PENGANTAR

PRAKTIKUM
HEMATOLOGI

1
 LABORATORIUM PATOLOGI KLINIK

PATOLOGI KLINIK:
CABANG ILMU KEDOKTERAN YANG MEMERIKSA
(MEMPELAJARI) CONTOH BAHAN YANG BERASAL DARI
TUBUH MANUSIA BERUPA: DARAH, URIN, TINJA,
ASCITES, SPERMA, DLL.menganalisa secara kualitatif &
kuantitatif
DIBAGI BEBERAPA SEKSI:
1. HEMATOLOGI
2. KIMIA KLINIK
3. IMUNO SEROLOGI
4. MIKRO & PARASIT
5. BANK DARAH
2
 PERANAN PEMERIKSAAN LAB.
KLINIK
penting sebagai Penunjang Klinik

1. MEMBANTU MENEGAKAN & MEMASTIKAN DIAGNOSE, MISALNYA: TSH

(HIPER/HIPOTHYROID)
LEUKIMIA, TYPHUS
2. MENENTUKAN STATUS KESEHATAN / SKRINING TEST, MISALNYA:
ANEMIA, PRA-OPERASI
3. FOLLOW UP MISALNYA: SGOT/SGPT (HEPATITIS), DHF (TROMBOSIT)
4. PROGNOSIS, PERJALANAN PENYAKIT & HASIL PENGOBATAN
3
 Peranan Laboratorium
PEMERIKSAAN PADA ORANG
SEHAT (tanpa gejala)

Check-up
Wellness testing
Penetapan faktor resiko dan
Deteksi dini berbagai penyakit
4
HASIL PEMERIKSAAN LABORATORIUM TERGANTUNG:
1. PREANALITIK (PENGELOLAAN SAMPEL)
2. ANALITIK (PROSESING SAMPEL)
3. POST ANALITIK (PENGELOLAAN HASIL)
Hsl diharapkan teliti, cepat, tepat dan dpt dipercaya AKURAT
Kesalahan sering terjadi : salah sampel/pasien, tertukar, tempat
pengambilan, waktu pengambilan dan salah hasil (penetikan)

BILA KLINIS >< HASIL LAB PERLU DICARI:

1. APAKAH DX. KERJA SUDAH BENAR?
2. ULANGI PEMERIKSAAN LAB. DENGAN SPESIAL ATTENTION
3. KOMUNIKASIKAN DENGAN Dr. PK

5
PEMILIHAN PEMERIKSAAN
LABORATORIUM
1. PASIEN ORIENTED
--------> KEPENTINGAN PASIEN (PENYAKIT)
--------> BIAYA
2. SARANA PEMERIKSAAN

SAMPLING DARAH

1. VENA ----> SERING

2. KAPILER ----> SAMPEL < 0,5 ml

3. ARTERI -----> BLOOD GAS ANALYSIS

6
 DIAGNOSE PENYAKIT

A. KLINIS
- ANAMNESE
- PEMERIKSAAN FISIK

B. PENUNJANG
1. LABORATORIUM KLINIK
2. PA
3. RADIOLOGI
4. MIKROBIOLOGI / PARASIT
5. EKG, USG, CT SCAN, DLL

7
 HEMATOLOGI
ILMU YANG MEMPELAJARI TENTANG SEL DARAH & KOAGULASI
SEL DARAH ADA 3 :
1. ERITROSIT (SEL DARAH MERAH)
2. LEUKOSIT (SEL DARAH PUTIH)
3. TROMBOSIT (KEPING DARAH)
YANG DIPERIKSA:
1. KADAR
2. STRUKTUR
3. FUNGSI
4. ASALNYA (SUMSUM TULANG)
PEMERIKSAAN DARAH RUTIN TDD:
1. HEMOGLOBIN (Hb) NORMAL WANITA
2. LED = LAJU ENDAP DARAH
3. JUMLAH LEUKOSIT, ERITROSIT, TROMBOSIT
4. HITUNG JENIS
5. EVALUASI HAPUSAN DARAH
LAIN-LAIN:
- JUMLAH ERITROSIT DAN JUMLAH RETIKULOSIT
-JUMLAH TROMBOSIT
- HEMATOKRIT (PCV) 8
 PENGAMBILAN BAHAN &
ANTIKOAGULAN
Pengambilan darah
Darah vena
Darah kapiler
Arterial capillary blood
Vena pungsi

Anti-koagulan
EDTA (Ethylene diamine tetra acetic acid)
Natrium sitrat dalam larutan 3,8 % Faal hemostasis
Heparin analisa gas darah
9
10
11
12
 TEHNIK PEMERIKSAAN
(METODA)
Manual : Automatik :
Lama * Cepat

