Machine Translated by Google

(2021) 21:164
Kengne dkk. Pengobatan dan Terapi Komplementer BMC
https://doi.org/10.1186/s12906-021-03325-y
Komplementer BMC
Kedokteran dan Terapi

ARTIKEL PENELITIAN Akses terbuka

Aktivitas antibakteri, antijamur dan

antioksidan dari kandungan
kimia seluruh tanaman Rumex absinicus
Irene Chinda Kengne1 , Léonel Donald Tsamo Feugap2 , Abdel Jelil Njouendou3 , Claudia Darille Jouogo Ngnokam2 ,
Mahamat Djamalladin Djamalladin2 , David Ngnokam2 , Nona Laurence Voutqueenne-Nazabadio4
Jean-De-Dieu Tamokou1*

Abstrak
Latar Belakang: Resistensi antibiotik telah berkontribusi terhadap beban penyakit menular baik di rumah sakit maupun
komunitas, dan merupakan ancaman besar bagi kesehatan masyarakat. Penelitian sebelumnya telah
mengungkapkan peran spesies oksigen reaktif sebagai mediator perantara kerusakan jaringan, setelah pemberian
antibioterapi, yang menunjukkan perlunya mengaitkan antioksidan dengan perawatan ini. Oleh karena itu, penelitian ini
dirancang untuk mempelajari aktivitas antibakteri, antijamur dan antioksidan dari ekstrak dan senyawa dari Rumex
Abyssinicus Jacq. (Polygonaceae), serta untuk menyelidiki mekanisme kerja antibakteri dari agen yang paling efektif.
Metode: Ekstrak tumbuhan dibuat dengan cara maserasi dalam pelarut organik diikuti dengan
kromatografi kolom fraksi EtOAc dan pemurnian fraksi berbeda yang mengarah pada isolasi dan karakterisasi
senyawa murni. Aktivitas antimikroba ekstrak/senyawa serta kombinasinya dengan ciprofloxacin dan flukonazol dievaluasi
menggunakan metode mikrodilusi kaldu dengan menentukan konsentrasi hambat minimum (MIC) dan konsentrasi
mikrobisida minimum (MMC). Efek ekstrak pada membran sel bakteri dan aktivitas enzim dehidrogenase rantai
pernapasan mikroba ditentukan dengan metode spektrofotometri. Aktivitas antioksidan dievaluasi menggunakan
uji 1,1-difenil-2-pikrilhidrazil (DPPH) dan kapasitas antioksidan setara asam galat (GAEAC).

Hasil: Chrysophanein (1), physcion (2), Ergosta-6,22-diene-3,5,8-triol (3), emodin (4), 6-hydroxyemodin (citreorosein) (5),
chrysophanein (6) dan physcionin (7) diisolasi dari fraksi EtOAc R. Abyssinicus dan menunjukkan tingkat aktivitas
antimikroba yang berbeda (MIC = 8–256 ÿg/mL). Ekstrak MeOH dan senyawa 2 dan 4 menunjukkan efek sinergis
dengan ciprofloxacin dan flukonazol. Senyawa 1, 2 dan campuran gabungan 6+7 menunjukkan aktivitas
antioksidan tertinggi (GAEAC = 83,38–106,03 ÿg/mL).

* Korespondensi: jtamokou@yahoo.fr; jean.tamokou@univ-dschang.org

1
Departemen Biokimia, Unit Penelitian Mikrobiologi dan Zat Antimikroba,
Fakultas Sains, Universitas Dschang, PO Box 67, Dschang, Kamerun Daftar lengkap
informasi penulis tersedia
di akhir artikel

© Penulis. Akses Terbuka 2021 Artikel ini dilisensikan di bawah Lisensi Internasional Creative Commons Attribution 4.0, yang
mengizinkan penggunaan, berbagi, adaptasi, distribusi, dan reproduksi dalam media atau format apa pun, selama Anda
memberikan kredit yang sesuai kepada penulis asli dan sumbernya , berikan tautan ke lisensi Creative Commons, dan tunjukkan
jika ada perubahan. Gambar atau materi pihak ketiga lainnya dalam artikel ini termasuk dalam lisensi Creative Commons artikel
tersebut, kecuali dinyatakan lain dalam batas kredit materi tersebut. Jika materi tidak termasuk dalam lisensi Creative Commons
artikel dan tujuan penggunaan Anda tidak diizinkan oleh peraturan perundang-undangan atau melebihi penggunaan yang diizinkan,
Anda harus mendapatkan izin langsung dari pemegang hak cipta. Untuk melihat salinan lisensi ini, kunjungi http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/.
Pengabaian Dedikasi Domain Publik Creative Commons (http://creativecommons.org/publicdomain/zero/1.0/) berlaku untuk data
yang tersedia dalam artikel ini, kecuali dinyatakan lain dalam batas kredit pada data tersebut.
Machine Translated by Google

Kengne dkk. Pengobatan dan Terapi Komplementer BMC (2021) 21:164 Halaman 2 dari 14

Kesimpulan: R. Abyssinicus berpotensi menjadi sumber antibakteri, antijamur dan antioksidan. Antibakteri
Mekanisme kerja ekstrak MeOH dan senyawa 2 disebabkan oleh terganggunya membran sitoplasma
dan penghambatan aktivitas enzim dehidrogenase rantai pernapasan mikroba. Sejauh pengetahuan kami, ini
adalah laporan pertama sampel uji dan hubungan ciprofloxacin/flukonazol terhadap strain MDR. Yang diamati
aktivitas senyawa yang diisolasi terhadap bakteri dan jamur termasuk strain MDR memerlukan eksplorasi lebih lanjut.

Kata Kunci: Rumex Abyssinicus, Antimikroba, Antioksidan, Strain Multiresisten, Kebocoran Membran, Dehidrogenase
aktivitas

Latar belakang obat-obatan telah meningkatkan minat yang luar biasa terhadap obat-obatan

