LAPORAN

PRAKTEK KERJA LAPANGAN

VERIFIKASI PENENTUAN TOTAL NITROGEN DALAM AIR DAN
LIMBAH CAIR DENGAN KALIUM PEROKSODISULFAT SECARA
SPEKTROFOTOMETER UV-VIS

Oleh :
Ika Chasanatun Ni’mah
24030116140090

DEPARTEMENT KIMIA
FAKULTAS SAINS DAN MATEMATIKA
UNIVERSITAS DIPONEGORO
SEMARANG
2019
ii
 HALAMAN PENGESAHAN
LAPORAN PRAKTEK KERJA LAPANGAN

Judul : Verifikasi Penentuan Total Nitrogen dalam Air

dan Limbah Cair Dengan Kalium Peroksodisulfat
Secara Spektrofotometer Uv-Vis
Nama : Ika Chasanatun Ni’mah
NIM : 24030116140090
Perusahaan / Instansi : PUSLITBANG P3KLL-KLH
Lokasi Perusahaan / : Kawasan PUSPITEK Gedung 210 Jl. Raya
Instansi PUSPITEK Serpong, Tangerang-Banten
Durasi PKL : 7 Januari – 8 Februari
Telah Diseminarkan :

Semarang, 13 Maret 2019

Pembimbing PKL, Pelaksana PKL,

Dr.Meiny Suzery M.S. Ika Chasanatun Ni’mah

NIP 19600510198032001 NIM 24030116140090

Mengetahui,
Koordinator PKL

Dra. Sriyanti, M.Si

NIP 196902051994032002

i
 HALAMAN PENGESAHAN
LAPORAN PRAKTEK KERJA LAPANGAN

Judul : Verifikasi Penentuan Total Nitrogen Dalam Air

danLimbah
Cair Dengan Kalium Peroksodisulfat Secara Spektrofoto-
meter UV-Vis
Nama : Ika Chasanatun Ni’mah
NIM :24030116140090
Perusahaan/Instansi : PUSLITBANG P3KLL-KLH
Lokasi Perusahaan/ : Kawasan PUSPIPTEK Gedung 210
Instansi Jl. Raya Puspiptek Serpong, Tangerang-Banten
Durasi PKL : 7 Januari – 8 Februari 2019

Tangerang Selatan , 08 Februari 2019

Mengetahui, Menyetujui
Kepala Pengelolaan Pembimbing
Lapangan

Ir. Luthfi Sulandjana M.M Oktaria Diah P. A.Md.AK.

NIP. 196112181994031001 NIP.197410312007102001

ii
KATA PENGANTAR

Segala Puji dan syukur penulis panjatkan kepada Allah SWT berkat
rahmat nikmat dan karunia-Nya yang tak pernah berhenti diberikan kepada
penulis sehingga laporan ini dapat diselesaikan. Laporan Praktek Kerja Laporan
(PKL) dengan judul “ VERIFIKASI PENENTUAN TOTAL NITROGEN
DALAM LIMBAH CAIR DENGAN KALIUM PEROKSODISULFAT SECARA
SPEKTROFOTOMETER UV-VIS” yang ditulis berdasarkan hasil penelitian di
laboratorium Pusat Sarana Pengendalian Dampak Lingkungan (PUSARPEDAL)
Serpong, Tangerang Selatan serta didukung oleh teori-teori dari berbagai literatur.

Dengan telah selesainya penelitian hingga tersusunnya laporan ini, penulis ingin
menyampaikan penghargaan dan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada:

1. Ibu, Ayah dan adik-adik saya tercinta yang selalu memberikan dukungan
dan bantuannya kepada penulis baik berupa moril maupun materil serta
kesabarannya selama ini.
2. Dra. Sriyanti, M.Si selaku koordinator PKL yang telah membantu dari
awal sampai berakhirnya PKL
3. Dr. Meiny Suzery M.S. selaku dosen pembimbing yang telah banyak
memberikan saran dan bimbingan dengan penuh perhatian hingga
selesainya PKL ini
4. Oktaria Diah Pitalokasari AMd. selaku pembimbing PKL yang dengan
sabar membimbing saya sehingga PKL ini berjalan lancar.
5. Kak Amin, Kak Dani yang telah membantu saya dalam bekerja di
Laboratorium
6. Seluruh staff dan pekerja di P3KLL
7. Farrasta Khoirunassaum yang selalu memberikan semangat dan
dukungannya
8. Teman-teman PKL saya Nadia dan Yessica yang selalu mebantu dan
memberikan dukungannya selama PKL berlangsung

iii
 9. Teman-teman saya Kimia angkatan 2016 yang selalu membantu dan
memberikan dukungannya dalam menyelesaikan penulisan Laporan PKL
ini.
10. Dan seluruh pihak yang membantu dalam penulisan Laporan PKL ini yang
tidak bisa saya sebutkan semuanya

Sebagai manusia dengan keterbatasan ilmu pengetahuan yang dikuasai,

penulis menyadari sepenuhnya bahwa penulisan Laporan ini masih sangat jauh
dari sempurna, untuk itu dengan kerendahan hati penulis mengharapkan saran dan
kritik yang membangun dari pembaca demi kesempurnaan Laporan Praktek Kerja
Lapangan ini.

Akhir kata penulis berharap semoga Laporan PKL ini bermanfaat bagi penulis
dan pembaca.

Semarang, 07 Februari 2019

Penulis

Ika Chasanatun Ni’mah

NIM 24030116140090

iv
 DAFTAR ISI

HALAMAN PENGESAHAN I ............................................................................... i

HALAMAN PENGESAHAN II ............................................................................. ii

KATA PENGANTAR ........................................................................................... iii

DAFTAR ISI ........................................................................................................... v

DAFTAR TABEL ................................................................................................ viii

BAB 1 PENDAHULUAN ...................................................................................... 1

1.1. Latar belakang .......................................................................................... 1

1.2. Perumusan Masalah .................................................................................. 2

1.3. Tujuan ....................................................................................................... 2

BAB II GAMBARAN UMUM PERUSAHAAN/ INSTANSI ............................. 3

2.1. Latar Belakang ......................................................................................... 3

2.2. Lokasi ....................................................................................................... 4

2.3. Visi dam Misi ........................................................................................... 5

2.4. Kegiatan .................................................................................................... 5

2.5. Tugas dan Fungsi ...................................................................................... 5

2.6. Fasilitas dan Peralatan .............................................................................. 6

2.7. Laboratorium Instansi ............................................................................... 6

2.8. Kerja Sama ............................................................................................... 8

BAB III TINJAUAN PUSTAKA .......................................................................... 9

3.1. Metode Verifikasi Uji ............................................................................... 9

3.1.1. Akurasi ............................................................................................ 10

3.1.2. Presisi .............................................................................................. 10

3.1.3. Spesifisitas ...................................................................................... 12

v
 3.1.4. Limit Deteksi danLimit Kuantitasi.................................................. 12

3.1.5. Linieritas ......................................................................................... 13

3.1.6. Limit of Linearity (LOL) ................................................................ 13

3.1.7. Methods Detection Limit (MDL) .................................................... 13

3.2. Pencemaran Air ...................................................................................... 14

3.2.1. Jenis Pencemaran Air ...................................................................... 14

3.2.2. Komponen Pencemaran Air ............................................................ 16

3.2.3. Sumber Pencemaran Air ................................................................. 18

3.2.4. Penanganan Limbah Cair ................................................................ 20

3.3. Nitrogen .................................................................................................. 20

3.3.1. Nitrogen Total ................................................................................. 22

3.3.2. Siklus Nitrogen ............................................................................... 23

3.3.3. Kegunaan Nitrogen ......................................................................... 24

3.4. Spektrofotometer .................................................................................... 24

3.5. Spektrofotometer Ultraviolet dan Visible (UV-Vis) .............................. 25

3.5.1. Hukum Lambert-Beer ..................................................................... 26

BAB IV METODOLOGI PENELITIAN ............................................................ 28

4.1. Tempat dan waktu pelaksanaan PKL ..................................................... 28

4.2. Metode .................................................................................................... 28

4.3. Prosedur Kerja ........................................................................................ 28

4.3.1. Prinsip kerja .................................................................................... 28

4.3.2. Pengambilan Sampel ....................................................................... 28

4.3.3. Alat dan Bahan yang Digunakan..................................................... 28

4.3.3.1. Alat yang Digunakan ............................................................... 28

4.3.3.2. Bahan yang Digunakan ............................................................ 29

vi
 4.3.4. Cara Kerja ....................................................................................... 29

4.3.4.1. Penetapan Total Nitrogen ........................................................ 30

BAB V HASIL DAN PEMBAHASAN ............................................................... 34

5.1. Linearitas Kurva Standar ............................................................................ 34

5.2 Penentuan Limit of Linearity (LoL) ............................................................ 35

5.3. Verifikasi Kurva Kalibrasi dengan CRM ................................................... 36

5.4. Penentuan Method Detection Limit (MDL) ............................................... 37

5.5 Penentuan Repeatabilitas dan Reprosibilitas ............................................... 38

BAB VI PENUTUP ............................................................................................. 41

6.1. Kesimpulan ............................................................................................. 41

6.2. Saran ....................................................................................................... 41

DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 42

LAMPIRAN .......................................................................................................... 44

vii
 DAFTAR TABEL

Table 1 Nilai presisi (RSD) sesuai dengan konsentrasi analat .............................. 11

Table 2 Data Linearitas Kurva Kalibrasi .............................................................. 34
Table 3 Penentuan LoL ......................................................................................... 36
Table 4 Verifkasi kurva kalibrasi dengan CRM ................................................... 36
Table 5 Penentuan Methode Dtection Limit ......................................................... 38
Table 6 Penentuan repeatabilitas, Reprodusibilitas dan Akurasi .......................... 39

viii
 BAB 1
PENDAHULUAN
1.1. Latar belakang
Air merupakan senyawa yang penting dalam kehidupan, sehingga air tidak
dapat digantikan oleh senyawa lain. Kualitas dan keamanan air harus dijaga
salah satunya dengan menjaga sumber air. Dalam siklus hidrologi, telah
diketahui bahwa dari saat terbentuknya awan, air sudah mengandung zat lain
selain H2O.
Permasalahan yang terkait dengan kualitas air yaitu adanya pencemaran
sumber air salah satunya air sungai yang dapat terjadi akibat pengaruh dari
berbagai macam air buangan yang terkandung didalamnya. Kandungan bahan
kimia yang ada didalam air limbah dapat merugikan lingkungan. Bahan
organik terlarut dapat menghabiskan oksigen dalam air limbah serta akan
menimbulkan rasa dan bau yang tidak sedap pada penyediaan air bersih.
Untuk mengetahui kualitas air diperlukan berbagai parameter, salah satu
diantaranya adalah kadar total nitrogen.
Nitrogen adalah salah satu elemen penting yang dibutuhkan oleh tumbuh-
tumbuhan dan biasanya dipasok sebagai pupuk dalam jumlah yang besar dan
dilakukan berulang-ulang. Kelebihan jumlah elemen dapat menyebabkan
pertumbuhan yang tidak produktif dari tanaman dan mengakibatkan
kerusakan
oleh hama sehingga terjadi pembuahan yang kurang sempurna. (Sunu, 2001)
Nitrogen dalam air limbah pada umumnya terdapat dalam bentuk organik
dan oleh bakteri berubah menjadi amoniak. Dalam kondisi aerobik bakteri
dapatmengoksidasi amoniak menjadi nitrit dan nitrat. Nitrat dapat digunakan
oleh algaedan tumbuh-tumbuhan lain untuk membentuk protein tanaman dan
oleh hewanuntuk membentuk protein hewan. (Ginting, 2007)
Apabila nitrogen total yang berlebihan (tidak memenuhi standart baku
mutu limbah cair) tidak dibatasi dan tidak ditangani sebagaimana mestinya,

