Anda di halaman 1dari 64

LAPORAN KEGIATAN KOASISTENSI PPDH

ROTASI DIAGNOSA LABORATORIK


IDENTIFIKASI BAKTERI SALURAN PERNAFASAN AYAM
Yang dilaksanakan di
LABORATORIUM MIKROBIOLOGI DAN IMUNOLOGI
VETERINER
FKH UNIVERSITAS BRAWIJAYA

Oleh :

Gian Suryanatha Hartawan, S.KH


190130100111017

PENDIDIKAN PROFESI DOKTER HEWAN


FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN
UNIVERSITAS BRAWIJAYA
MALANG
2019
LEMBAR PENGESAHAN

LAPORAN KEGIATAN PPDH


ROTASI DIAGNOSA LABORATORIK
SEROLOGI DAN VIROLOGI
yang dilaksanakan di
LABORATORIUM MIKROBIOLOGI DAN IMUNOLOGI VETERINER
FKH UNIVERSITAS BRAWIJAYA MALANG

Malang, 03 November-29 November 2019

Oleh:
Gian Suryanatha Hartawan,S.KH
190130100111017

Menyetujui,
Komisi Penguji
Pembimbing Penguji

drh. Dahliatul Qosimah, M.Kes drh. Sruti Listra Adrenalin, M.Sc

NIP. 198201272015042001 NIP. 199204022019032029

Mengetahui,
Dekan Fakultas Kedokteran Hewan
Universitas Brawijaya

Dr. Ir. Sudarminto Setyo Yuwono, M.App.Sc


NIP. 19631216 198803 1 002

ii
KATA PENGANTAR
Puji syukur ke hadirat Allah SWT yang telah melimpahkan rahmat dan
hidayah- Nya sehingga penulisan proposal kegiatan PPDH (Pendidikan Profesi
Dokter Hewan) rotasi Diagnosa Laboratorik di Laboratorium Mikrobiologi dan
Imunologi Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Brawijaya dapat terlaksana.
Penulis mengucapkan terima kasih kepada‫׃‬
1. Dr. Ir. Sudarminto Setyo Yuwono, M.App.Sc selaku dekan Fakultas Kedokteran
Hewan Universitas Brawijaya.
2. drh. Wawid Purwatiningsih, M.Si selaku coordinator PPDH FKH UB
3. drh. Dahliatul Qosimah, M.Kes, selaku pembimbing/penguji, drh. Sruti Listra
Adrenalin, M.Sc., selaku penguji, drh. Indah Amalia A., M.Si, drh. Fidi Nur Aini
E.P.D.,M.Si, dan drh. Gegana Airlangga yang telah memberikan bimbingan,
arahan kepada penulis.
4. Keluarga penulis, Bapak Sugi Hartawan dan Ibu Sri Sumiati yang selalu
mendukung penulis dalam segala kondisi.
5. Teman sejawaat PPDH gelombang 13 dan Kelompok 6 (Lafox) atas kerjasama,
dan kebersamannya
6. Semua pihak yang telah membantu dalam penyelesaian penulisan proposal ini
yang tidak mungkin penulis sebutkan satu persatu.
Penulis sepenuhnya menyadari bahwa penulisan laporan ini masih jauh dari
sempurna, untuk itu penulis mohon kritik dan saran yang bersifat membangun
demi masa mendatang yang lebih baik. Semoga laporan ini dapat bermanfaat bagi
banyak pihak.

Malang, 9 November 2019

Penulis

iii
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL ................................................................................................i
LEMBAR PENGESAHAN ............................................................................ii
KATA PENGANTAR ..............................................................................................iii
DAFTAR ISI .............................................................................................................iv
DAFTAR GAMBAR ................................................................................................vi
DAFTAR TABEL ....................................................................................................vii
DAFTAR LAMPIRAN ............................................................................................viii
BAB I PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang ............................................................................................1
1.2 Perumusan Masalah ....................................................................................2
1.3 Tujuan .........................................................................................................2
1.4 Manfaat .......................................................................................................2
BAB II TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Bakteri.........................................................................................................4
2.2 Ayam Kampung ..........................................................................................4
2.3 Saluran Pernafasan Ayam ...........................................................................4
2.4 Penyakit Mikrobial Saluran Pernafasan Unggas ........................................5
2.5 Diagnosa Penyakit Mikrobial Saluran Pernafasan Unggas ........................6
2.5.1 Pemeriksaan Fisik Ayam .......................................................................6
2.5.2 Nekropsi Ayam .....................................................................................6
2.5.3 Isolasi Bakteri dan Pengambilan Sampel ..............................................8
2.5.4 Identifikasi Bakteri ................................................................................8
2.5.5 Pewarnaan Bakteri .................................................................................12
2.5.6 Uji Katalase dan Mycoplasma Rapid Test.............................................13
2.6 Colibacillosis ..............................................................................................13
BAB III MATERI DAN METODE
3.1 Waktu dan Lokasi Kegiatan........................................................................17
3.2 Peserta PPDH..............................................................................................17
3.3 Alat da Bahan .............................................................................................17
3.3.1 Alat ........................................................................................................17
3.3.2 Bahan .....................................................................................................18
3.4 Metode ........................................................................................................18
3.4.1 Cara Pengambilan Sampel ....................................................................19
3.4.2 Transportasi ...........................................................................................19
3.4.3 Pemeriksaan dan Diagnosis ...................................................................19
3.4.4 Pewarnaan Bakteri, Uji Mycoplasma Rapid Test, dan Uji Katalase .....22
3.4.5 Uji Sensitivitas Bakteri..........................................................................24
3.4.6 Bagan Kerangka Operasional ................................................................25

iv
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Pengamatan Gejala Klinis Ayam Kampung ...............................................26
4.1.1 Signalement ...........................................................................................26
4.1.2 Anamnesa ..............................................................................................26
4.1.3 Diagnosa ................................................................................................26
4.1.4 Gejala Klinis ..........................................................................................27
4.1.5 Patologi Klinis .......................................................................................27
4.2 Hasil Pemeriksaan ......................................................................................29
4.2.1 Uji Mycoplasma Rapid Test ..................................................................47
4.2.2 Differensial Diagnosa ............................................................................47
BAB V PENUTUP
5.1 Kesimpulan .................................................................................................49
5.2 Saran ...........................................................................................................49
DAFTAR PUSTAKA ...............................................................................................50

v
DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
2.1 Sistem Respirasi Ayam ................................................................................ 4
3.4.6 Kerangka Operasional ................................................................................. 25
4.1.3 Eksudat Keluar dari Rongga Nasal Ayam Kampung ................................... 27
4.1.4 Perubahan Patologis Pada Organ Ayam Kampung ...................................... 28
4.2. Hasil Pertumbuhan Koloni Pada Media NAP ............................................ 30
4.2 Hasil Pewarnaan Gram Media NAP ........................................................... 31
4.2 Hasil Pewarnaan Spora ................................................................................ 32
4.2. Hasil Pertumbuhan Koloni Pada Media MSA ............................................ 34
4.2 Hasil Pewarnaan Gram Media MSA ........................................................... 35
4.2. Hasil Uji Katalase ........................................................................................ 36
4.2 Hasil Pertumbuhan Koloni Pada Media BAP ............................................. 37
4.2 Hasil Pewarnaan Gram Media BAP ............................................................ 38
4.2 Hasil Pertumbuhan Koloni Pada Media MCA ........................................... 40
4.2. Hasil Pewarnaan Gram Media MCA ........................................................... 41
4.2. Hasil Pertumbuhan Koloni Pada Media EMBA ......................................... 42
4.2 Hasil Pewarnaan Gram Media EMBA ........................................................ 44
4.2. Hasil Uji Sensitivitas Antibiotik Bakteri Eschericia coli ............................ 45
4.2.1 Hasil Uji Mycoplasma Rapid Test ............................................................... 47

vi
DAFTAR TABEL
Tabel Halaman
4.2. Pertumbuhan Bakteri Pada Media NAP ...................................................... 29
4.2. Hasil Pewarnaan Gram Media NAP ............................................................ 31
4.2. Pertumbuhan Bakteri Pada Media MSA ..................................................... 33
4.2. Hasil Pewarnaan Gram Media MSA ........................................................... 35
4.2. Pertumbuhan Bakteri Pada Media BAP ...................................................... 37
4.2. Hasil Pewarnaan Gram Media BAP ............................................................ 38
4.2. Pertumbuhan Bakteri Pada Media MCA ..................................................... 39
4.2. Hasil Pewarnaan Gram Media MCA ........................................................... 41
4.2. Pertumbuhan Bakteri Pada Media EMBA ................................................... 42
4.2. Hasil Pewarnaan Gram Media EMBA ........................................................ 43
4.2 Hasil Uji Sensitivitas Antibiotik Bakteri Eschericia coli ............................ 45

vii
viii
BAB I
PENDAHULUAN
1.1.Latar Belakang
Industri merupakan sector sekunder dalam pembangunan ekonomi berbagai
negara. Industri pangan yang sedang mengalami perkembangan cukup pesat yaitu
industry Perunggasan. Industri Perunggasan di Indonesia merupakan industri
pangan asal hewan yang banyak dilaksanakan oleh masyarakat di Indonesia.
Namun, Industri perunggasan di Indonesia sering mengalami pasang surut. Pada
awal tahun 1998, saat krisis ekonomi dan moneter banyak bisnis perunggasan yang
bangkrut. Wabah flu burung (Avian Influenza) yang menurunkan gairah peternakan
unggas di Indonesia. Industri perunggasan yang sedang mengalami peningkatan di
Indonesia saat ini adalah industri Ayam Kampung. ayam kampung saat ini
popularitas-nya semakin meningkat dibandingkan daging unggas lainnya. Hal ini
ditunjukkan dengan laju pertumbuhan produksi paling tinggi 5,49% (Aedah, 2016).
Perkembangan industri perunggasan menghadapi berbagai tantangan salah satu
tantangan berat yang dihadapi peternak unggas yaitu Penyakit pada unggas yang
disebabkan oleh berbagai agen penyakit seperti bakteri, virus, parasite dan factor-
faktor lainnya. Permasalahan penyakit pada unggas yang dihadapi oleh peternak
dapat mencapai 76,7% (Adetayo,2013).
Mikroba merupakan organisme yang berukuran kecil (mikro) yang dapat
melakukan aktivitas untuk hidup yang tergolong dalam prokaryot seperti bakteri
dan virus, dan eukariotik seperti alga, protozoa. Mikroba dapat menyebabkan
penyakit pada makhluk hidup salah satunya bakteri yang dapat menyebabkan
terjadinya penyakit infeksius. Penyakit infeksi merupakan penyakit yang
disebabkan oleh masuk dan berkembang biaknya mikroorganisme dalam tubuh
hostnya dan menimbulkan berbagai gejala dan tanda klinis serta dapat
menyebabkan kerusakan organ (Novard, 2019).
Salah satu permasalah penyakit infeksius pada unggas yaitu penyakit respirasi
yang dapat disebabkan oleh bakteri yang memberikan dampak yang cukup banyak

1
terhadap kesehatan unggas. Bakteri yang menyebabkan terjadinya penyakit
respirasi pada unggas yaitu Mycoplasma gallisepticum (MG), Mycoplasma
synoviae (MS), Ornithobacterium rhinotracheale (ORT), Escherichia coli,dan
Staphylococcus sp. Penyakit bakteri ini dapat menurunkan kesehatan ayam hingga
kematian dan dapat bersamaan menyerang unggas dengan virus seperti Avian
influenza (Samy, 2018).
Berdasarkan uraian diatas, maka dilakukan pemeriksaan ayam kampung yang
mengalami sakit pada saluran respirasi yang diduga disebabkan oleh bakteri.
Pemeriksaan dan penentuan diagnosa sakit saluran respirasi didasarkan atas
diagnosa dentatif dan diagnose defenitif sehingga dapat menentukan dan
menyimpulkan penyakit yang menyerang saluran respirasi ayam kampung.
1.2 Perumusan Masalah
1. Bagaimana peneguhan diagnosa pada sampel unggas yang diduga mengalami
gangguan pernafasan?
2. Bakteri apa yang ditemukan pada sampel unggas yang diduga penyebab
penyakit saluran pernafasan pada unggas secara mikrobiologis?
3. Bagaimana status antibiotik terhadap bakteri yang menyebabkan terjadinya
peyakit pada saluran pernafasan unggas?
1.3 Tujuan
Tujuan dilaksanakan rotasi laboratorium mikrobiologi dan imunologi veteriner
ini yaitu :
1. Mengetahui dan memahami cara peneguhan diagnosa pada sampel unggas
yang diduga mengalami gangguan pernafasan
2. Mengetahui bakteri yang ditemukan pada saluran pernafasan unggas yang
diduga penyebab penyakit secara mikrobiologis
3. Mengaetahui dan memahami status antibiotik terhadap bakteri yang
meneybabkan terjadinya penyakit pada saluran pernafasan unggas
1.4 Manfaat
Manfaat dari pelaksanaan kegiatan koasistensi PPDH rotasi laboratorium di
Laboratorium Mikrobiologi dan Imunologi Veteriner FKH UB ini adalah untuk

2
memberikan kesempatan bagi mahasiswa untuk mengetahui dan memahami cara
peneguhan diagnosa terhadap penyakit pada saluran pernafasan unggas melalui
pemeriksaan secara mikrobiologis dan mengetahui status antibiotik terhadap
bakteri patogen yang menyebabkan penyakit pada saluran pernafasan unggas.