Meningkatnya munculnya bakteri dan jamur patogen yang resisten
terhadap agen antimikroba sintetik merupakan ancaman yang
mengkhawatirkan terhadap kesehatan masyarakat. Yang paling
bakteri resisten antibiotik yang umum ditemui,
S. aureus (MRSA) yang resisten terhadap metisilin, Enterococci
yang resisten terhadap vankomisin (VRE), dan penisilin dan
Streptococci resisten sefalosporin (PCRS) telah berkontribusi terhadap
beban penyakit menular baik di negara-negara
pengaturan rumah sakit dan komunitas [1]. Mayoritas antibiotik klasik
yang dijual di pasaran saat ini memiliki kelemahan besar akibat efek
samping yang ditimbulkannya terhadap pasien.
dan berkembangnya berbagai resistensi obat oleh
mikroorganisme patogen [2]. Oleh karena itu, minat terhadap
penemuan agen antimikroba alami baru semakin meningkat
telah diamati, dengan tujuan untuk memerangi hal ini
patogen yang resisten sambil menghindari atau meminimalkan
konsekuensi yang tidak diinginkan dan efek samping yang terkait dengan
konsumsi antibiotik sintetik [3]. Penelitian sebelumnya telah
menunjukkan efek samping yang merugikan dari antibiotik bakterisida
seperti kuinolon, aminoglikosida.
sementara, ÿ-laktam menyebabkan disfungsi mitokondria dan
kelebihan produksi spesies oksigen reaktif (ROS) dalam sel mamalia,
menyebabkan kerusakan oksidatif pada DNA, protein, dan lipid
membran [4]. Oleh karena itu, bergaul
antioksidan dengan terapi antibiotik tampaknya menjadi strategi
untuk mengurangi atau mencegah efek samping.
Spesies oksigen reaktif adalah radikal bebas yang berasal dari
oksigen, produk metabolisme yang timbul dari endoplasma
retikulum dan mitokondria berbagai sel. Radikal bebas yang
dihasilkan sebagai akibat dari respons biokimia khas dalam tubuh
terlibat di dalamnya
diabetes, aterosklerosis, penuaan, kanker, peradangan,
imunosupresi, gangguan neurodegeneratif dan
penyakit jantung iskemik [5]. Radikal bebas terbukti
sangat beracun bagi patogen dan digunakan sebagai sarana
untuk mencegah kolonisasi jaringan oleh mikroorganisme.
Dengan demikian, produksi radikal bebas sangat meningkat
selama infeksi dan keadaan ini dapat menyebabkan oksidatif
menekankan; yang semakin memperumit kondisi pasien.
Metabolit sekunder tumbuhan seperti flavonoid dan
terpenoid memainkan peran penting dalam pertahanan melawan
radikal bebas dan mikroorganisme patogen [6]. Penelitian sebelumnya
menunjukkan bahwa penggunaan berasal dari tumbuhan
mencari alternatif antimikroba dan antioksidan
agen karena persepsi bahwa mereka menyebabkan efek samping
yang minimal dan memiliki riwayat penggunaan yang panjang
obat tradisional untuk pengobatan penyakit menular
dan kondisi stres oksidatif [7, 8]. Namun, kombinasi agen antioksidan
dan antimikroba memiliki efek yang sama
memperoleh penerimaan luas dalam industri farmasi [9]. Faktanya,
menggabungkan dua senyawa atau lebih
bisa lebih efektif untuk peningkatan aktivitas antioksidan dan
antimikroba dan bisa menawarkan efek sinergis. Fakta bahwa
flavonoid, terpenoid dan
saponin dapat meningkatkan kerentanan beberapa bakteri
terhadap antibiotik tertentu telah dibuktikan di banyak negara
studi [10, 11]. Produk alami dari tumbuhan tingkat tinggi mungkin
memiliki sumber antimikroba dan antioksidan baru
agen dengan mekanisme aksi yang mungkin baru [12].
Oleh karena itu, ada tiga tingkat interaksi yang terlibat: interaksi
dengan komponen seluler luar; interaksi dengan
membran sitoplasma dan interaksi dengan sitoplasma
konstituen. Produk alami dapat bertindak dengan bakteri
sel pada satu tingkat atau ketiga tingkat interaksi untuk menghasilkan
aktivitas antimikroba. Sistematis dan
penyaringan metodis dapat menghasilkan penemuan novel
prinsip aktif untuk mengatasi mekanisme resistensi di
mikroorganisme yang resistan terhadap banyak obat.
Telah didokumentasikan dengan baik bahwa tanaman milik Rumex
genus memiliki khasiat obat yang sesuai, yaitu
terutama didasarkan pada keberadaan antrakuinon, flavo-noid, dan
terpenoid [13]. R.apbisinicus Jacq. (Keluarga:
Polygonaceae) umumnya dikenal sebagai Bayam Rhubarb, adalah
tanaman tahunan herba besar yang tumbuh hingga 4 m
di ketinggian. Tanaman ini banyak ditemukan di Afrika tropis
terutama di daerah yang lebih kering. R. Abyssinicus digunakan secara lokal
sebagai astringen, pencahar, taeniafuge, depuratif dan
hemostatik [14]. Tanaman ini juga digunakan dalam pengobatan
kanker payudara, gonore, penyakit hati, hipertensi dan wasir [14].
Tanaman segar atau kering
diterapkan secara eksternal untuk mengobati batuk, pneumonia, luka,
rematik, luka dan kudis [14]. Ekstrak rimpang dikonsumsi untuk
mengendalikan diabetes bentuk ringan
dan, dengan air, untuk menyembuhkan sakit perut [14]. Yang mentah
ekstrak R. absinicus telah terbukti memiliki
antibakteri [15, 16], antikanker [16], antivirus [15], anti-
Machine Translated by Google
Kengne dkk. Pengobatan dan Terapi Komplementer BMC (2021) 21:164
inflamasi [15, 17], antioksidan [18], penyembuhan luka
[17], aktivitas antimalaria [19], diuretik dan analgesik [20] . Hingga
saat ini, belum ada laporan mengenai aktivitas anti bakteri, antijamur
dan antioksidan
senyawa yang diisolasi dari R. Abyssinicus, meskipun ada
adalah klaim etnobotani yang luas untuk sifat-sifat ini.
Oleh karena itu, penelitian ini dirancang untuk mempelajari
aktivitas antibakteri, antijamur dan antioksidan dari ekstrak dan
senyawa dari R. Abyssinicus serta
menyelidiki mekanisme aktivitas antibakteri
agen yang paling efektif. Interaksi metanol
ekstrak/senyawa R. Abyssinicus dan antibiotik
terhadap spesies bakteri dan ragi juga diselidiki.
Metode
Prosedur eksperimen umum
Analisis NMR
1 EtOAc-MeOH (95:5 ÿ 70:30) elusi bertingkat gradien
The Spektrum H dan 13C-NMR direkam pada spektrometer Bru-
ker Avance III 600 yang dilengkapi dengan platform cryo (1 H pada
600 MHz dan 13C pada 150 MHz). 2D
Eksperimen NMR dilakukan dengan menggunakan mikroprogram
Bru-ker standar (perangkat lunak Xwin-NMR versi 2.1).
Semua pergeseran kimia (ÿ) dilaporkan dalam satuan bagian per juta
(ppm) dengan sinyal pelarut sebagai referensi relatif terhadap
TMS (ÿ = 0) sebagai standar internal, sedangkan kopling
konstanta (J) diberikan dalam Hertz (Hz). Pelarut deuterasi, metanol
(CD3OD), dimetil sulfoksida (DMSO- d6), dan kloroform (CDCl3)
digunakan sebagai pelarut untuk
percobaan NMR.
Metode kromatografi
Kromatografi kolom dijalankan pada silika gel Merck
(VWR, Perancis) 60 (70–230 mesh) dan permeasi gel
pada Sephadex LH-20 (VWR, Perancis), sementara TLC dilakukan
pada pelat pra-pelapis silika gel GF254 dan
bintik-bintik divisualisasikan oleh lampu UV multiband UV-254/365
nm (ModelUVGL-58 Upland CA 91786, USA)
dilanjutkan dengan penyemprotan dengan H2SO4 50% lalu pemanasan
pada suhu 100 °C.
Pengumpulan sampel
Seluruh tanaman Rumex Abyssinicus Jacq. dikumpulkan pada
bulan Februari 2018 dari alam liar di Dschang, wilayah barat
Kamerun. Identifikasi botani
dilakukan oleh Victor Nana, ahli botani dari Herbarium Nasional
Kamerun, di mana spesimen voucher (N° 50,551/HNC) telah
disimpan.
Tidak ada izin khusus untuk pengumpulan tanaman
diperlukan untuk studi lapangan yang dijelaskan. Untuk lokasi/
kegiatan apa pun, tidak diperlukan izin khusus.
Semua lokasi pengumpulan tanaman bukanlah milik pribadi atau
dilindungi dengan cara apa pun dan studi lapangan adalah milik pribadi koleksi laboratorium kami. Spesies bakteri dan jamur dipertahankan
tidak melibatkan spesies yang terancam punah atau dilindungi.
Halaman 3 dari 14
Ekstraksi dan fraksinasi
Seluruh bahan tanaman R. absinicus dikeringkan dengan udara
pada suhu kamar dan digiling menjadi bubuk halus. Ini
bubuk kering (4,5 kg) diekstraksi pada suhu kamar
dengan metanol (3 × 20 L, 72 jam) untuk menghasilkan 200 g minyak mentah
ekstrak metanol setelah penguapan pelarut di bawah tekanan
rendah. Bagian dari ekstrak kasar ini (195 g)
mengalami pelarutan diferensial dengan H2O/EtOAc
(300 mL/500 mL) diikuti dengan H2O/n-BuOH (300 mL/
500ml). Setelah penguapan masing-masing pelarut di bawah
tekanan rendah, kami memperoleh 50 g EtOAc dan 18 g
ekstrak n-BuOH masing-masing.
Isolasi senyawa
Bagian dari fraksi EtOAc R. Abyssinicus (45 g) adalah
dikenai kromatografi kolom silika gel yang dielusi
dengan n-heksana-EtOAc (95:5 ÿ 80:20) diikuti oleh
untuk menghasilkan tujuh puluh fraksi masing-masing 400 mL. Ini adalah
digabungkan berdasarkan profil TLC untuk menghasilkan delapan
pecahan besar AH (A: 1–3; B: 4–10; C: 11–22; D: 23–
28; E: 29–35; P: 36–44; G: 45–63; H: 64–70). Pecahan A
(4,0 g) menjalani kromatografi kolom pada silika gel
dengan sistem n-heksana-EtOAc (95:5) menghasilkan senyawa 1
(15 mg) [21] dan 2 (17 mg) [22]. Kromatografi kolom gel Sephadex
LH-20 fraksi C (1,9 g) led
menjadi dua sub-fraksi (C1 dan C2). Pemurnian sub-fraksi C1 (500
mg) dengan kromatografi kolom silika gel (n-heksana-EtOAc, 90:10
ÿ 80:20) menghasilkan senyawa 3 (15 mg) [23]. Sub-fraksi C2 (300
mg), adalah
dimurnikan pada kolom gel Sephadex LH-20 menggunakan MeOH sebagai
eluen menghasilkan senyawa 4 (40 mg) [22]. Setelah Sephadex
Kolom gel LH-20 menggunakan MeOH, fraksi D (3,74 g) led
menjadi tiga subfraksi D1, D2 dan D3. Pemurnian D3
(400 mg) subfraksi dengan kromatografi kolom silika gel dengan n-
heksana-EtOAc (85:15) menghasilkan senyawa 5
(11 mg) [24]. Rekristalisasi fraksi G (5 g)
diberikan campuran dua senyawa 6 + 7 (10 mg) [25]
yang sayangnya tidak dapat dipisahkan dengan metode kromatografi
kolom silika gel.
Uji antimikroba
Mikroorganisme
Lima bakteri dan dua ragi diuji kerentanannya terhadap sampel
yang diteliti. Mikroorganisme yang diteliti adalah tiga gram positif
(Staphylococcus aureus
ATCC25923, S. aureus MSSA01 yang sensitif terhadap methisilin
dan S. aureus MRSA03 yang resisten terhadap metisilin) dan dua
Gram-negatif (Pseudomonas aeruginosa ATCC27853,
Shigella flexneri SDINT) bakteri dan dua strain ragi
dari Candida albicans ATCC10231 dan Cryptococcus neo-formans
H99. Mikroorganisme ini diambil dari
pada agar miring pada suhu + 4 °C dan seterusnya
Machine Translated by Google
Kengne dkk. Pengobatan dan Terapi Komplementer BMC
agar nutrisi (NA, Conda, Madrid, Spanyol) dan Sabour-aud
Dextrose Agar (SDA, Conda) masing-masing miring,
sebelum tes antimikroba apa pun.
Penentuan konsentrasi hambat minimum (MIC)
dan konsentrasi mikrobisida minimum (MMC)
Nilai MIC dan MMC ditentukan seperti yang dijelaskan
sebelumnya [26]. Sampel uji dilarutkan dalam dimetil-sulfoksida
(DMSO). Kontrol negatif terdiri dengan baik
dari 195 ÿL MHB atau SDB dan 5 ÿL standar dalam okulum. MIC
dinilai secara visual dan dianggap sebagai penghambat konsentrasi
sampel terendah
pertumbuhan mikroorganisme tersebut. Konsentrasi terendah
yang tidak menunjukkan pertumbuhan visual setelah subkultur
dianggap sebagai mikroba minimum
konsentrasi (MMC). Ciprofloxacin (Sigma-Aldrich,
Steinheim, Jerman) dan flukonazol (Merck, Darm-stadt, Jerman)
masing-masing digunakan sebagai kontrol positif untuk bakteri
dan ragi. Semua tes dilakukan di
rangkap tiga.
Efek gabungan antibiotik dan ekstrak MeOH,
senyawa 2 atau 4
Efek antimikroba dari kombinasi sampel
(Ekstrak MeOH, senyawa 2 dan 4), yang dipamerkan
aktivitas antimikroba tertinggi, dan antibiotik (cip-rofloxacin dan
flukonazol) dinilai oleh
metode kotak-kotak seperti yang dijelaskan sebelumnya [27]. Itu
inokulum awalnya disiapkan seperti dijelaskan di atas. Itu
mikroorganisme uji diinokulasi ke dalam pelat mikrotiter 96 sumur
dan pengenceran serial dua antimikroba
agen: antibiotik dan ekstrak MeOH, senyawa 2 atau 4.
