Faktor-faktor yang Mempengaruhi

Hasil Eksperimen

Poppy Anjelisa Z. Hasibuan

Kuliah Bioesei
Tujuan mata kuliah

1.Mahasiswa mampu merangkum metode eksperimen

2. Mahasiswa mampu mempertimbangkan faktor-
faktor yang mempengaruhi hasil eksperimen
2. Mahasiswa mampu membandingkan faktor
ekstrinsik dan faktor intrinsik yang mempengaruhi
hasil eksperimen
 EKSPERIMEN
Metode eksperimen merupakan bagian dari metode
kuantitatif, dan memiliki ciri khas tersendiri terutama
dengan adanya kelompok kontrol.
Dalam bidang sains, penelitian-penelitian dapat
menggunakan desain eksperimen karena variabel-variabel
dapat dipilih dan variabel-variabel lain yang dapat
mempengaruhi proses eksperimen itu dapat dikontrol
secara ketat. Sehingga dalam metode ini, peneliti
memanipulasi paling sedikit satu variabel, mengontrol
variabel lain yang relevan, dan mengobservasi
pengaruhnya terhadap variabel terikat.
Wiersma (1991) dalam Emzir (2009):
eksperimen sekurang-kurangnya terdiri dari satu
variabel bebas, yang disebut sebagai variabel
eksperimental, sengaja dimanipulasi oleh peneliti.

Arikunto (2006): eksperimen adalah suatu cara untuk

mencari hubungan sebab akibat (hubungan kausal)
antara dua faktor yang sengaja ditimbulkan oleh
peneliti dengan mengeliminasi atau mengurangi atau
menyisihkan faktor-faktor lain yang mengganggu.
Menurut Sutrisno Hadi (1982) variabel adalah semua keadaan,
faktor, kondisi, perlakuan, atau tindakan yang dapat
mempengaruhi hasil eksperimen. Dalam suatu penelitian
eksperimen, Sutrisno Hadi (1982) membedakan variabel menjadi
dua yaitu:
a. Variabel Eksperimen atau treatment variabel yaitu kondisi yang
hendak diselidiki bagaimana pengaruhnya terhadap gejala atau
behaviour variable
b. Variabel non eksperimental yaitu variabel yang dikontrol dalam
arti baik untuk kelompok eksperimental

Suharsimi Arikunto (1998:101) membedakan variabel menjadi dua

yaitu variabel yang mempengaruhi disebut variabel penyebab,
variabel bebas, atau independent variabel (X), dan variabel akibat
yang disebut variabel tak bebas, variabel tergantung, variabel
terikat, atau dependent variabel (Y).
 Desain Penelitian
Ibnu Hadjar (1999) membedakan desain penelitian
eksperimen murni menjadi dua yaitu:
a. Post test only control group design/post tes kelompok
kontrol
Pada desain ini subjek ditempatkan secara random ke dalam
kelompok-kelompok dan diekspose sebagai variabel
independent yang diberi post test. Nilai-nilai post test
kemudian dibandingkan untuk menentukan keefektifan
perlakuan.
Desain ini cocok untuk digunakan bila pre test tidak mungkin
dilaksanakan atau mempunyai kemungkinan untuk
berpengaruh pada perlakuan eksperimen.
b. Pre test post test control group design atau pre tes post tes
             

kelompok kontrol
Desain ini melibatkan dua kelompok subjek, satu diberi
perlakuan eksperimental (kelompok eksperimen) dan yang
lain tidak diberi apa-apa (kelompok kontrol). Dari desain ini
efek dari suatu perlakuan terhadap variabel dependen akan
di uji dengan cara membandingkan keadaan variabel
dependen pada kelompok eksperimen setelah dikenai
perlakuan dengan kelompok kontrol yang tidak dikenai
perlakuan.
 Faktor-faktor yang Mempengaruhi Hasil
Penelitian
INTRINSIK: Inherent pada hewan
Genetika, usia, jenis kelamin, kesehatan, status gizi,
status imun/kekebalan, irama sirkadian, faktor endokrin

