LAPORAN PRAKTIKUM BIOKIMIA

PERCOBAAN III :
IDENTIFIKASI SENYAWA DALAM URINE

Disusun oleh:
Kelompok IV
Ade Arkhamuddin (24030117130054)
Layla Syafira Ningrum (24030117130055)
Nur Hanna Mardhiyyah (24030117130056)
Nadya Devira I. (24030117130060)
Muhammad Haqian Nazili (24030117130089)
Muhammad Daffa Fauzan (24030117140028)

LABORATORIUM BIOKIMIA
DEPARTEMEN KIMIA
FAKULTAS SAINS DAN MATEMATIKA
UNIVERSITAS DIPONEGORO
SEMARANG
2019
 LEMBAR PENGESAHAN Commented [L1]: Bawahnya : LAPORAN PRAKTIKUM BIOKIMIA

Commented [L2]: Judul praktikum

Nama + nim

Semarang, 30 Oktober 2019

Praktikan I Praktikan II

Ade Arkhamuddin Layla Syafira Ningrum

NIM.24030117130054 NIM.24030117130055

Praktikan III Praktikan IV

Nur Hanna Mardhiyyah Nadya Devira Indraswari

NIM.24030117130056 NIM.24030117130060

Praktikan V Praktikan VI

Muhammad Haqian Nazili Muhammad Daffa Fauzan

NIM.24030117130089 NIM.24030117140028 Commented [L3]: 1 baris buat 3 praktikan

Mengetahui
Asisten

Sri Handayani
NIM.24030116120036
 DAFTAR ISI Commented [L4]: Halaman nya jangan lupa pake Times New
Roman

LEMBAR PENGESAHAN .............................................................................................. 2

DAFTAR ISI...................................................................................................................... 3
I. TUJUAN PERCOBAAN ............................................................................................ 6
II. TINJAUAN PUSTAKA ............................................................................................. 6
II.1. Urine ................................................................................................................... 6
II.1.1. Urine Sewaktu ............................................................................................. 6
II.1.2. Urine Pagi ................................................................................................... 6
II.1.3. Urine Postprandial....................................................................................... 6
II.1.4. Urine 24 jam ............................................................................................... 6
II.2. Pemeriksaan pada Urine...................................................................................... 7
II.3. Sifat Urine ........................................................................................................... 7
II.4. Ciri-ciri Urine Normal ........................................................................................ 7
II.5. Komponen Utama Urine Manusia ...................................................................... 7
II.6. Unsur-unsur Normal dalam Urine....................................................................... 8
II.6.1. Klorida ........................................................................................................ 8
II.6.2. Fosfat........................................................................................................... 8
II.6.3. Sulfat ........................................................................................................... 8
II.6.4. Karbonat ...................................................................................................... 8
II.6.5. Oksalat ........................................................................................................ 9
II.6.6. Urea ............................................................................................................. 9
II.6.7. Asam urat .................................................................................................... 9
II.6.8. Basa nukleat ................................................................................................ 9
II.7. Unsur-unsur Abnormal dalam Urine................................................................. 10
II.7.1. Albumin .................................................................................................... 10
II.7.2. Spurious Albuminuria ............................................................................... 10
II.7.3. Albumos .................................................................................................... 10
II.7.4. Musin dan nukleoalbumin ......................................................................... 10
II.7.5. Glukosa ..................................................................................................... 10
II.7.6. Empedu ..................................................................................................... 10
 II.7.7. Darah ......................................................................................................... 11
II.7.8. Aseton atau Dimetil Keton ........................................................................ 11
II.7.9. Lemak ....................................................................................................... 11
II.8. Komposisi Urine ............................................................................................... 11
II.9. Pengujian Pada Urine ........................................................................................ 11
V.3.1. Uji Klorida ................................................................................................ 11
V.3.2. Uji Fosfat .................................................................................................. 11
V.3.3. Uji Sulfat ................................................................................................... 12
V.3.4. Uji Asam Urat ........................................................................................... 12
V.3.5. Uji Ketone ................................................................................................. 12
V.3.6. Uji Glukosa ............................................................................................... 12
II.10. Penyakit pada Urine ...................................................................................... 13
II.11. Mekanisme Pembentukan dan Pembuangan Urin......................................... 13
II.12. Analisis Bahan .............................................................................................. 14
III.2.1.1. Indikator Fenol Merah .......................................................................... 14
III.2.1.2. Asam Asetat (CH3COOH) .................................................................... 14
III.2.1.3. Natrium Hidroksida (NaOH) ................................................................ 14
III.2.1.4. Sodium Nitroprusid ............................................................................... 14
III.2.1.5. Asam Nitrat ........................................................................................... 15
III.2.1.6. Amonium Sulfat ((NH4)2SO4) ............................................................... 15
III.2.1.7. Amonium Hidroksida (NH4OH) ........................................................... 15
III.2.1.8. Amonium Molibdat ((NH4)6Mo7O24) .................................................... 15
III.2.1.9. Kalium Oksalat (K2C2O4)...................................................................... 16
III.2.1.10. Barium Klorida (BaCl2) .................................................................... 16
III.2.1.11. Natrium Karbonat ............................................................................. 16
III.2.1.12. Asam Klorida .................................................................................... 17
III.2.1.13. Larutan Benedict ............................................................................... 17
III.2.1.14. Indikator Fenol Ptalein ...................................................................... 17
III. METODE PERCOBAAN ..................................................................................... 18
III.1. Alat dan Bahan .............................................................................................. 18
III.1.1. Alat............................................................................................................ 18
 III.1.2. Bahan ........................................................................................................ 19
III.2. Skema Kerja ......................................................................................................... 20
III.2.1. Senyawa Organik dalam Urine ................................................................. 20
III.2.2. Senyawa Anorganik dalam Urine ............................................................. 24
IV. DATA PENGAMATAN....................................................................................... 27
V. PEMBAHASAN ....................................................................................................... 31
V.1. Senyawa Organik Dalam Urine ............................................................................ 31
V.1.1. Pemecahan Ureum oleh Urease...................................................................... 31
V.1.2 Tes adanya Gula Pereduksi ............................................................................. 35
V.1.2 Tes adanya Gula Pereduksi .................................Error! Bookmark not defined.
V.1.3. Tes Adanya Kreatinin .................................................................................... 38
V.1.3.2 Percobaan WEYL ............................................................................................ 42
V.1.4 Tes Adanya Asam Urat dan Garamnya ........................................................... 45
V.1.5 Tes Adanya Keton ........................................................................................... 47
V.1.6 Tes Adanya Protein ......................................................................................... 49
V.2. Senyawa Anorganik dalam Urine ......................................................................... 51
V.2.1 Tes Adanya Amoniak ...................................................................................... 51
V.2.2 Tes Adanya Klorida ........................................................................................ 52
V.2.3 Tes Adanya Fosfat dan Kalsium ..................................................................... 53
V.2.4 Tes Adanya Sulfat ........................................................................................... 54
VI. PENUTUP............................................................................................................. 56
DAFTAR PUSTAKA ...................................................................................................... 58
 PERCOBAAN 3
IDENTIFIKASI SENYAWA DALAM URINE

I. TUJUAN PERCOBAAN
Mengetahui unsur-unsur yang terkandung dalam urine.

II. TINJAUAN PUSTAKA

II.1. Urine
Urin yaitu cairan sisa yang merupakan hasil ekskresi ginjal yang
keluar dari tubuh melalui proses urinasi. Urin perlu diekskresikan karena
membawa molekul sisa dalam darah yang telah disaring oleh ginjal.
Fungsi ekskresi urin yang lain yaitu menjaga homeostasis cairan tubuh.
Peran utama dari urin yaitu membuah racun dan sisa obat-obatan dari
dalam tubuh (Ridley, 2018).
II.1.1. Urine Sewaktu
Urine sewaktu adalah urine yang dikeluarkan pada waktu
yang tidak ditentukan dengan khusus. Urine sewaktu ini cukup
baik untuk pemeriksaan rutin yang menyertai pemeriksaan
badan tanpa pendapat khusus (Gandasoebrata, 2013).
II.1.2. Urine Pagi
Urine pagi adalah urine yang pertama-tama dikeluarkan
pada pagi hari setelah bangun tidur. Urine ini lebih pekat dari
urine yang dikeluarkan pada siang hari, jadi baik untuk
pemeriksaan sediment, berat jenis, protein, tes kehamilan, dan
lain-lain (Gandasoebrata, 2013).
II.1.3. Urine Postprandial
Urine postpradial adalah urine yang pertama kali
dilepaskan 1,5-3 jam sehabis makan. Urine ini berguna untuk
pemeriksaan terhadap glukosuria (Gandasoebrata, 2013).
II.1.4. Urine 24 jam
 Urine 24 jam adalah urine yang dikumpulkan selama 24
jam. Urine yang pertama keluar dari jam 7 pagi dibuang,
berikutnya ditampung termasuk juga urine jam 7 pagi keesokan
harinya (Gandasoebrata, 2013).
II.2. Pemeriksaan pada Urine
Sampel urin dapat digunakan untuk mendiagnosa penyakit
seluruh organ dalam tubuh, karena fluida dalam tubuh berhubungan
spesifik dengan satu sistem dalam tubuh. Urin membawa hasil
pembuangan dari proses metabolisme dalam tubuh manusia dan mamalia.
Karena urin merupakan produk sisa, sehingga urin dianggap tidak
memiliki fungsi apapun. Namun, sekarang urin menjadi spesi penting
untuk diagnosa bukan hanya ginjal tetapi organ tubuh lainnya juga.
Pemeriksaan pada urin sering digunakan karena cocok, hemat biaya, dan
metode yang terpercaya untuk analisis:
a. Mendiagnosa penyakit berdasarkan gejala klinis.
b. Membuktikan perkiraan penyakit dengan perlakuan yang tepat sesuai
dengan metode yang terpilih.
(Ridley, 2018).
II.3. Sifat Urine
Umumnya jumlah urine setiap hari sebanyak 600-2500 mL dan
dapat berkurang pada iklim panas. Bobot jenis urine 1,005-1,03 g/cm3.
pH urine berkisar antara 5,0-6,0. Urine normal berwarna kuning pucat
bening (Ridley, 2018).