1
 kemungkinan besar akan menimbulkan dampak negatif terhadap lingkungan
yangberhubungan erat dengan kesehatan manusia atau makhluk hidup.
Untuk mengetahui kadar parameter-parameter yang masuk kelingkungan
karena aktivitas manusia ataupun sebab lainnya diperlukan suatu metode yang
sudah standar. Suatu metode uji perlu di verifikasi secara berkala. Verifikasi
merupakan proses pembuktian kembali melalui pengujian bahwa persyaratan
yang telah ditetapkan telah terpenuhi. Verifikasi dilakukan untuk melihat
unjuk kerja dari suatu metode yang digunakan sebagai analisis rutin. Metode
verfikasi ini dilakukan terhadap parameter yaitu lineritas, limid deteksi
instrumen (LDI), presisi (ripitibilitas) dan akurasi.
1.2. Perumusan Masalah
1.2.1. Apakah metode yang digunakan untuk penentuan kadar
Nitrogen dalam limbah cair sudah valid ?
1.2.2. Apakah parameter yang diuji sudah memenuhi dan dapat
diterima untuk pengujian selanjutnya ?
1.3. Tujuan
1.3.1. Untuk membuktikan bahwa metode yang digunakan pada
penentuan Kadar Nitrogen dalam limbah cair sudah valid
1.3.2. Untuk memenuhi semua parameter keberterimaan suatu metode
dalam penentuan kadar Nitrogen pada Limbah cair
 BAB II
GAMBARAN UMUM PERUSAHAAN/ INSTANSI

2.1.Latar Belakang

Badan Pengendalian Dampak Lingkungan ( Bapedal ) adalah suatu

lembaga pemerintahan non-departemen yang bertanggung jawab langsung kepada
Presiden dalam penyelenggaraan fungsi pengendalian dampak lingkungan.
Bapedal dibentuk berdasarkan Surat Keputusan Presiden No.32 Tahun 1990 yang
kemudian ditingkatkan kepastian kelembagaananya dengan Surat Keputusan
Presiden No.77 Tahun 1994. Tugas pokok Bapedal adalah membantu Presiden
dalam pelaksanaan pengendalian lingkungan meliputi upaya pencegahan
perusakan lingkungan, pengulangan dampak lingkungan, dan pemulihan kualitas
lingkungan sesuai dengan peraturan perundang-undangan yang berlaku.

Bapedal perlu didukung oleh berbagai sarana seperti Laboratorium

Lingkungan dalam melaksanakan tugasnya. Bapedal mendapat bantuan
mendirikan Pusat Sarana Pengendalian Dampak Lingkungan (PUSARPEDAL)
atau Enviromental Management Center (EMC) oleh Pemerintahan Jepang melalui
JICA ( Japan International Co-Operation Agency). Laporan akhir diselesaikan
bersama Bapedal pada bulan Mei 1992 dan meletakkan batu pertama yang
dilakukan olehg menteri lingkungan hidup yaitu Prof.Dr.Emil Salim.

PUSARPEDAL diresmikan pada tanggal 12 Agustus 1993 oleh Menteri

Lingkungan Hidup, Sarwono Kusumaatmaja di Kawasan Pusat Penelitian Ilmu
Pengetahuan (Puspitek) serpong. Bulan oktober 1992 tim survei program Project
Type Tecnical Cooperation (PTTC) memutuskan program dimulai pada tanggal 1
Januari 1993 dan berlangsung sampai dengan tanggal 31 Desember 2000.
Program PTTC memberikan bantuan terpadu implementasi dan evaluasi dengan
menggabungkan 3 kerja sama, yaitu pelatihan Counterpart di Jepangn, mengirim
tenaga ahli ke Indonesia, membantu peralatan, dan bahan kimia. Berdasarkan
Peraturan Presiden Republik Indonesia Nomor 16 Tahun 2015 tentang

3
Kementrian Lingkungan Hidup dan Kehutanan, Pusat Sarana Pengendalian
Dampak Lingkungan (PUSARPEDAL) berganti nama menjadi Pusat Penelitian
dan Pengembangan Kualitas dan Pengembangan Lingkungan ( PUSLITBANG
KPL ).

Pengetahuan dan Teknologi (PUSPIPTEK) Serpong yang berperan

sebagai Laboratorium Lingkungan Hidup Rujukan. PUSARPEDAL sebagai
pembina Lanoratorium lingkungan telah dibuktikan dengan diperolehnya
Sertifikat Akreditasi Laboratorium Penguji dari Komite Akreditasi Nasional
(KAN) pada tanggal 7 Februari 2001 dan dikukuhkan pada tanggal 29 September
2005. Dengan kebijakan yang telah ditentukan oleh Bapedal, Pusarpedal akan
melakukan berbagai aktifitas seperti bantuan teknik kepada laboratorium lainnya,
pemantauan kualitas lingkungan, penelitian lingkungan, pengolahan data
lingkungan, dan mengorganisir kursus pelatihan lingkungan. dilihat dari sudut
pengendalian lingkungan, pusarpedal diprioritaskan akan memegang peran
penting dalam pengembangan jangka panjang tahap kedua.

Pada masa pemerintahan Presiden Joko Widodo Kementrian Kehutanan

digabungkan dengan Kementrian Lingkungan hidup menjadi Kemntrian
Lingkungan Hidup dan Kehutanan. Kementrian Lingkungan Hidup dan
Kehutanan berada dibawah dan bertanggung jawab kepada Presiden. Kementrian
Kehutanan dipimpin oleh seseorang Mentri Lingkungan Hidup dan Kehutanan
(MEN LHK) yang sejak tanggal 27 Oktober 2014 dijabat oleh Siti Nurbaya. Dan
sejak tanggal tersebut, maka Pusarpedal diubah namanya menjadi Pusat Penelitian
dan Pengembangan Kualitas Laboratorium Lingkungan (P3KLL).

2.2.Lokasi

Pusat penelitian dan Pengembangan Kualitas Laboratorium Lingkungan

(P3KLL) berdiri di kawasan Puspitek Serpong Tangerang Selatan Banten Gedung
210 diatas tanah luas 55.688 m2, dengan luas bangunan 8800 m2. Bangunan
tersebut terdiri dari blok administrasi, blok perpustakaan, blok penelitian, blok
pelatihan, blok auditorium, blok koprasi dan kantin, blok asrama, dan fasilitas
lainnya.

2.3.Visi dam Misi

P3KLL memiliki visi dan misi sebagai berikut:

1. Menyelenggarakan fungsi laboratorium lingkungan rujukan

2. Mengelola sistem laboratorium lingkungan di seluruh Indonesia melalui
pembinaan teknis manajemen, serta memberikan rekomendasi-
rekomendasi laboratorium lingkungan.
3. Membuat laboratorium lingkungan dalam proses akreditasi yang mengacu
kepada standar sistem mutu baik secara nasional maupun internasional.
4. Memberikan layanan masyarakat atau jasa dibidang laboratorium
lingkungan yang profesional dan mandiri.
2.4.Kegiatan

P3KLL melakukan kegiatan-kegiatan sebagai berikut:

1. Melakukan pengukuran pencemaran lingkungan antara lain yang terdiri

dari hasil buangan berupa limbah cair, limbah padat, dan pencemaran
udara
2. Melakukan pemantauan terhadap pencemaran yang terjadi di berbagai
tempat di Indonesia, sebagai masukan untuk pengembalian keputusan bagi
penentu kebijakan bidang lingkungan.
3. Memberikan bimbingan teknis laboratorium lingkungan dan bimbingan
penetapan sistem mutu berdasarkan SNI 19-17025
4. Membuat pedoman samplinbg dan analisis parameter kualitas lingkungan,
pedoman pemantauan kualitas lingkungan, pedoman perawatan, dan
kalibrasi peralatan laboratorium lingkungan, juga menyediakan dan
membuat serta bahan acuan standar/ bahan acuan (SRM/RM).

Struktur organisasi pada P3KLL adalah ditunjukan pada gambar 1.

2.5.Tugas dan Fungsi

 P3KLL melakukan tugas dan fungsinya sebagai berikut:

1. Melaksanakan pengujian dan pemantauan kualitas lingkungan

2. Melakukan virifikasi perbedaan dan hasil pemantaun oleh dua atau lebih
laboratorium.
3. Meningkatkan kapasitas dan layanan teknis dan pemantaun kualitas
lingkungan.
4. Melakukan pembinaan laboratorium lingkungan daerah provinsi dan Kota
atau Kabupaten.
5. Melaksanakan pelayanan teknis pengujian kualitas lingkungan dan
kalibrasi peralatan laboratorium lingkungan.
6. Melaksanakan koordinasi pemantauan kualitas lingkungan tingkat pusat
dan daerah.
2.6.Fasilitas dan Peralatan

Fasilitas yang dimiliki P3KLL antara lain laboratorium Uji Kualitas

Udara, laboratorium Air dan Limbah Cair, laboratorium Tanah dan Limbah Padat,
laboratorium Kebisingan dan Getaran, laboratorium Mikrobiologi, laboratorium
Toksikologi, Laboratorium Kalibrasi, pengolahan data dan informasi, auditorium,
perpustakaan ruang rapat, mushola, koperasi,kantin, gudang bahan-bahan kimia
dan lain-lain. Peralatan yang dimiliki Puslitbang KPL antara lain yakni : Ion
Chromatography (IC), Inductively Coupled Plasma-Mass Spectometry (ICP-MS).

Gas Chromatography (GC), Gas Chromatograph-Mass Spectometry (GC-MS),

Atomic Absorption Spectroscopy 8 (AAS). Ultraviolet-Visible Spectrophotometer
(UV-VIS), Toxicity Chracteristic Leaching Procedure (TLCP), Emmision Gas
Analyzer (EG), Air Quality Monitoring System,Hand Held Sound Intensity,High
Pleasure Liquid Chromatography (HPLC), Mercury Analizer, Flash Point Tester,
Corrosive Tester, Hand Held Sound Intensity, Vibration Meter Treatment,
Precision Integrating Sound Level Meter , LC50 dan LD50.