EKSTRINSIK: Eksternal untuk hewan

Faktor fisik, faktor kimia,
agen mikroba, stres
 FAKTOR INTRINSIK:
Genetika
Outbred HEWAN: Masalah terjadi ketika:
Populasi menurun sehingga sulit untuk mempertahankan heterogenitas
teknik pemeliharaan tidak menjamin keragaman genetik

Inbred/bawaan HEWAN: Masalah terjadi ketika ada:

persilangan tidak utuh (perkawinan silang yang tidak sempurna)
Tidak seragam
Persilangan yang tidak disengaja dengan jenis lainnya
mutasi spontan
penyimpangan kromosom
heterozigositas Residual
 Genetika
Variasi metabolisme disebabkan perbedaan enzim secara
kualitatif dan kuantitatif antara spesies dan strain:
konsentrasi sitokrom P450 dan isoenzim yang bersaing
Enzim rusak/tidak ada atau kehadiran enzim yang
khusus/unik

Note: INTEGRITAS GENETIKA TIDAK DIJAMIN OLEH

nomenklaturnya/tatanamanya dan PILIHLAH GALUR
DENGAN HATI-HATI!
Umur
Faktor penting dalam penelitian karsinogenisitas terhadap
tikus.
Neonatus memiliki sistem tubuh yang belum matang
dibandingkan dengan orang dewasa.
Hewan yang lebih tua dapat memulihkan kembali kondisi
tubuhnya seperti fungsi normal sebelumnya, pada saat
terjadi suatu kerusakan pada sistem tubuhnya.
Pada beberapa hal, respon ini mungkin terkait dengan galur!

Note: SESUAIKAN UMUR DENGAN KEBUTUHAN!

Jenis Kelamin
Perbedaan ditandai dari respon farmakologis dan
toksikologi untuk xenobiotik yang telah dibuktikan
antara tikus jantan dan betina. Perbedaan yang
berhubungan dengan jenis kelamin dalam tumor
mammae terinduksi DMBA sebagai berikut:

Wistar-Furth tikus: 100% pada wanita; 19% pada laki-

laki.

Copenhagen tikus: Tidak ada perbedaan antara pria

dan wanita
 Berat Badan
Berat badan serta luas permukaan tubuh akan
berpengaruh pada dosis yang harus diberikan.

Faktor ini sangat berpengaruh terhadap hewan yang

akan di jadikan percobaan karena akan mempengaruhi
hasil dari percobaan, disebabkan oleh pengaruh dosis
dan cairan tubuh hewan tersebut sehingga hasil dari
pengamatan akan berbeda-beda serta
mempengaruhi efek farmakologinya.
Status Imun
Disfungsi imunologi, termasuk hipersensitivitas dan alergi,
autoimun dan immunodeficiency dapat mempengaruhi hasil
eksperimen.

Agen yang mengubah fungsi kekebalan:

Usia
status gizi
bahan kimia
obat-obatan
aditif makanan
Logam
mikroba
 Status Gizi
Status gizi tergantung pada:
Jenis pakan yang diberikan
Metode dan jumlah pemberian makanan
nafsu makan
Usia
Berbagai pengaturan makanan seperti kurangnya jumlah
mineral, vitamin dan protein, komposisi lipid, dan
komposisi diet yang dapat mengubah biotransformasi
xenobiotik.

Note: KETAHUI APA YANG ANDA MAKAN!

