PRAKTIKUM 1

Mata Kuliah : Media Reagensia

Dosen Pengajar :1. Suliati S.pd, S.si M.kes

2. Tacik Idayati, SST

Tingkat/Semeter :1/1

Kelompok : B Non Reguler

Hari,Tanggal : Selasa, 2 Oktober 2012

Materi Praktikum : Membuat Media Simon Citrat Agar

Tujuan Praktikum : Mengetahui pembuatan Media Simon Citrat Agar sebanyak 20 ml

Prinsip : 1. Menimbang Media Simon Citrat Agar sebanyak 0,46 gram

2. Melarutkan Media Simon Citrat Agar 20 ml dengan menggunakan

aquades

Alat dan Bahan :

Alat : Bahan :

a. Timbangan Ohous a. Simon Citrat Agar

b. Petridish b. Aquades
c. Corong
d. Tissue
e. Bolpoin / Spidol
f. Lampu Spirtus
g. Kaki Tiga
h. Kawat Kasa
i. Becker Glass
j. Gelas Ukur
k. Tabung Reaksi
l. Kapas Lemak
m. Erlenmeyer
n. Rak Tabung
o. Korek Api
p. Koran
q. Karet Gelang
r. Spatula
s. Autoklaf
t. Kertas pH Media
Cara Kerja :

1. Menyiapkan alat dan bahan yang akan digunakan.

2. Menghitung jumlah Simon Citrat Agar yang akan ditimbang melalui rumus :
Gr yang dicari = V yang dicari Gr etiket
Vetiket
= 20 23
1000
= 0,46 Gram
3. Menimbang Simon Citrat Agar 0,46 gram dengan menggunakan timbangan ohous.
4. Melarutkan Simon Citrat Agar menggunakan aquades sebanyak 20 ml dengan cara :
a. Melarutkan Simon Citrat Agar 10 ml aquades dengan menggunakan spatula.
b. Memasukan Simon Citrat Agar kedalam Erlenmeyer dengan menggunakan
corong.
c. Membersihkan sisa agar yang ada dipetridis dan corong dengan sisa aquades.
d. Menutup Erlenmeyer dengan kapas berlemak.
5. Memanaskan larutan dengan menggunakan lampu spirtus hingga larutan tidak ada
gumpalan atau bintik pada dinding Erlenmeyer.
6. Tunggu hingga sedikit dingin.
7. Menghitung pH Simon Citrat Agar dengan kertas pH media dan pH harus menunjukan
7,0 + 0,2 .
8. Memanaskan larutan Simon Citrat Agar yang sudah dibagi dalam tabung reaksi kurang
lebih 2,5 ml.
9. Menutup tabung reaksi yang sudah berisi Simon Citrat Agar dengan kapas lemak.
10. Menggabungkan tabung reaksi selanjutnya ditutup dengan Koran secara rapi dan diikat
dengan menggunakan karet gelang.
11. Mensterilkan tabung reaksi yag sudah berisi Simon Citrat Agar pada suhu 121 0C selama
15 menit didalam autoklaf dengan cara :
a. Mengisi autoklaf dengan aquades sampai sejajar dua kumparan.
b. Meletakan media pada autoklaf diatas dandang autoklaf, lalu tutup autoklaf.
c. Menyalakan kompor, menunggu hingga uap air keluar, lalu tutup lubang tempat
uap air keluar.
d. Menunggu hingga suhu 1210 C, setelah suhu mencapai 121 0 C ditimer hingga 15
menit dan menjaga agar suhu tetap 1210 C dengan cara jika suhu naik dibuka
sedikit lubang uap air hingga mengeluarkan uap sedikit demi sedikit sampai suhu
1210 C.
e. Jika sudah 15 menit matikan kompor, dibuka perlahan hingga suhu turun menjadi
00 C lalu autoklaf dibuka dan media diambil letakan pada tempatnya
Penimbangan :

Massa cawan : 45,44 gr Hasil Timbang : 45,90 gr

Sampel (media) : 0,46 gr Massa cawan : 45,44 gr

45,90 gr 0,46 gr

Kesimpulan :

Untuk membuat media Simon Citrat Agar 20 ml dengan komposisi 23 gr/ 1 cc diperlukan
serbuk Simon Citrat Agar sebanyak 0,46 gr.

PRAKTIKUM 2

Mata Kuliah : Media Reagensia

Dosen Pengajar :1. Suliati S.pd, S.si M.kes

 2. Tacik Idayati, SST

Tingkat/Semeter :1/1

Kelompok : B Non Reguler

Hari,Tanggal : Senin, 8 Oktober 2012

Materi Praktikum : Membuat Media Cair Bacto Tryptose ( Peptone)

Tujuan Praktikum : Mengetahui cara pembuatan Media Cair Bacto Tryptose ( Peptone)

Prinsip : 1. Menimbang Bacto Tryptose sebanyak 1 gram

2. Menimbang Nacl sebanyak 0,5 gram

3. Melarutkan Bacto Tryptose ddn Nacl 50 ml dengan menggunakan

aquades

Alat dan Bahan :

Alat : Bahan :

a. Timbangan Ohous a. Bacto Tryptose (Peptone)

b. Petridish b. Nacl c. NaOH d. Aquades
c. Corong
d. Tissue
e. Bolpoin / Spidol
f. Lampu Spirtus
g. Kaki Tiga
h. Kawat Kasa
i. Becker Glass
j. Gelas Ukur
k. Tabung Reaksi
l. Kapas Lemak
m. Erlenmeyer
n. Rak Tabung
o. Korek Api
p. Koran
q. Karet Gelang
r. Spatula
s. Autoklaf
t. Kertas pH Media

Cara Kerja :

1. Menyiapkan alat dan bahan yang akan digunakan.

2. Menghitung jumlah Bacto Tryptose dan Nacl yang akan ditimbang melalui rumus :
 Bacto Tryptose = 100 10 Nacl = 100 5
1000 1000
= 1 Gram = 0,5 Gram
3. Menimbang Bacto Tryptose 1 gram dan Nacl 0,5 gram dengan menggunakan timbangan
ohous.
4. Melarutkan Bacto Tryptose dan Nacl menggunakan aquades sebanyak 50 ml dengan cara
:
a. Melarutkan Bacto Tryptose dan Nacl dengan menambahkan aquades sedikit demi
sedikit menggunakan spatula.
b. Memasukan Bacto Tryptose dan Nacl kedalam Erlenmeyer dengan menggunakan
corong.
c. Membersihkan sisa media yang ada dipetridis dan corong dengan sisa aquades.
d. Menutup Erlenmeyer dengan kapas berlemak.
5. Memanaskan larutan dengan menggunakan lampu spirtus hingga larutan tidak ada
gumpalan atau bintik pada dinding Erlenmeyer.
6. Tunggu hingga sedikit dingin.
7. Cek pH larutan dengan menggunakan kertas pH media
#Jika pH larutan kurang basa maka ditambah NaOH tetes demi tetes dalam larutan
menggunakan pipet tetes hingga media menjadi basa.
8. Menuangkan media pada tabung reaksi Tabung NA 5 ml II tabung, Tabung TB 3 ml 15
tabung.
9. Menutup tabung reaksi yang sudah berisi Bacto Tryptose dan Nacl dengan kapas lemak.
10. Menggabungkan tabung reaksi selanjutnya ditutup dengan Koran secara rapi dan diikat
dengan menggunakan karet gelang.
11. Mensterilkan tabung reaksi yag sudah berisi Bacto Tryptose dan Nacl pada suhu 121 0C
selama 15 menit didalam autoklaf dengan cara :
a. Mengisi autoklaf dengan aquades sampai sejajar dua kumparan.
b. Meletakan media pada autoklaf diatas dandang autoklaf, lalu tutup autoklaf.
c. Menyalakan kompor, menunggu hingga uap air keluar, lalu tutup lubang tempat
uap air keluar.
d. Menunggu hingga suhu 1210 C, setelah suhu mencapai 121 0 C ditimer hingga 15
menit dan menjaga agar suhu tetap 1210 C ,jika suhu naik dibuka sedikit lubang
uap air hingga mengeluarkan uap sedikit demi sedikit sampai suhu 1210 C.
e. Jika sudah 15 menit matikan kompor, dibuka perlahan hingga suhu turun menjadi
00 C lalu autoklaf dibuka dan media diambil letakan pada tempatnya.

