Tugas Kimia Instrumen:

Spektrofotometer UV-Vis
Hari Suharto 1311820002

Program Studi Magister Pendidikan Kimia

FMIPA Universitas Negeri Jakarta
 Prinsip
Kerja

Spektrofotomet
ri UV-Vis

Analisis Sampel
Prinsip Kerja
Spektrofotometer UV Vis
Untuk sampel yang berupa larutan
perlu diperhatikan beberapa
persyaratan pelarut yang dipakai
antara lain :
 Sampel dilarutkan dengan sempurna
 Pelarut yang dipakai tidak mengandung ikatan
rangkap terkonjugasi
 Tidak terjadi interaksi dengan molekul
senyawa yang dianalisis
 Kemurniannya harus tinggi.
 Analisis Spektrofotometer UV-
Vis
A Caffeinated Boost on UV Spectrophotometry: A Lab for
High School Chemistry or an Introductory University
Kevin Chemistry Course and
Dooling, Kurt Bodenstedt,
Michael F. Z, Page
 Pendahuluan

Prosedur
Kesimpulan
Percobaan
Analisis
Spektrofotomete
r Uv-Vis

Hasil dan Penentuan

Pembahasan Kadar Kafein
Prosedur Percobaan
Alat yang dibutuhkan

Pelat pemanas digital (VWR, VMS-C7)

Neraca analitis (Mettler Toledo, AB54-S / Fakta)

Centrifuge kapasitas besar (Beckman Coulter,

Avanti J-25) dengan rotor (Beckman Coulter, JA-17)

Spektrofotometer UV − Vis (Agilent Teknologi,

8453)

Penggiling kopi
Sampel Kopi

Biji kopi mentah (hijau) diperoleh dari U-Roast-Em dan

Roastmasters.

Biji kopi dibeli dari U-Roast- Em termasuk Supremo Kolombia,

Brasil Sierra Negra, Burundi Bwayi, dan Kosta Rika Central
Valley Café Vida (1 lb jumlah).

Biji kopi dibeli dari Roastmasters termasuk Kenya AA, Bolivia

Fair Trade / Organic, Guatamala SHB San Agustin Las Minas,
Brasil Yellow Bourbon Fazenda Cachoeira, Sumatra
Mandheling Organic, dan Ethiopia Yrgacheffe (jumlah 1 lb).
Kurva Kalibrasi Absorbansi Kafein

Kafein (nomor CAS: 95789-13-2) digunakan untuk membuat kurva

kalibrasi standar untuk menentukan absorptivitas molar.

Larutan stok disiapkan dengan menambahkan 19,4 mg kafein (1,00

mmol) ke labu ukur 100,0 mL dan encerkan tandai dengan air deionisasi
(DI).

Solusi stok digunakan untuk membuat satu set empat standar dengan
konsentrasi sebagai berikut : 2,00 × 10−5 M, 5.00 × 10−5 M, 7,99 × 10−5M,
dan 9,99 × 10−5M. (Standar digunakan untuk menyiapkan kurva kalibrasi
yang diberikan kepada siswa dan ditampilkan dalam data pendukung)
Ekstraksi dan Penentuan Persen Kafein
Sesi 1
Biji kopi mentah dari masing-
masing negara digiling halus
dalam penggiling kopi, diberi
label/ tanda dan disimpan
Setelah satu minggu, ekstrak
disentrifugasi dalam centrifuge
kapasitas besar selama 10 menit
pada 15.000 rpm dan 10°C.
Setelah pemisahan, supernatan
didekantasi ke gelas atau tabung
yang bersih.
Ekstraksi dan Penentuan Persen Kafein
siswa ditempatkan dalam
Sampel kopi tanah dipindahkan
kelompok dan bekerja secara
ke filter kopi yang berada di
kolaboratif untuk menimbang
dalam batang gelas corong
sekitar 1 g kopi
Air DI dipanaskan hingga
Ekstrak dibiarkan dingin,
92−98°C dan dengan lembut
tertutup, dan disimpan untuk
dituangkan di atas bubuk kopi
memungkinkan endapan putih
dalam tiga alikuot 50,0 mL dan
terbentuk. (Diyakini endapan ini
dikumpulkan dalam gelas kimia
adalah protein yang diekstraksi
untuk mengekstrak kafein dari
dari sampel mentah)
dasar.
Sesi 2
Ekstraksi dan Penentuan Persen Kafein

Para siswa mentransfer Setelah pengenceran,

5,00 mL ekstrak, sampel dianalisis
menggunakan pipet, ke menggunakan
labu ukur 100,00 mL spektrofotometer UV-Vis
diencerkan dengan air DI di 272 nm
Sesi 3
Ekstraksi dan Penentuan Persen Kafein

