STUDI TOKSISITAS AKUT DAN

SUBKRONIK TERHADAP EKSTRAK

ETANOL DARI DAUN Ficus deltoidea
PADA MENCIT JANTAN
Kelompok 2 Reguler Sore :
Merry Hetlina Br Tohang ​( 27216591A )
Jihan Izdihar Ayu Salbila ​( 27216752A )
Riska Sepia​ ​( 27216617A )
Audia Fatiskasari​ ​( 27216732A )
 TUJUAN PENELITIAN

• Untuk mengetahui kandungan fitokimia ekstrak etanol Daun Ficus

deltoidea. Mengevaluasi tingkat keamanan dan toksisitas melalui uji
toksisitas akut dan subkronis pada mencit (Mus musculus).
DASAR TEORI
Dalam beberapa tahun terakhir, penggunaan tanaman obat meningkat pesat dan sangat populer. Organisasi
Kesehatan Dunia memperkirakan bahwa 80% penduduk Afrika dan Asia menggunakan obat-obatan tradisional untuk menjaga
kesehatan dan pengobatan penyakit. Penelitian tentang penggunaan obat tradisional termasuk obat herbal meningkat pesat,
baik di negara maju maupun negara berkembang. Indonesia, salah satu negara berkembang, memiliki keanekaragaman hayati
tumbuhan yang tinggi yang banyak digunakan sebagai obat tradisional. Salah satu tumbuhan obat yang telah digunakan oleh
nenek moyang bangsa Indonesia adalah Tabat Barito (Ficus deltoidea Jack.)

F. deltoidea adalah tanaman budidaya abadi yang tingginya jarang melebihi 2 m. Di beberapa negara tanaman ini
dikenal dengan berbagai nama seperti Mas di Malaysia, Barito Barat di Indonesia, Agoluran di Filipina, dan Kangkalibang di
Afrika. Secara umum tumbuhan ini hidup sebagai tumbuhan epifit di hutan dan manfaatnya telah dipelajari secara mendalam
akhir-akhir ini. Setiap bagian tanaman diketahui memiliki manfaat sebagai obat. Buahnya dikunyah untuk meredakan sakit
kepala dan sakit gigi; serbuk akar dan daun tanaman telah digunakan sebagai obat luar untuk luka dan untuk menghilangkan
rematik.
 lanjutan
komposisi senyawa dalam tanaman sangat penting untuk memastikan kualitas, keamanan, dan
kemanjuran yang konsisten. Meskipun F. deltoidea memiliki beberapa potensi farmakologis yang menjanjikan,
belum diuji secara luas untuk kemungkinan efek sampingnya. Belum banyak penelitian yang mengevaluasi
tingkat keamanan dan toksisitasnya. Selanjutnya perlu dilakukan pengujian lebih lanjut pada hewan uji untuk
melihat apakah ada efek toksik untuk menjamin keamanan penggunaannya. Bahan baku herbal dan sintetik
harus dipastikan keamanannya sebelum dapat digunakan sebagai obat. Langkah penting dalam memastikan
keamanan obat adalah melakukan uji toksisitas yang sesuai pada model hewan, dimana uji toksisitas akut dan
subkronis merupakan salah satu uji utama yang harus dilakukan. Oleh karena itu, tujuan dari penelitian ini
adalah untuk mengevaluasi profil toksisitas akut dan paparan berulang selama 28 hari (toksisitas subkronis) dari
ekstrak etanol daun F. deltoidea.
ALAT DAN BAHAN
 ALAT
 Spuit oral
 Jarum suntik
 Tabung Ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA)
 Rotary Evaporator
 Penyaring

 BAHAN
 Tikus jantan
 Ekstrak etanol daun Fius deltoidea
 0,5 % CMC
 Aquadest
 Hand scoon
 Pelarut etanol 96%
CARA KERJA
• Persipan ekstrak Daun segar Ficus deltoidea
dikumpulkan, dibersihkan,
dikeringkan, dan dihaluskan.

Daun yang dihaluskan dimaserasi dengan pelarut

etanol 96% hingga 2x24 jam, lalu disaring.

Filtrat yang diperoleh dikumpulkan, dan penyaringan yang

tersisa direndam Kembali dengan pelarut baru. Proses tersebut
dilakukan hingga warna dari filtrat mejadi jelas.

