Penetapan Kadar Oksibenzon Dalam Krim Tabir Surya Secara Kromatografi Cair Kinerja Tinggi

PENETAPAN KADAR OKSIBENZON DALAM KRIM TABIR
SURYA SECARA KROMATOGRAFI CAIR

KINERJA TINGGI
OLEH
SITI ZULFAH NUR
NPM P2.31.35.0.15.069
PROGRAM STUDI DIPLOMA III ANALISA FARMASI DAN MAKANAN

POLITEKNIK KESEHATAN KEMENKES JAKARTA II
2018
PENETAPAN KADAR OKSIBENZON DALAM KRIM TABIR
SURYA SECARA KROMATOGRAFI CAIR
KINERJA TINGGI
Karya Tulis Ilmiah Ini Diajukan sebagai Syarat Untuk Memperoleh Gelar
Ahli Madya Analis Farmasi dan Makanan
OLEH
SITI ZULFAH NUR
NPM P2.31.35.0.15.069
PROGRAM STUDI DIPLOMA III ANALISA FARMASI DAN MAKANAN

POLITEKNIK KESEHATAN KEMENKES JAKARTA II
2018
LEMBAR PERSETUJUAN
Karya Tulis Ilmiah dengan Judul

“Penetapan Kadar Oksibenzon dalam Krim Tabir Surya secara
Kromatografi Cair Kinerja Tinggi”
Disusun oleh : Siti Zulfah Nur

NPM P2.31.35.0.15.069
Telah disetujui untuk dipertahankan di hadapan Tim Penguji Karya Tulis Ilmiah
Program Studi D III Analisa Farmasi dan Makanan Politeknik Kesehatan
Kementerian Kesehatan Jakarta II dalam rangka Ujian Akhir Program untuk
memenuhi syarat guna memperoleh Gelar Ahli Madya Analis Farmasi dan
Makanan.
Jakarta, Mei 2018
Pembimbing Utama, Pembimbing Pendamping,
Joko Sulistiyo, S.T., M.Si. Dra. Misde Yola, M.Pd., M.Farm.

NIP 19681122 198903 1002 NIP 19661008 199403 2003
LEMBAR PENGESAHAN
Karya Tulis Ilmiah dengan judul

“Penetapan Kadar Oksibenzon dalam Krim Tabir Surya secara
Kromatografi Cair Kinerja Tinggi”
Disusun oleh : Siti Zulfah Nur

NPM P2.31.35.0.15.069
Telah dipertahankan di hadapan Tim Penguji Karya Tulis Ilmiah Program Studi
Diploma III Analisa Farmasi dan Makanan Politeknik Kesehatan Kementerian
Kesehatan Jakarta II dalam rangka Ujian Akhir Program untuk memenuhi syarat
guna memperoleh Gelar Ahli Madya Analis Farmasi dan Makanan.
Jakarta, 17 Mei 2018

Tim Penguji :
Ketua
Latirah, S.Si., M.Farm.
NIP. 19620810 199603 2001
Anggota
1. Sri Mulyaningsih, S.Si., Apt.
NIP. 19770710 200801 2031
2. Joko Sulistiyo, S.T., M.Si.

NIP. 19681122 198903 1002
ABSTRAK
Siti Zulfah Nur, “Penetapan Kadar Oksibenzon dalam Krim Tabir Surya secara
Kromatografi Cair Kinerja Tinggi,” di bawah bimbingan Joko Sulistiyo, S.T.,
M.Si dan Dra. Misde Yola, M.Pd., M.Farm. 2018
Sinar matahari sangat diperlukan oleh makhluk hidup sebagai sumber energi dan
penyehat kulit dan tulang, di lain pihak sinar matahari mengandung sinar
ultraviolet yang membahayakan kulit, dapat menimbulkan kelainan pada kulit
mulai dari kemerahan, noda hitam, sampai kanker kulit. Sinar ultraviolet dapat
dihalau dengan kosmetik pelindung yang diformulasikan menjadi zat yang
berfungsi sebagai tabir surya. Tabir surya adalah bentuk sediaan yang di dalamnya
mengandung zat yang dapat menyerap atau memantulkan radiasi ultraviolet
sehingga mengurangi energi radiasi yang berpenetrasi ke kulit. Senyawa yang
paling sering digunakan dalam tabir surya adalah oksibenzon. Pengujian ini
dilakukan untuk mengetahui kadar oksibenzon memenuhi syarat atau tidak sesuai
dengan Peraturan Kepala Badan Pengawas Obat dan Makanan RI No.18 Tahun
2015 tentang Persyaratan Teknis Bahan Kosmetika bahwa persyaratan batas
kadar maksimum bahan aktif dalam produk akhir adalah 10%. Metode yang
digunakan adalah Kromatografi Cair Kinerja Tinggi menggunakan pelarut
metanol dan fase gerak berupa asetonitril:asam formiat 0,1%. Berdasarkan
pengujian yang telah dilakukan kadar rata-rata oksibenzon yang diperoleh sebesar
0,10975%. Maka dapat disimpulkan bahwa kadar sampel memenuhi syarat.
Kata kunci : Sinar ultra violet, Krim, Tabir surya, Oksibenzon, Kromatografi Cair
Kinerja Tinggi
`
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur penulis panjatkan ke hadirat Allah SWT, yang telah
melimpahkan rahmat dan karunia-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan
Karya Tulis Ilmiah (KTI) ini. Adapun judul KTI ini adalah “Penetapan Kadar
Oksibenzon dalam Krim Tabir Surya secara Kromatografi Cair Kinerja Tinggi”.
Karya Tulis Ilmiah ini dibuat untuk memenuhi salah satu syarat kelulusan
untuk memperoleh gelar Ahli Madya Analis Farmasi dan Makanan di Poltekkes
Kemenkes Jakarta II Program Studi D III Analisa Farmasi dan Makanan.
Pada kesempatan ini penulis menyampaikan terima kasih terutama
kepada:
1. Orang Tua yang terus menerus memberikan doa, semangat, motivasi serta
dukungannya demi terselesaikannya Karya Tulis Ilmiah ini.
2. Ibu Dra. Lisawati Tanzil, S.E., M.Si., Apt., selaku Ketua Program Studi
Diploma III Analisa Farmasi dan Makanan Politeknik Kesehatan Kementerian
Kesehatan Jakarta II.
3. Bapak Joko Sulistiyo, S.T., M.Si., serta Ibu Dra. Misde Yola, M.Pd., M.Farm.,
selaku pembimbing utama dan pendamping yang telah memberikan
pengarahan dan saran dalam penulisan Karya Tulis Ilmiah ini.
4. Pembimbing KTI di lahan PKL.
5. Seluruh Dosen dan Staf Program Studi Diploma III Analisa Farmasi dan
Makanan Politeknik Kesehatan Kementerian Kesehatan Jakarta II yang telah
banyak membimbing dan memberikan bantuan.
6. Semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu persatu.
Penulis menyadari bahwa dalam penulisan KTI ini masih banyak
kekurangan, untuk itu saran dan kritik yang membangun sangat penulis harapkan.
Akhir kata penulis berharap semoga pengujian ini dapat bermanfaat bagi penulis
maupun rekan-rekan lainnya.
Jakarta, Mei 2018
Penulis
i
DAFTAR ISI
Halaman
LEMBAR PERSETUJUAN
LEMBAR PENGESAHAN
ABSTRAK
KATA PENGANTAR ....................................................................................... i
DAFTAR ISI ...................................................................................................... ii
DAFTAR TABEL ............................................................................................. v
DAFTAR GAMBAR ......................................................................................... vi
DAFTAR LAMPIRAN ..................................................................................... vii
BAB I PENDAHULUAN ............................................................................... 1
1.1 Latar Balakang ................................................................................ 1
1.2 Perumusan Masalah ....................................................................... 2
1.3 Pembatasan Masalah ...................................................................... 3
1.4 Tujuan ............................................................................................ 3
1.4.1 Tujuan Umum .................................................................... 3
1.4.2 Tujuan Khusus ................................................................... 3
1.5 Manfaat .......................................................................................... 3
1.5.1 Bagi Mahasiswa ................................................................. 3
1.5.2 Bagi Masyarakat ................................................................ 3
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ...................................................................... 4
2.1 Landasan Teori............................................................................... 4
2.1.1 Kosmetika .......................................................................... 4
2.1.1.1 Penggolongan dan Kategori Kosmetik ................ 4
2.1.1.2 Tujuan Penggunaan Kosmetik ............................. 5
2.1.1.3 Manfaat Kosmetik ................................................ 6
2.1.1.4 Kosmetik Pelindung ............................................. 7
2.1.2 Kulit ................................................................................... 7
2.1.2.1 Anatomi Kulit ...................................................... 8
2.1.2.2 Fungsi Kulit.......................................................... 11
2.1.2.3 Jenis-Jenis Kulit ................................................... 12
ii
2.1.2.4 Pengaruh Kosmetik terhadap Kulit ...................... 12
2.1.3 Tabir Surya ......................................................................... 13
2.1.4 Krim ................................................................................... 15
2.1.5 Oksibenzon......................................................................... 15
2.1.6 Kromatografi ...................................................................... 16
2.1.6.1 Pengertian Kromatografi ...................................... 16
2.1.6.2 Pembagian Kromatografi ..................................... 16
2.1.7 Kromatografi Cair Kinerja Tinggi ..................................... 16
2.1.7.1 Prinsip .................................................................. 17
2.1.7.2 Fase Diam ............................................................ 17
2.1.7.3 Fase Gerak............................................................ 18
2.1.7.4 Uji Kesesuaian Sistem ......................................... 18
2.1.7.5 Linearitas dan Rentang......................................... 19
2.1.7.6 Instrumentasi KCKT ............................................ 19
2.1.7.7 Keuntungan KCKT .............................................. 22
2.2 Penelitian Relevan ......................................................................... 23
BAB III METODE PENGUJIAN .................................................................... 24
3.1 Waktu dan Lokasi Pengujian ......................................................... 24
3.1.1 Waktu Pengujian ................................................................ 24
3.1.2 Lokasi Pengujian ................................................................ 24
3.2 Prosedur Pengujian ........................................................................ 24
3.2.1 Prinsip Pengujian ............................................................... 24
3.2.2 Metode Pengujian .............................................................. 24
3.2.3 Prosedur Pengujian ............................................................ 24
3.2.4 Miniaturisasi Prosedur ....................................................... 27
3.2.4.1 Larutan Baku Tunggal ......................................... 27
3.2.4.2 Larutan Kurva Kalibrasi Baku ............................. 27
3.2.5 Langkah Kerja………………………………………….. .. 29
3.3 Alat dan Bahan ............................................................................... 31
3.3.1 Alat ..................................................................................... 31
3.3.2 Bahan ................................................................................. 32
3.3.2.1 Data Sampel ......................................................... 32
iii
3.3.2.2 Data Baku ............................................................ 32
3.3.2.3 Pelarut/Pereaksi ................................................... 32
3.4 Rumus Perhitungan ........................................................................ 33
3.4.1 Kadar Oksibenzon dalam Sampel ...................................... 33
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ......................................................... 34
4.1 Hasil Pengujian ............................................................................... 34
4.1.1 Data Uji Kesesuaian Sistem ............................................... 34
4.1.2 Data Penimbangan ............................................................. 35
4.1.3 Data Waktu Retensi dan Luas Area Sampel ...................... 36
4.1.4 Data Waktu Retensi dan Luas Area Baku .......................... 36
4.1.5 Perhitungan Uji Kesesuaian Sistem ................................... 37
4.1.6 Perhitungan Kurva Kalibrasi .............................................. 38
4.1.7 Kurva Baku Seri Oksibenzon ............................................. 39
4.1.8 Kadar Oksibenzon dalam Sampel ...................................... 39
4.1.9 Hasil Pengujian .................................................................. 40
4.2 Persyaratan ..................................................................................... 41
4.3 Pembahasan ................................................................................... 41
BAB V SIMPULAN DAN SARAN ................................................................. 43
5.1 Simpulan ........................................................................................ 43
5.2 Saran .............................................................................................. 43
DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................ 45
LAMPIRAN ....................................................................................................... 46
iv
DAFTAR TABEL
No Nama Tabel Halaman