Penimbangan :

1. Bacto Tryptose

Massa cawan : 48,38 gr

Sampel (media) : 1 gr
 Hasil timbang 49,38 gr

2. Nacl

Massa cawan : 61,61 gr

Sampel (media) : 0,5 gr

Hasil timbang 62,11 gr

Kesimpulan :

Untuk membuat Media Bacto Tryptose (Peptone) 50 ml dengan komposisi 10 gr/ 1 cc

Bacto Tryptose diperlukan 1 gram dan 5 gr/ 1 cc Nacl diperlukan 0,5 gram.

PRAKTIKUM 3

Mata Kuliah : Media Reagensia

Dosen Pengajar :1. Suliati S.pd, S.si M.kes

2. Tacik Idayati, SST

Tingkat/Semeter :1/1

Kelompok : B Non Reguler

Hari,Tanggal : Selasa, 9 Oktober 2012

Materi Praktikum : Membuat Media Nacl Broth Medium

Tujuan Praktikum : Mengetahui pembuatan Media Nacl Broth Medium sebanyak 50 ml

Prinsip : 1. Menimbang media Nacl Broth Medium

2. Melarutkan media Nacl Broth Medium 50 ml dengan menggunakan

aquades.

Alat dan Bahan :

Alat : Bahan :

a. Timbangan Ohous a. Air daging b. Sodium Clorida

b. Petridish c. NaOH 3 M d. Peptone e. Aquades
c. Corong
d. Tissue
e. Bolpoin / Spidol
f. Lampu Spirtus
g. Kaki Tiga
h. Kawat Kasa
i. Becker Glass
j. Gelas Ukur
k. Tabung Reaksi
l. Kapas Lemak
m. Erlenmeyer
n. Rak Tabung
o. Korek Api
p. Koran
q. Karet Gelang
r. Spatula
s. Autoklaf
t. Kertas pH Media

Cara Kerja :

1. Menyiapkan alat dan bahan yang akan digunakan.

 3. Menghitung bahan yang akan ditimbang melalui rumus :
Air daging 1000 ml = 1 gram
Peptone = 50 10 = 0,5 gr
1000
Sodium Clorida = 50 100 = 5 gr
1000
4. Menimbang bahan yang akan digunakan yaitu : 1 gr extract air daging, 0,5gr Peptone, 5
gr sodium clorida dengan menggunakan timbangan ohous.
5. Melarutkan bahan yang telah ditimbang menggunakan aquades sebanyak 50 ml dengan
cara :
a. Melarutkan 1 gr extract air daging, 0,5gr Peptone, 5 gr sodium clorida dengan
menambahkan aquades sedikit demi sedikit menggunakan spatula.
b. Memasukan 1 gr extract air daging, 0,5gr Peptone, 5 gr sodium clorida kedalam
Erlenmeyer dengan menggunakan corong.
c. Membersihkan sisa media yang ada dipetridis dan corong dengan sisa aquades.
d. Menutup Erlenmeyer dengan kapas berlemak.
6. Memanaskan larutan dengan menggunakan lampu spirtus hingga larutan tidak ada
gumpalan atau bintik pada dinding Erlenmeyer.
7. Tunggu hingga sedikit dingin.
8. Cek pH larutan dengan menggunakan kertas pH media
# Jika pH larutan kurang basa maka ditambah NaOH tetes demi tetes dalam larutan
menggunakan pipet tetes hingga media menjadi basa.
# Jika pH larutan kurang asam maka ditambah HCl tetes demi tetes dalam larutan
menggunakan pipet tetes hingga media menjadi asam.
9. Menuangkan media ke tabung reaksi sebanyak 16 tabung dengan ketentuan 3 ml.
10. Menutup tabung reaksi yang sudah berisi media dengan kapas lemak.
11. Menggabungkan tabung reaksi selanjutnya ditutup dengan Koran secara rapi dan diikat
dengan menggunakan karet gelang.
12. Mensterilkan tabung reaksi yag sudah berisi media pada suhu 121 0C selama 15 menit
didalam autoklaf dengan cara :
a.Mengisi autoklaf dengan aquades sampai sejajar dua kumparan.
b. Meletakan media pada autoklaf diatas dandang autoklaf, lalu tutup
autoklaf.
c.Menyalakan kompor, menunggu hingga uap air keluar, lalu tutup lubang tempat uap
air keluar.
d. Menunggu hingga suhu 1210 C, setelah suhu mencapai 1210 C ditimer
hingga 15 menit dan menjaga agar suhu tetap 1210 C ,jika suhu naik dibuka sedikit
lubang uap air hingga mengeluarkan uap sedikit demi sedikit sampai suhu 1210 C.
e. Jika sudah 15 menit matikan kompor, dibuka perlahan hingga suhu turun menjadi 0 0
C lalu autoklaf dibuka dan media diambil letakan pada tempatnya.

Penimbangan :
 1. Air Daging

Massa cawan : 51,60 gr

Sampel (media) : 1 gr

Hasil timbang 52,60 gr

2. Peptone

Massa cawan : 49,45 gr

Sampel (media) : 0,5 gr

Hasil timbang 49,95 gr

3. Sodium Clorida

Massa cawan : 50,70 gr

Sampel (media) : 5 gr

Hasil timbang 55,70 gr

Kesimpulan :

Untuk membuat Media Nacl Broth Medium 50 ml dengan komposisi 10 gr/ 1 cc air daging
diperlukan 1 gram, 10 gr/ 1 cc peptone diperlukan 0,5 gram dan 100 gr/ 1 cc sodium clorida
diperlukan 5 gram.
 LAPORAN PRAKTIKUM I
Mata Kuliah : Media

Dosen Pengajar : 1. Suliati SPd, S.Si, M.Kes

2. Tacik Idayati A.Mdk

Tingkat / Semester : 1/1

Kelompok :B

Hari dan Tanggal : Selasa, 2 Oktober 2012

Materi Praktikum : Membuat Media Mac Conkey

Tujuan : Untuk mengetahui cara membuat media mac

conkey

Prinsip : 1. Menimbang mac conkey

2. Melarutkan mac conkey dengan aquades ke dalam

erlenmeyer

Alat dan Bahan :

Alat : 1. Erlenmeyer 6. Spirtus 11. Batang Pengaduk

2. Pipet Tetes 7. Autoclave 12. Kaki Tiga dan

Kawat Kassa

3. Corong 8. Koran 13. Kapas Berlemak

4. Karet Gelang 9. Petridis 14. Neraca Ohaus

5. Gelas Ukur 10. Pita PH 15. Beaker Glass

Bahan : 1. Aquades

2. Media Mac Conkey

3. NaOH

Cara Kerja :

1. Menyiapkan alat dan bahan yang dibutuhkan

2. Menghitung massa reagen yang dibutuhkan
Gram = (Vol dicari/Vol etiket) x kadar
= (250/1000) x 52
= 13 gram
 3. Menimbang reagen sebanyak 13 gram di neraca ohaus dengan
petridis
4. Melarutkan reagen
a) Memindahkan reagen dari petridis ke dalam beaker glass
b) Memindahkan aquades ke dalam gelas ukur sebanyak 250 ml
c) Membilas petridis dengan aquades dari gelas ukur sedikit demi
sedikit
d) Menuang air bilasan kedalam beaker glass dan mengadukya
e) Menuang larutan ke dalam erlenmeyer
f) Menambahkan aquades dari gelas ukur
5. Memanaskan larutan dengan spirtus diletakkan di kawat kassa di atas
kaki tiga
a) Menjaga larutan tidak sampai mendidih
b) Memutar erlenmeyer, menunggu putaran berhenti dan memutar
lagi
c) Memanaskan hingga cairan jernih, dan tidak ada gelembung air
di dinding
6. Mendinginkan larutan hingga suhu 500C 450C
7. Menegecek PH larutan
Bila PH larutan kurang bassa maka, ditambahkan NaOH tetes demi
tetes dengan pipet tetes hingga PH tepat
8. Membungkus petridis dan media dengan koran dan karet
9. Mensterilkan petridis dan media pada autoclave selama 15menit pada
suhu 1210C