Setiap sumur terdiri dari kombinasi unik sampel uji dan konsentrasi
antibiotik. Piring-piring itu kemudian
diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37°C. Analisis dilakukan
dalam rangkap tiga. Dan interaksi agen antimikroba
dievaluasi dengan menghitung penghambatan fraksional
indeks konsentrasi (FIC). FIC didefinisikan sebagai berikut: MIC
antibiotik yang diuji dalam kombinasi/MIC dari
antibiotik diuji sendiri + MIC ekstrak/senyawa
diuji dalam kombinasi/MIC ekstrak/senyawa yang diuji
sendiri. Indeks FIC diartikan sebagai FIC ÿ 0,5: efek sinergis, 0,5
< FIC ÿ1: efek aditif, 1 < FIC ÿ2: efek berbeda, dan FIC > 2,0: efek
antagonis.
Studi mekanisme antibakteri
Uji kebocoran membran sel
Perubahan membran sel P. aeruginosa dan
S. flexneri dievaluasi dengan mengukur optik
kepadatan pada 260 nm dan 280 nm dari suspensi bakteri dengan
ada dan tidaknya ekstrak MeOH dan senyawa 2 menggunakan metode
yang dijelaskan oleh
Karsha dan Lakshmi [28].
(2021) 21:164 Halaman 4 dari 14
Evaluasi kebocoran gula melalui membran
bakteri
10 mL suspensi bakteri mengandung 108 CFU/
mL diinokulasi ke dalam ekstrak MeOH atau senyawa 2
pada ½ MIC, MIC dan 2MIC dan diinkubasi pada suhu 37°C dibawah
agitasi dengan kecepatan 150 rpm selama 12 jam. Setelah
inkubasi, campuran disentrifugasi pada 12.000 rpm dan supernatan
dikumpulkan. Konsentrasi gula pereduksi adalah
ditentukan secara spektrofotometri pada 550 nm menggunakan 3–5
asam dinitro-salisilat (DNS) [29].
Uji aktivitas enzim dehidrogenase rantai pernapasan
dalam bakteri
Bioenergi seluler adalah domain dengan masa depan yang menjanjikan
dalam pengembangan antimikroba baru. Beberapa penelitian
telah mengevaluasi bioenergi berbagai bakteri
patogen, yang menjelaskan kemampuan donor elektron
dan pemanfaatan akseptor, dan pengaturan komponen rantai
transpor elektron pada bakteri. Di dalam
pengujian, efek agen yang paling efektif terhadap aktivitas enzim
dehidrogenase rantai pernapasan patogen
bakteri sebagai uji mekanisme kerja antibakteri
telah dilakukan. Uji aktivitas dehidrogenase adalah
dilakukan dengan menggunakan 2,3,5-trifenil tetrazolium klorida
(TTC) seperti yang dijelaskan sebelumnya [30]. TTC berfungsi sebagai
akseptor elektron buatan dan direduksi menjadi merah
trifenil formazan (TPF) berwarna. Pengujian dilakukan dengan 3
ml kaldu nutrisi-glukosa-TTC
medium, ditambah dengan berbagai konsentrasi
Ekstrak MeOH atau senyawa 2 dalam 20 mL bertutup ulir
tabung reaksi. TPF yang dihasilkan setelah setiap periode pemaparan
(0, 30, 60 menit) diekstraksi dalam 4 mL amil alkohol
dan ditentukan secara spektrofotometri pada 500 nm. Itu
jumlah formazan yang dihasilkan ditentukan dari a
kurva dosis-respons standar (R2 = 0,9983). Aktivitas dehidro-
genase dinyatakan sebagai jumlah TPF
terbentuk (ÿg) per jumlah berat sel kering biomas sel (dalam mg).
Data dinyatakan sebagai mean ± standar deviasi.
Uji antioksidan
Uji kapasitas antioksidan setara asam galat (GEAC).
Tes GEAC dilakukan seperti yang dijelaskan sebelumnya [31]
dengan sedikit modifikasi. Dalam kuvet kuarsa, hingga 950 ÿL
buffer asetat (pH =5,0, 100 mM), berikut ini adalah
ditambahkan: 20 ÿL laccase (larutan stok 1 mM), tes 20 ÿL
sampel, 10 ÿL ABTS (2,2ÿ-azinobis (3-ethylbenzothiazo-line-6-sulfonic
acid) (larutan stok 74 mM). Pemurnian lakase dari Sclerotinia
sclerotiorum telah dilakukan
sesuai dengan protokol yang dijelaskan [32]. Contoh
konsentrasi dalam campuran pengujian adalah 800, 400, 200,
100, 10 ÿg/mL untuk ekstrak dan 200, 100, 50, 25, 12.5,
6.25, 3.125, 1.56 ÿg/mL untuk senyawa yang diisolasi. Itu
konten radikal ABTS•+ yang dihasilkan diukur
Machine Translated by Google
Kengne dkk. Pengobatan dan Terapi Komplementer BMC
pada 420 nm setelah waktu reaksi 240 detik dan diubah menjadi
setara asam galat dengan menggunakan kurva kalibrasi
(Koefisien korelasi Pearson: r = 0,997) dibangun
dengan standar asam galat 0, 4, 10, 14, 28, 56, 84 ÿM daripada
Trolox. Eksperimen dilakukan dalam rangkap tiga.
Pemulungan radikal bebas Diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH).
pengujian kadar logam
Aktivitas pemulungan radikal bebas dari ekstrak dan senyawa
dievaluasi sesuai dengan metode yang dijelaskan
[33]. EC50 ( ÿg/ml), yang merupakan jumlah sampel
diperlukan untuk menghambat sebesar 50% penyerapan DPPH
radikal bebas dihitung [33]. Vitamin C digunakan sebagai
kontrol standar. Semua analisis dilakukan di
rangkap tiga.
Uji sitotoksisitas
Tiga ekor tikus Wistar jantan (Rattus novergicus), berumur 10–12 tahun
minggu dan beratnya 230 hingga 240 g digunakan. Hewan-hewan
ini dibiakkan di rumah hewan Universitas
Dschang, Kamerun. Upaya untuk meminimalisir pun dilakukan
penderitaan hewan dan mengurangi jumlah hewan
digunakan dalam percobaan. Semua tikus dibius
melalui injeksi intraperitoneal dari campuran ketamin
(50 mg/kg berat badan, BB) dan xylazine (10 mg/kg berat badan
BW), dalam dosis yang biasa digunakan untuk keperluan operasi.
Selanjutnya hewan-hewan yang tidak sadarkan diri itu
Gambar 1 Struktur kimia senyawa yang diisolasi dari R. Abyssinicus (1–7): 1: Chrysophanol; 2: Fiscion; 3: Ergosta-6,22-diena-3,5,8-triol; 4:
Emodin; 5: 6-hidroksiemodin (Citreorosein; 6: Chrysophanein; 7: Physcionin
(2021) 21:164 Halaman 5 dari 14
dipenggal dengan cepat dan seluruh darah (10 mL) dikumpulkan
melalui tusukan jantung ke dalam tabung berbentuk kerucut yang berisi
Ethylene Diamine Tetra Acetic Acid (EDTA) sebagai anti koagulan.
Eritrosit diperoleh dengan cara sentrifugasi
pada suhu kamar selama 10 menit pada 1000 xg dan
dicuci tiga kali dalam buffer PBS [34]. Sitotoksisitas
dievaluasi seperti yang dijelaskan sebelumnya [34].
Analisis statistik
Data dianalisis dengan analisis varians satu arah
dilanjutkan dengan tes Post Hoc Waller-Duncan. Hasil eksperimen
dinyatakan sebagai mean ± Standar
Deviasi (SD). Perbedaan antar kelompok dianggap signifikan ketika
p <0,05. Semua analisis dilakukan dengan menggunakan Paket
Statistik untuk Ilmu Sosial
(SPSS, versi 12.0) perangkat lunak.
Hasil
Komposisi kimia
Sebanyak lima senyawa murni (1 hingga 5) dan satu campuran
dari dua senyawa (6 dan 7) diisolasi dari R. abys-sinicus.
Berdasarkan data spektralnya (1H dan 13C NMR,
1H-1H COSY, HSQC, HMBC, dan ROESY), struktur kimianya
seperti yang diilustrasikan pada Gambar .
berikut: 1: Krisofanol; 2: Fiscion; 3: Ergosta-6,22-
diena-3,5,8-triol; 4: Emodin; 5: 6-hidroksiemodin
(Citreorosein); 6: Krisofanein; 7: Fissionin.
Machine Translated by Google
Kengne dkk. Pengobatan dan Terapi Komplementer BMC (2021) 21:164
Senyawa 1, 2 dan 3 berasal dari EtOAc
fraksi sedangkan sisanya diisolasi dari
ekstrak metanol.
Krisofanol (1)
1 DMSO-d6) ÿ: 188,0 (C-9), 182,6 (C-10), 162,2 (C-1),
bubuk kuning; (C15H10O4); H-NMR (600 MHz, CDCl3)
ÿ: 12,08 (s, 1-OH), 11,97 (s, 8-OH) 7,84 (d, 7,5 Hz, H-5),
7,77 (br s, H-6), 7,69 (br s, H-4), 7,30 (h, 8,4 Hz, H-7),
7.12 (br s, H-2), 2.48 (s, ÿCH3); 13C-NMR (150MHz,
CDCl3) ÿ: 192,5 (C-9), 182,1 (C-10), 162,7 (C-1), 162,4
(C-8), 149.3 (C-3), 137.0 (C-6), 133.6 (C-11), 133.2 (C-14), 124.5
(C-7), 124.3 (C-2), 121.3 ( C-4), 119,9 (C-5),
115,8 (C-12), 113,7 (C-13), 22,4 (ÿCH3).
Fisika (2)
1
bubuk kuning; (C16H12O5); H-NMR (600 MHz, CDCl3)
ÿ: 12,34 (s, 1-OH), 12,15 (s, 8-OH), 7,65 (br s, H-5), 7,39
(d, 2,5 Hz, H-4), 7,10 (br s, H-7), 6,70 (d, 2,5 Hz, H-2),
3,95 (s, OCH3), 2,46 (s, ÿCH3); 13C-NMR (150MHz,
CDCl3) ÿ: 190,8 (C-9), 182,1 (C-10), 166,6 (C-3), 165,2
(C-1), 162.5 (C-8), 148.5 (C-6), 135.2 (C-14), 133.2 (C-11), 124.6
(C-7), 121.4 (C-5), 113.7 ( K-12), 110,3 (K-13),
108,3 (C-4), 106,8 (C-2), 56,1(ÿOCH3), 22,2 (ÿCH3).
Ergosta-6,22-diena-3,5,8-triol (3)
Bubuk putih; (C28H46O3); 13C-NMR (150MHz,
CDCl3): ÿ 135,5 (C-6), 135,3 (C-22), 132,4 (C-23), 130,9
(C-7), 82,3 (C-5), 79,6 (C-8), 66,6 (C-3), 56,3 (C-17), 51,8
(C-14), 51.2 (C-9), 44.7 (C-13), 42.9 (C-24), 39.9 (C-20),
39.4 (C-11), 37.1 (C-10), 37.0 (C-4), 34.8 (C-1), 33.2 (C-25), 30.2
(C-2), 28.8 (C-15) 23.5 ( K-12), 21.0 (K-21), 20.8
(C-16), 20.1 (C-26), 19.8 (C-28), 18.3 (C-19), 17.7 (C-27),
13.0 (K-18).
Emodin (4)
1 dalam kasus nilai MMC tampak dua kali lipat MIC,
bubuk merah; (C15H10O5); H-NMR (600 MHz, DMSO- d6) ÿ:
12,1 (s, 3-OH), 12,0 (s, 8-OH) 7,48 (d, 0,7 Hz, H-5), 7,16 (d, 0,7
Hz, H -7) 7,11 (h, 2,4 Hz, H-4) 6,59 (h, 2,4
Hz, H-2), 2,41 (s, ÿCH3); 13C-NMR (150 MHz, DMSO- d6) ÿ:
190,2 (C-9), 181,9 (C-10), 166,1 (C-1), 164,9 (C-3),
161.9 (C-8), 148.7 (C-6), 135.6 (C-14), 133.3 (C-11),
124.6 (C-7), 120.9 (C-5), 113.8 (C-12), 109.4 (C-13),
109,3 (C-4), 108,4 (C-2), 21,9 (ÿCH3).
Citreorosein (5)
1
bubuk merah; (C15H10O6); H-NMR (600 MHz, CD3OD)
ÿ: 7,28 (br s, H-2), 7,75 (br s, H-4), 7,20 (br s, H-5), 6,54
(br s, H-7), 4,70 (s, ÿOCH2-); 13C-NMR (150MHz,
CD3OD) ÿ: 191,5 (C-9), 183,4 (C-10), 169,1 (C-8), 166,7
(C-6), 163,7 (C-1), 152,9 (C-3), 136,9 (C-11), 135,0 (C-14), 122,2
(C-2), 118,4 (C-4), 115,9 ( C-13), 111.1 (C-5),
109.2 (C-7), 108.5 (C-12), 64.1 (ÿOCH2-).
Halaman 6 dari 14
Krisofanein (6)
1
bubuk kuning; (C21H20O9); H-NMR (600 MHz,
DMSO-d6) ÿ: 13,1 (s, 1-OH), 7,88 (m, H-5), 7,86 (m, H-6) 7,71 (d;
7,9 Hz, H-7) 7,51 (br s, H- 4) 7.21 (br s, H-2)
5.20–3.10 (Lem), 2.44 (s, 3-CH3); 13C-NMR (150MHz,
158.7 (C-8), 148.1 (C-3), 136.4 (C-6), 135.2 (C-11), 132.6
(C-14), 124.5 (C-2), 122.9 (C-7), 121.0 (C-5), 119.8 (C-4),
115,3 (C-12), 115,2 (C-13), 101,0 (C-1ÿ), 77,8 (C-5ÿ),
77,0 (C-3ÿ), 73,7 (C-2ÿ), 70,0 (C-4ÿ), 61,1 (C-6ÿ), 21,9
(ÿCH3).
Fissionin (7)
1
bubuk kuning; (C22H22O10); H-NMR (600MHz,
DMSO-d6) ÿ: 12,8 (s, 1-OH), 7,50 (br s, H-4), 7,37 (d,
2,3 Hz, H-5) 7,19 (d, 2,3 Hz, H-7) 7,18 (br s, H-2), 5,20–
3,10 (Lem), 3,97 (s, ÿOCH3), 2,42 (s, ÿCH3); 13C-NMR
(150 MHz, DMSO-d6) ÿ 186,9 (C-9), 182,4 (C-10), 165,2
(C-6), 162.1 (C-1), 161.2 (C-8), 147.6 (C-3), 135.1 (C-11),
132,5 (C-14), 124,7 (C-2), 119,7 (C-4), 114,96 (C-13),
114,95 (C-12), 107,9 (C-7), 106,9 (C-5), 101,1 (C-1ÿ),
77,9 (C-5ÿ), 77,1 (C-3ÿ), 73,8 (C-2ÿ), 70,3 (C-4ÿ), 61,3 (C-6ÿ),
56,6 (ÿOCH3) 21,8 (ÿCH3) .
Aktivitas antimikroba
Analisis parameter penghambatan mengungkapkan variabilitas
aktivitas antimikroba dalam ekstrak dan senyawa terisolasi, dan
dalam strain mikroba yang diuji (Tabel 1).
Dengan demikian, ketiga ekstrak organik menunjukkan aktivitas
semua mikroorganisme diuji, dengan MIC dan MMC
nilai bervariasi antara 32 dan 256 ÿg/mL. Paling atas
aktivitas diamati dengan ekstrak kasar (MIC = 32 ÿg/
mL) ditemukan melawan C. neoformans, dan khususnya
fraksi EtOAc terhadap S. flexneri, S. aureus dan C.
albicans. Fraksi ini adalah yang paling aktif dengan MIC
nilai antara 32 dan 64 ÿg/mL. Meskipun di sebagian besar
ekstrak metanol dan asetat ditemukan
fungisida terhadap C. neoformans pada 32 ÿg/mL sedangkan pada
konsentrasi yang sama fraksi EtOAc bersifat bakterisidal terhadap S.
flexneri.
Sehubungan dengan senyawa yang diisolasi, MMC-nya
sama atau dua kali lebih tinggi dari MIC yang bersangkutan.
Bakteri yang paling aktif dihambat dan
pertumbuhan jamur pada konsentrasi 8 ÿg/mL, dan in
dalam beberapa kasus, aktivitas mereka sebanding dengan aktivitas mereka
obat referensi. Pada konsentrasi 8 ÿg/ml ini,
senyawa 2 dan 4 menghambat pertumbuhan C. albicans
dan C. neoformans, dan juga menunjukkan aktivitas fungisida
terhadap strain ini. Penghambatan pertumbuhan yang disertai
dengan aktivitas mikrobisida dicatat dengan
senyawa 4 serta campuran 6+7 terhadap C. neo-formans dan S.
aureus. Namun, senyawa ini menunjukkan aktivitas bakterisida
terhadap S. flexneri pada 16 ÿg/
Machine Translated by Google

