MicroRNAs: Peran Baru dalam Patobiologi Preeklampsia

Pemahaman kita tentang bagaimana microRNAs (miRNAs) mengatur jaringan gen

dan mempengaruhi jalur molekuler yang berbeda yang menyebabkan berbagai
patologi manusia telah meningkat secara signifikan selama bertahun-tahun.
Sebaliknya, peran miRNA pada gangguan hipertensi terkait kehamilan seperti
preeklamsia (PE) baru mulai muncul. Makalah terbaru menyoroti bahwa hasil
kehamilan yang merugikan dikaitkan dengan ekspresi menyimpang dari beberapa
miRNA. Saat ini, upaya sedang dilakukan untuk menentukan fungsi biologis
miRNAs plasenta yang dapat menjelaskan kontribusi mereka terhadap kondisi
penyakit terkait kehamilan ini. Penemuan bahwa miRNAs stabil dalam sirkulasi
ditambah dengan fakta bahwa plasenta mampu melepaskan mereka ke sirkulasi di
exosomes menghasilkan banyak antusiasme untuk menggunakannya sebagai
biomarker. Dalam ulasan ini, kami akan meringkas temuan terbaru dari
pemahaman kita tentang regulasi miRNA dalam kaitannya dengan PE, gangguan
hipertensi kehamilan. Penekanan khusus akan diberikan untuk peran molekul
miRNA kunci seperti miR-210 dan miR-155 yang dikenal secara konsisten tidak
diatur pada wanita dengan PE.

Kata kunci: kehamilan, microRNAs, preeklamsia, angiogenesis, inflamasi

PENDAHULUAN

Preeklampsia (PE) adalah gangguan kehamilan multisistem yang mempengaruhi

sekitar 10 juta wanita secara global (1). PE diketahui berkontribusi secara
signifikan terhadap morbiditas dan mortalitas maternal dan perinatal. Setiap tahun
sekitar 76.000 kematian ibu dan 500.000 bayi meninggal karena gangguan
hipertensi kehamilan (2). PE didiagnosis oleh onset de novo hipertensi (≥140
mmHg tekanan darah sistolik atau ≥90 mmHg tekanan darah diastolik) pada atau
setelah midgestasi dan adanya salah satu dari gejala-gejala seperti proteinuria,
trombositopenia, insufisiensi ginjal, otak, atau gangguan penglihatan. (3). Karena
proteinuria tidak selalu berkorelasi dengan hasil, maka tidak lagi dianggap sebagai
fitur diagnostik klinis dari PE (4). Insiden PE terus meningkat karena faktor risiko
tambahan yang termasuk usia ibu lanjut, obesitas, diabetes, dll. (5). Potongan
bukti terbaru memprediksi risiko jangka panjang penyakit kardiovaskular seperti
stroke, hipertensi pulmonal, dan masalah metabolisme atau endokrin baik pada
ibu dan anak (6). PE dapat menyebabkan komplikasi yang lebih parah seperti
sindrom Hemolysis Elevated Liver enzymes and Low Platelet (HELLP) atau
eklampsia dengan kejang dan gangguan penglihatan. Saat ini, satu-satunya terapi
kuratif PE adalah persalinan bayi dan plasenta.

Penyebab yang tepat dari PE masih tetap sulit dipahami. PE diperkirakan terjadi
sebagai konsekuensi dari beberapa faktor, termasuk remodeling arteri spiral yang
rusak, stres oksidatif plasenta, disfungsi endotel, dan inflamasi sistemik. Pada
kehamilan normal, sitotrofoblas (CTBs) bermigrasi melalui desidua dan
miometrium untuk memasuki arteri spiral maternal dari endotelium dan media
tunika yang memasok darah ke janin yang sedang berkembang. Hal ini
menyebabkan arteri menjadi pembuluh darah besar dengan resistansi rendah yang
memfasilitasi aliran darah yang cukup ke plasenta. Pada tahap pertama PE, CTB
gagal menembus miometrium membuat pembuluh yang sempit menghasilkan
hipoperfusi plasenta yang menyebabkan remodeling abnormal arteri spiralis (7).
Tahap kedua penyakit ini terjadi karena kegagalan remodeling arteri spiral dan
hipoperfusi yang mengarah ke hipoksia plasenta, stres oksidatif, stres endoplasmic
reticulum (ER), dan pelepasan berikutnya dari beberapa faktor plasenta ke dalam
sirkulasi ibu (3). Pelepasan faktor-faktor ini dan interaksinya dengan hasil
vaskular ibu dalam disfungsi endotel, karakteristik khas PE. Selain itu, faktor-
faktor ini juga berkontribusi terhadap inflamasi sistemik yang berlebihan dan
ketidakseimbangan sistem imun yang menyebabkan manifestasi klinis PE.