II.4. Ciri-ciri Urine Normal

Urin normal berwarna bening kuning pucat, tidak ada endapan,
dan berbau tajam. Urin biasanya memiliki berat jenis sebesar 1,005-1,03
g/cm3 dengan pH berkisar antara 5,0-6,0. Pada urin juga mengandung
urobilinogen sebanyak 0,2-1.0 mg/dL (Ridley, 2018).

II.5. Komponen Utama Urine Manusia

 Komposisi urine yang paling utama adalah air. Urine dalam
kondisi normal umumnya mengandung 90% air. Kandungan urine
lainnya adalah urea, asam urat, dan amonia yang merupakan zat sisa dari
pemecahan protein, dan zat warna empedu yang membuat urine menjadi
warna kuning, berbagai macam garam, zat beracun, dan sisa obat
(Ridley, 2018).

II.6. Unsur-unsur Normal dalam Urine

II.6.1. Klorida
Klorida mudah larut sehingga tidak akan membentuk
deposit. Semakin banyak memakan makanan asin maka semakin
banya klorida yang diekskresikan. Klorida berkurang pada
penderita demam, gangguan pencernaan, anemia, dan pada
penderita nephritis kronis (Gupta, 1932).
II.6.2. Fosfat
Unsur fosfat biasanya ditemukan pada urine yang bersifat
basa atau amoniakal, tetapi ditemukan juga pada urine yang
sedikit asam atau netral. Hampir ¾ alkalin fosfat dari total fosfat
mudah larut dan tidak membentuk deposit, sedangkan fosfat biasa
larut pada urin asam tetapi mengendap pada urin basa.
Kandungan fosfat dalam urin meningkat jika banyak
mengkonsumsi garam basa dan air. Fosfat ditemukan pada urine
setelah meminum susu diet, juga berlebih pada penderita
tuberkulosis. Fosfat juga ada pada pembentukan asam di urine
akibat melemahnya metabolisme (Gupta, 1932).
II.6.3. Sulfat
Sulfat ada di urine dalam tiga bentuk yaitu sulfat organik
(kombinasi indol, skatol, kresol, dan fenol), sulfat anorganik
(kalium atau natrium sulfat), dan jarang sulfat dalam bentuk
netral. Banyaknya sulfat dalam urine menunjukkan intensitas
pembusukan intestinal dari metabolisme protein (Gupta, 1932).
II.6.4. Karbonat
 Karbonat biasanya ditemukan di dalam urine bersamaan
dengan fosfat. Karbonat ditemukan dalam bentuk basa atau
mendekomposisi urin sebagai sistitis. Karbonat diproduksi ketika
asam-asam dalam sayuran terbebaskan dari makanan atau dari
kelebihan garam alkalin dan air (Gupta, 1932).
II.6.5. Oksalat
Oksalat sering ditemukan pada urine dalam bentuk
kalsium oksalat dan ketika jumlahnya sedikit ada dalam bentuk
oxaluria. Umumnya terdapat pada urine asam (Gupta, 1932).
II.6.6. Urea
Total nitrogen dari urea diekskresikan dalam urine. Urea
terdiri dari 85% konstituen nitrogen yang dikombinasi seperti
asam urat, amonia, xantin, hipoxantin, kreatin, kreatinin, dan
asam hippurat. Banyaknya urea bervariasi tergantung dengan
jumlah konsumsi makanan yang mengandung protein (Gupta,
1932).
II.6.7. Asam urat
Normalnya tubuh sehat mengekskresikan asam urat setiap
harinya sebanyak 6-8 butir. Asam urat terdapat dalam bentuk
bebas ataupun terkombinasi. Asam urat bentuk bebas biasanya
membentuk deposit berwarna coklat kemerahan, tetapi jika dalam
bentuk terkombinasi biasanya sebagai urate. Asam urat membuat
urine bersifat asam dan dapat larut di dalam basa seperti pada
soda tetapi tidak larut dalam asam asetat. Kandungan asam urat
dalam urin meningkat ketika ada metbolisme protein yang
berlebih (Gupta, 1932).
II.6.8. Basa nukleat
Basa nukleat merupakan senyawa turunan dari destruksi
nuklein seperti xantin, hipoxantin, guanin, asam hipurat, dan
kreatinin. Basa nukleat biasanya terikat pada asam urat (Gupta,
1932).
II.7. Unsur-unsur Abnormal dalam Urine
II.7.1. Albumin
Albumin biasanya ditemukan dalam bentuk serum
albumin. Proteida urine lainnya yaitu serum globulin, albumose,
peptone, nukeoalbumin, dan fibrin. Permanen albuminuria
terdapat banyak dalam gangguan ginjal. Albumin juga terdapat
dalam sifilis, pneumonia, tifoid, dan difteri (Gupta, 1932).
II.7.2. Spurious Albuminuria
Ada sedikit albumin yang tercampur dalam urine.
Albumin terdapat dari plasma sel. Albumin terdapat dalam darah
menstruasi wanita atau dalam beberapa buangan leucorhoeal
yang tercampur dalam urine (Gupta, 1932).
II.7.3. Albumos
Selain albumin, albumose, musin, dan nukleoalbumin juga
terkandung dalam urine. Albumose merupakan produk degradasi
dari albumin, sedangkan musin dan nukleoalbumin dari asam
nukleat. Albumose terendapkan berwarna putih dengan asam
nitrat. Albumin dan albumos sering berada bersamaan dalam
urine (Gupta, 1932).
II.7.4. Musin dan nukleoalbumin
Musin merupakan konstituen dari mukus sedangkan
nukleoalbumin merupakan turunan dari ephitelium sistem urin.
Jika urin bersifat asam, musin tidak larut dan membentuk
deposit seperti gumpalan putih. Namun, jika urine bersifat basa
maka musin terdapat dalam larutan (Gupta, 1932).
II.7.5. Glukosa
Glukosa atau gula biasanya terdapat dalam urine penderita
diabetes, gangguan pankreatik, hepatik, dan kardiak (Gupta,
1932).
II.7.6. Empedu
 Empedu dalam urine terkandung dalam dua bentuk yaitu
pigmen empedu dan garam empedu. Pigmen empedu terdapat
dari turunan bilirubin dan sebagian dari biliverdin. Sedangkan
garam dari asam empedu terdapat dari asam glikolat dan asam
taurokolat (Gupta, 1932).
II.7.7. Darah
Darah dalam urine ada dalam dua bentuk. Pertama, darah
merah terdapat dalam urine yang disebut haematuria. Kedua,
haemoglobin terdapat dalam urine tanpa ada darah merah,
disebut haemoglobinuria (Gupta, 1932).
II.7.8. Aseton atau Dimetil Keton
Aseton dan asam diasetik ditemukan dalam urine
berbentuk ketosis dan juga disebut asidosis (Gupta, 1932).
II.7.9. Lemak
Ketika lemak dan albumin terdapat di dalam urin, hal ini
disebut dengan siluria. Namun, ketika lemak terdapat dalm urine
tanpa adanya albumin, hal ini disebut lipuria (Gupta, 1932).

II.8. Komposisi Urine

Komposisi urine bervariasi tergantung pada jenis makanan serta
air yang diminum. Urine normal berwarna bening kuning pucat, warna
ini berasal dari zat warna empedu (bilirubin dan biliverdin). Urin normal
pada manusia terdiri dari air, urea, asam urat, amoniak, keratinin, asam
laktat, asam fosfat, garam-garam terutama garam dapur, dan zat berlebih
dalam darah seperti vitamin C dan obat-obatan (Ridley, 2018).