Kengne dkk. Pengobatan dan Terapi Komplementer BMC (2021) 21:164 Halaman 7 dari 14

Tabel 1 Aktivitas antimikroba (MIC dan MMC dalam ÿg/mL) ekstrak dan senyawa hasil isolasi dari R. Abyssinicus serta referensi
obat antimikroba
Ekstrak/Senyawa Parameter penghambatan P. aeruginosa S. flexneri S. aureus MSSA01 MRSA03 C. albicans C. neoformans

ekstrak MeOH mikrofon 64 128 64 64 64 64 32

MMC 128 128 128 128 128 64 32

MMC/MIC 2 1 2 2 2 1 1

Fraksi EtOAc mikrofon 64 32 32 64 64 32 32

MMC 128 32 64 64 64 64 32

MMC/MIC 2 1 2 1 1 2 1

fraksi n-BuOH mikrofon 128 128 128 256 256 64 32

MMC 256 256 128 256 256 64 64

MMC/MIC 2 2 1 1 1 1 2

1 mikrofon 64 32 32 64 64 64 32

MMC 128 32 64 64 128 64 32

MMC/MIC 2 1 2 1 2 1 1

2 mikrofon 8 8 8 16 16 8 8

MMC 16 16 8 32 32 8 8

MMC/MIC 2 2 1 2 2 1 1

3 mikrofon 128 128 256 >256 >256 128 64

MMC 256 >256 >256 >256 >256 >256 128

MMC/MIC 2 / / / / / 2

4 mikrofon 16 8 8 32 32 8 8

MMC 16 16 8 32 32 8 8

MMC/MIC 1 2 1 1 1 1 1

5 mikrofon 32 32 32 128 128 16 16

MMC 64 32 32 256 256 32 32

MMC/MIC 2 1 1 2 2 2 2

6+7 mikrofon 16 8 8 16 16 16 8

MMC 16 16 8 16 32 16 8

MMC/MIC 1 2 1 1 2 1 1

Refa mikrofon 0,5 8 0,5 4 4 1 2

MMC 0,5 8 0,5 4 4 1 2

MMC/MIC 1 1 1 1 1 1 1

A
/: tidak ditentukan; Konsentrasi Penghambatan Minimum MIC; Konsentrasi Mikrobisida Minimum MMC; : flukonazol untuk jamur dan ciprofloxacin untuk bakteri

mL, yaitu dua kali MIC-nya. Pengamatan serupa terjadi
dicatat pada senyawa 2 terhadap P. aeruginosa. Semua dari
strain yang diuji kurang sensitif terhadap senyawa 3.
Efek gabungan dari ekstrak/senyawa MeOH dan
antibiotik
Hasil studi interaksi antara ekstrak/senyawa metanolik (2
dan 4), dan ciprofloxacin pada
bakteri atau flukonazol dalam ragi disajikan pada Tabel 2.
Kami menemukan bahwa efek dari hubungan ekstrak meta-nolik
dengan agen antibakteri dan antijamur ini
bersifat sinergis apapun mikroorganismenya
diuji. Meskipun demikian, hubungan antar senyawa
2 dan ciprofloxacin menunjukkan efek aditif terhadap
strain MSSA01 dan MRSA03. Interaksi antara
senyawa 4 dan flukonazol juga terbukti bersifat aditif terhadap
ragi C. albicans dan C. neofor-mans. Efek aditif juga diamati
terhadap C.
albicans ketika senyawa ini dikombinasikan dengan
ciprofloxacin.
Mekanisme aktivitas antibakteri
Studi tentang mekanisme kerja metanol
ekstrak/senyawa 2 dibandingkan dengan referensi
antibiotik, ciprofloxacin dilakukan dengan pengukuran
di satu sisi kepadatan optik pada 260 dan 280 nm
dan di sisi lain tampak berkurang
gula dalam suspensi kultur bakteri, dan akhirnya oleh
Machine Translated by Google

Kengne dkk. Pengobatan dan Terapi Komplementer BMC (2021) 21:164 Halaman 8 dari 14

Tabel 2 Interaksi Ekstrak/Senyawa Metanol R. Abyssinicus dan Antibiotik Terhadap Spesies Bakteri dan Ragi
Mikroorganisme ekstrak MeOH Senyawa 2 Senyawa 4
FICA FICEx FIC Interpretasi FICA FIC2 FIC Interpretasi FICA FIC5 FIC Penafsiran

P.aeruginosa 0,25 0,125 0,37 Sinergis 0,125 0,125 0,25 Sinergis 0,25 0,125 0,25 Sinergis
S.flexneri 0,125 0,125 0,25 Sinergis 0,031 0,25 0,281 Sinergis 0,0625 0,25 0,31 Sinergis
S.aureus 0,25 0,125 0,37 Sinergis 0,25 0,125 0,375 Sinergis 0,5 0,125 0,625 Aditif