Terlepas dari penyebab yang memulai, plasenta diketahui memainkan peran

penting dalam inisiasi dan perkembangan PE. Penghapusan plasenta
menyebabkan berhentinya gejala klinis PE. Oleh karena itu, penting untuk
memahami bagaimana jaringan pengaturan gen dikontrol dalam plasenta selama
PE. Dalam beberapa tahun terakhir, microRNAs (miRNAs) telah mengumpulkan
banyak perhatian karena mereka telah muncul sebagai kelas baru dari regulator
ekspresi gen. Dalam ulasan ini, kita akan membahas pemahaman kita saat ini
tentang peran miRNAs yang paling konsisten disregulasi, miR-210 dan miR-155
di PE.

MiRNAs DAN BIOGENESISNYA

MicroRNAs kecil (~ 22-25 nt), endogen, rantai tunggal, RNA non-coding yang
mengatur ekspresi gen istimewa dengan mengikat ke wilayah yang tidak
diterjemahkan (3′UTR) dari gen target (8). Molekul regulator ini memainkan
peran penting dalam regulasi ekspresi gen pasca-transkripsional dengan
menyebabkan penghambatan translasi atau pembelahan mRNA sehingga
mendiamkan ekspresi gen tidak seperti gen penyandi protein (9). Ada sekitar
2.500 miRNA dan 1.000 dari ini divalidasi pada manusia saja (10). Satu miRNA
dapat mengikat beberapa target dan menghasilkan penekanan translasi dari banyak
gen. Satu miRNA terlibat dalam beberapa proses penting seperti pengembangan,
diferensiasi sel, dan migrasi untuk beberapa nama. Tidak mengherankan miRNA
juga berkontribusi pada konsepsi dan pemeliharaan kehamilan (11) dengan
mengatur proses kunci seperti peradangan (12), toleransi imun (13), angiogenesis
(14), dan apoptosis (15). Ekspresi yang menyimpang dari miRNAs ditemukan
pada beberapa gangguan terkait kehamilan seperti PE, pembatasan pertumbuhan
intrauterin, dan kelahiran prematur.

Biogenesis miRNA terjadi melalui proses banyak langkah dan diatur oleh
seperangkat protein dan enzim pada berbagai langkah seperti transkripsi, langkah-
langkah pemrosesan, atau pergantian miRNA. miRNAs pertama kali ditranskripsi
sebagai transkrip primer panjang oleh RNA pol II. Sekuens miRNA terletak di
dalam struktur jepit rambut dari transkrip primer. Pada hewan, nukleus enzim
RNase III, Drosha, memotong miRNA primer (pri-miRNA) meninggalkan sekitar
70 nt urutan jepit rambut yang disebut prekursor miRNA atau (pre-miRNA) di
dalam nukleus. Kemudian, eksportin-5 mengekspor pre-miRNA keluar dari
nukleus untuk dibelah oleh Dicer-1, sitoplasma enzim RNase III. Ini membentuk
22-nt-long double-stranded duplex. Dupleks ini kemudian dikaitkan dengan
protein keluarga Argonaute (inti dari RNA-induced silencing complex atau RISC).
Lengan dupleks yang dimasukkan ke dalam RISC memediasi hubungan dengan
mRNA target dengan pasangan basa komplementer. Kedua rantai miRNA matang
memiliki potensi untuk mengikat dan mengatur target mereka, tetapi satu rantai
biasanya terakumulasi pada tingkat yang lebih tinggi secara signifikan yang
merupakan miRNA yang dominan secara fungsional dan produk minor sering
terdegradasi secara preferensial. GW182 kemudian berinteraksi dengan protein
Ago dan mempromosikan penghambatan translasi dan degradasi mRNA (9, 16).
GW182 dapat bertindak sebagai perancah untuk berinteraksi dengan protein
pengikat poli A (PABP) dan bersaing untuk mengikat PABP dengan faktor
inisiasi eukariotik 4 G. Karena interaksi ini, mRNA tidak diedarkan dan ini
mengarah pada penurunan efisiensi penerjemahan. MRNA yang dihasilkan
selanjutnya ditargetkan untuk degradasi cepat oleh kompleks deadenilase (16). Ini
diikuti oleh decapping dari mRNA dan membuatnya rentan terhadap pembelahan
exonucleolytic. Konsentrasi seluler miRNA diharapkan berkorelasi dengan
aktivitas represifnya. Ekspresi tinggi miRNA dianggap dapat menekan translasi
targetnya lebih banyak dan, oleh karena itu, lebih fungsional secara fungsional
daripada yang di ekspresi rendah miRNA. Hal ini didukung oleh beberapa
pengamatan overekspresi miRNA yang menyebabkan penurunan tergantung dosis
pada tingkat mRNA target (17-19).

