Pembuatan Media

Persiapan Membuat Larutan Dalam Satuan (Unit)

Konsentrasi dari satu substrat tertentu dalam media dapat
digambarkan dalam variasi satuan (unit) adalah sebagai
berikut ini:
Satuan Berat digambarkan sebagai milligram per liter (mg/l
atau dapat ditulis sebagai mgL-1.
10-6 = 1,0 mg/l atau 1 part per million (ppm) atau seper juta
bagian.
10-7 = 0,1 mg/l
Satuan
Konsentrasi.
-9
10
0,001
mg/l(M)
atau
g/lsenyawa sama dengan massa molekul
Satu=molar
larutan
suatu
dalam gram per liter.
1 molar (M) = massa molekul dalam g/l.
1 mM
= massa molekul dalam mg/l atau 10-3 M.
1 M
= massa molekul dalam g/l atau 10-6 M atau 10-3 mM.

Konversi dari mili molar (mM) ke mg/l.

Sebagai contoh, massa molekul auxin : 2,4 D =
221,0.
1 M larutan 2,4 D berisi 221,0 g/l.
1 mM larutan 2,4 D berisi 0,221 g/l = 221,0 mg/l
1 M larutan 2,4 D berisi 0,000221 g/l = 0,221
mg/l

Konversi dari mg/l ke mili molar (mM)

Massa molekul CaCl2. 2H2O = 40.08 + 2 x 35.453 + 4 x 1.008 + 2 x 16 = 147.018
Massa atom: Ca = 40.08 ; Cl = 35..453 ; H = 1.008; O = 16
Jika 440 mg/l CaCl2. 2H2O akan di konversikan ke mM, maka:
Jumlah mg dari CaCl2. 2H2O
Jumlah mM CaCl2. 2H2O

=
Massa molekul dari CaCl2. 2H2O
440

=
147.018
=

2.99 mM

Jadi 440 mg/l CaCl2. 2H2O = 2.99 mM.

Rumus Pengenceran
V1.M1 = V2.M2
Dimana:
V1 = volume sebelum pengenceran
V2 = volume setelah pengenceran
M1 = konsentrasi sebelum pengenceran
M2 = konsentrasi setelah pengenceran
Contoh Soal :
Di pasaran alkohol yang tersedia memiliki konsntrasi 96%. Jika kita
memerlukan alkohol 70%, maka berapa volume aquades yang harus
ditambahkan?
V1.M1 = V2.M2
1000 x (0.96) = V2. (0.70)
960
V2 =
0.70
= 1371 ml
Jadi aquadest yang ditambahkan adalah 1371 ml - 1000 ml = 371 ml
Berapa volume aquades yang ditambahkan untuk membuat formalin
0.1% dari formalin 37% ?

Kenormalan (N)
Grek

= mol x jumlah H+ atau OH-

Contoh : 1 mol HCl

= 1 grek
2 mol H2SO4
= 4 grek
2 mol NaOH
= 2 grek
3 mol Ca(OH)2
= 6 grek
Jika sudah memahami hubungan mol dengan grek, maka
kenormalan didefinisikan sebagai jumlah grek zat terlarut dalam tiap
liter larutan atau jumlah mgrek zat terlarut dalam tiap mi liter larutan
grek
mgrek
N =
=
liter
ml
Berapa gram NaOH yang dibutuhkan untuk membuat larutan 1 N
NaOH
1 grek NaOH = 1 mol NaOH
gram
=
=
Berat atom

x
= 40 gram
40

No

Pembuatan Larutan Stock Media MS Untuk Skala

Besar
Larutan
stok

Persenyawaan

Berat
persenyawaan
(mg)

Pelarut
Aquadest
(ml)

Konsentrasi
Volume
larutan stok larutan stok
(kali)
untuk 1 liter
media (ml)
50
20

NH4NO3

83500

1000

KNO3

95000

1000

50

20

CaCl2.H2O

44000

1000

100

10

1000

100

10

F
(senyawa
mi kro)

500
500
1000

200

(37000+
17000)
(5570+
7450)
(3380.0+
1720.0+
1240.0+
1240.0+
50.0+
5.0+
5.0)

200

MgS4.H2O
KH2PO4
FeSO4.7H2O
Na2EDTA.
1. MnSO4.H2O
2. ZnSO4.H2O
3. H3BO3
4. KI
5. Na2MoO4.H2O
6. CoCl.6H2O
7. CuSO4.5H2O

Membuat Media :
o Pembuatan larutan stok tujuan : efisiensi
waktu dan tenaga : menimbang bahan yang
berulangulang setiap kali membuat media.
Selain itu, kadang-kadang timbangan yang
dibutuhkan untuk menimbang jumlah kecil
tidak tersedia dalam laboratorium