MSSA01 0,125 0,0625 0,18 Sinergis 0,0625 0,5 0,5625 Aditif 0,25 0,25 0,5 Sinergis
MRSA03 0,125 0,125 025 Sinergis 0,0625 0,5 0,5625 Aditif 0,25 0,125 0,375 Sinergis
C.albicans 0,125 0,0625 0,18 Sinergis 0,0625 0,0625 0,125 Sinergis 0,25 0,5 0,75 Aditif

C.neoformans 0,0625 0,0625 0,125 Sinergis 0,0625 0,0625 0,125 Sinergis 0,25 0,5 0,75 Aditif

FICA MIC antibiotik yang diuji dalam kombinasi/MIC antibiotik yang diuji sendiri; FICEx MIC ekstrak diuji dalam kombinasi/MIC ekstrak diuji sendiri; Mikrofon FIC2 dari
senyawa 2 diuji dalam kombinasi dengan antibiotik/MIC dari senyawa 2 yang diuji sendiri; FIC4 MIC senyawa 4 diuji dalam kombinasi dengan antibiotik/ MIC
senyawa 4 diuji sendiri; FIC: MIC antibiotik yang diuji dalam kombinasi/MIC antibiotik yang diuji sendiri + MIC ekstrak/senyawa yang diuji dalam kombinasi/MIC
ekstrak/senyawa diuji sendiri; antibiotik: ciprofloxacin untuk bakteri dan flukonazol untuk jamur

mengukur aktivitas aktivitas enzim dehidro-genase rantai Aktivitas antioksidan

pernapasan. Hasil ini diilustrasikan dalam Dilihat dari aktivitas antioksidannya, kapasitas ekstrak atau
Gambar. 2, 3 dan 4, masing-masing. senyawa dalam menangkap radikal DPPH cukup besar
ditentukan dan dinyatakan dalam EC50, diikuti dengan penentuan
Efek pada kebocoran membran sel kapasitas antioksidan total yang dinyatakan dalam
Tercatat bahwa ekstrak metanol dan senyawa 2 menginduksi Setara asam galat (GEAC). Dari hasil yang didokumentasikan
kebocoran bahan biologis yang menyerap pada 260 dan 280 nm oleh pada Tabel 3, diamati bahwa senyawa 2
P. aeruginosa (Gbr. 2a dan b) menunjukkan potensi pemulungan yang signifikan terhadap
dan S. flexneri (Gbr. 2c dan d), pada konsentrasi sama dengan Radikal DPPH (EC50 = 3,08 ± 0,44 ÿg/mL), mendekati nilai tersebut
atau dua kali MIC mereka. Namun, efek ini dari referensi vitamin C (1,81 ± 0,19 ÿg/mL). Namun,
sampel yang diuji pada kebocoran membran ditemukan senyawa 1 dan 6+7 memiliki pemulungan yang menarik
konsentrasi tergantung pada keberadaan kedua mikroorganisme. kekuatan melawan radikal DPPH dengan nilai EC50 sebesar
Di hadapan P. aeruginosa, majemuk 4,52 ± 0,36 ÿg/mL dan 7,63 ± 1,27 ÿg/mL, masing-masing
2 menunjukkan efek kebocoran yang lebih tinggi dibandingkan ekstrak kasar. dibandingkan dengan MeOH (62,11 ± 0,39 ÿg/mL), EtOAc
(72,29 ± 0,71 ÿg/mL) dan n-BuOH (76,54 ± 0,78 ÿg/mL)
Efek pada kebocoran gula membran dari bakteri ekstrak.
Studi tentang munculnya gula pereduksi juga mengungkapkan bahwa Selain itu, senyawa 1 dan 2 menunjukkan nilai tertinggi
gula pereduksi meningkat pada kultur bakteri nilai kapasitas antioksidan total sebesar 106,03 ± 0,87 ÿg/mL
suspensi seiring dengan meningkatnya konsentrasi ekstrak metanol dan 104,87 ± 1,43 ÿg/mL, masing-masing. Berturut-turut disusul
serta senyawa 2 yang diuji campuran senyawa 6+7, senyawa 5, senyawa 4, kemudian ekstrak
dari ½ CMI ke 2 MIC melalui MIC (Gbr. 3). Penampilan gula MeOH, EtOAc dan n-Bu-OH dengan nilai GEAC 83,38 ± 0,22,
pereduksi juga lebih penting
kehadiran produk 2 dibandingkan dengan R. 81,09 ± 0,93, 79,54 ± 1,26, 73,23 ± 0,61, 58,44 ± 0,38 dan
ekstrak absinicus. 40,46 ± 0,74 ÿg/mL, masing-masing.

Efek pada enzim dehidrogenase rantai pernapasan

aktivitas pada bakteri tersebut
Pengaruh ekstrak MeOH dan senyawa 2 terhadap rantai respirasi
dehidrogenase pada P. aeruginosa dan S.
flexneri dinyatakan sebagai rata-rata TriPhenyl Formazan (TPF)
yang terbentuk diilustrasikan pada Gambar 4. Umumnya untuk pengujian
konsentrasi senyawa dan pada mikroorganisme tertentu, kami
mengamati peningkatan TPF yang dilepaskan
waktu. Namun seiring konsentrasi zat yang diuji
meningkat, terjadi penurunan DPK yang signifikan
terbentuk untuk setiap waktu inkubasi. Pengurangan ini adalah
lebih penting terhadap S. flexneri baik untuk ekstrak kasar maupun
untuk senyawa 2 yang diuji.
Aktivitas sitotoksik
Aktivitas sitotoksik ekstrak dan senyawa terisolasi dari R.
Abyssinicus dipelajari dengan menilai
aktivitas hemolitik terhadap sel darah merah (sel darah merah) menggunakan
Triton X-100 sebagai kontrol positif. Kami mengamati 100%
lisis dengan kontrol positif, dibandingkan dengan saline buffer
fosfat (PBS) yang tidak menunjukkan lisis sel darah merah.
Menariknya, tidak ada satupun ekstrak dan senyawa yang diuji
menunjukkan hilangnya integritas membran akibat sel
lisis pada konsentrasi hingga 2048 ÿg/mL untuk ekstrak
dan 256 ÿg/mL untuk senyawa yang diisolasi (hasilnya tidak
ditampilkan).
Machine Translated by Google

Kengne dkk. Pengobatan dan Terapi Komplementer BMC (2021) 21:164 Halaman 9 dari 14

Gambar 2 Penampilan bahan penyerap 260 dan 280 nm dalam filtrat P. aeruginosa dan S. flexneri dalam suspensi kontrol dan setelah perlakuan dengan
konsentrasi ekstrak MeOH dan senyawa 2 yang berbeda

Diskusi banyak efek samping yang terkait dengan antimikroba konvensional

Munculnya strain bakteri dan jamur yang resisten terhadap obat
antimikroba konvensional serta efek samping yang terkait dengan
antibioterapi telah meningkatkan pencarian produk alami sebagai cara
alternatif untuk melawan organisme ini. Sejak peradaban paling awal,
tanaman obat telah dimanfaatkan oleh praktisi medis untuk mengatasi
berbagai masalah kesehatan, dan di antaranya adalah infeksi bakteri
dan jamur [35]. Ekstrak tumbuhan dan senyawa alami efektif dalam
pengobatan penyakit menular sekaligus meringankan
[36]. Penelitian ini menilai aktivitas antimikroba dan antioksidan ekstrak
R. Abyssinicus dan senyawa hasil isolasinya. Tanaman ini terkenal
dengan berbagai kegunaannya dalam pengobatan herbal untuk
mengatasi masalah kesehatan yang melibatkan stres oksidatif, serta
infeksi bakteri dan jamur.
Fraksinasi bio-guided dari tanaman ini kemudian dilakukan untuk
mengidentifikasi agen potensial yang memiliki aktivitas antimikroba
dan/atau antioksidan. Sebanyak lima senyawa murni (1 hingga 5) dan
satu campuran dua
Machine Translated by Google
Kengne dkk. Pengobatan dan Terapi Komplementer BMC
Gambar 3 Tampilan gula pereduksi (ÿg/mg) dalam filtrat P. aeruginosa (a) dan S. flexneri (b) untuk suspensi kontrol dan setelah perlakuan
dengan perbedaan konsentrasi ekstrak MeOH dan senyawa 2
senyawa (6 dan 7) diisolasi dari fraksi EtOAc
dari R. abisinicus. Senyawa 1, diidentifikasi sebagai chrysopha-
nol, pertama kali dilaporkan dari Rheum rhabarbarum, sebuah
tanaman tahunan herba yang termasuk dalam famili Polygona-
ceae [37], dan telah ditemukan di berbagai famili, seperti
Polygonaceae, Rhamnaceae, Fabaceae,
Liliaceae, Asphodelaceae, Buphorbiaceae, Meliaceae,
Podocarpaceae, Picramniaceae, dan Hemerocallidaceae
[38, 39]. Senyawa 2, physcion, terjadi secara alami
turunan antrakuinon, dan bahan bioaktif utama dalam pengobatan
tradisional Tiongkok Radix dan
(2021) 21:164 Halaman 10 dari 14
Rhizoma rhei [40]. Ini adalah dihidroksiantrakuinon atau 9,
10-antrakuinon yang mengandung substituen hidroksi pada posisi
1 dan 8, gugus metoksi pada posisi 3, dan gugus metil pada posisi
6. Senyawa 3 diidentifikasi sebagai
ergosta-6,22-diene-3,5,8-triol, suatu polihidroksisterol yang
sebelumnya telah diisolasi dari Lentinus edodes [23].
Senyawa 4, emodin, merupakan turunan antrakuinon
yang pertama kali dilaporkan di Aspergillus goesii, suatu mikotoksin
[41]. Senyawa 5 diidentifikasi sebagai 6-hidroksiemodin
(citreorosein), dilaporkan dalam genus Rumex untuk pertama
waktu oleh Ertürk dkk. [42]. Senyawa 6, krisofan,
Machine Translated by Google

Kengne dkk. Pengobatan dan Terapi Komplementer BMC (2021) 21:164 Halaman 11 dari 14