Selain jalur kanonik ini, ada jalur miRNA lain yang baru-baru ini ditemukan
(Gambar 1). Mirtrons, miRNA atipikal, dihasilkan dari intron hairpin pendek yang
dikeluarkan oleh mesin splicing. Kemudian, mereka dilinierisasi oleh enzim lariat
debranching dan selanjutnya dilipat menjadi pre-miRNA. Mirtrons memotong
pembelahan Drosha tidak seperti jalur kanonik. Namun, mereka diproses lebih
lanjut dengan cara yang sebanding (20). Jalur lain yang baru-baru ini ditemukan
menunjukkan pembelahan langsung pra-miRNA oleh Ago2 tidak Dicer seperti
pada jalur kanonik tradisional (21). Fungsi miRNAs selama kehamilan dan
kondisi penyakit terkait kehamilan saat ini tidak diketahui.
Pentingnya mesin biogenesis miRNA disorot oleh pengamatan bahwa kurangnya
bahkan protein tunggal dalam jalur ini menyebabkan cacat yang sangat besar pada
organ reproduksi yang berbeda. Drosha (enzim RNase III nuklir) bertanggung
jawab untuk membelah pri-miRNA ke pra-miRNA. Jika Drosha secara khusus
dihempaskan dalam sel spermatogenik dalam testis postnatal menggunakan Cre-
Lox, spermatogenesis terganggu (22). Peran protein lain DGCR8 yang terlibat
dalam jalur biogenesis miRNA yang berinteraksi dengan Drosha untuk
menghasilkan pra-miRNA dalam nukleus ditentukan dengan menggunakan model
tikus knockout yang bersyarat. Kim et al. menunjukkan bahwa tikus knockout
terkontrol DGCR8 yang diproduksi menggunakan progesteron receptor (PR)-Cre
diperlukan untuk perkembangan uterin dan kesuburan (23). Selain itu, miRNA
yang bergantung pada DGCR8 diperlukan untuk modulasi imun, siklus
reproduksi, dan respon hormon steroid. Hilangnya Dicer (enzim sitoplasma
RNase III) menyebabkan kematian mematikan dan sangat penting untuk
mempertahankan populasi sel induk selama perkembangan tikus awal (24). Semua
molekul kunci dari jalur biogenesis miRNA juga telah ditemukan diekspresikan
dalam plasenta (25). Ago2 telah terbukti penting untuk tahap awal embriogenesis
tikus (26). Mutasi pada Ago2 pada tikus menyebabkan cacat pada perkembangan
plasenta dan kematian embrio pada midgestasi (27). Apakah protein biogenesis
miRNA lain juga memainkan peran penting dalam perkembangan plasenta tetap
tidak terjawab. Hal ini sebagian besar disebabkan oleh fakta bahwa kekurangan
tikus dalam salah satu protein miogen biogenesis sering menunjukkan cacat
perkembangan awal sebelum pembentukan plasenta.

MiRNAs PLACENTAL DAN FUNGSINYA

MicroRNAs berlimpah diekspresikan di plasenta selama kehamilan dan sebuah

penelitian oleh Liang et al. menunjukkan profil miRNA plasenta (28). Sumber
utama miRNA plasenta adalah trofoblas villi (29, 30). MiRNA plasenta mamalia
muncul terlambat selama evolusi. Plasenta mengekspresikan miRNA pada
berbagai tahap kehamilan, termasuk beberapa yang dinyatakan secara spatio-
temporal. Ini menunjukkan bahwa miRNA memainkan peran dalam
mengendalikan gen dan juga dimodulasi oleh beberapa faktor tambahan seperti
lingkungan, sinyal, dan jalur epigenetik.

Menariknya, beberapa miRNAs baru secara khusus dinyatakan dalam plasenta

(31). MiRNA spesifik-plasenta ini sebagian besar terkelompok dalam tiga
kelompok seperti klaster kromosom 14 miRNA (C14MC), C19MC, dan klaster
miR-371-373. Sebagian besar miRNA trophoblastik (trophomiRs) diekspresikan
dari kluster gen C14MC yang mencakup sekitar 40 kb yang mengandung 52
miRNA dan diturunkan secara eksklusif dari gen yang dicetak secara maternal.
Klaster ini sangat diekspresikan pada trimester pertama dan secara bertahap
kurang diekspresikan pada trimester ketiga. Klaster sebagian besar diekspresikan
dalam embrio dan jaringan plasenta dan diketahui terlibat dalam pengaturan
diferensiasi seluler dan takdir (31).

