Daur asam trikarboksilat & pernafasan

Septiyaningsih
2014
Definisi
Siklus asam trikarboksilat ( siklus TCA / tricarboxylic
acid) disebut juga siklus Krebs / siklus asam sitrat
Mrp serangkaian rx di mitokondria yg mengoksidasi
gugus asetil pd asetil KoA & mereduksi koenzim yg
teroksidasi mll rantai transpor elektron yg
berhubungan dg pembentukan ATP
Jalur terakhir metabolisme oksidatif karbohidrat, AA/protein,
lemak, pengubahan rangka karbonnya mjd CO2 & H2O
Oksidasi menyediakan ATP.
Tjd di mitokondria di hati
Jalur Aerob (butuh O2)
Peran : pembentukan glukosa dr rangka karbon
AA/glukoneogenesis, lipogenesis (sintesis asam lemak) &
interkonversi AA.
Jalur untuk oksidasi unit dg 2 karbon & jalur untuk
pertukaran bbg metabolit dr transaminasi.
Bersifat amfibolik
Siklus TCA menghasilkan substrat untuk
rantai respiratorik
Rx gugus asetil pd asetil KoA & asam dikarboksilat 4 karbon yaitu
sitrat.
Pembebasan 2 molekul CO2 & pembentukan ulang oksaloasetat
Hanya sebagian kecil oksaloasetat yg dibutuhkan untuk
mengoksidasi asetil KoA dlm jumlah besar sbg peran katalitik
Menyediakan energi jumlah besar slma oksidasi
Oksidasi Asetil KoA, koenzim mengalami breduksi & reoksidasi di
rantai respiratorik dg pembentukan ATP
Sifat rx Aerob butuh O2 sbg oksidan terakhir dr koenzim-koenzim
yg tereduksi
Enzim di matriks mitokondria baik bebas maupun terikat pd
membran mitokondria serta membran krista, t4 enzim rantai
respiratorik
Reaksi- reaksi Siklus TCA
1. Dekarboksilasi oksidatif piruvat
2. Sintesis sitrat dari asetil Koa & oksaloasetat
3. Isomerisasi sitrat
4. Oksidasi & Dekarboksilasi isositrat
5. Dekarboksilasi oksidatif ketoglutarat-α
6. Pemecahan suksinil KoA
7. Oksidatif suksinat
8. Hidrasi Fumarat
9. Oksidasi malat
1. Dekarboksilasi oksidatif piruvat
Piruvat = produk akhir glikolisis aerob hrs ditanspor
ke mitokondria sebelum amsuk ke siklus TCA
Dilakukan oleh pengangkut piruuvat spesifik yg
membantu piruvt melewati membran mitokondria bg
dalam
Piruvat sampai matriks diubah mjd asetil KoA oleh
kompleks multienzim
Rx irreversibel
Kompleks piruvat dehidrogenase mrp sumber utama
asetil KoA
 Komponen enzim
kompleks piruvat dehidrogenase terdiri dr 3 enzim
( piruvat dehidrogenase/E1/dekarboksilase,
dihidrolipoat transasetilase/E2, dihidrolipoat
dehidrogenase/E3).
tiap enzim mpy salinan multipel & mengatalisis sbg
dr keseluruhan rx
Peran : enzim pd pengubahan piruvat mjd asetil
KoA & mengandung 2 enzim pengatur yg berikatan
sangat kuat, protein kinase & fosfoprotein fosfotase.
 Koenzim
kompleks piruvat dehidrogenase mengandung 5
koenzim yg bekerja sbg pembawa / oksidan untuk rx
zat antara.
E1 membutuhkan asam lipoat & koenzim A
E3 membutuhkan FAD & NAD+
 Pengaturan kompleks piruvat dehidrogenase
2 enzim pengatur mrp bg dr kompleks scr bergantian mengubah
aktivasi & inaktivasi E1 : menimbulkan fosforilasi protein
kinase yg tdk bergantung AMP-siklik shg menghambat E1
Fosfoprotein fosfataseakan mengaktivasi E1
Kinase secara alosterik teraktivasi oleh ATP, asetil KoA, &
NADH shg akan menghentikan kompleks piruvat dehidrogenase
.
asetil KoA & NADH scr alosterik menghambat bentuk
defosforilasi (aktif) E1
Protein kinase scr alosterik diinaktivasi oleh NAD+ & koenzim
akan mengaktifkan piruvat dehidrogenase.