2.7.Laboratorium Instansi

1. Laboratorium Kalibrasi
 Labortaorium ini mempunyai tugas melakukan pengembangan metode dan
pelaksanaan kalibrasi peralatan laboratorium lingkungan, peningkatan
kapasitas, bimbingan teknis serta evaluasi kinerja laboratorium.

2. Laboratorium Penguji

Laboratorium kalibrasi ini bertugas melakukan penyiapan bahan

penyusun pedoman pengelolaan laboratorium pengembangan metode
pelaksanaan pengambilan contoh uji dan pengujian parrameter kualitas
lingkungan, pengelolaan, sumber daya dan peralatan laboratorium,
pembuatan bahan acuan standar dan bahan uji banding atau uji
profisiensi serat pengelolaan limbah laboratorium.
3. Laboratorium Ambien dan Emisi
Laboratorium ambien dan emisi ini melaksanakan pemantauan udara
ambien dan emisi dari sumber bergerak, pemantauan hujan asam serta
pemantauan kualitas lingkungan kualitas udara sesuai Indeks Standar
Pemncemaran Udara (ISPU).
4. Laboratorium Lingkungan
Laboratorium lingkungan ini melaksanakan pengambulan contih uji serta
analisis air tanag, air permukaan, baik mata air maupun air limbah,
membuat acuan untuk parameter lingkungan kualitas contoh ujia
profesiensi dan pengembangan contoh uji analisis.
5. Laboratorium Biologi
Laboratorium biologi ini memiliki kegiatan, meliputi kegiatan foto
specimen, penilaian kualitas perairan berdasarkan berdasarkan bio
indikator makro invertebrata, identifikasi plankton, dan bentos, analisis
bakteri total kloroform, analisis total E.coli serta uji bio assay LC50 dan
LD50.
6. Laboratorium Tanah dan Limbah Padat
Laboratorium tanah dan limbah padat ini mampu melakukan uji
karakteristik, Toxicity Characteristic Leaching Procedure (TCLP) untuk
analisis senyawa organik, pembuatan Standar Reference Material (SRM)
 tanah, melakukan pengambilan contohuji tanah, sedimen dan limbah
padat, melakukan pengembangan metode serta melakukan pengujian
tanah dan limbah dapat untuk parameter logam berat dan senyawa
organik lainnya.
7. Laboratorium Kebisingan dan Getaran
Laboratorium kebisingan dan getaran ini mempunyai kemampuan
melakukan pengukuran kebisingan lingkungan berdasarkan
KEPMENT48/MENLH/11/1996 , ISO 1996-1:1989, ISO 1996-3, 1987,
pengukuran getaran lingkungan dan pengendaliannya, pengukuran sound
power dan sound intensity di tempat, analisi emisi kebisingan dari mesin
untuk memperkirakan kerusakan mesin, analisis ruangan serta analisis
pengendalian suara.
2.8.Kerja Sama

P3KLL menjalin kerjasama dengan lembaga-lembaga berskala Nasional

seperti Badan Pengendalian Dampak Lingkungan (BAPEDAL), Balai
Laboratorium Kesehatan (BLK), Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia (LIPI),
Badan Tenaga Atom Nasional (BATAN), Perguruan Tinggi (PT), dan beberapa
Lembaga Swadaya Masyarakat (LSM). Selain itu, Puslitbang KPL juga
berpartisipasi aktif dalam kerjasama berskala internasional antara lain dengan
Japan International Coorperation Agency (JICA) dalam pengembangan fasilitas
dan SDM dibidang pengelolaan lingkungan, United Nation University (UNU)
dalam hal pemantauan dan analisis linngkungan di kawasan Asia Timur
(pemantauan EDCs), Acid Deposition And Oxidant Research Center (ADORC-
EANET) dalam jariangan pemantauan hujan asam di kawasan Asia Timur,
International Atomic Energy Agency (IAEA) dalam pengukuran kualitas
lingkungan dengan teknologi nuklir, dan lain-lainnya.
 BAB III
TINJAUAN PUSTAKA

3.1. Metode Verifikasi Uji

Verifikasi merupakan proses konfirmasi kembali, melalui penyediaan bukti

objektif, bahwa persyaratan yang ditentukan telah terpenuhi. Karena adanya
perbedaan kondisi saat metode dibuat dengan saat metode diadopsi suatu
laboratorium, sehingga diperlukan verifikasi metode (Garfield & Hirsch, 2000)
(Smith, 2010). Verifikasi metode pada dasarnya berbeda dengan validasi metode.
Verifikasi metode dilakukan pada semua metode standar atau metode yang telah
divalidasi, pada waktu mula-mula digunakan dan pada jarak waktu tertentu secara
berkala. Parameter-parameter yang harus dipenuhi pada verifikasi yaitu presisi,
akurasi dan batas deteksi (bila perlu). Tujuan dilakukannya verifikasi metode
yaitu, sebagai berikut: (Smith, 2010)

a. Untuk memastikan, bahwa laboratorium atau personel penguji dapat

menerapkan metode tersebut dengan baik (ketersediaan peralatan, fasilitas,
pereaksi, penguji, keterampilan, dan kompetensi).
b. Untuk menjamin mutu hasil pengujian. Laboratorium harus sudah menerapkan
sistem manajemen sesuai dalam ISO/IEC 17025 untuk melakukan kegiatan
verifikasi/validasi metode dan analis yang terlatih. Analis terlatih yang
dimaksud, yaitu (How to Meet ISO 17025: Requirement for Method
Verification):
1. Analis harus memiliki pengetahuan, pengalaman dan pelatihan untuk
melakukan pengujian.
2. Analis harus kompeten dalam menjalankan fungsi tertentu laboratorium:
- Mengoperasikan instrumen.
- Melakukan analisis sesuai yang ditetapkan.
- Memahami teknik analisis.
3. Pelatihan harus didokumentasikan.
4. Pembenaran penyimpangan dari metode referensi.

Adapun beberapa parameter analisis yang harus dipertimbangkan dalam

validasi metode analisis .
3.1.1. Akurasi
Akurasi atau kecermatan adalah seberapa dekat suatu hasil pengukuran kepada
nilai sebenarnya. Terkadang masalah dalam menentukan akurasi adalah
ketidaktahuan terhadap nilai yang sebenarnya. Dalam beberapa tipe sampel kita
dapat menggunakan sampel yang telah diketahui nilainya dan mengecek metode
pengukuran yang kita gunakan untuk menganalisis sampel itu sehingga kita
mengetahui akurasi dari prosedur yang diujikan, metode ini disebut dengan CRM
(Certified Reference Method). Pendekatan lain adalah dengan membandingkan
hasilnya dengan hasil yang dilakukan oleh lab lain (Smith, 2010)atau dengan
menggunakan metode referen(Walton, 2001). Akurasi juga dapat diketahui
dengan melakukan uji rekoveri (Walton, 2001). Hasil uji ini akurasi dapat
dinyatakan sebagai persen perolehan kembali (recovery) analit yang ditambahkan
pada sampel. Sampel ditambahkan (spiking) dengan standar yang telah diketahui
jumlah dan kadarnya(EMA, 1995) . Rentang nilai penerimaan kecermatan suatu
metode akan bervariasi sesuai kebutuhannya (FAO, 1998)..
3.1.2. Presisi
Presisi adalah ukuran yang menunjukkan derajat kesesuaian antara hasil uji
individual, diukur melalui penyebaran hasil individual dari rata-rata jika prosedur
diterapkan secara berulang pada sampel-sampel yang diambil dari campuran yang
homogen (Harmita, 2004). Presisi dapat dibagi dalam dua kategori: keterulangan
atau ripitabilitas (repeatability) dan ketertiruan (reproducibility). Ripitabilitas
adalah nilai presisi yang diperoleh jika seluruh pengukuran dihasilkan oleh satu
orang analis dalam satu periode tertentu, menggunakan pereaksi dan peralatan
yang sama dalam laboratorium yang sama. Ketertiruan adalah nilai presisi yang
dihasilkan pada kondisi yang berbeda, termasuk analis yang berbeda, atau periode
dan laboratorium yang berbeda dengan analis yang sama. Karena ketertiruan dapat
memperbanyak sumber variasi, ketertiruan dari analisis tidak akan lebih baik
hasilnya dari nilai keterulangan(Harvey, 2000).
Presisi dalam hal ripitabilitas diukur dengan menghitung relative standard
deviation atau simpangan baku relatif (RSD) dari beberapa ulangan dengan
menggunakan rumus:

Standar deviasi ripitabilitas bervariasi tergantung pada konsentrasi (AOAC 2002).

Oleh karena itu hasil yang didapat dari perhitungan dibandingkan hasilnya dengan
nilai yang ada di Tabel 2.
Table 1Nilai presisi (RSD) sesuaidengankonsentrasianalat

(%) analat Konsentrasi RSD (%)