Jumlah terbatas * 15-26 parameter

dalam waktu
beberapa menit

Kurang teliti & * Lebih teliti &

kurang akurat akurat

Murah * relatif lebih mahal

13
 DX.HEMATOLOGI SCR AUTOMETED
ANALYZER

Tujuan : efisiensi pmrx hematolgi

Prinsip dasar: flow cytometry ukuran dan
jumlah sel darah dihitung pd susp sel drh
dlm medium yg mengalir pd jalur ttt.
( impedensi dan electro-optical
Hasil pengukuran : jumlah & volume
(ukuran sel) histrogramdistribusi sel-sel
darah
Interpretasi hasil : perlu diket indeksnya
14
NEUTROPENIA
LARGE IMMATURE CELL
THROMBOCYTOPENIA
PLATELET AGGREGATES
SCHIZOCYTES

15
HASIL PEMERIKSAAN HEMATOLOGI (AUTOMETED ANALYZER)

DATE : 14/2/05
RUN #: 12345
SEQ # : 27
PLT Flags
WBC : 7.6 103/ mm3 ( 5.3 10.0 ) MCV : 80 m3 ( 80 100 )
RBC : 4.90 106/ mm3 (3.80 5.80 ) MCH : 30.6 Pg ( 26.5 35.5 )
HGB : 15.0 g/dl ( 11.0 16.5 ) MCHC : 34.2 g/dl ( 31.5 33.5 )
HCT : 43.9 % ( 36.0 - 50.0 ) RDW : 13.2 % ( 11.0 16.0 )
PLT : 298 103/ mm3 ( 150 390 ) MPV : 8.7 m3 ( 6.5 11.0 )
WBC Flag
%LYM : 39.3 % ( 20.0 -46.0 ) # LYM : 2.2 103/ mm3 ( 1.2 3.2 )
%MON : 7.3 % ( 4.0 10.0 ) # MON : 0.4 103/ mm3 ( 0.3 0.6 )
%GRA : 53.4 % ( 43.0 76.0 ) #GRA : 3.0 103/ mm3 ( 1.2 6.8 )

WRC RBC P LT

50100 250300450 30 120 23 0 5 10 20 16 3 0

 PEMERIKSAAN KADAR HEMOGLOBIN
[ CARA SAHLI ]

1. PRINSIP
HB + HCL 0,1 N AS. HEMATIN (Hitam)
BANDINGKAN DGN WARNA STANDAR SCR
VISUAL
(Coklat) Koefisien variasi 10%
2. TUJUAN
MENGUKUR KADAR HB

(pemeriksaan kolorimetri visual yg tidak teliti

dan tdk standard, Dpt dipakai bagi yg tidak
memeiliki peralatan spektrofotometer)
17
3. ALAT
HB METER SAHLI
TERDIRI
1. WARNA STANDARD
2. TABUNG
HEMOMETER BER
SKALA 2 22 g/dl
HCl
3. PENGADUK GELAS
1 2 3 4 5 4. PIPET SAHLI
BERVOLUME 20 L
5. HCL 0,1 N + PIPET
PASTEUR
18
4. CARA PEMERIKSAAN
a. TABUNG HEMOMETER
DIISI LARUTAN HCL 0,1
N SAMPAI ANGKA 2
b. DGN PIPET SAHLI
MASUKKAN DARAH 20 Ul
c. DIAMKAN 5 MENIT
d. ENCERKAN DGN
AQUADES SAMPAI
WARNANYA SAMA DGN
WARNA STANDAR
e. BACA KADAR HBNYA
19
B. PIPET SAHLI DIISI DARAH

20 L
C. HAPUS KELEBIHAN
DARAH
DENGAN KERTAS TISSUE
D. MASUKKAN DARAH 20 l
DARI PIPET SAHLI
KEDALAM TABUNG HB
METER
E. BILAS PIPET SAHLI
DENGAN HCL DALAM
TABUNG TSB DI ULANG 3
KALI
20
F. TUNGGU 5 MENIT
AGAR TERBENTUK
ASAM HEMATIN
G. ENCERKAN DENGAN
AQUADES DAN
DIADUK SAMPAI
WARNANYA SAMA
DENGAN WARNA
STANDAR

21
H. BACA KADAR HB
DENGAN MELIHAT
KETINGGIAN
MINISKUS
LARUTAN

22
6. PELAPORAN
DINYATAKAN DALAM g/dl
DILAPORKAN DLM ANGKA BULAT, ATAU
NAIK
SETENGAH.
MISAL 11 12.
7. CATATAN
NILAI NORMAL
LAKI LAKI : 14 18 g/dl
WANITA : 12 16 g/dl

23
SUMBER KESALAHAN
1. ALAT/REAGEN KURANG SEMPURNA
a. VOLUME PIPET SAHLI TIDAK TEPAT 20 Ul
b. WARNA STANDARD SUDAH PUCAT
c. KADAR HCL TIDAK TEPAT 0,1 N