Kesimpulan :
Untuk membuat media Mac Conkey dengan komposisi 52 gram/liter
diperlukan serbuk Mac Conkey sebanyak 13 gram
 LAPORAN PRAKTIKUM III
Mata Kuliah : Media

Dosen Pengajar : 1. Suliati SPd, S.Si, M.Kes

2. Tacik Idayati A.Mdk

Tingkat / Semester : 1/1

Kelompok :B

Hari dan Tanggal : Selasa, 9 Oktober 2012

Materi Praktikum : Membuat Media Bouillon

Tujuan : Untuk mengetahui cara membuat media bouillon

Prinsip : 1. Menimbang bouillon

2. Melarutkan bouillon dengan aquades ke dalam

erlenmeyer

Alat dan Bahan :

Alat : 1. Erlenmeyer 6. Spirtus 11. Batang Pengaduk

2. Pipet Tetes 7. Autoclave 12. Kaki Tiga dan

Kawat Kassa

3. Corong 8. Tabung Na 13. Kapas Berlemak

4. Karet , Koran 9. Petridis 14. Neraca Ohaus

5. Gelas Ukur 10. Pita PH 15. Beaker Glass

Bahan : 1. Aquades

2. Peptone (Bacto Tryptose)

3. NaOH

4. Air Daging / Lab Lemco 1-2%

5. Sodium Chloride

Cara Kerja :

1. Menyiapkan alat dan bahan yang dibutuhkan

2. Menghitung massa reagen yang dibutuhkan
 Gram Peptone = (Vol dicari/Vol etiket) x kadar
= (100/1000) x 10
= 1 gram
Gram Sodium Chloride = (100/1000) x 5
= 0,5 gram
Gram Lab Lemco =12%
= 1 2 gram (2 gram) dalam 100ml
3. Menimbang peptone sebanyak 1 gram, sodium chloride sebanyak 0,5
gram, dan lab lemco sebanyak 2 gram dengan neraca ohaus
4. Melarutkan reagen
a) Memindahkan reagen dari petridis ke dalam beaker glass
b) Memindahkan aquades ke dalam gelas ukur sebanyak 250 ml
c) Membilas petridis dengan aquades dari gelas ukur sedikit demi
sedikit
d) Menuang air bilasan kedalam beaker glass dan mengadukya
e) Menuang larutan ke dalam erlenmeyer
f) Menambahkan aquades dari gelas ukur
5. Memanaskan larutan dengan spirtus diletakkan di kawat kassa di atas
kaki tiga
a) Menjaga larutan tidak sampai mendidih
b) Memutar erlenmeyer, menunggu putaran berhenti dan memutar
lagi
c) Memanaskan hingga cairan jernih, dan tidak ada gelembung air di
dinding
6. Mendinginkan larutan hingga suhu 500C 450C
7. Menegecek PH larutan
Bila PH larutan kurang bassa maka, ditambahkan NaOH tetes demi
tetes dengan pipet tetes hingga PH tepat
8. Memasukkan larutan ke dalam tabung Na masing masing 5 ml
9. Menutupnya dengan kapas berlemak, menutupnya dengan koran, dan
merekatkannya dengan karet
10. Mensterilkan media pada autoclave selama 15menit pada suhu
1210C

Kesimpulan :
Untuk membuat media Bouilion membutuhkan Air Daging / Lab Lemco
sebanyak 2 gram, media Bacto Tryptose sebanyak 1 gram, dan Sodium
Chlorida sebanyak 0,5 gram
 Laporan Pratikum Pembuatan Media

Pembuatan Media Semi Solid

Mata Kuliah : Media Reagensia

Dosen Pembimbing : 1. Suliati, S.Pd, S.Si, M.Si

2. Tacik Idayati, A.Md.K

Tanggal Pratikum : 3 Desember 2012

Tingkat / Semester :I/I

Kelompok : B Non Reguler

Materi Pratikum : Pembuatan Media Semi Solid

Alat :

1 Erlenmeye 6 Kaki Tiga 11 Kertas 15 Tabung

r 7 Karet Indikator Biokimia
2 Gelas Ukur 8 Koran pH 16 Pipet
3 Batang 9 Kapas 12 Korek 17 Aspirator
Pengaduk Berlemak 13 Autoclave
4 Petridish 10 Neraca 14 Rak 1.
5 Corong Analitik Tabung
2. Bahan :

1 Tryptose
2 NaCl
3 Agar
4 Aquades

3. Langkah kerja:

1 Menghitung media yang dibutuhkan dengan menggunakan rumus :

4.
ml yang dibut h kan
X bobot pada etiket
5. ml pada etiket

6.
72
5
7. Tryptose 1000

8. 0,36 gram
9.
72
5
10. NaCl 1000

11. 0,36 gram

12.
72
4
13. Agar 1000

14. 0,28 gram

2 Menimbang petridish terlebih dahulu lalu catat, berat petridish,
setelah itu tambahkan dengan berat media yang akan ditimbang
15.
16. Berat Petridish : 39,61 gr
17. Berat Tryptose : 0,36 gr +
18. 39,97 gr
19.
20. Berat Petridish : 39,61 gr
21. Berat NaCl : 0,36 gr +
22. 39,97 gr
23.
24. Berat Petridish : 39,61 gr
25. Berat Media agar : 0,28 gr +
26. 39,89 gr
27.
28.
3 Siapkan peralatan yang akan digunakan untuk melarutkan media yaitu
gelas ukur, corong, spatula dan Erlenmeyer.
4 Larutkan ketiga media pada petridish dengan aquades sebanyak 72 ml
ke dalam Erlenmeyer
5 Setelah bersih, setelah selesai melarutkan, gulung kapas berlemak
untuk menutup Erlenmeyer yang telah berisi media.
6 Panaskan media Semi Solid diatas kaki tiga, hingga larut sempurna
tetapi tidak mendidih, hingga bewarna jernih
7 Cek pH media Semi Solid yang telah dilarutkan
8 Setelah pH pas, masukkan media ke dalam tabung biokimia sebanyak
18 tabung dengan volume masing-masing 4 ml tiap tabung.
9 Tutup tabung biokimia tersebut dengan kapas berlemak.
10 Ikat semua tabung kimia menjadi satu dengan menggunakan karet
11 Tutup dengan kertas Koran, lalu ikat dengan karet
12 Tuliskan identitas media
13 Sterilkan dengan menggunakan autoclave selama 15 menit, pada suhu
1210C
14 Setelah media steril, dinginkan, lalu masukan ke dalam lemari
pendingin agar media tidak rusak.

29.

