LAPORAN PRAKTIKUM

ISOLASI ASAM USNAT DARI USNEA THALLUS

Kelompok A7
Nama kelompok :
1.Cahya Wulandari
2.Ni. Gusti Ayu M.Ps
3.Denny Kuswanto
4. Muflihatun K.
5. Aminatush S.
6. Lolla Putri P.

I.

1100043
1100836
1120365
1130056
1130189
1130457

PENDAHULUAN

A. Tujuan Praktikum
1. Untuk mengetahui cara isolasi senyawa asam usnat dari kayu angin
(Usnea thallus)
2. Mengetahui cara identifikasi senyawa asam usnat dari kayu angin (Usnea
Thallus), yang meliputi:
Kromatografi lapis tipis
Titik lebur
max
B. Bahan dan Alat
a. Bahan yang dipakai :
-

Serbuk kayu angin (Usnea

thallus)

Etanol

Aseton
Methanol
Kloroform
Aquadem

Pengaduk
Api Bunsen
Water bath

- b. Alat yang Dipakai :

-

Statif
Beaker Glass
Klem

Kaki tiga
Magnetic stirer
Labu alas bulat

Silica Gel
Kasa
Chamber

Soxlet
GelasUkur
CorongGelas + kertas saring
Aluminium foil
Pipet tetes
KertasPerkamen

Pipakapiler
Corong Buchner
Corong panas
UV 365 nm
Corong gelas + kapas
Alat Thiele

C. Metode Pelaksanaan
C.1. Skema Kerja
-

Serbuk kayu angin 25 g

-

Ampas

- diekstraksi dengan
- EtOH sebanyak 2 sirkulasi
(300 ml) dengan
metode soxhletasi selama 8
jam
Ampas
Filtrat
Ampas
Di ekstraksi dengan aseton 200
- ml
dengan soxhletasi selama 6 jam
Filtrat
Ditambah aseton panas kmd
disaring panas

Filtrat
Ampas
- Menambahkan air 100ml ad terbentuk
pengendapan
suspensi, kenudian di
diamkan
semalam
Endapan
Filtrat
Disaring dengan corong Buchner
kemudian dicuci dengan air, selanjutnya
direkristalisasikan
dengan aseton
Kristal
Keringkan di lemari
asam
Kristal kering
Hitung % Asam usnat
- C.2. Identifikasi
1.

Kromatografi Lapis Tipis:

- Fase Diam
: Silika Gel
- Fase Gerak : Kloroform methanol (8:1)
- Penampaknoda
: Lampu UV 365 nm
Penyiapan fase diam
1,5 cm
Minimal 1 cm
10 cm

0,5 cm
A : Totolan tipis
B : Totolan lebih tebal

Penyiapan fase gerak

- Disiapkan fase gerak sejumlah 10 ml (kloroform:methanol=8:1). Ditunggu

sampai chamber jenuh (kertas saring basah sampai atas). Kemudian dilakukan
eluasi
1. Fase gerak
2. Kertas saring

Chamber
Lempeng Silica
gel Skema kerja
Lempeng Silika Gel -yang udah ditotoli
dengan cuplikan.
Dimasukan dalam -chamber yang
- fase gerak
sudah jenuh dengan
Dieluasi sampai
- batas
Dikeluarkan
5

Dibiarkan eluen menguap

Dideteksi dengan -UV 365 nm
2. Spektra UV-Vis
-

Cara kerja : Kristal Asam

Usnat kemudian dilarutkan dalam kloroform (baku induk). Kemudian dilakukan

perekaman kurva hubungan antara panjang gelombang dan serapan. Rekaman
dimulai dari panjang gelombang 220 nm 305 nm. maks yang didapat pada
280,8 nm
- Skema Kerja :

Masuk rentang (0,20,8 nm)

Zat murni

Kristal AsamUsnat
- Dilarutkan dalam kloroform ad
larut
Larutan
-- Menyiapkan alat spektro dan blanko.
-- Ambil larutan sampel, kemudian
- dimasukkan kedalam kuvet sampai
- kuvet
- Cek adsorbansi pada spektro
Hasil
Tidak masuk rentang
(0,2-0,8 nm)
Zat tidak murni
6