Kelompok gen lain yang ditemukan pada kromosom 19, C19MC membentang
sekitar 100 kb DNA genomik dan menyimpan 46 gen miRNA intronik yang
mengekspresikan 58 spesies miRNA (32). Mirna dari klaster yang satu ini adalah
yang paling melimpah di trofoblas dalam plasenta manusia. Untuk miRNA
C19MC, alel yang diwariskan secara paternal hanya diekspresikan dalam plasenta.
Dalam plasenta, miRNA C19MC diekspresikan sedini minggu 5 kehamilan dan
ekspresi meningkat saat kehamilan meningkat. Hromadnikova dkk. melaporkan
peningkatan regulasi sirkulasi C19MC miRNAs (miR-516-5p, miR-517*, miR-
520a*, miR-525, dan miR526a) pada pasien dengan PE (33). Temuan terbaru oleh
Delorme-Axford et al. menunjukkan bahwa tingkat ekspresi yang tinggi dari
kelompok C19MC pada trofoblas manusia primer memberikan resistansi terhadap
infeksi oleh virus (34). miRNA ini berfungsi dengan menginduksi autophagy
dalam sel-sel plasenta. Menariknya, overekspresi dari gugus C19MC juga
menganugerahkan resistensi virus terhadap sel-sel non-plasental yang sangat
menunjukkan bahwa kelompok ini penting untuk mengurangi serangan patogen
viral.
Klaster miR-371-373 adalah klaster miRNA kecil pada manusia dan klaster
homolog miR-290-295 juga ditemukan pada tikus. Menariknya, klaster miR-371
juga ditemukan pada kromosom 19 dalam wilayah 1.050 bp yang berdekatan
dengan klaster C19MC. Klaster ini sangat diekspresikan dalam sel trofoblas
primer dan meningkat pada trimester ketiga. Klaster ini juga dinyatakan dalam
garis kuman primordial embrio awal, garis kuman komponen stem cell dari testis
dewasa dan garis stem cell dari garis keturunan tikus awal. Sebuah tinjauan rinci
tentang bagaimana miRNA plasenta spesifik yang diekspresikan secara jelas ini
terlibat dalam komplikasi kehamilan dapat ditemukan dalam publikasi oleh
Morales-Prieto et al. (31) dan Mouillet dkk. (35).

Mengingat miRNA memainkan peran penting dalam beberapa proses, ekspresi

plasenta yang menyimpang dari miRNA akan berkorelasi dengan beberapa
penyakit patologis termasuk PE. Data eksperimen terbaru menunjukkan bahwa
angiogenesis, proliferasi trofoblas, dan toleransi kekebalan yang merupakan
proses kunci dalam PE diatur oleh miRNAs. Angiogenesis diketahui memainkan
peran penting dalam patogenesis PE dan beberapa miRNA (angiomiRs) diketahui
untuk mengubah jalur angiogenik. miR-16 dan miR-29 adalah faktor pertumbuhan
endotel vaskular (VEGF)-A dan pengurangan VEGF-A kemudian menghambat
migrasi sel-sel endotel vena umbilikalis (HUVECs) (36-38). miR-494 menangkap
transisi fase pertumbuhan dan sintesis (transisi G1/S) dengan menargetkan cyclin-
dependent kinase 1 (CDK1) dan cyclin D1 (CCND1) (39). Supernatan dari miR-
494 overexpressing dMSCs merusak pembentukan kapiler HUVEC dengan
menekan VEGF. Selanjutnya, miR-17, miR-20a, dan miR-20b overexpression
menyebabkan migrasi cytotrophoblast yang rusak dan remodeling arteri spiral
dengan menargetkan Ephrin B2 dan Ephrin B4 (37, 40). miR-125b-1-3p, miR-
328, dan miR-21 juga terlibat sebagai angiomiRs. AngiomiRs lain seperti miR-
210 dan miR-155 akan dibahas secara rinci nanti dalam ulasan ini.

Kegagalan invasi trofoblas mengarah ke cacat pada remodeling arteri spiral, tanda
kehamilan PE. Beberapa miRNAs, termasuk miR-16, miR-29b, miR-34a, miR-
155, miR-210, dan miR-675, menurunkan proliferasi dan migrasi trofoblast.
Ekspresi rendah miR-34a dalam PE dikaitkan dengan peningkatan SERPINA3
yang terlibat dalam invasi trofoblas (41). Sebaliknya, miR-378a-5p, miR-376c,
dan miR-21 telah terbukti meningkatkan proliferasi dan invasi trofoblas melalui
modulasi jalur sinyal nodal (42-44). Studi klaster lain adalah klaster miR-17-92
yang dapat mengatur diferensiasi trofoblas manusia primer (45). Namun,
penghapusan klaster miR-17-92 in vivo pada tikus menimbulkan pups kecil yang
akhirnya mati saat lahir (46).