II.9. Pengujian Pada Urine

V.3.1. Uji Klorida
Uji klorida dapat dilakukan dengan penambahan asam
nitrat dan perak nitrat 3%. Uji positif ditandai dengan
terbentuknya endapan putih (Gupta, 1932).
V.3.2. Uji Fosfat
 Salah satu uji fosfat yaitu dengan cara penambahan asam
nitrat dan beberapa tetes amonium molibdat kemudian dilakukan
pemanasan. Uji positif keberadaan fosfat ditandai dengan
terbentuknya endapan kuning (Gupta, 1932).
V.3.3. Uji Sulfat
Uji sulfat dilakukan dengan penambahan beberapa tetes
asam klorida atau 2-3 tetes asam nitrat, kemudian ditambahkan
1-2 tetes larutan barium klorida. Keberadaan sulfat ditandai
dengan terbentuknya endapan barium sulfat yang berwarna putih
(Gupta, 1932).
V.3.4. Uji Asam Urat
Uji keberadaan asam urat dilakukan dengan penambahan
asam klorida atau asam nitrat dan dibiarkan selama 24 jam.
Asam urat ada di dalam larutan urine ditandai dengan
terbentuknya kabut berwarna merah bata yang terdapat di bawah
tabung. Uji lain dapat dilakukan dengan Test Mureksid (oksidasi
asam urat) dengan cara memekatkan larutan urin di cawan
porselen dan ditambahkan 1-2 tetes asam nitrat lalu diuapkan
hingga hambir kering. Keberadaan asam urat ditandai dengan
residu merah kekuningan (Gupta, 1932).
V.3.5. Uji Ketone
Test Rothera dapat digunakan untu uji keberadaan keton.
Urine ditambahkan padatan amonium klorida hingga ada
padatan tak terlarut di bawah, lalu ditambahkan natrium
nitroprusid dan tunggu sampai padatan menjadi terlarut.
Keberadaan ketone akan ditunjukkan dengan munculnya cincin
ungu. Test lain yang juga bisa dipakai yaitu test Lieben’s
Iodoform dan test Legal’s (Gupta, 1932).
V.3.6. Uji Glukosa
Uji Glukosa dapat menggunakan Uji Fehling yang akan
memberikan endapan merah bata (Cu2O) untuk keberadaan
 glukosa. Endapan ini terjadi karena gugus aldehid pada glukosa
mereduksi Cu2+ pada larutan fehling menjadi Cu+ dalam bentuk
Cu2O. Atau uji glukosa dapat digunakan larutan Benedict yang
juga memberikan uji positif endapan merah bata (Gupta, 1932).

II.10. Penyakit pada Urine

Penyakit umum yang bisa dideteksi pada urin yaitu batu ginjal.
Batu ginjal atau disebut juga dengan kencing batu disebabkan oleh
adanya endapan yang mengeras di dalam ginjal. Batu-batu ini dapat turun
ke saluran bagian bawah yaitu ureter, kandung kemih, dan saluran
kencing terluar. Gejala penyakit batu ginjal di antaranya yaitu nyeri di
daerah pinggang ataupun pada saluran kencing (Ridley, 2018).

II.11. Mekanisme Pembentukan dan Pembuangan Urin

Ginjal yaitu tempat mengeluarkan zat sisa metabolisme dalam
bentuk urine. Proses pembentukan urine melalui tiga tahap yaitu filtrasi,
reabsorpsi, dan sekresi.
a. Filtrasi (penyaringan)
Proses ini merupakan proses yang paling pertama yaitu
pemindahan cairan dari glomerulus menuju ke kapsul bowman dengan
menembus membran filtrasi. Membran filtrasi ada 3 bagian yaitu
endothelium glomerulu, membran basiler, epitel kapsul bowman. Di
dalam glomerulus terjadi filtrasi sel darah merah, trombosit, protein,
agar tidak keluar dari ginjal.
b. Reabsorpsi
Reabsorpsi yaitu proses perpindahan cairan setelah difiltrasi.
Volume urin manusia hanya 5% dari filtrat glomerulus. Oleh karena
itu, 99% filtrat glomerulus akan direabsorbsi secara aktif pada tubulus
kontortus proksimal dan terjadi penambahan zat-zat sisa serta urea
pada tubulus kontortus distal.
c. Sekresi
 Proses ini merupakan proses keluarnya urine dari tubuh
manusia, hewan, dan mamalia lainnya. Urine diekskresikan dalam
bentuk larutan.
(Ridley, 2018).

II.12. Analisis Bahan

III.2.1.1. Indikator Fenol Merah
Sifat Fisika : padatan berbentuk bubuk, berwarna merah muda
hingga merah tua, memiliki titik leleh >300oC,
bersifat basa lemah.
Sifat Kimia : larut basa alkali hidroksida dan karbonat, sedikit
larut dalam alkohol dan aseton, hampir tidak larut
dalam kloroform dan eter, stabil dalam udara,
stabil dalam panas, digunakan dalam kesehatan
sebagai penanda pada proses absorbsi obat.
(Chem-supply, 2014)
III.2.1.2. Asam Asetat (CH3COOH)
Sifat Fisika : larutan tidak berwarna dan berbau kuat seperti
cuka. Memiliki bobot molekul 60,05 g/mol
dengan berat jenis 1,049 g/cm3. Asam asetat
memiliki titik didih 118,1oC.
Sifat Kimia : larut di dalam air, dietileter, dan aseton. Bersifat
asam. Reaktif terhadap basa.
(Sciencelab, 2013a)
III.2.1.3. Natrium Hidroksida (NaOH)
Sifat fisika : tidak berbau, merupakan padatan, berat molekul
40 g/mol, berwarna putih, titik didih 1388° C
Sifat kimia : bersifat korosif, higroskopis, reaktif dengan
logam, reaktif dengan oksidator
(Sciencelab, 2013l)
III.2.1.4. Sodium Nitroprusid
 Sifat Kimia : padatan berwarna merah dan tidak berbau.
Memiliki bobot molekul 297,95 g/mol dengan
berat jenis 1.72 g/cm3.
Sifat Fisika : larut di dalam air, reaktif terhadap oksidator dan
asam-asam.
(Sciencelab, 2013m) (HNO3)
III.2.1.5. Asam Nitrat
Sifat Fisika : larutan berwarna sedikit kekuningan, berbau
sangat kuat, memiliki bobot molekul 63 g/mol.
Asam nitrat memiliki titik didih 121oC dengan
berat jenis 1,408.
Sifat Kimia : larut di air dan dietil eter. Bersifat asam kuat,
sangat rektif terhadap basa, reaktif terhadap
reduktor dan logam.
(Sciencelab, 2013h)
III.2.1.6. Amonium Sulfat ((NH4)2SO4)
Sifat Fisik : padatan berwarna abu-abu putih, memiliki titik
leleh 280oC dengan berat jenis 1,77. Amonium
sulfat memiliki bobot molekul 132,14 g/mol.
Sifat Kimia : larut di air, tidak larut dalam aseton, sangat
reaktif dengan oksidator, dan reaktif terhadap
basa.
(Sciencelab, 2013d)
III.2.1.7. Amonium Hidroksida (NH4OH)
Sifat Fisik : larutan tidak berwarna, memiliki bobot molekul
35,05 gram/mol, titik leleh -69.2°C, dan berat
jenis 0,898.
Sifat Kimia : sangat mudah larut dalam air dingin, bersifat
basa lemah, reaktif terhadap asam.
(Sciencelab, 2013b)
III.2.1.8. Amonium Molibdat ((NH4)6Mo7O24)
 Sifat Fisika : padatan berwarna putih kehijauan, memiliki
bobot molekul 1235.86 g/mol, dan berat jenis
2.276 g/cm3.
Sifat Kimia : mudah larut di air, tidak bersifat korosif
terhadap gelas.
(Sciencelab, 2013c)
III.2.1.9. Kalium Oksalat (K2C2O4)
Sifat Fisika : padatan berwarna putih dan tidak berbau,
memiliki bobot molekul 184.2 g/mol dengan berat
jenis 2,13.
Sifat Kimia : larut dalam air, reaktif dengan oksidator, tidak
korosif terhadap gelas.
(Sciencelab, 2013j)
III.2.1.10. Barium Klorida (BaCl2)
Sifat Fisika : padatan berwarna putih dan tidak berbau,
memiliki bobot molekul 208.31 g/mol dengan berat
jenis 3,9. Barium klorida memiliki titik leleh 962oC
dan titik didih 1560oC.
Sifat Kimia : sebagian larut di air, tidak larut di asam, reaktif
terhadap asam, tidak bersifat korosif dengan gelas.
(Sciencelab, 2013e)
III.2.1.11. Natrium Karbonat
Sifat Fisika : padatan berbentuk bubuk, berwarna putih, tidak
berbau, rasa pahit atau basa dengan pH pada 1%
larutan adalah 11.5, dan memiliki titik didih 851oC.
Sifat Kimia : larut dalam air panas dan gliserol, sedikit larut
dalam air dingin dan tidak larut dalam aseton serta
alkohol, bersifat higroskopis, reaktif dengan asam,
dan mulai terdekomposisi pada suhu 400oC
menjadi CO2.
(Sciencelab, 2013)
III.2.1.12. Asam Klorida
Sifat Fisika : larutan tidak berwarna hingga kuning muda,
berbau tajam, bersifat asam, memiliki titik didih
108.58oC dan titik leleh -62.25oC pada konsentrasi
20.22%, 83oC dan -46.2oC pada konsentrasi 31%,
50.5oC dan -25.4oC pada konsentrasi 37%.
Sifat Kimia : larut dalam air dingin, air panas, dan dietil eter,
sangat reaktif terhadap logam, reaktif terhadap
material organik, alkali, dan air, sangat korosif
terhadap alumunium, tembaga dan stainless steel.
(Sciencelab, 2013)
III.2.1.13. Larutan Benedict
Sifat Fisika : larutan berwarna biru transparan, tidak berbau,
memiliki titik didih 100oC.
Sifat Kimia : mudah larut dalam air panas dan dinginn, sedikit
larut dalam methanol dan dietil eter, sangat reaktif
terhadap asam dan sedikit reaktif terhadap basa,
bersifat higroskopis.
(Sciencelab, 2013)
III.2.1.14. Indikator Fenol Ptalein
Sifat Fisika : larutan tidak berwarna, memiliki titik didih
79,58oC dengan berat jenis 0,8.
Sifat Kimia : bisa digunakan sebagai indikator dalam titrasi
asam basa. Larut di dalam air, metanol, dietileter,
dan aseton. Reaktif terhadap asam dan basa.
(Sciencelab, 2013i)
III. METODE PERCOBAAN
III.1. Alat dan Bahan
III.1.1. Alat
- Gelas Beker
- Kertas Saring
- Tabung Reaksi
- Penangas air
- Pipet Tetes
- Spatula
- Pengaduk
- Pemanas Listrik
- Kaki Tiga
- Drop Plate
- Erlenmeyer
- Cawan Porselin
- Penjepit
- Corong
- Rak tabung
reaksi
- Gelas ukur
III.1.2. Bahan
- Sampel Urine
- Phenol Ptalein
- Fenol Merah
- Na2CO3
- CH3COOH 0,1M
- Tepung kedelai
- Reagen Benedict
- NaOH 2M
- Sodium Nitroprusid
- HNO3 pekat
- (NH4)2SO4 padat
- NH4OH
- Amonium Molibdat
- Kalium Oksalat
- HCl pekat
- BaCl
III.2. Skema Kerja
III.2.1. Senyawa Organik dalam Urine
III.2.1.1. Pemecahan Ureum oleh Urease
3 mL Urine + 4 tetes indikator Phenol Merah
Tabung Reaksi I
- Penetesan Na2CO3 2% hingga larutan
berwarna merah muda
- Penambahan CH3COOH 0,1M hingga
larutan berwarna kuning
- Pemanasan pada penangas air hingga
suhu 60oC
- Penambahan satu ujung sendok
spatula tepung kedelai
- Pengocokkan dan pendiaman
beberapa saat
- Pengamatan
Hasil

