2.1 Pendahuluan
Mikrobiologi Pangan: Principles into Practice, Edisi Pertama. Osman Erkmen dan T. Faruk
Bozoglu. © 2016 John Wiley & Sons, Ltd. Diterbitkan 2016 oleh John Wiley & Sons, Ltd.
12
Pengawetan Makanan dengan Suhu Tinggi 13
Ini mengubah sifat protein, memecahkan membran sel, dan menurunkan asam
nukleat dan komponen seluler lainnya. Panas lembab 2500 kali lebih efektif
daripada panas kering panas pada suhu yang sama.
Panas kering melibatkan suhu yang lebih tinggi dan waktu yang lebih lama
untuk menghasilkan tingkat kematian yang sama seperti panas lembab. Hal ini
disebabkan oksidasi senyawa organik seluler sel (misalnya protein) dan
menyebabkannya "terbakar" secara perlahan. Denaturasi protein sel terjadi
pada suhu yang lebih rendah dan waktu pemaparan yang lebih pendek dengan
panas lembab daripada yang diperlukan untuk oksidasi dan pembakaran pada
ihancurkan dalam 2–15
panas kering. Misalnya, endospora Bacillus anthracis d
menit oleh panas lembab pada 100 ° C, tetapi dengan panas kering dibutuhkan
hingga 180 menit pada 140 ° C untuk mencapai hasil yang sama.
Efektivitas panas dalam membunuh sel mikroba dan spora bergantung pada
banyak faktor, seperti komposisi makanan, jenis dan sifat mikroorganisme, dan
jenis metode pengolahan. Faktor-faktor ini penting dalam mengembangkan dan
mengadopsi prosedur pemrosesan panas yang efektif untuk makanan.
14 Bab 2
spora dihancurkan pada suhu 70–80 ° C dalam beberapa menit, tetapi spora
dari beberapa jamur (seperti Byssochlamys fulva) dapat bertahan hingga
setinggi 90 ° C selama 5 jam. Banyak spora bakteri dihancurkan pada suhu 100
° C dalam 30 menit, tetapi beberapa spora bakteri tidak hancur dengan cara
direbus (100 ° C) selama 24 jam. Semua spora baik bakteri atau jamur
dihancurkan pada suhu 121 ° C dalam 15-20 menit dengan panas lembab.
Usia sel, tahap pertumbuhan, dan suhu inkubasi penting dalam kaitannya
dengan ketahanan panas. Sel mikroba lebih tahan panas dalam fase lag dan
stasioner (sel tua), dan lebih tahan panas pada fase eksponensial (sel muda)
dan fase kematian (karena adanya produk akhir metabolik). Sel yang
sebelumnya terkena perlakuan panas rendah menjadi relatif tahan terhadap
perlakuan panas berikutnya (karena induksi sintesis protein stres).
Meningkatkan jumlah awal mikroorganisme meningkatkan ketahanan panas
(Tabel 2.1). Proteksi panas dengan jumlah mikroba yang besar disebabkan
oleh pelepasan zat pelindung (polisakarida, protein, lipid, dll.) Dari sel lisis. Ini
menunjukkan pentingnya jumlah mikroba awal yang lebih rendah dalam
makanan sebelum perlakuan panas. Akhirnya, ketahanan panas
mikroorganisme meningkat dengan meningkatnya suhu inkubasi menuju
enunjukkan ketahanan panas yang tinggi
optimal. Seperti Escherichia coli m
saat ditanam pada suhu 37 ° C dibandingkan pada suhu 28 ° C.
komponen susu hingga 71,7 ° C selama 15 detik. Makanan dalam wadah kecil
dipanaskan lebih cepat dari pada wadah besar.
16 Bab 2
2.4.1.1 Pasteurisasi
Pasteurisasi adalah perlakuan panas ringan untuk menonaktifkan enzim dan
sebagian besar mikroorganisme. Tujuan utama dari perawatan ini adalah untuk
menghilangkan sel vegetatif dari bakteri patogen. Sebagian besar
mikroorganisme pembusuk juga dimusnahkan. Umur simpan produk yang
dipasteurisasi tergantung pada jenis makanan dan kondisi pasteurisasi dan
penyimpanan. Untuk keamanan dan kualitas penjagaan, pasteurisasi harus
dilengkapi dengan kemasan yang mencegah kontaminasi, dan pendinginan
yang memperlambat serta mencegah pertumbuhan mikroorganisme yang
masih hidup pada perlakuan panas. Pasteurisasi biasanya melibatkan
penerapan perlakuan panas di bawah 100 ° C. Panas untuk pasteurisasi dapat
disediakan oleh uap, air panas, panas kering, atau arus listrik dan produk
didinginkan segera setelah perlakuan panas. Nama pasteurisasi diambil dari
tawaran Louis Pasteur, yang pertama kali menggunakan panas pada 60 ° C
selama 30 menit untuk mengontrol pembusukan anggur.
