Kultur Jaringan

Outline Mata Kuliah Kultur Jaringan

• Tutorial
• Praktikum
• Tugas Terstruktur
• Penilaian: Ujian Mid-Final
Solusi apa yang anda pikirkan jika ingin tanam pisang pada lahan sekian ratus hektar
(Umur, Jenis dan Jumlah SAMA)
Solusi apa yang anda pikirkan dalam melestarikan durian
(biji kisut, daging besar)
Solusi apa yang anda pikirkan untuk membebaskan tanaman
kedelai dari serangan virus

KEDELAI TERSERANG
VIRUS
 KULTUR
JARINGAN TUMBUHAN
 Pengertian Kultur Jaringan
• Teknik yang dilakukan untuk menumbuhkan
sel, jaringan, organ atau organisme utuh
(whole organism) secara in vitro pada medium
buatan/artifisial pada kondisi aseptis dan
terkontrol
 Prinsip Utama Kultur Jaringan
• Totipotensi (autonomus)
• Dedifferensiasi
 Jenis Kultur Jaringan
• Kultur Jaringan Tumbuhan
• Kultur Jaringan Hewan
 MIKROPROPAGASI

• Pengertian: penggandaan massa dari tanaman

pertanian, hortikultura, tanaman obat melalui
teknik kultur jaringan
• Propagasi vegetatif secara cepat pada beberapa
tanaman pertanian dan hortikultur
• Menggantikan teknik propagasi konvensional
 Clone/Klon

• Organisme yang secara genetik/genom sama

 Keuntungan Kultur Jaringan

• Penggandaan tanaman sangat sulit jika

dilakukan dgn cara pemotongan atau secara
tradisional lainnya
• Produksi tanaman dalam jumlah besar dengan
sifat yang sama lebih cepat
• Memelihara varietas tanaman dari perubahan
genetic
• Produksi senyawa tanpa harus
membudidayakan tanaman induknya
Bagian Tanaman yang dapat di KJT
Kultur Protoplas
Medium (Nutrien, Hara)
• Medium KJ merupakan tempat
tersedianya kebutuhan nutrisi untuk
pertumbuhan eksplan.
• Medium dapat berwujud padat, cair atau
semi padat.
Penyiapan Media
Larutan A (10X) Larutan C
Misalnya dibuat dlm 100 mL Misalnya dibuat dlm 100 mL
Artinya utk buat 1 L, maka diambil Larutan B
10 mL Misalnya dibuat dlm 100 mL
 10 mL

10 mL

X mL

Setelah semua digabung, lakukan

chek pH, lalu tambahkan agar
Media dimasukkan ke dalam wadah
Model Wadah KJ
 Pembuatan media KJ Berbahan Kimia Tekhnis

• Gunakan bahan kimia dengan tingkat kemurnian rendah

• Jika tidak ada sama sekali bahan, maka gunakan ekstrak tanah
subur, agar kue sebagai pemadat
• Bisa dicoba gunakan minuman tonik
Tahap Sterilisasi Eksplan
Tahapan Penyiapan Eksplan
Kontaminasi
Ruang KJT
 Kultur Kalus
• Jika sel membelah menjadi massa yang tidak
terdiferensiasi disebut kalus. Kalus dapat diproduksi
dari semua bagian tanaman (batang, daun, meristem,
dsb)
• Kalus dapat diinisiasi menjadi berbagai bentuk
sehingga menjadi tanaman kecil yang utuh (planlet)
Kultur Sel (Cell Culture)
 Embriogenesis
• Embriogenesis adalah proses terbentuknya embrio
somatik. Embrio somatik adalah embrio yang bukan
berasal dari zigot, tetapi berasal dari sel biasa dari
jaringan tanaman.
• Jika embrio terbentuk dari kultur anther atau mikrospora,
maka prosesnya disebut: androgenesis
• Norstog (1979) menyimpulkan bahwa pada proses
embriogenesis somatik selalu didahului oleh
pembentukan kumpulan sel yang belum terdiferensiasi,
seperti protocorm dan dari protocorm kemudian
terbentuk proembryonic bud
Pembentukan Protocorm
Kultur Tunas
 Kultur Antera
• Pollen/antera (kepala sari) ditumbuhkan
pada media disebut kultur antera.
• Digunakan untuk produksi tanaman
haploid (tumbuhan kelamin jantan
haploid)
 Biji Sintesis
• Embriogenesis merupakan hal dasar untuk
berbagai teknologi pada bidang biotek. Embrio
somatik digunakan untuk mengahsilkan biji
sintetik/tiruan. Na Alginat dan Calsium clorida
mengcoating
Cara Membuat Biji Sintetik

Calsium Klorida

Natrium Alginat
Plantlet
Cara Mengkultur Pisang
Cara Mempersiapkan Tunas Pisang

Tunas Batang Tunas Pisang Muda

Proses Pertumbuhan Kultur Pisang
Tahapan Pembentukan Tunas Pisang
Contoh planlet yang sudah diaklimatisasi
Kultur Pucuk Aglonema
Aplikasi KJ pada Rekayasa Genetik
Tanaman
Penggunaan protein racun atau bakteri BT secara langsung pada tanaman
butuh biaya besar dan tenaga yang tidak efesien. Kita Kembali ke Dogma
Sentral Biologi Molekular
Agrobacterium tumefaciens yang sudah disisipi DNA dari BT,
dicampurkan pada protoplast
Pembentukan kalus tumbuhan setelah kontak dengan bakteri
Agrobacterium
Seleksi planlet untuk mengetahui ada tidaknya gen BT pada
planlet
• Planlet yang diketahui memiliki gen asing
digunakan sebagai eksplant untuk diperbanyak
• Planlet yang sudah diperbanyak dilakukan
pengujian untuk memastikan bahwa tanaman
tersebut mampu membentuk protein racun
yang telah disisipkan dalam gen tanaman
melalui perantaraan bakteri AT
 Metabolit Sekunder KJT

• Metabolit primer: fungsi fisiologis yang telah diketahui

• Metabolit sekunder: fungsi fisiologis belum diketahui
sepenuhnya
 Metode In Vitro Untuk Mendapatkan Met. Sekunder

• Permasalahan kesehatan (farmasi) kesulitan bahan

baku, misalnya senyawa dari tanaman karena kadar
“sedikit”
• Pendekatan Bioteknologi “KJT”
• Alasannya: faktor habitat tumbuh, variasi kandungan
metabolit akibat faktor genotipe dan lingkungan
Kunyit dan Temulawak.
Memiliki senyawa kimia kurkumin
(Sintesis senyawa ini telah dipatenkan UGM)
Riset-Riset Kultur Jaringan Terbaru