2. PEMERIKSA
a. MENGISI DARAH TIDAK TEPAT 20 L
b. CEROBOH
c. PENGAMATAN KURANG TERANG
d. TERBENTUK GELEMBUNG UDARA
e. TIDAK MEMBILAS PIPET DENGAN HCL
f. MENGENCERKAN TIDAK TEPAT
24
 PEMERIKSAAN HEMATOKRIT
PRINSIP
Prosentase endapan eritrosit terhadap jumlah darah
semula (darah EDTA dalam tabung tertentu diputar
dg kecepatan dan waktu tertentu, akan terjadi
endapan)

Harga Normal : 40 - 48 % , 37- 43 %

CARA PEMERIKSAAN
secara makro atau mikro

25
 ALAT :
- tabung wintrobe (100 mm, 2,5 mm, skala 0-100 mm)
- sentrifuge

CARA MAKRO
Pipet darah (EDTA) kedalam tabung wintrobe sampai
tanda 100 diatas
Tabung dipusingkan dg kecepatan 3000 rpm (30 menit)
Amati pd tabung wintrobe:
a. tebalnya lap putih diatas eritrosit (buffy coat), yg terdiri
atas lekosit dan trombosit. Ketebalan buffy coat 1 mm
setara dg 10.000 lekosit /cmm. (pd lekositosis atau CML
terlihat sangat tebal)
b. Warna palasma diatas ( kuning: ikterik & coklat :
hemoglobinemia)
26
 LAJU ENDAP DARAH
(LED)

1. PRINSIP
DARAH YANG SUDAH DIBERI KOAGULAN BILA
DIDIAMKAN DALAM WAKTU TERTENTU MAKA SEL
SEL DARAH AKAN MENGENDAP. DALAM HAL INI
YANG DIHITUNG ADALAH KECEPATAN WAKTU
MENGENDAPNYA
2. TUJUAN
UNTUK MENGETAHUI BANYAKNYA SEL SEL
DARAH YANG MNEGENDAP DALAM WAKTU
TERTENTU 27
3. ALAT YANG DIPERLUKAN
a) TABUNG WESTERGREN
1. PANJANG 300 mm
2. GARIS TENGAH BAGIAN DALAM 2,5 mm
3. SKALA DARI 0 200 mm
4. KEDUA UJUNG TABUNG TERBUKA
b) RAK WESTERGREN
c) PENGHISAP
d) PENCATAT WAKTU
e) PIPET BERSKALA
f) SEMPRIT 5 ml DAN JARUMNYA
g) BOTOL KECIL

28
4. REAGEN
LARUTAN NATRIUM SITRAT 3,8% [NA CITRAT
ANHYDRAT]
5. CARA PEMERIKSAAN

a. SEDIAKAN
TABUNG/BOTOL YG
TELAH DIISI DENGAN 0,4
ml LARUTAN NATRIUM
SITRAT 3,8%

b. HISAPLAH DARAH VENA

1,6 ml MASUKKAN
KEDALAM BOTOL YG
BERISI NATRIUM CITRAT

29
c. CAMPUR

d. HISAPLAH CAMPURAN
DARAH INI KEDALAM PIPET
WESTERGREN DENGAN
BANTUAN KARET
PENGHISAP SAMPAI GARIS
BERTANDA 0 mm

e. BIARKAN PIPET ITU DALAM

SIKAP TEGAK LURUS PADA
RAK WESTERGREN SELAMA
60 MENIT [PASANG
PENCATAT WAKTU]
30
 f. BACA

6. PELAPORAN
HASIL PEMERIKSAAN DINYATAKAN DALAM MILIMETER
PERJAM DAN 2 JAM

31
7. CATATAN
a. NILAI NORMAL : LAKI LAKI 0 10 mm/JAM
WANITA 0 20 mm/JAM
b. KESALAHAN YG SERING TERJADI :
1) ANTIKOAGULAN DAN DARAH TIDAK DICAMPUR DENGAN
BAIK
2) TERJADI HEMOLISE
3) PIPET YG DIPAKAI TIDAK BERSIH DAN KERING
4) KEADAAN PIPET PADA RAK MIRING SEHINGGA
MENYEBABKAN KESALAHAN PEMBACAAN SEBESAR 30%
5) KOLOM DARAH MENGANDUNG GELEMBUNG UDARA
6) PENENTUAN LAJU ENDAP DARAH DILAKUKAN LEBIH DARI
2 JAM SESUDAH PENGAMBILAN DARAH
7) SUHU RUANGAN TINGGI [SEBAIKNYA PADA SUHU KAMAR
180 150] 32
8) PENCATATAN WAKTU TIDAK TEPAT
 HITUNG SEL-SEL DARAH
(LEKOSIT, ERITROSIT &
TROMBOSIT
1. PRINSIP
DARAH + LAR. SESUAI SEL NYA
DIHITUNG PADA KAMAR HITUNG
IMPROVED NEUBAUER
Larutan lekosit : Turk
eritrosit : Hayem