100 100% 1
10 10% 1.5
1 1% 2
0.1 0.10% 3
0.01 100 ppm 4
0.001 10 ppm 6
0.0001 1 ppm 8
0.00001 10 ppb 15
(sumber: AOAC 2002)
Nilai yang didapat juga dapat dibandingkan atau dengan menggunakan rumus:
𝑅𝑆𝐷𝑟 = C −0.15
dengan C adalah konsentrasi yang didapat dari rataan.
Nilai yang dapat diterima untuk ripitabilitas adalah antara 1/2 dan 2 kali dari nilai
yang dijadikan sebagai pembanding. Ada juga yang menggunakan RSD Horwitz
sebagai nilai pembanding, RSD Horwitz dihitung dengan rumus:
Dengan menggunakan pembanding RSD Horwitz nilai yang dapat diterima untuk
ripitabilitas adalah RSD yang terhitung dari ulangan yang ada harus kurang dari
2/3 dari nilai RSD Horwitz (Garfield & Hirsch, 2000).
3.1.3. Spesifisitas
Spesifisitas dari metode analitik tertentu berarti metode itu hanya mendeteksi
komponen yang diinginkan. Metode analitis dapat bersifat sangat spesifik untuk
komponen tertentu atau pada beberapa kasus dapat menganalisis spektrum
komponen yang luas(Smith, 2010).
Spesifisitas suatu metode diuji dengan membandingkan hasil dari sampel yang
mengandung pengotor dengan hasil sampel yang tidak mengandung pengotor.
Pada dasarnya, spesifisitas dapat diuji secara langsung atau tidak langsung.
Pendekatan secara tidak langsung ditinjau dari penerimaan parameter akurasi.
Pendekatan secara langsung ditinjau dari keberadaan komponen
pengganggu(Ermer, 2005). Cara yang terakhir dilakukan dengan menambahkan
sejumlah tertentu komponen pengganggu pada larutan standar murni. Jika
diperkirakan tidak adanya komponen pengganggu pada sampel, spesifisitas dapat
ditunjukkan dengan membandingkan hasil uji sampel dengan standar(EMA,
1995).
3.1.4. Limit Deteksi danLimit Kuantitasi
Limit deteksi atau Limit of Detection (LOD) suatu metode analisis adalah
jumlah terkecil dari analat yang dapat dideteksi namun jumlah ini belum tentu
dapat dikuantisasi dengan presisi yang baik oleh metode tersebut. Limit kuantitasi
atau Limit of Quantitation (LOQ) yang disebut juga limit determinasi adalah
konsentrasi terendah dari analat yang dapat ditentukan secara kuantitatif dengan
presisi dan akurasi yang dapat diterima(Ermer, 2005).
(Giese, 2004)menyatakan bahwa terdapat dua cara untuk menentukan LOD
dan LOQ, yaitu dengan menentukan kurva kalibrasi menggunakan sepuluh level
konsentrasi, atau melakukan analisis blanko berulang. Tetapi ada masalah dalam
pendekatan menggunakan blanko karena seringkali sulit diukur dan variasinya
sangat tinggi. Lebih lanjut, nilai yang didapat dengan pendekatan seperti ini tidak
bergantung dari analat (AOAC 2002).
 Limit deteksi hanya berguna untuk mengontrol ketidakmurnian yang tidak
diinginkan yang konsentrasinya harus tidak lebih dari level tertentu dan
mengontrol kontaminan dengan konsentrasi rendah, sedangkan materi yang
bermanfaat harus ada pada konsentrasi yang cukup tinggi agar dapat menjadi
fungsional. Limit deteksi dan determinasi seringkali bergantung pada kemampuan
instrumen (AOAC 2002).
3.1.5. Linieritas
Linearitas metode analisis menunjukkan kemampuan suatu metode untuk
memperoleh hasil uji, yang baik langsung maupun dengan definisi transformasi
matematis yang baik, proporsional dengan konsentrasi analat dalam sampel pada
range tertentu(Leyva A, 2008). Linieritas dapat diuji secara informal dengan
membuat plot residual yang dihasilkan oleh regresi linier pada respon konsentrasi
dalam satu seri kalibrasi(Thompson M, 2002).
Linieritas harus dievaluasi dengan pemeriksaan visual terhadap plot
absorbansi yang merupakan fungsi dari konsentrasi analat. Jika hubungannya
linier, hasil uji dievaluasi lebih lanjut secara statistik dengan perhitungan garis
regresi. Dalam penentuan linieritas, sebaiknya menggunakan minimum lima
konsentrasi(EMA, 1995).Rentang penerimaan linieritas tergantung dari tujuan
pengujian. Pada kondisi yang umum, nilai koefisien regresi (r2) ≥ 0,99.
3.1.6. Limit of Linearity (LOL)
Limit of Linearity merupakan rentang kerja yang dibuat dan disesuaikan
dengan kisaran contoh yang akan dianalisa. Mulai batas terendah sampai batas
tertinggi. Rentang kerja dibuat dari sederet larutan standar dengan konsentrasi
terendah sampai tertinggi (sesuai dengan kisaran contoh). Deret standar tersebut
dibaca absorbansinya dan dibuat kurva kalibrasi, dimana sumbu Y adalah
absorbansi dan sumbu X adalah konsentrasi
3.1.7. Methods Detection Limit (MDL)
MDL merupakan batas deteksi metode yang bisa diuji pada konsentrasi paling
rendah. Proses MDL meliputi dari preparasi sampel hingga pengukuran dengan
instrument dan didapatkan hasil pengukuran. Setelah didapatkan hasil
pengukurannya (minimal 7 data). Barulah dilakukan perhitungan statistic yang
rumusnya sebagai berikut:
MDL = 𝑇(𝑛 − 1,1 − 𝛼 = 0,99) 𝑥 𝑆𝐷
𝑇(𝑛 − 1,1 − 𝛼 = 0,99) = nilai t- unutuk tinggat kepercayaan 99% dan
standar devisiasi dengan derajat kebebasan n-1
MDL = Method Detection Limit
SD = Standar Devisiasi
3.2.Pencemaran Air

Pencemaran air dapat merupakan masalah, regional maupun lingkungan

global, dan sangat berhubungan dengan pencemaran udara serta penggunaan
lahan tanah atau daratan. Walaupun air merupakan sumber daya alam yang
dapat diperbaharui, tetapi air akan dapat dengan mudah terkontaminasi oleh
aktivitas manusia untuk tujuan yang bermacam-macam sehingga dengan
mudah dapat tercemar. (Darmono, 1995)

Air yang tersebar di alam semesta ini tidak pernah terdapat dalam
bentuk murni, namun bukan berarti bahwa semua air sudah tercemar. Misalnya,
walaupun di daerah pegunungan atau hutan yang terpencil dengan udara yang
bersih dan bebas dari pencemaran, air hujan yang turun di atasnya selalu
mengandung bahan-bahan terlarut, seperti karbon dioksida (CO2 ), oksigen
(O2), dan nitrogen (N2 ),serta bahan-bahan tersuspensi misalnya debu dan
partikel-partikel lainnya yang terbawa air hujan dari atmosfir.

Adanya benda-benda asing yang mengakibatkan air tersebut tidak dapat

digunakan sesuai dengan peruntukannya secara normal disebut dengan
pencemaran air. Karena kebutuhan makhluk hidup akan air sangat bervariasi,
maka batas pencemaran untuk berbagai jenis air juga berbeda-beda. Sebagai
contoh, air kali di pegunungan yang belum tercemar tidak dapat digunakan
langsung sebagai air minum karena belum memenuhi persyaratan untuk
dikategorikan sebagai air minum. (Kristanto, 2002)

3.2.1. Jenis Pencemaran Air

Menurut (Darmono, 1995) pencemaran air terdiri dari bermacam-macam jenis,
antara lain:

a. Pencemaran Mikroorganisme dalam Air

Berbagai kuman penyebab penyakit pada makhluk hidup seperti bakteri,

virus, protozoa, dan parasit sering mencemari air. Kuman yang masuk ke dalam
air tersebut berasal dari buangan limbah rumah tangga maupun buangan dari
industri peternakan, rumah sakit, tanah pertanian dan lain sebagainya. Pencemaran
dari kuman penyakit ini merupakan penyebab utama terjadinya penyakit pada
orang yang terinfeksi. Penyakit yang disebabkan oleh pencemaran air ini disebut
water-borne disease dan sering ditemukan pada penyakit tifus, kolera, dan
disentri.

b. Pencemaran Air oleh Bahan Anorganik Nutrisi Tanaman

Penggunaan pupuk nitrogen dan fosfat dalam bidang pertanian telah

dilakukan sejak lama secara meluas. Pupuk kimia ini dapat menghasilkan
produksi tanaman yang tinggi sehingga menguntungkan petani. Tetapi dilain
pihak, nitrat dan fosfat dapat mencemari sungai, danau, dan lautan. Sebetulnya
sumber pencemaran nitrat ini tidak hanya berasal dari pupuk pertanian saja,
karena di atmosfer bumi mengandung 78% gas nitrogen . Pada waktu hujan dan
terjadi kilat dan petir, di udara akan terbentuk amoniak dan nitrogen terbawa air
hujan menuju permukaan tanah. Nitrogen akan bersenyawa dengan komponen
yang kompleks lainnya.

c. Pencemar Bahan Kimia Anorganik

Bahan kimia anorganik seperti asam, garam dan bahan toksik logam
lainnya seperti timbal (Pb), kadmium (Cd), merkuri (Hg) dalam kadar yang tinggi
dapat menyebabkan air tidak enak diminum. Disamping dapat menyebabkan
matinya kehidupan air seperti ikan dan organisme lainnya, pencemaran bahan
tersebut juga dapat menurunkan produksi tanaman pangan dan merusak peralatan
yang dilalui air tersebut (karena korosif).
d. Pencemar Bahan Kimia Organik

Bahan kimia organik seperti minyak, plastik, pestisida, larutan pembersih,

detergen dan masih banyak lagi bahan organik terlarut yang digunakan oleh
manusia dapat menyebabkan kematian pada ikan maupun organisme air lainnya.
Lebih dari 700 bahan kimia organik sintetis ditemukan dalam jumlah relatif
sedikit pada permukaan air tanah untuk diminum di Amerika, dan dapat
menyebabkan gangguan pada ginjal, gangguan kelahiran, dan beberapa bentuk
kanker pada hewan percobaan di laboratorium. Tetapi sampai sekarang belum
diketahui apa akibatnya pada orang yang mengkonsumsi air tersebut sehingga
dapat menyebabkan keracunan kronis.

3.2.2. Komponen Pencemaran Air

Komponen pencemaran air akan menentukan terjadinya indikator

pencemaran air. Pembuangan limbah industri, limbah rumah tangga, dan kegiatan
masyarakat lainnya yang tidak mengindahkan kelestarian dan daya dukung
lingkungan akan sangat berpotensi terjadinya pencemaran air.

Menurut (Sunu, 2001), adapun komponen pencemaran air dikelompokkan sebagai

berikut:

a. Limbah Zat Kimia

Apabila limbah zat kimia yang belum terolah dibuang langsung ke air
lingkungan seperti sungai, danau, laut akan membahayakan bagi kehidupan
organisme di dalam air.

Limbah zat kimia sebagai bahan pencemar air dikelompokkan sebagi berikut:

1. Insektisida

Insektisida sebagai bahan pemberantas hama masih banyak digunakan

masyarakat khususnya di sektor pertanian. Apabila pemakaian insektisida
berlebihan, maka akan mempunyai dampak lingkungan.

2. Pembersih
 Zat kimia yang berfungsi sebagai pembersih banyak sekali macamnya
seperti shampo, detergen, dan bahan pembersih lainnya. Indikasi adanya limbah
zat pembersih yang berlebihan ditandai dengan timbulnya buih-buih pada
permukaan air

3. Larutan penyamak kulit

Senyawa krom (Cr) merupakan bahan penyamak kulit yang banyak

digunakan pada industri penyamakan kulit. Sisa larutan panyamak kulit akan
dapat menambah jumlah ion logam pada air. Untuk itu maka industri penyamakan
kulit seharusnya mempunyai instalasi pengolahan air limbah (IPAL) untuk
mengolah sisa larutan penyamak kulit agar tidak merusak lingkungan khususnya
pencemaran air.

4. Zat warna kimia

Penggunaan zat warna cenderung meningkat sejalan dengan

perkembangan industri menggunakan zat warna agar produknya mempunyai daya
tarik yang lebih baik dibandingkan dengan warna aslinya. Pada dasarnya semua
zat warna adalah racun bagi kesehatan tubuh manusia.

b. Limbah Padat

Lingkup limbah padat yang dimaksudkan ini merupakan limbah hasil

proses IPAL berupa endapan (slude) yang biasanya hasil dari proses filter press.
Slude dapat dikategorikan tidak berbahaya dan dapat juga dikategorikan sebagai
limbah bahan berbahaya dan beracun (B3).