3
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Bakteri
Bakeri adalah mikroba prokariotik yang uniseluler dan berkembangbiak
dengan cara aseksual dengan pembelahan sel. Bakteri tidak berklorofil namun
ada yang bersifat fotosintetik, kemudian bakteri hidup secara bebas, parasit,
saprofit, sebagai patogen pada manusia, hewan dan tumbuhan. Habitatnya
terdapat dimanamana misalnya di alam, tanah, laut, atmosfer dan di dalam
lumpur. Bentuk tubuhnya ada yang bulat, spiral dan batang. Selain itu bakteri
merupakan struktur sel yang tidak mempunyai membran inti sedangkan
komponen genetiknya terdapat di dalam molekul DNA tunggal yang terdapat di
dalam sitoplasma. Ukuran sel-sel bakteri sangat bervariasi tergantung masing-
masing spesiesnya, namun pada umumnya 0,5-1,0 x 2,0-5 µm (Riskawati, 2016).
2.2 Ayam Kampung
Ayam buras merupakan salah satu jenis ternak unggas yang telah
memasyarakat dan tersebar diseluruh pelosok nusantara. Bagi masyarakat
Indonesia ayam buras sudah bukan hal asing, istilah “Ayam Buras” semula
adalah kebalikan dari istilah “Ayam Ras” dan sebutan ini mengacu pada ayam
yang ditemukan berkeliaran bebas disekitar rumah. Untuk memudahkan
pembedaannya maka kelompok ayam domestic (komersial) disebut ayam buras
(bukan ras), dengan demikian pengertian ayam buras tidaklah sama dengan ayam
kampung. Ayam buras berasal dari hasil domestikasi, yang mempunyai empat
spesies yakni Gallus Varius (Ayam hutan hijau), Gallus-gallus (Ayam hutan
merah), Gallus Sonnerati (Ayam hutan abu-abu india), dan Gallus Lavayeti
(Ayam hutan jingga) (Suardy, 2013).
2.3 Saluran Pernafasan Ayam
Respirasi merupakan salah satu proses vital yang berfungsi untuk
menjalankan proses metabolism didalam tubuh makhluk hidup. Sistem respirasi
terjadi proses pertukaran gas oksigen (O2) dari udara oleh organisme hidup yang
akan menghasilkan karbondioksida CO2 kemudian dikeluarkan dari dalam tubuh.

4
Saluran pernafasan unggas dimulai dari nasal, cavits nasalis, larynx, trachea,
syrinx. Bronkus primaries (mesobronchi), bronkus sekunder, tertiaries
(parabronchi), air capillaris, pulmo, air sac, dan pneumatic bones dari saluran
respirasi unggas. Ayam tidak memiliki diafragma sehingga paru-paru ayam tidak
mengembang. Paru-paru ayam memiliki fungsi untuk tempat pertukaran gas
(oksigan dan karbondioksida) (Kirbas, 2018).
Proses inspirasi dilakukan oleh air sac caudal, air sac cranial dan pulmo untuk
melakukan pertukaran O2 dan CO2. Proses ekspirasi terjadi melalui air sac caudal
kemudian menuju paru-paru. Karbondioksida menuju trachea melalui cranias
sacs lalu dikeluarkan menuju lingkungan (Kirbas, 2018). Sistem Pernafasan
unggas ditunjukkam pada (Gambar 2.1).

Gambar 2.1. Sistem Respirasi Ayam ( Kirbas, 2018)


2.4 Penyakit Mikrobial Saluran Pernafasan Unggas
Penyakit saluran pernafasan unggas dapat terjadi pada nasal, trachea, paru-
paru hingga air sac. Penyakit pernafasan pada unggas menyerang berbagai jenis
unggas baik yang diternakan maupun yang alam liar seperti ayam, bebek, angsa,
merpati, burung unta, kalkun, dan unggas-unggas lainnya. Agen penyebab
penyakit pada saluran pernafasan dapat disebabkan oleh bakteri, virus, maupun
jamur (Butcher, 2015).
Penyakit saluran pernafasan pada unggas yang disebabkan oleh microbial
(bakteri) yaitu Coryza yang disebabkan oleh bakteri Mycoplasma gallicepticum,

5
Mycoplasma synovium menyebabkan penyakit arthritis, Collibacilosis dapat
disebabkan oleh Escherichia coli (Colibacillosis), Pastreulla mulcotida dapat
menyebabkan penyakit pada saluran respirasi bawah dan dapat menyebabkan
kematian pada unggas, dan Ornithobacterium rhinotracheale dapat
menyebabkan terjadinya penyakit pada saluran pernafasan atas dan saluran
pernafasan bawah (Kubia, 2012).
2.5 Diagnosa Penyakit Mikrobial Saluran Pernafasan Unggas
Diagnosa Penyakit Mikrobial pada saluran pernafasan unggas dapat dilakukan
dengan mengamati gejala klinis yang terlihat pada unggas seperti adanya mucus
yang keluar dari nasal, unggas kesulitan saat bernafas, adanya suara berat yang
terdengar saat unggas bernafas. Pengambilan darah untuk menguji adanya bakteri
pathogen dengan menguji darah unggas yang diambil dan dicampur dengan
antigen seperti Mycoplasma Rapid Test. Pengamatan perubahan patologis pada
organ-organ pernafasan, dan melakukan isolasi dan identifikasi bakteri yang
terdapat pada organ-organ saluran pernafasan sehingga mendapatkan peneguhan
diagnose yang tepat (Kabir, 2010).
2.5.1 Pemeriksaan Fisik Ayam
Pemeriksaan pada ayam diawal dengan mengumpulkan data signalment
dan anamnesa yang berasal dari pemilik ayam yang dapat digunakan sebagai
penunjang pelaksanaan pemeriksaan dan penentuan diagnose penyakit.
Kemudian dilakukan pemeriksaan fisik pada ayam. Pemeriksaan fisik pada
ayam dilakukan dengan pengamatan tingkah laku ayam, cara berdiri, keadaan
bulu yang menutupi tubuh ayam serta mengamati kebersihan bulu, berat
badan, pemeriksaan mata, discharges pada nasal, membrane mukosa,
pemeriksaan mata, pemeriksaan persendian, palpasi tubuh ayam dan
dilakukan pemeriksaan feses yang jatuh (Bsrat, 2014).
2.5.2 Nekropsi Ayam
Tindakan nekropsi pada ayam diawali dengan melaksanakan euthanasia.
Euthanasi dilakukan agar hewan tidak merasakan rasa sakit yang berlebihan
dari tindakan nekropsi. Euthanasia pada unggas dapat dilakukan dengan

6
menggunakan emboli udara pada kepala, pemberian gas (gas karbondioksida),
pemberian barbiturate melalui jugular vein (Latimer, 2011).
Menurut Darmayanti (2012) prosedur nekropsi ayam yaitu Kadaver
dibasahi dengan air terlebih dahulu untuk menghindari bulu tidak
beterbangan, karena hal tersebut dapat menyebabkan pencemaran.
Melakukan pembedahan diutamakan pada organ yang biasanya mengalami
perubahan menciri. Membuat irisan melintang pada kulit daerah abdomen,
lalu kulit ditarik ke bagian anterior dan irisan tersebut diteruskan ke daerah
thorakssampai mandibula. Irisan pada kulit juga diteruskan ke bagian
posterior di daerah abdomen. Memperhatikan warna, kualitas, dan derajat
dehidrasi dari jaringan sub-kutan dan otot-otot dada.
Membuat irisan melintang pada dinding peritoneum, di daerah ujung
sternum (procesus xyphoideus) ke arah lateral. Kemudian membuat irisan
longitudinal di daerah abdomen melalui linea mediana ke arah posterior
sampai daerah kloaka, untuk membuka cavum abdominalis. Memeriksa
kantung udara di daerah abdominalis dan thorakalis dan memeriksa letak
berbagai organ di dalam cavum thorax dan abdominalis sesuai posisinya tanpa
menyentuh organ tersebut. Memperhatikan kemungkinan terhadap adanya
cairan, eksudat, transudat atau darah di dalam rongga perut dan rongga dada.
Saluran pencernaan dikeluarkan dengan memotong oesophagus pada bagian
proksimal proventrikulus. menarik seluruh saluran pencernaan ke arah
posterior dengan memotong mesenterium sampai pada daerah kloaka.
Mengeluarkan hati, kantung empedu, limpa dan melakukan
pemeriksaan. Membuat irisan secara longitudinal pada berbagai organ dan
periksa terhadap kemungkinan adanya lesi dan penyakit. Memeriksa terhadap
adanya abnormalitas pada organ tersebut. Mengamati dan mencatat semua
perubahan patologik yang ditemukan dan mengambil organ yang mengalami
perubahan patologis.

7
2.5.3 Isolasi Bakteri dan Pengambilan Sampel
Isolasi bakteri dapat pada ayam dapat dilakukan dengan mengambil
isolasi bakteri dari pengambilan sampel dari organ yang menunjukkan
perubahan patologis dengan memotong specimen kecil kemudian diambil
isolasi dengan menggunakan ose atau memasukkan potongan organ yang telah
kecil kedalam media umum dan diperkaya. Kemudian di inkubasi selama 24
jam pada suhu 370C (Islam, 2017).
Isolasi bakteri pada ayam dengan permasalahan penyakit respirasi dapat
diambil dari swab organ dari pus yang berasal nasal, trachea. Pengambilan
sampel organ trachea, paru-paru, dan hati untuk ayam yang menunjukkan
gejala klinis pernafasan. Pengambilan sampel darah dilakukan untuk
melakukan uji hematologi, pemeriksaan rapit test, uji biokimia, dan
pemeriksaan imunologi (Youssef, 2019).
2.5.4 Identifikasi Bakteri
Identifikasi bakteri pada sistem pernafasan ayam kampung dilakukan
dengan penanaman pada media umum, media selective, media differensial,
pewarnaan gram, pewarnaan spora, Mcoplasma Rapid test, dan uji sensitivitas
antibiotik.
1. Media Umum Bakteri
BHIB (Brain Heart Infusion Broth) merupakan media cair yang
digunakan untuk membudidayakan atau menumbuhkan berbagai jenis
bakteri seperti bakteri aerob, bakteri anaerob serta bakteri pathogen
maupun non pathogen. Media ini mengandung 0,1 % agar, 6,5% natirum
clorida serta megandung gelatin peptone, beef heart infusion, calf brain
infusion, Disodium fosfat, dan dextrose (Zimbro, 2009).
Media ini mengandung protein jaringan otak, jaringan hati, dan
peptone yang menjadi nutrisi bakteri sehingga menjadi support
pertumbuhan berbagai bakteri. Natirum klorida dalam media berperan
sebagai agen diferensial dan selektif dengan mengganggu permeabilitas
membrane dan tekanan osmotic dari organisme yang tidak tahan kondisi

8
tinggi garam. 0,1% agar membantu dalam menumbuhkan bakteri anaerob
karena agar dapat mengurangi kadar oksigen yang berlebihan didalam
media. Bakteri yang memiliki pertumbuhan baik yaitu bakteri coccus
pathogen maupun non pathogen dan bakteri non coccus seperti
Streptococcus pneumoniae, streptococcus pyogenes, Neisseria
meningitidis (Zimbro, 2009).
Media NAP (Nutrient Agar Plate) merupakan media umum yang dapat
digunakan untuk menumbuhkan mikroorganisme anaerob dan aerob.
Selain itu, media NAP dapat digunakan sebagai media enrichment dengan
penambahan darah. Media NAP mengandung peptone, sodium chloride,
ekstrak yeast, agar yang menjadi nutrisi terhadap pertumbuhan bakteri.
Untuk sodium chloride berperan sebagai menjaga tekanan osmotic
terhadap media. Culture karakteristik bakteri yang ditanam pada media
NAP terlihat setelah diinkubasi selama 18-48 jam pada suhu 35-370C.
Golongan bakteri yang dapat tumbuh dengan sangat baik pada media NAP
yaitu Staphylococcus sp, Streptococcus sp, Escherichia coli,Klebsiella sp.,
dan Pseudomonas sp. (Aurulanatham, 2012).
2. Media differensial dan Selective
Media Blood Agar Plate (BAP) merupakan media differensial yang
digunakan untuk mengisolasi bakteri Staphylococcus sp, streptococcus sp,
dan bakteri Enterococcus sp yang menyebabkan terjadinya penyakit pada
manusia maupun hewan yang dibedakan berdasarkan kemampuan
menghomoliskan darah. Media ini mengandung casein, jaringan organ
digesti hewan, ekstra yeast, agar, ekstrak daging, sodium klorida, dan darah
kambing sebanyak 5%. Casein, jaringan organ digesti hewan, ekstra yeast,
agar, ekstrak daging berfungsi untuk memberikan nutrisi pada bakteri.
Sodium klorida untuk menghalang pertumbuhan bakteri gram negatif.
Darah kambing sebanyak 5% diberikan pada media ini sebagai factor untuk
mengetahui kemampuan hemolysis darah yang dimiliki bakteri.
Streptococcus pyogenes dan Staphyloccus aureus β-hemolitik,