2. TUJUAN
MENGHITUNG JUMLAH LEKOSIT / CMM 33

DARAH
3. ALAT / REAGEN
a. PIPET THOMA LEKOSIT (
Pengaduk Putih)
BERSKALA 0,5 11.
b. ERITROSIT (0.5, 1, 101)
PENGADUK MERAH
c. KAMAR HITUNG
IMPROVED NEUBAUER
d. MIKROSKOP
e. LARUTAN TURK, HAYEM

34
5. CARA PEMERIKSAAN
a. ISILAH PIPET THOMA DGN
DARAH SAMPAI ANGKA 0,5

b. HAPUSLAH KELEBIHAN DARAH

DGN KERTAS TISSUE

c. ISILAH PIPET THOMA DGN

LARUTAN TURK SAMPAI
ANGKA 11 & LAR. HAYEM
SAMPAI ANGKA 101
35
d. ANGKATLAH PIPET DARI LAR.
TURK / HAYEM DAN POSISIKAN
HORISONTAL LALU LEPASKAN
KARET PENGHISAPNYA

e. TUTUPLAH KEDUA UJUNG

PIPET DGN JARI LALU
KOCOKLAH SELAMA 2 3
MENIT.

f. SEDIAKAN KAMAR HITUNG

IMPROVED NEUBEUR DGN
KACA PENUTUPNYA

36
g. KOCOK PIPET THOMA TADI
LALU BUANGLAH 3 TETES
PERTAMA, LALU SENTUHKAN
UJUNGNYA DGN SUDUT 30
PD
PINGGIR KACA PENUTUP
SAMPAI KAMAR HITUNG TERISI
PENUH.

h. TUNGGU SELAMA 2 MENIT,

LALU HITUNGLAH LEKOSIT,
ERITROSIT

37
i. CARA MENGHITUNG

1. LETAKKAN MEJA MIKROSKOP

DLM POSISI HORISONTAL .
KURANGI SINAR YANG
MASUK
2. GUNAKAN OBJEKTIP 10 X
UNTUK MENGHITUNG
JUMLAH LEKOSIT PADA
RUANG A, B. C, D
3. GUNAKAN OBJEKTIP 45 X
UTK MENGHITUNG
ERITROSIT PADA RUANG
1,2,3,4,5
38
4. USAHAKAN AGAR SATU
4. HITUNGLAH JUMLAH
LEKOSIT SECARA ZIG-
ZAG

5. LEKOSIT /ERITROSIT
YG
MENYINGGUNG PADA
GARIS BATAS ATAS
MASUK KOTAK
DIBAWAHNYA DAN
PADA GARIS BATAS
KIRI MASUK KOTAK DI
KANANNYA.
39
6. PERHITUNGAN JUMLAH SEL
DARAH
PENGENCERAN DARAH DLM PIPET = 20X, SEDANGKAN LUAS TIAP
BIDANG BESAR = 1 mm2 DAN TINGGI KAMAR HITUNG 1/10 mm
LEKOSIT DIHITUNG DALAM 4 BIDANG BESAR SEHINGGA JUMLAH
LUASNYA = 4X1 mm2 = 4 mm2
FAKTOR PERKALIAN = 1 : (0,4 X 20 X 20 X N ) = 50 . N

PENGENCERAN DARAH DLM PIPET = 200X, SEDANGKAN LUAS TIAP

BIDANG BESAR = 1 mm2 DAN TINGGI KAMAR HITUNG 1/50 mm
ERITROSIT DIHITUNG DALAM 5 BIDANG BESAR SEHINGGA JUMLAH
LUASNYA = 5X1 mm2 = 5 mm2
FAKTOR PERKALIAN = 50 X 200 X N = 10.000 . N

7. PELAPORAN
JUMLAH LEKOSIT & ERITROSIT= /
mm3 40
8. CATATAN
a. NILAI NORMAL LEKOSIT 4000 10.000 /mm3
ERITROSIT 4,4 5,9 ; 3,8 5,2 Juta / m3

b. KESALAHAN UMUM YG SERING TERJADI :

JUMLAH DARAH/LARUTAN TURK & HAYEM YG DIHISAP
KEDALAM PIPET TIDAK TEPAT
MEMAKAI PIPET BASAH
BERKURANGNYA DARAH DALAM PIPET PADA WAKTU
PENGAPUSAN DARAH YG MELEKAT PADA UJUNG PIPET
TERJADINYA GELEMBUNG UDARA DALAM PIPET PADA WAKTU
MENGHISAP DARAH/LARUTAN PENGENCER
TERJADINYA BEKUAN DARAH KARENA LAMBAT BEKERJA
PENGOCOKAN DARAH TIDAK SEMPURNA
CAIRAN TERBUANG SEDIKIT PADA WAKTU MENCABUT KARET
PENGHISAP
41
 KAMAR HITUNG / KACA PENUTUP KOTOR
ADA GELEMBUNG UDARA YANG MASUK PADA WAKTU
PENGISIAN KAMAR HITUNG
LETAK KACA PENUTUP SALAH
MEJA MIKROSKOP TIDAK HORISONTAL
SALAH MENGHITUNG SEL YANG MENYINGGUNG GARIS
BATAS
KACA PENUTUP TERGESER KARENA DISENTUH DENGAN
LENSA MIKROSKOP
LARUTAN TURK ATAUPUN HAYEM KOTOR