Selama kehamilan normal, lingkungan imun yang tolerogenik diatur oleh

beberapa regulator imun miRNAs. Klaster miR-17-92, miR-146a, miR-155, dan
miR-223 diketahui disregulasi dalam PE dan terkait dengan banyak sel kekebalan
tubuh seperti makrofag, sel dendritik, dan fungsi Tregs (47). miR-126 juga
memodulasi respon imun bawaan di plasmocytoid DC (48). Menariknya, ekspresi
TGFβ3 yang tinggi merangsang miR-494 pada stem cell mesenkim desidua
(dMSCs) yang pada gilirannya menghambat polarisasi makrofag M2 dengan
mengurangi produksi PGE2 (49). miR-181a ditemukan meningkat dalam MSC
dari PE parah dibandingkan dengan pasien normal dan blok jalur TGFβ (50).
HLA-G diketahui terlibat dalam mengembangkan toleransi kekebalan pada
kehamilan dan miR-152 telah terbukti menekan ekspresi HLA-G dalam sel-sel
koriokarsinoma JEG-3. Selanjutnya, miR-152 berperan sebagai peningkat respon
imun dengan meningkatkan NK cell-mediated cytolysis (51). Ekspresi miR-152
telah ditemukan lebih tinggi dan sebaliknya, ekspresi HLA-G menjadi lebih
rendah dalam PE. Dengan demikian, tergoda untuk berspekulasi bahwa miR-152
dapat memainkan peran dalam mengatur ekspresi HLA-G dalam PE. Penelitian
lebih lanjut diperlukan untuk sepenuhnya memahami peran miRNA dalam
toleransi imun selama kehamilan. Dalam ulasan ini, kita akan membahas tentang
peran miR-210 dan miR-155 yang secara konsisten terlihat meningkat pada pasien
PE dan jalur penting yang mereka pengaruhi.

PERAN miR-210 DALAM PE

Telah dilaporkan bahwa multiple miRNAs ditingkatkan atau diturunkan dalam
plasenta/darah/serum/plasma wanita dengan PE dibandingkan dengan wanita
hamil normal. Secara khusus, satu miRNA, miR-210 telah terbukti diekspresikan
secara berlebihan di plasenta preeklampsi oleh beberapa kelompok independen
(52, 53). Pertama, Pineles et al. menyaring 157 miRNA menggunakan qRTPCR
dan menunjukkan bahwa miR-210 ditingkatkan dalam plasenta PE. Beberapa
penelitian selanjutnya oleh Zhu et al., Walikota-Lynn dkk., dan Enquobahrie dkk.,
Lebih menegaskan peningkatan ekspresi miR-210 dalam plasenta wanita PE (53-
55). miR-210 adalah miRNA intronic yang terletak di dalam lokus genetik
transkrip AK123483. Faktor transkripsi yang mengatur ekspresi miR-210
termasuk faktor hipoksia-inducible (HIF-1α, HIF-2α), dan NF-κB (56). Sementara
telah dilaporkan bahwa ekspresi miR-210 plasenta meningkat pada pasien PE ada
beberapa target miR-210 yang telah diidentifikasi dalam etiologi PE. Beberapa
penelitian hingga saat ini dijelaskan sebagai berikut. miR-210 telah sangat terkait
dengan hipoksia yang mengarah ke invasi trofoblas yang tidak memadai dan
remodeling arteri spiral abnormal berkontribusi terhadap PE (57) dan meningkat
karena (HIF-1α) yang mengikat ke elemen responsif HIF pada promotor
proksimal 400 bp upstream (58 ). Dengan overexpressing miR-210, HIF
mengontrol respon terhadap hipoksia pada tingkat sel dengan mengatur gen yang
terlibat dalam proses yang berbeda seperti angiogenesis, erythropoiesis, proliferasi
sel, diferensiasi, apoptosis, peradangan, dan metabolisme.

Zhang dan rekan menunjukkan bahwa ekspresi miR-210 meningkat pada plasenta
pasien PE dan juga secara cepat diinduksi oleh hipoksia di jalur sel trofoblas (57).
Kelompok ini menemukan bahwa miR-210 tidak hanya diatur oleh HIF-1α tetapi
juga oleh NF-kB p50. Baik ephrin-A3 (EFNA3) dan homeobox-A9 (HOXA9)
dikenal untuk fungsi biologis yang berbeda seperti migrasi sel dan remodeling
vaskular dan pengembangan selama embriogenesis adalah target langsung miR-
210. Ekspresi EFNA3 ditekan sendiri oleh represi translasi, tetapi ekspresi
HOXA9 ditekan oleh degradasi mRNA dan represi translasi. Kelompok ini juga
menemukan bahwa kedua target menurunkan regulasi plasenta dengan PE
dibandingkan dengan plasenta dari pasien kontrol. Ekspresi ektopik miR-210
dalam sel-sel trofoblast dilemahkan migrasi sel dan invasi.