9
Streptococcus pneumoniae α-hemolitik. Bakteri Staphyloccus epidermis γ-
hemolitk (Leboffe, 2011).
Media EMBA (Eosin Methylene Blue Agar) merupakan media
differensial dan selektif yang digunakan untuk mengisolasi bakteri
Enterobacter gram negative. Media ini mengandung laktosa, eosin Y,
methylene blue, pancreatic digest of gelatin , dipotassium fosfat. Laktosa
dan pancreatic digest of gelatin berperan sebagai sumber nutrisi bakteri.
Eosin Y dan methylene blue berperan untuk menghambat pertumbuhan
bakteri gram negative pada media ini. Bakteri Escherichia coli akan
tumbuh dengan koloni berwarna hijau metalik, Klebsiella akan tumbuh
dengan koloni berwarna biru. Koloni bakteri yang memiliki warna yang
berbeda didasarkan pada kemampuan bakteri dalam memfermentasi
laktosa yang terkandung dalam media (Zimbro, 2009).
Media MCA (Mac Conkey Agar) merupakan media selective yang
digunakan untuk isolasi bakteri Enterobacteriaceae yang memiliki
kemampuan dalam memfermentasi laktosa. MCA mengandung Laktosa,
bile salt, crystal violet, sera neutral red. Bile salt dan crystal violet
berperan dalam menghambat pertumbuhan bakteri gram positif. Laktosa
merupakan karbohidrat yang digunakan sebagai nutrisi bagi bakteri.
Bakteri yang mampu memfermantasi laktosa akan merubah warna media
menjadi merah. Perubahan warna dipengaruhi adanya neutral red yang
terkandung didalam media. Bakteri E.coli dan E. aerogenes memiliki
koloni berwarna merah. Untuk bakteri P.mirabilis tidak memfermentasi
laktosa sehingga media berwarna kuning (Leboffe, 2011).
Media Mannitol Salt Agar (MSA) merupakan media selective yang
digunakan untuk isolasi dan identifikasi bakteri Stapylococcus sp patogen
yang berasal dari susu, daging, hewan sakit dan bahan pangan. Media MSA
mengandung karbohidrat mannitol, NaCl, Pancreatic casein, Ekstrak
daging, Phenol red pH (6,8-7,4), dan agar. Sodium klorida akan mnjadi
media selektif bagi Staphylococcus sp. karena bakteri lainnya tidak dapat

10
bertahan apabila adanya NaCl. Staphylococcus sp. patogen dapat
memfermentasi manitol dan memproduksi asam sehingga mengubah pH
media. Ekstrak daging dan mannitol sebagai sumber nutrisi bakteri.
Perubahan ini menyebabkan media berwarna media. Staphylococcus sp.
yang dapat merubah warna yaitu Staphylococcus aureus. Bakteri
Staphylococcus sp. spesies lainnya dapat ditumbuhkan pada media ini.
Namun, tidak merubah warna media seperti Staphyloccus epidermis media
MSA berwarna merah (Leboffe, 2011).
3. Uji sensitivitas bakteri
Uji sensitivitas bakteri merupakan uji yang dilaksanakan untuk
mengetahui kemampuan antibiotik terhadap bakteri pathogen baik dalam
menghambat, membunuh atau meilisiskan bakteri serta untuk mengetahui
antibiotik yang bersifat resisten terhadap suatu bakteri patogen. Metode uji
sensitivitas bakteri yang digunakan yaitu Kirby bauer disk method. Metode
ini menggunakn disk yang mengandung antibiotik dan dilakukan
pembuatan suspensi bakteri setara standar McFarland 0,5 terlebih dahulu
(Bagul, 2016).
Prosedur pembuatan suspense bakteri setara standar Mcfarland 0,5 yaitu
Satu tabung berisi larutan standar McFarland 0.5 terlebih dahulu disiapkan.
Suspensi bakteri dibuat dengan cara mengambil 4-10 ose bakteri dari media
NA yang telah diinkubasi selama 24 jam lalu dimasukkan ke dalam tabung
yang berisi NaCl 0,9% atau PBS, kemudian dihomogenkan. Suspensi
bakeri tersebut disetarakan kekeruhannya dengan larutan standar
McFarland 0.5 kemudian dengan menggunakan cotton swab, suspensi
diusapkan pelanpelan pada seluruh permukaan media Mueller Hinton Agar
(MHA) dan cakram antibiotik (Zen, 2015).
Antibiotik akan berdifusi dalam media agar MHA (Muller Hinton
Agar) sehingga dapat membentuk zona hambat terhadap koloni bakteri. Uji
sensitivitas ini dapat diamati hasil pembentukan zona setelah dilakukan
inkubasi selama 18-24 jam. Kemudian dilakukan perhitungan diameter

11
yang terbentuk untuk mengetahui tingkatan sensitivitas antibiotik (Bagul,
2016).
2.5.5 Pewarnaan Bakteri
1. Pewarnaan Gram
Pewarnaan gram merupakan teknik perwarnaan bakteri yang
digunakan untuk membedakan setiap jenis bakteri. Perbedaan antar setiap
spesies bakteri didasarkan pada bakteri gram positive dan bakteri gram
negative. Bakteri gram positif memiliki warna ungu sedangkan bakteri
gram negative berwarna merah. Langkah langkah pewarnaan gram yaitu
koloni bakteri yang terpisah diambil dari media agar kemudian diletakkan
pada objek glass. Lalu diberikan pewarna kristal violet selama 2 menit,
lugol selama 1 menit, aceton alcohol selama 1 menit, dan safranin selama
1 menit kemudian dilakukan pengamatan dimikroskop dengan
perbesaram 1000x (Becerra, 2016).
Bakteri gram positif memiliki warna ungu saat dilakukan karena
bakteri gram positif memiliki dinding sel seperti jaring yang tebal.
Dinding sel bakteri gram positif terdiri dari peptidoglikan yang tebal dan
iodine complex yang terdapat pada dinding sel tidak hilang sehingga saat
melakukan pewarnaan gram akan berwarna ungu. Bakteri gram negative
memiliki warna merah karena dinding sel bakteri gram negative memiliki
lapisan peptidoglikan yang tipis kemudian saat dilakukan pewarnaan
gram lapisan iodin mengalami luntur oleh alcohol sehingga safranin dapat
mewarnai dinding sel sehingga bakteri gram negative berwarna merah
(Thairu, 2016).
2. Pewarnaan Spora
Bakteri memiliki spora yang memiliki fungsi untuk melindungi
bakteri dari kondisi lingkungan yang ekstrim. Pewarnaan spora bakteri
dapat dilakukan dengan menggunakan metode schaeffer fulton. Metode
ini menggunakan malachite green dan safranin untuk mewarnai spora
bakteri (berwarna hijau) dan sel bakteri. Teknik pewarnaan spora

12
dilakukan dengan memberikan malachite green selama 5 menit dan
dilakukan pemanasan. Saat pemanasan dipastikan bahwa malachite
green tidak kering dan mendidih. Kemudian diberikan safranin selama
1 menit dan dilakukan pengamatan dibawah mikroskop. Malachite
green akan memberikan warna hijau pada spora bakteri (Oktari, 2017).
2.5.6 Uji Katalase dan Mycoplasma Rapid Test
A. Uji Katalase
Uji Katalase merupakan uji yang digunakan untuk mengetahui sifat
bakteri dalam menentukan sifat bakteri dalam menghasilkan enzim katalase.
Uji katalase dilakukan dengan cara meneteskan beberapa tetes H2O2 di atas
kaca preparat kemudian isolat diinokulasikan pada H2O2 pengamatan
dilakukan hingga beberapa menit hingga terdapat perubahan. Uji positif untuk
uji katalase ditandai dengan adanya gelembung. uji negatif ditandai dengan
tidak adanya perubahan atau gelembung-gelembung oksigen pada isolat
bakteri (Antriana, 2014).
B. Mycoplasma Rapid Test
Mycoplasma Rapid Test merupaka uji cepat yang digunakan untuk
mendiagnosa adanya penyakit yang disebabkan oleh Mycoplasma gallinarum
secara cepat pada ayam. Prosedur uji ini yaitu meneteskan serum sebanyak
0,4-0,5 ml diatas objek glass. Kemudian meneteskan control positf dan
negative sebanyak 0,4-0,5 ml. Antigen diteteskan sebanyak 0,4-0,5 diatas
serum, control positif dan control negative kemudian dicampur dengan cara
diputar secara perlahan atau ditunggu selama 2 menit. Hasil positif ditandai
dengan adanya reaksi agglutinasi sedangkan hasil negative tidak ada
aglutinasi yang terbentuk (Charles river, 2012).
2.6 Colibacillosis
Colibacillosis merupakan penyakit menular pada unggas yang disebabka\n
oleh bakteri Escherichia coli galur patogen. Infeksi E.coli ini dapat terjadi pada
berbagai jenis ayam dari semua kelompok umur, serta ungas lainnya seperti kalkun
dan itik. Pada anak ayam sampai umur 3 minggu menyebabkan kematian dengan

13
gejala klinis omphalitis, jaringan sekitar pusar menjadi lembek seperti bubur dan
oedema. Pada ayam berumur 8-10 minggu menyebabkan terjadinya gangguan
pernafasan seperti ngorok, bersin, anemia, kekurusan yang menimbulkan kematian
sebersar 1-2% serta ayam terlihat lemas (Hastarinda, 2016).
Gejala klinis colibacillosis tidak spesifik dan dipengaruhi oleh umur ayam,
lama infeksi, organ yang terserang dan adanya penyakit lain secara bersamaan.
Penularan colibacillosis dapat melalui oral seperti pakan, air minum atau debu
dan kotoran yang tercemar Eschericia coli. Debu dalam kandang ayam yang
mengandung 105-106 bakteri lain dan E.coli dapat bertahan lama. Apabila debu
terhirup ayam maka dapat menginfeksi saluran pernafasan (Hastarinda, 2016).
Patogenesa Eschericia coli pada sistem pernafasan unggas terjadi melalui
unggas menghirup debu didalam kandang yang mengandung E.coli patogen.
Kemudian E.coli akan masuk kedalam trachea yang kemudian menghasilkan
toxin seperti enterotoxin, sitotiksin, dan toxin STX (Shiga toxins) sehingga
mengakibatkan kerusakan lapisan mukosa dan penetrasi mukosa trachea.
Kemudian E.coli akan masuk kedalam paru-paru dan bermultiplikasi dengan
merusak lapisan mukosa dan bermultiplikasi pada sel-sel epitel paru-paru.
Kerusakan pada saluran pernafasan ini mengakibatkan terjadinya gangguan
pernafasan dan ayam mengalami bersin dan terlihat flu (Kahn, 2010).
Colibacilosis pada saluran pernafasan menyebabkan terjadinya kondisi
colisepticemia. Kondisi colicepticemia mengakibatkan terjadinya kerusakan
pada saluran pernafasan (trachea, paru-paru, dan airsac). Sehingga saat dilakukan
pemeriksaan patologis organ maka akan ditemukan adanya hemoragi kongesti
pada paru-paru, pada kasus parah paru-paru akan menghasilkan eksudat,
hemoragi pada trachea serta keluarnya lendir mucous bening ataupun keruh dan
air sac akan terlihat lebih keruh dan airsaculitis (Tonu, 2011).
Pemeriksaan colibacillosis pada ayam dapat dilakukan dengan pemeriksaan
gejala klinis, pemeriksaan perubahan patologis pada organ, dan pemeriksaan
laboratorium untuk mengidentifikasi E.coli. Isolasi bakteri dapat dilakukan
dengan mengambil pada sampel organ yang mengalami kerusakan atau