Ekstrak etanol terkonsentrasi menggunakan rotary evaporator. Selanjutnya

ekstrak disimpan untuk pemeriksaan fitokimia dan tes hewan.
• Uji Toksisitas Akut
10 tikus jantan dibagi menjadi dua
kelompok.
Tikus-tikus itu diamati untuk
kemungkinan toksisitas setiap jam
selama 6 jam pertama. dan terus
diamati setiap hari selama 14 hari.
Kelompok kontrol yang diberi
CMC 0,5% dan kelompok
perlakuan ekstrak dosis 2000 mg /
kg BB, yang dilarutkan dalam
CMC 0,5% secara oral.
Tikus diamati sebagai tanda
toksisitas pada fisiknya dan
perubahan perilaku, juga mencatat
jumlah kematian untuk
menentukan dosis
mematikan 50% (LD).
• Uji Toksisitas Subkronik
25 tikus jantan masing-
masing dibagi menjadi
lima kelompok.
Pada akhir pengobatannya,
hewan percobaan itu berpuasa
semalam. Kemudian dibius dan
diambil darahnya dalam tabung
ethylenediaminetetraacetic acid
(EDTA) untuk analisis
hematologi, sedangkan tabung
tanpa EDTA untuk
analisis biokimia serum.
Ekstrak tersuspensi dalam
0,5% CMC dengan volume
yang diberikan 1 mL / 100 g
BB. Ekstrak campuran
diberikan secara oral setiap
hari selama 28 hari.
Tikus diberi pakan standar
dan air ad libitum. Berat dari
tikus diukur
seminggu sekali. Tanda-
tanda toksisitas dan kematian
diamati setiap hari.
kelompok kontrol diberi
CMC 0,5%.
sedangkan Perlakuan
kelompok diberi perlakuan
dengan berbagai dosis
ekstrak 125, 250, 500, dan
1000 mg/kg BB, masing-
masing.
• Hematologi dan Biokimia Serum analisis
Analisis hematologi darah seperti sel
darah putih, sel darah merah,
hemoglobin, hematokrit (Ht),
Analisis biokimia serum, darah
konsentrasi hemoglobin sel darah
tanpa EDTA, disentrifugasi
rata-rata (KIA) , KIA, volume sel
pada 3000 rpm
rata-rata (MCV), dan trombosit
selama 10 menit.
dilakukan sesuai dengan panduan
analisis untuk penganalisis darah
otomatis.

Dihasilkan serum dianalisis untuk alanin

Semua hewan kemudian
dikorbankan untuk menentukan
beratnya (gr) dan berat relatif (%)
organ seperti jantung, paru-paru,
limpa, lambung, hati,
testis, dan ginjal.
transaminase (ALT), aspartat transaminase
(AST), alkalin fosfatase (ALP), gamma-
glutamil transferase, bilirubin, total protein,
albumin, kreatinin, urea, glukosa, kolesterol,
trigliserida (TG), dan laktat dehidrogenase
(LDH) menggunakan penganalisis biokimia
otomatis.
HASIL PENELITIAN
• Skrinning Fitokimia
• Analisis fitokimia ekstrak etanol daun F.deltoidea positif mengandung
alkoloid, fenolik, flavonoid, kumarin dan steroid. Namun metabolit
sekunder lainnya seperti saponin, karotenoid, dan tanin tidak
ditemukan. Secara kuantitatif, total fenolat dan flavonoid ekstrak
etanol daun F. deltoidea adalah 107,6583211 µg GA/ mg dan
175,9103641 pg CE/ mg. Ekstrak tersebut juga memiliki aktivitas
antioksidan dengan nilai IC sebesar 103,7484 µg/ mL yang tergolong
kategori sedang.
 Uji toksisitas akut
• Tabel 1 Analisis bobot badan mencit yang diberi ekstrak etanol daun E deltoidea secara
oral selama 14 hari.