Hubungan waktu-suhu asli pasteurisasi ditentukan sesuai dengan inaktivasi
Mycobacterium tuberculosis, karena bakteri ini dianggap sebagai patogen
paling tahan panas yang mungkin terjadi dalam susu. Itu hancur saat susu
terkena suhu 61 ° C selama 10 menit. Kemudian Coxiella burnetii d itemukan
sebagai agen penyebab demam Q yang ditularkan melalui susu dan susu
dipanaskan dalam tong pada suhu 62,8 ° C selama 30 menit untuk
menonaktifkan bakteri ini. Metode ini dikenal sebagai pemrosesan waktu lama
suhu rendah (LTLT) atau pasteurisasi tong.
Pasteurisasi susu biasanya dilakukan dengan melewatkan susu melalui
penukar panas pada suhu tinggi yang bersentuhan dengan sumber panas untuk
membunuh mikroorganisme vegetatif secara lebih efisien dan mengurangi
kualitas susu. Susu dipanaskan pada suhu 72 ° C selama 15 detik dengan
aliran kontinyu dan susu kemudian didinginkan dengan cepat. Proses ini dikenal
sebagai metode suhu tinggi-waktu singkat (HTST) atau pasteurisasi flash.
Kadang-kadang, digunakan pada 79 ° C selama 20-25 detik untuk mengurangi
total beban mikroba dan meningkatkan umur simpan produk.
18 Bab 2
Gambar 2.3 Kelangsungan Hidup kurva yang menunjukkan urutan kematian logaritmik
ilaipada suhu yang berbeda.
dan D n
fosfat. Jumlah fenol yang dibebaskan dapat dengan mudah diperkirakan
dengan penambahan reagen, yang berubah menjadi biru dengan adanya fenol.
Standar warna digunakan untuk menafsirkan hasil tes ini.
Enzim yang ada dalam susu, fosfatase, digunakan sebagai indikator
perlakuan panas yang tidak memadai. Enzim ini menunjukkan ketahanan
panas yang lebih tinggi daripada bakteri. Jika hubungan waktu-suhu dirancang
untuk enzim, proses panas untuk menghancurkannya dapat ditentukan.
20 Bab 2
2.4.1.3 Tyndallization
Metode yang paling efektif dan paling sederhana untuk sterilisasi media adalah
dengan memanaskan cairan hingga 121 ° C selama 15-20 menit menggunakan
pressure cooker atau autoclave. Ini karena suhu yang sangat tinggi diperlukan
untuk membunuh spora bakteri. Ada cara teknis yang rendah untuk
mensterilkan media selama 3 hari berturut-turut, meskipun ada spora.
Pemanasan yang berurutan ini disebut Tyndallization. Tyndallization / fractional
steam steri lization adalah siklus berulang dari proses pendidihan, pendinginan,
dan inkubasi untuk membunuh spora pada tiga hari pengulangan pada 80–100
° C selama 30 menit.
Pada hari ke-1, sel vegetatif bakteri, khamir dan kapang serta spora kapang
dibunuh, tetapi beberapa spora bakteri akan bertahan. Spora yang tersengat
panas dapat berkecambah selama inkubasi semalaman ke sel vegetatif.
Kemudian, ketika kaldu dipanaskan kembali setelah inkubasi, sel-sel vegetatif
yang berkecambah dari spora yang tersisa dimatikan. Kemudian medium yang
dipanaskan kedua diinkubasi. Penguapan ketiga adalah tindakan pencegahan
tambahan. Itu tidak banyak digunakan hari ini. Tyndallization digunakan untuk
bahan peka panas yang tidak tahan autoclaving. Petugas lapangan yang tidak
memiliki autoclave (panci presto) dapat mencoba tyndallization.
