran
Canaria (2001).
47. Flint, M. dkk. Investigasi diagnostik post mortem penyakit pada populasi penyu yang hidup bebas: Sebuah tinjauan terhadap
temuan dan protokol patologis yang umum. J. Vet. Diagn. Investig. 21, 733-759 (2009).
48. Galosi, L. dkk. Mikosis atipikal pada burung psittacine: Sebuah studi retrospektif. Depan. Dokter hewan. Sci. 12(9), 883276 (2022).

Ucapan Terima Kasih

Penelitian ini tidak akan mungkin terlaksana tanpa dukungan luar biasa dari Parco Regionale Veneto del
Delta del Po, Kotamadya Jesolo, Penjaga Pantai, dan Badan Perlindungan Lingkungan Regional (ARPAV).
Kami juga ingin mengucapkan terima kasih kepada Legambiente Veneto, WWF Veneto, Plastic Free Veneto,
Sea Shepherd Conserva- tion Society Veneto, Marevivo Veneto, Museo Civico di Storia Naturale di Jesolo, dan
semua relawan atas komitmen mereka dalam semua tahap pemantauan.

Kontribusi penulis
G.P.: konseptualisasi; analisis formal, penulisan-draf awal, tinjauan penulisan dan penyuntingan. CC:
konseptualisasi, analisis formal, penulisan-draf awal, tinjauan penulisan dan penyuntingan. GS: investigasi,
analisis formal, metodologi, tinjauan penulisan dan penyuntingan. LC: investigasi, analisis formal. P.D.:
investigasi, analisis formal, tinjauan penulisan dan penyuntingan. D.P.: investigasi, analisis formal. S.M.:
metodologi, konseptualisasi, penulisan-draf awal, penulisan-tinjauan dan penyuntingan.

Pendanaan
Para penulis menyatakan bahwa tidak ada dana, hibah, atau dukungan lain yang diterima selama persiapan
Laporan Ilmiah | (2023) 13:2938 | https://doi.org/10.1038/s41598-023-30211-z 11
Laporan Ilmiah
www.nature.com/scientificreports/
naskah ini.

Laporan Ilmiah | (2023) 13:2938 | https://doi.org/10.1038/s41598-023-30211-z 12

Laporan Ilmiah
www.nature.com/scientificreports/

Kepentingan yang bersaing

Para penulis menyatakan tidak memiliki kepentingan yang bersaing.

Informasi tambahan
Korespondensi dan permintaan materi harus ditujukan kepada C.C.
Informasi cetak ulang dan perizinan tersedia di www.nature.com/reprints.
Catatan penerbit: Springer Nature tetap netral terhadap klaim yurisdiksi dalam peta yang diterbitkan dan
afiliasi kelembagaan.
Akses Terbuka Artikel ini dilisensikan di bawah Lisensi Creative Commons Atribusi 4.0 Lisensi
Internasional, yang mengizinkan penggunaan, berbagi, adaptasi, distribusi, dan reproduksi dalam
media apa pun atau
selama Anda memberikan kredit yang sesuai kepada penulis asli dan sumbernya, memberikan tautan ke
lisensi Creative Commons, dan menunjukkan jika ada perubahan. Gambar atau materi pihak ketiga lainnya
dalam artikel ini termasuk dalam lisensi Creative Commons artikel, kecuali jika dinyatakan sebaliknya dalam
baris kredit pada materi tersebut. Jika materi tidak termasuk dalam lisensi Creative Commons artikel dan
penggunaan yang Anda maksudkan tidak diizinkan oleh peraturan perundang-undangan atau melebihi
penggunaan yang diizinkan, Anda harus mendapatkan izin langsung dari pemegang hak cipta. Untuk melihat
salinan lisensi ini, kunjungi http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/.

© Hak Cipta © Penulis 2023

Laporan Ilmiah | (2023) 13:2938 | https://doi.org/10.1038/s41598-023-30211-z 13

Laporan Ilmiah