KINETIKA MICHAELIS_MENTEN

Keterangan: E : Enzim, S: Substrat (reaktan), ES: ikatan sementara, P: Hasil reaksi Sistem enzim-substrat untuk tiap-tiap reaksi enzimatik bersifat khusus. Kestabilan ikatan enzim-substrat ditentukan oleh konstanta Michaelis (Km). Mekanisme untuk satu substrat enzim catalyzed reaksi. Dengan enzim (E) yang mengikat substrat (S) dan menghasilkan suatu produk (P). Pada tahun 1902, Victor Henri mengajukan suatu teori kinetika enzim yang kuantitatif, namun data eksperimennya tidak berguna karena perhatian pada konsentrasi ion hidrogen pada saat itu masih belum dititikberatkan. Setelah Peter Lauritz Srensen menentukan skala pH logaritmik dan memperkenalkan konsep penyanggaan (buffering) pada tahun 1909. kimiawan Jerman Leonor Michaelis dan murid bimbingan

pascadokotoralnya yang berasal dari Kanada, Maud Leonora Menten, mengulangi eksperimen Henri dan mengkonfirmasi persamaan Henri. Persamaan ini kemudian dikenal dengan nama Kinetika Henri-Michaelis-Menten (kadang-kadang juga hanya disebut kinetika Michaelis-Menten). Hasil kerja mereka kemudian dikembangkan lebih jauh oleh G. E. Briggs dan J. B. S. Haldane. Penurunan persamaan kinetika yang diturunkan mereka masih digunakan secara meluas sampai sekarang . Salah satu kontribusi utama Henri pada kinetika enzim adalah memandang reaksi enzim sebagai dua tahapan. Pada tahap pertama, subtrat terikat ke enzim secara reversible, membentuk kompleks enzim-substrat. Kompleks ini kadang-kadang disebut sebagai kompleks Michaelis. Enzim kemudian mengatalisasi reaksi kimia dan melepaskan produk;

Michaelis-Menten berkaitan plot v laju reaksi terhadap konsentrasi substrat [S].

Penentuan konstanta

Lineweaver-Burk pot Untuk menentukan kecepatan maksimum yang diperantarai reaksi enzim, serangkaian percobaan dilakukan dengan berbagai substrat konsentrasi ([S]) dan tingkat awal pembentukan produk diukur. 'Awal' di sini adalah diartikan bahwa laju reaksi diukur setelah periode waktu relatif singkat, selama yang membangun kompleks tetapi tetap konsentrasi substrat sekitar konstan dan semi-asumsi keadaan-tetap akan terus. pengukuran dapat kemudian akan diplot dalam sebuah Lineweaver-Burk plot, merencanakan kebalikan dari konsentrasi substrat terhadap kebalikan dari kecepatan awal

Nilai-nilai konstanta yang dikehendaki K plot. Nilai-nilai yang akurat untuk K

M

dan V
maks

maks

dapat dibaca secara langsung dari

dan V

hanya dapat ditentukan oleh regresi non-

linier dari data yang Michaelis-Menten. sementara berguna untuk visualisasi seharusnya tidak pernah menjadi sumber nilai aktual dari enzim konstan karena ketidakpekaan besar untuk kesalahan yang melekat pada semua plot terbalik. Harus satu dipaksa untuk memperoleh nilai dari alur terbalik, yang Hanes-Woolf plot adalah yang paling akurat.