3 mL Akuades + 4 tetes indikator Phenol Merah

Tabung Reaksi II
- Penetesan Na2CO3 2% hingga larutan
berwarna merah muda
- Penambahan CH3COOH 0,1M hingga
larutan berwarna kuning
- Pemanasan pada penangas air hingga
suhu 60oC
- Penambahan satu ujung sendok
spatula tepung kedelai
- Pengocokkan dan pendiaman
beberapa saat
- Pengamatan
Hasil
III.2.1.2. Tes Adanya Gula Pereduksi

1 mL Urine + 5 mL reagen Benedict

Tabung Reaksi 1
- Pemanasan hingga terjadi perubahan
warna
- Pendinginan cepat
- Pengamatan
Hasil

III.2.1.3. Tes Adanya Kreatinin

Percobaan JAFFE

5 mL Urine
Tabung Reaksi I
- Penambahan 1 mL asam pikrat jenuh
- Penambahan 1 mL NaOH 2M
- Pengamatan
Hasil

5 mL Akuades
Tabung Reaksi II
- Penambahan 1 mL asam pikrat jenuh
- Penambahan 1 mL NaOH 2M
- Pengamatan
Hasil
 Percobaan WEYL

5 mL Urine
Tabung Reaksi 1
- Penambahan 5 tetes sodium nitroprusid
- Penambahan NaOH hingga basa
- Penambahan tetes demi tetes asam asetat
- Pengamatan
Hasil
-

III.2.1.4. Tes Adanya Asam Urat dan Garamnya

Percobaan Muroksid

0,5 mL Urine
Cawan Porselin
- Penambahan 3 tetes HNO3 pekat
- Pemanasan di atas penangas air hingga
kering
- Pengamatan
Hasil

Percobaan Reduksi Perak (Schiff)

5 tetes Urine + 3 tetes Na2CO3 2%

Drop Plate
- Penetesan pada sepotong kertas yang
sudah dibasahi AgNO3
- Pengamatan
Hasil
III.2.1.5. Tes Adanya Senyawa Keton (Percobaan Rhotern)

5 mL Urine
Tabung Reaksi
- Penambahan (NH4)2SO4 padat hingga
larutan jenuh (sambil dikocok)
- Penambahan 2 tetes nitroprusid 5%
- Penambahan NH4OH jenuh
- Pengocokan hingga rata
- Pendiaman selama 30 menit
- Pengamatan
Hasil

III.2.1.6. Tes Adanya Protein

10 mL Urine
Gelas Beker
- Penyaringan dengan kertas saring

5 mL filtrat
Tabung Reaksi
- Pemanasan di penangas air
- Penambahan 5 tetes asam asetat 2N
- Pengamatan
Hasil
III.2.2. Senyawa Anorganik dalam Urine
III.2.2.1. Tes Adanya Amoniak
3 mL Urine + 2 tetes Indikator PP
Tabung Reaksi 3
- Penambahan 2-3 tetes Na2CO3 2%
hingga berwarna merah muda
- Pemanasan di penangas air hingga
mendidih
- Peletakkan kertas saring (yang sudah
ditetesi indikator PP) di mulut tabung
reaksi
- Pengamatan
Hasil

III.2.2.2. Tes Adanya Klorida

2 mL Urine
Cawan Porselin
- Penambahan 2 tetes HNO3 pekat
- Penambahan 2 tetes AgNO3
- Pengamatan
Hasil
III.2.2.3. Tes Adanya Fosfat dan Kalsium
10 mL Urine
Tabung Reaksi
- Penambahan 1 mL NH4OH hingga basa
- Pemanasan di penangas air hingga
terbentuk endapan putih
- Penyaringan
- Pencucian endapan dengan akuades

Endapan Putih
Tabung Reaksi
- Pelarutan endapan dengan 1 mL
CH3COOH 2%

Larutan Larutan
Tabung Reaksi I Tabung Reaksi II

Larutan
Tabung Reaksi I
- Penambahan 1 tetes HNO3 pekat
- Penambahan 3 tetes Amonium Molibdat
- Pemanasan
- Pengamatan
Hasil

Larutan
Tabung Reaksi II
- Penambahan 3 tetes Kalium Oksalat
- Pengamatan
Hasil
III.2.2.4. Tes Adanya Sulfat
2 mL Urine + 1 tetes HCl pekat
Tabung Reaksi
- Penambahan 3 tetes BaCl2 0,1M
- Pengamatan
Hasil
IV. DATA PENGAMATAN

No. Perlakuan Hasil Ket.