1. Data Waktu Retensi dan Luas Area Uji Kesesuaian Sistem...................... 34
2. Data Faktor Ikutan dan Efisiensi Kolom ................................................... 35
3. Data Penimbangan Baku Oksibenzon ....................................................... 35
4. Data Penimbangan Sampel ........................................................................ 36
5. Data Waktu Retensi dan Luas Area Sampel .............................................. 36
6. Data Waktu Retensi dan Luas Area Baku Oksibenzon ............................. 36
7. Perhitungan Regresi ................................................................................... 38
v
DAFTAR GAMBAR
No Nama Gambar Halaman

1. Anatomi Kulit ........................................................................................... 8
2. Lapisan Epidermis ..................................................................................... 8
3. Lapisan Dermis ......................................................................................... 10
4. Lapisan Subkutis........................................................................................ 11
5. Rumus Bangun Oksibenzon ...................................................................... 15
6. Alat Kromatografi Cair Kinerja Tinggi ..................................................... 20
7. Kurva Baku Seri Oksibenzon .................................................................... 39
vi
DAFTAR LAMPIRAN
No Nama Lampiran Halaman

1. Gambar Seperangkat Alat KCKT .............................................................. 46
2. Sertifikat Baku Pem banding Oksibenzon ................................................. 47
3. Data Kurva Kalibrasi Oksibenzon ............................................................. 48
4. Data Hasil Penetapan Kadar Oksibenzon .................................................. 49
5. Data Hasil RSD dengan Alat KCKT ........................................................ 50
vii
BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Menurut Peraturan Kepala Badan Pengawas Obat dan Makanan Republik

Indonesia Nomor 18 Tahun 2015 yang dimaksud kosmetika adalah bahan atau
sediaan yang dimaksudkan untuk digunakan pada bagian luar tubuh manusia
(epidermis, rambut, kuku, bibir dan organ genital bagian luar) atau gigi dan
membran mukosa mulut terutama untuk membersihkan, mewangikan, mengubah
penampilan dan atau memperbaiki bau badan atau melindungi atau memelihara
tubuh pada kondisi baik.
Tidak dapat dipungkiri lagi bahwa kosmetik tidak lagi merupakan kebutuhan
sekunder, tetapi sudah menjadi kebutuhan pokok bagi setiap orang. Berbagai jenis
kosmetik yang banyak dipasaran, mulai dari kosmetik pembersih, pelembab,
pelindung, riasan (dekoratif atau make up) sampai pengobatan mempunyai tujuan
yang sama, yaitu untuk kebersihan pribadi, meningkatkan daya tarik melalui make
up, meningkatkan rasa percaya diri dan perasaan tenang, melindungi kulit dan
rambut dari kerusakan sinar UV, polusi dan faktor lingkungan yang lain,
mencegah penuaan, dan secara umum membantu seseorang lebih menikmati dan
menghargai hidup. (Traggono dan Latifah, 2007:7)
Jenis kosmetik pelindung kulit selain fungsi utamanya adalah untuk
mencegah kulit kering, penggunaan produk SPF (Sun Protective Factor) ini juga
untuk melindungi kulit dari sinar matahari. Salah satunya adalah penggunaan krim
tabir surya karena fungsi tabir surya adalah untuk melindungi kulit dari radiasi
ultraviolet dalam sinar matahari, yang dapat menimbulkan berbagai kerusakan
pada kulit, seperti penuaan dini, kekeringan, hiperpigmentasi, sampai kanker kulit.
Sinar matahari, di satu pihak, sangat diperlukan oleh makhluk hidup sebagai
sumber energi dan penyehat kulit dan tulang, misalnya dalam pembentukkan
vitamin D dari pro-vitamin D yang mencegah penyakit polio dan riketsia, tetapi di
lain pihak sinar matahari mengandung sinar ultraviolet yang membahayakan kulit.
Sinar matahari terdiri atas sinar UV A, sinar UV B, dan sinar UV C.
1
2
Terpapar sinar UV A dan UV B terlalu lama dapat mengakibatkan kulit

terasa perih akibat terbakar, lalu muncul flek-flek hitam pada wajah. Sinar UV
juga mengganggu regenerasi sel, merusak kolagen, dan elastisitas kulit. Tak heran
bila kulit yang sering terpanggang sinar matahari terlihat lebih tua, karena
munculnya kerutan-kerutan pada kulit. Dampak paling parah dari paparan sinar
UV B adalah memicu penyakit kanker pada kulit (Muliyawan dan Suriana,
2013:275).
Oleh karena itu, krim tabir surya (Sunscreen) ini dirancang untuk
melindungi kulit dari paparan sinar matahari yang dapat membahayakan kulit.
Krim ini kini dilengkapi dengan bahan-bahan aktif yang berperan sebagai
penangkal sinar UV. Oksibenzon dan oktil metoksisinamat merupakan senyawa
anti UV A dan UV B yang paling umum digunakan. Namun pemakaian
oksibenzon dapat menyebabkan photoallergy dan photoxic (Tranggono dan
Latifah, 2007:83).
Bahan kosmetik harus memenuhi persyaratan mutu sebagaimana tercantum
dalam Kodeks Kosmetika Indonesia atau standar lain yang diakui atau sesuai
ketentuan peraturan perundang-undangan, seperti yang dicantumkan dalam
Peraturan Kepala Badan Pengawas Obat dan Makanan No. 18 Tahun 2015 tentang
Persyaratan Teknis Bahan Kosmetika dengan batas kadar maksimum dalam
produk akhir dan persyaratan lainnya. Salah satunya adalah oksibenzon dengan
persyaratan batas kadar maksimum bahan aktif dalam produk akhir adalah 10%.
Standar tersebut harus dipenuhi oleh produk kosmetik, salah satunya sediaan
krim dengan zat aktif oksibenzon. Untuk itu dilakukan penetapan kadar secara
kromatografi cair kinerja tinggi untuk bahan yang mempunyai persyaratan batas
kadar maksimum.
1.2 Perumusan Masalah

Mengetahui apakah sampel yang diuji secara Kromatogafi Cair Kinerja
Tinggi memenuhi persyaratan Peraturan Kepala Badan Pengawas Obat dan
Makanan Republik Indonesia Nomor 18 Tahun 2015 Tentang Persyaratan Teknis
Bahan Kosmetika bahwa batas kadar maksimum bahan aktif oksibenzon dalam
produk akhir sebesar 10%.
3
1.3 Pembatasan Masalah

Dalam Karya Tulis Ilmiah ini, penulis membatasi pengujian sampel hanya
pada Penetapan Kadar Oksibenzon dalam Sediaan Krim Tabir Surya secara
Kromatografi Cair Kinerja Tinggi.
1.4 Tujuan
1.4.1 Tujuan Umum

Pengujian sediaan krim yang mengandung oksibenzon bertujuan untuk
mendapatkan informasi mengenai kadar oksibenzon dalam kosmetika sediaan
krim tersebut apakah memenuhi syarat sesuai dengan peraturan Kepala Badan
Pengawas Obat dan Makanan Republik Indonesia Nomor 18 Tahun 2015 Tentang
Persyaratan Teknis Bahan Kosmetika atau tidak.
1.4.2 Tujuan Khusus

Pengujian ini bertujuan untuk melakukan pemisahan zat aktif dan
menetapkan kadar oksibenzon dalam sediaan krim dengan menggunakan metode
Kromatografi Cair Kinerja Tinggi .
1.5 Manfaat
1.5.1 Bagi Mahasiswa

Karya Tulis Ilmiah ini diharapkan dapat menambah pengetahuan,
pengalaman dan wawasan penulis dalam bidang pengujian kosmetika serta dalam
memilih jenis sediaan kosmetika khususnya dalam sediaan krim tabir surya yang
mengandung oksibenzon sesuai dengan persyaratan yang telah ditetapkan.
1.5.2 Bagi Masyarakat

Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi bagi pembaca
khususnya dan masyarakat pada umumnya, mengenai krim tabir surya yang
mengandung oksibenzon sehingga dapat memilih krim tabir surya yang baik dan
aman untuk digunakan dalam pemakaian sehari-hari.
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Landasan Teori
2.1.1 Kosmetika
Berdasarkan Peraturan Kepala Badan Pengawas Obat dan Makanan

Republik Indonesia Nomor 18 Tahun 2015 tentang Persyaratan Teknis Bahan
Kosmetika yang dimaksud dengan kosmetika adalah bahan atau sediaan yang
dimaksudkan untuk digunakan pada bagian luar tubuh manusia (epidermis,
rambut, kuku, bibir, dan organ genital bagian luar) atau gigi dan membran mukosa
mulut terutama untuk membersihkan, mewangikan, mengubah penampilan
dan/atau memperbaiki bau badan atau melindungi atau memelihara tubuh pada
kondisi baik.
2.1.1.1 Penggolongan dan Kategori Kosmetik

Menurut Peraturan Menteri Kesehatan RI, kosmetik dibagi ke dalam 13
kelompok:
1. Preparat untuk bayi, misalnya minyak bayi, bedak bayi.

2. Preparat untuk mandi, misalnya sabun mandi, bath capsule.
3. Preparat untuk mata, misalnya mascara, eye-shadow.
4. Preparat wangi-wangian, misalnya parfum, toilet water.
5. Preparat untuk rambut, misalnya cat rambut, hair spray.
6. Preparat pewarna rambut, misalnya cat rambut.
7. Preparat make-up (kecuali mata), misalnya bedak, lipstick.
8. Preparat untuk kebersihan mulut, misalnya pasta gigi, mouth washes.
9. Preparat untuk kebersihan badan, misalnya deodorant.
10. Preparat kuku, misalnya cat kuku, losion kuku.
11. Preparat perawatan kulit, misalnya pembersih, pelembab, pelindung.
12. Preparat cukur, misalnya sabun cukur.
13. Preparat untuk suntan dan sunscreen, misalnya sunscreen foundation.
Penggolongan kosmetik menurut Tranggono dan Latifah (2007:7) dibagi
berdasarkan sifat dan cara pembuatannya dan berdasarkan kegunaannya bagi kulit
4
5
1). Penggolongan menurut sifat dan cara pembuatan:

a) Kosmetik modern, diramu dari bahan kimia dan diolah secara modern
(termasuk antaranya adalah cosmedics).
b) Kosmetik tradisional:
1) Betul-betul tradisional, misalnya mangir, lulur, yang dibuat dari bahan
alam dan diolah menurut resep dan cara yang turun-temurun.
2) Semi tradisional, diolah secara modern dan diberi bahan pengawet
agar tahan lama.
3) Hanya namanya yang tradisional, tanpa komponen yang benar-benar
tradisional dan diberi warna yang menyerupai bahan tradisional.
2). Penggolongan menurut kegunaannya bagi kulit
a) Kosmetik perawatan kulit (skin-care cosmetics).
Jenis ini perlu untuk merawat kebersihan dan kesehatan kulit. Termasuk di
dalamnya:
1) Kosmetik untuk membersihkan kulit (cleanser): sabun, cleansing
cream, cleansing milk, dan penyegar kulit (freshener).
2) Kosmetik untuk melembabkan kulit (moisturizer), misalnya
moisturizing cream, night cream, anti wrinkle cream.
3) Kosmetik pelindung kulit, misalnya sunscreen cream dan sunscreen
foundation, sun block cream/lotion.
4) Kosmetik untuk menipiskan atau mengampelas kulit (peeling),
misalnya scrub cream yang berisi butiran-butiran halus yang berfungsi
sebagai pengampelas (abrasiver).
b) Kosmetik riasan (dekoratif atau make-up)
Jenis ini diperlukan untuk merias dan menutup cacat pada kulit sehingga
menghasilkan penampilan yang lebih menarik serta menimbulkan efek
psikologis yang baik, seperti percaya diri (self confidence). Dalam
kosmetik riasan, peran zat pewarna dan zat pewangi sangat besar.
2.1.1.2 Tujuan Penggunaan Kosmetik

Rostamailis (2005:9), secara umum tujuan penggunaan kosmetik adalah
untuk memelihara dan merawat kecantikan kulit secara teratur. Dengan
6
demikian, maka tujuan dari penggunaan kosmetik dapat dikelompokkan sebagai

berikut:
a. Melindungi lapisan kulit dari pengaruh-pengaruh luar yang merusak.
b. Mencegah lapisan terluar kulit dari kekeringan.
c. Mencegah kulit cepat kering dan berkeriput, karena kosmetik menembus ke
bawah lapisan luar dan memasukkan bahan-bahan aktif ke lapisan dalam.
d. Melekat di atas permukaan kulit untuk mengubah warna atau rona daerah kulit
tertentu.
e. Memperbaiki kondisi kulit misalnya kulit kering, normal, berminyak.
f. Menjaga kulit tetap kencang.
g. Mengubah penampilan atau mempercantik.
2.1.1.3 Manfaat Kosmetik