Irama Sirkadian
Parameter perilaku,
biokimia dan fisiologis
(harian, ritme, nilai
minimum dan nilai
maksimum) terjadi pada
waktu tertentu:
Jumlah darah dan
waktu koagulasi
suhu tubuh
Metabolisme obat dan
toksisitas
Tekanan darah
Produksi hormon

Note: KONSISTEN DENGAN PENGUMPULAN DATA

 Faktor Endokrin

Hormon seks merupakan faktor penentu terpenting dari

aktivitas enzim sitokrom P450
Testosteron bila diberikan kepada tikus betina
meningkatkan kemampuannya dalam proses
biotransformasi xenobiotik
Mengebiri tikus jantan mengurangi kemampuannya dalam
proses biotransformasi xenobiotik
 Variasi Biologis
Variasi biologis merupakan faktor intrinsik yang tidak dapat
dikontrol/dikendalikan.
Pada istilah biologi, variasi merupakan penyimpangan
struktur, fungsi dan perkembangan ciri organisme dari
induknya, dari organisme lain dalam populasi sama, atau dari
populasi lain dalam jenis sama atau kelompok berkerabat.
Variasi genotip (genetik) termasuk perbedaan pada genotip di
dalam populasi atau jenis sebagai hasil mutasi, rekombinasi
atau interaksi gen.
Variasi fenotip pada struktur dan fungsi hasil dari tingkah
laku perbedaan lingkungan pada satu atau lebih genotip.
 Faktor penyebab variasi antar spesies:

a. Fase Absorbsi  ikatan obat dengan protein

 waktu transit (lama waktu plasma
pengosongan lambung)
 pH tempat absorbsi (saluran c. Fase Metabolisme
cerna)  aliran darah organ
 keadaan makanan (puasa atau  defisiensi enzim
tidak)
 mikroba
d. Fase Ekskresi
 aliran darah
 aliran darah organ
 pH urin
b. Fase Distribusi
 aliran darah organ
 koefisien partisi
 FAKTOR EKSTRINSIK:
Faktor Fisik

Faktor lingkungan
endogen: Faktor lingkungan
Diet eksogen:
Cage Bedding Desain kandang
Stress Suhu dan kelembaban
Ventilasi
Penerangan
Kebisingan
Diet
Variasi dalam kuantitas atau kualitas vitamin esensial atau mineral dapat:
Mengubah sistem metabolisme obat
Mempengaruhi integritas membran
Predisposisi terjadinya efek karsinogen

Bahan baku mungkin berisi:

Nitrat dan amina – yang membentuk nitrosamine in vivo
Ikan yang dimakan tinggi nitrosamin

Yang dapat dilakukan:

Melihat tanggal pembuatan
Menganalisis pakan untuk nutrisi yang penting
Meminimalkan perubahan diet mendadak
Cage Bedding
JENIS IDEAL
 kayu lunak  Bebas debu
 kayu keras  Enak dan nyaman
 bonggol jagung  menyerap
 produk kertas  Bebas dari kontaminasi
 Tergantung pada spesies dan
desain eksperimental
Pilihan tempat tidur mempengaruhi tingkat amonia dalam kandang:
(MOST) serbuk Aspen> serbuk pine> reclaimed wood pulp
bedding > virgin pulp loose > bedding hardwood chip bedding >
recycled paper bedding > virgin cellulose > pelleted paper bedding
> bonggol jagung (LEAST)

Note: Bedding adalah faktor yang dapat dikendalikan

 Stres
Periode aklimatisasi setelah pengiriman mempengaruhi tingkat stres hewan
uji

Stres dapat diturunkan dengan:

 Pemasok/pengirim menyediakan makanan untuk 1-2 minggu
 Penggunaan kandang yang sama

Perilaku agresif bisa terjadi:

sekelompok tikus pada satu kandang yang sama menunjukkan respon
adrenal yang berbanding lurus dengan kepadatan hewan

Penanganan
 penanganan secara teratur dapat mengurangi stres
 penanganan yang benar / metode pengendalian
 melakukan percobaan dengan lemah lembut terhadap hewan uji
 Desain kandang
Desain kandang yang baik yaitu:
Bersih dan kering
ventilasi yang memadai
Akses ke makanan dan air yang mudah
lingkungan aman
Bebas dari bagian tepi yang tajam
Penempatan
kandang di rak
merupakan hal yang
penting
Lokasi rak dapat
mempengaruhi hasil
penelitian