piruvat mrp inhibitor protein kinase yg kuat
Jk konsentrasi piruvat meningkat E1 akan aktif scr maksimal
 Defisiensi piruvat dehidrogenase
menyebabkan asidosis laktat kongenital
ketidakmampuan perubahan piruvat mjd asetil KoA
menyebabkan perubahan piruvat diubah mjd asam laktat
oleh laktat dehidrogenase
1. Asidosis laktat – kematian
2. pembentukan asam laktat menyebabkan
keterlambatan psikomotor, kerusakan korteks serebri,
ganglia basal, & batang otak
3. ataksia episodik ketidakmampuan mengoordinasikan
otot scr volunter diinduksi oleh karbohidrat.
2. Sintesis sitrat dr asetil KoA & oksaloasetat
Kondensasi asetil KoA & oksaloasetat untuk membentuk
sitrat dikatalisis oleh sitrat sintase membentuk ikatan karbon-
ke-karbon antara karbon metil pd asetil KoA & karbonil pd
oksaloasetat.
Sitrat sintase scr alosterik teraaktivasi oleh Ca+2 &ADP
Dihambat : ATP, NADH, suksinil KoA, & derivat lemak
asetil KoA
Sitrat menghambat fosfofruktokinase yg mengatur laju
glikolisis & mengaktivasi asetil KoA karboksilase
Ikatan tioester pada sitril-KoA terbentuk mengalami
hidrolisis & membebaskan sitrat & KoASH (rx eksotermik)
3. Isomerisasi sitrat
Sitrat diisomerisasi mjd isositrat oleh
aconitase/akonitase/akonitat hidratase (dihambat oleh
fluoroasetat yg diubah mjd fluoroasetil KoA yg berkondensasi
dg oksaloasetat untuk membentuk fluorositrat- penghambat
aconitase yg kuat shg menyebabkan akumulasi sitart)
Tahap 1 : dehidrasi mjd cis-akonitat
Tahap 2 : rehidrasi mjd isositrat
Rx scr asimetris shg 2 atom karbon hilang dlm rx selanjutnya
krn tjd channelling pemindahan produk sitrat sintase scr
langsung ke bg aktif akonitase.
Hasil O integrasi aktivitas siklus TCA & penyedia sitrat di
sitosol sbg sumber asetil KoA untuk sintesis asam lemak
Aconitase Aconitase
4. Oksidasi dan dekarboksilasi isositrat
Isositrat dehidrogenase mengatalisis dekarboksilasi oksidatif
isositrat untuk membentuk okasalosuksinat yg terikat pd
enzim & mengalami dekarboksilasi mjd α-ketogluutarat.
Membutuhkan ion MG++/Mn++
Isoenzim : NAD+ (mitkondria), NADP+
(mitokondria&sitosol)
scr irreversibel menghasilkan 3 molekul NADH dan pelepasan
CO2 yg pertama
Sbg pembatas laju siklus TCA
Enzim ini scr alosterik teraktivasi oleh ADP dan Ca+2 &
dihambat oleh ATP & NADH yg kadarnya meningkat jk sel
mpy energi yg berlimpah
Isocitrate DH
Isocitrate DH
5. Dekarboksilasi oksidatif ketoglutarat-α
kompleks Ketoglutarat-α dibentuk mll deaminasi /
transaminasi oksidatif asam amino glutamat.
Ketoglutarat-α mjd suksinil KoA dikatalisis oleh kompleks
Ketoglutarat-α dehidrogenase (mngadung 3 aktivitas enzim)
Melepaskan CO2 yg kedua & membentuk NADH kedua dr
siklus
Koenzim : tiamim pirofosfat, asam lipoat, FAD, NAD+, &
koenzim A
Berfungsi sbg bg dr katalitik.
kompleks Ketoglutarat-α dihambat oleh ATP, GTP, NADH, &
suksinil KoA
Diaktivasi oleh CA+2
Ketoglutarat
DH compleks
6. Pemecahan suksinil KoA
Suksinil tiokinase = suksinil KoA sintetase memecah tioester
berenergi tinggi yg terikat dg suksinil KoA
Rx ini mengalami perangkaian untuk proses fosforilasi GDP mjd
GTP. GTP & ATP dpt mengalami interkonversi scr energetik mll rx
nukleosida difosfat kinase.