14
menunjukkan perubahan patologis (pada organ trachea dan paru-paru).
Pemeriksaan mirobiologi dilakukan dengan penanaman bakteri pada media
(NAP, MCA,EMBA, SCA, UREASE, dan MRVP) dan pemeriksaan gram
bakteri. Pada penumbuhan bakteri di media didapatkan hasil pada media MCA
akan menghasilkan koloni bakteri berwaran merah yang dapat memfermentasi
laktosa, pada media EMBA akan mengahasilkan koloni berwarna hijau metalik,
Uji urease negative, uji citrate negative, uji MR (Methyl red) positif, dan uji VP
(Voges proskaur) negative. Pada perwarnaan gram akan mendapatkan koloni
bakteri gram negatif dan berbentuk basil atau cocobasil (Daud, 2014).
Diagnosa banding terhadap penyakit colibacillosis pada ayam yaitu
salmonellosis, pasteurellosis, dan staphylococcosis. Colibacillosis memiliki
kemiripan terhadap salmonellosis disebabkan karena colibacillosis bersifat
septicemic dan menyerang pada unggas yang sedang mengalami perkembangan.
Kemudian, adanya perubahan patologis pada pericardium dan ovarium infeksi
dari collibacolosis dapat dibandingkan dengan infeksi bakteri Salmonella
gallinarum (Kebede, 2019).
Uji sensitivitas antibiotik dapat dilakukan untuk mengetahui reaksi
sensitivitas E.coli terhadap beberapa antibiotik sehingga dapat digunakan untuk
pengobatan terhadap penyakit colibacillosis. Antibiotik yang dapat digunakan
yaitu gentamycin, amocycillin, streptomycin, clindamycin, trimethroprim, dan
tetracycline. Berdasarkan hasil uji sensitivitas antibiotik E.coli sensitive terhadap
gentamycin dan resisten terhadap amocycillin, streptomycin, clindamycin, dan
trimethroprim. Untuk antibiotik tetracycline bakteri ini memiliki sensitivitas
intermediet (Daud, 2014).
Penyakit colibacillosis pada unggas dapat dicegah penyebaran penyakit
dapat dilakukan dengan meningkatkan program biosecurity didalam lingkungan
peternakan ayam. Program biosecurity yang dilakukan yaitu melakukan
melaksanakan program all in all out pada produk ayam yang diternakan, kontrol
terhadap hewan pemangsa, rodensia, atropoda yang dapat menjadi vector
penyebaran penyakit, densifeksi kandang untuk menghilangkan vector dan

15
bakteri penyebar penyakit, menjaga kebersihan tempatpenyimpanan pakan serta
melakukan pemeriksaan terhadap kesehatan ayam yang baru masuk kedalam
peternakan untuk mengetahui status kesehatan ayam serta pemberian vaksinasi
pada unggas (Hastuti, 2014).
Vaksinasi terhadap colibacillosis dapatdiberikan untuk mencegah terjadinya
outbreak dan penyakit ini dilingkungan peternakan. Vaksin collibacilosis tersedia
vaksin inactive dan vaksin live. Tipe vaksin live yang diberikan dapat
menurunkan morbiditas dan mortalitas akibat infeksi yang disebabkan oleh
E.coli. Vaksin live yang tersedia yaitu Poulvac E.coli 078, Spray, serta vaksin
E.coli yang proteksi menyilang untuk melindungi ayam dari serotypes O1,O2,
dan O,18. Vaksin inactived dapat digunakan untuk proteksi terhadap strain E.coli
yang bersifat homologonus. Pemberian vaksin ini dilakukan dengan cara injeksi
pada dada ayam (Nolan, 2013).

16
BAB III
MATERI DAN METODE
3.1 Waktu dan Lokasi Kegiatan
Kegiatan Rotasi Diagnosa dilaksanakan pada tanggal 04 November - 22
November 2019 yang bertempat di Laboratorium Mikrobiologi dan Imunologi
Veteriner Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Brawijaya.
3.2 Peserta PPDH
Peserta koasistensi diagnosa laboratorium adalah mahasiswa PPDH Fakultas
Kedokteran Hewan Universitas Brawijaya yang berada dibawah bimbingan drh.
Dahliatul Qosimah, M.Kes. Berikut biodata peserta koasistensi diagnosa
laboratorium yang dilaksanakan di Laboratorium Mikrobiologi dan Imunologi
Veteriner Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Brawijaya :
Nama : Gian Suryanatha Hartawan, S. KH
Program Studi : Pendidikan Profesi Dokter Hewan
Fakultas : Fakultas Kedokteran Hewan
Universitas : Universitas Brawijaya
Alamat : Perumahan Golden House Kav. 6, Jl. Bendungan Sigura-gura
VI, Lowokwaru, Malang, Jawa Timur.

No. Hp : 081282454819

3.3 Alat dan Bahan


3.3.1 Alat
Alat yang digunakan pada pemeriksaan mikrobiologi sampel sistem
pernafasan pada ayam dalam pembuatan media dan penanaman bakteri terdiri
dari ose bulat, incubator, mikroskop, tabung reaksi, cawan petri, tissue, kapas,
autoclave, laminar air flow, micropipet, yellow tip, tempat penampung air,
korek api, spidol, kertas, Pensil warna, log book,objeck glass, rak tabung reaksi,
masker, glove, timbangan, tabung reaksi, gelas ukur, Erlenmeyer, alumunium
foil, Sprayer alcohol. Alat yang digunakan untuk pembedahan ayam kampung
pinset anatomis, gunting tajam-tumpul, tempat pembedahan, pinset sirugis,
spuit 3 ml, plastic tempat penyimpanan sampel.

17
3.3.2 Bahan
Bahan persiapan dan transport sampel ayam kampung sakit gangguan
respirasi yaitu kandang ayam, tempat makan, tempat minum, dan pet cargo
penyimpanan ayam kampung. Bahan pembedahan ayam kampung yaitu air, dan
NaCl fisiologis. Bahan media isolasi dan identifikasi bakteri terditi dari Nutrient
Agar Plate (NAP) 500 gr bermerek Merck , Mannitol Salt Agar (MSA) 500 gr
bermerek Merck, BHIB (Brain Heart Infusion Broth) 500 gr bermerek Merck,
Muller Hinton Agar (MHA) 500 gr bermerek Merck, Blood Agar Plate (BAP)
500 gr bermerek Merck ,MCA (Mac Conkey Agar) 500 gr bermerek Merck, dan
EMBA (Eosin Methylene Blue Agar) 500 gr bermerek Merck.
Pewarnaan gram bakteri terdiri dari koloni bakteri,aquades, kristal violet,
lugol, aceton alcohol, dan safranin. Pewarnaan Spora tediri dari koloni bakteri,
malachite green, dan safranin. Uji Mycoplasma rapid test terdiri dari serum
darah ayam kampung dan antigen Mycoplasma. Uji katalase terdiri dari koloni
bakteri dan H2O2. Pengamatan dan identifikasi bakteri terdiri dari minyak
emersi.
3.4 Metode
Pemeriksaan dan diagnosa terhadap penyakit yang disebabkan oleh bakteri
dilakukan dengan melaksaan berbagai prosedur yang diawali dengan
pengumpulan data sampel (ayam kampung) meliputi signalement, anamnesa
hewan. Kemudian dilakukan pemeriksaan fisik terhadap ayam untuk mengetahui
adanya perubahan-perubahan yang tampak pada ayam dan melaksanakan
pengambilan sampel dengan melakukan swab.
Tindakan selanjutnya dilakukan nekrposi untuk mengamati organ sistem
respirasi dan organ-organ lainnya disertai dengan pengambilan sampel organ
untuk dilakukan pemeriksaan bakteri dan virus. Pemeriksaan bakteriologi
dilakukan dengan mengisolasi bakteri dari organ kemudian ditumbuhkan pada
berbagai media dan dilakukan pemeriksaan gram bakteri. Data dan hasil yang
didapatkan dari tindakan pengumpulan data dan pemeriksaan laboratorium akan
digunakan untuk penentuan diagnosa penyakit respirasi pada ayam kampung.

18
3.4.1 Cara Pengambilan Sampel
Ayam kampung diambil dari peternakan Pancamurti yang terletak di Jl.
Telaga Warna Blok E No.12 Tlogo Mas Malang. Ayam kampung yang
diambil merupakan ayam sakit yang dididuga sakit pada saluran respirasi
dengan tanda adanya mucus yang keluar dari saluran respirasi atas (hidung),
lemas dan didasarkan anamnesa yang berasal dari pemilik peternakan.
3.4.2 Transportasi
Sampel ayam kampung sakit yang telah di dapatkan kemudian
dimasukkan kedalam pet cargo saat dibawa dari peternakan menuju tempat
peliharaan. Ayam dipelihara didalam kandang dan diberikan makan dan
minum selama pemeliharaan.
3.4.3 Pemeriksaan dan Diagnosis
Sampel ayam kampung sakit yang telah di dapatkan kemudian dibawa ke
Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Kedokteran Hewan Universitas
Brawijaya untuk dilakukan pemeriksaan dan peneguhan diagnosa.
1. Pemeriksaan Fisik Ayam Kampung

Ayam Kampung

- Dilakukan pengambilan darah ayam sebanyak 3 cc pada vena


brachialis
- Diletakkan ayam kampung diatas meja kemudian dilakukan
pemeriksaan fisik yang diamati dari tingkah laku, palpasi tubuh
ayam dan pengamatas pus pada organ tubuh dan
didokumentasikkan keadaan ayam
- Diambil pus yang berasal dari hidung (nasal) dan trachea ayam
kampung menggunakan cotton bud dan ose
- Disimpan hasil pengambilan pus pada media BHIB (Brain
heart Infusion broth)

Hasil

19
2. Euthanasi Ayam Kampung
Ayam Kampung

- Dihandling dan restrain ayam kampung untuk mengurangi


pergerakan ayam
- Disiapkan spuit 5 cc untuk dilakukan emboli udara pada bagian
kepala ayam
- Dimasukkan udara kedalam kepala ayam
- Ditunggu ayam hingga benar-benar telah mati
- Disiapkan peralatan untuk nekropsi

Hasil
3. Nekropsi Ayam Kampung
Ayam Kampung

- Direbahkan secara dorsal ayam kampung kemudian


dibasahkan bulu ayam dengan air
- Dicabut bulu ayam kemudian di incise dan gunting dari daerah
mulut ayam hingga bagian thorax untuk mengamati trachea
- Diamati trachea ayam dengan cara membuka trachea untuk
mengamati perubahan patologis. Ditemukan adanya banyak
mucus ditrachea
- Dipotong trachea dan dikoleksi dengan dimasukkan kedalam
plastic sampel
- Dinsisi bagian linea alba dari caudal kearah cranial hingga
processus xyphoideus
- Diamati air sac kemudian diswab airsac dengan menggunakan
ose dan hasil swab dimasukkan media BHIB (Brain heart
Infusion broth)
- Dipotong costochondoral antara costae dan vertebrae
thoracalis dan dikuakkan kearah depan untuk mempermudah
mengamati topografi organ paru-paru.

20
- Dipreparasi organ paru-paru dan diamati perubahan yang
tampak. Pada organ paru-paru diamati adanya hemoragi dan
nodul berukuran kecil.
- Dilakukan pengambilan sampel bakteri dari paru-paru dengan
menggunakan ose dan hasil pengambilan sampel dimasukkan
dalam media BHIB (Brain heart Infusion broth)
- Dipreparasi organ proventriculum, liver, otak, spleen,
duodenum, dan caecum untuk dilakukan pemeriksaan virologi
- Didokumentasika organ-organ yang dipreparasi dan media
BHIB diinkubasi di incubator pada suhu 370C selama 24 jam

Hasil

4. Penanaman bakteri pada Media NAP (Nutrient Agar Plate), MCA (Mac
Conkey Agar), MSA (Mannitol Salt Agar), BAP (Blood Agar Plate), dan
EMBA (Eosin Metylene Blue Agar)

Bakteri
- Diamati pertumbuhan koloni pada media BHIB dan
dokumentasi
- Diambil koloni bakteri pada media BHIB kemudian dilakukan
streak 4 quadran pada media NAP. Kemudian diinkubasi di
incubator pada suhu 370C selama 24 jam.
- Diambil koloni bakteri pada media NAP kemudian dilakukan
streak 4 quadran pada media MCA dan MSA. Kemudian
diinkubasi di incubator pada suhu 370C selama 24 jam.
- Diambil koloni bakteri pada media MCA dan MSA kemudian
dilakukan streak 4 quadran pada media BAP, EMBA.
Kemudian diinkubasi di incubator pada suhu 370C selama 24
jam.
- Didokumentasikan hasil pertumbuhan koloni bakteri

Hasil

21
3.4.4 Pewarnaan Bakteri, Uji Mycoplasma Rapid Test, dan Uji Katalase
Pewarnaan gram dan spora dilakukan dengan mengambil koloni bakteri
terpisah dari media NAP (Nutrient Agar Plate).
a. Pewarnaan Gram
Bakteri

- Diletakkan koloni bakteri diatas objek glass yang telah terdapat


aquades. Kemudian di fiksasi pada bunsen
- Dituang kristal violet pada objek glass selama 2 menit.
Kemudian buang pewarna dan dibilas dengan aquades
- Dituang Lugol pada objek glass selama 1 menit. Kemudian
buang pewarna dan dibilas dengan aquades
- Dituang Aceton alcohol pada objek glass hingga warna luntur
kemudian aceton alcohol dibuang
- Dituang safranin pada objek glass selama 1 menit kemudian
pewarna dibuang dan dibilas dengan aquades.
- Dikeringkan preparat dengan tissue halus secara perlahan
- Diamati preparat menggunakan mikroskop pada perbesaran
x,40x,100x, dan 1000x. pada perbesaran 1000x diberikan
minyak emersi
- Didokumentasi hasil pewarnaan gram dan dicatat hasil