42
 PENGHITUNGAN TROMBOSIT
CARA LANGSUNG

A. ALAT & BAHAN

Pipet Thoma eritrosit
kamar hitung Improved Neubauer
larutan Rees Ecker
B. CARA
sama dg cara eritrosit
C. PENGHITUNGAN
PENGENCERAN DARAH 200 X
JUMLAH TROMBOSIT per mm3 : 2000 . N

43
 PENGHITUNGAN TROMBOSIT
TIDAK LANGSUNG
Hitung jumlah eritrosit per mm3
Sediaan hapusan darah dg cat wright atau giemsa
Hitunglah jumlah trobosit yang terlihat bersama
dengan 1000 eritrosit
PERHITUNGAN
Jumlah trombosit dlm 10 lapangan pandang = N
jumlah trombosit per mm3 = 2000 . N

44
PENGHITUNGAN RETIKULOSIT
PRINSIP
Retikulosit (eritrosit muda yg masih mengandung
sisa asam rebonukleat =RNA dalam
sitoplasmanya).
Benang-benang RNA terlihat berwarna biru tua pd
pengecatan supravital brilliant cresyl blue (BCB)

NILAI NORMAL
dewasa : 0,5 1,5 % dan bayi : 2 6 %
45
 HAPUSAN DARAH
1. TUJUAN :
mengevaluasi hapusan darah tepi, hitung
jenis lekoasit dan memperkirakan jumlah
sel trombosit
2. PENGECATAN
Darah EDTA metoda pewarna wright,
Giemsa

46
3. ALAT YANG DIPERLUKAN
a. MIKROSKOP
b. KACA OBJEK YG KERING, BEBAS DEBU DAN
LEMAK
c. LANCET STERIL
d. PENCATAT WAKTU
e. RAK PENGECATAN
f. RAK PENGERING
g. MINYAK EMERSI
h. KACA PENGGESER
i . PINSIL KACA
4. REAGEN
a. LARUTAN WRIGHT/GIEMSA
b. LARUTAN PENYANGGAH DGN Ph 6,4
c. METHANOL ABSOLUT
47
5. CARA PEMERIKSAAN
a. PEMBUATAN SEDIAAN APUS DARAH
1) TETESKAN SATU TETES DARAH
DIATAS KACA OBJEK 2 cm DARI
TEPI. LETAKKAN KACA TERSEBUT
DIATAS MEJA DENGAN DARAH
DISEBELAH KANAN

2) DENGAN TANGAN KANAN

LETAKKAN KACA PENGGESER
DISEBELAH KIRI TETESAN DARAH

3) GERAKKAN KEKANAN HINGGA

MENYENTUH TETESAN TERSEBUT
48
4) BIARKAN DARAH MENEMPEL
DAN MENYEBAR RATA
DIPINGGIR KACA
PENGGESER

5) SEGERA GESERKAN KACA

TERSEBUT KEKIRI DENGAN
SUDUT 30 45.

6) BIARKAN SEDIAN TERSEBUT

KERING DIUDARA, LALU
TULISLAH IDENTITAS PASIEN
49
b. CIRI CIRI SEDIAAN APUS YG BAIK
YAITU
1) PANJANG APUSAN - 2/3 PANJANG
KACA
2) HARUS ADA BAGIAN YG CUKUP
TIPIS UNTUK DIPERIKSA
3) PINGGIR SEDIAAN RATA [A], TIDAK
BERLUBANG LUBANG DAN
BERGARIS GARIS [B]
4) PENYEBARAN LEKOSIT HARUS
MERATA, TIDAK BERKUMPUL PADA
PINGGIR
5) ERITROSIT SALING BERDEKATAN
TAPI TIDAK BERTUMPUKAN
6) FIKSASI HARUS CUKUP LAMA, BILA
TIDAK MAKA KROMATIN DAN INTI
AKAN LARUT
7) TIDAK BOLEH MENGANDUNG
ENDAPAN ZAT PEWARNA
50
c.1 PEWARNAAN WRIGHT
1) LETAKKAN SEDIAAN YG AKAN DIWARNAI
PADA RAK PEWARNA DENGAN LAPISAN
DARAH DIATAS. KEMUDIAN TETESKAN 20
TETES LARUTAN WRIGHT DAN BIARKAN
SELAMA 2 MENIT
2) LALU TETESKAN SAMA BANYAKNYA
LARUTAN PENYANGGA KEATAS SEDIAAN
DAN BIARKAN 20 MENIT, BUANG SISA CAT
3) SIRAMLAH SEDIAAN ITU DENGAN
AQUADES, MULA MULA PERLAHAN
LAHAN KEMUDIAN KERAS KERAS UNTUK
MEMBERSIHKAN SEDIAAN DARI KOTORAN
4) TARUHLAH SEDIAAN DALAM SIKAP LURUS
PADA RAK PENGERING. BIARKAN KERING
DIUDARA