Limbah padat yang terbentuk lebih halus, bila dibuang ke air lingkungan
tidak dapat larut dalam air dan tidak dapat mengendap, melainkan membentuk
koloid yang melayang-layang di dalam air. Koloid tersebut akan menjadikan air
menjadi keruh sehingga akan menghalangi penetrasi sinar matahari ke dalam air
dan mengakibatkan terganggunya proses fotosintesis tanaman di dalam air.
Kandungan oksigen terlarut di dalam air juga menurun sehingga akan
mempengaruhi kehidupan di dalam air.
c. Limbah Bahan Makanan

Limbah bahan makanan pada dasarnya bersifat organik yang sering

menimbulkan bau busuk yang menyengat hidung dan dapat didegradasi oleh
mikroorganisme. Apabila limbah bahan makanan mengandung protein, maka pada
saat didegradasi oleh mikroorganisme akan terurai menjadi senyawa yang mudah
menguap dan menimbulkan bau busuk.

d. Limbah Organik

Limbah organik biasanya dapat membusuk atau terdegradasi oleh

mikroorganisme. Oleh karena itu, bila limbah industri terbuang langsung ke air
lingkungan akan menambah populasi mikroorganisme di dalam air. Bila air
lingkungan sudah tercemar limbah organik berarti sudah terdapat cukup banyak
mikroorganisme di dalam air, maka tidak tertutup kemungkinan berkembangnya
bakteri patogen.

e. Limbah Anorganik

Limbah anorganik biasanya tidak dapat membusuk dan sulit didegradasi

oleh mikroorganisme. Limbah anorganik pada umumnya berasal dari industri
yang menggunakan unsur-unsur logam seperti Arsen (As), Kadmium (Cd),
Timbal (Pb), Krom (Cr), Kalsium (Ca), Nikel (Ni), Magnesium (Mg), Air Raksa
(Hg), dan lain-lain. Industri yang mengeluarkan limbah anorganik seperti industri
electroplating, industri kimia, dan lain-lain. Bila limbah anorganik langsung
dibuang di air lingkungan, maka akan terjadi peningkatan jumlah ion logam di
dalam air. Ion logam yang berasal dari logam berat, bila terbuang ke air
lingkungan sangat berbahaya bagi kehidupan khususnya manusia.

3.2.3. Sumber Pencemaran Air

Pencemaran air dapat ditandai oleh turunnya mutu, baik air daratan
(sungai, danau, rawa, dan air tanah) maupun air laut sebagai suatu akibat dari
berbagai aktivitas manusia modern saat ini sangat beragam sesuai
karakteristiknya.
Menurut (Sunu, 2001), adapun sumber pencemaran air yaitu:

a. Pencemaran Air oleh Pertanian

Air limbah pertanian sebenarnya tidak menimbulkan dampak negatif pada

lingkungan, namun dengan digunakannya fertilizer sebagai pestisida yang
kadang-kadang dilakukan secara berlebihan, sering menimbulkan dampak negatif
pada keseimbangan ekosistem air. Sektor pertanian juga dapat berakibat
terjadinya pencemaran air, terutama akibat dari penggunaan pupuk dan baha
kimia pertanian tertentu seperti insektisida dan herbisida.

b. Pencemaran Air oleh Peternakan dan Perikanan

Penanganan yang tidak tepat terhadap kotoran dan sisa makanan ternak
dapat berpotensi sebagai sumber pencemaran. Karakteristik terhadap pencemaran
air yang diakibatkan oleh kegiatan peternakan antara lain:

Komposisi dan jumlah kotoran ternak bervariasi tergantung pada tipe,

jumlah dan metode pemberian makan dan penyiramannya.

Tingkat pencemaran sangat bervariasi tergantung pada lokasi lahan yang

digunakan untuk peternakan, sistem dan skala operasi serta tingkat teknik
pengembangbiakan.

c. Pencemaran Air oleh Industri

Air limbah industri cenderung mengandung zat berbahaya, oleh karena itu
harus dicegah agar tidak dibuang ke saluran umum. Karakteristik pencemaran air
dari industri manufaktur antara lain:

- Limbah cair
- Industri makanan
- Industri tekstil
- Industri pulp dan kertas
- Industri kimia
- Industri kulit
 - Industri electroplating

d. Pencemaran Air oleh Aktivitas Perkotaan

Aktivitas manusia di perkotaan memberikan andil dalam menimbulkan

pencemaran lingkungan yang tinggi. Ledakan jumlah penduduk yang tidak
terkendali mengakibatkan laju pencemaran lingkungan melampaui laju
kemampuan alam. Penyebab pencemaran air karena limbah perkotaan seperti air
limbah, kotoran manusia, limbah rumah tangga, limbah gas, dan limbah panas.

3.2.4. Penanganan Limbah Cair

Tahap awal penanganan limbah cair adalah proses penyaluran dan

pengumpulan. Proses ini meliputi sistem perpipaan dalam rumah dan perkantoran,
sistem penyambungan pipa kesaluran pengumpul, sistem penyaluran limbah cair
dan kelengkapannya, seperti lubang pemeriksa serta pemompaan. Tahap
berikutnya adalah pengolahan yang dimulai dari tahap pengolahan pendahuluan
(pretreatment/prelaminary treatment), pengolahan tahap pertama (primary
treatment), pengolahan tahap kedua (secondry treatment), pengolahan tahap ketiga
(tertiary treatment), dan pengolahan lumpur (sludge disposal).

Pada penanganan limbah cair jenis dan jumlah proses pengolahan limbah
cair tergantung pada kualitas efluen limbah cair. Jadi, jenis teknologi yang
digunakan bergantung pada analisis kualitas limbah cair serta penggunaan efluen.
Efluen limbah cair dengan konsentrasi tinggi yang dibuang di sungai dapat
dimanfaatkan sebagai baku air minum. Akan tetapi, memanfaatkan air tersebut
menuntut proses pengolahan yang lengkap dibandingkan dengan limbah cair yang
dibuang kedalam saluran irigasi untuk pertanian. (Soeparman, 2001)

3.3.Nitrogen

Nitrogen adalah salah satu unsur esensiil pada makhluk hidup. Nitrogen
cair digunakan sebagai bahan pembeku dalam industri pengolahan makanan.
Penggunaaan penting lainnya ialah dalam proses produksi berbagai senyawa
nitrogen, terutama melalui pembuatan amoniak.
 Kesetimbangan yang bagus dari daur nitrogen dapat dengan mudah
dikacaukan oleh aktivitas manusia. Bila tanah dibudayakan secara ekstensif,
nitrogen terfiksasi dilepaskan dengan laju yang lebih besar dari pada
pengembaliannya secara alami. Keadaan tersebut membutuhkan pengembalian
senyawa nitrogen ke dalam tanah sebagai pupuk. Telah diperkirakan bahwa
pemasukan nitrogen terfiksasi ke dalam daur nitrogen melalui aktivitas manusia
sekarang menyamai atau melebihi yang berasal dari sumber alami. (Suminar,
1987)

Nitrogen yang berasal dari udara merupakan komponen utama dalam

pembuatan pupuk dan telah banyak membantu intensifikasi produksi bahan
makanan di seluruh dunia. Sebelum adanya proses fiksasi nitrogen secara sintetik,
sumber utama nitrogen untuk keperluan pertanian hanyalah bahan limbah dan
kotoran hewan, serta amonium sulfat yang didapatkan dari hasil sampingan
pembuatan kokas dari batu bara. (Austin, 1996) Menurut (Gabriel, 2001), sifat
nitrogen ada dua, yaitu:

a.Sifat fisika Nitrogen

- Panas transformasi β ↔ α: 54,71 kal/mol.

- Panas fusi/peleburan: 17,23 kal/mol.
- Panas penguapan: 1332,9 kal/mol.
- Temperatur kritis: 126,26 ± 0,04 kal/mol.
- Tekanan kritis: 33,45 ± 0,02 atm.
- Massa jenis:
 Bentuk α: 1,0265 gr/ml pada -252,6oC
 Bentuk β: 0,08792 gr/ml -210,0oC
 Bentuk cair: 1,1607-0,0045

b.Sifat kimia Nitrogen

Pada suhu rendah elemen nitrogen berkemampuan reaktif sangat rendah.

Pada suhu tinggi nitrogen bisa bereaksi dengan Chrom, Silikon,Titanium,
Aluminium, Boron, Berrylium, Magnesium, Barium, Strontium, Kalsium, dan
Lithium dan membentuk nitrit dan oksigen membentuk NO. Dengan adanya
katalisator dan suhu menengah, nitrogen bereaksi dengan hidrogen membentuk
amoniak. Pada suhu di atas 1800oC, Nitrogen, Karbon dan Hidrogen bergabung
membentuk Hidrogen Sianida.

Menurut (Mahida, 1993), persenyawaan-persenyawaan nitrogen yang

terdapat dalam tanah dapat dibagi dalam tiga kelompok, yaitu:

a) Nitrogen yang ada sebagai ion-ion nitrat dan amonium, yang merupakan
bagian sangat kecil dari seluruh nitrogen yang ada, namun merupakan
sumber dari nitrogen bagi tanaman-tanaman.
b) Nitrogen yang ada dalam persenyawaan, seringkali disebut persenyawaan
nitrogen yang dapat dinitrifikasikan, yang cepat terurai untuk
menghasilkan ion-ion nitrat atau amonium.
c) Nitrogen yang terdapat dalam persenyawaan yang dengan lambat terurai
oleh mikroflora tanah.
3.3.1. Nitrogen Total

Nitrogen Total adalah jumlah atau kadar keseluruhan nitrogen yang terdapat
dalam limbah cair atau sampel, air permukaan dan lainnya.