Hasil
b. Pewarnaan Spora
Bakteri

- Diletakkan koloni bakteri diatas objek glass yang telah terdapat


aquades. Kemudian di fiksasi pada Bunsen
- Dituangkan preparat dengan malachite green dan dipanaskan
pada Bunsen selama 5 menit

22
- Dijaga preparat agar tidak kering atau mendidih dan
menambahkan malachite green apabila kering. Kemudian
dibuang pewarna dan dibilas dengan aquades
- Dituangkan safranin pada preparat selama 1 menit. Kemudian
dibuang pewarna dan dibilas dengan aquades
- Dikeringkan preparat dengan tissue halus secara perlahan
- Diamati preparat menggunakan mikroskop pada perbesaran
x,40x,100x, dan 1000x. pada perbesaran 1000x diberikan
minyak emersi
- Didokumentasi hasil pewarnaan gram dan dicatat hasil

Hasil
-
c. Pengujian Mycoplasma Rapid Test
Serum

- Disiapkan serum ayam sakit, antigen Mycoplasma, micropipet,


yellow tip, dan objek glass
- Diambil serum sebanyak 25 µl menggunakan micropipet
kemudian ditambhakan antigen Mycoplasma
- Dicampurkan serum dan antigen dengan cara digoyangkan
objek glass
- Diamati hasil agglutinasi yang terbentuk dan
didokumentasikan hasil uji Mycoplasma rapid test

Hasil

23
d. Uji Katalase
Bakteri

- Diambil koloni bakteri pada media MSA dengan menggunakan


ose
- Diletakkan diatas objek glass lalu diberikan H2O2 sebanyak 1
tetes
- Diamati pembentukkan gelembung gas pada objek glass
- Didokumentasi pembentukan gelembung gas tersebut

Hasil

3.4.5 Uji Sensitivitas Bakteri


Bakteri

- Disiapkan satu tabung standar McFarland 0,5, media BHIB


berisi bakteri, Spuit 1 ml, tabung reaksi, dan PBS steril
- Divortex BHIB berisi bakteri
- Dimasukkan PBS kedalam tabung reaksi steril menggunakan
spuit
- Ditambahkan koloni bakteri kedalam tabung reaksi berisi PBS
kemudian di sesuaikan kekeruhan dengan standar McFarland
0,5
- Disiapkan media MHA, Cotton bud steril, dan bakteri
- Diambil koloni bakteri menggunakan Cotton bud steril lalu
distreak full pada media MHA
- Diletakkan disk antibiotik Bacitracin, Penicilin G,
Ciprofroxacil, Gentamycin, dan Cepalosporin pada media
MHA
- Diinkubasi pada incubator pada suhu 370C selama 24 jam
- Dilakukan penghitungan diameter zona hambat dan
didokumentasi

Hasil

24
3.4.6 Bagan Kerangka Operasional

Anamnesa

Diagnosa
Pemeriksaan Gejala Klinis dan Tentatif
pengambilan sampel

Pemeriksaan Fisik dan Nekropsi

Pengambilan Darah
V. Brachialis
Isolasi Bakteri

Pengambilan
Serum Media BHIB

Pewarnaan
Uji Mycoplasma Media NAP Bakteri Diagnosa
Definitif
Rapid Test

Media MCA Media MSA

Media EMBA Pewarnaan


Bakteri
Media BAP Uji Katalase
Media MHA

Hasil

Gambar 3.4.6 Kerangka Operasional

25
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Pengamatan Gejala Klinis Ayam Kampung
4.1.1 Signalement
Hewan
Nama : Ayam Hiha
Jenis Hewan : Ayam Kampung Betina
Umur : 2,5 bulan
Client (Pemilik)
Nama : Peternakan Pancamurti
Alamat : Jl. Telaga Warna Blok E No.12 Tlogo Mas Malang
4.1.2 Anamnesa :
Ayam kampung selama seminggu mengalami ngorok, sulit bernafas,
nafsu makan berkurang, kurang linca Ayam kampung telah diberikan obat
penstrep dan vitamin B kompleks namun keadaan ayam belum membaik.
4.1.3 Diagnosa
Diagnosa terhadap penyakit saluran respirasi pada ayam dilakukan
melalui anamnesa, pemeriksaan fisik dan gejala klinis, pemeriksaan
patologi klinis pada organ setelah ayam dinekropsi, pemeriksaan
mikrobiologis melalui isolasi bakteri pada organ yang mengalami
kerusakan.
Pemeriksaan colibacillosis pada ayam dapat dilakukan dengan
pemeriksaan gejala klinis, pemeriksaan perubahan patologis pada organ,
dan pemeriksaan laboratorium untuk mengidentifikasi E.coli. Isolasi bakteri
dapat dilakukan dengan mengambil pada sampel organ yang mengalami
kerusakan atau menunjukkan perubahan patologis (pada organ trachea dan
paru-paru). Pemeriksaan mirobiologi dilakukan dengan penanaman bakteri
pada media dan pemeriksaan gram bakteri (Daud, 2014).

26
4.1.4 Gejala Klinis
Ayam kampung menunjukkan gejala klinis lemas, nafsu makan sedikit,
terdengar suara ngorok saat malam, eksudat keluar dari nasal dalam jumlah
yang cukup banyak. Eksudat yang keluar dari rongga nasal terdapat pada
(Gambar 4.1.3)

Gambar 4.1.3 Eksudat keluar dari rongga nasal ayam kampung


(Dokumentasi Pribadi, 2019)
Gejala klinis yang nampak pada ayam menunjukkan ayam kampung
terserang colibacillosis. Menurut Hastarinda (2016) colibacillosis yang
menyebabkan gangguan pernafasan menunjukkan gejala klinis ngorok,
lemas, keluarnya cairan mucus pada daerah nasal. Ayam mengalami
kekurusan akibat nafsu makan ayam yang menurun serta ayam terlihat lesu
dan tidak melakukan banyak pergerakan. Pada ayam muda akan mengalami
gangguan pertumbuhan, diare, bulu pada area kloaka kotor akibat kotoran
ayam lengket pada bulu.
4.1.5 Patologi Klinis
Patologi klinis yang ditemukan pada organ ayam kampung saat
dilakukan nekropsi yaitu nasal terdapat lendir mucus berwarna bening yang
hingga keluar dari rongga nasal dan mengering, trachea terdapat lendir,
Pulmo mengalami hemoragi,nekrosis berwana hitam, dan air sac terlihat
keruh. Perubahan patologis pada organ trachea dan pulmo ditunjukkan oleh
(Gambar 4.1.4).

27
A B

Gambar 4.1.4 Perubahan patologis pada organ Ayam Kampung (Dokumentasi


Pribadi, 2019). Keterangan : (A) Trachea terdapat mucus dan (B)
Pulmo megalami hemoragi, (C) Air sac terlihat keruh
Perubahan patologis yang terlihat pada organ pulmo, dan trachea ayam
kampung terserang penyakit colibacillosis. Menurut Tonu (2011) perubahan
patologis pada penyakit colibacillosis pada organ pernafasan yaitu pulmo
mengalami hemoragi, trachea hemoragi dan terdapat lendir mucous bening
maupun keruh serta air sac tampak keruh ketika diamati. Pada infeksi berat
yang disebabkan oleh colibacillosis akan mengakibatkan terjadinya
Tracheitis, airsaculitis, dan bronchiolitis. Pada saluran pernafasan atas yaitu
rongga nasal akan mengeluarkan eksudat dan mengering.
Pada trachea ayam tidak ditemukan peruahan patologis yang
mencolok. Adanya lendir pada trachea dengan warna yang bening
merupakan hal yang normal pada ayam. Pada trachea ayam terdapat cilia dan
epitel respiratory menghasilkan mucus yang membantu dalam proses
mencegah benda asing untuk masuk kedalam sistem pernafasan yang lebih
dalam. Produksi mucus yang berlebihan dan terjadinya perubahan warna

28
menunjukkan cilia dan epitel respiratory tidak mampu melawan benda asing
yang masuk kedalam sistem pernafasan (Kirbas, 2018).
4.2 Hasil Pemeriksaan
Isolasi dan identifikasi bakteri dilakukan pada organ nasal , trachea, pulmo,
dan air sac yang menunjukkan adanya perubahan patologis untuk mengetahui
bakteri penyebab terjadinya kerusakan atau kelainan pada organ-organ tersebut.
Sampel bakteri yang telah diisolasi dari empat organ tersebut kemudian
ditumbuhkan pada media BHIB (Brain Heart Infusion Broth) kemudian diinkubasi
pada incubator pada suhu 370C. Berdasarkan hasil inkubasi didapatkan hasil
kekeruhan pada media BHIB yang menunjukkan hasil adanya pertumbuhan bakteri.
Menurut Zimboro (2009) menyatakan bahwa BHIB (Brain Heart Infusion
Broth) merupakan media cair yang digunakan untuk membudidayakan atau
menumbuhkan berbagai jenis bakteri seperti bakteri aerob, bakteri anaerob serta
bakteri pathogen maupun non pathogen yang pertumbuhan koloni bakteri pada
media ini ditandai dengan keruh. Media ini mengandung banyak nutrisi yang
dibutuhkan bakteri untuk tumbuh.
4.2.1 Nasal
Koloni bakteri organ nasal yang telah ditumbuhkan pada media Brain
Heart Infusion Broth (BHIB) kemudian ditumbuhkan pada media Nutrient
Agar Plate (NAP). Kemudian media NAP diinkubasi pada suhu 37 0C.
Berdasarkan hasil inkubasi didapatkan pertumbuhan koloni bakteri pada media
NAP memiliki warna putih dan kuning dengan ukuran yang kecil. Kemudian
berbentuk circular, dengan tepi entire dan elevasi bakteri flat. Pertumbuhan
koloni bakteri pada media NAP ditunjukkan pada (Gambar 4.2.1).

29
Gambar 4.2.1 Hasil Pertumbuhan koloni pada media NAP (Dokumentasi
Pribadi, 2019). Keterangan : Koloni Bakteri pada media
NAP memiliki bentuk Circuler dengan tepi entire dan
elevasi yang flat. Koloni bakteri berwarna putih
Koloni bakteri yang terdapat pada media NAP (Nutrient Agar Plate)
kemudian dilakukan pewarnaan gram. Koloni bakteri yang diambil merupakan
koloni bakteri yang terpisah memiliki warna kuning. Berdasarkan hasil
pewarnaan gram didapatkan hasil yaitu koloni bakteri gram positif dengan
bentuk coccus dan bakteri gram negative berbentuk cocobasil. Hasil pewarnaan
gram ditunjukkan oleh (Gambar 4.2.1)

Gambar 4.2.1 Hasil pewarnaan gram media NAP organ Nasal


(Dokumentasi Pribadi, 2019) Keterangan : Koloni Bakteri
yang diamati terdapat bakteri gram postif dengan bentuk
coccus dan bakteri gram negative dengan bentuk cocobasil.

30
Identifikasi bakteri dilanjutkan dengan menumbuhkan bakteri pada media
MSA (Mannitol Salt Agar) dan MCA (MacConkey Agar). Koloni bakteri yang
ditumbuhkan pada media MSA dan MCA berasal dari kooni yang terpisah.
Berdasarkan hasil pertumbuhan koloni bakteri pada media MSA dan MCA
didapatkan hasil yaitu

Berdasarkan hasil pertumbuhan pada media BHIB koloni bakteri kemudian


ditumbuhkan pada media NAP (Nutrient Agar Plate) dengan melakukan streak
koloni empat kuadran untuk mendapatkan koloni terpisah. Pertumbuhan koloni
bakteri pada media NAP terdapat pada (Tambel 4.2) dan (Gambar 4.2)
Tabel 4.2 Pertumbuhan koloni bakteri media NAP
No Organ Media NAP
1 Nasal Koloni bakteri tumbuh, berwarna putih
dan kuning, mucoid, bakteri circuler kecil
pada koloni terpisah
\2 Trachea Koloni bakteri tumbuh berwarna putih,
bentuk bakteri circuler. Terdapat bakteri
berukuran circuler besar
3 Air Sac Koloni bakteri tumbuh, koloni berwarna
putih, circuler dengan ukuran medium
4 Pulmo Koloni bakteri tumbuh, berwarna putih,
koloni berbentuk rhizoid dan kering

A B

31
C D

Gambar 4.2 Hasil Pertumbuhan koloni pada media NAP (Dokumentasi


Pribadi, 2019). Keteranagan: (A) Organ Nasal, (B) Organ
Trachea, (C) Organ Pulmo, dan (D) Organ Air sac.
Menurut Zimboro (2009) menyatakan media NAP (Nutrient Agar Plate)
merupakan media umum yang dapat digunakan untuk menumbuhkan berbagai jenis
bakteri baik bersifat patogen maupun non patogen karena bakteri ini memiliki
banyak nutrisi untuk pertumbuhan bakteri seperti karbohidrat, vitamin, pepton,
garam, komponen nitrogen organik. Bakteri Escherichia coli memiliki koloni
berwarna putih dengan bentuk round, Bakteri Staphylococcus sp memiliki ukuran
koloni yang small, berwarna kuning dengan bentuk yang round. Bakteri Bacillus sp
memiliki koloni berbentuk rhizoid yang tumbuh pada media, kering, dan berwarna
putih.
Pewarnaan gram dilakukan untuk mengidentifikasi morfologi dan gram bakteri.
Koloni bakteri yang terpisah pada media NAP (Nutrient Agar Plate) diambil lalu
dilakukan metode pewarnaan gram. Hasil pewarnaan bakteri dengan metode
pewarnaan gram terdapat pada (Tabel 4.2) dan (Gambar 4.2) dibawah ini.