Manfaat kosmetik menurut Wasitaatmadja (1997:63) adalah untuk
pemeliharaan dan perawatan kulit. Pemeliharaan berarti usaha pencegahan
terhadap timbulnya kelainan-kelainan atau penyebab dari kelainan tersebut. Usaha
perawatan berarti mempertahankan keadaan yang sekarang baik agar tidak
berubah menjadi buruk. Kosmetik pemeliharaan dan perawatan terdiri dari:
1. Pembersih
Kulit harus dibersihkan karena sebagai organ tubuh yang berada paling luar
(pembungkus), kulit terpapar pada setiap unsur yang ada di lingkungan luar
yang dapat merusak kulit. Kosmetik pembersih dapat melakukan fungsi
pembersihan kulit dengan baik.
2. Pelembab
Pada kulit kering terjadi pada keadaan kelembaban udara sangat rendah dan
penguapan air dari kulit sangat tinggi. Kosmetik pelembab ini dapat
mengurangi kekeringan kulit dan mengurangi penguapan kulit dengan cara
menutupinya.
3. Pelindung
Pada keadaan tertentu, kulit memerlukan perlindungan tambahan. Pertama,
pada polusi yang bersifat iritan sangat kuat. Kedua, pada paparan sinar
matahari yang mengandung sinar ultra violet secara langsung dan lama.
Perlindungan kulit dapat dilakukan menggunakan kosmetik tabir surya.
7
4. Penipisan
Penipisan kulit kadang-kadang perlu dilakukan pada keadaan kulit menebal
dan agak kasar, misalnya pada gangguan keratinisasi kulit. Penipisan kulit
dapat dilakukan oleh penipis yang biasanya mengandung zat dengan partikel
besar.
2.1.1.4 Kosmetik Pelindung

Kulit harus dilindungi dari paparan sinar matahari, karena paparan sinar
ultra violet pada kulit menyebabkan penebalan lapisan tanduk, menimbulkan
keriput-keriput, dan menambah pigmentasi. Untuk mencegah atau menghindari
pengaruh buruk dari sinar ultra violet, kulit harus diberi pelindung yang
menghilangkan efek sinar tersebut, dengan memantulkannya (seng oksida,
titanium dioksida) atau menyerapnya (senyawa-senyawa kimia, tannin, asam para
amino benzoat, ester asam salisilat)
Menurut Tranggono dan Latifah (2007:81). Kosmetik pelindung adalah
kosmetik yang dikenakan dengan tujuan melindungi kulit dari berbagai pengaruh
lingkungan yang merugikan kulit. Menurut tujuan spesifiknya, masing-masing
kosmetik pelindung dapat dibagi menurut kelompok berikut:
1. Preparat yang melindungi kulit dari bahan-bahan kimia.
2. Preparat untuk melindungi kulit dari debu, kotoran, dan lain-lain.
3. Preparat untuk melindungi kulit dari benda fisik yang membahayakan kulit
(sinar ultraviolet, panas)
4. Preparat untuk melindungi kulit dari luka secara mekanis
5. Preparat untuk mengusir serangga agar tidak mendekati kulit.
2.1.2 Kulit
Kulit merupakan “selimut” yang menutupi permukaan tubuh dan memiliki fungsi
utama sebagai pelindung dari berbagai macam gangguan dan rangsangan luar. Fungsi
perlindungan kulit ini terjadi melalui sejumlah mekanisme biologis, seperti pembentukan
lapisan tanduk secara terus-menerus (keratinisasi dan pelepasan sel-sel yang sudah mati),
respirasi dan pengaturan suhu tubuh, produksi sebum dan keringat, dan pembentukan
pigmen melanin untuk melindungi kulit dari bahaya sinar ultraviolet matahari, sebagai
peraba dan perasa, serta pertahanan terhadap tekanan dan infeksi dari luar. Selain itu kulit
merupakan suatu kelenjar holokrin yang besar (Tranggono dan Latifah, 2007:11).
8
2.1.2.1 Anatomi Kulit

Kulit adalah organ tubuh yang terletak paling luar dan membatasinya dari
lingkungan hidup manusia. Kulit merupakan organ yang esensial dan vital serta
merupakan cermin kesehatan dan kehidupan. Kulit juga sangat kompleks, elastis dan
sensitif, bervariasi pada keadaan iklim, umur, ras dan juga tergantung pada lokasi tubuh.
Kulit yang elastis dan longgar terdapat pada kelopak mata dan bibir, sedangkan
kulit yang tebal dan tegang terdapat pada telapak kaki dan tangan dewasa. Kulit yang tipis
terdapat pada wajah, yang lembut pada leher dan badan, dan yang berambut kasar
terdapat pada kepala. Secara hispatologis kulit tersusun atas tiga lapisan utama yaitu
lapisan epidermis atau kutikel, lapisan dermis (korium, kutis vera, true skin), dan lapisan
subkutis (hipodermis).
Gambar 1. Anatomi Kulit
(Rostamailis, 2005:18)
1. Lapisan Epidermis
Gambar 2. Lapisan Epidermis

(Graham-Brown, 2005:90)
9
Menurut Tranggono dan Latifah (2007:11) , epidermis merupakan bagian

tubuh yang menarik karena kosmetik dipakai pada bagian epidermis. Meskipun
ada beberapa jenis kosmetik yang digunakan hingga ke dermis, namun tetap
penampilan epidermis yang menjadi tujuan utama. Lapisan epidermis ini terdiri
atas stratum korneum, stratum lusidum, stratum granulosum, stratum spinosum,
dan stratum basalis.
1. Lapisan Tanduk (stratum corneum)
Terdiri atas beberapa lapisan sel yang pipih, mati, tidak memiliki inti, tidak
mengalami proses metabolisme, tidak berwarna, dan sangat sedikit mengandung air.
Sebagian besar terdiri atas keratin, jenis protein yang tidak larut dalam air, dan
sangat resisten terhadap bahan-bahan kimia. Hal ini berkaitan dengan fungsi kulit
untuk memproteksi kulit dari pengaruh luar. Secara alami, sel-sel yang sudah mati di
permukaan kulit akan melepaskan diri untuk beregenerasi. Permukaan stratum
corneum dilapisi oleh suatu lapisan pelindung lembab tipis yang bersifat asam,
disebut Mantel Asam kulit.
2. Lapisan Jernih (stratum lucidum)
Terletak tepat dibawah stratum corneum, merupakan lapisan yang tipis,
jernih, mengandung eleiden, sangat tampak jelas pada telapak tangan dan
telapak kaki. Antara stratum lucidum dan stratum granulosum terdapat
lapisan keratin tipis yang disebut rein’s barrier (Szakall) yang tidak bisa
ditembus (impermeable).
3. Lapisan Berbutir-butir (stratum granulosum)
Tersusun oleh sel-sel keratinosit yang berbentuk polygonal, berbutir kasar,
berinti mengkerut. Stoughton menemukan bahwa di dalam butir keratohyalin
itu terdapat bahan logam, khususnya tembaga yang menjadi katalisator proses
pertandukan kulit.
4. Lapisan Malphigi (stratum spinosum atau malphigi layer)
Memiliki sel yang berbentuk kubus dan seperti berduri. Intinya besar dan
oval. Setiap sel berisi filament-filamen kecil yang terdiri atas serabut protein.
Cairan limfe masih ditemukan mengitari sel-sel dalam lapisan malphigi ini.
5. Lapisan Basal (stratum germinativum atau membran basalis)
Adalah lapisan terbawah epidermis. Terdapat sel-sel melanosit, yaitu sel yang
10
tidak mengalami keratinisasi dan fungsinya hanya membentuk pigmen

melanin dan memberikannya kepada sel-sel keratinosit melalui dendrit-
dendritnya.
2. Lapisan Dermis
Gambar 3. Lapisan Dermis

Dermis adalah lapisan kulit yang berada di bawah epidermis. Lapisan ini
bertanggung jawab terhadap elastisitas dan kehalusan kulit. Selain itu, lapisan dermis juga
berperan menyuplai nutrisi bagi epidermis (Muliyawan dan Suriana, 2013:138). Di dalam
dermis terdapat adneksa-adneksa kulit seperti folikel rambut, papilla rambut, kelenjar
keringat, saluran keringat, kelenjar sebasea, otot penegak rambut, ujung pembuluh darah
dan ujung saraf, juga sebagai serabut lemak yang terdapat pada lapisan lemak bawah kulit
(subkulit/hipodermis) (Tranggono dan Latifah, 2007: 11). Menurut Wasitaatmadja
(1997:3), lapisan ini terdiri atas pars papilaris dan pars retikularis.
a. Pars papilaris
Merupakan bagian yang menonjol ke dalam epidermis, berisi ujung serabut
saraf dan pembuluh darah.
b. Pars retikularis
Merupakan bagian bawah dermis yang berhubungan dengan subkutis, terdiri atas
serabut penunjang kolagen, elastin dan retikulin. Dasar (matriks) lapisan ini terdiri atas
cairan kental asam hialuronat dan kondroitin sulfat dan sel- sel fibroblas. Kolagen
muda bersifat lentur namun dengan bertambahnya umur menjadi stabil dan keras.
Retikulin mirip dengan kolagen muda, sedangkan elastin biasanya bergelombang,
berbentuk amorf, mudah mengembang dan elastis.
11
3. Lapis Subkutis
Gambar 4. Lapisan Subkutis

Lapisan ini merupakan kelanjutan dermis, terdiri atas jaringan ikat longgar
berisi sel-sel lemak di dalamnya. Sel lemak merupakan sel bulat, besar, dengan
inti terdesak ke pinggir karena sitoplasma lemak yang bertambah. Sel-sel ini
membentuk kelompok yang dipisahkan satu dengan lainnya oleh trabekula yang
fibrosa. Lapisan sel lemak disebut panikulus adiposus, berfungsi sebagai cadangan
makanan. Di lapisan ini terdapat ujung-ujung saraf tepi, pembuluh darah dan
saluran getah bening. Lapisan lemak ini juga berfungsi sebagai bantalan
(Wasitaatmadja, 1997:3).
2.1.2.2 Fungsi Kulit

Menurut Muliyawan dan Suriana (2013:138) kulit memiliki berbagai
fungsi di dalam tubuh, diantaranya adalah :
1. Proteksi
Kulit melindungi organ-organ tubuh dari pengaruh lingkungan luar. Misalnya sinar
matahari, zat-zat kimia, perubahan suhu, dan lain-lain.
2. Thermoregulasi (menjaga keseimbangan temperatur tubuh)
Kulit akan menjaga suhu tubuh agar tetap optimal. Keringat yang keluar saat suhu
udara panas berfungsi untuk mendinginkan tubuh. Keluarnya keringat adalah salah satu
mekanisme tubuh untuk menjaga stabilitas temperatur.
3. Organ Sekresi
Kulit berfungsi sebagai organ untuk melepaskan kelebihan air dan zat-zat lainnya,
seperti NaCl, ammonia, dan lain-lain.
4. Persepsi sensoris (menerima rangsangan)
Sebagai alat perasa, kulit akan bereaksi pada perbedaan suhu, sentuhan, rasa
12
sakit, dan tekanan melalui beberapa reseptor seperti benda meissner, diskus
merkell dan korpuskulum golgi sebagai reseptor raba, korpuskulum pacini sebagai
reseptor tekanan, korpuskulum ruffini dan benda krauss sebagai reseptor suhu dan
nervus and plate sebagai reseptor nyeri.
5. Absorpsi (penyerapan)
Beberapa zat tertentu bisa diserap masuk ke dalam tubuh melalui dua jalur
yaitu epidermis dan melalui kelenjar sebase. Material yang mudah larut dalam
lemak lebih mudah diabsorpsi dibandingkan air dan material yang larut dalam air.
2.1.2.3 Jenis-Jenis Kulit
Secara umum, kulit terbagi menjadi tiga jenis, yaitu kulit kering, kulit normal,
dan kulit berminyak. Menurut Muliyawan dan Suriana (2013:141) pembagian ini
didasarkan pada kandungan air dan minyak yang terdapat pada kulit.
a. Kulit kering adalah kulit dengan kadar air kurang atau rendah.
b. Kulit normal adalah kulit yang memiliki kadar air tinggi dan kadar minyak
rendah sampai normal.
c. Kulit berminyak adalah kulit yang memiliki kandungan air dan minyak yang
tinggi.
d. Kulit campuran adalah kulit yang dalam dunia kosmetik dikenal juga dengan
istilah kulit kombinasi.
2.1.2.4 Pengaruh Kosmetik terhadap Kulit