Banyak masalah dalam penerapan tyndallization jika terdapat banyak spora
dalam cairan, hal ini dapat menyebabkan pertumbuhan bakteri yang signifikan
dan menyebabkan pembusukan selama inaktivasi berturut-turut. Sementara
sel-sel itu mati pada tahap pendidihan berikutnya, sel-sel mati tetap berada di
dalam medium (sebagai racun). Ini adalah pekerjaan yang memakan waktu.
Prosedur ini hanya bekerja untuk media kaldu yang mendukung pertumbuhan
mikroorganisme pembentuk spora.
2.4.1.4 Blansing
Blansing adalah teknik memasak yang melibatkan pemanasan makanan
(biasanya sayuran dan buah-buahan) dalam air pada suhu sekitar 90–100 ° C
untuk waktu yang sangat singkat. Pemutihan sering kali diikuti dengan
mendinginkan makanan ke dalam air es atau air dingin yang mengalir untuk
menghentikan proses memasak. Makanan sering kali direbus sebelum
dibekukan atau dikalengkan. Ini membantu mengawetkan makanan dengan
menonaktifkan enzim atau aksi enzim yang menyebabkan makanan rusak dan
kehilangan warna, rasa, dan nilai gizi. Waktu blansing bervariasi sesuai dengan
ukuran dan jenis makanan. Underblanching merangsang aktivitas
22 Bab 2
Karakteristik utama dari proses UHT: (1) sifat kontinu, (2) kemasan aseptik, (3)
penggunaan suhu yang sangat tinggi, (4) waktu yang singkat, (5) memungkinkan
penerimaan produk dibandingkan dengan produk yang dipasteurisasi secara
konvensional, dan (6) menghasilkan produk steril komersial.
2.4.3 Sterilisasi
Sterilisasi adalah penghancuran semua mikroorganisme yang dapat hidup
termasuk spora, virus, dan prion. Sterilisasi mutlak tidak berlaku pada
makanan, ini digunakan untuk media laboratorium, larutan, dan peralatan gelas.
Penggunaan uap murni di bawah tekanan adalah cara paling praktis untuk
menerapkan panas lembab untuk mensterilkan bahan. Dalam sistem tertutup
(autoclave) dengan volume konstan, peningkatan tekanan memungkinkan
peningkatan suhu di atas titik didih (Tabel 2.3). SuhuBertekanan
Pengawetan MakananMenurut Suhu Tinggi 23
0 100.0
5 109.0
10 115.0
15 121.5
20 126.5
steam over 1 atm lebih besar dari pada air mendidih. Steam bertekanan
memiliki keunggulan pemanasan yang cepat dan penetrasi yang lebih besar.
Autoclave biasanya dioperasikan pada tekanan 15 psi (121 ° C) selama 15-20
menit untuk mencapai sterilisasi. Autoklaf membutuhkan bejana bertekanan
lebih tinggi yang diisi dengan uap jenuh panas dan semua udara dibuang
keluar. Uap harus bersirkulasi dan kontak dengan semua bahan yang
disterilkan. Waktu yang diperlukan tergantung pada volume material (Tabel
2.4). Autoclave menggunakan uap jenuh untuk mematikan semua yang ada di
dalam ruangannya. Pada suhu tinggi ini, uap mudah mengembun di permukaan
benda yang lebih dingin. Saat uap mengembun, ini menciptakan ruang hampa
yang menarik lebih banyak uap ke dalam autoklaf. Sterilisasi uap cocok untuk
media padat dan cair, peralatan gelas yang terkontaminasi, tabung karet,
larutan kultur yang dibuang, dan sebagainya. Bahan yang tidak cocok untuk
autoklaf termasuk bubuk, senyawa peka panas, dan zat yang tidak larut dalam
air (seperti minyak mineral) yang tidak dapat ditembus uap. Mikroba yang
tersuspensi dalam minyak hanya terkena panas kering. Beberapa media,
seperti kaldu fermentasi tertentu, gelatin nutrisi, dan susu lakmus, didenaturasi
pada suhu 121 ° C. Mereka disterilkan pada suhu yang lebih rendah seperti 115
° C selama 15 menit.
24 Bab 2
Sebuah konsentrasi sekitar 106 spora (atau sel) per mililiter adalah recom
diperbaiki untuk proses termal. Untuk spora, suspensi dipanaskan untuk
membunuh sel vegetatif yang tersisa. Akhirnya, jumlah awal spora (atau sel) per
satuan volume suspensi ditentukan.