51
c.2 PEWARNAAN GIEMSA

SIAPKAN LAR.GIEMSA ENCER : 1VOL

GIEMSA + 9 VOL LAR. PENYANGGAH
LETAKKAN HAPUSAN DIATAS RAK
TETESKAN METANOL ABSOLUT, BIARKAN
5 MENIT
TETESKAN LARUTAN GIEMSA, BIARKAN
20 MENIT
CUCI
KERINGKAN
52
 HITUNG JENIS
LEKOSIT
1. PRINSIP
TERDAPAT PERBEDAAN DAYA SERAP
SEL DARAH TERHADAP ZAT ASAM

2. TUJUAN
MENGHITUNG JUMLAH TIAP TIAP
JENIS LEKOSIT DALAM DARAH

53
 6. PERHITUNGAN

EO BA BT SG LI MO
1
a) TENTUKAN AREA
PENGHITUNGAN
2
DENGAN LENSA
3
OBJEKTIF 10X. TETESI
4
DENGAN MINYAK
5
IMMERSI DAN PERIKSA
6
DENGAN LENSA
7 OBJEKTIF 100X
8
b) BUAT KOLOM KOLOM
9
UNTUK JENIS JENIS
10
LEKOSIT DAN TIAP
%
TIAP JENIS ADA 10
KOLOM

54
 c) DENGAN MENGGUNAKAN
PENGATUR MIKRO PADA
EO BA BT SG LI MO MIKROSKOP, MULAILAH
MENGHITUNG DARI
1 I IIII I II I 10
PINGGIRAN SEDIAAN
2 IIII 10
KEARAH BAWAH. SETELAH
3 IIII II 10
ITU GESERLAH KEKANAN
4 IIII 10 KEMUDIAN KEATAS LAGI
5 IIII III 10 DAN SETERUSNYA
6 IIII IIII 10 d) SEPULUH LEKOSIT YG
7 IIII IIII 10 PERTAMA DILIHAT
8 IIII III 10 DIMASUKKAN KEDALAM
9 IIII 10 KOLOM 1 DAN SETERUSNYA
10 IIII 10 SAMPAI KOLOM 10
% 66 10 e) HITUNG TIAP TIAP JENIS
0 LEKOSIT PADA KESEPULUH
BARIS YG DIBUAT SEBAGAI
BERIKUT :

55
7. PENCATATAN PELAPORAN
a. DIMULAI DARI SEL EOS, BASO, NETRO
STAB,
NETRO SEG, LIMFO, MONO
b. JUMLAH DINYATAKAN DALAM PROSEN [%]
8. CATATAN
HARGA NORMAL
EOSINOFIL : 1 3 %
BASOFIL :01%
BATANG :26%
SEGMEN : 50 70 %
LIMFOSIT : 20 40 %
MONOSIT : 2 8 %
56
EOSINOFIL
BENTUK : BULAT
SITOPLASMA/GRANUL
A : BESAR BESAR,
BERBENTUK BULAT,
BERWARNA MERAH
JINGGA, JUMLAHNYA
BANYAK SALING
BERDEKATAN
INTI : BIASANYA
TERDIRI DARI 2 LOBUS

57
BASOFIL
BENTUK : BULAT
INTI : SUKAR DILIHAT
SEBAB TERTUTUP OLEH
GRANULA
GRANULA : SANGAT
BESAR BULAT,
BERWARNA UNGU TUA,
JUMLAHNYA BANYAK
TETAPI LETAKNYA TIDAK
BEGITU RAPAT
VAKUOL : KADANG
KADANG TAMPAK
BERWARNA PUSAT
DALAM SITOPLASMA
58
NEUTROFIL
SEGMEN
BENTUK : BULAT
SITOPLASMA/GRANULA :
KEMERAH MERAHAN
BANYAK, KECIL KECIL
WARNA LEMBAYUNG
MUDA, BANYAK TETAPI
TERPISAH
INTI : TERDIRI DARI 2 5
LOBUS, DIHUBUNGKAN
DENGAN BENANG
KHROMATIN, WARNA
UNGU TUA, PADAT
59
STAB/BATANG
BENTUK : BULAT
SITOPLASMA/GRA
NULA : KEMERAH
MERAHAN
BANYAK, KECIL
KECIL WARNA
LEMBAYUNG
MUDA, BANYAK
TETAPI TERPISAH
INTI :BENTUK
BATANG