Menurut Rostamailis (2005:63-71) pengaruh kosmetik terhadap kulit dibagi
atas:
1. Pengaruh positif terhadap kulit
a. Melindungi dari hawa dingin, panas, sinar matahari yang berlebihan dan
kelembaban udara yang terlalu rendah serta terhadap goresan/polesan
bahan-bahan make up yang khusus, seperti make up punggung (karakter),
fantasi, dan sebagainya.
b. Menjaga kondisi kulit agar tetap lembut dan segar, tentu kulit akan terlihat
awet muda (tidak kasar) dan jelas tidak menimbulkan keriput-keriput atau
goresan-goresan ketuaan.
13
c. Memperindah, misalnya membuat bentuk muka yang terlalu bulat menjadi

agak lonjong, warna kulit muka yang hitam terlihat sedikit putih, dan
sebagainya.
2. Pengaruh negatif terhadap kulit
a. Sinar ultra violet yang ada dalam sinar matahari juga dapat menyebabkan
kulit terbakar, tua sebelum waktunya serta noda-noda hitam
(hiperpigmentasi) bahkan bisa berakibat menjadi kanker kulit.
b. Pergantian dari hawa panas di luar rumah ke ruangan yang ber AC, akan
menimbulkan kekeringan dan keriput-keriput pada kulit karena udara
dingin tetapi kering.
c. Bila terlalu lama berjemur di sinar matahari akan membahayakan kulit dan
kesehatan, karena sinar UV-B yang ada dalam sinar matahari dapat
menembus sampai lapisan epidermis.
2.1.3 Tabir Surya

Paparan sinar ultraviolet secara langsung pada kulit dapat menimbulkan
berbagai kelainan pada kulit, antara lain kemerahan, noda hitam, jerawat, penuaan
dini, keriput, kekeringan, hingga kanker kulit. (Muliyawan dan Suriana,
2013:271)
Tabir Surya adalah produk perawatan kulit yang berfungsi melindungi kulit
dari sinar ultraviolet. Produk ini mengandung bahan aktif yang mampu menyerap
UV-B dan meneruskan UV-A ke dalam kulit serta cepat mencoklatkan kulit.
(Muliyawan dan Suriana, 2013: 272).
Sinar ultraviolet (UV) terdiri atas sinar Ultraviolet A (UV-A) yang
memiliki panjang gelombang 320-400 nm, Ultraviolet B (UV-B) yang memiliki
panjang gelombang 280-320 nm, dan Ultraviolet C (UV-C) yang memiliki
panjang gelombang 200-280 nm. (Goeswin, 2015:95)
Sinar UV-C memiliki panjang gelombang paling pendek, tetapi memiliki
energi serta daya perusak yang paling besar. Untunglah UV-C tidak sampai ke
bumi karena diserap oleh lapisan ozon di angkasa luar. (Tranggono dan
Latifah:82)
Menurut Wasitaatmadja (119-120), ada 2 macam tabir surya:
14
1. Tabir surya kimia, misalnya PABA, PABA ester, benzofenon, salisilat dan
antranilat, yang dapat mengabsorpsi energi radiasi. Tabir surya kimia
mengabsorpsi hamper 95% radiasi sinar UV-B yang dapat menyebabkan
sunburn (eritema dan kerut) namun hampir tidak menghalangi UV-A
penyebab direct tanning, kerusakan sel elastin, actinic skin damage dan
timbulnya kanker kulit.
2. Tabir surya fisik, misalnya titanium dioksida, Mg silikat, seng oksida, red
petrolatum dan kaolin, yang dapat memantulkan sinar. Tabir surya fisik
dapat menahan UV-A maupun UV-B.
Menurut Tranggono dan Latifah (2007:82-83) ada dua macam cara untuk melindungi
kulit dari bahaya radiasi sinar UV, yaitu:
a. Perlindungan secara fisik

Misalnya memakai payung, topi lebar, baju lengan panjang, celana
panjang, serta pemakaian bahan-bahan kimia yang melindungi kulit dengan
jalan memantulkan sinar yang mengenai kulit, misalnya Titan dioksida, Zinc
oksida, kaolin, kalsium karbonat, magnesium karbonat, talcum, silisium
dioksida dan bahan-bahan lainnya sejenis yang sering dimasukkan dalam
dasar bedak (foundation) atau bedak.
b. Perlindungan secara kimiawi
Perlindungan secara kimiawi ini dapat dilakukan dengan memakai bahan
kimia. Ada dua kelompok bahan kimia ini:
1. Bahan yang menimbulkan dan mempercepat proses penggelapan kulit
(tanning), misalnya dioxy acetone dan 8-methoxy psoralen, yang
dikonsumsi 2 jam sebelum berjemur. Bahan ini mempercepat
pembentukkan pigmen melanin di permukaan kulit.
2. Bahan yang menyerap UV-B tetapi meneruskan UV-A ke dalam kulit,
misalnya Para Amino Benzoic Acid (PABA) dan derivatnya, Cinnamates,
Anthranilates, Benzophenon, Digalloyl trioleate, dan petroleum veteriner
merah. PABA dan sejumlah bahan tesebut bersifat photosensitizer, yaitu
jika terkena sinar matahari terik dapat menimbulkan berbagai reaksi
negative pada kulit, seperti photoallergy, phototoxic, disamping
pencoklatan kulit (tanning) yang tidak disukai orang Asia.
15
2.1.4 Krim
Berdasarkan Farmakope Indonesia Edisi V (2014:51), krim adalah bentuk
sediaan setengah padat mengandung satu atau lebih bahan obat terlarut atau
terdispersi dalam bahan dasar yang sesuai. Istilah ini secara tradisional telah
digunakan untuk sediaan setengah padat yang mempunyai konsistensi relatif cair
diformulasi sebagai emulsi air dalam minyak atau minyak dalam air. Sekarang ini
batas tersebut lebih diarahkan untuk produk yang terdiri dari emulsi minyak
dalam air, yang dapat dicuci dengan air dan lebih ditujukan untuk penggunaan
kosmetika dan estetika.
2.1.5 Oksibenzon
O
HO O
Gambar 5. Rumus Bangun Oksibenzon

(Kodeks Kosmetika Indonesia, 1993:351)
Nama Lain : Benzophenon-3

Rumus Kimia : 2-hidroksi-4-metoksibenzofenon
Rumus Molekul : C14H12O3
Berat Molekul : 228,25 g/mol
Deskripsi : Serbuk; warna putih atau hampir putih
Kelarutan : Mudah larut dalam etanol (95%) P dan toluen
P; praktis tidak larut dalam air
Suhu Beku : Tidak lebih rendah dari 62,00
Susut Pengeringan : Tidak lebih dari 2,0%; pengeringan dilakukan
pada suhu 400 dalam vakum selama 2 jam
Penyimpanan : Dalam wadah tertutup rapat, terlindung dari
cahaya
Kegunaan dan Penggunaan : Tabir surya
(Kodeks Kosmetika Indonesia, 1993:351).

16
2.1.6 Kromatografi
2.1.6.1 Pengertian Kromatografi

Kromatografi adalah metode pemisahan secara fisika dimana komponen-
komponen yang akan dipisahkan terbagi diantara dua fase, yang satu adalah fase
diam sementara yang lain adalah fase gerak yang bergerak pada arah tertentu
(Gandjar, Ibnu Gholib dan Abdul Rohman, 2007:286).
2.1.6.2 Pembagian Kromatografi

Kromatografi dapat dibedakan atas berbagai macam tergantung pada
pengelompokkannya.
Berdasarkan pada mekanisme pemisahannya, kromatografi dibedakan menjadi:
a. Kromatografi adsorbsi
b. Kromatografi partisi
c. Kromatografi pasangan ion
d. Kromatografi penukar ion
e. Kromatografi eksklusi ukuran
Berdasarkan pada alat yang digunakan, kromatografi dapat dibagi atas:
a. Kromatografi kertas
b. Kromatografi lapis tipis
c. Kromatografi cair kinerja tinggi
d. Kromatografi gas
2.1.7 Kromatografi Cair Kinerja Tinggi

Kromatografi Cair Kinerja Tinggi atau biasa juga disebut dengan HPLC.
HPLC adalah istilah yang umum dipakai di dunia internasional yang mengandung
dua arti yaitu High Performance Liquid Chromatography atau High Pressure
Liquid Chromatography. Namun, beberapa ilmuwan Indonesia mempopulerkan
istilah KCKT singkatan dari Kromatografi Cair Kinerja Tinggi sebagai pengganti
istilah HPLC (High Performance Liquid Chromatography atau High Pressure
Liquid Chromatography) (Mulja, Muhammad dan Suharman, 1995:236).
KCKT merupakan teknik pemisahan yang diterima secara luas untuk
analisis dan pemurnian senyawa tertentu dalam suatu sampel. Metode KCKT
17
tidak menyebabkan destruktif dan dapat digunakan baik untuk analisis kualitatif
maupun kuantitatif (Gandjar, Ibnu Gholib dan Abdul Rohman, 2007:378).
Terdapat dua bentuk kromatografi partisi yaitu fase normal dan fase
terbalik. Fase normal adalah suatu metode dimana fase diam lebih polar daripada
fase gerak. Pada metode ini, zat yang sifatnya kurang polar akan keluar terlebih
dahulu dari kolom, diikuti oleh zat yang sifatnya makin polar. Fase normal ini
baik untuk pemisahan campuran zat yang merupakan isomer dan zat-zat yang
mempunyai kelarutan terbatas dalam air (Jhonson, E.L dan Stevenson R,
1991:395).
Fase terbalik adalah suatu metode dimana fase gerak lebih polar
dibandingkan fase diamnya. Pada metode ini, zat yang sifatnya paling polar akan
keluar terlebih dahulu dari kolom, diikuti oleh zat yang sifatnya kurang polar.
Pasangan pelarut yang paling lazim dipakai sebagai fase gerak dalam fase terbalik
ini adalah campuran air dan metanol atau campuran air dan asetonitril (Jhonson,
E.L dan Stevenson R, 1991:399).
2.1.7.1 Prinsip
Kromatografi cair merupakan teknik pemisahan berdasarkan fase diam
berupa padatan dan fase gerak berupa cairan, teknik dimana solut atau zat-zat
terlarut terpisah oleh perbedaan kecepatan elusi yang melewati suatu kolom
kromatografi (Gandjar, Ibnu Gholib dan Abdul Rohman, 2007:418).
Prinsip kerja alat KCKT adalah fase gerak didorong melalui kolom dengan
tekanan pompa dan laju alir yang sesuai. Setelah sistem mencapai kesetimbangan,
cuplikan yang dilarutkan di dalam pelarut disuntikkan ke dalam sistem, biasanya
melalui katup. Linarut terbawa ke dalam kolom, kemudian dipisahkan dan keluar
melalui detektor. Hasil detektor dibaca dan pada grafik yang dihasilkan dapat
dipakai untuk memperoleh data analitik (Gritter, Roy J, James dan Arthur,
1991:12).
2.1.7.2 Fase Diam

Pemisahan dicapai melalui partisi, adsorpsi, atau proses pertukaran ion
tergantung jenis fase diam yang digunakan. Fase diam yang umumnya digunakan
adalah silika yang dimodifikasi atau butiran polimerik. Butiran dibuat dengan
penambahan hidrokarbon rantai panjang. Jenis fase diam yang diperlukan dalam
18
suatu pengujian dinyatakan dalam masing-masing monografi dan ditunjukkan

oleh tanda “L”. Ukuran dari partikel sering disebutkan dalam monografi
(Farmakope Indonesia Edisi V, 2014:1535).
2.1.7.3 Fase Gerak

