TUGAS

Nama : Ririn Hairini

NRP : 173020229

1. Jelaskan prinsip dan cara kerja salah satu metode cepat  dalam Analisis
Mikrobiologi Pangan

Jawab :

Uji indol adalah uji biokimia yang umum digunakan untuk membedakan
Enterobacteriaceae dan genera lainnya (Acharya, 2012). Uji indol dilakukan untuk
mengetahui kemampuan bakteri memecah triptofan asam amino membentuk senyawa
indol. Triptofan dihidrolisis oleh triptofanase untuk menghasilkan tiga kemungkinan
produk akhir, salah satunya adalah indol. Produksi indol terdeteksi oleh reagen Kovac
atau Ehrlich yang tersusun atas 4-p-benzaldehid dimethylamino, reagen ini bereaksi
dengan indol, sehingga menghasilkan senyawa berwarna merah.

Prinsip ;  beberapa bakteri dapat memproduksi indole dari pemecahan asam amino
trypthopan dengan menggunakan ezim tryptophanase. Produksi indole akan dideteksi
dengan menggunakan pereaksi Erlich atau reagen Kovak. Indole akan bereaksi dengan
aldehyde dalam reagen dan memberikan warna merah. Sebuah lapisan alkohol merah
akan terbentuk sepeti cincin di bagian atas menandakan indole positif.

Prosedur ; koloni bakteri yang diambil akan dieramkan dalam medium air pepton
yang mengandung asam tryptophan dan kemudian diinkubasi selama 24-48 jam dalam
suhu 370 C. Setalah diinkubasi tambahkan 0,5 ml reagen Kovac’s kedalam medium air
pepton. Reagen Kovac’s mengnadung para-dimethyl aminobenzaldehyde, isoamyl
alcohol dan con. HCl. Raegen Erlich lebih sesitif dalam mendeteksi produksi indole
dalam lingkungan anaerob. Formasi cincin merah yang terbentuk menunjukkan bahwa
bakteri mampu memecah asam amino triptofan yang memberikan hasil positif dalam tes.
Contoh; Escherichia coli: Positive; Klebsiella pneumoniae: Negative

Atau dengan kata lain cara pada uji indol sebagai beriku :

1. Menginokulasi secara tusuk tegak (stab) biakan bakteri E.coli pada medium SIM
secara duplo.
2. Menginkubasi pada suhu 370 C selama 24-48 jam.
3. Menambahkan 5 tetes reagen kovac’s ke dalam 2 tabung.
4. Mengkocok secara perlahan dan biarkan tabung dalam posisi tegak.
5. Mengamati permukaan medium. Terbentuknya cincin merah tua pada permuakaan
medium menunjukkan indol positif.