30.
 31. LAPORAN PRAKTIKUM
32.
33.
34. HARI, TANGGAL : SELASA, 18 SEPTEMBER 2012
35. PRAKTIKUM : PEMBUATAN MEDIA TSIA (TRIPLE SUGAR IRON AGAR)
36. TUJUAN : MENGETAHUI CARA MEMBUAT MEDIA TSIA DENGAN
BENAR
37. DOSEN PENGAJAR : TACIK IDAYATI, S.ST
38.
Alat dan bahan :
1. Petri dish 11. Kompor
2. Batang pengaduk 12. Kertas PH Media
3. Erlenmeyer 13. Karet
4. Gelas Ukur 14. NaOH 0,1
5. Spiritus 15. HCL 0,1
6. Koran 16. Kapas Berlemak
7. Kaki tiga 17. Aquades
8. Kawat kassa 18. Media TSIA
9. Corong 19. Korek
10. Autoclave 20. Tabung reaksi
39.
Langkah Kerja :
1. Siapkan alat dan bahan yang akan diperlukan
2. Menimbang media TSIA dengan menggunakan petri dish dengan perhitungan :
40. Berat TSIA : volume yang diinginkan/volume yang tertera pada etiket x gr etiket = 60/1000 x 65
41. = 3,9 gram
3. Masukkan media TSIA yang telah ditimbang tersebut kedalam Erlenmeyer dengan cara melarutkannya
menggunakan air aquades di dalam petri dish tadi, sedikit demi sedikit sampai serbuk-serbuk media
TSIA tidak bersisa.
4. Bilas corong dan batang pengaduk dengan menggunakan air aquades yang masih tersisa. Usahakan air
yang digunakan tidak kurang dan tidak lebih atau sesuai dengan kebutuhan.
5. Gulung kapas berlemak sampai bisa dijadikan penutup Erlenmeyer dengan bentuk yang padat dan
tidak mudah melorot tapi bisa diambil dengan mudah.
6. Siapkan kaki tiga, kawat kassa dan spiritus yang menyala.
7. Letakkan Erlenmeyer diatas kassa.
8. Larutkan media dengan memanaskannya dan mengocok pelan tabung Erlenmeyer hingga berwarna
bening dan tidak ada serbuk yang menempel di dinding tabung.
9. Setelah proses pelarutan selesai, tunggu hingga tidak terlalu panas dan tidak terlalu dingin hangat-
hangat kuku lalu cek PH-nya dengan melihat pada etiket botol media kemudian sesuaikan PH-nya
dengan menambah NaOH (bila kurang basa) dan HCL (bila kurang asam)
10. Setelah PH-nya sesuai, tuangkan ke dalam 15 tabung reaksi dengan masing-masing tabung 4 ml.
11. Buat gulungan kapas yang sesuai dengan mulut tabung reaksi
12. Tutup ke-15 tabung dengan kapas berlemak dan ikat jadi satu dengan Koran sebelum akhirnya
dibungkus Koran dan dikaretin lagi.
13. Proses selanjutnya, masukkan ke-15 tabung tersebut ke dalam Autoclave untuk proses Sterilisasi.
42.
43. Proses Sterilisasi :
 1. Perhatikan air aquades yang ada di dalam autoclave. Air yang digunakan untuk sterilisasi harus
bersih dengan kata lain menggunakan air aquades yang masih baru atau bekas sterilisasi
sebelumnya. Permukaan airnya harus sejajar dengan 2 kumparan yang ada didalam autoclave.
2. Masukkan ke-15 tabung reaksi tersebut kedalam Autoclave bersama dengan media lainnya yang
juga ingin disterilisasi.
3. Tutup autoclave dengan memutar knop pemutarnya yang sejajar secara bersamaan dan dengan
kekuatan yang sama, hal ini ditujukan agar tekanan dalam autoclave seimbang.
4. Nyalakan kompor
5. Tunggu hingga dari katup keluar uapnya
6. Setelah keluar uap, tutup kedua katupnya.
7. Tunggu hingga suhunya naik sampai 121oC
8. Apabila suhunya sudah 121oC, maka timer dinyalakan selama 15 menit.
9. Atur suhunya agar tetap bertahan di suhu 121oC dengan cara membuka dan menutup katup secara
perlahan-lahan sampai uapnya keluar secara perlahan.
10. Setelah 15 menit, matikan kompornya
11. Buka katupnya sedikit demi sedikit hingga uap di dalam autoclave keluar secara pelan-pelan. Dan
suhunya turun menjadi 0oC
12. Setelah dipastikan suhunya benar-benar 0oC, buka knop penutup pada tutup autoclave dengan cara
yang sama sewaktu menutup lalu geser perlahan tutupnya agar uap panas dari dalam autoclave
tidak mengenai wajah kita.
13. Angkat media yang sudah steril menggunakan serbet dan ditaruh dikeranjang.
14. Media TSIA yang sudah disterilkan, didinginkan dengan cara memiringkan tabung reaksinya
sebesar 30o atau bisa juga dengan menyanggah tabung reaksi yang berisi TSIA panas dengan
mengunakan tabung reaksi kosong agar tercipta kemiringan yang mana salah satu ujungnya lebih
tinggi daripada ujung lainnya.
15. Masukkan kedalam lemari pendingin bila media TSIA sudah dingin.
44.
45.

46.
 47. LAPORAN PRAKTIKUM I
48.

49. Mata Kuliah : Media Reagensia

50. Dosen Pengajar :1. Suliati Spd,Ssi M.kes

51. 2. Tacik Idayati, SST

52. 3. Ayu Puspitasari

53. 4. Krisdiyanti Ellifas , SST

54. Tingkat/semester : 1/ I

55. Kelompok : B non reguler

56. Hari,tanggal : selasa , 2 Oktober 2012

57. Materi Praktikum :membuat media Cimone Sitrat Agar

58. Tujuan Praktikum :mengetahui cara pembuatan Cimone Sitrat Agar

59. Prinsip :1. Menimbang Simon Sitrat Agar sebanyak 0,46 gr

60. 2. Melarutkan Simon Sitart Agar 20 ml dengan

menggunakan Aquades kedalam Erlenmeyer

61. Alat dan Bahan

62. Alat :1. Timbangan ohaus 11. Tabung reaksi

63. 2. petridish 12. Kapas lemak

64. 3. corong 13. erlenmeyer

65. 4. tissue 14. Rak Tabung

66. 5. bolpoi 15. Korek api

67. 6. lampu spirtus 16. koran

68. 7. kaki tiga 17. Karet gelang

69. 8. kawat kasa 18. spatula

70. 9. beaker glass 19. autoklaf

71. 10. gelas ukur 20. Kertas Ph

72. Bahan : 1. Simon Sitrat Agar

73. 2. Aquades

74.

75. Prosedur :

1. Menyiapkan media Simon Sitrat Agar dan melihat komposisi serta

penggunaannya
2. Menghitung jumlah Simon Sitrat Agar yang akan ditimbang melalui rumus :
76. m = v yang dicari X gr etiket
77. v etiket
78. = 20 X 23
79. 1000
80. = 0,46 gr
81.
3. Menimbang simon Sitrat Agar 0,46 gr menggunakan timbangan ohause
a. Menghubungkan timbangan ohause dengan aliran listrik
b. Tekan tombol on / of
c. Jika telah menunjukkan angka 0,00 letakkan petridish diatas timbangan.
d. Tunggu sampai angka stabil, selanjutnya catat berat petridish yang tertera
tambahkan 0,46 gr Simon Sitrat Agar.
4. Menutup bahan dengan tutup petridish agar bahan tidak menggumpal
5. Melarutkan Simone Sitrat Agar dari 20 ml aquades dengan spatula,
kemudian masukkaan larutan Simon Sitrat Agar ke dalam Erlenmeyer dengan
corong
6. Membersihkan sisa Agar yang ada di petridish dan corong dengan sisa
aquades, lalu masukkan ke Erlenmeyer.
7. Menutup Erlenmeyer dengan kapas lemak
8. Memanaskan larutan diatas lampu spirtus dengan penyangga kaki tiga
sampai larutan tidak ada gumpalan/bintik pada dinding Erlenmeyer.
9. Tunggu hingga sedikit dingin.
10.Menghitung Ph Simon Sitrat Agar dengan menggunakan kertas Ph Media
harus menunjukkan 7,0 0,2
11.Memanaskan larutan Simon Sitrat Agar ke dalam tabung reaksi kurang lebih
2,5 ml. Dengan cara menghitung aquades menggunakan gelas ukur sampai
2,5 ml sebagai patokan ukuran. Lalu memasukkannya ke tabung reaksi dan
larutan Simon Sitrat Agar samakan dengan tinggi aquades pada tabung
reaksi tadi.
12.Menutup tabung reaksi yang sudah diisi larutan Simon Sitrat Agar dengan
kapas berlemak.
13.Menggabungkan tabung reaksi, selanjutnya tutup dengan Koran dan diikat
dengan karet gelang.
14.Mensterilkan tabung reaksi yang sudah terisi media pada suhu 121C selama
15 menit di autoklaf dengan cara :
a. Mengisi autoklaf dengan aquades sampai sejajar dua kumparan
b. Meletakkan media pada autoklaf diatas dandang autoklaf lalu ditutup
 c. Menyalakan kompor ,menunggu hingga uap air keluar, lalu tutup lubang
tempat air keluar
d. Menunggu hingga suhu naik 121C ,setelah suhu mencapai 121C ditimer
hingga 15 menit dan menjaga agar suhu tetap 121C dengan cara
membuka sedikit lubang uap air yang mengeluarkan uap sedikit demi
sedikit sampai suhu tetap stabil 121C
e. Jika sudah 15 menit, matikan kompor, bukaperlahan hingga suhu turun
menjadi 0C ,lalu membuka autoklaf dan mengambil media
82.