Fase gerak atau eluen biasanya terdiri atas campuran pelarut yang dapat
bercampur yang secara keseluruhan berperan dalam daya elusi dan resolusi yang
ditentukan oleh polaritas keseluruhan pelarut, polaritas fase diam, dan sifat
komponen-komponen sampel. Fase gerak sebelum digunakan harus dilakukan
degassing (penghilangan gas) yang ada pada fase gerak, sebab adanya gas akan
berkumpul dengan komponen lain terutama pada pompa dan detektor sehingga
akan mengganggu analisis. Untuk pembuatan fase gerak lebih baik menggunakan
pelarut, buffer, dan reagen dengan kemurnian yang sangat tinggi dan berderajat
KCKT (HPLC grade). Sebelum digunakan fase gerak harus disaring terlebih
dahulu untuk menghindari partikel-partikel kecil yang dapat mengakibatkan
kekosongan pada kolom sehingga proses pemisahan terganggu (Gandjar, Ibnu
Gholib dan Abdul Rohman, 2007:171).
2.1.7.4 Uji Kesesuaian Sistem

Menurut Rohman, Abdul (2016:109) uji kesesuaian sistem dapat
didefinisikan sebagai serangkaian uji untuk menjamin bahwa metode tersebut
dapat menghasilkan akurasi dan presisi. Sebelum melakukan analisis, analis harus
memastikan bahwa sistem dan prosedur yang digunakan harus mampu
memberikan data yang dapat diterima. Persyaratan-persyaratan kesesuaian sistem
biasanya dilakukan setelah dilakukan pengembangan metode dan validasi metode.
Parameter-parameter yang digunakan meliputi:
1. Presisi
Menurut Harmita (2006:160), mengatakan parameter uji keberulangan dari area
dan waktu retensi sebagai hasil dari penyuntikan berulang kali sebanyak lima
sampai enam kali dinyatakan dalam simpangan baku relatif. Presisi diukur sebagai
standar deviasi (SD) atau standar deviasi relative (RSD). kriteria presisi diberikan
jika metode memberikan standar deviasi atau koefisien variasi 2% atau kurang.
2. Resolusi
Berdasarkan Farmakope Indonesia Edisi V (2014:1538) resolusi merupakan su-
19
atu ukuran seberapa baik dua puncak terpisah sehingga dapat digunakan untuk
analisa kuantitatif secara akurat.
3. Efisiensi Kolom
Berdasarkan Farmakope Indonesia Edisi V (2014:1539) Efisiensi kolom
(Jumlah lempeng teoritis (N) ) adalah bagian dari refleksi ukuran ketajaman suatu
puncak, sangat penting untuk mendeteksi komponen kecil. Jumlah lempeng
teoritis (N) dihitung dengan persamaan:
𝑡
N = 16[𝑊]2
4. Faktor Ikutan
Berdasarkan Farmakope Indonesia Edisi V (2014:1538) Faktor ikutan
merupakan ukuran suatu kesimetrisan suatu puncak kromatogram. Untuk suatu
puncak yang simetris, factor ikutan T besarnya satu dan besarnya harga T akan
bertambah, jika kromatogram Nampak makin berekor. Nilai factor ikutan
dianggap baik apabila < 2. Yang dihitung dengan persamaan :
𝑊0,05
T=
2𝑓
2.1.7.5 Linearitas dan rentang

Menurut Harmita (2006:162), Linearitas adalah kemampuan metode
analisis untuk memberikan respon terhadap konsentrasi analit dalam sampel.
Linearitas dapat diperoleh dengan mengukur beberapa konsentrasi standar
(minimal 5) yang berbeda dari kadar dalam sampel, kemudian data diproses
dengan menggunakan regresi linier sehingga diperoleh koefisien korelasi (r).
Koefisien korelasi yang baik untuk suatu metode analisis yaitu di atas 0,9990.
2.1.7.6 Instrumentasi Kromatografi Cair Kinerja Tinggi

Peralatan kromatografi cair kinerja tinggi terdiri dari wadah berisi
fase gerak, pompa untuk mendorong fase gerak masuk ke dalam sistem
dengan tekanan tinggi, injektor untuk memasukkan sampel ke dalam fase gerak,
kolom kromatografi, detektor, dan perangkat pengumpul data (Farmakope
Indonesia Edisi V, 2014:1535).
20
Gambar 6. Alat KCKT
Keterangan alat Kromatografi Cair Kinerja Tinggi:

a. Wadah Fase Gerak
Wadah fase gerak harus bersih dan lembam (inert). Wadah pelarut kosong
ataupun labu laboratorium dapat digunakan sebagai wadah fase gerak. Wadah ini
biasanya dapat menampung fase gerak antara 1 sampai 2 liter pelarut (Gandjar,
Ibnu Gholib dan Abdul Rohman, 2007:380).
b. Pompa
Pompa atau sistem penghantaran fase gerak digunakan untuk menjamin
proses penghantaran fase gerak berlangsung secara tepat, reproduksibel, konstan,
dan bebas dari gangguan. Pompa untuk KCKT harus bersifat inert terhadap fase
gerak. Bahan yang digunakan untuk pompa KCKT adalah gelas, baja tahan
karat, teflon, dan batu nilam. Pompa yang digunakan sebaiknya mampu
memberikan tekanan sampai 5000 psi dan mampu mengalirkan fase gerak
dengan kecepatan alir 3 mL/menit. Untuk tujuan preparatif, pompa harus
mampu mengalirkan fase gerak dengan kecepatan 20 mL/menit (Gandjar, Ibnu
Gholib dan Abdul Rohman, 2007:382).
c. Injektor
Larutan yang akan dianalisis disuntikkan secara langsung ke dalam fase
gerak yang mengalir di bawah tekanan menuju kolom menggunakan injektor (alat
penyuntik) yang terbuat dari tembaga tahan karat dan katup teflon yang
dilengkapi dengan keluk sampel (sample loop) internal atau eksternal (Gandjar,
Ibnu Gholib dan Abdul Rohman, 2007:383).
21
d. Kolom
Bagian kolom termasuk baja tahan karat, baja tahan karat berlapis dan kolom
polimer diisi dengan fase diam. Panjang dan diameter dalam kolom
mempengaruhi pemisahan, selanjutnya ukuran kolom terdapat dalam masing-
masing monografi (Farmakope Indonesia V, 2014:1535).
Kolom pada kromatografi cair kinerja tinggi merupakan bagian yang sangat
penting sebab pemisahan komoponen-komponen sampel akan terjadi di dalam
kolom. Kolom kromatografi cair kinerja tinggi dibuat dengan diameter sangat
kecil (kolom mikro), bertujuan agar kepekaan kolom menjadi lebih teliti,
menghemat fase gerak, memperluas kemampuan detektor, dan menghemat larutan
yang akan dianalisis. Kolom juga dibuat pendek bertujuan agar menghasilkan
resolusi yang baik, memperkecil partikel fase diam sehingga hasil pemisahan
sempurna (Mulja, Muhammad dan Suharman, 1995:24)
e. Detektor
Detektor pada KCKT akan memberikan informasi kepada kita tentang segala
sesuatu yang diperlukan sehubungan dengan tujuan analisis kualitatif dan
kuantitatif. Detektor dibagi menjadi 2 golongan yaitu detektor tipe G (general)
mendeteksi zat secara umum, sedangkan detektor tipe S (selective) mendeteksi
komponen secara spesifik dan selektif.
Menurut Mulja dan Suharman (1995:250), detektor yang memenuhi
syarat adalah sebagai berikut:
1) Sensitivitas yang sangat tinggi
2) Kestabilan dan reprodusibiliti yang sangat baik
3) Memberikan respons yang linier terhadap konsentrasi linarut
4) Dapat bekerja dari temperatur kamar sampai 400˚C
5) Tidak dipengaruhi perubahan temperatur dan kecepatan pelarut pengembang
6) Dapat selektif terhadap macam-macam linarut di dalam larutan pengembang
7) Tidak merusak sampel
8) Dapat menghilangkan “zone broadening” dengan adanya pengaruh minimal
internal volume
Menurut Ibnu Gholib, Gandjar dan Abdul Rohman (2007:389) jenis-
jenis detektor pada KCKT ada 5 yaitu :
1) Detektor Spektrofotometri UV-Vis
22
2) Detektor Photodiode-array (PDA)

3) Detektor Fluoresensi
4) Detektor Indeks Bias
5) Detektor Elektrokimia.
Detektor Photo Diode Array (PDA) merupakan detektor UV-Vis dengan
berbagai keistimewaan. Detektor ini mampu memberikan kumpulan kromatogram
secara simultan pada panjang gelombang yang berbeda dalam sekali proses
(single run). Selama proses berjalan, suatu kromatogram pada panjang gelombang
yang diinginkan (Biasanya antara 190-400 nm) dapat ditampilkan. Dengan
demikian PDA memberikan lebih banyak informasi komposisi sampel dibanding
dengan UV-Vis. Dengan detektor ini juga diperoleh spectrum UV tiap puncak
yang terpisah sehingga dapat dijadikan suatu alat yang penting untuk memilih
panjang gelombang maksimal untuk sitem KCKT yang digunakan. Dengan
detektor ini pula, dapat dilakukan uji kemurnian puncak dengan membandingkan
antara spectra analit dengan spectra senyawa yang sudah diketahui. Spectrum dan
kromatogram yang dihasilkan pada detektor PDA ini dapat ditampilkan sebagai
plot 3 dimensi absorbansi, panjang gelombang, dan waktu (Rohman, A dan
Gholib, 2012:437)
f. Rekorder
Alat pengumpul data seperti komputer, integrator, dan rekorder dihubungkan
dengan detektor. Alat ini akan mengukur sinyal elektronik yang dihasilkan oleh
detektor lalu merekamnya sebagai suatu kromatogram yang selanjutnya dapat
dievaluasi oleh analis.
2.1.7.7 Keuntungan Kromatografi Cair Kinerja Tinggi

Menurut Johnson dan Stevenson (1991:9) Kromatografi Cair Kinerja
Tinggi mempunyai banyak keuntungan jika dibandingkan dengan Kromatografi
Cair tradisional, di antaranya yaitu:
a. Kecepatan
Waktu analisis yang kurang dari satu jam merupakan hal yang lazim. Banyak
analisis dapat dilakukan dalam 15 – 30 menit. Namun, untuk analisis yang
tidak rumit dapat dicapai waktu analisis kurang dari 5 menit.
23
b. Daya pisah
Kromatografi Cair mempunyai dua tempat terjadinya interaksi. Kemampuan
analit berinteraksi secara selektif dengan fase diam dan fase gerak pada KCKT.
c. Kepekaan
Detektor serapan UV yang biasa dipakai dalam KCKT dapat mendeteksi
berbagai jenis senyawa dalam jumlah nanogram (10-9g). Detektor fluoresensi
dan elektrokimia dapat mendeteksi dalam jumlah pikogram (10-12g).

d. Kolom yang dapat dipakai kembali
Berbeda dengan Kromatografi Cair klasik, kolom KCKT dapat dipakai
kembali. Banyak analisis dapat dilakukan pada kolom yang sama sebelum
kolom itu harus diganti. Akan tetapi, kolom tersebut turun mutunya.
e. Molekul besar dan ion
Pada KCKT dalam ragam eksklusi dan pertukaran ion ideal untuk menganalisis
molekul besar dan ion.
f. Mudah memperoleh kembali cuplikan
Sebagian besar detektor yang dipakai pada KCKT tidak merusak
sehingga komponen cuplikan dapat dikumpulkan dengan mudah melewati
detektor.
2.2 Penelitian yang Relevan

Penelitian yang berjudul “Penetapan Kadar Oksibenzon dalam Tabir Surya
secara Kromatografi Gas” pernah dilakukan oleh Nova Fitria Astrid, (2017)
Mahasiswi Poltekkes Kemenkes Jakarta II. Penetapan kadar oksibenzon secara
Kromatografi Gas menggunakan kolom kapiler dengan detektor ionisasi nyala,
gas pembawanya yaitu helium, laju alir kolom 1,30 ml/menit.
Pengukuran yang dilakukan dengan metode Kromatografi Gas yaitu,
presisi, akurasi, efisiensi kolom, faktor ikutan dan penetapan kadar. Hasil
menunjukkan nilai SD dan RSD untuk oksibenzon adalah memenuhi syarat
karena nilai yang didapat tidak lebih dari 2%, dan nilai kadar rata-rata dari
oksibenzon yaitu sebesar 6,48%. Sehingga dapat disimpulkan bahwa kadar
oksibenzon dalam sampel memenuhi syarat.
BAB III
METODE PENGUJIAN
3.1 Waktu dan Lokasi Pengujian
3.1.1 Waktu Pengujian