Siswa menghubungkan data Para siswa kemudian

absorbansi dari sampel yang menghitung molaritas
diencerkan ke kafein ekstrak kafein asli dan
tertentu konsentrasi dikonversi nilai ini ke persen
menggunakan hukum Beer massa kafein (b / b) dalam
− Lambert. alasan masing-masing.
Penentuan Persen Air
Selama sesi lab kedua, siswa diberikan
keseluruhan biji kopi mentah) yang
cocok dengan identitas pekarangan
mereka dari sesi lab pertama
DI air dituangkan di atas sampel kopi
untuk menurunkan internal suhu kacang
dan padamkan proses pemanggangan.
Kacang panggang yang didinginkan
ditempatkan di botol berlabel dan
disimpan di lemari asam selama dua
hari.
Pada sesi ketiga para siswa menimbang
ulang biji panggang yang telah kering.
Perbedaan massa pra-panggang dan
pasca-panggang sampel siswa dikaitkan
dengan hilangnya air selama
pembakaran. Perubahan massa
dikonversi menjadi persen air (b / b)
dari sampel yang diberikan.
Setiap kelompok menimbang dan
mentransfer sampel biji utuh memiliki
massa sekitar 2 g (ke tiga angka penting)
ke dalam gelas kimia 50 mL.
para siswa memindahkan biji tersebut
menjadi kopi saringan didiamkan di
dalam batang panjang, corong kaca.
Penentuan Persen Air
Setelah mencatat massa biji mentah,
para siswa menempatkan sampel dalam
oven lab dengan suhu antara 190 dan
200° C
Sampel dari seluruh kelas ditempatkan
di seluruh oven dan panggang secara
bersamaan. Sedangkan kacang utuh
sampel dipanggang, para siswa mulai
mengencerkan kafein ekstrak yang
dijelaskan di atas. Mengikuti waktu
panggang (10 menit di atas 190° C)
Perhitungan
Selama pelaksanaan pelajaran siswa diberi daya serap kurva kalibrasi
kafein murni dan nilai persen yang diketahui kafein dan persentase air
dalam sampel kopi (Tabel 1 ).
Siswa memperoleh jumlah energi yang diserap setelah iradiasi sampel ekstrak encer dalam spektrofotometri UV−Vis

Jumlah cahaya yang ditransmisikan melalui sampel individu dikonversi menjadi absorbansi oleh persamaan A = log ( I 0 / I ), dimana
I 0 adalah intensitas cahaya awal dan I intensitas cahaya yang ditransmisikan

Kuantitas energi diserap adalah fenomena absorptivitas molar (ε) dari kafein. Nilai ini dihitung dari kemiringan kurva kalibrasi
daya serap cahaya yang diberikan kesiswa, menggunakan serangkaian solusi standar.

Terakhir, diperoleh nilai absorbansi dari ekstrak kafein encer itu dikonversi ke konsentrasi molar menggunakan hukum
Beer−Lambert: A = ε bc , (A = nilai absorbansi, ε = molar absorptivitas larutan, b = panjang lintasan sel kuvet (yaitu, jarak yang
ditempuh cahaya melalui sampel), dan c = konsentrasi larutan).

Begitu konsentrasi ekstrak encer diketahui, molaritas minuman asli ditentukan menggunakan rumus pengenceran M 1 V 1 = M 2 V
2

Molaritas dikonversi menjadi massa kafein (dalam gram) dan dibandingkan dengan massa bubuk kopi yang digunakan dalam ekstraksi,
menghasilkan persen kafein secara massal (b / b)
Hasil dan Pembahasan
 Setelah meninjau data siswa,
Diketahui bahwa persentase
dihitung persen kafein dalam
kafein (b / b) dalam berbagai
sampel kopi berkisar 1,18-
sampel kopi adalah sedikit
2,15% dan persen air berkisar
lebih besar dari 1%
antara 3,51 hingga 11,67%.

Ini menunjukkan siswa

sekolah menengah
memperoleh hasil yang
serupa dengan yang
diharapkan dan diindikasikan
siswa sekolah menengah atas
Hasil dan Pembahasan siap untuk melakukan
eksplorasi
 Kesimpulan
Pada percobaan ini siswa dapat menentukan
persen kafein dalam sampel kopi mentah
menggunakan analisis spektrofotometri UV-Vis
berkisar 1,14 % sampai 1,80 % (b/b) dengan
persen kehilangan air 3,27% hingga 10,8 % (b/b)