GTP + GDP → GDP + ATP
GTP untuk dekarboksilasi oksaloasetat mjd fosfoenolpiruvat
dlm glukoneogenesis & menghasilkan hub. Regulatorik
antara aktivitas siklus TCA & pengghentian oksaloasetat
untuk glukoneogenesis
Suksinil KoA dibentuk dr propionil KoA yg dihasilkan dr
metabolisme asam lemak dg atom karbon ganjil dn dr
metabolisme bbrp AA
7. Oksidasi Suksinat
Suksinat dioksidasi mjd fumarat oleh suksinat
dehidrogenase yg terikat pd permukaan membran dlm
mitokondria.
Enzim ini mengandung FAD & protein besi-sulfur
(Fe;S) & lngsung mereduksi ubikuinon dlm rantai
transpor elektron
menghasilkan koenzim FADH2 tereduksi
Dihambat oleh oksaloasetat

Suksinate DH
8. Hidrasi Fumarat
Fumarat dihidrasi mjd malat mll rx bebas brsifat
reversibel & dikatalisis olh fumarase (fumarat
hidratase) mengatalisis penambahan air pd ikatan
rangkap fumarat.
Fumarat dihasilkan dr siklus urea, sintesis purin,
selama katabolisme AA, fenilalanin & tirosin.
fumarase
9. Oksidasi Malat
Malat dioksidasi mjd oksaloasetat oleh malat
dehidrogenase yg memerlukan NAD+.
Hasil : NADH yg ketiga & terakhir dlm
siklusOksaloasetat dihasilkan mll transaminasi AA,
asam aspartat.

Malate DH
Energi yg dihasilkan Siklus TCA
2 atom karbon masuk ke siklus dlm bentuk asetil KoA
& keluar sbg CO2
Tidak melibatkan pemakaian/pembentukan oksaloasetat
/ zat antara lainnya.
4 pasang elektron akan ditransfer selama 1 lingkaran
siklus : 3 pasang elektron akan mereduksi NAD+ mjd
NADH & 1 pasang mereduksi akan FAD mjd FADH2
Oksidasi 1 NADH oleh transpor elektron menyebabkan
pembentukan 3 ATP, oksidasi FADH2 menghasilkan 2
ATP yg dihasilkan dr oksidasi 1 asetil KoA.
1 Putaran siklus TCA menghasilkan 12
ATP
Akibat oksidasi dikatalisis dehidrogenase pda siklus
TCA dihasilkan 3 molekul NADH & 1 FADH2 untuk
setiap molekul asetil KoA yg dikatabolisme per satu
kali putaran siklus
Ekuivalen pereduksi dipindahkan ke rantai
respiratorik, tempat reoksidasi masing-masing NADH
menghasilkan pembentukan pembentukan -3ATP &
FADH2, -2ATP
Terbentuk 1 ATP / GTP melalui fosforilasi tingkat
substrat yg dikatalisis suksinat tiokinase
Pengaturan Siklus TCA
A. Pengaturan melalui aktivasi & inhibisi aktivitas enziim : dikendalikan mll enzim sitrat
sintase, isositrat dehidrogenase & kompleks ketoglutarat-α dehidrogenase
B. Pengaturan ketersediaan ADP
1.Efek peningkatan ADP: pemakaian energi akibat kontraksi otot, rx biosintesis
menyebabkan hidrolisis ATP mjd ADP & Pi. Akibatnya tjd peningkatan rx
mnggunakan ADP untuk bentuk ATP&fosforillasi oksidatif. Pembentukan ATP
meningkat s/d mengimbangi laju pemakaian ATP oleh rx yg membutuhkan energi
2.Efek penurunan ADP : ADP rendah maka pembentukan ATP mll fosforilasi
oksidatif menurun akibat kekurangan akseptor fosfat (ADP)/fosfat inorganik (Pi)
Laju fosforilasi oksidatif sebanding dg [ADP][Pi]/[ATP] disebut pengendalian
respiratorik pembentukan energi.
Oksidasi NADH & FADH2 oleh rantai transpor elektronterhenti jk ADP
rterbatas.
Jk NADH & FADH2 terakumulasi bentuk yg teroksidasi mjd berkurang
menghambat oksidasi asetil KoA mll siklus TCA akibat kekurnagan koenzim
yg teroksidatif.
TERIMAKASIH