Pengujian ini dilakukan pada tanggal 3 Maret – 7 Maret 2018.
3.1.2 Lokasi Pengujian

Pengujian dilaksanakan di Laboratorium Kosmetik Balai Besar POM DKI
Jakarta, Jalan As’syafiiyah No. 133, Rt. 06 / Rw. 03, Cilangkap, Cipayung,
Kota Jakarta Timur, DKI Jakarta 13870
3.2 Prosedur Pengujian
3.2.1 Prinsip Pengujian

Oksibenzon dapat dipisahkan dari matriks sampel dan ditetapkan kadarnya
secara KCKT berdasarkan perbedaan polaritas dan kelarutan.
3.2.2 Metode Pengujian
Metode penetapan kadar oksibenzon dalam krim tabir surya adalah

Kromatografi Cair Kinerja Tinggi
3.2.3 Prosedur Pengujian
1. Larutan Uji
Sejumlah lebih kurang 0,5 g sampel ditimbang dan dimasukkan ke dalam
labu tentukur 25 mL. ditambah 15 mL Metanol, di vortex dan diencerkan
dengan metanol sampai tanda (larutan a).
Sejumlah 1,0 mL Larutan a dipipet dan dimasukkan ke dalam labu tentukur
20 mL, kemudian diencerkan dengan metanol sampai tanda. Larutan
disaring dengan penyaring membran PVDF 0,45 µm (Larutan A)
2. Larutan Baku Tunggal

Larutan Baku Oksibenzon
Sejumlah lebih kurang 50 mg Oksibenzon ditimbang dan dimsukkan ke labu
24
25
tentukur 10 mL, ditambah 5 mL methanol, di vortex dan diencerkan dengan

methanol sampai tanda (larutan b1). Sejumlah 4,0 mL larutan b1 dipipet dan
dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 mL, kemudian diencerkan dengan
methanol sampai tanda. Larutan disaring dengan penyaring membran PVDF
0,45 µm. Diperoleh larutan baku dengan konsentrasi 40 µg/mL (Larutan B).
3. Larutan Kurva Kalibrasi Baku

1. Larutan Baku Induk
Sejumlah masing-masing lebih kurang 100 mg Oksibenzon, 100 mg Metil
Benziliden Camphor, 50 mg Butil Metoksi Dibenzoil Metan, 250 mg
Oktil Metoksisinamat, 250 mg Homosalat dan 125 mg Oktil Salisilat,
dimasukkan ke dalam labu tentukur 20 mL, ditambah 5 mL metanol,
dikocok hingga larut, kemudian diencerkan dengan metanol sampai
tanda. Diperoleh larutan baku dengan konsentrasi : Oksibenzon 5000
µg/ml, Metil Benziliden Champor 5000 µg/ml, Butil Metoksi Dibenzoil
Metan 2500 µg/mL, Oktil Metoksisinamat 12500 µg/mL, Homosalat
12500 µg/mL, dan Oktil Salisilat 6250 µg/mL (Larutan K)
2. Larutan Baku 25%
Sejumlah 1,0 mL larutan K dipipet dan dimasukkan ke dalam labu
tentukur 25 mL, kemudian diencerkan dengan metanol sampai tanda
(larutan u1). Sejumlah 1,0 mL larutan u1 dipipet dan dimasukkan ke
dalam labu tentukur 20 mL, kemudian diencerkan dengan metanol sampai
tanda. Larutan disaring dengan penyaring membran PVDF 0,45 µm.
Diperoleh larutan baku dengan konsentrasi Oksibenzon 10 µg/mL, Metil
Benziliden Champor 10 µg/mL, Butil Metoksi Dibenzoil Metan 5 µg/mL,
Oktil Metoksisinamat 25 µg/mL, Homosalat 25 µg/mL, dan Oktil
Salisilat 12,5 µg/mL (Larutan u)
3. Larutan Baku 50%
(larutan v1). Sejumlah 1,0 mL larutan v1 dipipet dan dimasukkan ke
26

Benziliden Champor 20 µg/mL, Butil Metoksi Dibenzoil Metan 10
µg/mL, Oktil Metoksisinamat 50 µg/mL, Homosalat 50 µg/mL, dan Oktil
Salisilat 25 µg/mL (Larutan v)
4. Larutan Baku 75%
(larutan w1). Sejumlah 1,0 mL larutan w1 dipipet dan dimasukkan ke
µg/mL, Oktil Metoksisinamat 15 µg/mL, Homosalat 75 µg/mL, dan Oktil
Salisilat 37,5 µg/mL (Larutan w)
5. Larutan Baku 100%
(larutan x1). Sejumlah 1,0 mL larutan x1 dipipet dan dimasukkan ke
Benziliden Champor 40 µg/mL, Butil Metoksi Dibenzoil Metan 2 µg/mL,
Oktil Metoksisinamat 100 µg/mL, Homosalat 100 µg/mL, dan Oktil
Salisilat 50 µg/mL (Larutan x)
(larutan y1). Sejumlah 1,0 mL larutan y1 dipipet dan dimasukkan ke
27

µg/mL, Oktil Metoksisinamat 125 µg/mL, Homosalat 125 µg/mL, dan
Oktil Salisilat 62,5 µg/mL (Larutan y)
4. Cara Penetapan
Larutan A, B, C, D, E, F, G, dan H, u, v, w, x, y, disuntikkan secara
terpisah pada KCKT dengan kondisi analisa sebagai berikut:
Kolom : C18 (250 x 4,6 mm, ukuran partikel 5 µm)
Fase Gerak : Asetonitril : Asam Formiat 0,1% pH ± 2,7
(80:20)
Oven : 40ºC
Volume Penyuntikkan : 20 µl
Detektor : PDA 311 nm (Oksibenzon, Metil
Benziliden Camphor, Oktil
Metoksisinamat, Homosalat dan Oktil
Salisilat)
PDA 358 nm (Butil Metoksi Dibenzoil
Metan)
3.2.4 Miniaturisasi Prosedur
3.2.4.1 Larutan Baku Tunggal

Larutan Baku Oksibenzon
Sejumlah lebih kurang 50 mg Oksibenzon ditimbang dan dimasukkan ke
dalam labu tentukur 50 mL, ditambah 10 mL methanol, di vortex dan diencerkan
dengan methanol sampai tanda (larutan b1). Sejumlah 3,0 mL larutan b1 dipipet
dan dimasukkan ke dalam labu tentukur 10 mL, kemudian diencerkan dengan
methanol sampai tanda. Larutan disaring dengan penyaring membran PVDF 0,45
µm. Diperoleh larutan baku dengan konsentrasi 90 µg/mL (Larutan B).
3.2.4.2 Larutan Kurva Kalibrasi Baku

1. Larutan Baku Induk
Sejumlah masing-masing lebih kurang 50 mg Oksibenzon dimasukkan
ke dalam labu tentukur 50 mL, ditambah 5 mL metanol, dikocok hingga
28
larut, kemudian diencerkan dengan metanol sampai tanda. Diperoleh

larutan baku dengan konsentrasi : Oksibenzon 1000 µg/mL (Larutan C)
2. Larutan Baku 25%
Sejumlah 1,0 mL larutan C dipipet dan dimasukkan ke dalam labu
(larutan C1). Larutan disaring dengan penyaring membran PVDF 0,45 µm.
Diperoleh larutan baku dengan konsentrasi Oksibenzon 10 µg/mL
(Larutan C1)
3. Larutan Baku 50%
(Larutan C2)
4. Larutan Baku 75%
(Larutan C3)
(Larutan C4)
(Larutan C5)
29
3.2.5 Langkah Kerja

Larutan Uji (Larutan A)
Sejumlah lebih kurang 0,5 g sampel ditimbang
↓
Dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 mL
↓
Ditambahkan 15 mL Metanol, di vortex dan diencerkan dengan metanol
sampai tanda (larutan a)
↓
Pipet 1,0 mL larutan a
↓
Dimasukkan ke dalam labu tentukur 20 mL
↓
Encerkan dengan metanol sampai tanda
↓
Larutan disaring dengan penyaring membran PVDF 0,45 µm (Larutan A)
Larutan Baku Tunggal (Larutan B)
Ditimbang lebih kurang 50 mg Oksibenzon dan dimasukkan ke dalam labu

tentukur 50 mL
↓
Ditambahkan 10 mL metanol, di vortex dan diencerkan dengan methanol
sampai tanda (larutan b1)
↓
Pipet sejumlah 3,0 mL larutan b1
Dimasukkan ke dalam labu tentukur 10 mL kemudian diencerkan dengan
methanol sampai tanda (larutan b2)
↓
Pipet 3,0 mL larutan b2
Dimasukkan ke dalam labu tentukur 10 mL, kemudian diencerkan dengan
methanol sampai tanda.
↓
Larutan disaring dengan penyaring membran PVDF 0,45 µm. Diperoleh
larutan baku dengan konsentrasi 90 µg/mL (Larutan B).
30
Larutan Kurva Kalibrasi Baku
1. Larutan Baku Seri 1 (Larutan C1)

Sejumlah 1,0 mL larutan b1 dipipet dan dimasukkan ke dalam labu
tentukur 100 mL
↓
Diencerkan dengan metanol sampai tanda (larutan c1)
↓
Larutan disaring dengan penyaring membran PVDF 0,45 µm
↓
(Larutan C1)

Sejumlah 2,0 mL larutan b1 dipipet dan dimasukkan ke dalam labu tentukur
100 mL
Diperoleh larutan baku dengan konsentrasi Oksibenzon 20 µg/mL (Larutan C2)

tentukur 100 mL
↓
↓
↓
(Larutan C3)
31

tentukur 100 mL
↓
↓
↓
(Larutan C4)

tentukur 100 mL
↓
↓
↓
(Larutan C5)
3.3 Alat dan Bahan
3.3.1 Alat
Alat yang digunakan dalam penetapan kadar oksibenzon dalam Krim Tabir
Surya adalah Kromatografi Cair Kinerja Tinggi dengan satu set computer dan
printer, Pipet volume 1,0 mL; 2,0 mL; 3,0 mL; 4,0 mL; 5,0 mL, pipet filler, pipet
tetes, labu tentukur 10 mL; 50 mL; dan 100 mL, gelas piala 50 mL dan 100 mL,
pH meter, penyaring membran berporositas 0,45 µm, spuit, vial, dan timbangan
analitik.
32
3.3.2 Bahan
3.3.2.1 Data Sampel

Sampel yang digunakan dalam pengujian kadar oksibenzon adalah :
Nama : “X”
Bentuk : Krim
Warna : Cokelat
Bau : Harum
Komposisi : Petrolatum, Aqua, Beeswax, Paraffinum Liquidum, Titanium
Dioxide, Stearic Acid, Cetyl Alcohol, Candelila Wax, Glycerin,
Fragrance, Glycyrhizza Glabra Root Extract, Retinyl Palmitate,
Ascorbic Acid, Tocopheryl Acetate, Methylparaben,
Triethanolamine, CI 15985:1, CI 16255, Propylparaben
No.Reg : POM NA 18160104513
No. Batch : 17111d
Produksi : PT “Y”
Netto : 20 g
Pemerian : Krim, berwarna merah cokelat, berbau harum.
3.3.2.2 Data Baku
a. Baku Pembanding
Baku pembanding yang digunakan dalam pengujian kadar oksibenzon
adalah sebagai berikut:
Nama : Oksibenzon
No. Kontrol : 109385
Kemurnian : 100,04%
Produksi : PPOMN RI, Jakarta
Pemerian : Serbuk hablur berwarna kuning pucat.
3.3.2.3 Pelarut/Pereaksi
- Metanol
- Asetonitril
- Asam Formiat 0,1%
33
3.4 Rumus Perhitungan
3.4.1 Kadar Oksibenzon dalam Sampel

Kadar oksibenzon dalam sampel dapat dihitung dengan rumus:
bi f
x
a 10000
bi : Konsentrasi (µg/mL) oksibenzon dalam larutan uji yang dihitung dari

kurva kalibrasi.
a : Bobot contoh (g) dari larutan uji.
f : Faktor pengenceran larutan uji