 Larutan stok dibedakan berdasarkan

pengelompokan dalam : Stok makro, stok
mikro, stok Fe, stok vitamin dan stok hormone
Stok hormone dan vitamin dapat disimpan
antara 2-4 minggu, sedangkan stok hara dapat
disimpan 4-8 minggu.
Setelah larutan stok tersedia, maka
pembuatan media selanjutnya hanya dengan
teknik pengenceran dan pencampuran saja.

larutan stock (lanjutan)

Hal yang perlu diperhatikan dalam pembuatan
larutan stok adalah penyimpanan (daya simpan)
larutan
Larutan yang sudah mengalami pengendapan, tidak
dapat digunakan lagi. Untuk menghindari
pengendapan larutan stok Mengatur kepekatan
larutan atau menghidari pencampuran terutama
untuk unsur hara makro.
Kondisi simpan juga diperhatikan, karena ada
beberapa bahan yang tidak tahan dalam suhu tinggi
atau cahaya.

Larutan stock (lanjutan)

Larutan stok kadang-kadang ditumbuhi
mikroorganisme Menjaga kebersihan
wadah dan tempat penyimpanan.
Cara Pembuatan Larutan Stock
Menimbang persenyawaan yang tertera dalam
kolom tersebut misalnya (NH4NO3)
sebanyak yang tertera dalam kolom berat
senyawa misalnya (83500 mg).

Cara Pembuatan larutan Stock (lanjutan)

Bahan yang telah ditimbang Erlenmeyer
atau gelas piala bersih yang sudah berisi
aquadest atau air bebas ion kira-kira 500 ml
lalu diaduk hingga larut merata. Bila jenis
senyawanya banyak, masukkan satu senyawa
diaduk hingga larut baru dimasukkan senyawa
yang lain, begitu untuk selanjutnya).
Larutan, kemudian dipindahkan ke dalam
labu ukur bersih volume 1 liter. Kemudian
ditambahkan aquadest hingga volume larutan
tepat pada 1 liter.

Pembuatan Larutan Stock (Lanjutan)

Khusus untuk pembuatan larutan stok E ada

sedikit perbedaan karena Fe dan Ca yang sulit
larut. Untuk melarutkannya ada teknik khusus,
yaitu sebagai berikut:
Timbang 5570 mg FeSO4.7H2O dan 7450 mg
Na2EDTA.

Pembuatan Larutan Stock (Lanjutan)

Kedua bahan tersebut dilarutkan secara

terpisah dalam kira-kira 250 ml aquadest,
gelas piala yang digunakan volumenya 1 liter.
Larutan Na2EDTA dipanaskan hingga 40-60o C
selama beberapa menit, kemudian tambahkan
larutan FeSO4.7H2O dan diaduk hingga
tercampur rata. Bila masih sulit larut, larutan
ditambah HCl 1 N setetes demi setetes hingga
larutan homogen. Biarkan hingga suhu
kembali ke suhu kamar.

 Setelah dingin, masukkan larutan campuran

itu ke dalam labu ukur, tambahkan aquadest
hingga volume mencapai 1 liter.
Setelah volume tepat 1 liter, pindahkan ke
dalam erlenmeyer/botol reagen 1 liter yang
bersih dan seluruh sisinya sudah tertutup
alumunium foil.
Larutan stok E dapat disimpan dalam kondisi
suhu kamar atau di dalam lemari es. Karena
larutan Fe ini peka terhadap cahaya, maka
perlu diselubungi alumunium foil pada
Erlenmeyer/botol penyimpannya.

Skema Pembuatan Media MS

Stok Makro

Stok Vitamin

Stok Mikro
600 ml

Stok Besi

Stok Hormon/ZPT

Volume dicukupkan menjadi 900 ml dengan menambahkan aquades

Larutan ditetapkan pHnya yaitu berkisar 5.6 5.8 jika pH larutan media lebih kecil dari pH yang
ditentukan, diberikan beberapa tetes larutan NaOH/KOH 1 N dan jika pH larutan media lebih
besar dari pH yang ditentukan diberikan beberapa tetes larutan HCl 1 N

Menambahkan gula 20 30 g/l, setelah itu volume dicukupkan menjadi 1000 ml

dengan menambahkan aquades

Menambahkan agar sebanyak 6 - 10 g/l, kemudian media dipanaskan

hingga agar larut. Setelah itu media didistibusikan ke botol-botol kultur