83. Penimbangan :

84. Massa cawan : 45,44 gr hasil timbang :45, 90 gr

85. Media : 0,46 gr massa cawan : 45, 44 gr
86. + -
87. 45,90 gr Samplemedia : 0,46 gr

88.

89.

90.

91.

92.

93. Kesimpulan :

94. Untuk membuat media simon sitrat agar 20ml dengan komposisi 23gr 1cc
diperlukan serbuk simon sitrat agar sebanyak 0,46gr.

95.

96.

97.

98.

99.

100.

101.

102.

103.

104.
105.

106.

107.

108.

109.

110.

111. LAPORAN PRAKTIKUM II

112.

113. Mata Kuliah : Media Reagensia

114. Dosen Pengajar :1. Suliati Spd,Ssi M.kes

115. 2. Tacik Idayati, SST

116. 3. Ayu Puspitasari

117. 4. Krisdiyanti Ellifas , SST

118. Tingkat/semester : 1/ I

119. Kelompok : B non reguler

120. Hari,tanggal : senin , 08 Oktober 2012

121. Materi praktikum : membuat media cair Peptone

122. Tujuan praktikum :mengetahui cara pembuatan media cair Pepton

123. Prinsip : 1. Menimbang Pepton

1. Melarutkan Pepton

124.

125. Alat dan Bahan

126. Alat :1. Timbangan ohaus 11. Tabung reaksi

127. 2. petridish 12. Kapas lemak

128. 3. corong 13. erlenmeyer

 129. 4. tissue 14. Rak Tabung

130. 5. bolpoin 15. Korek api

131. 6. lampu spirtus 16. koran

132. 7. kaki tiga 17. Karet gelang

133. 8. kawat kasa 18. spatula

134. 9. beaker glass 19. autoklaf

135. 10. gelas ukur 20. Kertas Ph

136.

137.

138. Bahan : a. Pepton

139. b. NaCl

140. c. Aquades

141. d. NaOH

142.

143. Procedure:

1. Menyiapkan alat & bahan

2. Menghitung bahan :
144. Peptone : NaCl :
145. = 100 X 10 = 100 X 5
146. 1000 1000

147. = 1 gr = 0,5

3. Menimbang bahan yang sudah dihitung dengan cara menambahannya

dengan berat petridish
4. Melarutkan bahan yang sudah ditimbang kedalam Erlenmeyer dengan
menggunakan aquades sedikit demi sedikit agar tidak ada bahan yang
tersisa
5. Mengaduk rata sehingga NaCl dan Pepton dapat bercampudapat
bercampur ,lalu menutup Erlenmeyer dengan kapas lemak
6. Memanaskan media diatas lampu spirtus dengan penyangga kaki tiga dan
kawat kasa, memutar - mutar Erlenmeyer hingga larut sempurna tapi tidak
boleh sampai mendidih.larutan yang larut sempurna ditandai dengan
hilangnya gumpalan atau bintik pada dinding Erlenmeyer dan larutan akan
jernih.
 7. Setelah larutan sudah larut sempurna lalu angkat dan diamkan hingga sedikit
dingin
8. Mengecek Ph larutan dengan kertas Ph media menggunakan bantuan
spatula.
148. Jika Ph larutan kurang basa, maka ditambah NaOH tetes demi tetes dalam
larutan dengan pipet tetes hingga media menjadi basa dan sesuai batas Ph
yang dicantumkan di etiket media.
9. Menuangkan media pada tabung reaksi .
10.Menutup tabung dengan kapas lemak dan membungkus bagian atasnya
dengan Koran lalu mengikatnya dengan karet gelang.
11.Mensterilkan media dengan autoklaf selama 15 menit pada suhu 121C

149.

150. Penimbangan :

1. Pepton
151.
152. Massa cawan : 48, 38 gr hasil timbang :49,38 gr
153. Media : 1 gr massa cawan : 48,38 gr
154. + -
155. 49,38 gr Sample media : 1 gr
2. NaCl
156.
157. Massa cawan : 61,61 gr hasil timbang :62,11 gr
158. Media : 0,5 gr massa cawan : 61,61 gr
159. + -
160. 62,11 gr Sample media : 0,5 gr
161.
162.
163.
164.
165.
166.
167.
168.
169.
170.
171.
172.
173.
174.
175.
176.
177.
178.
179.
180.
181.
182.
183.
184.
185.
186.
187.
188.
189.
190.
191.
192.
193.
194.
195.
196.
197.
198.
199.
200.
201.
202.
203. LAPORAN PRAKTIKUM III
204. Mata Kuliah : Media Reagensia

205. Dosen Pengajar :1. Suliati Spd,Ssi M.kes

206. 2. Tacik Idayati, SST

207. 3. Ayu Puspitasari

208. 4. Krisdiyanti Ellifas , SST

209. Tingkat/semester : 1/ I

210. Kelompok : B non reguler

211. Hari,tanggal : selasa, 9 Oktober 2012

212. Materi Praktikum :membuat media NaCl Broth Medium

213. Tujuan Praktikum :mengetahui cara pembuatan NaCl Broth Medium

214. Prinsip :1. Menimbang Pepton 0,5 gr

215. 2. Menimbang 1 gr

216. 3. Menimbang Sodium Klorida 5 gr

217. Alat dan Bahan

218. Alat :1. Timbangan ohaus 11. Tabung reaksi

 219. 2. petridish 12. Kapas lemak

220. 3. corong 13. erlenmeyer

221. 4. tissue 14. Rak Tabung

222. 5. bolpoi 15. Korek api

223. 6. lampu spirtus 16. koran

224. 7. kaki tiga 17. Karet gelang

225. 8. kawat kasa 18. spatula

226. 9. beaker glass 19. autoklaf

227. 10. gelas ukur 20. Kertas Ph

228.

229.

230. Bahan : 1. Air daging

231. 2. Sodium Chlorida

232. 3. Pepton

233. 4. Aquades

234. 5. NaOH 3 M

235.