60
LIMFOSIT
BENTUK : BULAT ATAU
TIDAK TERATUR
SITOPLASMA/GRANULA
: BANYAK BERWARNA
BIRU MUDA
: BESAR DAN SEDIKIT,
WARNA MERAH TUA
INTI : BULAT ATAU
LONJONG, HAMPIR
MENGISI SELURUH SEL

61
MONOSIT
BENTUK : TIDAK
TERATUR, UKURANNYA
PALING BESAR
SITOPLASMA/GRANULA :
SERING KEMERAHAN
VOKULA : SERING
TERDAPAT DALAM
SITOPLASMA
INTI : BERVARIASI
BIASANYA BERBENTUK
SEPERTI GINJAL,
KHROMATIN TERSUSUN
DALAM UNTAIAN, WARNA
LEMBAYUNG MUDA
62
 Kelainan bentuk

Target cell Tear drop cell Akantocyte Burr cell

Spherocyte Sickle cell Schistocyte Crenated cell

63
 Stomatocyte Basophilic stippling normoblast Howell Jolly-
bodies

Rouleaux formation Polikromasi 64

65
Retikulosit
Definisi : eritrosit muda yg masih
mengandung sisa asam
ribonukleat (RNA) di dalam
sitoplasmanya

Normal : 0,2 -2 %

Pemeriksaan : supravital
Brilliant cresyl blue (BCB)

Retikulositosis (jumlah meningkat) :

* anemia hemolitik
* pasca perdarahan akut
* terapi Fe pada anemia
defisiensi besi
66
Eritrosit hipokromik mikrositik
( Anemia defisiensi besi )

Oval macrocytes
( Anemia megalbalastik )

67
 LAIN-LAIN
Gametosit Ring form

M
A
L
A
R
I
A

Gametosit Skizon
68
 GOLONGAN DARAH

Menentkan subgroup gol darah A,B,O, AB

Menentukan jenis aglutinogen dlm sel &
aglutinin dlm serum
Cara : a. kaca obyek
b. tabung ( suspebnsi sel darah dg
nilai hematokrit 2 %)

69
HUKUM LANSTEINER
AGLUTININ (Ab) THD GOL. DARAH TDP DLM PLASMA HANYA
APABILA ERITROSITNYA TDK MENGANDUNG Ag YG SESUAI

GOL. DARAH ANTIGEN AGLUTININ

O -- Anti-A, B

A A Anti-B

B B Anti-A

AB AB --

O BOMBAY -- Anti-A, B, H

70
71
72
73
74
75
 PENETAPAN GOLONGAN DARAH
(ABO)
A. Cara Tabung

Serum anti A,B,AB,Rh

Darah
76
 PENETAPAN GOLONGAN DARAH (ABO)
A. Cara Tabung

Suspensi sel darah Serum anti A,B,AB,Rh

(hematokrit 2 %)
+
77
Disentrifuge 1000 rpm 1menit
 REAKSI SILANG
TUJUAN:
1. MENCEGAH KEJADIAN REAKSI TRANSF. HEMOLITIK
2. MEYAKINKAN BAHWA MANFAAT TRANSFUSI OPTIMAL

MAYOR

ERI Dn SERUM Rs

SERUM Dn ERI Rs

MINOR
78
 PRINSIP
Mengetahui apakah sel darah merah (eritrosit) donor
bisa hidup dalam tubuh pasien

Mengetahui apakah ada/tidak antibodi komplet (tipe

IgM) dan antibodi inkompliet (tipe IgG) dalam
serum pasien (mayor) maupun dalam serum donor
yang melawan sel pasien (minor)

79
 METODA

Aglutinasi langsung
tidak langsung
Aglutinasi reaksi antigen-antibodi terjadi
penggumpalan sel oleh antibodi

Gel Test DiaMed gel test

80
 TES COOMBS DIREK
TUJUAN: Cari eritrosit yg terlapisi IgG

+
CUCI

IgG
3X AHG

AGLUTINASI
TES (+)


AHG: Anti Human Globulin

81
REAKSI SILANG 3 TAHAP:
1. R S SALIN :
MENCOCOKKAN Ab ALAMI ( IgM )
DONOR & RESIPIEN
RECEK GOL. DARAH ABO

2. R S ALBUMIN :
MENDETEKSI Ab-anti Rh
MENINGKATKAN KEPEKAAN
TES ANTI GLOBULIN
3. R S ANTI GLOBULIN :
MENDETEKSI Ab IMUN (IgG) YANG TIDAK
TERLIHAT PD RS MEDIUM SALIN/ ALBUMIN
Mis. GOL DARAH Rh, KELL.,DUFFY, KIDD

