LAPORAN HASIL PRAKTIKUM

PERTEMUAN / TANGGAL : Pertemuan III / 25 September 2018

MATERI / METODE : Media

PEMBIMBING : Tacik Idayanti, S.ST, S.Si

A. Tujuan

Untuk mengetahui bagaimana cara membuat media TSIA(Triple Sugar Iron Agar)

B. Prinsip

Media TSIA (Triple Sugar Iron Agar) memberikan informasi fermentasi mengenai
glukosa, pemanfaatan gula laktosa dan sukrosa, dan proses pernapasan anaerobik. Proses
pernapasan yang menggunakan belerang sebagai penerima elektron terakhir untuk
menghasilkan hidrogen sulfida. Informasi ini berguna dalam identifikasi hasil gram
negatif.

C. Alat dan Bahan

Alat :

1. Petridis 2 buah
2. Tabung biokimia 14 buah
3. Rak tabung
4. Gelas ukur
5. Autoklaf
6. Koran
7. Karet gelang
8. Batang Pengaduk
9. Labu erlenmeyer
10. Corong
11. Serbet
12. Kapas berlemak

Bahan :

1. Aquades 56 ml
2. TSIA(Triple Sugar Iron Agar) 3,64 gr
3. Agar Bakteriological 0,56 gr

D. Prosedur

1. Timbang TSIA sebanyak 3,64 gr lalu simpan di petridis

2. Timbang Agar Bakteriological sebanyak 0,56 gr lalu simpan di petridis
 3. Siapkan aquades sebanyak 56 ml untuk melarutkan TSIA dan Agar Bakteriological.
4. Larutkan TSIA dan Agar Bakteriological dengan batang pengaduk di petridis masing
masing dengan dituangkan aquades secukupnya hingga larut sempurna
5. Tuangkan TSIA dan Agar Bakteriological ke dalam labu erlenmeyer dengan menggu
nakan corong
6. Bilas petridis dan corong dengan menggunakan sisa aquades dan masukkan air
bilasan itu ke labu erlenmeyer.
7. Tutup labu erlenmeyer dengan kapas berlemak
8. Lalu goyang goyangkan labu erlemeyer agar tercampur sempurna
9. Setelah tercampur, lalu panaskan media hingga larut, pada saat pemanasan ini jangan
lupa untuk terus mengaduk media dengan cara mengangkat dan memutar labu erlen
meyer agar media tidak mendidih
10. Setelah dipanaskan, cek PH dengan kertas indikator apakah sudah sesuai atau belum.
Jika PH nya kurang asam maka ditambahkan HCl dan tambahkan NaOH apabila
kurang basa
11. Apabila PH nya sudah sesuai, segera tuangkan media ke dalam 14 tabung biokimia
dengan masing masing tabung sebanyak 4 ml dan tutup tabung dengan kapas
berlemak.
12. Jika semua tabung sudah terisi, lalu bungkus tabung dengan koran dan tali dengan
karet untuk kemudian di autoklaf selama 15 menit dengan suhu 121°C
13. Setelah selesai di autoklaf, letakkan tabung dalam posisi miring.
14. Apabila media sudah memadat dan sudah dingin maka media sudah siap digunakan

E. Kesimpulan

1. Untuk menghitung berat TSIA yang dibutuhkan, maka menggunakan rumus

V1 V2
m1 m2
2. Media yang masih panas setelah pemanasan harus segera dituangkan ke dalam
tabung biokimia sebelum media memadat. Karena apabila sudah memadat akan
susah untuk menuangkannya. Begitu juga saat setelah sterilisasi di autoklaf, segera
miringkan tabung sebelum media memadat.
3. Pada saat praktikum PH media yang dibuat lebih dari 7,4, maka kami tambahkan HCl
sebanyak 6 tetes.