Kinetika Reaksi Enzimatis

The uncatalyzed reaction of a reactant molecule a

substrate (S) to form a product (P)

The catalyzed reaction pathway:

Kinetika Reaksi Enzimatis
Kinetika Reaksi Enzimatis
Types of enzyme reactions:

1. Soluble enzyme-insoluble substrate

2. Insoluble enzyme-soluble substrate
3. Soluble enzyme-soluble substrate

Homogeneous catalysis
Enzymatic reaction mechanism
Enzymatic reaction

Mekanisme reaksi enzimatis:

1.

2.

3.
 Enzymatic reaction

Laju penghilangan substrat, -rS : (reaksi 1 dan 2)

Konsentrasi enzyme-substrate complex tidak dapat diukur, maka

kita perlu menggunakan PSSH
Enzymatic reaction

Substitusi (ES) ke persamaan laju penghilangan substrat:

???
atau jika disederhanakan:

Konsentrasi free enzyme (E ) tidak bisa diukur, yang hanya bisa

diukur adalah konsentrasi enzyme total (Et )
 Enzymatic reaction
Total concentration enzyme = constant

enzyme-substrate complex
free enzyme

atau dengan mensubstitusi (ES ) :

sehingga:
Enzymatic reaction

Substitusi (E) ke dalam persamaan laju penghilangan substrat atau

laju konsumsi substrat, -rS :

atau disederhanakan menjadi

Michaelis Menten equation

dengan : dan
Enzymatic reaction

Michaelis Menten equation dapat juga ditulis dalam bentuk:

dengan yaitu laju maksimum untuk konsentrasi

enzyme total
Enzymatic reaction

Vmax dan KM dapat

ditentukan dari
grafik
Enzymatic reaction

Pada saat konsentrasi substrat rendah, KM >> (S) :

reaksi orde satu terhadap substrat

Pada saat konsentrasi substrat tinggi, KM << (S) :

reaksi orde nol terhadap substrat

Enzymatic reaction

Jika laju reaksi setengah laju maksimum:

maka

dan
Enzymatic reaction
Contoh soal:

Mekanisme reaksi urea dengan urease diberikan pada

persamaan reaksi berikut:

Jika hasil penelitian memberikan data berikut ini:

Tentukan parameter Michaelis-Menten

Vmax, KM
Enzymatic reaction
Penyelesaian soal:
Buat Michaelis-Menten equation:

Jadikan dalam bentuk persamaan garis lurus (perhatikan,

sesuaikan dengan data yang diberikan):

=S

Plot versus , dari grafik dapat ditentukan

Vmax dan KM
Enzymatic reaction

Grafik Michaelis-Menten untuk hubungan antara laju dengan

konsentrasi substrat tidak selalu memberikan hasil yang
konsisten pada eksperimen dengan berbagai konsentrasi
substrat.

Michaelis-Menten equation kemudian diinversi dalam berbagai

bentuk persamaan.
Enzymatic reaction

Plot Lineweaver-Burk
Enzymatic reaction

Plot Eadie-Hofstee
Enzymatic reaction

Plot Hanes-Woolf
Enzymatic reaction

Reaksi enzymatic yang lebih rumit:

Dengan menggunakan PSSH untuk komplek ES dan EP:

Enzymatic reaction

Parameter KM dan Vmax dapat juga ditentukan dengan

menggunakan metoda integral (reaksi enzymatic dalam
reaktor batch):
Enzymatic reaction

Hasil integrasi:

Jika dibuat dalam bentuk jumlah yang terkonversi:

Enzymatic reaction

Atau dalam bentuk konsentrasi substrate, S:

Enzymatic reaction

Contoh:

Sebuah reaktor dengan volume 0,5 L digunakan untuk

mengkonversi urea menjadi amonia. Jika konsentrasi awal urea
adalah 0,1 mol/L dan konsentrasi urease adalah 0,001 g/L,
tentukan berapa lama waktu yang dibutuhkan untuk
mengkonversi 99% urea. Reaksi dilakukan dalam reaktor
batch dan suhu tetap.
Enzymatic reaction

Menggunakan persamaan berikut:

Untuk menentukan nilai KM dan Vmax.

Kemudian menggunakan persamaan

 Enzymatic reaction

Contoh:

Suatu reaksi enzimatik mengikuti persamaan Michaelis-Menten

sebagai berikut:

Hitunglah perubahan konsetnrasi substrat (S) yang diperlukan

untuk meningkatkan laju reaksi dari 10 menjadi 50 persen dari
laju maksimal.
 Enzymatic reaction

Contoh:

Tentukan parameter Michaelis-Menten dari data penelitian

berikut:
 Enzymatic reaction
Soal:

Limbah industri susu merupakan substrat yang baik untuk pertumbuhan

mikroba karena kandungan laktosa yang tinggi. Salah satu
pemanfaatan nya adalah untuk produksi sirop glukosa dengan
bantuan enzim beta galaktosidase.
Data laju reaksi enzimatik menyatakan gram laktosa terhidrolisis per
menit oleh i mg enzim.

Laktosa (g/L) 10; 16,5; 18 ; 19; 25; 30; 45; 75

Laju reaksi enzimatik 0,1; 0,12; 0,13; 0,14; 0,15; 0,16 ; 0,17 ; 0,18

Buatlah bentuk persamaan kinetika dari data yang di atas.