Gambar 4 Pengaruh ekstrak MeOH dan senyawa 2 terhadap rantai pernafasan dehidrogenase pada P. aeruginosa dan S. flexneri. TPF: Trifenil Formazan

adalah glikosida chrysophanol yang sebelumnya telah
diidentifikasi dari daun dan akar Aloe hija-zensis [43].
Akhirnya senyawa 7 diidentifikasi sebagai
physcionin, didistribusikan di akar hampir semua
Spesies Rheum [44].
Ketiga ekstrak organik menunjukkan aktivitas
terhadap semua mikroorganisme yang diuji, dengan MIC dan
Nilai MMC bervariasi antara 32 dan 256 ÿg/mL. Penelitian
sebelumnya telah melaporkan ekstrak kasar R. absi-nicus
menunjukkan antibakteri [15, 16], antikanker [16],

Tabel 3 Aktivitas antioksidan ekstrak dan beberapa senyawa hasil isolasi dari R. Abyssinicus
Ekstrak/senyawa aktivitas penangkal radikal bebas DPPH (EC50, ÿg/mL) Kapasitas antioksidan setara asam galat (GEAC, ÿg/mL)
ekstrak MeOH 62,11±0,39a 73,23±0,61a

Fraksi EtOAc 72,29±0,71b 58,44 ± 0,38b

fraksi n-BuOH 76,54±0,78c 40,46±0,74c

1 4,52±0,36d 104,87±1,43d

2 3,08 ± 0,44e 106,03±0,87d

4 10,69 ± 0,51f 79,54±1,26e

5 9,88 ± 0,62f 81,09±0,93e

6+7 7,63±1,27g 83,38±0,22f

Vitamin C 1,81 ± 0,19 jam /

EC50: Konsentrasi setara sampel uji yang menangkap 50% radikal DPPH. Data mewakili rata-rata ± SD dari tiga percobaan independen yang dilakukan di
rangkap tiga. Pada kolom yang sama, nilai yang dipengaruhi oleh huruf superskrip berbeda (ah) berbeda nyata menurut uji ANOVA satu arah dan uji Waller Duncan;
p <0,05; /: tidak ditentukan
Machine Translated by Google
Kengne dkk. Pengobatan dan Terapi Komplementer BMC (2021) 21:164
antivirus [15], anti-inflamasi [15, 17], antioksidan
[18], penyembuhan luka [17], antimalaria [19], diuretik dan
aktivitas analgesik [20] .
Namun aktivitas tertinggi (MIC = 32 ÿg/mL) adalah
ditemukan dengan tiga ekstrak terhadap C. neoformans, dan
khususnya fraksi EtOAc terhadap S. flexneri, S. aur-eus dan C.
albicans. Fraksi ini adalah yang paling aktif
dengan nilai MIC antara 32 dan 64 ÿg/mL. Namun, meskipun dalam
banyak kasus, nilai MMC tampak seperti itu
menggandakan MIC, ekstrak MeOH dan fraksi EtOAc
ditemukan bersifat fungisida terhadap C. neoformans di
32 ÿg/mL sedangkan pada konsentrasi yang sama etil
fraksi asetat bersifat bakterisidal terhadap S. flexneri.
Penelitian ini mengevaluasi antibakteri, antijamur dan
aktivitas antioksidan senyawa yang diisolasi dari R.
juranginicus. Sebagian besar senyawa ini ditemukan menghambat
efek mikrobisida dengan nilai MMC yang sama atau dua kali lebih
tinggi dari nilai MMC.
MIC yang sesuai. Senyawa 2 dan 4 menghambat
pertumbuhan C. albicans dan C. neoformans pada konsentrasi 8
ÿg/mL, dan juga menunjukkan aktivitas fungisida
melawan strain ini. Beberapa penelitian telah mendokumentasikan a
berbagai sifat farmakologis dari physcion termasuk aktivitas
pencahar, hepatoprotektif, antineoplastik, anti-inflamasi dan anti-
mikroba [40, 45].
Senyawa 4, emodin, juga telah ditunjukkan untuk ditampilkan
antibakteri, antijamur, antiparasit, antioksidan, dan
aktivitas antivirus [46]. Campuran 6+7 juga menunjukkan aktivitas
antimikroba yang cukup besar dengan efek bakterisida terhadap S.
flexneri pada 16 ÿg/mL sementara
senyawa 3 tidak aktif terhadap sebagian besar pengujian
strain.
Pengaruh asosiasi ekstrak MeOH dengan
ciprofloxacin dan flukonazol bersifat sinergis
terlepas dari mikroorganisme yang diuji. Senyawa 2
terkait dengan ciprofloxacin menunjukkan efek sinergis
kecuali pada strain MSSA01 dan MRSA03. Sebuah sinergis
Efek juga diamati ketika senyawa 4 dikombinasikan dengan
ciprofloxacin terhadap MSSA01 dan MRSA03
strain. Hasil ini menunjukkan peningkatan kerentanan
terhadap antibiotik uji. Kombinasi yang sinergis
telah terbukti membuat mikroorganisme sangat rentan terhadap
konsentrasi kedua agen antimikroba yang dapat dengan mudah
diperoleh atau dilampaui dalam
serum setelah pemberian dosis biasa [47], menunjukkan perlunya
mengeksplorasi potensi kombinasi
ekstrak MeOH, senyawa 2 dan 4 dengan referensi
obat antimikroba, untuk memerangi strain yang resisten. Ke
sepengetahuan kami, ini adalah laporan pertama dari sampel uji
dan hubungan ciprofloxacin / flukonazol terhadap
strain MDR.
Studi ini juga menunjukkan bahwa ekstrak MeOH dan senyawa
2 menginduksi kebocoran bahan biologis yang menyerap pada 260
dan 280 nm, kemungkinan asam nukleat dan
Halaman 12 dari 14
turunan protein oleh P. aeruginosa dan S. flexneri, di
konsentrasi sama dengan atau dua kali MIC-nya. Ini
pengamatan menunjukkan kontribusi senyawa 2
dan ekstrak MeOH terhadap perubahan membran mikroba, dan
mengakibatkan kebocoran bahan intraseluler
dapat menyebabkan kematian mikroba, membenarkan tindakan mikrobisida tersebut
memengaruhi. Mekanisme kematian bakteri serupa juga terjadi
dilaporkan dalam penelitian sebelumnya [28]. Kemampuan MeOH
ekstrak dan senyawa 2 untuk mengubah membran sel bakteri
selanjutnya ditunjukkan dengan peningkatan gula pereduksi
dalam suspensi budaya sebagai konsentrasi keduanya
ekstrak MeOH yang diuji dan senyawa 2 yang dihasilkan
½ MIC ke 2 MIC melalui MIC. Munculnya gula pereduksi juga
menjadi lebih penting dengan adanya
senyawa 2 dibandingkan dengan ekstrak R. Abyssinicus. Pengamatan
ini telah didokumentasikan dengan
terpenoid dari daun Tridax procumbens Linn.
terhadap E. coli [48]. Dalam penelitian ini, ekstrak MeOH dari
R. absinicus dan senyawa 2 juga ditemukan menghambat enzim
rantai pernapasan dehidrogenase P. aeru-ginosa dan S. flexneri.
Penurunan aktivitas ini
enzim, dapat berkontribusi terhadap penghambatan mikroba
pertumbuhan dan mungkin menyebabkan kematian. Sejujurnya,
penghambatan aktivitas dehidrogenase pada bakteri patogen adalah
menunjukkan aktivitas antimikroba yang kuat karena penghambatan
oksida-reduktase seperti dehidrognase, mempengaruhi
respirasi mikroba.
Kajian terhadap sifat antioksidan ekstrak R. Abyssini-cus dan
senyawa hasil isolasinya mengungkap potensi ekstrak/senyawa
hasil isolasi tersebut dalam mengais
Radikal DPPH, dengan senyawa 2 teridentifikasi paling tinggi
mengais-ngais kekuasaan melawan kelompok radikal DPPH. Senyawa
1, 4, 5 dan 6+7 juga menampilkan pemulungan yang menarik
kekuatan melawan radikal DPPH dibandingkan dengan
Ekstrak MeOH, EtOAc dan n-BuOH. Secara keseluruhan, senyawa
1 dan 2 memiliki kapasitas antioksidan total tertinggi sedangkan
ekstrak EtOAc dan n-BuOH merupakan yang tertinggi.
paling tidak aktif. Pengamatan ini menunjukkan bahwa fraksinasi
meningkatkan aktivitas antioksidan senyawa
1, 2, 4, 5 dan 6+7 dan mengencerkan EtOAc dan
ekstrak n-BuOH. Oleh karena itu, keberadaan senyawa tersebut
mungkin ikut bertanggung jawab atas antioksidan
aktivitas (AOA) yang ditemukan dalam ekstrak tumbuhan ini; AOA
tergantung pada metode yang digunakan, memperkuat konsep
bahwa ekstrak tumbuhan ini mengandung beberapa senyawa
antioksidan yang bekerja dengan cara berbeda. Antimikroba
dan aktivitas antioksidan senyawa 1, 2 dan 4 adalah
sesuai dengan penelitian sebelumnya [19, 29, 40, 46,
49]. Namun, ini adalah laporan pertama mengenai antibakteri,
aktivitas antijamur dan antioksidan senyawa 3, 5–7
melawan radikal bebas dan bakteri serta jamur patogen.
Aktivitas antioksidan dari senyawa ini digabungkan dengan
sifat antimikrobanya, mungkin menawarkan pilihan terapeutik untuk
pengobatan penyakit menular
Machine Translated by Google
Kengne dkk. Pengobatan dan Terapi Komplementer BMC
secara bersamaan mengurangi banyak efek samping yang sering
dikaitkan dengan antimikroba konvensional [36].
Kesimpulan R.
Abyssinicus merupakan sumber potensial agen antibakteri,
antijamur dan antioksidan. Mekanisme aktivitas antibakterinya
disebabkan oleh gangguan membran sitoplasma dan penghambatan
aktivitas enzim dehidrogenase rantai pernapasan mikroba.
Menariknya, tidak satu pun ekstrak/senyawa yang diuji menunjukkan
aktivitas sitotoksik terhadap sel normal; menyoroti kesesuaian dan