Tabel 4.2 Hasil Pewarnaan gram pada media NAP (Nutrient Agar Plate)
No Organ Hasil Pewarnaan Gram
Bentuk Gram
1 Nasal Coccus dan Cocobasil Positif dan Negatif

32
2 Trachea Cocobasil Negatif
3 Pulmo Basil Positif
4 Air Sac Basil, cocobasil Negatif

A B

C D

Gambar 4.2. Hasil pewarnaan gram pada media NAP (Dokumentasi


Pribadi, 2019).
Keterangan : (A) Organ Nasal, (B) organ Trachea, (C)
Organ Pulmo, dan (D) Air sac.
Berdasarkan pada hasil pewarnaan gram (Gambar 4.2) didapatkan hasil koloni
bakteri pada organ nasal berbentuk coccus dengan gram positif, organ trachea
cocobasil dengan gram negative, organ pulmo basil dengan gram positif dan pada
area tengah bakteri terlihat kosong, dan pada Air sac koloni bakteri terlihat
cocobasil dan basil dengan gram negatif. Menurut Mohamad (2014) menyatakan
bahwa identifikasi bakteri dapat dilakukan dengan mengamati morfologi bakteri
pada mikroskop dengan mengamati bentuk bakteri. Morfologi bentuk bakteri pada
pewarnaan bakteri terdapat coccus, basil, cocobacil,spiral. Bakteri yang memiliki

33
bentuk coccus yaitu Staphylococcus sp dengan bentuk koloni seperti anggur,
Streptococcus sp dengan bentuk koloni seperti rantai dengan gram positif. Bakteri
berbentuk cocobasil adalah Eschericia coli dengan gram negatif. Bakteri
berbentuk basil yaitu Bacillus sp gram positif dan bakteri ini memiliki spora
sehingga akan terlihat adanya bagian bakteri yang tidak terwarnai oleh pewarnaan
gram.

Pewarnaan spora dilakukan pada koloni bakteri yang berasal dari media NAP
organ pulmo. Pewarnaan spora dilakukan berdasarkan hasil adanya bagian tengah
bakteri saat pewarnaan gram terdapat area yang terlihat kosong. Hasil pewarnaan
spora bakteri mendapatkan hasil yaitu bakteri memiliki spora pada bagian central
dan berbentuk basil. Berdasarkan letak spora bakteri dan bentuk bakteri maka
disimpulkan bakteri yang terdapat diorgan pulmo yaitu Bacillus sp. Hasil
Pewarnaan Spora terdapat pada (Gambar 4.2).

34
Gambar 4.2. Hasil Pewarnaan Spora (Dokumentasi Pribadi, 2019).
Keterangan : Spora terletak di central bakteri
Bacillus sp merupakan bakteri gram positif yang berbentuk batang besar
dengan ukuran Panjang sel 3-5 mikron. Bakteri ini memghasilkan spora yang
berbentuk elips yang terletak ditengah-tengah sel (central) (Rima, 2018).
Menurut UK Standard (2018) menyatakan bahwa bakteri Bacillus sp
merupakan bakteri yang dapat bersifat pathogen dan non pathogen pada tubuh
hewan. Bacillus sp pada ayam dapat dimanfaatkan sebagai probiotik untuk
menghambat pertumbuhan bakteri pathogen didalam tubuh ayam. Bacillus sp
sebagai probiotik karena bakteri ini menghasilkan produk-produk ekstraseluler
seperti Subtilin,coagulin, bacilysin, aminocoumacin, phospholidase, dan Iturins.
Strains Baccilus sp yang dimanfaatkan dalam pembuatan probiotik B. clausi dan
B. subtilis. Serta dapat mengkontaminasi pada organ-organ tubuh ayam melalui
lingkungan sekitar dan udara sehingga dapat mengakibatkan foodborne disease.
Menurut Islam (2017) menyatakan bahwa bakteri Bacillus sp dapat
mengkontaminasi tubuh ayam melalui lingkungan sekitar yaitu melalui udara
kemudian kontaminasi dapat melalui pakan yang dikonsumsi oleh ayam sehingga
bakteri ini dapat masuk dalam tubuh ayam maupun saat dilakukan proses nekropsi
organ diletakkan dilingkungan yang tidak steril.

Koloni bakteri pada media NAP (Nutrient Agar Plate) yang terpisah
kemudian diambil untuk dilakukan identifikasi pada media selektif media MSA
(Mannitol Salt Agar). Media MSA digunakan untuk mengetahui bakteri gram
positif melalui kemampuan bakteri untuk memfermentasi mannitol pada media
MSA. Berikut hasil pertumbuhan kolonik bakteri pada media MSA terdapat pada
(Tabel 4.2 ) dan (Gambar 4.2)
Tabel 4.2 Perumbuhan koloni Bakteri pada media MSA
No Organ Hasil
1 Nasal Koloni bakteri berwarna kuning dan merah
2 Trachea Tidak ada pertumbuhan koloni bakteri

35
3 Air Sac Tidak ada pertumbuhan koloni bakteri
4 Pulmo Koloni bakteri berwarna kuning dan merah

A B

C D

Gambar 4.2. Hasil Pertumbuhan koloni pada media MSA. Keterangan : (A)
Organ Nasal, (B) Organ Trachea, (C) Organ Pulmo, dan (D)
Organ Air sac (Dokumentasi Pribadi, 2019).
Pertumbuhan koloni bakteri pada media MSA(Mannitol Salt Agar) yaitu
berwarna kuning dan merah pada MSA organ nasal dan berwarna kuning pada
media MSA organ pulmo. Media MSA pada organ trachea dan organ air sac tidak
ada pertumbuhan koloni bakteri. Menurut Leboffe (2011) menyatakan bahwa
media MSA digunakan untuk mengisolasi bakteri staphylococci yang bersifat
pathogen yaitu Staphylococcus aureus. Staphylococcus aureus yang bersifat
patogen dapat memfermentasi manitol dan memproduksi asam sehingga
mengubah pH media. Ekstrak daging dan mannitol sebagai sumber nutrisi bakteri.
Kemampuan bakteri yang dapat memfermentasi mannitol mengakibatkan media
menjadi berwarna kuning.
Tabel 4.2 Hasil pewarnaan gram pada media MSA
No Organ Hasil Pewarnaan Gram

36
Bentuk Gram
1 Nasal Coccus Positif
2 Trachea Tidak ada bakteri Tidak ada Bakteri
3 Pulmo Basil, coccus Positif
4 Air Sac Tidak ada bakteri Tidak ada Bakteri

A B

Gambar 4.2. Hasil pewarnaan gram pada media MSA (Dokumentasi


Pribadi, 2019). Keterangan : (A) Organ Nasal dan (B)
Organ Pulmo.
Berdasarkan (Gambar 4.2) didapatkan hasil pewarnaan koloni bakteri
pada media MSA yaitu adanya koloni bakteri berbentuk coccus gram positif pada
organ nasal dan pulmo serta pada organ pulmo didapatkan adanya bakteri
berbentuk basil. Bakteri Stapylococcus aureus merupakan bakteri gram positif
yang memiliki bentuk coccus secara individual dan berbentuk seperti anggur jika
berkoloni. Memiliki diameter 0,5-1,5 µm dengan kemampuan dapat
memfermentasi kandungan mannitol pada media MSA sehingga dapat merubah
warna media menjadi kuning (Myles, 2012).
Kemudian koloni bakteri pada media MSA (Mannitol Salt Agar) dilakukan
uji katalase. Uji katalase dilakukan dengan menggunakan koloni bakteri yang
berasal dari media MSA organ nasal yang memiliki koloni berwarna kuning.
Berdasarkan hasil uji katalase didapatkan adanya gelembung. Sehingga
mengindikasikan terdapat bakteri Staphylococcus aureus. Hasil uji katalase
terdapat pada (Gambar 4.2).

37
Gambar 4.2 Hasil Uji Katalase (Dokumentasi Pribadi, 2019).
Keterangan : Koloni bakteri berasal dari media MSA yang
memiliki koloni bakteri berwarna kuning organ nasal
menunjukkan hasil positif terbentuk gelembung
Menurut Antriana (2014) menyatakan bahwa uji katalase digunakan untuk
mengetahui aktivitas katalase bakteri yang diuji. Bakteri Staphylococcus aureus
memproduksi enzim katalase sehingga dapat memecah H2O2 menjadi H2O dan O2
sehingga membentuk gelembung gas. Hidrogen peroksida terbentuk sewaktu
metabolisme aerob sehingga mikroorganisme dapat menguraikan hydrogen
peroksida tersebut.
Menurut Samy (2018) menyatakan bahwa bakteri Staphylococcus aureus
merupakan bakteri gram positive yang dapat ditemukan pada lingkungan
peternakan unggas. Bakteri ini dapat berperan sebagai bakteri flora normal tubuh
ayam yang dapat ditemukan pada membrane mucous. Bakteri ini dapat ditemukan
pada kulit maupun sistem pernafasan atas. Bakteri ini dapat bersifat opportunistic
pathogen apabila terjadi penurunan sistem imunitas pada ayam dan menyebabkan
terjadinya penyakit pada sistem pernafasan.
Kemudian koloni bakteri yang terdapat pada media MSA (Mannitol Salt
Agar) diambil untuk ditumbuhkan pada media BAP (Blood Agar Plate). Koloni
bakteri yang diambil merupakan koloni yang terpisah. Berdasarkan hasil
pertumbuhan koloni bakteri pada media BAP ditunjukkan pada (Tabel 4.2) dan
(Gambar 4.2).
Tabel 4.2 Pertumbuhan Koloni Bakteri pada Media BAP

38
No Organ Hasil
1 Nasal α-hemolisa (hemolisa sebagian
yang ditandai dengan koloni
bakteri berwarna hijau
2 Trachea α-hemolisa (hemolisa sebagian
yang ditandai dengan koloni
bakteri berwarna hijau
3 Pulmo γ-hemolisa (Tidak
menghomolisiskan darah)
4 Air sac α-hemolisa (hemolisa sebagian
yang ditandai dengan koloni
bakteri berwarna hijau

A B

Gambar 4.2.1 Hasil Pertumbuhan koloni pada media BAP (Dokumentasi


Pribadi, 2019). Keterangan : (A) Organ pulmo (sebelah

39
kiri) dan organ Nasal (sebelah kanan), (B) Organ Trachea
(sebelah kiri) dan Air Sac (sebelah kanan)
Pertumbuhan koloni bakteri pada media BAP (Blood Agar Plate) pada
(Gambar 4.2) didapatkan hasil yaitu α- hemolisa (koloni berwarna hijau) pada
koloni bakteri yang berasal dari organ nasal, trachea, dan air sac dan γ-hemolisa
yang berasal dari organ pulmo. Menurut Leboffe (2011) menyatakan bahwa media
BAP digunakan untuk mengisolasi bakteri yang memiliki kemampuan untuk dapat
menghomolisiskan darah yang terkandung dalam media. Hasil α- hemolisa
menunjukkan bakteri dapat menghemolisiskan darah sebagian sehingga koloni
berwarna hijau sedangkan γ-hemolisa menunjukkan bakteri tidak memiliki
kemampuan untuk menghemolisiskan darah sehingga tidak terjadi perubahan
warna disekitar koloni bakteri yang tumbuh.
Bakteri Staphylococcus aureus merupakan bakteri yang memiliki
kemampuan untuk menghomolisiskan darah. Kemampuan bakteri ini untuk dapat
menghemolisiskan darah melalui toksin alpha haemolysiss yang menjadi factor
untuk dapat menyebabkan haemolitic, dermonecrotic dan efek neurotoxic pada
tubuh hospes. Gen hla dan hlb merupakan gen yang mengekspresikan terjadinya
alpha, beta, maupun gamma hemolysis pada darah kambing pada media BAP yang
dimiliki oleh bakteri Staphylococcus aureus (Ariyanti, 2011).