Penelitian ini menunjukkan bahwa pemberian ekstrak etanol daun F deltoidea dengan
dosis 2000 mg/ kg BB tidak mempengaruhi BB mencit dan tidak ada tanda- tanda gejala
keracunan atau perubahan perilaku seperti perilaku tidak sehat atau abnormal dan
kematian dalam waktu 72 jam-14 hari setelah pemberian ekstrak.
Tabel 2. Bobot (g) dan bobot relatif (%) organ mencit jantan yang diberi
ekstrak etanol daun F deltoidea secara oral selama 14 hari.
 • hasil indeks jantung, paru, limpa, lambung, hati,
testis, dan ginjal menunjukkan bahwa tidak ada
Keteranga pembesaran organ pada masing- masing mencit
n table 2 dengan dosis 2000 mg/ kg BB kecuali pada
bobot relatif testis kiri, sedangkan berat testis
kanan menurun.
 Toksisitas subkronis
• Tabel 3 Berat Badan dan Pertambahan Berat Badan Mencit yang Diperlakukan
Secara Oral Selama 28 Hari Dengan Ekstrak Etanol Daun Deltoidea.

BB pada mencit jantan tidak menunjukkan perbedaan hasil yang signifikan antara
kelompok perlakuan dan kelompok kontrol selama masa pengobatan. Sedangkan
bobot relatif juga tidak menunjukkan perbedaan yang nyata, kecuali pada dosis 125
dan 1000 mg/ kg BB yang menunjukkan penurunan persentase bobot relatif.
 Tabel 4 Bobot organ dan bobot organ relatif mencit jantan yang
diberi ekstrak etanol daun F deltoideo secara oral sebanyak 28 hari

Ket : Tidak terdapat perbedaan yang signifikan (p>0,05) dari semua berat organ (g) dan organ relatif antara
kelompok perlakuan dan kelompok kontrol. termasuk jantung, paru- paru, hati, limpa, lambung. ginjal, dan
testis pada setiap tingkat dosis
 Analisis Hematologi dan biokimia darah
• Tabel 5 Parameter hematologi mencit jantan yang diberi ekstrak
etanol daun Ficus deltoidea secara oral selama 28 hari
Ket Tabel 5
:

Hasil penelitian menunjukkan bahwa pemberian ekstrak selama 28 hari periode

percobaan, tidak menyebabkan perubahan yang bermakna secara statistik (p >
0,05) pada parameter hematologi dibandingkan kontrol kecuali dosis 250 mg/
kg BB. Ht ditemukan meningkat secara signifikan, sedangkan MCV menurun
dibandingkan dengan kontrol.
 Tabel 6. Parameter biokimia serum mencit jantan yang diberi
ekstrak etanol daun F deltoides secara oral selama 28 hari.

Ket : Pemberian ekstrak etanol daun F. deltoidea secara oral selama 28 hari tidak menyebabkan perubahan signifikan
(p > 0,05) pada parameter biokimia serum dibandingkan dengan kontrol. Namun, terdapat peningkatan yang
signifikan pada AST dan ALP pada serum mencit yang diberi dosis 1000 mg/kg BB
 PEMBAHASAN
• Tanaman ini telah lama digunakan untuk kebutuhan manusia dalam pembuatan makanan dan jamu. Biasanya diterima sebagai senyawa yang
sangat aman untuk dikonsumsi dan mengandung beberapa metabolit sekunder penting. Meskipun senyawa bioaktif dari tanaman termasuk
flavonoid banyak digunakan, namun penggunaan tanaman itu sendiri dapat menimbulkan efek toksisitas yang tidak terduga. Toksisitas
mungkin berasal dari beberapa senyawa tanaman yang menyebabkan hematoloxic dan hepatotoksik, yang dapat memicu insersi dan
karsinogenesis

• Uji toksisitas akut pada hewan dapat digunakan untuk mendapatkan persyaratan klasifikasi bahaya nilai LD. Toksisitas akut biasanya
menjadi langkah awal yang harus dilakukan dan dapat memberikan informasi awal tentang aksi toksik suatu zat, menentukan dese pada
hewan. Hal tersebut menjadi dasar dilakukannya penilaian toksisitas akut ekstrak etanol daun F deltoidea pada mencit. Secara umum,
perubahan abnormal pada perilaku umum dan BB telah digunakan sebagai parameter kritis untuk evaluasi objektif dari efek zat uji pada
hewan percobaan karena perubahan ini seringkali merupakan tanda pertama dari toksisitas