selektivitasnya terhadap bakteri dan ragi patogen.
Ekstrak MeOH dan senyawa 2 dan 4 menunjukkan efek sinergis
dengan ciprofloxacin dan flukonazol.
Aktivitas yang diamati dari senyawa yang diisolasi terhadap bakteri
dan jamur termasuk strain MDR memerlukan eksplorasi lebih lanjut.
Singkatan
1
13C-NMR: Resonansi Magnetik Nuklir Karbon Tiga Belas; H-NMR: Proton
Resonansi Magnetik Nuklir; NMR 2D: Magnetik Nuklir Dua Dimensi
Resonansi; ATCC: Koleksi Budaya Tipe Amerika; CC: Kolom
Kromatografi; NYAMAN: Spektroskopi Korelasi; DMSO: Dimetilsulfoksida;
EtOAc: Etil asetat; HMBC: Konektivitas Obligasi Berganda Heteronuklir;
HNC: Herbier National du Cameroun; HR-EI-MS: Elektron Resolusi Tinggi
Spektrometri Massa Dampak; HR-TOFESIMS: Waktu Penerbangan Resolusi Tinggi
Spektrometri Massa Ionisasi Elektrospray; HSQC: Single Heteronuklir
Koherensi Kuantum; IR: Infra-merah; MDR: Multi-Resisten Obat;
MeOH: Metanol; MHA: Agar-agar Mueller Hinton; MHB: Kaldu Mueller Hinton;
MIC: Konsentrasi penghambatan minimum; MMC: Mikrobisida Minimum
Konsentrasi; NA: Agar nutrisi; n-BuOH: n-Butanol; NMR: Magnetik Nuklir
Resonansi; RF: Faktor retensi; KLT: Kromatografi Lapis Tipis;
TMS: Tetrametilsilana; TOF-ESIMS: Waktu Penerbangan Ionisasi Electrospray
Spektrometri massa; UV: Ultra-ungu
Informasi Tambahan Versi online berisi materi
tambahan yang tersedia di https://doi. org/10.1186/s12906-021-03325-y.
File tambahan 1 Skema 1 Protokol untuk ekstraksi dan pemurnian fraksi EtOAc
Rumex Abyssinicus.
1
File tambahan 2 Gambar S1 : Spektrum H-NMR senyawa 1. Gambar S2 : Spektrum
senyawa 13C-NMR 1. Gambar S3 : Spektrum HSQC 1 Spektrum senyawa H-1
Spektrum HMBC senyawa 1. HCOSY 1. Gambar senyawa 1. Gambar S4 : S5 :
1
Gambar S6: Spektrum H-NMR senyawa 2. Gambar S7: Spektrum senyawa 13C-
NMR 2. Gambar S8: Spektrum HSQC senyawa 2. Gambar S9: Spektrum COZY
senyawa 2. Gambar S10: HMBC Spektrum senyawa 2. Gambar S11:
Spektrum H-NMR senyawa 3. Gambar S12: Spektrum senyawa 13C-NMR 3. Gambar
1
S13: Spektrum senyawa HSQC 3. Gambar S14: Spektrum senyawa 3 H-1 H
COZY. Gambar S15: Spektrum HMBC senyawa 3. Gambar S16: S17: Spektrum
senyawa 13C-NMR 4. Gambar S18: Spektrum HSQC 1 Spektrum HCOSY senyawa
1
4. HCOSY dari senyawa 4. Spektrum H-NMR senyawa 4. Gambar
Gambar S19: Gambar S20: Spektrum HMBC senyawa senyawa 4. Gambar S21:
Spektrum 13C-NMR senyawa 1 Spektrum senyawa 5. Gambar S22:
1
H-1 H 5. Gambar S33: Spektrum HSQC senyawa 5. Gambar S24: H-NMR
Spektrum COZY senyawa 5. Gambar S25: Spektrum HMBC senyawa 5. Gambar
Spektrum H-NMR senyawa 6 dan 7. S26:
1
Gambar S27: Spektrum 13C-NMR senyawa 6 dan 7. Gambar S28: 1 H-1 HCOSY
Spektrum senyawa 6 dan 7. Gambar S29: Spektrum senyawa HSQC
6 dan 7. Gambar S30: Spektrum HMBC senyawa 6 dan 7.
(2021) 21:164 Halaman 13 dari 14
Ucapan Terima Kasih
Para penulis berterima kasih kepada Universitas Dschang atas pembiayaan beberapa
bahan habis pakai yang digunakan dalam pekerjaan ini, kepada “Service Commun
d'Analyses” dan “Groupe Chimie des Substances Naturelles”, kepada “Institut de
Chimie Moléculaire de Reims” untuk spektroskopi dan analisis spektrometri pada
peralatan ESIMS dan NMR pada Platform PlAnet. Penghargaan yang kami terima atas
program FEDER UE terhadap proyek PlAneT CPER.
Kontribusi penulis ICK, LDTF,
AJN, CDJN dan MDD berkontribusi pada pengumpulan dan analisis data. JDT
menunjuk penelitian tersebut, melakukan pengujian biologis dan membantu dalam
penulisan dan penyuntingan naskah. JDT, LVN dan DN mengawasi dan merevisi naskah
secara kritis untuk konten intelektual penting. Semua penulis membaca dan menyetujui
naskah akhir.
Pendanaan
Para penulis tidak memiliki dana untuk pekerjaan ini.
Ketersediaan data dan bahan Kumpulan
data yang digunakan dan dianalisis selama penelitian ini tersedia dari penulis terkait.
Deklarasi
Persetujuan etika dan persetujuan untuk berpartisipasi
Semua prosedur dan protokol yang melibatkan hewan dan perawatannya diikuti
sesuai dengan pedoman institusional dan disetujui oleh Komite Etik Nasional Kamerun
(Nomor Reg. FWA-IRB00001954) dan sesuai dengan pedoman ARRIVE.
Persetujuan untuk publikasi
Tidak berlaku.
Kepentingan yang bersaing
Para penulis menyatakan bahwa mereka tidak memiliki kepentingan yang bersaing.
Detail penulis
1
Departemen Biokimia, Unit Penelitian Mikrobiologi dan Zat Antimikroba,
Fakultas Sains, Universitas Dschang, PO Box 67, Dschang, Kamerun.
2
Departemen Kimia, Unit Penelitian Kimia Terapan dan
Lingkungan, Fakultas Sains, Universitas Dschang, PO
3
Kotak 67, Dschang, Kamerun. Departemen Ilmu Biomedis, Fakultas Ilmu Kesehatan,
4
Universitas Buea, PO Box 12, Buea, Kamerun. Pita
Isolasi dan Struktur, Institut Kimia Molekuler Reims (ICMR), CNRS UMR 7312, Bat. 18
BP 1039, 51687 Reims Cedex 2, Prancis.
Diterima: 22 Januari 2021 Diterima: 14 Mei 2021
Referensi 1.
Dewal MB, Wani AS, Vidaillac C, Oupický D, Rybak MJ, Firestine SM. Turunan Thieno
[2,3-d] pirimidinedion sebagai agen antibakteri. Eur J Med Kimia. 2012;51:145–53.
https://doi.org/10.1016/j.ejmech.2012.02.035.
2.Nkomo LP. Bioaktivitas in vitro ekstrak kasar Lippia javanica pada isolat klinis Helicobacter
pylori: Skrining fitokimia awal.
Universitas Fort Hare. Tesis Master, Universitas Fort Hare, Fakultas Sains &
Pertanian; 2010. hal. 97.
3. Rojas J, Buitrago A. Minyak atsiri dan produknya sebagai agen antimikroba: Kemajuan
dan prospek. Bab 13, 26p. Dalam: Duarte MCT, Rai M, editor.
Tanaman Obat Terapi Dari Lab hingga Mark; 2015.
4. Kalghatgi S, Spina CS, Costello JC, Liesa M, Morones-Ramirez JR, Slomovic S, dkk.
Antibiotik bakterisida menyebabkan disfungsi mitokondria dan kerusakan oksidatif
pada sel mamalia. Kedokteran Terjemahan Sains. 2013;5(192):192ra85.
5. Chanda S, Kaneria M, Nair R. Aktivitas antibakteri Psoralea corylifolia L.
benih dan bagian udara dengan berbagai metode ekstraksi. Mikrobiol Res J. 2011;
6(2):124.
6. Adeshina GO, Onaolapo JA, Ehinmidu JO, Odama LE. Fitokimia dan
studi antimikroba dari ekstrak etil asetat daun Alchornea cordifolia ditemukan di
Abuja, Nigeria. J Med Tanaman Res. 2010;4(8):649–58.
7. Joubouhi C, Tamokou JDD, Ngnokam D, Voutquenne-Nazabadioko L,
Kuiate JR. Iridoid dari fraksi iso-butanol Canthium subcordatum dengan
Machine Translated by Google
Kengne dkk. Pengobatan dan Terapi Komplementer BMC (2021) 21:164
aktivitas biologis yang kuat. Med Alternatif Kompilasi BMC. 2017;17(1):17. https://
doi.org/10.1186/s12906-016-1536-8 .
8. Nzogong RT, Ndjateu FST, Ekom SE, Fosso J-AM, Awouafack MD, Tene M, dkk. Aktivitas
antimikroba dan antioksidan turunan triterpenoid dan fenolik dari dua tanaman
Melastomataceae Kamerun: Dissotis senegambiensis dan Amphiblemma
monticola. Med Alternatif Kompilasi BMC. 2018; 18(1):159. https://doi.org/10.1186/
s12906-018-2229-2.
9. Davidson PM, Branen AL. Antimikroba makanan - pengantar. Dalam Davidson PM, Sofos
JN, Branen AL (Eds.), antimikroba dalam makanan (Edisi ke-3rd), Hal 1–10. New York,
NY: CRC Pers; 2005.
10. Sieniawska E, Swatko-Ossor M, Sawicki R, Skalicka-Woÿniak K, Ginalska G.
Terpen alami mempengaruhi aktivitas antibiotik terhadap Mycobacterium
tuberkulosis yang diisolasi. Praktek Kepala Kedokteran. 2017;26(2):108–12. https://doi.
org/10.1159/000454680.
11. Tagousop CN, Tamokou JDD, Kengne IC, Ngnokam D, Voutquenne-Nazabadioko L.
Aktivitas antimikroba saponin dari Melanthera elliptica dan efek sinergisnya dengan
antibiotik terhadap fenotipe patogen. Kimia Cent J. 2018;12(1):97. https://doi.org/10.1186/
s13065- 018-0466-6.
12. Ahmad I, Aqil F. Kemanjuran in vitro ekstrak bioaktif 15 tanaman obat terhadap bakteri
enterik yang resistan terhadap berbagai obat penghasil ESÿL. Mikrobiol Res.
2007;162(3):264–75. https://doi.org/10.1016/j.micres.2006.06.010.
13. Rao K, Ch S, David Banji HS, Mahesh V. Sebuah studi tentang nutraceuticals dari
genus Rumex. Hygeia JD Med. 2011;3(1):76–88.