Analisis air limbah terhadap nitrogen total meliputi berbagai nitrogen yang
berbeda-beda yaitu amoniak, nitrit dan nitrat. Hubungan yang timbul diantara
berbagai bentuk campuran nitrogen dan perobahan-perobahan yang terjadi dalam
alam pada umumnya digambarkan dengan “siklus nitrogen”. Didalam air limbah
kebanyakan dari nitrogen itu pada dasarnya terdapat dalam bentuk organik atau
nitrogen protein dan amoniak. Setingkat demi setingkat nitrogen organik itu
dirobah menjadi nitrogen amoniak, dalam kondisi-kondisi aerobik, oksidasi dari
amoniak menjadi nitrit dan nitrat terjadi sesuai waktunya. (Mahida, 1993)

a. Amoniak

Amoniak merupakan senyawa nitrogen yang menjadi NH4 pada pH

rendah. Amoniak dalam air buangan industri berasal dari oksidasi bahan-bahan
organik oleh bakteri diubah menjadi CO2 , H2 O, NH3 . Amoniak dalam air
limbah sering terbentuk karena adanya proses kimia secara alami. (Ginting, 2007)
Pengaruh amoniak pada kesehatan manusia, yaitu dapat menyebabkan iritasi pada
mata jika kandungan amoniak dalam air lebih besar dari 0 (nol) mg/l. (Soeparman,
2001).

b. Nitrit

Nitrit merupakan bentuk nitrogen yang hanya sebagian teroksidasi. Nitrit

tidak ditemukan dalam air limbah yang segar, melainkan dalam limbah yang
sudah basi atau lama. Nitrit tidak dapat bertahan lama dan merupakan keadaan
sementara proses oksidasi antara amoniak dan nitrat. Nitrit bersumber dari bahan
yang bersifat korosif dan banyak dipergunakan di pabrik-pabrik. Nitrit tidak tetap
dan dapat berubah menjadi amoniak atau dioksidasi menjadi nitrat. (Ginting,
2007)

Pengaruh nitrit pada kesehatan manusia yaitu, dapat menyebabkan

methamoglobinemia dan efek racun kandungan nitrit dalam air lebih besar dari 0
(nol) mg/l. (Soeparman, 2001)

d. Nitrat

Ternyata nitrat juga dapat menjadi pupuk pada tanaman air. Bila terjadi
hujan lebat, air akan membawa nitrat dari tanah masuk ke dalam aliran sungai,
danau, dan waduk. Kemudian menuju lautan dalam kadar yang cukup tinggi. Hal
ini akan merangsang tumbuhnya algae dan tanaman air lainnya. Kelimpahan
unsur nutrisi nitrat ini dalam air disebut Euthrophication. Pengaruh negatif
eutropikasi ini ialah terjadinya perubahan keseimbangan kehidupan antara
tanaman air dan hewan air. Pengaruh nitrat pada kesehatan manusia yaitu, dapat
menyebabkan terjadinya methamoglobinemia pada bayi yang mengkonsumsi air
dengan konsentrasi nitrat lebih dari 45 mg/l. (Soeparman, 2001).

3.3.2. Siklus Nitrogen

Nitrogen merupakan unsur penting dalam protein, jadi penting bagi

tumbuhan dan hewan. Dibanding dengan oksigen, nitrogen tersedia empat kali
lebih banyak di atmosfir, tetapi kebanyakan organisme tidak dapat
mempergunakan nitrogen atmosfir secara langsung. Hampir semua tanaman dan
hewan dapat menggunakan nitrogen secara langsung. Oleh karena itu siklus
nitrogen menyediakan banyak jembatan antara cadangan atmosfir dan komunitas
biologis. (Kristanto, 2002).

3.3.3. Kegunaan Nitrogen

Nitrogen merupakan salah satu elemen dari berbagai elemen (Fosfor,

Kalium, Sulfur, Kalsium, Magnesium) yang tergolong dalam elemen nutrisi.
Elemen nitrogen terkandung di dalam protein (semua protein) dipakai untuk
membangun sel. Selain itu nitrogen cair (-179oC) dipakai sebagai obat pemati rasa
dalam proses pembedahan dan dipakai untuk membekukan butir-butir darah agar
bisa disimpan agak lama. (Gabriel, 2001)

3.4.Spektrofotometer

Spektrofotometer sesuai dengan namanya adalah alat yang terdiri dari

spektrometer dan fotometer. Spektrometer ialah menghasilkan sinar dari spektrum
dan panjang gelombang tertentu, sedangkan fotometer adalah alat pengukur
intensitas cahaya yang ditransmisikan atau yang diabsorpsi. Jadi spektrofotometer
adalah alat yang digunakan untuk mengukur energi secara relatif jika energi
tersebut ditransmisikan, direfleksikan atau diemisikan sebagai fungsi dari panjang
gelombang. Kelebihan spektrometer dibandingkan fotometer adalah panjang
gelombang dari sinar putih dapat lebih terseleksi dan ini diperoleh dengan alat
pengurai seperti prisma, grating ataupun celah optis. Pada fotometer filter, sinar
dengan panjang gelombang yang diinginkan diperoleh dengan berbagai filter dari
berbagai warna yang mempunyai spesifikasi melewatkan trayek panjang
gelombang tertentu. Pada fotometer filter, tidak mungkin diperoleh panjang
gelombang yang benar-benar monokromatis, melainkan suatu trayek panjang
gelombang 30-40 nm. Sedangkan pada spektrometer, panjang gelombang yang
benar-benar terseleksi dapat diperoleh dengan bantuan alat pengurai cahaya
seperti prisma. Suatu spektrofotometer tersusun dari sumber spektrum tampak
yang kontinyu, monokromator, sel pengabsorpsi untuk larutan sampel atau blanko
dan suatu alat untuk mengukur perbedaan absorpsi antara sampel dan blanko
ataupun pembanding. (Khopkar, 1990)

3.5.Spektrofotometer Ultraviolet dan Visible (UV-Vis)

Spektrofotometer UV-Vis pada umumnya digunakan untuk:

a. Menentukan jenis kromofor, ikatan rangkap yang terkonyugasi dan

ausokrom dari suatu senyawa organik.
b. Menjelaskan informasi dari struktur berdasarkan panjang gelombang
maksimum suatu senyawa.
c. Mampu menganalisis senyawa organik secara kuantitatif dengan
menggunakan hukum Lambert-Beer.

Spektrofotometri UV-Vis adalah pengukuran panjang gelombang dan

intensitas sinar ultraviolet dan cahaya tampak yang diabsorbsi oleh sampel. Sinar
ultraviolet dan cahaya tampak memiliki energi yang cukup untuk mempromosikan
elektron pada kulit terluar ke tingkat energi yang lebih tinggi. Spektroskopi UV-
Vis biasanya digunakan untuk molekul dan ion anorganik atau kompleks di dalam
larutan. Spektrum UV-Vis mempunyai bentuk yang lebar dan hanya sedikit
informasi tentang struktur yang bisa didapatkan dari spektrum ini sangat berguna
untuk pengukuran secara kuantitatif. Sinar ultraviolet berada pada panjang
gelombang 200-400 nm, sedangkan sinar tampak berada pada panjang gelombang
400-800 nm.

Panjang gelombang (λ) adalah jarak antara satu lembah dan satu puncak,
sedangkan frekuensi adalah kecepatan cahaya dibagi dengan panjang gelombang

(λ). Bilangan gelombang adalah (v) adalah satu satuan per panjang gelombang.
(Dachriyanus, 2004)

Kebanyakan penerapan spektrofotometri UV-Vis pada senyawa organik

didasarkan n-π* ataupun π-π* karena spektrofotometri UV-Vis memerlukan
hadirnya gugus kromofor dalam molekul itu. Transisi ini terjadi dalam daerah
spektrum (sekitar 200 ke 700 nm) yang nyaman untuk digunakan dalam
eksperimen. Spektrofotometer UV-Vis yang komersial biasanya beroperasi dari
sekitar 175 atau 200 ke 1000 nm. Identifikasi kualitatif senyawa organik dalam
daerah ini jauh lebih terbatas daripada dalam daerah inframerah. Ini karena pita
serapan terlalu lebar dan kurang terinci. Tetapi, gugus-gugus fungsional tertentu
seperti karbonil, nitro dan sistem tergabung, benar-benar menunjukkan puncak
yang karakteristik, dan sering dapat diperoleh informasi yang berguna mengenai
ada tidaknya gugus semacam itu dalam molekul tersebut. (Underwood A.L,
1986).

3.5.1. Hukum Lambert-Beer

Hukum Lambert-Beer (Beer`s law) adalah hubungan linearitas antara

absorban dengan konsentrasi larutan sampel. Konsentrasi dari sampel di dalam
larutan bisa ditentukan dengan mengukur absorban pada panjang gelombang
tertentu dengan menggunakan hukum Lambert-Beer. Biasanya hukum Lambert-
Beer ditulis dengan:

A = ε . b. C
A = Absorban (serapan)
ε = koefisien ekstingsi molar (M-1 cm-1)
b = tebal kuvet (cm)
C = konsentrasi (M)
Pada beberapa buku ditulis juga:
A = E. b. C
E = Koefisien ekstingsi spesifik (ml g-1 cm-1)
b = tebal kuvet (cm)
C = Konsentrasi (gram/100 ml).

Menurut (Dachriyanus, 2004), Hukum Lambert-Beer terbatas karena sifat

kimia dan faktor instrumen. Penyebab non linearitas ini adalah:
- Deviasi koefisien ekstingsi pada konsentrasi tinggi (>0,01 M), yang
disebabkan oleh interaksi elektrostatik antara molekul karena jaraknya
yang terlalu dekat.
- Hamburan cahaya karena adanya partikel dalam sampel.
- Flouresensi atau fosforesensi sampel.
- Berubahnya indeks bias pada konsentrasi yang tinggi.
- Pergeseran kesetimbangan kimia sebagai fungsi dari konsentrasi.
- Radiasi non-monokromatik; deviasi bisa digunakan dengan
menggunakan bagian datar pada absorban yaitu pada panjang
gelombang maksimum.
 BAB IV
METODOLOGI PENELITIAN

Percobaan ini bertujuan untuk memverifikasi metode penentuan total

nitrogen dalam air dan limbah cair dengan kalium peroksodisulfat menggunakan
spektrofotometer UV VIS. Hasil uji dibandingkan dengan syarat keberterimaan
yang ditetapkan oleh P3KLL , sehingga metode tersebut dapat digunakan untuk
analisis rutin di Laboratorium Air dan Limbah Cair PUSARPEDAL.

4.1.Tempat dan waktu pelaksanaan PKL

Proses analisis ini dilakukan di Laboratorium Air dan Limbah Cair

Pusarpedal yang berlokasi di kawasan Puspitek gedung 210, Serpong, Tangerang.
Adapun waktu pelaksanaanya adalah selama kurang lebih 1 bulan (terhitung mulai
tanggal 7 Januari 2019- 7 februari 2019)

4.2.Metode

Adapun metode yang digunakan adalah secara peroksodisulfat. Yaitu

metode yang berdasarkan oksidasi, yang mengoksidasi semua senyawa nitrogen.

4.3.Prosedur Kerja
4.3.1. Prinsip kerja

Penambahan larutan alkalin dari kalium peroksodisulfat terhadap sampel

untuk mengubah senyawa ntrogen menjadi ion nitrat serta menguraikan senyawa
organik.

4.3.2. Pengambilan Sampel

Pada penetapan total nitrogen dengan kalium peroksodisulfat dalam air

sungai yang digunakan adalah sampel sungai yang diambil oleh tim sampling
P3KLL.