3. Penentuan titik lebur.

- Titik leleh adalah suatu dimana fase padat berada dalam keseimbangan
dengan fase cairnya. Titik lebur dari kristalin murni adalah sifat fisik yang
digunakan untuk mengidentifikasi sampel. Penentuan titik lebur dilakukan dengan
alat thiele atau alat lain.
- Skema :
Letakkan kristal asam usnat pada
Meletakkan objectglass di alat
Nyalakan alat dan posisikan kaca pembesar pada
kristal untuk mengamati lelehnya kristal
amati suhu saat kristal mulai meleleh sampai kristal
meleleh secara sempurna
-

Sesuai dengan teori

Senyawa murni

II.

- kristal asam usnat

Mencatat suhu lelehnya
dan membandingkan -titik leleh secara teoritis
Tidak sesuai dengan
teori
Senyawa tidak
murni

HASIL DAN PEMBAHASAN

-

Senyawa asam usnat diperoleh dari hasil isolasi pada tanaman Kayu

Angin (Usnea Thallus) dengan menggunakan cara isolasi soxhletasi karena asam
usnat tahan terhadap panas. Asam usnat memiliki titik leleh sebesar 204C. Metode

soxhletasi merupakan metode exhaustive yaitu isolasi sampai habis. Dalam isolasi
asam usnat ini, menggunakan 2 pelarut. Proses isolasi yang pertama, menggunakan
pelarut Etanol dan isolasi kedua menggunakan pelarut aseton karena asam usnat larut
dalam aseton.
-

Pembentukan atau pemurnian asam usnat digunakan proses kristalisasi

yaitu dengan menggunakan aseton panas yang kemudian ditambah dengan air.
-

Berikut hasil pemurnian asam usnat :

1. Organoleptis :
- Bentuk : serbuk
- Warna : putih
- Bau
: tidak berbau
-

Pada kelompok kami, asam usnat yang diperoleh berbentuk serbuk.

Seharusnya asam usnat berbetuk kristal jarum. Hal ini
mungkin dikarenakan waktu yang digunakan untuk proses
isolasi kurang lama karena pada jurnal seharusnya dilakukan
selamanya 6 jam tetapi pada kelompok kami hanya
dilakukan selama 4,5 jam sehingga kristal jarum asam usnat
tidak terbentuk dengan sempurna dan masih berada diantara
serbuk-serbuk tersebut.
-

2. Kromatografi Lapis Tipis (KLT)

noda8

Setelah selesai dimasukkan dalam chamber, tidak tampak noda

apapun. Kemudian dilihat menggunakan sinar UV 356, terlihat ada noda.

3. Spektrofotometri UV-Vis
-

Pada uji spektrofotometri UV-Vis ini untuk melihat panjang

gelombang dari asam usnat. Didapatkan puncak maksimum terletak panjang

gelombang 280,8 nm dengan adsorbansi 0,260581.
4. Titik leleh
Asam usnat secara teoritis memiliki titik leleh sebesar 204C. Asam
usnat kelompok kami tidak diperoleh nilai titik lelehnya. Mungkin karena
bentuk dari kelompok kami yaitu serbuk sehingga sulit untuk diamati
melelehnya kristal asam usnat, yang disebabkan karena kristalnya terjebak
didalam serbuk tersebut.
5. % Asam Usnat
- Bobot Usnea Thallus : 20,0005 g
- Bobot Asam Usnat : 1,0052 g
- % asam usnat
: 5,0259%

III.

KESIMPULAN
Dari hasil praktikum diatas, dapat disimpulkan bahwa asam usnat

kelompok kami :
Panjang gelombang (max = 280.8 nm) dengan adsorbansi (A = 0,260581)
Bukan termasuk senyawa murni
% asam usnat yang diperoleh sebanyak 5,0259%
Pada sinar UV tampak noda dengan flouresensi
-

DAFTAR PUSTAKA

Novi Kristanti, Alfinda, dkk. Buku Ajar Fitokimia. Surabaya : Airlangga

University
Gritter, Roy J, dkk. 1991. Pengantar Kromatografi. Bandung : penerbit ITB
Mitchell, William A. Plant Medicine in Practice. Washington : Churchill
Livingstone
-

10