14. Ken F (2019) Database tanaman tropis yang berguna [online]. Tersedia: http://tropical.
theferns.info/viewtropical.php?id=Rumex+abyssinicus [Diakses 29-12-2019.
15. Getie M, Gebre-Mariam T, Rietz R, Höhne C, Huschka C, Schmidtke M, dkk.
Evaluasi aktivitas anti mikroba dan anti inflamasi tanaman obat Dodonaea viscosa,
Rumex nervosus dan Rumex absinicus. Fitoterapia. 2003; 74(1–2):139–43. https://
doi.org/10.1016/S0367-326X(02)00315-5.
[ PubMed ] 16. Tamokou JDD, Chouna JR, Fischer-Fodor E, Chereches G, Barbos O,
Damian G, dkk. Aktivitas antikanker dan antimikroba dari beberapa tanaman obat
Kamerun yang kaya antioksidan. PLoS Satu. 2013;8(2):e55880. https://doi. org/10.1371/
journal.pone.0055880.
17. Mulisa E, Asres K, Engidawork E. Evaluasi penyembuhan luka dan anti-
aktivitas inflamasi rimpang Rumex Abyssinicus J. (Polygonaceae) pada tikus. Med
Alternatif Kompilasi BMC. 2015;15(1):341.
18. Mohammed SA, Panda RC, Madhan B, Demessie BA. Ekstraksi senyawa bioaktif dari
bahan tanaman Ethiopia Akar Rumex Abyssinicus (mekmeko)—studi tentang kinetika,
optimasi, aktivitas antioksidan dan antibakteri. J Taiwan Inst Kimia Eng.
2017;75:228–39. https://doi.org/10.1016/j. jtice.2017.03.004.
[ Artikel bebas PMC ] [ PubMed ] 19. Muganga R, Angenot L, Tits M, Frederich M. Aktivitas
antiplasmodial dan sitotoksik tanaman obat Rwanda yang digunakan dalam pengobatan
malaria. J Etnofarmakol. 2010;128(1):52–7. https://doi.org/10.1016/j.jep.2009.12.023.
20. Mekonnen T, Urga K, Engidawork E. Evaluasi aktivitas diuretik dan analgesik rimpang
Rumex absinicus Jacq pada tikus. J Etnofarmakol. 2010;127(2):433–9.
https://doi.org/10.1016/j.jep.2009.10.020.
21. Guo S, Feng B, Zhu R, Ma J, Wang W. Isolasi preparatif tiga antrakuinon dari Rumex
japonicus dengan kromatografi arus berlawanan kecepatan tinggi. Molekul.
2011;16(2):1201–10. https://doi.org/10.3390/molecules16021201.
22. Basu S, Ghosh A, Hazra B. Evaluasi aktivitas antibakteri Ventilago madraspatana Gaertn.,
Rubia cordifolia Linn. Dan Lantana camara Linn.: isolasi emodin dan physcion
sebagai agen antibakteri aktif. Res Phytother. 2005;19(10):888–94. https://doi.org/
10.1002/ptr.1752.
[ PubMed ] 23. Rivera A, Benavides OL, Rios-Motta J. (22E)-Ergosta-6,22-diene-3ÿ,5ÿ,8ÿ-triol:
polihidroksisterol baru yang diisolasi dari Lentinus edodes (shiitake). Nat Prod Res.
2009;23(3):293–300. https://doi.org/10.1080/14786410802038671.
24. Zhang C, Wang X, Zhang X, Zhang Y, Xiao H, Liang X. Dipandu oleh Bioassay
pemisahan citreorosein dan senyawa estrogenik lainnya dari Polygonum cuspidatum.
Res Phytother. 2009;23(5):740–1. https://doi.org/10.1002/ptr.2619.
25. Kubo I, Murai Y, Soediro I, Soetarno S, Sastrodihardjo S. Cytotoxic
antrakuinon dari Rheum pulmatum. Fitokimia. 1992;31(3):1063–5. https://doi.org/
10.1016/0031-9422(92)80078-S.
26. Tamokou JDD, Tala MF, Wabo HK, Kuiate JR, Tane P. Aktivitas antimikroba ekstrak metanol
dan senyawa dari kulit batang Vismia rubescens. J Etnofarmakol. 2009;124(3):571–
5. https://doi.org/10.1016/j.jep.2009.04.062.
27. Climo MW, Pelindung RL, Pemanah GL. Kombinasi vankomisin dan ÿ-
laktam bersifat sinergis melawan Staphylococcus dengan penurunan kerentanan
terhadap vankomisin. Agen Antimikroba Kemoterapi. 1999;43(7):1747–53. https://doi.org/
10.1128/AAC.43.7.1747 .
Halaman 14 dari 14
28. Karsha PV, Lakshmi OB. Aktivitas antibakteri lada hitam (Piper nigrum Linn.) dengan
referensi khusus pada cara kerjanya terhadap bakteri. Sumber Daya Produk J Nat India.
2010;1(2):213–5.
29. Sathya-Bama S, Jayasurya Kingsley S, Sankaranarayanan S, Bama P.
Aktivitas antibakteri ekstrak fitokimia berbeda dari daun T. procumbens Linn.: identifikasi
dan cara kerja senyawa terpenoid sebagai antibakteri. Ilmu Farmasi Int J Pharm.
2012;4(1):557–64.
30. Kim KJ, Sung WS, Suh BK, Moon SK, Choi JS, Kim JG, dkk. Aktivitas antijamur dan
cara kerja partikel nano perak pada Candida albicans.
Biometal. 2009;22(2):235–42. https://doi.org/10.1007/s10534-008-9159-2.
31. Beras-Evans C, Miller NJ. Status antioksidan total dalam plasma dan cairan tubuh. Metode
Enzimol. 1994;234:279–93. https://doi.org/10.1016/0076-6879(94)34095-1.
32. Mot AC, Pârvu M, Damian G, Irimie FD, Darula Z, Medzihradszky KF, dkk.
Laccase “kuning” dengan ciri spektroskopi “biru”, dari Sclerotinia sclerotiorum.
Proses Biokimia. 2012;47(6):968–75. https://doi.org/10.1016/j. procbio.2012.03.006.
33. Djouossi MG, Tamokou JDD, Ngnokam D, Kuiate JR, Tapondjou LA,
Harakat D, dkk. Flavonoid antimikroba dan antioksidan dari daun Oncoba spinosa Forssk.
(Salicaceae). Med Alternatif Kompilasi BMC. 2015;15(1):134.
34. Situ H, Bobek LA. Penilaian in vitro potensi terapi antijamur dari histatin-5 ludah dua
varian domain histatin-5 dan ludah Mucin (MUC7) 1. Agen Antimikroba Kemoterapi.
2000;44(6):1485–93. https://doi. org/10.1128/AAC.44.6.1485-1493.2000.
35. Tamokou JDD, Kuiate JR, Gatsing D, Efouet AP, Njouendou AJ.
Evaluasi antidermatofit dan toksikologi ekstrak, fraksi dan senyawa diklorometana-
metanol yang diisolasi dari Coula edulis. Iran J Med Sci. 2011;36(2):111–21.
36. Iwu M, Duncan AR, Okunji CO. Antimikroba Baru Asal Tumbuhan. hal. 457– 462. Dalam:
Janick J, penyunting. Perspektif tentang tanaman baru dan kegunaan baru.
Alexandria: Pers ASHS; 1999.
37. Tutin F, Clewer HWB. XCIX.—bahan penyusun rhubarb. J Kimia Soc Trans. 1911;99(0):946–
67. https://doi.org/10.1039/CT9119900946.
38. Kuo YH, Lee PH, Wein YS. Empat senyawa baru dari benih Cassia fistula. J Nat Prod.
2002;65(8):1165–7. https://doi.org/10.1021/np020003k.
39. Panichayupakaranant P, Sakunpak A, Sakunphueak A. Penentuan HPLC kuantitatif
dan ekstraksi antrakuinon pada daun Senna alata. J Kromatografi Sci.
2009;47(3):197–200. https://doi.org/10.1093/chromsci/47.3.197.
40. Agarwal S, Singh SS, Verma S, Kumar S. Aktivitas antijamur turunan antrakuinon dari
Rheum emodi. J Etnofarmakol. 2000;72(1–2):43–6. https://doi.org/10.1016/
S0378-8741(00)00195-1.
41. Wells JM, Cole RJ, Kirksey JW. Emodin, metabolit toksik Aspergillus
pergiii diisolasi dari buah chestnut yang rusak akibat kumbang. Aplikasi Mikrobiol.
1975;30(1): 26–8. https://doi.org/10.1128/AM.30.1.26-28.1975.
42. Ertürk S, Özbas M, Imre S. Pigmen antrakuinon dari Rumex cristatus.
Ilmu Farmasi ACTA. 2001;43(1):21–2.
43. Abd-Alla HI, Shaaban M, Shaaban KA, Abu-Gabal NS, Shalaby NM, Laatsch H.
Senyawa bioaktif baru dari Aloe hijazensis. Nat Prod Res. 2009;23(11): 1035–49.
https://doi.org/10.1080/14786410802242851.
44. He J, Wang L, Guo H, Zhao H, Sun J. Kimia, farmakologi dan metode pengolahan rhubarb
(spesies Rheum): tinjauan. J Makanan Bioaktif. 2019;8:42–50.
45. Pang MJ, Yang Z, Zhang XL, Liu ZF, Fan J, Zhang HY. Physcion, turunan
antrakuinon yang terjadi secara alami, menginduksi apoptosis dan autophagy
pada karsinoma nasofaring manusia. Acta Farmakol Dosa. 2016; 37(12):1623–40. https://
doi.org/10.1038/aps.2016.98.
46. Izhaki I. Emodin – metabolit sekunder dengan banyak ekologi
fungsinya pada tumbuhan tingkat tinggi. Fitol Baru. 2002;155(2):205–17. https://doi.org/
1 0.1046/j.1469-8137.2002.00459.x.
47. Klastersky J, Cappel R, Daneau D. Signifikansi klinis sinergisme in vtro antara antibiotik
pada infeksi gram negatif. Agen Antimikroba Kemoterapi. 1972;2(6):470–5.
https://doi.org/10.1128/AAC.2.6.470.
48. Bama SS, Kingsley SJ, Anan S, Bama P. Aktivitas antibakteri berbeda
ekstrak fitokimia dari daun T. procumbens: identifikasi dan cara kerja senyawa terpeniod
sebagai antibakteri. Ilmu Farmasi Int J Pharm. 2012;4(1):557–64.
49. Prateeksha, Yusuf MA, Singh BN, Sudheer S, Kharwar RN, Siddiqui S, dkk.
Chrysophanol: Antrakuinon alami dengan potensi bioterapi beragam. Biomolekul
2019;9:68, 2, DOI: https://doi.org/10.3390/biom9020068.
Catatan Penerbit
Springer Nature tetap netral sehubungan dengan klaim yurisdiksi
dalam peta yang diterbitkan dan afiliasi kelembagaan.