Satu studi berhipotesis bahwa overexpression miR-210 akan menyebabkan

disfungsi mitokondria pada PE. Ketika mitokondria disfungsional, mereka
menghasilkan sejumlah besar spesies oksigen reaktif (ROS) yang bisa menjadi
pemicu PE. Selama kehamilan normal, ada keadaan stres oksidatif dan ini hanya
meningkat selama kehamilan yang diderita oleh PE. ROS, bersama dengan
estrogen dan beberapa sitokin inflamasi, terlibat dalam menstabilkan HIF-1α
selama normoxia. Muralimanoharan dkk. menemukan disfungsi mitokondria pada
plasenta dengan PE yang dikaitkan dengan peningkatan produksi ROS dan
stabilisasi HIF-1. Mereka juga menemukan peningkatan regulasi miR-210 dan
penurunan ISCU (iron-sulfur klaster scaffold homolog) dalam plasenta PE (59).
Data mereka menunjukkan bahwa peningkatan regulasi miR-210 merepresi fungsi
mitokondria melalui ISCU terkait mitokondria. Kelompok lain mengevaluasi
hubungan antara miR-210 dan ISCU (60). Mereka menemukan korelasi terbalik -
ketika ada ekspresi berlebihan miR-210 di garis sel trofoblas mereka ada
penurunan ISCU. Lee et al. juga menunjukkan peningkatan deposisi besi di Swan-
71 trofoblas setelah hipoksia diinduksi. Mereka juga menemukan akumulasi besi
intraseluler dan penurunan invasi matrigel setelah menghambat ISCU melalui
transfeksi trofoblas Swan-71 yang menunjukkan bahwa penurunan ISCU oleh
miR-210 dapat menghambat invasi trofoblas, prekursor umum untuk PE.
Penelitian ini merupakan temuan patofisiologi lain yang menghubungkan miR-
210 dan PE.

Studi lain menggunakan screening throughput tinggi (HTS) berbasis profil

miRNA placenta manusia menunjukkan miR-210 akan meningkat pada pasien PE.
Enzim steroidogenik, hidroksisteroid (17-β) dehidrogenase 1 yang diekspresikan
terutama dalam syncytiotrophoblasts villi korion plasenta adalah target langsung
miR-210. Yang penting, tingkat plasma hidroksisteroid (17-β) dehidrogenase
sebagian besar berkurang sebelum onset PE meningkatkan kemungkinan
menggunakannya sebagai biomarker (61).
Faktor modulator saluran kalium 1 (KCMF1) diprediksi menjadi target miR-210
menggunakan algoritma prediksi target. Meskipun penelitian lain menunjukkan
bahwa KCMF1 terlibat dalam proliferasi, migrasi, dan invasi pada kanker epitel;
Namun, perannya dalam plasenta tidak diketahui. Luo dkk. pertama menunjukkan
bahwa tingkat KCMF1 secara signifikan lebih rendah pada plasenta pasien PE dan
berbanding terbalik dengan ekspresi miR-210 (62). KCMF1 secara eksperimental
divalidasi sebagai target langsung miR-210 menggunakan uji luciferase ganda
dalam sel HTR8/SVneo. Selain itu, faktor inflamasi tumor necrosis factor-α
(TNF-α) dapat meningkatkan ekspresi miR-210 sambil menekan level KCMF1.
Oleh karena itu, ekspresi miR-210 dapat berkontribusi pada terjadinya PE dengan
mengganggu pensinyalan yang dimediasi KCMF1 pada plasenta manusia.

Peran miR-210 dalam angiogenesis, metabolisme besi, dan invasi trofoblas telah
diketahui dengan baik tetapi peran miR-210 dalam pengaturan gen yang terkait
dengan respon imun baru mulai muncul. Kami melaporkan bahwa aktivasi toll-
like receptor 3 (TLR3) melalui poli I:C (meniru RNA virus rantai ganda sintetis)
menghasilkan gejala hipertensi seperti PE, disfungsi endotel, dan proteinuria pada
tikus hanya ketika hamil. Kami menunjukkan bahwa baik HIF-1α dan NF-κB p50
mengikat promotor miR-210 dan menginduksi ekspresinya, juga secara signifikan
meningkat pada poli I:C mengobati plasenta tikus. Pengobatan poli I:C pada CTB
manusia secara signifikan meningkatkan kadar HIF-1α, NF-κB p50, dan miR-210.
Selain itu, kami menunjukkan bahwa miR-210 secara langsung menargetkan
transduser sinyal dan aktivator transkripsi 6 (STAT6) yang menghasilkan
penurunan produksi IL-4 yang menyebabkan keseimbangan pro-produksi sitokin
anti-inflamasi dalam mendukung sitokin pro-inflamasi. Temuan ini menunjukkan
bahwa dalam model tikus preeklampsi yang diinduksi TLR3, ekspresi miR-210
plasenta diinduksi melalui HIF-1α dan NF-κB p50 yang dapat berkontribusi pada
pengembangan PE (63). Studi-studi ini diambil bersama-sama menunjukkan
bahwa banyak fungsi miR-210 yang mempengaruhi jalur yang berbeda selama
PE, seperti disfungsi mitokondria, angiogenesis, dan sistem kekebalan tubuh.