BAB IV
HASIL PENGUJIAN DAN PEMBAHASAN
4.1 Hasil Pengujian
4.1.1 Data Uji Kesesuaian Sistem
Hasil Uji Kesesuaian Sistem yang telah dilakukan sebanyak 6 kali

penginjekkan pada alat Kromatografi Cair Kinerja Tinggi seperti yang tertera
pada Tabel 4.1 serta Data Faktor Ikutan dan Efisiensi Kolom pada tabel 4.2.
Tabel 4.1 Data Waktu Retensi dan Luas Area

Waktu Luas
No. | Xi - X | |Xi - X |2 | Xi - X | |Xi - X |2
Retensi Area
1. 5,270 0,005 0,000025 2151734 2194 4813636
2. 5,270 0,005 0,000025 2151254 2674 7150276
3. 5,266 0,001 0,000001 2155605 1677 2812329
4. 5,257 0,008 0,000064 2156415 2487 6185169
5. 5,262 0,003 0,000009 2153756 172 29584
6. 5,263 0,002 0,000004 2154802 874 763876
∑ 31,588 0,024 0,000128 12923566 10078 21754870
X 5,265 0,004 0,000021 2153928 1679,7 3625811,7
Berdasarkan tabel diatas, setelah dilakukan uji kesesuaian sistem dengan

alat KCKT. Diperoleh waktu retensi dan luas area dari penginjekkan sebanyak 6
kali dengan nilai rata-rata yang diperoleh secara berturut-turut sebesar 5,265 dan
3625811,7.
34
35
Tabel 4.2 Faktor Ikutan dan Efisiensi Kolom
No.Baku Faktor Ikutan Efesiensi Kolom
1. 1,176 11976,971
2. 1,176 12007,010
3. 1,179 12125,698
4. 1,180 11897,459
5. 1,175 12092,262
6. 1,175 12151,512
X 1,177 12041,819
%RSD 0,184 0,813
Berdasarkan tabel diatas, setelah dilakukan uji kesesuaian sistem dengan alat
KCKT. Diperoleh faktor ikutan dengan % RSD sebesar 0,184% dan diperoleh
efisiensi kolom dengan % RSD sebesar 0,813%.
4.1.2 Data Penimbangan

A. Data Penimbangan Baku
Tabel 4.3 Penimbangan Baku Oksibenzon BPFI

No Keterangan Bobot ( mg )
1 Bobot Wadah 219,51
2 Bobot Wadah + Bahan 271,97
3 Bobot Bahan 52,46
Berdasarkan tabel diatas, penimbangan bobot wadah kosong sebesar

219,51 mg, penimbangan bobot wadah beserta baku oksibenzon sebesar 271,97
mg, sehingga bobot baku oksibenzon sebesar 52,46 mg.
36
B. Data Penimbangan Sampel

Data hasil pengujian berupa penimbangan sampel (larutan uji) untuk
penetapan kadar dapat dilihat pada Tabel 4.4
Tabel 4.4 Penimbangan Sampel
Keterangan Penimbangan (g)
Sampel 123H-a 0,5402
Sampel 123H-b 0,5349
Berdasarkan tabel diatas, dilakukan penimbangan sampel dengan sampel

yang sama sebanyak dua kali. Diperoleh penimbangan sampel 123H-a dengan
bobot 0,5402 g dan penimbangan sampel 123H-b dengan bobot 0,5349 g.
4.1.3 Data Waktu Retensi dan Luas Area Sampel

Data hasil pengujian waktu retensi dan luas area sampel (larutan uji) untuk
penetapan kadar dapat dilihat pada Tabel 4.5
Tabel 4.5 Waktu retensi dan Luas Area sampel
No Bobot (g) Waktu Retensi Luas Area
123H-a 0,5402 5,257 43140
123H-b 0,5349 5,259 43377
Berdasarkan tabel diatas, setelah dilakukan pengukuran larutan uji dengan

alat KCKT. Diperoleh waktu retensi sebesar 5,257 dan luas area sebesar 43140
untuk sampel 123H-a. Waktu retensi sebesar 5,259 dan luas area sebesar 43377
untuk sampel 123H-b.
4.1.4 Data Waktu Retensi dan Luas Area Baku Oksibenzon

Data waktu retensi dan luas area baku untuk penetapan kadar Oksibenzon.
Seperti yang tertera pada tabel 4.6
Tabel 4.6 Waktu Retensi dan Luas Area Baku Oksibenzon

No Bb (µ) Fb c Waktu Luas
(µg/mL) Retensi Area
1 52460 5000 10,492 5,257 537605
2 52460 2500 20.984 5,266 1074175
3 52460 1667 31,476 5,268 1607415
4 52460 1250 41,968 5,270 2151734
5 52460 1000 52,460 5,267 2729154
37
Berdasarkan tabel diatas, setelah dilakukan pengukuran larutan baku dengan

alat KCKT. Baku 1 diperoleh waktu retensi sebesar 5,257 dan luas area sebesar
537605 dengan konsentrasi 10,492 µg/mL, baku 2 diperoleh waktu retensi sebesar
5,266 dan luas area 1074175 dengan konsentrasi 20,984 µg/mL, baku 3 diperoleh
waktu retensi sebesar 5,268 dan luas area sebesar 1607415 dengan konsentrasi
31,476 µg/mL, baku 4 diperoleh waktu retensi sebesar 5,270 dan luas area sebesar
2151734 dengan konsentrasi 41,968 µg/mL, dan baku 5 diperoleh waktu retensi
sebesar 5,267 dan luas area sebesar 2729154 dengan konsentrasi 52,460 µg/mL
dengan bobot penimbangan masing-masing 52460 µg.
4.1.5 Perhitungan Uji Kesesuaian Sistem
1. Presisi
a. Waktu Retensi
∑|xi − x̄ |2
SD = √
n−1
0,000128
SD = √ = 5,0596 x 10−3
6−1
SD
RSD = × 100%
x̄
5,0596 x 10−3
RSD = × 100% = 0,0961 %
5,265
b. Luas Area
∑|xi-x̄|2
SD =√
n-1
21754870
SD =√ = 2085,898847
6-1
SD
RSD = X 100%
x̄
2085,898847
RSD = X 100% = 0,0968%
2153928
4.1.6 Perhitungan Kurva Kalibrasi

38
Untuk membuat kurva larutan baku seri yang terdiri dari beberapa konsentrasi,
maka dilakukan perhitungan regresi. Data baku seri yang telah diolah dalam tahap
perhitungan sebelumnya kemudian diolah kembali untuk perhitungan ini seperti yang
tertera dalam Tabel 4.7.
1) Perhitungan Konsentrasi standar

52,46 𝑚𝑔
 Baku Induk = = 1,0492 𝑚𝑔/𝑚𝐿 𝑥 1000 = 1049,2 µ𝑔/𝑚𝐿
50 𝑚𝑙
1
 Standar 1 = 1049,2 µ𝑔⁄𝑚𝐿 𝑥 100 = 10, 492 µ𝑔⁄𝑚𝐿
2
 Standar 2 = 1049,2 µ𝑔⁄𝑚𝐿 𝑥 100 = 20,984 µ𝑔⁄𝑚𝐿
3
4
5
2) Perhitungan Regresi
Tabel 4.7 Perhitungan Regresi

Konsentrasi Luas Area
No. X.Y (𝑋𝑖 )2 (𝑌𝑖 )2
(𝑋𝑖 ) (𝑌𝑖 )
1. 10,492 537605 5640551,66 110,082064 2,89019136x1011
2. 20,984 1074175 22540488,2 440,328256 1,153851931x1012
3. 31,476 1607415 50594994,54 990,738576 2,583782982x1012
4. 41,968 2151734 90303972,51 1761,313024 4,629959207x1012
5. 52,460 2729154 143171418,8 2752,0516 7,448281556x1012
∑ 157,38 8100083 312251425,7 6054,51352 1,610489481x1013
X 31,476 1620016,6 62450285,14 1210,902704 3,220978962x1012
Berdasarkan data pada tabel diatas, dapat diketahui tentang data-data yang akan
digunakan untuk perhitungan kurva larutan baku oksibenzon.
n.ΣXY-(ΣX)(ΣY) 5.312251425,7 -(157,38)(8100083)

b= 2 2 = = 52045,91113
n.ΣX - (ΣX) 5.6054,51352- 24768,4644
𝑎 = 𝑌̅−𝑏𝑥̅
39
= 1620016,6 – (52045,91104 x 31,476)

= - 18180,4987
n . Σ𝑋𝑌 − ( ∑𝑥 ) . ( ∑𝑦 )
𝑟=
√[ 𝑛 . ∑𝑋 2 − (∑𝑋)2 ] . [ 𝑛 . ∑𝑦 2 − (∑𝑦)2 ]
(5 𝑥 312251425,7) − (157,38 𝑥 8100083)
=
√[(5 𝑥 6054,51352) − 24768,4644] 𝑥 [(5 𝑥 1,610489481x1013 ) − 6,561134461𝑥1013 ]
286466066
=
286502013
= 0,99987
4.1.7 Kurva Baku Seri Oksibenzon
Kurva kalibrasi Baku Oksibenzon dapat dilihat seperti pada gambar 7
Kurva Baku Seri Oksibenzon

3000000
y = 5E+07x - 18180
2500000
R² = 0.9997
2000000
Luas Area
Series1
1500000
Linear (Series1)
1000000
500000
0
0 0.01 0.02 0.03 0.04 0.05 0.06
Konsentrasi (mg/ml)
Gambar 7 . Kurva Kalibrasi Baku Oksibenzon
4.1.8 Kadar Oksibenzon dalam Sampel

Perhitungan kadar oksibenzon dalam sampel dapat dihitung menggunakan
rumus :
bi f
x
a 10000
bi : Konsentrasi (µg/mL) oksibenzon dalam larutan uji yang dihitung dari kurva
kalibrasi.
a : Bobot contoh (g) dari larutan uji.

40
f : Faktor pengenceran larutan uji
 Sampel 123H-a :
Persamaan Garis: y = 52045,91104x – 18180
43140 = 52045,91104x - 18180
61320
x =
52045,91104
x = 1,178190539 µg/ml
1,178190539 µg/ml 500

Kadar = 𝑥 = 0,1090 %
0,5402 g 10000
 Sampel 123H-b :
Persamaan Garis: y = 52045,91104x – 18180
43377 = 52045,91104x – 18180
61557
x =
52045,91104
x = 1,182744211 µg/ml
1,182744211 µg/ml 500

Kadar = 𝑥 = 0,1105 %
0,5349 g 10000
Berdasarkan hasil pengujian yang telah dilakukan terhadap sampel dalam krim
tabir surya secara Kromatografi Cair Kinerja Tinggi diperoleh kadar oksibenzon
dalam sampel sebesar 0,1090% dan 0,1105%
0,1090%+0,1105%
Rata-rata kadar: = 0,10975%
2
4.1.9 Hasil Pengujian

Berdasarkan hasil pengujian kadar oksibenzon yang telah dilakukan
terhadap sampel dalam sediaan krim tabir surya secara Kromatografi Cair Kinerja
Tinggi diperoleh kadar oksibenzon dalam sampel 123H-a sebesar 0,1090% dan
dalam sampel 123H-b sebesar 0,1105%.
4.2 Persyaratan
41
Berdasarkan Peraturan Kepala Badan Pengawas Obat dan Makanan RI No. 18