4.3.3. Alat dan Bahan yang Digunakan

4.3.3.1.Alat yang Digunakan
 1. Spektrofotometer UV-VIS;

2. Labu ukur 50 ml, 500ml;

3. Gelas Piala 50ml,100ml;

4. Pipet volumetric 0,5;1,0;2,0;3,0;4,0;5,0;6,0;7,0;9,0;10 mL;

5. Pipet ukur 5 mL;

6. Botol dekomposing 100ml tahan panas;

7. Autoklaf;

8. Oven;

9. Desikator;

10. Neraca Anlitik Digital;

11. Botol semprot

12. Spatula

13. Kuvet Spektrofotometer

14. pH meter D-05

4.3.3.2.Bahan yang Digunakan

Bahan kimia berkualitas p.a dan bahan lain yang dignakan dalam pengujian ini
terdiri atas

1. Aquades atau air bebad ion (deionized water) yang mempunyai DHL 0,5-
2,0 µmhos/cm
2. Larutan NaOH-K2S2O8
3. Larutan HCl ( 1+16)
4. Larutan HCl (1+500)
5. Saringan membran berposi 0,45 µm
6. Larutan induk KNO3 100 ppm
4.3.4. Cara Kerja
4.3.4.1.Penetapan Total Nitrogen

a. Preparasi Sampel

Sampel air sungai yang diambil sebaiknya langsung dianalisis, apabila

tidak memungkinkan maka sampel dapat diawetkan dengan penambahan
H2SO4 pekat sampai pH<2 dan disimpan ditempat gelap pada temperatur 40C.

b. Pembuatan Reagen dan Perekasi

- Pembuatan Larutan Induk KNO3

Larutkan 0.1805 gram KNO3 ( yang telah dipanaskan pada suhu 1050C
- 1100C selama 3 jam dan dinginkan dalam desikator ) dengan aquades
dalam labu ukur 250mL. Kemudian tera dengan aquades hingga tanda
tera. Simpan dalam botol borosiklat berwarna gelap pada suhu 40C.
- Pembuatan Larutan Baku Nitrogen 10 ppm (mg/L)
Pipet 5 mL larutan induk 100 ppm kedalam labu ukur 50 ml kemudian
tambahkan aquades sampai tanda tera (dibuat saat akan digunakan)
- Pembuatan larutan NaOH-K2S2O8
Larutkan 10 gram natrium hidroksida dengan 250 ml aquades
tambahkan 7.5 gram kalium peroksodium sulfat, aduk hingga larut
sempurna.( Dibuat pada saat akan digunakan dan jumlah larutan yang
akan dibuat tergantung pada jumlah blanko, sampel dan spike yang
akan dibuat.
- Larutan HCl (1+16)
Tambahkan 5 mL HCl pekat kedalam 80 mL aquades.
- Larutan HCl ( 1+500)
Tambahkan 1 mL HCl pekat ke dalam 500 mL air suling.

b. Pengujian Sampel

- Pembuatan Kurva Kalibrasi

1. Pembuatan Larutan Kerja
  Pipet 0,0: 0,25: 1,0:2,0:3,0:4,0:5,0:6,0:7,0:9,0:10 ke
dalam labu ukur 50 ml. Encerkan masing-masing larutan
dengan air suling, lalu tepatkan sampat tanda tera.
 Larutan kerja tersebut mengandung 0,0:
0,05:0,2:0,4:0,6:0,8:1,0:1,2:1,4:1,8:2,0 mg N/L
2. Pembuatan Kurva kalibrasi dengan tahapan sebagai berikut:
 Ambil 50 mL larutan yang telah dibuat, masukkan
kedalam botol dekomposing tahan panas 100ml
 Tambahkan 10 mL larutan NaOH-K2S2O8, segera tutup
dan kocok.
 Masukkan kedalam autoklaf dan panaskan pada
temperatur 1200 C selama 30 menit
 Keluarkan botol dan dinginkan. Saring dan tampung
filtratnya
 Pipet 25 mL filtrat kedalam gelas piala 50 mL
 Tambahkan 5 mL HCl (1+500) dan atur pH antara 2-3
 Ukur absorbansinya dengan spektrofotometer pada
panjang gelombang 220 nm, dengan refrerence (zerp
adjustment) air suling.
- Penentuan Limit Of Lineritas (LOL)
1. Pembuatan Larutan Kerja
 Pipet 0,025 ml dan 10 ml KNO3 10 ppm ke dalam labu
ukur 50ml ulangi pengenceran sebanyak 10x, larutan
tersebut mengandung 0,05 mg N/L dan 2,0 mg N/L
2. Pengukuran LOL
 Ambil 50 mL larutan kerja, masukkan kedalam botol
dekomposing tahan panas 100ml
 Tambahkan 10 mL larutan NaOH-K2S2O8, segera tutup
dan kocok.
  Masukkan kedalam autoklaf dan panaskan pada
temperatur 1200 C selama 30 menit
 Keluarkan botol dan dinginkan. Saring dan tampung
filtratnya
 Pipet 25 mL filtrat kedalam gelas piala 50 mL
 Tambahkan 5 mL HCl (1+16) dan atur pH antara 2-3
 Ukur absorbansinya dengan spektrofotometer pada
panjang gelombang 220 nm, dengan refrerence (zerp
adjustment) air suling.
- Penentuan Method Detection Limit (MDL)
1. Pembuatan larutan Keja
 Pipet 50 ml sampel
 Pipet 0.1 ml larutan KNO3 10 ppm kedalam labu
ukur 50 ml tambahkan dengan sampel sampe tanda
tera (sampel +0.02ppm std) spike
2. Penentuan MDL
 Ambil 50 mL larutan kerja, masukkan kedalam botol
dekomposing tahan panas 100ml
 Tambahkan 10 mL larutan NaOH-K2S2O8, segera
tutup dan kocok.
 Masukkan kedalam autoklaf dan panaskan pada
temperatur 1200 C selama 30 menit
 Keluarkan botol dan dinginkan. Saring dan tampung
filtratnya
 Pipet 25 mL filtrat kedalam gelas piala 50 mL
 Tambahkan 5 mL HCl (1+16) dan atur pH antara 2-3
 Ukur absorbansinya dengan spektrofotometer pada
panjang gelombang 220 nm, dengan refrerence (zerp
adjustment) air suling.
- Verifikasi Kurva kalibrasi dengan CRM
1. Penentuan Larutan Kerja
 Pipet 0,01 ml CRM ( Certified Refrence Material)
dan masukkan ke labu ukur 50 ml tambahkan
aquades sampe tanda tera (pengulangan sampe 10x)
2. Penentuan Akurasi dan Presisi
 Ambil 50 mL larutan kerja, masukkan kedalam botol
dekomposing tahan panas 100ml
 Tambahkan 10 mL larutan NaOH-K2S2O8, segera
tutup dan kocok.
 Masukkan kedalam autoklaf dan panaskan pada
temperatur 1200 C selama 30 menit
 Keluarkan botol dan dinginkan. Saring dan tampung
filtratnya
 Pipet 25 mL filtrat kedalam gelas piala 50 mL
 Tambahkan 5 mL HCl (1+16) dan atur pH antara 2-3
 Ukur absorbansinya dengan spektrofotometer pada
panjang gelombang 220 nm, dengan refrerence (zerp
adjustment) air suling.
 BAB V
HASIL DAN PEMBAHASAN

Pada Praktek Kerja Lapangan ini, dilakukan ”Verifikasi Penentuan Total

Nitrogen Dalam Air dan Limbah Cair dengan Kalium Peroksodisulfat Secara
Spektrofotometer UV-VIS”. Prinsip dari penelitian ini adalah penambahan larutan
alkalin dari kalium peroksodisulfat terhadap sampel untuk mengubah senyawa
ntrogen menjadi ion nitrat serta menguraikan senyawa organik. Adapun metode
yang digunakan adalah secara peroksodisulfat. Yaitu metode yang berdasarkan
oksidasi, yang mengoksidasi semua senyawa nitrogen. Penelitian ini
menghasilkan data verfikasi metode berupa hasil linearitas kurva, limit deteksi,
data akurasi dan presisi.

5.1. Linearitas Kurva Standar

Dilakukan pengukuran absorbansi 10 larutan standar KNO3 dan blanko

dengan konsentrasi yang ditentukan dari rentang metode Nitrogen yaitu 0.05-2.0
mg N/L yaitu membuat 10 titik kurva kalibrasi diantaranya (0.05; 0.02 ; 0.04 ;
0.06 ; 0.08 ; 1.0 ; 1.2 ; 1.4 ; 1.6 ; 1.8 ; 2.0 )

Table 2 Data Linearitas Kurva Kalibrasi

Method Slope 0.2191

Intercept 0.0906
Correlation Determination (R) 0.9997
Correlation Coeficient (r) 0.9997
Batas Keberterimaan r ≥ 0.9995
KESIMPULAN LINEARITAS DITERIMA

Berdasarkan Tabel 2 , didapatkan Correlation Coefficien (r) 0.9995. Nilai

tersebut menunjukkan bahwa titik-titik hasil penelitian linear pada rentang
konsentrasi yang diuji karena kurva standar Nitrogen ini memenuhi syarat
keberterimaan linearitas yaitu r>0.995. Nilai Method Slope (b) merupakan ukuran
sensifitas dari suatu metode pengujian semakin besar nilai b maka metode
pengujian memberikan sensifitas lebih tinggi atau respon instrumen yang cukup
kuat terhadap merubah konsentrasi yang ada. Idealnya intercept (a) adalah nol,
namun kenyataannya pada data yang ditemukan respon instrumen, hal ini
disebabkan karena adanya gangguan (noise) ataupun kontiminasi. Hal ini tidak
menjadi suatu kesalahan jika pada saat uji linearitas dan akurasi pada kurva
tersebut memenuhi batas keberterimaan.

Uji linearitas kurva kalibrasi dilakukan untuk membuktikan linearitas

hubungan antara konsentrasi dengan respon instrumen. Akan tetapi uji ini lebih
bersifat subjektif karena beda pengamat akan memberikan kesimpulan yang
berbeda terhadap suatu linearitas, untuk menghindari hal tersebut maka digunakan
uji linearitas secara statistika dengan mencari nilai Fhitung yang dibandingkan
dengan nilai Ftabel pada tingkat kepercayaan 99% menggunakan data pada kurva
yang disajikan pada tabel 3.

5.2 Penentuan Limit of Linearity (LoL)

Uji linearitas dapat ditentukan dengan mencari nilia Fhitung dari

perbandingan antara simpangan baku batas atas kurva dan batas bawa dari kurva
kalibrasi yaitu (0.005 mg/L dan 2.0 mg/L). Rumus untuk menentukannya adalah
sebagai berikut:

𝑆𝐷12
𝐹 ℎ𝑖𝑡𝑢𝑛𝑔 = ……………………………...................... (1)
𝑆𝐷22

Nilai Fhitung yang diperoleh dibandingkan dengan nilai Ftabel pada tingkat
kepercayaan 99%, dengan kesimpulan sebagai berikut:

1. Jika Fhitung< Ftabel, garis yang terbentuk adalah regresi linear

2. Jika Fhitung> Ftabel, garis yang terbentuk adalah regresi non-linear

Berdasarkan pengolahan data pada Tabel 2, maka dapat disimpulkan garis yang
terbentuk tersebut mutlak merupakan garis regresi linear dan diketahui pula nilai
LoL.