1. Pemecahan Ureum oleh Urease Tabung 1:
(Urine)
-3 mL urine + 4 tetes fenol merah + Urine berwarna kuning keruh
Na2CO3 2% +

-penambahan CH3COOH

-pemanasan hingga 60oC

-penambahan tepung kedelai

-pengocokan, pendiaman

Aquades
Tabung 2:
-
-3 mL akuades + 4 tetes fenol
Aquadest berwarna putih
merah + Na2CO3 2%
keruh

-penambahan CH3COOH

-pemanasan hingga 60oC

-penambahan tepung kedelai

-pengocokan, pendiaman
2. Tes Gula Pereduksi
- 1 mL urine + 3 mL larutan
Benedict
- Pemanasan dan pendinginan
3. Tes Kreatinin
(Percobaan JAFFE)
a. 5 mL urine + 1 mL asam pikrat
jenuh + 1 mL NaOH 2M
b. 5 mL aquades + 1 mL asam
pikrat jenuh + 1 mL NaOH 2M
Urine berwarna biru
-
kehijauan, tidak terdapat
endapan merah bata
Tabung 1 (sampel urine) : +
Larutan berwarna jingga -
Tabung 2 (akuades) :
Larutan berwarna kuning
 (Percobaan WEYL)
5 mL urine + 5 tetes sodium Larutan berwarna jingga saat
nitroprussid + NaOH hingga basa + ditambahkan NaOH dan +
asam asetat berubah menjadi warna awal
saat ditambahkan asam asetat
4. Tes Asam Urat dan Garamnya
(Percobaan Muroksid)
- 0,5 mL urine + 3 tetes HNO3
pekat
- Pemanasan sampai kering
(Percobaan SCHIFF)
- 5 teter urine + 5 tetes Na2CO3 2%
- Penetesan larutan campuran ke
kertas saring yang dibasahi
AgNO3
5. Tes Senyawa Ketone (Uji Rhotern)
- 5 mL urine + Na2SO4 serbuk
- 3 tetes nitroprusid 5% + 2 mL
NH4OH jenuh
- Pengocokan dan pendiaman 15
menit
6. Tes Protein
- Penyaringan 5 mL urine
- Pemanasan filtrat pada penangas
air
- Penambahan 3-5 tetes CH3COOH
2N Commented [L5]: lengkapi

7. Tes amoniak
- 2 mL urine + 2 tetes PP + 2-3 Urine yang dipanaskan
tetes Na2CO3 2% menimbulkan warna merah
- Pemanasan di atas penangas air
muda pada kertas saring +
hingga mendidih
- Peletakkan sepotong kertas saring
(sudah ditetesi indikator PP) di
mulut tabung
8. Tes Klorida
- 2 mL urine + 2 tetes HNO3 pekat Larutan keruh dan terdapat
+
+ 2 tetes AgNO3 endapan, dan larut setelah
penambahan NH4OH berlebih
9. Tes Sulfat
- 2 mL urine + 1 tetes HCl pekat +
3 tetes BaCl2 0,1M
10. Tes Fosfat dan Kalsium
- 5 mL urine + 1 mL NH4OH
- Pemanasan pada penangas air
- Penyaringan
- Pelarutan endapan dengan 1 mL
CH3COOH 2%
- Pembagian menjadi 2 larutan (A Commented [L6]: lengkapi

dan B)
Larutan A (Uji Fosfat)
- Larutan A + 1 tetes HNO3 pekat +
3 tetes amonium molibdat dan
pemanasan
Larutan B (Uji Kalsium)
- Larutan B + 3 tetes kalium
oksalat
 Kelompok
No. Jenis Uji
1 2 3 4 5 6 7 8
1. Pemecahan ureum oleh urease + + + + + +
2. Gula pereduksi + - - - - -
3. Tes adanya kreatinin
a. JAFFE + + + + + +
b. WEYL + + + + + +
4. Tes adanya asam urat dan garamnya
a. Muroksid + - + + + +
b. SCHIFF + + + + + +
5. Tes adanya keton - - - - - -
6. Tes adanya protein - - - - - -
7. Tes adanya amonia - - + - - -
8. Tes adanya klorida + + + + + +
9. Tes fosfat / kalsium - - -/+ -/+ + -/+
10. Tes sulfat + + + + + +

Ket. Commented [L7]: Lengkapi datanya

Kelompok 1 : urine diabetes

Kelompok 2 : urine sewaktu
Kelompok 3 : urine bangun tidur
Kelompok 4 : urine orang sakit & minum obat
Kelompok 5 : urine setelah makan buah naga
Kelompok 6 : urine perokok
Kelompok 7 : urine ibu hamil
Kelompok 8 : urine peminum kopi
V. PEMBAHASAN

Percobaan identifikasi senyawa dalam urine ini bertujuan untuk

mengetahui unsur-unsur yang terkandung dalam urine. Urine adalah cairan
sisa hasil metabolime tubuh yang diekskresikan oleh ginjal dan
dikeluarkan dari dalam tubuh melalui proses urinasi (Iqbal 2008). Fungsi
utama urin adalah untuk membuang zat sisa seperti racun atau obat-obatan
dari dalam tubuh. Commented [L8]: + prinsip dan metode

Dalam percobaan sampel yang digunakan adalah urine seseorang

yang sedang sakit dan peminum obat. Dilakukan identifikasi senyawa yang
terdapat di urine secara kualitatif. Identifikasi senyawa dalam urine sangat
penting karena dengan adanya identifikasi senyawa dalam urine bisa
mengetahui ada dan tidaknya suatu penyakit dalam tubuh.

V.1. Senyawa Organik Dalam Urine

V.1.1. Pemecahan Ureum oleh Urease Commented [d9]: Sudah direvisi ya, maaf mba saya bingung ini
kan kemarin mba bilang pake foto kelompok lain nah yang saya
Uji ini bertujuan untuk mengetahui adanya ureum dalam dapatkan itu cuman foto hasil akhirnya, sedangkan yang
penambahan tiap reagennya itu ngga ada, jadi ini foto untuk tiap
urine yang dapat dipecah oleh enzim urease. Ureum penambahan reagen saya pakai punya kelompok saya tapi
pembahasannya sesuai yg hasilnya positif(merah muda).
merupakan hasil metabolisme akhir dari protein. Umumnya
meliputi 80-90% dari total nitrogen yang dikeluarkan melalui
urine. Prinsip yang terdapat dalam percobaan ini adalah
pemecahan ureum oleh enzim urease. Sampel yang digunakan
dalam percobaan ini antara lain aquadest dan urine. Aquadest
digunakan sebagai pembanding. Setiap sampel ditambahkan
indikator fenol merah yang bertujuan untuk menandai
perubahan pH yang terjadi pada larutan. Commented [L10]: Lampirkan fotonya
 Gambar 5.1 Penambahan Indikator Fenol
Reaksi fenol merah:

HIn In-
Suasana asam suasana basa
(kuning) (merah)
(Underwood, 1986)

Perubahan pH ini untuk menandai pH optimum enzim

urease bekerja optimal. Fenol merah merupakan indikator
dengan range pH 6,0-8,4 dan pada suasana asam membentuk
warna kuning (Underwood, 1986).
Penambahan natrium karbonat 2 % berfungsi untuk
mencapai pH yang diinginkan yaitu pH enzim urease bekerja
optimum pada suasana basa. Pencapaian pH tersebut ditandai
dengan perubahan warna. Commented [L11]: Lampirkan foto

Gambar 5.2 Natrium Karbonat 2%

Penambahan asam asetat akan menghasilkan larutan
berwarna kuning, baik pada urine maupun akuades. Fungsi
asam asetat adalah untuk memberikan suasana asam. Commented [L12]: Lampirkan foto

Gambar 5.3 Penambahan asam asetat

Selanjutnya dipanaskan sehingga warna larutan pada
urine dan aquades menjadi merah muda. Fungsi pemanasan Commented [L13]: Yakin? cek

adalah untuk mencapai suhu optimal enzim urease, sehingga

enzim tersebut dapat bekerja secara optimal pada proses
pemecahan ureum. Kemudian penambahan tepung kedelai ke
dalam sampel. Tepung kedelai berfungsi sebagai sumber enzim
urease. Enzim urease berfungsi memecahkan ureum menjadi
urea.. Sampel ditambah dengan tepung kedelai warna sampel
menjadi merah muda hal ini diakibatkan adanya enzim urease Commented [L14]: Yang bener yang mana ? kuning keruh /
kuning cerah?
dalam tepung kedelai bereaksi dengan urea yang ada pada
urine sehingga terjadi reaksi enzimatik, yaitu hidrolisis urea
dalam urine oleh urease dalam tepung kedelai (Poedjiadi,
1994). Sedangkan pada aquades menghasilkan larutan
berwarna putih keruh. Dari percobaan didapatkan hasil yang
positif pada kedua sampel urine. Uji positif ditandai oleh
warna urine berwarna merah muda. Kandungan ureum dalam Commented [L15]: Sesuaikan, di pernyataan diatas katanya
ureum udah dipecah sama urease ?? kok negative ?
urine akan dipecah oleh enzim urease (pemecah ureum)
sehingga menghasilkan amonium karbonat. Reaksi tersebut
akan ditandai dengan munculnya warna merah muda. Commented [L16]: Inget lagi.. kmaren aku bilang apa ☹

Reaksi yang terjadi adalah:

(Kusnawidjaya, 1987)