Tabel 4.2 Hasil pewarnaan gram pada media BAP


No Organ Hasil Pewarnaan Gram
Bentuk Gram
1 Nasal coccus Positif

2 Trachea Cocobasil,coccus Positif dan negative


3 Pulmo Basil Positif

40
4 Air Sac Coccus, basil Positif dan negative

A B

C D

Gambar 4.2. Hasil pewarnaan gram pada media BAP (Dokumentasi


Pribadi, 2019). Keterangan : (A) Organ Nasal, (B) organ
Trachea, (C) Organ Pulmo, dan (D) Air sac.
Koloni bakteri pada media NAP (Nutrient Agar Plate) kemudian di
tumbuhkan pada media MCA untuk mengidentifikasi bakteri gram negative yang
dapat memfermentasi laktosa. Pertumbuhan koloni bakteri pada media MCA
(MacConkey Agar) didapatkan hasil yaitu koloni bakteri yang tumbuh pada media
berwarna merah yang terdapat pada media MCA organ nasal, trachea, pulmo dan
air sac. Bakteri yang memiliki koloni berwarna merah menunjukkan bakteri dapat
memfermantasi laktosa yang merupakan bakteri Enterobacteriaceae dan gram
negative. Pertumbuhan bakteri terdapat pada (Tabel 4.2) dan (Gambar 4.2).
Tabel 4.2 Hasil Pertumbuhan Koloni Bakteri pada media MCA

41
No Organ Hasil
1 Nasal Koloni berwarna merah. Bakteri
memfermentasi laktosa
2 Trachea Koloni berwarna merah. Bakteri
memfermentasi laktosa
3 Pulmo Koloni berwarna merah. Bakteri
memfermentasi laktosa
4 Air Sac Koloni berwarna merah. Bakteri
memfermentasi laktosa

A B

C D
42
Gambar 4.2.1 Hasil Pertumbuhan koloni pada media MCA (Dokumentasi
Pribadi, 2019). Keterangan : (A) Organ Nasil, (B) Organ
Trachea, (C) Organ Pulmo, dan (D) Organ Air sac
Menurut Leboffe (2011) menyatakan bahwa media MCA (MacConkey Agar)
digunakan untuk mengisolasi bakteri Enterobacteriaceae yang memiliki
kemampuan memfermentasi laktosa. Bakteri yang mampu memfermantasi laktosa
akan merubah warna media menjadi merah. Perubahan warna dipengaruhi adanya
neutral red yang terkandung didalam media. Bakteri E.coli koloni berwarna
merah.
Pertumbuhan koloni bakteri pada media MCA dilakukan pewarnaan gram
untuk mengetahui morfologi dan gram bakteri tersebut. Berdasarkan hasil
pewarnaan gram didapat hasil yang terdapat pada (Tabel 4.2) dan (Gambar 4.2).
Tabel 4.2 Hasil Pewarnaan gram pada media MCA (MacConkey Agar)
No Organ Hasil Pewarnaan Gram
Bentuk Gram
1 Nasal Basil Positif dan negative
2 Trachea Cocobasil Negatif
3 Pulmo Basil dan cocobasil Positif dan negative
4 Air Sac Cocobasil Negatif

A B

43
C D

Gambar 4.2. Hasil pewarnaan gram pada media MCA (Dokumentasi


Pribadi, 2019). Keterangan : (A) Organ Nasal, (B) organ
Trachea, (C) Organ Pulmo, dan (D) Air sac.
Pertumbuhan koloni bakteri pada media MCA kemudian diambil koloni yang
terpisah untuk dilakukan penanaman pada media EMBA (Eosin Methylene Blue
Agar). Pertumbuhan koloni bakteri pada media EMBA terdapat pada (Tabel 4.2)
dan (Gambar 4.2)
4.2 Pertumbuhan koloni media EMBA (Eosin Methylene Blue Agar)
No Organ Hasil
1 Nasal Koloni bakteri berwarna hijau metalik dan
berwarna gelap
2 Trachea Koloni bakteri berwarna hijau metalik
3 Air Sac Koloni bakteri berwarna hijau metalik
4 Pulmo Koloni bakteri berwarna hijau metalik

A B

44
C D

Gambar 4.2. Hasil Pertumbuhan koloni bakteri pada media EMBA


(Dokumentasi Pribadi, 2019). Keterangan: (A) Organ Nasal,
(B) Organ Trachea, (C) Organ Pulmo, dan (D) Organ Air
Sac
Berdasarakan hasil isolasi dan pertumbuhan bakteri pada media EMBA
(Eosin Methylene Blue Agar) yang terdapat pada (Gambar 4.2) didapatkan hasil
warna koloni bakteri yaitu hijau metalik sehingga diidentifikasi bakteri tersebut
merupakan bakteri Escherichia coli. Menurut Zimboro (2009) menyatakan bahwa
bakteri Escherichia coli akan tumbuh dengan koloni berwarna hijau metalik pada
media EMBA. E. coli memiliki warna hijau metalik karena kemampuan bakteri
dalam memfermentasi laktosa atau sukrosa yang terkandung dalam media.
Escherichia coli dapat menyebabkan terjadinya penyakit colibacillosis pada
ayam. Escherichia coli strain enterotoxigenic merupakan strain E.coli yang
menyebabkan terjadinya berbagai penyakit pada unggas seperti diare, colibacilosis
pada saluran pernafasan yang ditandia dengan adanya pengeluaran mucosa dalam
jumlah banyak pada nasal, kerusakan pada organ paru-paru dan airsac. Serta E.coli
menyebabkan terjadinya kematian embryo dan omphalitis. Sehingga terdapat
strain Avian pathogenic E.coli (APEC) yang menyerang unggas. APEC memiliki
masa inkubasi 3-5 hari. Rute infeksi E.coli (APEC) yaitu masuk kedalam tubuh
ayam melalui mulut atau saluran inspirasi, air minum, sel membrane (Daud,
2014).

45
Kemudian dilakukan pewarnaan gram pada media EMBA (Eosin Methylene
Blue Agar). Berdasarkan hasil pewarnaan gram didapatkan bakteri berbentuk
cocobasil dan gram negative. Untuk organ pulmo terdapat bakteri berbentuk basil
dengan gram positif. Hasil perwarnaan gram ditunjukkan oleh (Tabel 4.2) dan
(Gambar 4.2).
Tabel 4.2 Hasil pewarnaan gram media EMBA (Eosin Methylene Blue Agar)
No Organ Hasil Pewarnaan Gram
Bentuk Gram
1 Nasal cocobasil Negative
2 Trachea cocobasil Negative
3 Pulmo Basil dan cocobasil Positif dan negative
4 Air Sac cocobasil Negative

A B

46
C D

Gambar 4.2. Hasil pewarnaan gram pada media EMBA (Dokumentasi


Pribadi, 2019). Keterangan : (A) Organ Nasal, (B) organ
Trachea, (C) Organ Pulmo, dan (D) Air sac.
Uji sensitivitas antibiotik dilakukan dengan mengambil koloni bakteri yang
berasal dari media EMBA (Eosin Methylene Blue Agar) organ pulmo kemudian
ditumbuhkan pada media BHIB terlebih dahulu. Kemudian koloni bakteri diambil
dari media BHIB yang telah diinkubasi selama 24 jam dan dibuat standar
McFarland 0,5 dengan PBS steril.
McFarland merupakan penyetaraan konsentrasi mikroba dengan menggunakan
lauran BaCl2 1% dan H2O4 1%. Standar kekeruhan McFarland ini untuk
menggantikan perhitungan bakteri satu per satu dan untuk memperkirakan
kepadatan sel yang akan digunakan pada prosedur pengujian antimikroba (Zen,
2015).
Lalu koloni bakteri ditumbuhkan pada media MHA (Muller Hinton Agar)
distreak secara full kemudian disk antibiotik diletaakkan pada media MHA. Disk
antibiotik yang digunakan berisi antibiotik Bacitracin, Penicilin G,
Cefadroxil,Ciprofloxacin, dan Gentamycin. Kemudian diinkubasi pada incubator
selama 24 jam pada suhu 370C. Hasil uji sensitivitas antibiotik terdapat pada
(Gambar 4.2).

47
Gambar 4.2.Hasil Uji Sensitivitas Antibiotik pada bakteri Eschericia
coli (Dokumentasi Pribadi, 2019).
Berdasarkan hasil uji sensitivitas antibiotik pada bakteri Eschericia coli
didapatkan hasil yaitu antibiotik Bacitracin dan Penicilin G resisten terhadap bakteri
Eschericia coli. Untuk antibiotik Cefadroxil,Ciprofloxacin, dan Gentamycin
terbentuk zona hambat terhadap bakteri Eschericia coli. antibiotik yang sensitive
yaitu Ciprofoxacin dan Gentamycin sedangkan Cefadroxil intermediet. Berikut data
hasil perhitungan zona hambat terdapat pada (Tabel 4.2.4)
Tabel 4.2.4 Hasil Uji Sensitivitas Antibiotik
Antibiotik Zona Hambat Zona Hambat Keterangan
Sensitive (mm) CLSI (mm) Hasil
Bacitracin ≥13 0 Resisten
Cefadroxil ≥18 15 Intermediet
Ciprofloxacin ≥21 30 Sensitive
Gentamycin ≥15 16 Sensitive
Penicilin G ≥22 8 Resisten

Menurut Patel, dkk (2016) menyatakan bahwa uji sensitivitas antibiotik disk
diffusion test untuk Penicilin G harus memiliki zona hambat ≥22 untuk dinyatakan
sensitive sehingga apabila dibawah ≤ 11 maka antibiotik tersebut resisten terhadap
bakteri Eschericia coli. Untuk zona hambat antibiotik Bacitracin yang sensitive
terhadap E.coli membentuk zona hambat ≥20. Sehingga apabila zona hambat yang
terbentuk ≤ 8 maka antibiotik tersebetu resisten teradap bakteri Eschericia coli.
Untuk zona hambat Ciprofloxacin (≥21), Gentamycin (≥15) maka antibiotik

48
tersebut sensitive terhadap Eschericia coli. Untuk antibiotik Cefadroxil memiliki
zona hambat ≥18 dinyatakan sensitive terhadap E.coli. Namun berdasarkan hasil uji
didaptkan hasil zona hambat yang terbentuk 15 maka Cefadroxil bersifat intermediet
terhadap infeksi yang disebabkan oleh bakteri E.coli karena zona hambat
intermediet untuk Cefadroxil yaitu 15-17.
Berdasarkan hasil uji didapatkan bahwa Gentamycin, Ciprofloxacin bersifat
sensitive terhadap bakteri Eschericia coli, sedangkan untuk Cefadroxil bersifar
intermediet. Mekanisme kerja antibiotik Gentamycin, Ciprofloxacin, dan Cefadroxil
yaitu (Ramsey, 2017) :
1. Ciprofloxaxin memiliki mekanisme kerja dengan menginhibisi DNA
gyrase pada bakteri sehingga mengakibatkan terjadinya kematian pada
bakteri (bacteriosidal). Antibiotik ini bersifat broad spektrum sehingga
dapat melawan infeksi bakteri gram negative dan gram positif.
2. Gentamycin merupakan antibiotik yang memiliki efek aminoglikosida
yang menghambat sintesis protein bakteri dan mengganggu proses
kebutuhan oksigen bakteri sehingga bakteri mengalami kekurangan
oksigen walaupun berada di lingkungan yang banyak mengandung
oksigen dan antibiotik ini memiliki efek bakteriosidal dan antibiotik
narrow spectrum terhadap bakteri gram negative.
3. Cefadroxil merupakan antibiotik golongan cefalosporin generasi
pertama yang bersifat broad spektrum yang peka terhadap bakteri
golongan gram negative dan bakteri gram positif. Namun lebih aktif
terhadap bakteri coccus gram negative. Antibiotik ini mengganggu
sentesis protein pada dinding sel bakteri sehingga mengakibatkan
dinding sel bakteri menjadi tidak kuat.
4.2.1 Mycoplasma Rapid Test
Uji Mycoplasma Rapid Test dilakukan dengan menggunakan
serum ayam kampung yang ditambahkan dengan antigen Mycoplasma.
Berdasarkan hasil uji Mycoplasma Rapid Test didapatkan hasil uji
negatif yaitu tidak terjadi reaksi aglutinasi.