• Temuan ini menyatakan bahwa tikus yang diobati dengan ekstrak etanol daun F deltoides dalam toksisitas akut dan subkronis tidak
menyebabkan kematian atau bahkan tampaknya tidak memiliki perubahan abnormal pada perilaku umum, variasi berat yang signifikan
terkait dengan pengobatan ekstrak. atau asupan makanan/air sebagai tanda keracunan kritis pada hewan uji. Karena itu. Dapat diasumsikan
bahwa LD ekstrak adalah >2000 mg/kg, yang menunjukkan bahwa ekstrak umumnya dianggap tidak beracun pada konsumsi akut,
berdasarkan metode klasifikasi toksisitas akut. Selain itu, hasil evaluasi saat ini mengenai LD mengungkapkan bahwa dosis oral tunggal
(2000 mg/kg BB) tidak menyebabkan kematian dalam 72 jam dan selama 14 hari pengamatan. Hasil ini menunjukkan bahwa paparan akut
terhadap ekstrak etanol daun F deltoiden tidak menyebabkan efek toksik, dan nilai LD, dianggap >2000 mg/kg BB pada tikus yang hamless
dalam dosis akut.
 lanjutan
• elama tes subkronis ini, semua hewan aktif dan merespons rangsangan secara positif. Tidak ada kematian, perubahan perilaku dan tanda-
tanda klinis efek toksik lokal atau sistemik diamati Selain kematian sebagai tanda toksisitas yang jelas, ada variabel lain yang mungkin
menunjukkan efek samping seperti BB selama pengobatan klinis dan tanda-tanda toksisitas.

• Hasil saat ini dalam studi toksisitas subkronis mengungkapkan bahwa BW tidak menunjukkan perubahan signifikan setelah pemberian
ekstrak selama 28 hari dibandingkan dengan kelompok kontrol. Sementara itu, pertambahan berat badan relatif juga tidak menunjukkan
perbedaan yang nyata, kecuali pada mencit yang diberi perlakuan dengan ekstrak etanolik daun F deltoidea dosis 125 dan 1000 mg/kgBB
didapatkan pertambahan berat badan relatif yang nyata. Temuan ini didukung oleh penelitian sebelumnya menyatakan bahwa ekstrak
metanol daun F. deltoidea dengan dosis 200 mg/kg tidak menyebabkan perubahan abnormal pada penyakit fiver dan fungsi ginjal pada
penelitian toksisitas subkronis [39]. Hal ini kemungkinan besar disebabkan oleh beberapa faktor eksternal yang mempengaruhi kelompok ini
khususnya seperti perebutan dominasi (perebutan hierarki sosial, ciri-ciri binatang jantan). atau pola makan yang monoton yang dapat
menyebabkan penurunan asupan pakan. Selain itu, sebagian besar berat organ relatif tampaknya tidak terpengaruh oleh perlakuan ekstrak
kecuali pada berat relatif hati ekstrak pada dosis 125 dan 500 mg/kg BB yang menurun dibandingkan dengan kontrol. Perbedaan berat organ
dalam mungkin disebabkan oleh variasi ukuran organ dalam dan/atau BB hewan.

• Hasil saat ini menunjukkan bahwa terjadi peningkatan Ht tetapi terjadi penurunan MCV mencit yang diberi dosis 250 mg/kg BB. Kondisi ini
sepertinya tidak relevan karena berada dalam rentang fisiologis normal [43]. Perubahan ini tidak tergantung dosis karena hanya diamati pada
kelompok yang diberi perlakuan dengan dosis 250 mg/kg BB, sedangkan pada dosis yang lebih tinggi tidak ditemukan.

• data ini menunjukkan bahwa tidak ada hubungan dosis-respons yang jelas, dan semua fluktuasi kecil dalam parameter ini berada dalam
kisaran normal laboratorium pengujian. Oleh karena itu, variasi ini tidak ada relevansinya dengan signifikansi klinis atau efek toksik dari
ekstrak tetapi lebih pada variabilitas fisiologis dari hewan itu sendiri. Selain itu, efeknya tidak bergantung pada dosis, dan tidak disertai
tanda atau gejala klinis
KESIMPULAN PENELITIAN

• Penelitian ini menunjukkan bahwa oral akut dan subkronik pemberian

ekstrak etanol Daun Ficus deltoidea untuk tikus jantan tidak
menimbulkan gejala klinis toksisitas atau menyebabkan kematian. LD
dari ekstrak etanol Daun Ficus deltoidea untuk tikus > 2000 mg/kg
dianggap praktis tidak beracun berdasarkan BW, BW relatif,
hematologi, dan analisis biokimia darah.