Gambar 5.4 Hasil Pemecahan ureum oleh urease

 Tepung kedelai berfungsi sebagai sumber enzim urease.
Enzim urease berfungsi memecahkan ureum menjadi urea.
Kandungan ureum dalam urine akan dipecah oleh enzim
urease (pemecah ureum) sehingga menghasilkan amonium
karbonat.. Commented [L17]: Persingkat dan perjelas kalimatnya
Commented [L18]: Diatas udah dijelasin. Ga perlu pengulangan

V.1.2 Tes adanya Gula Pereduksi Commented [d19]: Sudah yaaa

Uji ini bertujuan untuk mengidentifikasi adanya gula

pereduksi dalam urine. Prinsip percobaan ini adalah reaksi
reduksi. Pemeriksaan glukosa urine dengan tes reduksi atau
menggunakan benedict ini memanfaatkan sifat glukosa sebagai
pereduksi. Zat yang paling sering digunakan untuk menyatakan
adanya reduksi adalah yang mengandung garam cupri. Reagen
terbaik yang mengandung garam cupri adalah larutan Benedict.
Penambahan reagen benedict ini bertujuan untuk membentuk
endapan merah bata gugus pereduksi yang terdapat dalam
urine saat dipanaskan. Prinsip dari tes Benedict adalah glukosa
dalam urine akan mereduksi kuprisulfat (dalam benedict)
menjadi kuprosulfat yang terlihat dengan perubahan warna dari
larutan Benedict tersebut. Jadi, bila urine mengandung
glukosa, maka akan terjadi reaksi perubahan warna seperti
yang dijelaskan di atas. Namun, bila tidak terdapat glukosa,
maka reaksi tersebut tidak akan terjadi dan warna dari benedict
tidak akan berubah.
Reaksi yang terjadi adalah sebagai berikut:
 (Martoharsono, 1993)

Setelah ditambahkan reagen benedict menghasilkan Commented [L20]: Sampel ditambahkan benedict, warnanya
??
warna biru, sampel kemudian dipanaskan. Pemanasan yang Lampirkan foto

dilakukan bertujuan untuk mempercepat reaksi.

Gambar Setelah ditambahkan Benedict

Setelah dipanaskan, dalam larutan yang berwarna biru, Commented [L21]: Lampirkan foto setelah pemanasan

pada bagian dasar tabung reaksi tidak terbentuk endapan merah

bata yang menunjukkan uji negatif. Commented [L22]: Cek lagi.. hasilmu ada endapan merah bata
ga ??? hmmm
 Gambar Hasil Uji gula Pereduksi (-)
Hasil dari uji ini adalah urine menunjukkan hasil yang
negatif, karena diperoleh urine berwarna biru kehijauan dan
tidak ada endapan merah bata. Artinya pada sampel iurine
orang sakit dan meminum obat ini tidak terdapat gula
pereduksi. Apabila hasil yang diperoleh menunjukkan hasil
positif yaitu adanya endapan merah bata artinya orang tersebut
dapat diindikasikan mengalami penyakit diabetes mellitus Commented [L23]: Artinya… pada sampel orang ini….

Glukosuria dapat terjadi karena peningkatan kadar glukosa Commented [L24]: Apaabila hasil yang diperoleh menunjukan
adanya endapan merah bata (positif gula pereduksi), artinya…
dalam darah yang melebihi kapasitas maksimum tubulus untuk
mereabsorpsi glukosa. Hal ini dapat ditemukan pada kondisi
diabetes mellitus, tirotoksikosis, sindroma Cushing,
phaeochromocytoma, peningkatan tekanan intrakranial atau
karena ambang rangsang ginjal yang menurun seperti pada
renal glukosuria, kehamilan dan sindroma Fanconi (Wirawan
dkk, tt). Orang yang mempunyai urine jenis ini menderita
penyakit diabetes melitus. Diabetes Melitus adalah suatu
penyakit yang ditandai dengan adanya peningkatan kadar gula
darah dalam tubuh (Heppy, 2013). Diabetes Melitus
merupakan penyakit metabolik dengan adanya peningkatan
gula darah (hiperglikemia) yang disebabkan oleh kelainan
sekresi insulin dan kerja insulin (Septiyanti, 2013).
V.1.3. Tes Adanya Kreatinin

V.1.3.1 Percobaan JAFFE

Percobaan ini dilakukan untuk menunjukkan
adanya kreatinin dalam urine. Pemeriksaan kreatinin
darah dengan kreatinin urin bisa digunakan untuk
menilai kemampuan laju filtrasi glomerolus (Sodeman,
1995). Prinsip percobaan ini adalah pemecahan
kreatinin. Kreatin adalah anhidrida dari keratin
(asammetil guadmin asetat) yang banyak dibentuk
dalam obat dengan dehidrasi keratin fosfat yang non
enzimatik dan tidak reversible. Kreatinin merupakan Commented [L25]: sitasi

konstituen dalam urine.

Gambar 5.3 Sampel yang akan diuji

Dalam penambahan asam pikrat, yang bertujuan Commented [L26]: sampel ditambahkan asam pikrat jenuh,
tujuannya adalah
untuk mereaksikan kreatinin agar terbentuk kompleks
berwarna kuning. Hal ini sesuai dengan prinsip dari test
kreatinin, yaitu berdasarkan reaksi antara kreatinin
dengan asam pikrat yang membentuk larutan kuning.
Sampel urine ditambah dengan asam pikrat jenuh yang
menghasilkan warna kuning pekat pada dan warna
kuning terang pada akuades.

Gambar 5.4 Sampel setelah ditambahkan asam pikrat

jenuh

Kemudian ditambah dengan NaOH yang

menghasilkan warna jingga kemerahan pada sampel
urine sedangkan pada sampel aquades tidak terjadi
perubahan warna atau tetap berwarna kuning. Hal ini
terjadi dengan memprotonkan nitrogen dalam suasana
basa yang kemudian terbentuk kreatinin rantai lurus. Commented [L27]: sitasi
Gambar 5.5 Sampel setelah ditambahkan NaOH dan
digojok

Uji positif pada percobaan ini ditandai dengan

sampel berwarna jingga. Sehingga telah terpecahnya
kreatinin dalam urine menjadi kreatinin dan garam
asam pikrat. Hasil dari uji ini, yaitu didapatkan sampel
urine positif mengandung kreatinin. Hal ini ditunjukkan
dengan adanya perubahan warna menjadi oranye
kemerahan (jingga). Hal tersebut menunjukkan bahwa
dalam urine tersebut mengandung kreatinin.
Dari gambar diatas, Nampak tabung 1 (sebelah
kanan) yang berisikan sampel urin saat direaksikan
dengan larutan asam pikrat dan NaOH terjadi
perubahan warna menjadi jingga, hal ini berarti pada
sampel urin mengandung kreatinin. Sedangkan pada
tabung 2 (sebelah kiri) yang merupakan sampel
aquades tidak mengalami perubahan warna, hal ini
berarti aquades tidak mengandung senyawa kreatinin.
Kadar kreatinin memiliki nilai normal yaitu, 0,6 –
1,2 mg% untuk sampel urin sewaktu dan 1 – 1.5 mg%
untuk sampel urin 24 jam. Apabila hasil kadar kreatinin
 labih tinggi daripada normalnya menunjukkan bahwa
orang tersebut terkena akut tubular nekrosis, dehidrasi,
diabetes neforpati, eklamia (suatu kehamilan yang
meliputi kejang), glomerulonefritis, gagal ginjal,
penyakit otot menyusun, preeclampsia (kehamilan –
induced hipertensi), pielonefritis, ginjal berkurangnya
aliran darah (syok, gagal ginjal, jantung kongestif),
rhabdomyolysis, obstruksi saluran kemih. Sedangkan
kadar kreatinin lebih rendah dari normal dapat
menunjukkan: muscular clystrophy (tahap akhir) dan
myasthenia gravis.

Reaksi yang terjadi:

H OH
N H
N
C O O2N NO 2
C HN C O
C NH2 +
N CH 2
N CH 2

CH3 NO 2
CH 3

NH2 OH

H2N NO 2
C NH

N CH3

NO 2
CH2COOH

(Martoharsono 1993)
V.1.3.2 Percobaan WEYL
Percobaan ini bertujuan untuk mengetahui adanya
kreatinin dalam urine. Prinsip percobaan ini adalah
penambahan larutan basa. Penambahan Sodium
Nitroprusid dan NaOH bertujuan agar kreatinin dapat
bereaksi dengan basa dan menunjukkan warna kuning
cerah. Setelah ditambahkan NaOH, larutan berubah
warna menjadi warna jingga.