49
Gambar 4.2.1 Hasil Mycoplasma Rapid Test (Dokumentasi Pribadi,
2019). Keterangan: (A1) Serum ayam kelompok
Pencernaan hasil positif, (A2) Serum ayam kelompok
pernafasan hasil negatif, dan (+) Kontrol Positif
Menurut Diyantoro (2017) menyatakan bahwa uji cepat Mycoplasma
sp. dilakukan untuk mengetahui adanya antibodi yang terdapat didalam
tubuh ayam. Hasil negative ditandai dengan tidak terbentuknya
penggumpalan (aglutinasi) akibat reaksi antara serum dengan antigen
Mycoplasma gallinarum. Hasil negative menunjukkan tidak adanya
antibody spesifik Mycoplasma gallinarum yang terdapat serum darah
ayam.
4.2.2 Differensial Diagnosa
Diagnosa banding terhadap penyakit colibacillosis pada ayam yaitu
salmonellosis,coryza dan staphylococcosis yang bersifat akut lainnya.
Colibacillosis memiliki kemiripan terhadap salmonellosis disebabkan
karena colibacillosis bersifat septicemic dan menyerang pada unggas yang
sedang mengalami perkembangan. Kemudian, adanya perubahan patologis
pada pericardium dan ovarium infeksi dari collibacolosis dapat
dibandingkan dengan infeksi bakteri Salmonella gallinarum yang
menyebabkan terjadinya penyakit Fowl Typhoid (Kebede, 2019).
Colibacillosis dengan penyakit coryza memiliki persamaan yaitu
menyerang sistem pernafasan unggas. Penyakit coryza ditandai dengan
adanya peradangan pada selaput lendir saluran pernafasan atas (rongga nasal
serta organ trachea atas) yang eksudatnya dapat berwarna jernih hinhha

50
encer dengan warna kuning, suara ngorok, diare, dan kesulitan bernafas.
Gejala klinis yang dimiliki oleh penyakit coryza memiliki persamaan dengan
gejala klinis yang disebabkan oleh colibacillosis yang menyerang sistem
pernafasan.

BAB V
PENUTUP
5.1 Kesimpulan
Berdasarkan pemeriksaan yang kami lakukan pada sampel didapatkan hasil
sebagai berikut :

1. Berdasarkan anamnesa pemilik ayam kampung selama seminggu


mengalami ngorok, sulit bernafas, nafsu makan berkurang, kurang linca

51
Ayam kampung telah diberikan obat penstrep dan vitamin B kompleks
namun keadaan ayam belum membaik
2. Pada pemeriksaan gejala klinis ayam kampung didapatkan hasil lemas,
nafsu makan sedikit, terdengar suara ngorok saat malam, mucus keluar dari
nasal dalam jumlah yang cukup banyak.
3. Pada pemeriksaan post mortem organ ayam kampung didapatkan hasil
adanya perubahan pada berbagai organ seperti nasal terdapat lendir mucus
berwarna bening, trachea terdapat lendir, Pulmo mengalami
hemoragi,nekrosis berwana hitam.
4. Isolasi bakteri dilakukan pada organ nasal, trachea, pulmo dan air sac.
5. Identifikasi bakteri dilakukan dengan penanaman bakteri pada media NAP,
MCA,MSA,EMBA, Uji sensitivitas antibiotik, uji pewarnaan gram, uji
katalase, dan uji Mycoplasma rapid test. Berdasarkan Hasil identifikasi
bakteri didapatkan hasil pada saluran pernafasan ayam terdapat koloni
bakteri Eschericia coli, Staphylococcus aureus, dan Bacillus spp.
6. Penyebab penyakit saluran pernafasan pada ayam kampung diduga
disebabkan oleh bakteri Eschericia coli yang mengakibatkan penyakit
colibacillosis. Hasil ini diperkuat berdasarkan pertumbuhan koloni bakteri
pada media MCA dan EMBA, uji pewarnaan gram.

5.2 Saran
Jumlah alat penunjang kegiatan agar dapat lebih diperbanyak untuk menunjang
kegiatan seperti jumlah Bunsen serta

DAFTAR PUSTAKA

Adetayo, A.K., Ademiluyi I.O., and I.O. Jennifer. 2013. Challenges of Small Poultry
Farms in Layer Production in Ibadan Oyo State Nigeria. Global Journal of
Science Frontier Research Agriculture and Veterinary Sciences Volume 13 Issue
2 Version 1.0 Year 2013. Global Journals Inc.
Aedah, S., M.H. Bintoro Djoefrie, dan G. Suprayitno. 2016. Faktor-Faktor yang
Memengaruhi Daya Saing Industri Unggas Ayam Kampung (Studi Kasus PT Dwi
dan Rachmat Farm, Bogor). Journal IPB Vol.11 No.2 : (173-182). Institute
Pertanian Bogor. Bogor.

52
Antriana, N. 2014. Isolasi Bakteri Asal Saluran Pencernaan Rayap Pekerja
(Macrotermes spp.). P-ISSN: 1411-5433 Jurnal Universitas Jember.
Aurulanatham, R., S.Pathmanathan, N. Ravimannan, and K. Niranjan. 2012.
Alternative Culture Media For Bacterial Growth Using Different Formulation
Of Protein Sources. Journal Nat.Prod.Plant Resour., 2012,2 (6):697-700.
University of Jaffna. SriLangka.
Ariyanti,D. S.I. Oktavia Salasia, and S. Tato. 2011. Characterization of Haemolysin
of Staphylococcus aureus Isolated from Food of Animal Origin. Indonesian
Journal of Biotecnology, VOL. 16, No. 1, pp. 32-37.
Bagul, U.S, and S.M. Sivakumar. 2016. Antibiotic Susceptibility Testing: A Review On
Current Practices. INT J Pharm 2016; 6(3):11-17. Jazan University. Kingdom
of Saudi Arabia.
Becerra ,S.C., D. C. Roy, C. J. Sanchez, R. J. Christy and D. M. Burmeister.2016. An
Optimized staining technique for the detection of Gram positive and Gram
negative bacteria within tissue. BMC Research Notes. (2016) 9:216
Bsrat A., T. Tesfay and Y. Tekie. 2014. Clinical, Gross and Histopathological Study
on Common Local Chicken Diseases in Enderta District, South East Tigray.
European Journal of Biological Sciences 6 (4): 95-103, 2014. Mekelle
University. Ethiopia.
Butcher,G.D.,J.P. Jacob, and F.B. Mather. 2015. Common Poultry Diseases. University
Of Florida. USA.
Charles River. 2012. Mycoplasma Plate Antigents. North Franklin. USA.
Damayanti, Y., I.B. Oka Winaya, dan M.D. Rudyanto. 2013. Evaluasi Penyakit Virus
pada Kadaver Broiler Berdasarkan Pengamatan Patologi Anatomi di Rumah
Pemotongan Unggas. Indonesia Medicus Veterinus 2012 1(3) : 417 – 427.
Universitas Udayana. Bali.
Daud, A., Htin N.N., Abba Y., Pann F.H., Kyaw T., Khaing A.T., Jesse F.F.A.,
Mohammed K., Adamu L., and Tijjani A. 2014. An Outbreak Of Colibacillosis
In a Broiler Farm. J Vet Adv 2014., 4(7):646-651. Universiti Malaysia Sabah.
Malaysia.
Diyantoro dan S. Wulandari. 2017. Deteksi Antibodi Salmonella pullorum dan
Mycoplasma gallisepticum Pada Anak Ayam (Doc) Pedaging Beberapa
Perusahaan Yang Dijual Di Kabupaten Lamongan. Agroveteriner Vol.5., No. 2
Juni 2017. Universitas Airlangga. Surabaya.
Dogan, G.K., and I. Takici. 2018. Anatomy of Respiratory System In Poultry. MAE Vet
Fak Derg,3(2):141-147,2018. Kafkas University.Turkey.
Hastarinda, V. 2016. Kasus Penyakit Kolibasillosis dan Dampaknya Terhadap
Produksi Ayam Petelur di Tunas Muda Farm Kecamatan Palang Kabupaten
Tuban [Skripsi]. Fakultas Vokasi Universitas Airlangga. Surabaya.
Hastuti S., and E. Yuwono. 2014. Viral and Bacterial Diseases in Broiler Chicken
Farms at the Area of Banyumas District. Journal Animal Production 13 (3) :
198-206. Indonesia.

53
Islam, M.S., S. Khanam, and M.K. Mohanta. 2017. Isolation, characterization and
identification of bacterial isolates from the poultry environment at Rajshahi
Metropolis, Bangladesh. Journal of Entomology and zoology Studies
2017;5(4):918-926. University Of Rajshahi. Bangladesh.
Kabir, S.M.L. 2010. Avian Colibacillosis And Salmonellosis: A Closer Look At
Epidemiology, Pathogenesis, Diagnosis, Control And Public Health Concerns.
Int. J. Environ. Res. Public Health 2010, 7, 89-114. Osaka Prefecture University.
Japan.
Kahn and Cynthia M. 2010. The Merck Veterinary Manual. 10th edition. Whitehouse
Station: Merck & Co., Inc., 2. USA.
Kebede,D., Z.Tekle, A.Gezahegne, G.Abdisa, R.Mulatu,A.Wondimu and A.
Ayesheshum. 2019. Review on Salmonella Gallinarum-Pullorum. British Journal
of Poultry Sciences 8 (1): 10-16, 2019 ISSN 1995-901X © IDOSI Publications,
2019. British.
Kubiak, M. 2012. Respiratory Disease in Backyard Poultry. Vet Times. United
Kingdom.
Latimer, K.S and P.M. Rakich. 2011. Necropsy Examination Chapter 14. Patient
Evaluation. USA
Leboffe,M.J. and B.E.Pierce. 2011. A Photographic Atlas for the Microbiology
Laboratory 4th Edition. Morton Publishing. Colorado.
Mohamad, N.A, N.A. Jusoh, Z.Z. Htike, and S.L. Win. 2014. Bacteria Identification
From Microscopic Morphology: A Survey. International Journal on Soft
Computing, Artificial Intelligence and Applications (IJSCAI), Vol.3, No. 2, May
2014. Malaysia.
Myles, I.A, and S.K. Datta. 2012. Staphylococcus aureus : an introduction. Semin
Immunopathol. 2012 March ; 34(2): 181–184. United States of America.
Nolan,L. 2013. Chapter 18 : Colibacillosis Diesease of Poultry. 13th Edition. Ames :
Wiley-Blackwell. United States of America.
Novard, M.F.A., N. Suharti. R. Rasyid. 2019. Gambaran Bakteri Penyebab Infeksi
Pada Anak Berdasarkan Jenis Spesimen dan Pola Resistensinya di Laboratorium
RSUP Dr. M. Djamil Padang Tahun 2014-2016. Jurnal Kesehatan Andalas .
2019;8 (Supplement 2).
Oktari, A., Y. Supriatin, M. Kamal and H. Syafrullah. 2017. The Bacterial Endospore
Stain on Schaeffer Fulton using Variation of Methylene Blue Solution. IOP Conf.
Series: Journal of Physics: Conf. Series 812 (2017) 012066. Indonesia.

54
Ramsey, I. 2017. BSAVA Small Animal Formulary 9th edition. British Small Animal
Veterinary Association. British.
Riskawati. 2016. Isolasi Dan Karakterisasi Bakteri Patogen Pada Tanah Di
Lingkungan Tempat Pembuangan Akhir Sampah (Tpas) Kota Makassar. Fakultas
Sains dan Teknologi UIN Alauddin Makassar [Skripsi]. Makassar.
Samy, A., and M.M. Naguib. 2017. Avian Respiratory Coinfection and Impact on
Avian Influenza Pathogenicity in Domestic Poultry: Field and Experimental
Findings. Vet Sci. 2018.,5,23. Institute Dokki, Giza. Egypt.
Suardy, Z. 2013. Analisis Pendapatan Peternak Ayam Buras yang Dipelihara Secara
Intensif di Kecamatan Awangpone Kabupaten Bone [Skripsi]. Fakultas Peternakan
Universitas Hasanuddin. Makassar.
Thairu , Yunusa, I.A. Nasir, Y. Usman. 2016. Laboratory Perspective of Gram Staining
and its Significance in Investigations of Infectious Diseases. Sub Saharan African
Journal of Medicine /Vol 1/issue 4.Ahmadu Bello University. Nigeria.
Tonu, N.S., M. A. Sufian, S. Sarker, M.M. Kamal, M.H. Rahman and M.M. Hossain.
2011. Pathological Study On Colibacillosis In Chickens And Detection Of
Escherichia coli By PCR. Bangl. J. Vet. Med. (2011). 9(1): 17 – 25. Bangladesh.
UK Standards. 2018. Identification of Bacillus Species. Public Health England.
England.
Youssef, F.M., A.A. Soliman, G.A. Ibrahim, H.A. Saleh. 2019. Advanced
Bacteriological Studies on Bumblefoot Infections in Broiler Chicken with Some
Clinicopathological Alteration. Veterinary Science and Research Volume 1:1
Vetry Sci Rech 2019. Institute Ismailia. Egypt.
Zen, N.A.M, E de Queljoe, dan M. Singkoh. 2015. Uji Bioaktivitas Ekstrak Padina
australis Dari Pesisir Pantai Molas Sulawesi Utara Terhadap Bakteri
Staphylococcus epidermidis. Jurnal Pesisir dan Laut Tropis Volume 2 No 1
Tahun 2015. Manado.
Zimbro,M.J.,D.A.Power,S.M.Miller,G.E.Wilson,and J.A. Johnson. 2009. Manual of
Microbiological Culture Media Second Edition. Becton, Dickinson and
Company. United States of America.

55
56

Anda mungkin juga menyukai