Uji Sterilitas dan Efektifitas Media

Cair
Prinsip:

Media adalah substrat dimana

mikroorganisme dapat tumbuh yang
disesuaikan dengan lingkungan hidupnya.
Sedangkan substrat adalah bahan
makanan penyubur pH tertentu, vitamin
dan mineral.

Tujuan:

Membuat media cair dengan

mengujinya dengan uji sterilitas dan uji
efektifitas untuk mengetahui apakah media
layak digunkan.

Alat dan Bahan

Alat :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.

Erlenmeyer
Tabung Reaksi
Piala gelas 400 mL
Pembakar Spirtus
Tabung ulir dan tabung durham
Inkubator
Bulb
Rak Tabung
Koran
Tali Kasur
Baki
Spatula
Neraca Kasar
Gelas ukur 50 mL
Pipet serologi 10 mL
Autoklaf

Bahan :
1.
2.
3.
4.

pH universal
Air Suling
Media Cair TSB (Tryptic Soy Broth)
Alkohol 70 %

Pembuatan Media Cair TSB

50
ml

Ditimbang
1,5 gr TSB

Dipipet 5 ml

Dituang ke
dalam tabung
ulir

Dilarutkan dengan
air dingin 50 ml

Dihomogenkan

Dimasukkan
kedalam piala gelas
dan di bungkus
koran

Cek pH larutan

Disterilisasi
basah dengan
autoklaf 121oc,
15 psi, 15 menit

Uji Sterilitas media cair

Media
Tabun
cair
g Ulir Pipet
Serolog
i

Dipipet
5mL
media cair

Dimasukkan
kedalam piala gelas
dan di bungkus
koran

Diinkubasi
dalam
inkubator
37oc, 24 jam

Disterilisasi
basah dengan
autoklaf 121oc,
15 psi, 15 menit

Dituang ke
dalam tabung
ulir

Didinginkan

Uji Efektivitas media

cair

Media
Tabun
cair
g Ulir Pipet
Serolog
i

Suspensi
bakteri 24
jam

Dimasukkan
kedalam gelas ukur
dan di bungkus
koran

Dipipet 1 ml
suspensi
Dituang kan ke dalam
bakteri
tabung ulir yang telah
berisi media cair

Dipipet
5mL
media cair

Disterilisasi
basah dengan
autoklaf 121oc,
15 psi, 15 menit

Dimasukkan
kedalam piala gelas
dan di bungkus
koran

Dituang ke
dalam tabung
ulir
Cek pH larutan

Didinginkan

Diinkubasi dalam
inkubator 37oc, 24
jam

Hasil Pengamatan
Nama
Media

LOT

Jumlah
Bahan

Kadaluar
sa

p
H

Tes

Hasil

TSB

82339
29

1,5 gr/50mL

31-07-2012

Uji
Sterilitas

(-) tidak ditumbuhi

bakteri

TSB

82339
29

1,5 gr/50mL

31-07-2013

Uji
Efektifitas

(+) ditumbuhi bakteri

dan berwarna keruh

Uji Sterilitas

Uji Efektifitas

Uji Sterilitas dan Efektifitas Media

Padat
Prinsip:

Media adalah substrat dimana

mikroorganisme dapat tumbuh yang
disesuaikan dengan lingkungan hidupnya.
Sedangkan substrat adalah bahan
makanan penyubur pH tertentu, vitamin
dan mineral.

Tujuan:

Membuat media padat dengan

mengujinya dengan uji sterilitas dan uji
efektifitas untuk mengetahui apakah media
layak digunkan.

Alat dan Bahan

Alat
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.

Erlenmeyer
Tabung Reaksi
Piala gelas 400 mL
Pembakar Spirtus
Cawan Petri
Tabung ulir dan tabung durham
Inkubator
Rak Tabung
Koran
Tali Kasur
Baki
Spatula
Neraca Kasar
Gelas ukur 50 mL
Autoklaf
Pengaduk

Bahan :
1.
2.
3.
4.
5.

pH universal
Air Suling Panas
Media Padat PCA (Plate Count Agar)
Alkohol 70 %
Larutan Fisiologi

Pembuatan Media Padat PCA

50
ml

Ditimbang
1,18 gr PCA

Kepala erlenmeyer di
bunkus dengan koran

Dilarutkan dengan
air panas 50 ml

Disterilisasi
basah dengan
autoklaf 121oc,
15 psi, 15 menit

Dihomogenkan

Cek pH larutan

Uji steriltas Media Padat

50
ml

Ditimbang
1,18 gr PCA

Kepala erlenmeyer di
bunkus dengan koran

Dilarutkan dengan
air panas 50 ml

Disterilisasi
basah dengan
autoklaf 121oc,
15 psi, 15 menit

Dihomogenkan

Cek pH larutan

Didinginkan
Media padat dituang ke dalam
cawan petri, hingga 1/3 tinggi
cawan pertri

Ditunggu
hingga media
mengeras
Dihomogenkan

Diinkubasi dalam
inkubator 37oc, 24
jam

Uji Efektivitas Media Padat

50
ml

Ditimbang
1,18 gr PCA

Kepala erlenmeyer di
bunkus dengan koran

Dilarutkan dengan
air panas 50 ml

Disterilisasi
basah dengan
autoklaf 121oc,
15 psi, 15 menit

LF Ose dipijarkan

Suspens
i Bakteri
Dihomogenkan

Dihomogenkan

Cek pH larutan

Didinginkan
Media padat dituang ke dalam
cawan petri, hingga 1/3 tinggi
cawan pertri

Ose di
celupkan ke
dalam LF

Diambil
suspensi
bakteri 1
mata ose

Digoreskan pada
media padat
dengan bentuk zigzag

Diinkubasi dalam
inkubator 37oc, 24
jam

Ditunggu
hingga media
mengeras

Hasil Pengamatan
Nama
Media

LOT

Jumlah
Bahan

Kadaluar
sa

p
H

Tes

Hasil

PCA

934981
4

1,18 gr/50mL

31-10-2014

Uji
Sterilitas

(-) tidak ditumbuhi

bakteri

PCA

934918

1,18 gr/50mL

31-10-2014

Uji
Efektifitas

(+) ditumbuhi bakteri

Uji Sterilitas

Uji Efektifitas

Pembahasan
Uji sterilitas dan uji efektifitas dilakukan pada
media baik media cair maupun media padat. Hal ini
dilakukan untuk mengetahui apakan media layak
digunakan atau tidak. Uji sterilitas dikatakan
berhasil apabila tidak ditumbuhi bakteri, hal ini
bertanda bahwa media tidak terkontaminasi.
Sedangkan Uji efektifitas dikatakn berhasil apabila
media ditumbuhi bakteri, hal ini bertanda bahwa
media layak untuk ditumbuhin atau ditanami
bakteri

Kesimpulan