236. Prosedur :

1. Menyiapkan alat & bahan

2. Menghitung bahan :
237. Air daging 1000 ml = 1 gr
238.
239. Pepton : 50 X 10 = 0,5 gr
240. 1000
241. Sodium klorida : 50 X 100 = 5 gr
242. 1000
3. Menimbang bahan yang sudah dihitung dengan cara menambahannya
dengan berat petridish
4. Melarutkan bahan yang sudah ditimbang kedalam Erlenmeyer dengan
menggunakan aquades sedikit demi sedikit agar tidak ada bahan yang
tersisa
5. Mengaduk rata sehingga air daging, peptone, sodium Chlorida dapat
bercampur ,lalu menutup Erlenmeyer dengan kapas lemak
 6. Memanaskan media diatas lampu spirtus dengan penyangga kaki tiga dan
kawat kasa, memutar - mutar Erlenmeyer hingga larut sempurna tapi tidak
boleh sampai mendidih.
7. Setelah larutan sudah larut sempurna lalu angkat dan diamkan hingga sedikit
dingin.
8. Mengecek Ph larutan dengan kertas Ph media dengan bantuan spatula :
- Jika Ph kurang basa maka tambahkan NaOH
- Jika Ph kurangf asam maka tambahkan HCl
9. Menuangkan media ke tabung reaksi sebanyak 16 tabung dengan ketentuan
3 ml
10.Menutup tabung reaksi dengan kapas lemak, lalu kelompokkan menjadi satu
dan bungkus dengan Koran lalu diikat yang rapat dengan karet gelang.
11.Mensterilkan media
243. Engan menggunakan autoklaf pada suhu 121 C selama 20 menit.
244.

245. Penimbangan :

246. Air daging :

247. Massa cawan: 51,60 gr hasil timbang: 52,60 gr

248. Media : 1 gr massa cawan : 51,60 gr
249. + -
250. 52, 60 gr sampel media : 1 gr
251.
252.
253.
254. Peptone :
255. Massa cawan : 49,45 gr hasil timbang :49, 95 gr
256. Media : 0,5 gr massa cawan : 49,45 gr
257. + -
258. 49,95 gr Samplemedia : 0,5 gr
259.
260.
261. Sodium Chlorida :
262. Massa cawan : 50,70 gr hasil timbang :55,70 gr
263. Media : 5 gr massa cawan : 50,70 gr
264. + -
265. 5 gr Sample media : 5 gr
266.
267. Kesimpulan :
268. Untuk membuat media NaCl Broth Medium 50 ml dengan komposisi 10
gr/cc air daging diperlukan 1 gr,10 gr/1cc Peptone diperlikan 0,5 gr dan 100
gr/1cc Sodium Chlorida diperlukan 5 gr.
269.
270.
271.
272.
273.
274.
275.
276.
277.
278.
279.
280.
281.
282.

283. LAPORAN PRAKTIKUM

284.

285. Mata Kuliah : Media

286. Dosen Pengajar : 1. Suliati S.pd, S.Si, M.Kes.

287. 2. Tacik Idayati A. MdK

288. 3. Ayu Puspitasari, ST, M. Si

289. 4. Krisdiyanti Ellyfas, SST

290. Tingkat/Semester : 1/I

291. Kelompok : B (Non Reguler)

292. Tanggal Praktikum : Selasa, 27 November 2012

293. Tujuan Praktikum : Untuk mengetahui cara pembuatan Media padat Eosin
Methylene

294. Blue Agar (EMB).

295. Alat-alat : 1. Petridisk 8. Kaki Tiga

296. 2. Neraca Listrik 9. Pipet Tetes

297. 3. Batang Pengaduk 10. Autoclave

298. 4. Gelas Ukur 11. Kapas Berlemak

299. 5. Erlenmeyer 12. Kertas pH

300. 6. Corong 13. Koran

301. 7. Bunsen 14. Karet Gelang

302. Bahan : Eosin Methylene Blue Agar (EMB)

303. Aquades

304. NaOH

305. HCl

306. Spirtus

307.

308. Langkah Kerja :

1 Menyiapkan alat dan bahan.

2 Menghitung dahulu sebelum melakukan penimbangan :
309.
310. Gram = ml yang dibutuhkan x bobot pada etiket
311. ml pada etiket
312.
313. = 60 x 37,5 = 2,25 g
314. 1000
315.
3 Menimbang EMB dengan menggunakan neraca listrik :
316.
317. Berat Petridisk = 51,180 g
318. Berat EMB = 2,25 g +
319. Berat total = 53,430 g
320.
321. Setelah ditimbang ternyata didapatkan 53,474 g, sehingga harus dihitung
kembali berat EMB.
322.
323. Berat bersih EMB = Berat total yang didapat Berat petridisk
324. = 53,474 51,180
325. = 2,294 berat yang digunakan
326.
4 Setelah menimbang, siapkan gelas ukur. Kemudian isi dengan aquades
sebanyak 60 ml.
5 Tuang sedikit demi sedikit aquades yang ada di gelas ukur ke dalam petridisk
agar media larut dengan sempurna.
6 Pindahkan larutan media EMB ke dalam Erlenmeyer dengan bantuan corong.
7 Bilas petridisk dan corong sedikit demi sedikit menggunakan aquades di dalam
gelas ukur sampai benar-benar bersih dan tidak meninggalkan sisa pada corong,
petridisk, dan batang pengaduk.
8 Tutup mulut Erlenmeyer dengan kapas berlemak.
 9 Lakukan pemanasan di atas kaki tiga sambil dikocok. Setelah pusaran yang
dkocok sudah berhenti, lakukan pengocokan selanjutnya.
10 Tunggu sampai semua larut dan terjadi perubahan dari keruh menjadi bening,
tetapi tidak boleh sampai mendidih.
11 Ukur range pH dengan menggunakan kertas pH. Pada media EMB pH yang
diinginkan adalah 6,8. Jika pH terlalu asam tambahkan NaOH. Dan jika pH
terlalu basa tambhkan HCl sesuai volume yang dibutuhkan.
12 Lalu bungkus mulut Erlenmeyer dengan Koran dan sediakan 8 buah petridisk
lagi dan bungkus juga menggunakan Koran.
13 Lakukan sterilisasi alat dan bahan menggunakan autoclave dengan suhu 121C
selama 15 menit.
14 Buka autoclave, ambil semua alat dan bahan.
15 Buka bungkus Koran pada 8 buah petridisk dan mulut Erlenmeyer.
16 Tuang media EMB dari Erlenmeyer ke dalam 8 buah petridisk hingga menjadi
padat.
17 Masukkan ke dalam lemari es.

327.

328.

329.

330.

331.

332.

333.

334.

335.

336.

337.

338.

339.

340.

341.
342.

343.

344.

345.

346. LAPORAN PRAKTIKUM

347.

348. Mata Kuliah : Media

349. Dosen Pengajar : 1. Suliati S.pd, S.Si, M.Kes.

350. 2. Tacik Idayati A. MdK

351. 3. Ayu Puspitasari, ST, M. Si

352. 4. Krisdiyanti Ellyfas, SST

353. Tingkat/Semester : 1/I

354. Kelompok : B (Non Reguler)

355. Tanggal Praktikum : Senin, 3 Desember 2012

356. Tujuan Praktikum : Untuk mengetahui cara pembuatan Media cair yaitu NaCl
Broth

357. Alat-alat : 1. Petridisk 10. Autoclave

358. 2. Neraca Listrik 11. Kapas Berlemak

359. 3. Batang Pengaduk 12. Kertas pH

360. 4. Gelas Ukur 13. Koran

361. 5. Erlenmeyer 14. Karet Gelang

362. 6. Corong 15. Tabung Reaksi

363. 7. Bunsen 16. Pipet Ukur

364. 8. Kaki Tiga 17. Bulb

365. 9. Pipet Tetes 18. Rak Tabung

366. Bahan : Air daging/ lab_lemco powder/Blue Extract 10 ml

367. Peptone 10 g

368. NaCl 10 g

369. Aquades

370. Spirtus

371. NaOH 3N

372. HCl

373.