PERAN miR-155 DALAM PE

MiRNA lain yang terkait dengan PE adalah miR-155 (64–66). Ini diproses pada
manusia dari akson 3 dari non-protein coding B-cell integration cluster (BIC)
RNA (67). Ekspresinya diinduksi dalam sel-B, sel-T, dan makrofag teraktivasi
dan beberapa penelitian telah menemukannya diekspresikan berlebih dalam
beberapa tipe limfoma sel-B (24).

Zhang et al. melaporkan bahwa overexpression miR-155 berkontribusi terhadap

PE dengan menurunkan regulasi protein kaya cysteine 61 (CYR61), faktor
pengatur angiogenik yang penting selama kehamilan (68). Knockout pada gen
CYR61 tikus yang ditargetkan menghasilkan kematian embrio karena insufisiensi
vaskular plasenta dan integritas pembuluh darah yang terganggu (69). Telah
ditunjukkan dalam penelitian sebelumnya bahwa gen CYR61 secara signifikan
menurun pada plasenta manusia dengan PE (70). CYR61 dikenal untuk
menginduksi ekspresi VEGF dan kelompok ini berhipotesis bahwa penurunan
CYR61 akan menyebabkan penurunan kadar VEGF pada plasenta dengan PE.
miR-155 menargetkan wilayah dalam urutan 3′UTR gen CYR61 yang mengarah
ke penurunan kadar CYR61 pada plasenta PE. Temuan ini mengusulkan jalur
miR-155-CYR61-VEGF dimana overexpression miR-155 menyebabkan
penurunan CYR61 yang mengarah ke penurunan kadar VEGF, oleh karena itu,
mengurangi angiogenesis plasenta.

Liu et al. menunjukkan bahwa ekspresi plasenta miR-155 meningkat dan faktor
pertumbuhan endotel vaskular (VEGF) menurun pada model tikus PE yang
diinduksi oleh L-nitroarginine methyl ester (L-NAMA) (71). Karena VEGF
memainkan peran penting dalam pembentukan lumen vaskular selama
angiogenesis tampaknya menjadi pemain kunci dalam kehamilan. Penurunan
VEGF menyebabkan berkurangnya angiogenesis yang dihubungkan dengan PE
karena pembentukan jaringan vaskular yang tidak tepat dan berfungsi seperti
invasi rendah sel trofoblast yang menyebabkan iskemik plasenta. Kelompok ini
juga menemukan bahwa peningkatan regulasi miR-155 berbanding terbalik
dengan penurunan kadar VEGF dalam plasenta yang menunjukkan bahwa miR-
155 menginduksi penurunan regulasi ekspresi VEGF yang berkontribusi pada
pengembangan PE.

Beberapa peneliti telah menunjukkan miR-155 melemahkan proliferasi

trophoblast melalui regulasi cyclin D1 di HTR-8/SVneo sel trofoblas ekstravilli.
Ini juga menargetkan interleukin-1 receptor-associated kinase M (IRAKM), NF-
kB inhibitor interacting Ras-like 1 (NKIRAS1), dan phosphatase and tensin
homolog (PTEN). Dengan menargetkan regulator ini, miR-155 meningkatkan
jalur inflamasi AP-1/NF-kB (72). Juga, peningkatan ekspresi miR-155 telah
terlibat dalam invasi plasenta dangkal seperti yang terlihat pada PE (73).

miR-155 juga mengatur ekspresi reseptor angiotensin II tipe 1 pada sel-sel endotel
vena umbilikal dari wanita dengan PE berat (74). Angiotensin II (Ang II) dapat
memainkan peran penting dalam patogenesis PE dengan menginduksi inflamasi
tingkat rendah pada sel-sel endotel, sel-sel vaskular, sel-sel otot polos, dan sel-sel
imun. miR-155 juga dikaitkan dengan pengaturan ekspresi faktor sistem renin-
angiotensin. Dalam penelitian ini, Cheng et al. HUVECs terisolasi dari wanita
hamil normal dan pasien dengan PE berat. Selain itu, peningkatan yang signifikan
dalam Ang II dan AT1R dalam HUVECs dan mengurangi ekspresi miR-155 dari
pasien PE dibandingkan dengan wanita hamil normal menunjukkan hubungan di
antara mereka. Selain itu, penulis menunjukkan bahwa miR-155 secara langsung
menargetkan AT1R. Data ini menunjukkan bahwa pasien dengan PE mengalami
penurunan ekspresi miR-155 yang mengarah pada peningkatan AT1R, sehingga
mempengaruhi ekspresi sistem renin-angiotensin yang berkontribusi pada
pengembangan PE.

