MEDIA

KELOMPOK 1
MACAM MACAM MEDIa
01 MEDIA NUTRIENT BROTH 04 MEDIA BGLB
BRILLIAN GREEN LACTOSE BROTH

02 MEDIA GULA GULA

03 MEDIA LACTOSE BROTH

01

Nutrient Broth merupakan media umum yang di gunakan untuk

menumbuhkan biakan secara general. NB diformulasikan dengan sumber
karbon dan nitrogen supaya dapat memenuhi kebutuhan nutrisi bakteri
 Alat dan bahan
Alat: Bahan/Reagen
• Gelas ukur - Beef extrack
• Gelas= arloji - laritan NaOH 0,1 N
• Beaker glass - Aquadest
• Tabung reaksi -Larutan HCL 0,1 N
• Neraca Triple Beam Balance - NaCl
• Rak tabung reaksi - Peptone from meat
• Kasa Asbes
• Pipet tetes Pengaduk kaca
• Bunsen / kaki tiga
• pH meter/kertas pH
• Korek api
 Cara pembuatan
1. Larutkan menggunakan aquadest sebanyak 15 ml
2. Panaskan di atas api spirtus sampai bener-bener homogen
3. Angkat beaker glass dan di suam-suam
4. Dilakukan uji pH menggunakan pH media
5. Jika pH sudah sesuai ke tuang campuran media ke setiap tabung dengan volume yang
sama
6. Setelah itu tutup dengan kapas kasa dan beri label
7. Lakukan sterilisasi menggunakan autoklaf pada tekanan 2 atm atau 1,5 Ib pada suhu
121 °C selama 15 menit dengan total keseluruhan 45-60 menit
8. Letakkan pada rak tabung dengan posisi tegak dan Media sudah jadi siap untuk
digunakan
02 Media Gula gula
Media Gula-Gula digunakan dalam pengujian biokimiawi suatu mikroba
khususnya untuk melihat aktifitas fermentasi glukosa oleh suatu mikroba
seperti bakteri dan jamur.

Komposisi Pembuatan Media Gula-Gula

Yaitu :
1. Air Pepton, Aquades
2. Jarutan Fenolphetalin
3. larutan KOH
4. Glukosa, Sukrosa, Laktosa
1. Menimbang peptone water sebanyak 1,53 gr menggunakan neracaanalitis
2. Masukkan dalam erlenmeyer, kemudian larutkan gan aquades
sebanyak 60 ml, homogenkan.
3. Memanaskan diatas hot plate dengan suhu 150 ¹e. Jangan sampai mendidih
4. Menimbang dan memasukan media pada tiap Erlenmeyer yang terdiri dari
glukosa, maltosa, laktosa, masing masing sebanyak 0,02 gr. (di beri label)
5. menambahkan peptone water pada masing-masing erlenmeyer sebanyak 20
ml. Homogenkan.
6. Memasukkan pada tiap-tiap tabung reaksi yang berisi tabung durham.
7. Memasukkan larutan glukosa,maltose,laktosa pada 5 tabung reaksi masing-
masing 4 ml. .
8. Mensterilisasikan dengan memasukkan dalam autoklaf dengan suhu 121'e
selama 15 menit.
Menutup dam membungkus masing masing tabung kemudian disterilkan di
autoclave
9. Mengeluarkan media dari autoclave. Mendinginkan, dan di simpan
03

Media Lactose Broth merupakan media yang digunakan untuk mendeteksi

kehadiran coliform yang memfermentasikan laktosa dalam air, makan, dan produk
susu. Fungsi dari laktosa yaitu sumber karbohidrat untuk bakteri, jika terbentuk
gas maka proses fermentasi telah terjadi
Alat : Bahan :
• Neraca • Media cair Example: Lactose Broth
• Erlenmeyer • Air suling
• Spatula • Kertas pH universal
• Gelas ukur 50 mL • Koran
• Pipet serologi 10 mL
• Tabung Ulir
• Piala Gelas 400 mL
• Autoklaf
1. Timbang media caIr sebanyak 0,65 gram dalam wadah erlenmeyer 100 mL yang sudah
berlabel
2. Dilarutkan dengan air culing sebanyak 50 mL
3. Cek pH, bila terlalu basa tambahkan HCI dan bila terlalu asam tambahkan larutan NaOH
4 Dipipet media cair kedalam tabung ulir berdurham yang sudah berlabel lengkap sebanyak 5
mL
5. Tabung ulir berdurham disimpan pada piala gelas kemudian ditutup dengan koran ikat
dengan tali kasur
6. diautoklaf dengan tekanan 15 Psi (Pound Square inch), suhu 121°C selama 15 menit
04

Media brillian green lactose merupakan media khusus yang digunakan

untuk pemeriksaan, dan gunakan untuk mengetahui perkiraan jumlah
bakteri coli dan caliform dalam 100ml sampel

Komposisi media BGLB :

• Pepton 10g
• Brilliant 0,0133
• Oxgall 20g
• Aquadest 1000mL
05
Peptone water adalah suatu medium yang diformulasikan oleh Shred, Devoan
dan Lee. Peptone water digunakan untuk menumbuhkan mikroorganisme untuk
mentukan tipe pola fermentasi karbohidrat dari mikroorgnisme nof-fastidious.
Komposisi Peptone Water (Oxoid) :
• Pepton -- 10 gram
• Natrium klorida -- 5 gram
• dinatrium fosfat -- 3,5 gram
• Kalium Dihidrogen Fosfat -- 1,5 gram
• Air sulingan -- 1 liter
• pH akhir -- 7,2 ± 0,2 @ 25 °C
1. Formula peptone water adalah 20 gram/liter akuades
2. membuat 1 liter peptone water diperlukan 20g serbuk peptone water.
3. Timbang peptone water menggunanakan timbangan analitik agar lebih presisi.
4. Larutkan 20 gram medium ke 1 liter dipanaskan pada suhu 80 °C sambil diaduk
menggunakan alat hot plate dan magnetic stirrer . Pastikan medium larut dengan sempurna
5. Atur pH medium hingga mencapai 7,2 ± 0,2 saat suhu mencapai 25°C.
6. media pH dapat menggunakan alat pH meter agar hasilnya lebih akurat.
7. Jika saat awal pengukuran, medium memiliki pH 6,2 maka dapat ditambah larutan HCL
sedikit demi sedikit. Dan sebaliknya apabila pH medium lebih rendah dari 6,2 dapat
ditambah larutan NaOH.
8. Peptone water yang telah dimasukkan ke dalam tabung reaksi sesuai kebutuhan dan
tutup dengan tidak rapat/renggang.
9. Sterilisasi medium menggunakan autoklaf pada suhu 121°C 10. Setelah disterilisasi dan
medium sudah agak dingin medium dapat digunakan
THANK’S