374. Langkah Kerja :

1 Siapkan alat dan bahan.

2 Lakukan perhitungan dahulu sebelum melakukan penimbangan :
375.
Air daging/lab_lemco powder = 40 x 1% = 0,4 g
376. 100
377.
Peptone = 40 x 10 = 4 g
378. 100
379.
NaCl = 40 x 10 = 4 g
380. 100
381.
3 Kemudian lakukan penimbangan dengan neraca listrik :
382.
Lab_Lemco Powder :
a Berat petridisk = 50,22 g
383. Berat awal lab_lemco powder = 0,4 g +
384. Berat total = 50,62 g
b Berat bersih lab_lemco powder= Berat total yang didapat berat petridisk
385. = 50,66 50,22
386. = 0,44 g berat yang digunakan
387.
Peptone :
a Berat petridisk = 51,70 g
388. Berat awal peptone = 4 g +
389. Berat total = 55,70 g
 b Berat bersih peptone = Berat total yang didapat berat petridisk
390. = 55,79 51,70
391. = 4,09 g berat yang digunakan
392.
393.
394.
395.
NaCl
a Berat petridisk = 37,93 g
396. Berat awal NaCl = 4 g +
397. Berat total = 41,93 g
b Berat bersih NaCl = Berat total yang didapat berat petridisk
398. = 41,94 37,93
399. = 4,01 g berat yang digunakan
400.
4 Setelah menimbang semua bahan, siapkan gelas ukur dan isi dengan aquades
sebanyak 40 ml.
5 Lalu tuang aquades tersebut ke dalam tiga petridisk yang berisi bahan-bahan
pembuatan media dan aduk menggunakan batang pengaduk hingga bahan di
dalam petridisk tercampur dan larut sempurna.
6 Kemudian masukkan ketiga bahan tersebut ke dalam Erlenmeyer dengan
bantuan corong.
7 Bilas corong dengan aquades yang terdapat dalam gelas ukur agar sisa bahan
yang menempel pada corong dapat larut juga.
8 Kemudian tutup mulut Erlenmeyer dengan menggunakan kapas berlemak.
9 Panaskan larutan media di atas kaki tiga. Sambil di kocok. Jika pusaran sudah
berhenti boleh dilakukan kocokan selanjutnya hingga warna larutan media
berubah dari keruh menjadi bening.
10 Ukur pH hingga 7,4. Jika terlalu asam tambahkan NaOH dan jika terlalu basa
tambahkan HCl sesuai volume yang dibutuhkan.
11 Siapkan 10 tabung reaksi di dalam rak tabung. Pipet 4 ml aquades di dalam
tabung reaksi yang digunakan sebagai contoh untuk menyamakan.
12 Distribusikan media cair ke dalam 10 tabung reaksi masing-masing volumenya 4
ml.
13 Kemudian tutup 10 tabung reaksi dengan kapas berlemak.
14 Lalu bungkus mulut 10 tabung reaksi dengan Koran dan ikat dengan karet
gelang.
15 Setelah itu, lakukan sterilisasi menggunakan autoclave dengan suhu 121C
selama 15 menit.
16 Keluarkan alat dan bahan dari autoclave, kemudian didiamkan hingga dingin.
Setelah itu, masukkan ke dalam lemari es.

401.
402.

403.

404.

405. LAPORAN PRAKTIKUM

406.

407. Mata Kuliah : Media

408. Dosen Pengajar : 1. Suliati S.pd, S.Si, M.Kes.

409. 2. Tacik Idayati A. MdK

410. 3. Ayu Puspitasari, ST, M. Si

411. 4. Krisdiyanti Ellyfas, SST

412. Tingkat/Semester : 1/I

413. Kelompok : B (Non Reguler)

414. Tanggal Praktikum : Selasa, 4 Desember 2012

415. Tujuan Praktikum : Untuk mengetahui cara pembuatan Media Padat yaitu
Triple Sugar Iron Agar (TSIA).

416. Alat-alat : 1. Petridisk 10. Autoclave

417. 2. Neraca Listrik 11. Kapas Berlemak

418. 3. Batang Pengaduk 12. Kertas pH

419. 4. Gelas Ukur 13. Koran

420. 5. Erlenmeyer 14. Karet Gelang

421. 6. Corong 15. Tabung Reaksi

422. 7. Bunsen 16. Pipet Ukur

423. 8. Kaki Tiga 17. Bulb

424. 9. Pipet Tetes 18. Rak Tabung

425. Bahan : Triple Sugar Iron Agar (TSIA)

426. Aquades

427. NaOH

428. Spirtus

429.

430. Langkah Kerja :

1 Menyiapkan alat dan bahan.

2 Menghitung dahulu sebelum melakukan penimbangan :
431.
432. Gram = ml yang dibutuhkan x bobot pada etiket
433. ml pada etiket
434.
435. = 30 x 65 = 1,95 g
436. 1000
437.
3 Menimbang TSIA dengan menggunakan neraca listrik :
438.
439. Berat petridisk = 49,78 g
440. Berat awal TSIA = 1,95 g +
441. Berat total = 51,73 g
442.
443. Setelah ditimbang ternyata didapatkan 51,76 g, sehingga harus dihitung kembali
berat TSIA,
444.
445. Berat bersih TSIA = Berat total yang didapat berat petridisk
446. = 51,76 49,78
447. = 1,98 g berat yang digunakan
448.
4 Setelah menimbang, siapkan gelas ukur. Kemudian isi dengan aquades
sebanyak 30 ml.
5 Tuang sedikit demi sedikit aquades yang ada di gelas ukur ke dalam petridisk
agar media larut dengan sempurna.
6 Pindahkan larutan media TSIA ke dalam Erlenmeyer dengan bantuan corong.
7 Bilas petridisk dan corong sedikit demi sedikit menggunakan aquades di dalam
gelas ukur sampai benar-benar bersih dan tidak meninggalakan sisa pada
corong, petridisk, dan batang pengaduk.
8 Tutup mulut Erlenmeyer dengan kapas berlemak.
9 Lakukan pemanasan di atas kaki tiga sambil dikocok. Setelah pusaran yang
dikocok berhenti, lakukan pengocokan selanjutnya.
 10 Tunggu samua larut dan terjadi perubahan dari warnanya yang keruh menjadi
bening, tetapi tidak boleh sampai mendidih.
11 Ukur range pH dengan menggunakan kertas pH. Pada media TSIA pH yang
diinginkan adalah 7,4. Jika pH terlalu asam ditambah NaOH. Dan jika pH terlalu
basa ditambah HCl sesuai volume yang dibutuhkan.
12 Siapkan 7 tabung reaksi di dalam rak tabung. Pipet 4 ml aquades di dalam
tabung reaksi yang digunakan sebagai contoh untuk menyamakan.
13 Distribusikan media padat TSIA di 7 tabung reaksi masing-masing volumenya
4ml.
14 Kemudian tutup 7 tabung reaksi dengan kapas berlemak.
15 Lalu bungkus mulut 7 tabung reaksi dengan Koran dan ikat dengan karet gelang.
16 Setelah itu, lakukan sterilisasi menggunakan autoclave dengan suhu 121C
selama 15 menit.
17 Keluarkan dari autoclave, kemudian didiamkan hingga dingin. Kemudian
posisikan tabung reaksi menjadi miring hingga menjadi padat. Setelah itu,
masukkan ke dalam lemari es.

449.

450. LAPORAN PRAKTIKUM

451. Mata Kuliah : Media dan Reagensia

452. Dosen Pengajar : Suliati Spd. Ssi. MKes

453. Tacik Idayati SST

454. Tingkat/Semester : 1 (satu)

455. Tanggal Praktikum:

456. Materi Praktikum : Membuat media Triple Sugar Iron Agar (TSIA)

457. Tujuan Praktikum : Mengetahui cara pembuatan media TSIA sebanyak 30ml.

458. Prinsip :- Menimbang TSIA sebanyak 1,95 gr

- Melarutkan TSIA 60ml dengan menggunakan aquades

kedalam Erlenmeyer.