Note: Bedding
Note: ROTASIadalah faktor yang dapat
PENEMPATAN dikendalikan
kandang di rak!
Suhu dan Kelembapan
Tergantung pada:
bahan, konstruksi, dan desain kandang
adanya ventilasi yang memadai atau tidak
Adanya penyaring udara pada bagian atas kandang
Jumlah hewan per kandang
Tingkat aktivitas hewan
Lokasi kandang dalam rak atau ruang (jika statis)
Frekuensi dari penggantian Bedding
jenis Bedding
Kelembapan
 Seiring dengan peningkatan RH, sifat adhesi partikel meningkat
menyebabkan ukuran partikel yang lebih besar
 Seiring dengan penurunan RH, gaya elektrostatik meningkat
 Beberapa panduan merekomendasikan RH antara 30% dan 70%
 Perbedaan RH ditoleransi dengan lebih baik pada temperatur rendah
karena berhubungan dengan mekanisme kehilangan panas dari
kebanyakan hewan

Suhu
 Tikus menyusui yang berada di suhu 35 0C selama enam jam sehari
memproduksi susu lebih sedikit daripada tikus yang berada di suhu
220C
 Reproduksi pada tikus menurun tajam pada suhu 32 0C
 Tikus yang berada di suhu 36 0C pada RH 22% lebih rentan terhadap
virus influenza daripada tikus yang berada di suhu 35.6 0C dan RH
90%
Mekanisme adaptasi untuk mempertahankan suhu tubuh
Perilaku: Jika terjadi penurunan suhu
 Berkerumun
 Meringkuk
 Membangun sarang
 peningkatan aktivitas

Fisiologis: Perubahan kecepatan metabolisme, laju pertumbuhan dan konsumsi

makanan/air.
 Hibernasi atau estivasi
 Menggigil
 Perubahan pembuluh darah perifer
 Piloereksi

Morfologi: perubahan suhu yang sangat besar untuk setidaknya 14-21 hari
 simpanan lemak
 Memancarkan panas
 Lapisan rambut menebal
Ventilasi
Tujuan
 Suplai oksigen yang cukup
 Menghilangkan panas
 melarutkan kontaminasi gas dan partikel
 Menyesuaikan kadar air
 Membuat perbedaan tekanan

Guideline: 10-15 perubahan udara segar/jam

 Penerangan
Tikus albino lebih rentan terhadap retinopati fototoksik
dibandingkan spesies lain

Intensitas dan photoperiodicity dapat mempengaruhi

fisiologi, morfologi, dan perilaku
 aktivitas enzim hepatik
 Metabolisme senyawa
 Tikus diberi dosis tetap hexobarbital:
 Light cycle: tidur lebih lama
 Dark cycle: Kurang tidur

Lingkungan laboratorium MUNGKIN menyebabkan

penyimpangan
 Kebisingan
Pengukuran
Frekuensi = hertz (Hz)
Tekanan = desibel (dB)

Sebagian besar hewan memiliki pendengaran dengan frekuensi suara

yang lebih tinggi dibandingkan dengan manusia
Tikus - pendengaran yang optimal = 40 kHz
mencit - pendengaran yang optimal = 15-20 kHz

Tingkat kebisingan di fasilitas hewan tidak boleh melebihi 85 dB

(guideline untuk manusia)

Tidak ada guideline untuk pembatasan frekuensi

Efek kebisingan di >85 dB, menyebabkan
Kerusakan rambut sensoris dan sel pendukung
Kerusakan mekanis pada tikus pada 160 dB
Nyeri pada tikus pada 140 dB
Kerusakan telinga bagian dalam pada tikus setelah
kontak yang terlalu lama sampai 100 dB
Peningkatan serum kolesterol, pada tikus di 83 dB
Stres audiogenic karena
kebisingan melebihi 83 dB dapat
menyebabkan penurunan
kesuburan pada hewan pengerat
TERIMA KASIH