Table 3 Penentuan LoL

Parameter Hasil Keterangan

F hitung 0.3352 Fhitung<Ftabel
F tabel F(9) 5.351 Diterima
LoL 2.0 ppm

Nilai LoL berarti titik akhir nilai konsentrasi garis regresi ini masih linear
pada konsentrasi tersebut.

5.3. Verifikasi Kurva Kalibrasi dengan CRM

Verifikasi kurva kalibrasi dimaksudkan utntuk ketertelusuran pengujian

dan akurasi kemiringan (slope) kurva kalibrasi dengan menggunakan CRM.
Perlakuan ini dilakukan dengan menggunakan bahan acuan bersetifikat dan nilai
kadar yang diperoleh harus masuk kedalam nilai rentang ketidakpastian yang
tertera dalam sertifikat CRM. Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan pada
pengujian CRM didapatkan hasil pada Tebel 4. Berdasarkan data pada tabel 4 dan
uji kurva kalibrasi dapat disimpulkan bahwa kurva kalibrasi yang diperoleh
merupakan kruva yang dapat dipercaya untuk proses pengujian karena memenuhi
semua batas keberterimaan.

Table 4 Verifkasi kurva kalibrasi dengan CRM

Batas Keberterimaan Keterangan Kesimpulan

1) %RSD ≈ 9,17% 0.74% Diterima
2)%Trueness≈%R≈ 80% - 115% 105% Diterima
3) %Bias ≈ - 20% - (+15%) 10% Diterima
5.4. Penentuan Method Detection Limit (MDL)

Limitdeteksi metode adalah nilai yang diputuskan secara statistik untuk

menetapkan hasil pengukuran suatu zat melalui metode analisis tertentu yang
berbeda dengan pembacaan blanko. Penentuan limit deteksi metode bertujuan
mengevaluasi kemampuan metode dalam mengkuantisasi analit. Rumus
perhitungan limit deteksi metode adalah sebagai berikut:

𝑀𝐷𝐿 = 𝑡𝑛−1 𝑥 𝑆𝐷

Keterangan :

MDL = Method Detection Limit

tn-1 = nilai t tabel dengan tingkat kepercayaan 99%

SD = Simpangan baku ( Standar Deviasi)

Berdasarkan tabel 5 bahwa metode ini dapat mendeteksi suatu sampel pada
konsentrasi terendah. Semua pengujian dalam penentuan MDL dilakukan
pemeriksaan dengan five point check untuk dapat mengetahui kebenaran dari nilai
MDL. Akurasi yang dihasilkan dalam penentuan MDL sangat tergantung dengan
konsentrasi target yang digunakan. Bila MDL kurang dari 10% spike, berarti data
pengujian memiliki nilai keragaman yang besar dan stabil sehingga akan
menyebabkan kesulitan dalam membedakan antara nilai MDL dengan LoQ jadi
penentuan MDL harus diulang dengan menggunakan konsentrasi target yang lebih
rendah. Bila nilai MDL lebih besar dari spike, maka data pengujian memiliki nilai
keragaman yang kecil.

a. Uji perolehan kembali (% Recorvery) memenuhi batas keberterimaan yang

disyaratkan yaitu 70%-125%. Berdasarkan data pada Tabel 5, hasil
pengujian memenuhi persyaratannya yaitu 89.3 %.
b. Berdasarkan Tabel 5. S/N yang didapat adalah 6.393. Bila S/N kurang dari
2.5, maka hal ini menunjukkan kesalahan acak yang terjadi pada pengujian
terlalu tinggi dan menghasilkan MDL yang tinggi. Dalam hal ini,
 penambahan larutan standar pada sampel harus pada konsentrasi yang
lebih tinggi agar dapat mengingkatkan signal yang ada. Bila S/N yang
diperoleh lebih besar dari 10 maka penambahan larutan standar pada
sampel yang terlalu tinggi, oleh karena itu konsentrasi larutan standar yang
ditambahkan harus pada konsentrasi sampel yang lebih rendah.

Pemelihan konsentrasi spike dalam penentuan MDL harus sesuai dengan

keberterimaan, yaitu 10% Spike< MDL < Spike. Berdasarkan pengolahan
data, kriteria tersebut memenuh keberterimaan didapat sebesar
0.002<0.007<0.02.

Table 5 Penentuan Methode Dtection Limit

Parameter Hasil
Konsentrasi Target (mg/L) 0.02
Rata-rata konsentrasi perolehan kembali 0.021
(mg/L)
%RSD < 0.67 CV Horwitz 15.64 < 21.45
% Recorvery 89.3%
S/N 6.393
MDL 0.007
LoQ 0.02
Simpulan Diterima

5.5 Penentuan Repeatabilitas dan Reprosibilitas

Pengulangan pengujian sangat diperlukan dalam penentuan MDL, terdapat

dua parameter pengulangan yang dilakukan dalam penelitian ini yaitu penentuan
repeatabilitas dan reprosibilitas atau keterulangan dilakukan dengan pengukuran
spike sebanyak 7 kali pengulanganoleh satu orang analis, sedangkan pengujian
parameter reprodusibilitas atau ketertiruan dilakukan dengan membandingkan
pengukuran larutan spike sebanyak 7 kali pengulangan yang dilakukan oleh dua
analis yang berbeda yang bertujuan untuk melihat variabilitas hasil pengujian
terhadap waktu,kondisi akomodasi, sumber daya dan lingkungan.

Table 6 Penentuan repeatabilitas, Reprodusibilitas dan Akurasi

a. Hari pertama

Table 6.1 Repeatabilitas1

Parameter Hasil
Rerata 1.421
Standar Deviasi (SD) 0.0108
RSDr 0.76
Horwitz Value (PSDr) 15.76
Batas Keberterimaan (RSDr< 0.5 PRSDr) 0.76<7.68

b. Hari Kedua

Table 6.1 Repeatabilitas2

Parameter Hasil
Rerata 1.416
Standar Deviasi (SD) 0.0092
RSDr 0.65
Horwitz Value (PSDr) 15.184
Batas Keberterimaan (RSDr< 0.5 PRSDr) 0.65<7.68

Table 6.3 Reprosudibilitas1

Parameter Hasil
Analisa 1 Analisa 2

Rerata 1.422 1.420

Standar Deviasi 0.0114 0.0114
RSDr 0.8 0.8
Grand mean 1.42
SDr 0.01
RSDr 0.77
Horwitz Value
Batas
Keberterimaan
RSDr < 0.5 0.77 < 7.67
PRSDr

Evaluasi Data

SD12
Fhitung   0.996
SD22
Fhitung < Ftabel : maka data tidak beda nyata

sd g 
n1  1sd12  n2  1sd 22 
0.0290
n1  n2  2

x1  x2 ttabel = 2.1
t hitung   0.12
1 1
sd g 
n1 n2

thitung< ttabel : maka data tidak beda nyata

 BAB VI
PENUTUP
6.1.Kesimpulan
1. Penentuan Kadar Nitrogen dalam limbah cair dengan metode yang telah
ditetapkan secara SNI memiliki linearitas (r) 0.9997, MDL sebesar 0.007
mg/L LoQ 0.02 mg/L akurasi 105% dan Presisi 0.74%
2. Metode yang telah digunakan untuk menentukan total Nitrogen dalam
limbah cair dengan Kalium Peroksodisulfat bisa digunakan untuk metode
standar dalam penentuan nitrogen rutin dalam Laboratorium karena
memenuhi semua batas keberterimaan.
6.2.Saran
1. Setelah dilakukan preparasi larutan harus secepatnya diukur
absorbansinya karena pendiaman larutan yang terlalu lama akan
mengubah nilai absorbansinya sehingga pengukuran menjadi tidak valid.
2. Pastikan dalam membershikah kuvet tidak ada bekas atau noda yang
tertinggal dalam kuvet karena akan mempengaruhi hasil absorbansi.
DAFTAR PUSTAKA

Austin, G. (1996). Industi Proses Kimia Edisi kelima. Jakarta: Erlangga.

Dachriyanus, D. (2004). Analisis Struktur Senyawa Organik Secara Spektroskopi.

Padang: Andalas University Press.

Darmono. (1995). Lingkungan Hidup dan Pencemaran Hubungannya Dengan

Taksologi Senyawa Logam . Jakarta: UI-Press.

EMA. (1995). Validation of Analytical Procedure. The Europen Agency for the
Evaluation of Medicinal Products, (p. ICH Topic Q 2 B ).

Ermer, J. (2005). Performance parameters, calculation and tests. In J. J. Ermer,

Method Validation in Pharmaceutical Analysis. WILLEY-VCH verlag
Gmbh and Co. KGaA.

Gabriel. (2001). Fisika Lingkungan Cetakan Pertama. Jakarta: Hipokrates.

Garfield, K., & Hirsch, J. (2000). Quality Assurance Principle for Analytical
Laboratorie. USA: AOAC International.

Giese, G. (2004). Method Validation Institute of Hygiene and Environment. City

of Hamburg.

Ginting, P. (2007). Sistem Pengolahan Lingkungan dan Limbah Industri, Cetakan

Pertama. Bandung: CV.Yrama widya.

Harmita. (2004). Petunjuk pelaksanaan validasi metode dan cara perhitungannya.

Majalah Ilmu kefarmasian, 1(.3):117-135.

Harvey, D. (2000). Modern Analytical Chemistry. Inc., USA: McGraw-Hill

Companies.

Khopkar, S. (1990). Konsep Dasar Kimia Analitik. JAkrta: UI-Press.

Kristanto, P. (2002). In Ekologi Industri (pp. 20 167-170). Yogyakarta: Penerbit
Andi.

Leyva A, Q. A. (2008). Rapid and sensitive Anthrone-sulfuric acid essay in

microplate format to quantity carbohydrate in biopharmaceuticel product.
In method development and validation (pp. 36:134-141). biologicals.

Mahida, U. (1993). Pencemaran Air dan Pemanfaatan Limbah Industri. Jakarta:

PT Raja Gravindo Persada.

Smith, J. 2. (2010). Evaluation of analytical data. New York: Springer Science.

Soeparman. (2001). Pembuangan Tinja dan Limbah Cair Suatu Pengantar. Jakrta:
Buku Kedoktera EGC.

Suminar, A. (1987). Kimia Dasar Prinsip dan Terapan Modern edisi keempat.
Jakarta: Erlangga.

Sunu, P. (2001). Melindungi Lingkungan Dengan Menerapkan ISO 14001 ,

Cetakan, Pertama. Jakarta: PT. Gramedia Widiasarana Indonesia.

Thompson M, E. S. (2002). Harmonized quidelines for single laboratory

validation and methods of analysis. (pp. 74(5): 835-855). IUPAC
Technical repost.

Underwood A.L, D. R. (1986). Analisis Kimia Kuantitatif edisi kelima. Jakrta:

Erlangga.

Walton, R. (2001). Validation of laboratory tests and methods. 10(2)(59-65).

LAMPIRAN