459. Alat dan Bahan:

460. Alat : 461.

a. Timbangan Ohaus k. Tabung reksi
b. Petridis l. Kapas lemak
c. Corong m. Erlenmeyer
d. Tissue n. Rak tabung
 e. Bolpoin/Spidol o. Korek api
f. Lampu spirtus p. Koran
g. Kaki tiga q. Karet gelang
h. Kawat kasa r. Spatula
i. Gelas beker s. Autoklaf
j. Gelas ukur t. Kertas pH media
462.
463. Bahan : 464.
a. TSIA
b. Aquades
465.

466. Prosedur :

1. Menyiapkan media TSIA dan melihat komposisi serta penggunaannya.

2. Menghitung jumlah TSIA yang akan ditimbang melalui rumus :
v yang dicari
467. g yang dicari = v etiket x g etiket

30
468. = 1000 x 65 = 1,95gr

3. Menimbang TSIA 1,95gr menggunakan timbangan ohaus dengan cara :

a. Menghubungkan timbangan ohaus kelistrik
b. Tekan tombol on/of
c. Jika telah menunjukan angka 0,00 letakkan Petridis diatas timbangan
d. Tunggu sampai angka stabil
469.
470. Rincian penimbangan:
471. Berat petridish = 53,122
Berat sebenarnya =
472. Berat TSIA = 1,95 -
55,074
473. Berat seharusnya = 55,072
+
474.
= 55,072
475. = 1,97
4. Menutup bahan dengan Petridis agar bahan tidak menggumpal
5. Melarutkan TSIA dengan aquades kedalam erlenmeyer dengan menggunakan
corong
6. Memberihkan sisa agar yang ada di Petridis dengan sisa aquades selanjutnya
dimasukkan kedalam Erlenmeyer
7. Menutup Erlenmeyer dengan kapas lemak
8. Memanaskan larutan diatas lampu spirtus dengan penyangga kaki tiga,
sampai larutan tidak ada gumpalan atau titik pada Erlenmeyer
9. Tunggu hingga sedikit dingin
10.Menghitung pH TSIA hingga sesuai dengan pH TSIA sebenarnya yang tertera
pada etiket
11.Memasukkan larutan TSIA kedalam tabung reaksikurang lebih 2ml dengan
cara menghitung aquades dengan gelas ukur sebagai sampel/patokan
ukuran. Kemudian masukkan kedalam tabung reaksi dan larutan
 TSIAsamakan dengan tinggi aquades yang digunakan sebagai patokan
tersebut
12.Menutup satu-persatu tabung reaksi dengan kapas berlemak
13.Menggabungkan tabung reaksi dan menutupnya dengan Koran secara rapid
an diikat dengan karet gelang.
14.Mensterilkan tabung reaksiyang sudah terisi media pada suhu 1210C selama
15 menit didalam autoklaf.
476.
477. Kesimpulan :
478. Untuk membuat media TSIA 30ml dengan komposisi 65g/1cc diperlukan
serbuk TSIA sebanyak 1,95gr.

479.

480.

481.

482.

483.

484.

485.

486. LAPORAN PRAKTIKUM

487. Hari , Tanggal : Senin,4 Desember 2012

488. Tujuan : Untuk mengetahui pembuatan media VP

489. Prinsip : - Menghitung dan menimbang kebuthan media yang

diperlukan

- Melarutkan media tersebut dengan erlenmeyer dan

mengidentifikasi PH
- Melakukan sterilisasi dengan autoclave

490. Alat alat :

Timbangan analitik Pipet tetes

Batang pengaduk Pipet ukur
Petridise Bulb
Erlenmeyer Kertas PH indikator
Gelas ukur 100 ml Kapas berlemak
Corong Koran + karet
Autoclave Kulkas
Kaki tiga
 Spirtus
Kawat kasa

491. Bahan :

o Media Simon Citrat

o Aquades

492. Langkah kerja :

1. Menghitung dan menimbang kebutuhan bahan untuk membuat media VP

dengan rumus

493. Timbanglah sesuai kebutuhan , sebelumnya timbang petridish,

Kemudian akumulasikan dengan massa VP yang dibutuhkan

2. Larutkan media yang telah ditimbang dengan aquades secukupnya ,

sebelumnya aquades telah diukur sesuai volume yang diinginkan
menggunakan gelas ukur
3. Masukkan larutan tersebut kedalam erlenmeyer .Lakukan pembilasan pada
alat yang digunakan untuk melarutkan
4. Tutuplah dengan kapas berlemak ,panaskan sambil diputar erlenmeyer
5. Setelah panas, ceklah pH yang diinginkan pH dalam praktikum pH pada
larutan media terlalu basah sehingga perlu ditambahkan HCl ,tambahkan
sampai netral ( pH yang diingkan )
6. Bagilah larutan dalam erlenmeyer menjadi

494.

495.

496.

497.

498.

499.

500.

501.

502.

503.

504.
 505.

506.

507.

508.

509.

510.

511.

512.

513.

514.

515.

516. Laporan Pratikum Pembuatan Media

517. Pembuatan Media Simon Citrate

518.

519. Mata Kuliah : Media Reagensia

520. Dosen Pembimbing : 1. Suliati, S.Pd, S.Si, M.Si

521. 2. Tacik Idayati, A.Md.K

522. Tanggal Pratikum : 27 November 2012

523. Tingkat / Semester :I/I

524. Kelompok : B Non Reguler

525. Materi Pratikum : Pembuatan Media Simon Citrate

526. Alat dan Bahan :

527.

528. Alat : 538. Kapas Berlemak

529. Erlenmeyer 539. Neraca Analitik
530. Gelas Ukur 540. Kertas Indikator pH
531. Batang Pengaduk 541. Korek
532. Petridish 542. Autoclave
533. Corong 543. Rak Tabung
534. Kaki Tiga 544. Tabung Biokimia
535. Karet 545. Pipet
536. Koran 546. Aspirator
537. 547.
548. Bahan : 550.
18 Media padat simon citrate
19 Aquades
549.
551.

552.

553.

554. Langkah kerja:

20 Menghitung media simon citrate yang dibutuhkan dengan

menggunakan rumus:
555.
ml yang dibut h kan
X bobot pada etiket
556. ml pada etiket

557.
40 ml
X 23 gr
558. = 1000 ml

559.
560. = 0.92 gr
21 Menimbang petridish terlebih dahulu lalu catat, berat petridish,
setelah itu tambahkan dengan berat media yang akan ditimbang
561.
562. Berat Petridish : 49,54 gr
563. Berat Media Simon Citrate : 0,92 gr +
564. 50,46 gr
22 Siapkan peralatan yang akan digunakan untuk melarutkan media yaitu
gelas ukur, corong, spatula dan Erlenmeyer.
23 Larutkan media pada petridish dengan aquades sebanyak 40 ml ke
dalam Erlenmeyer
24 Setelah bersih, setelah selesai melarutkan, gulung kapas berlemak
untuk menutup Erlenmeyer yang telah berisi media.
25 Panaskan media cimon citrate diatas kaki tiga, hingga larut sempurna
tetapi tidak mendidih
26 Setelah bewarna jernih siapkan kapas berlemak untuk menutup tabung
biokimia
27 Pipet 2,5 ml aquades sebagai batas ukur penuangan media pada
tabung biokimia
28 Cek pH media cimon citrate yang telah dilarutkan, setelah pH pas,
tuang media simon citrate pada tabung biokimia yang telah diasiapkan
sesuai dengan batas ukur aquades
29 Tutup tabung dengan kapas berlemak yang telah disiapkan
30 Lakukan hal yang sama hingga semua media tertuang pada tabung
reaksi
31 Ikat semua media dengan menggunakan karet
32 Tutup dengan kertas Koran, lalu ikat dengan karet
33 Tuliskan identitas media
34 Sterilkan dengan menggunakan autoclave selama 15 menit, pada suhu
1210C
35 Setelah media steril, dinginkan, lalu masukan ke dalam lemari
pendingin
565.
566.

567.

568.

569.

570.

571.

572.

573.

574.

575.

576.

577.

578.

579.

580.

581.

582.

583.

584.

585.

586.

587.