Gambar 5.6 Sampel setelah ditambahkan Natrium

nitroprusid
 Gambar 5.7 Sampel setelah ditambahkan NaOH

Selanjutnya penambahan asam asetat berfungsi

agar kreatinin menunjukkan warna reaksi yang berbeda
terhadap suasana asam yaitu kembali menjadi berwarna
bening. Uji positif menunjukkan adanya kreatinin
ditandai dengan adanya perubahan warna menjadi
kuning cerah saat ditambahkan larutan basa dan
kembali berwarna semula (bening) saat penambahan
asam.
Gambar 5.8 Sampel setelah ditambahkan larutan asam
asetat

Nampak dari gambar di atas, hasil yang Commented [L28]: tampak

diperoleh dari uji tersebut adalah urine positif

mengandung kreatinin. Hal tersebut ditandai dengan
sampel mengalami perubahan warna saat penambahan
basa yaitu menjadi kuning cerah.
 Reaksi yang terjadi adalah sebagai berikut:

H H
N N
C O C O
C HN C HN
Na2Fe(CN) 5NO .2H2O +
H
N CH 2 N CH2

CH 3 CH 3

HN Fe(CN)5NO.2H2O

C NH 2Na+

NH

CH2COOH
(Martoharsono 1993).

V.1.4 Tes Adanya Asam Urat dan Garamnya

V.1.4.1. Percobaan Muroksid
Percobaan ini bertujuan untuk mengidentifikasi
senyawa asam urat dan garamnya dalam urine. Prinsip
percobaan ini adalah pemutusan ikatan rangkap pada asam
urat. Penambahan HNO3 pekat dalam percobaan ini adalah
untuk memutus ikatan rangkap pada asam urat (C=O )
menjadi ikatan tunggal C-OH dan mengeliminasi ikatan
tunggal C-H menjadi ikatan rangkap C=N sehingga
dihasilkan senyawa berwarna kuning kecoklatan. Commented [L29]: lampirkan foto
 Reaksinya:
H N C O N C OH
H
H
O C C N HNO3 HO C C N NO2
C O C OH
H N C N N C N
H
(Martoharsono, 1993)

Pemanasan yang dilakukan bertujuan untuk

mempercepat reaksi yang terjadi. Hasil dari uji ini yaitu
didapatkan urine berwarna kuning oranye, dimana uji Commented [L30]: lampirkan foto

tersebut berarti uji positif. Hal ini menandakan bahwa

dalam sampel urine tersebut mengandung asam urat.
Adanya asam urat berlebih akan menyebabkan siklus
urea terhambat sehingga pembentukan urea dalam
amoniak menjadi terhambat dan tubuh tidak dapat
menerima diet berprotein tinggi. Asam amino yang
melebihi batas dalam jumlah tinggi akan menyebabkan
koma sehingga bisa mematikan (Martoharsono, 1993).
Skema jalur metabolisme terbentuknya asam urat dalam
tubuh manusia:
N C OH N C O
HN C O
H OH CH C N O CH C N
O C C N
C OH C OH
C O
HN C N HN C N
HN C N H H
H
(laktin) (urat)
(laktan)

HN C O
H
O C C N
C O
HN C N
H
(asam urat)

(Martoharsono, 1993
 V.1.4.2 Percobaan Reduksi Perak (SCHIFF)
Percobaan ini bertujuan untuk mengetahui adanya asam
urat dan garamnya dalam urine. Prinsip percobaan ini
adalah reduksi ion Ag+ menjadi Ag. Uji positif pada
percobaan ini adalah adanya lapisan seperti cermin perak
yang menempel pada kertas saring.
Penambahan larutan Na2CO3 bertujuan untuk
membentuk garam dari asan urat ketika Na2CO3 bereaksi
dengan asam urat. Penambahan AgNO3 bertujuan untuk
mereaksikan AgNO3 tersebut dengan garam dari asam urat
dan membentuk lapisan warna perak pada kertas saring
akibat adanya reduksi Ag+ menjadi Ag oleh garam sodium
(Na+) dari asam urat tersebut.
Reaksi yang terjadi adalah:
2AgNO3 + Na2CO3  Ag  + 2NaNO3 + CO3 + O2

(Kusnawidjaya, 1987)
Uji ini menandakan uji positif yang ditandai dengan
adanya lapisan cermin perak / ada bercak kotoran kehitam
hitaman pada kertas saring. Hal ini menandakan bahwa Commented [L31]: letakkan sebelum mekanisme reaksi,
tambahkan fotonya
dalam sampel urine tersebut mengandung asam urat.
V.1.5 Tes Adanya Keton
Percobaan ini bertujuan untuk mengetahui keberadaan
protein di dalam urine. Prinsip yang mendasari percobaan ini
ialah reaksi pembentukan senyawa kompleks. Penambahan
amonium sulfat padat bertujuan untuk mengkondisikan larutan
urine yang bersifat asam menjadi netral. Sedangkan
penambahan sodium nitroprusid dan amonium hidroksida
bertujuan sebagai pereaksi. Reaksi yang terjadi:
 Pada larutan sampel tidak terbentuk cincin jingga,
sehingga dapat diketahui di dalam sampel urine tidak terdapat
ketone. Ketone banyak terdapat pada urine penderita demam
tifoid, kanker, dan diabetes (Gupta, 1932).
Pertanyaan :
1. Tuliskan rumus umum keton Commented [L32]: tuliskan di kalimat pembahasan, bukan
seperti ini . ok
Jawab :

(Gupta, 1932).
2. Berapa nilai kadar keton dalam urine normal
Jawab :
Tingkat keton dalam urin yang normal adalah kurang dari
0,6 milimol per liter (mmol/L) (Gupta, 1932).
3. Buatkan skema jalur metabolisme terbentuknya senyawa
keton dalam tubuh manusia Commented [L33]: cari mekanisme reaksinya juga

Jawab :
Pada saat tubuh mengalami kelaparan dimana jumlah
karbohidrat tidak mencukupi sebagai energi, asam lemak
akan diubah menjadi badan keton yang kemudian beredar
dalam darah, proses pembentukan keton disebut sebagai
ketogenesis. Suatu keadaan dimana jumlah keton yang
diproduksi melebihi jumlah normal disebut sebagai ketosis,
yang kemudian dapat ditemukan dalam darah yang dikenal
 sebagai ketonemia atau dalam urin sebagai ketonuria
(Gupta, 1932).
4. Tuliskan reaksi yang terjadi pada percobaan diatas
Jawab :

(Gupta, 1932)

V.1.6 Tes Adanya Protein Commented [L34]: lihat ppercobaan tes kreatinin, buat sperti
itu .. lampirkan foto setiap kali penambahan reagen
Percobaan ini dilakukan dengan tujuan untuk mengetahui
keberadaan protein dalam urine. Prinsip yang mendasari
percobaan ini denaturasi protein. Sampel urine yang digunakan
merupakan urine orang sakit. Penyaringan sampel berguna
untuk memisahkan urine dari padatan pengotornya. Kemudian,
dilakukan penambahan asam asetat dan pemanasan yang
berguna untuk mempercepat proses denaturasi protein dalam
urine. Penambahan asam, garam, maupun panas dapat
membuat struktur pecah. Keberadaan protein ditandai dengan
terbentuknya koagulan putih dengan reaksi:

(Winarno, 1996)
Pada hasil percobaan, larutan sampel urine tetap berwarna
kuning bening dan tidak terbentuk koagulan sama sekali. Hal
ini menunjukkan bahwa di dalam urin tidak mengandung
protein. Keberadaan protein dalam urine salah satu penyakit
terparahnya yaitu gangguan pada ginjal (Gupta, 1932). Commented [L35]: jelaskan sebabnya
Pertanyaan : Commented [L36]: masukkan di kalimat pembahasan

1. Sebutkan jenis protein yang ada di dalam urine.

Jawab :
Albumin merupakan salah satu protein utama dalam
plasma manusia dan menyusun sekitar 60 persen dari total
protein plasma. Kadar albumin normal dalam urin berkisar
antara 0-0,04 gr/L/hari. Keberadaan albumin dalam urin
dengan jumlah yang melebihi batas normal, dapat
mengindikasikan terjadinya gangguan dalam proses
metabolisme tubuh.
2. Jelaskan reaksi yang terjadi pada percobaan diatas.
Jawab :

Sampel urin dilakukan penambahan asam asetat dan

pemanasan yang berguna untuk mempercepat proses
denaturasi protein dalam urine. Penambahan asam, garam,
maupun panas dapat membuat struktur pecah. Keberadaan
protein ditandai dengan terbentuknya koagulan putih.
V.2. Senyawa Anorganik dalam Urine
V.2.1 Tes Adanya Amoniak
Percobaan ini bertujuan untuk mengidentifikasi senyawa
amonia yang terdapat dalam urine. Prinsip percobaan ini adalah
reduksi NH4+ menjadi NH3. Pada percobaan ini, urine yang
bertindak sebagai sampel ditambahkan indikator PP untuk
menandai perubahan pH dari asam menjadi basa setelah
penambahan Na2CO3. Kemudian penambahan Na2CO3 bertujuan
untuk membentuk NH3. Uji positif percobaan ini adalah
terbentuknya warna merah muda pada kertas saring.
Reaksi phenolftalein (PP) adalah sebagai berikut:
OH OH