Tahun 2015 tentang Persyaratan Teknis Bahan Kosmetika dinyatakan
bahwa persyaratan oksibenzon dengan batas kadar maksimum bahan aktif dalam
produk akhir adalah tidak lebih dari 10%.
4.3 Pembahasan
Penetapan kadar Oksibenzon dalam krim tabir surya secara Kromatografi
Cair Kinerja Tinggi menggunakan prosedur identifikasi dan penetapan kadar
oksibenzon dalam produk kosmetik secara kromatografi cair kinerja tinggi.
Sebelum dilakukan pengukuran penetapan kadar oksibenzon, terlebih
dahulu dilakukan Uji Kesesuaian Sistem (UKS) untuk membuktikan bahwa
keberulangan suatu sistem kromatografi memenuhi syarat dalam melakukan suatu
pengujian. UKS merupakan suatu hal yang penting untuk memastikan suatu
sistem berjalan dengan baik dan benar. Dari pengujian yang dilakukan didapatkan
hasil presisi yang dinyatakan dalam simpangan baku relatif berdasarkan waktu
retensi sebesar 0,0961 % dan berdasarkan luas area sebesar 0,09 % . Maka, dapat
disimpulkan bahwa presisi tersebut memenuhi syarat (MS).
Pada penetapan kadar oksibenzon, penulis hanya menggunakan metoda
Kromatografi Cair Kinerja Tinggi dan penulis dapat membandingkannya dengan
penetapan kadar oksibenzon secara Kromatografi Gas. Keuntungan kromatografi
gas adalah kita dapat menggunakan kolom lebih panjang untuk menghasilkan
efisiensi pemisahan yang tinggi. Gas dan uap mempunyai viskositas yang rendah,
demikian juga kesetimbangan partisi antara gas dan cairan berlangsung cepat,
sehingga analisis relatif cepat dan sensitivitasnya tinggi. Fase gas dibandingkan
sebagian besar fase cair tidak bersifat reaktif terhadap fase diam dan zat-zat
terlarut.
Pada pemilihan fase gerak KCKT harus diperhatikan tingkat kepolarannya.
Hal ini dikarenakan campuran analit akan terpisah berdasarkan kepolaran fase
gerak, fase diam, dan analit tersebut. Hal tersebut akan mempengaruhi kecepatan
untuk sampai ke detektor (waktu retensi). Fase gerak yang digunakan pada
penelitian ini merupakan campuran pelarut yang memiliki tingkat kepolaran
berbeda-beda dan fase gerak tersebut digunakan karena sangat efektif pada
pemisahan kolom fase terbalik (Gandjar, Ibnu Gholib dan Abdul Rohman,
2007:397).
42
Jenis kolom yang digunakan yaitu oktadesilsilana (C18) karena mampu

memisahkan senyawa-senyawa dengan kepolaran yang rendah, sedang, maupun
tinggi. Kolom ini juga efektif untuk pemisahan kolom fase terbalik (Gandjar,
Ibnu Gholib dan Abdul Rohman, 2007:386). Sebelum dan sesudah digunakan
kolom harus dialirkan dengan metanol. Hal ini bertujuan agar kolom terbebas
dari pengotor.
Kolom yang digunakan memiliki ukuran porositas 5 µm, maka fase
gerak dan sampel harus disaring dengan penyaring membran 0,45 µm. Hal
tersebut sangat penting untuk memperoleh hasil pemisahan yang sempurna serta
untuk menghindari terjadinya penyumbatan (blocking) di dalam kolom.
Teknologi kolom partikel kecil ini memerlukan sistem pompa tekanan tinggi
yang mampu mengalirkan fase gerak pada tekanan tinggi agar tercapai laju aliran
beberapa mL per menit. Di dalam kolom KCKT diletakkan oven untuk menjaga
suhu kolom tetap stabil.
Dari hasil pengujian diperoleh kadar rata-rata untuk sampel “X” sebesar
0,1097%. Sehingga dapat disimpulkan bahwa kadar oksibenzon dalam sampel
“X” memenuhi syarat.
BAB V
SIMPULAN DAN SARAN
5.1 Simpulan
Berdasarkan hasil pengujian penetapan kadar oksibenzon dalam krim tabir

surya secara kromatografi cair kinerja tinggi dapat disimpulkan bahwa kadar
oksibenzon dalam sampel tersebut memenuhi syarat (MS) sesuai dengan
Peraturan Kepala Badan Pengawas Obat dan Makanan RI No.18 Tahun 2015
tentang Persyaratan Teknis Bahan Kosmetika yang mempersyaratkan batas kadar
maksimum bahan aktif oksibenzon adalah 10 % karena kadar rata-rata oksibenzon
yang diperoleh dalam sediaan krim tabir surya sebesar 0,1097%.
5.2 Saran
Dalam melakukan pengujian secara kuantitatif pengerjaan haruslah

dilakukan seteliti mungkin agar hasil yang diperoleh maksimal. Sebaiknya
pengujian tidak hanya dilakukan sekali dan juga menggunakan beberapa metode
untuk mendapatkan hasil yang teliti dan akurat. Hal tersebut tergantung pada
kondisi laboratorium itu sendiri dan faktor lainnya, seperti individu yang
mengerjakan pengujian sebaiknya memiliki latar belakang, pengalaman kerja serta
keterampilan dibidang analisis, sehingga ia dapat menguasai dan memahami
prinsip dari setiap pengujian baik secara kualitatif maupun kuantitatif, karena hal
ini sangat berpengaruh pada hasil pengujian, baik itu berhubungan dengan cara
kerja maupun pelaksanaan. Pereaksi yang digunakan (reagen yang digunakan)
harus dalam keadaan fresh, instrumen yang digunakan harus selalu dikontrol
ketelitiannya, karena keakuratan hasil pengujian juga tergantung dari keakuratan
alat yang digunakan.
43
DAFTAR PUSTAKA
Agus, Goeswin. 2015. Sediaan Kosmetik. Bandung: Institut Teknologi

Bandung.
Badan Pengawas Obat dan Makanan. 2015. Peraturan Kepala Badan

Pengawas Obat dan Makanan Nomor 18 Tentang Persyaratan
Teknis Bahan Kosmetika. Jakarta: Badan Pengawas Obat dan
Makanan.
Gandjar, Ibnu Gholib dan Abdul Rohman. 2007. Kimia Farmasi

Analisis. Yogyakarta: Pustaka Pelajar.
Graham-Brown, Robin dan Tony Burns. 2005. Lecture Notes

Dermatologi. Diterjemahkan oleh M. Anies Zakaria. Jakarta:
Erlangga.
Gritter, Roy J, James M. Bobbit dan Arthur E. Schwarting. 1991.

Pengantar Kromatografi. Diterjemahkan oleh Kosasih
Padmawinata. Bandung: Institut Teknologi Bandung.
Harmita. 2006. Analisis Kuantitatif Bahan Baku dan Sediaan Farmasi.

Jakarta: Universitas Indonesia.
Jhonson, E. L dan Stevenson, R. 1991. Dasar Kromatografi Cair.

Bandung: Institut Teknologi Bandung.
Kementerian Kesehatan Republik Indonesia. 2014. Farmakope Indonesia

Edisi V. Jakarta: Ditjen Bina Kefarmasian dan Alat Kesehatan.
Mulja, M dan Suharman. 1995. Analisis Instrumental. Surabaya: Airlangga

University Press.
Muliyawan, Dewi dan Neti Suriana. 2013. A-Z Tentang Kosmetik. Jakarta:
PT Gramedia
Rohman, Abdul. 2016. Validasi dan Penjaminan Mutu Metode Analisis

Kimia. Yogyakarta: Gadjah Mada University Press.
Rohman, A dan Gholib, I. 2012. Analisis Obat Secara Spektrofotometri dan

Kromatografi. Yogyakarta: Pustaka Pelajar
Rohman, A dan Gholib, I. 2009. Kimia Farmasi Analisis. Yogyakarta:

Graha Ilmu
44
45
Rostamailis. 2005. Penggunaan Kosmetik, Dasar Kecantikan dan

Berbusana yang Serasi. Jakarta: Rineka Cipta.
Tranggono, Retno Iswari dan Fatma Latifah. 2007. Buku Pegangan

Ilmu Pengetahuan Kosmetik. Jakarta: PT. Gramedia Pustaka Utama.
Unites States Pharmacopoeia. 2013. Unites States Pharmacopoeia, Volume

II. Medicines and Healthcare Products Regulatory Agency
(MHRA).
Walpole, Ronald E. 1989. Pengantar Statistika Edisi 3. Jakarta: PT.

Gramedia Pustaka Utama.
Wasitaatmadja, Sjarif M. 1997. Penuntun Ilmu Kosmetik Medik.

Jakarta: Universitas Indonesia.
L
A
M
P
I
R
A
N
46
Lampiran 1. Gambar Seperangkat Alat KCKT
Sumber : Koleksi Pribadi

Diambil di Balai Besar Pengawas Obat dan Makanan di Jakarta
Pada tanggal 29 Maret 2018
47
Lampiran 2. Sertifikat Baku Oksibenzon
Sumber : Koleksi Pribadi

48
Lampiran 3. Data Kurva Kalibrasi Oksibenzon
Sumber : Alat KCKT

49
Lampuiran 4. Data Hasil Penetapan Kadar Oksibenzon
Sumber : Alat KCKT

50
Lampiran 5. Data Hasil RSD dengan Alat KCKT
Sumber : Alat KCKT


Penetapan Kadar Oksibenzon Dalam Krim Tabir Surya Secara Kromatografi Cair Kinerja Tinggi

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Penetapan Kadar Oksibenzon Dalam Krim Tabir Surya Secara Kromatografi Cair Kinerja Tinggi

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

PENETAPAN KADAR OKSIBENZON DALAM KRIM TABIR

SURYA SECARA KROMATOGRAFI CAIR

PROGRAM STUDI DIPLOMA III ANALISA FARMASI DAN MAKANAN

PROGRAM STUDI DIPLOMA III ANALISA FARMASI DAN MAKANAN

Karya Tulis Ilmiah dengan Judul

Disusun oleh : Siti Zulfah Nur

Jakarta, Mei 2018

Pembimbing Utama, Pembimbing Pendamping,

Joko Sulistiyo, S.T., M.Si. Dra. Misde Yola, M.Pd., M.Farm.

Karya Tulis Ilmiah dengan judul

Disusun oleh : Siti Zulfah Nur

Jakarta, 17 Mei 2018

2. Joko Sulistiyo, S.T., M.Si.

Jakarta, Mei 2018

No Nama Tabel Halaman

No Nama Gambar Halaman

No Nama Lampiran Halaman

1.1 Latar Belakang

Menurut Peraturan Kepala Badan Pengawas Obat dan Makanan Republik

Terpapar sinar UV A dan UV B terlalu lama dapat mengakibatkan kulit

1.2 Perumusan Masalah

1.3 Pembatasan Masalah

1.4.1 Tujuan Umum

1.4.2 Tujuan Khusus

1.5.1 Bagi Mahasiswa

1.5.2 Bagi Masyarakat

2.1 Landasan Teori

Berdasarkan Peraturan Kepala Badan Pengawas Obat dan Makanan

2.1.1.1 Penggolongan dan Kategori Kosmetik

1. Preparat untuk bayi, misalnya minyak bayi, bedak bayi.

1). Penggolongan menurut sifat dan cara pembuatan:

2.1.1.2 Tujuan Penggunaan Kosmetik

demikian, maka tujuan dari penggunaan kosmetik dapat dikelompokkan sebagai

2.1.1.3 Manfaat Kosmetik

2.1.1.4 Kosmetik Pelindung

2.1.2.1 Anatomi Kulit

Gambar 1. Anatomi Kulit

Gambar 2. Lapisan Epidermis

Menurut Tranggono dan Latifah (2007:11) , epidermis merupakan bagian

tidak mengalami keratinisasi dan fungsinya hanya membentuk pigmen

Gambar 3. Lapisan Dermis

Gambar 4. Lapisan Subkutis

2.1.2.2 Fungsi Kulit

2.1.2.3 Jenis-Jenis Kulit

2.1.2.4 Pengaruh Kosmetik terhadap Kulit

c. Memperindah, misalnya membuat bentuk muka yang terlalu bulat menjadi

2.1.3 Tabir Surya

a. Perlindungan secara fisik

Gambar 5. Rumus Bangun Oksibenzon

Nama Lain : Benzophenon-3

(Kodeks Kosmetika Indonesia, 1993:351).

2.1.6.1 Pengertian Kromatografi

2.1.6.2 Pembagian Kromatografi

2.1.7 Kromatografi Cair Kinerja Tinggi

2.1.7.2 Fase Diam

suatu pengujian dinyatakan dalam masing-masing monografi dan ditunjukkan

2.1.7.3 Fase Gerak

2.1.7.4 Uji Kesesuaian Sistem

2.1.7.5 Linearitas dan rentang

2.1.7.6 Instrumentasi Kromatografi Cair Kinerja Tinggi

Gambar 6. Alat KCKT

Keterangan alat Kromatografi Cair Kinerja Tinggi:

2) Detektor Photodiode-array (PDA)