82
 Uji Silang ( Crossmatch )

Uji silang utk tindakan sblm transfusi

mencocokkan darah penderita dg darah donor
Uji silang major : sel donor serum
penerima
Uji silang minor : serum donor sel
penerima
Interpretasi hasil ada / tdk aglutinasi (tdk
terjadi reaksi= uji saring darah sesuai)

83
 UJI SILANG= CROSSMACTH

A. Cara Tabung

Uji silang major Serum penerima

Darah penderita
84
 TES COOMBS DIREK
TUJUAN: Cari eritrosit yg terlapisi IgG

+
CUCI

IgG
3X AHG

AGLUTINASI
TES (+)


AHG: Anti Human Globulin

85
86
 Tes Coombs

Mencari antiglobulin aglutinasi

Tes langsung Indikasi : hemolitik,
ikterus neonatorum, reaksi transfusi
( ada/tdknya anlizat yg melapisi eritrosit)
Tes tak langsung mencari analizat tak
lengkap dlm serum

87
 DIREK COOMBS TEST
Prinsip : mencari antibodi (Ab) spesifik tdk lengkap yg
menempel pd sel eritrosit. Dg me+kan anti human
glob.serum pd suspensi sel eritrosit yg bebas dari prot.
Yg terlapisis oleh Ab spesifik dlm wkt ttt akan terjadi
aglutinasi
Reagen & alat:
1. rabbit anti human glob serum (IgG)
2. PZ (garam fisiologi NaCl 0,9 %)
3. tab. Centrifuge, tab reaksi, pipet pastur,centrifuge
Bahan / sampel : darah tanpa antikoagulan
88
 Cara kereja:
1. Ambil 0,5 cc darah masukkan kedlm tab reaksi + PZ 5
100 x, kocok (bolak-balik)
2. Centrifuse 1500 rpm/3 menit, buang fitratnya lakukan 3-4
x (pencucian)
3. Buat suspensi eritrosit 2-4 % dengan pack cellnya
4. Kedlm tab. Reaksi 2 tts serum coombs + 1 tts suspensi
eritrosit inkubasi pd suhu 37oC selama 30-60 menit
5. Kocok tab. agulitanasi + / - (bila perlu dg mikroskop)
Hasil :
positif terjadi aglutinasi
negatif tidak terjadi aglutinasi

89
 Prinsip kerja DiaMed gel tes
- Untuk mendeteksi Alloantibodi dalam serum

Anti IgG
+ Alloantibodi
+ Eritrosit
serum tersensitisasi Kompleks Anti IgG
-Alloantibodi
-Eritrosit tersensitisasi
Dextran
acrylamide
gel
Baca :
Grade 1 4
90
Low Ionic Strength Salt Solution (LISS)
-Utk membuat suspensi eritrosit 0,8 1%
-Terdiri dari :
- 1,75 gr + 18 gr glycine + 20 ml buffer fosfat
(11,3 ml 0,15 M KH2PO4, 8,7 ml 0,15 M NaHPO4)
- Tambahkan diluted water sampai 1000ml
- Pastikan PH 6,7
91
- Tambahkan 0,5 Sodium Azide sebagai pengawet.
DiaMed gel test card
92
Inkubator

93
Centrifuge

94
Hasil Cross-match

Hasil tes :
M :(-)
m : 2+
AC : 4+ 95
96
 FAAL HEMOSTASIS
Masa Perdarahan (Bleeding Time)
Metode : Duke (tersering dipakai
Ivy
Normal : 1 3 menit

Masa Pembekuan (Clotting Time)

Mengukur waktu pembekuan drh
Normal : 5 15 menit
97
 Contact Tissue
Activation ic Ex Factor
n s tri
t i
r II n si
In X e-K c
Pr XI K VI
I
Pa

W
M
rt

T)
H IX L
.T

(P
hr

P II

e
om ag.

VI

im
pl

.T
Co

.T

Common

ot
im

Pr
e
Ti

(P
m

Phos. Lipid
TT
e
(C

X, V
T)

Throm.
Prothrombin

Time
(TT)
Fibrinogen

Bithell et al. 1998 (Wintrobes)

Fibrin 98
 Bleeding Time (Waktu Perdarahan)

Volar
Cuping
telinga
40 mmHg
Cara Duke Cara Ivy
Normal Normal
1-3 menit Kertas 1-7 menit
2 2
1 3
saring
1

Start Start
Normal Abnormal Bleeding time
Dacie et al. 1975, Hirsh et al. 1979, Sirridge et al. 1983 (memanjang) menilai
99
:
Coagulation (Clotting) Time (CT)

*Menilai Intrinsic dan common pathway

Coagulation
(beku)
1 2 3

Beku Beku Start

Whole
1 2 3 Blood
Tanpa Normal:
Anti- 5 - 15 menit
koagulan

Water bath 37o C 100

Brown 1980
101