O’Connell et al. menemukan bahwa miR-155 adalah target umum mediator

inflamasi, dan karena dikenal sebagai onkogen, temuan mereka berpotensi
mengidentifikasi hubungan antara peradangan dan kanker (75). Dalam penelitian
mereka, mereka menemukan bahwa miR-155 diinduksi oleh TLR di makrofag. Ini
berarti miR-155 adalah komponen respon makrofag primer untuk berbagai jenis
mediator inflamasi. miR-155 dikenal untuk meningkat dalam plasenta pasien
dengan PE, dan penelitian sebelumnya telah menunjukkan hubungan potensial
antara miR-155 dan PE karena peradangan pada antarmuka ibu-janin (68). Untuk
mendukung, baru-baru ini miR-155 dan IL-17A ditemukan meningkat pada akhir
onset plasenta dan serum PE (76). Tabel 1 merangkum miRNA yang terkait
dengan plasenta yang tidak diregulasi selama PE.

Di masa depan, bagaimana miRNA berkontribusi pada disfungsi endotel dan

hipertensi selama kehamilan yang mengarah ke PE perlu ditangani (77). Secara
khusus, untuk menggambarkan peran miRNAs individu dalam studi tambahan PE
in vivo memanfaatkan model overexpression plasenta-spesifik atau gen knockout
diperlukan untuk mengatasi pertanyaan-pertanyaan yang tidak terjawab.

KESIMPULAN

Penemuan miRNAs memperluas pengetahuan kita tentang bagaimana mereka

mengatur ekspresi gen dengan memodulasi beberapa proses seluler utama. Saat
ini, penelitian sedang dilakukan untuk menggunakan biomarker berbasis miRNA
sebagai alat diagnostik untuk berbagai penyakit termasuk PE. Sejumlah besar
penelitian telah dilakukan menggunakan profil miRNA ditambah dengan studi
validasi miRNAs ini dalam darah/serum/plasma pasien PE. Di masa depan,
keberhasilan menggunakan miRNA sebagai biomarker dalam PE akan sangat
bergantung pada penentuan ekspresi miRNA pada berbagai tahap kehamilan dan
bagaimana hal itu dapat mengubah kekuatan memprediksi perkembangan
penyakit serta hasil klinis. Pendekatan diagnostik lain yang mendapatkan
perhatian adalah penentuan konsentrasi dan kandungan miRNA dari exosomes di
seluruh kehamilan yang dapat berfungsi sebagai penanda awal untuk PE (78).
Selain itu, menjelaskan peran fungsional miRNA yang tidak diregulasi dapat
mengidentifikasi jalur penting yang terlibat dalam PE.

Kurangnya data dari peran miRNAs dalam PE saat ini membatasi penggunaannya
dalam terapi. Beberapa miRNA yang terlibat dalam penyakit lain divalidasi dalam
model hewan yang relevan secara klinis dan saat ini dalam uji klinis/praklinis.
Biasanya, dalam pengaturan penyakit, antagomiRs mengurangi miRNAs yang
merugikan dan sebaliknya tiruan miRNA dapat meningkatkan kelimpahan
miRNAs yang menguntungkan. Uji klinis sekarang dilakukan untuk miRNA
khusus liver, miR-122 untuk pengobatan infeksi HCV kronis setelah studi pada
tikus dan primata non-manusia. Keberhasilan pemberian anti-miR-122 terutama
disebabkan oleh kemudahan dimana miRNAs ini sebagian besar terakumulasi
dalam liver (79). Berdasarkan efek penekanan tumor miR-34, obat yang
diformulasikan berbasis tiruan formulasi liposom juga diberikan saat ini pada
pasien dengan kanker hati primer (80). Kami membutuhkan model penyakit
hewan yang sesuai dan studi fungsi manusia untuk uji klinis masa depan
menggunakan terapi berbasis miRNA.

Untuk memfasilitasi terapi berbasis miRNA pada gangguan terkait kehamilan,

studi masa depan dengan lebih menekankan pada meminimalkan efek target,
meningkatkan waktu dan dosis untuk mendapatkan efek samping yang minimal
dan menjelaskan mekanisme serapan yang tepat dari miRNAs ini oleh organ lain
yang diperlukan. Oleh karena itu, meningkatkan pengetahuan kita tentang fungsi
miRNA pada gangguan terkait kehamilan diperlukan untuk mengembangkan
strategi terapi di masa depan.