C OH H 2O C OH H3O+
O OH
C C O
O O

H2In, tidak berwarna HIn- tidak berwarna

Fenolftalein

O-

H3O+
C O

C O
O

In2-, merah

(Underwood, 1986)

Pemanasan dilakukan dengan tujuan untuk mempercepat

reaksi. Pada kertas saring ditetesi dengan indikator PP yang
 bertujuan untuk mengetahui adanya gas yang bersifat basa yang
timbul selama proses pemanasan. Gas yang bersifat basa tersebut
dapat merubah warna kertas saring yang telah ditetesi indikator
PP menjadi merah muda.
Hasil yang diperoleh dari percobaan ini adalah kertas saring
berubah menjadi warna merah muda (pink) yang menandakan
urine tersebut positif terhadap amoniak. Hal ini dikarenakan ada
gas amonia yang dibebaskan selama reaksi. Commented [L37]: lampirkan fotonya

Reaksi yang terjadi:

Na2CHO3 NH4HCO3 NaCH2O3 (NH4)CO3

2NH4 + CO32-  2NH3  + CO2  + H2

(Martoharsono, 1993)

V.2.2 Tes Adanya Klorida

Percobaan ini bertujuan untuk mengidentifikasi ada atau
tidaknya klorida dalam urine. Prinsip percoban ini adalah reaksi
pembentukan kompleks dan reaksi pengendapan.
Penambahan HNO3 pekat bertujuan untuk menguraikan
ikatan ionik antara Cl- yang pada umumnya berikatan dengan
Na+. Penambahan AgNO3 bertujuan untuk mengendapkan Cl-
menjadi AgCl. Penambahan NH4OH berlebih adalah untuk
melarutkan endapan AgCl menjadi ion kompleks [Ag(NH4OH)]+.
Uji positif dari percobaan ini adalah terbentuknya endapan putih Commented [L38]: lampirkan fotonya…
stelah penambahan AgNO3 dan HNO3 , serta stelah penambahan
keruh atau warna merah muda yang dapat larut jika ditambahkan NH4OH

dengan NH4OH berlebih. HNO3 pada percobaan ini berfungsi

untuk mencegah terjadinya perak fofat. Terbentuknya endapan
AgCl (endapan putih) menunjukkan adanya ion Cl- yang berasal
 dari urine diikat oleh Ag+ dari AgNO3. Penambahan amoniak
akan mengurangi endapan AgCl (Ganong, 2003).
AgCl + NH4OH AgOH + NH4Cl
(Ganong, 2003)

Hasil yang diperoleh dari percobaan ini adalah urine

terbentuk endapan keruh yang larut apabila ditambahkan NH4OH
berlebih. Hal ini menandakan bahwa sampel urine tersebut positif
mengandung klorida.
Reaksi yang terjadi:
NaCl + HNO3  NaNO3 + HCl

HCl + AgNO3  AgCl  + HNO3

AgCl  + NH4OH  [Ag(NH4OH)]+ + Cl-

(Martoharsono, 1993)

V.2.3 Tes Adanya Fosfat dan Kalsium

Percobaan ini bertujuan untuk mengidentifikasi adanya fosfat
dan kalsium dalam urine. Prinsip percobaan ini adalah reaksi
pengendapan. Uji positif adanya fosfat dalam urine ditandai
dengan terbentuknya endapan warna kuning. Sedangkan Uji
positif adanya kalsium adalah terbentuknya endapan atau larutan
yang keruh. Pada percobaan ini urine ditambah dengan larutan
amonium hidroksida yang berfungsi untuk membuat larutan
bersifat alkalis. Kemudian larutan tersebut dipanaskan untuk
mempercepat reaksinya. Pemanasan larutan dilakukan hingga
terbentuk endapan putih. Kemudian larutan tersebut disaring
menggunakan kertas saring. Setelah disaring endapan putih pada
kertas saring dicuci dengan aquades lalu di larutkan dalam 1 mL
 asam asetat 2%. Kemudian larutan dibagi dua menjadi 2 tabung.
Tabung 1 untuk menguji adanya Fosfat dalam urine sampel dan
tabung 2 untuk menguji adanya kalsium dalam urine sampel.
Pada tabung 1, larutan ditambahkan 1 tetes HNO3 Pekat,
kemudian ditambahkan 3 tetes Ammonium Molibdat. Selanjutnya
larutan dipanaskan untuk mempercepat terjadinya reaksi. Setelah
dipanaskan dan diamati, larutan tidak membentuk adanya
endapan yang menandakan urine sampel tidak mengandung
fosfat.
Pada tabung 2, larutan ditambahkan 3 tetes kalium oksalat.
Dan setelah diamati larutan menjadi keruh dan ada endapan yang
menandakan urine sampel mengandung kalsium. Commented [L39]: jangan lupa laampirin foto, di setiap
perlakuan
Reaksi yang terjadi: jangan lupa jawab pertanyaan di buku pp

HPO42- + 12MoO42- + 3NH4+ + 23H+  (NH3)[P(Mo3O4)4]

 + 12H2O

Ca2+ + K2C2O4  CaC2O4  + 2K+

(Kusnawidjaya, 1987)

V.2.4 Tes Adanya Sulfat

Percobaan ini bertujuan untuk mengidentifikasi adanya sulfat
dalam urine. Prinsip percobaan ini adalah pengendapan ion sulfat.
Uji positif percobaan ini adalah terbentuknya endapan putih atau
keruh pada larutan. Pada percobaan ini sampel urine ditambah
dengan HCl pekat dan BaCl2. Penambahan HCl pekat bertujuan
untuk mengkondisikan larutan dalam suasana asam. Sedangkan
penambahan BaCl2 bertujuan untuk mengendapkan ion SO42-
menjadi BaSO4 yang berwarna putih dan tidak larut. Commented [L40]: tambahkan fotonya

Reaksi yang terjadi:

SO42- + 2H+  H2SO4
 H2SO4 + BaCl2  BaSO4  + 2HCl

(Kusnawidjaya, 1987)
Dari hasil percobaan didapat hasil bahwa pada sampel urine
mengandung sulfat yang ditandai dengan terbentuknya endapan
putih.
VI. PENUTUP
VI.1. KESIMPULAN
Pada sampel urine orang sakit terdapat beberapa senyawa kimia
yaitu kreatinin, klorida, fosfat, kalsium, dan sulfat. Sedangkan untuk
senyawa gula pereduksi, asam urat dan garamnya, keton, protein,
dan amoniak tidak terdapat di dalam sampel urine tersebut.
VI.2. SARAN
- Pemanasan pada saat uji protein harus diperlama
- Tepung kedelai yang digunakan pada uji pemecahan ureum oleh
urease harus yang terbaru agar enzim urease di dalamnya masih
terjaga baik.
 DAFTAR PUSTAKA Commented [L41]: lengkapi

Chem-supply. 2014. “Safety Data Sheet Phenol Red.” MSDS: 1–4.

Gandasoebrata, R. 2013. Penuntun Laboratorium Klinik. Lima belas. Jakarta:
Penerbit Dian Rakyat.
Gupta, Byomkes D A S. 1932. URINE ANALYSIS. India: Butterworth & Co. LTD.
Ridley, John W. 2018. Fundamentals of the Study of Urine and Body Fluids.
USA: Springer International Publishing AG.
Sciencelab. 2013a. “Material Safety Data Sheet Acetic Acid MSDS.” MSDS: 1–7.
———. 2013b. “Material Safety Data Sheet Ammonium Hydroxide.” MSDS: 1–
6.
———. 2013c. “Material Safety Data Sheet Ammonium Molybdate
Tetrahydrate.” MSDS: 1–5.
———. 2013d. “Material Safety Data Sheet Ammonium Sulfate MSDS.” MSDS:
1–6.
———. 2013e. “Material Safety Data Sheet Barium Chloride , Anhydrous
MSDS.” MSDS: 1–6.
———. 2013f. “Material Safety Data Sheet Benedict’s Reagent.” MSDS: 1–6.
———. 2013g. “Material Safety Data Sheet Hydrochloric Acid.” MSDS 3: 1–7.
———. 2013h. “Material Safety Data Sheet Nitric Acid.” MSDS: 1–6.
———. 2013i. “Material Safety Data Sheet Phenolphthalein.” MSDS 4: 1–6.
———. 2013j. “Material Safety Data Sheet Potassium Oxalate Monhydrate
MSDS.” MSDS: 1–6.
———. 2013k. “Material Safety Data Sheet Sodium Carbonate.” MSDS: 1–6.
———. 2013l. “Material Safety Data Sheet Sodium Hydroxide.” MSDS: 1–6.
———. 2013m. “Material Safety Data Sheet Sodium Nitroprusside.” MSDS: 1–6.