2.5.1.2 Pemanasan
Botol kaca dipanaskan dalam bak minyak yang diaduk dan dikontrol secara
termostatis pada suhu tinggi atau air untuk suhu di bawah 100 ° C. Tabung
dipanaskan pada suhu konstan untuk selang waktu tertentu. Tindakan
pencegahan berikut diperlukan dalam proses pemanasan:
1 Botol harus dibawa ke suhu yang ditentukan sebelum dimasukkan ke dalam
bak mandi. Waktu pemanasan awal, misalnya 30 detik, diperbolehkan untuk
menaikkan suhu suspensi ke tingkat pengujian sebelum penghitungan waktu
dimulai.
2 Jika penangas minyak digunakan, vial dikeringkan sebelum dimasukkan ke
dalam minyak dan disegel dengan hati-hati.
3 Metode beberapa tabung, seperti enam botol replikasi, harus digunakan
untuk setiap proses.
4 Botol yang diberi perlakuan panas harus didinginkan dengan cepat di dalam penangas
air es.
N
dN d
kN atau kd
t (2.1)
dt N dengan
dN/ dt a
dalah laju kematian mikroorganisme (atau spora), N adalah jumlah sel
yang layak (atau spora), k adalah konstanta laju inaktivasi, t adalah waktu, dan
tanda minus (“ ”) Menandakan bahwa N menurun. Mengintegrasikan
persamaan ini antara batas, jumlah N1 pada
waktu t1 dan
jumlah N2 pada
waktu
t2,memberikan
ZZ
dN
N k dt
ln N2 ...
ln N1 † kt2t1 †
28 Bab 2
dan
k ˆ ˆ log (2.2)
ln N1ln N2 2: 303 N1 t2 t1 t2t1 N2 Persamaan
ini dapat dimodifikasi
k ˆ log atau t log (2.3)
menjadi 2: 303 N0 2: 303 N0 ada saat
tNkNp
ersamaan 2.2 dapat ditulis sebagai
t,p
ln N l n N0 kt a
tau ln N ln N0 kt
( 2,4) persamaan ini dapat diubah dalam
(2,5)
di mana N a dalah jumlah akhir dari sel-sel yang layak (atau spora) sebagai
koloni forming unit (cfu ml1 atau g1)pada waktu t (min ), N0adalah jumlah awal
sel atau spora yang layak (cfu ml1 atau g1) pada waktu 0, k adalah konstanta
laju (min1), dan log10(N/ N0 ) adalah jumlah siklus log pengurangan sel mikroba
(atau spora) dalam interval waktu.
Sebuah garis lurus dari kemiringan hidup kurva (Gambar 2.3) harus 1 /D. D
Nilaiberbanding terbalik dengan konstanta laju k (k=
1 /D) . Jadi, Persamaan 2.5
dapat ditulis sebagai
(2,7)
N0
t D... log N0 log
N† D log N
† (2.10)
T2 T z
1 ... log D1log D2† mana awal(T1)
dan akhir(T2)suhu dalam ° F
(atau ° C).
“Kesehatan Minimum” dan Sterilitas Komersial
Spora Clostridium botulinum tipe A dan B adalah patogen bawaan makanan
yang paling tahan panas. Sterilisasi komersial makanan rendah asam (pH>
4,6)
30 Bab 2
membutuhkan penghancuran spora yang cukup. Sasaran untuk sterilisasi
komersial makanan asam (4.6) adalah jamur tahan panas. Dalam proses ini,
dua tujuan penting: produk yang aman dan produk yang stabil. Titik aman
dalam makanan rendah asam adalah C. botulinum. Ketika populasi mikroba
awal dalam satu batch produk adalah 10n, proses panas yang
menghasilkannpengurangan desimal “” (nD ) diterapkan. Dalam proses panas
makanan rendah asam, kematian minimum diterapkan untuk mengurangi
pengurangan 12 desimal dalam jumlah C. botulinum spora(log N0 log N = 12).
dari
Ini dikenal sebagai juru masak 12D atau botulinum. Misalnya, jika D121 C.
botulinum adalah 0,21 menit, maka juru masak botulinum akan memiliki
F0 (proses panas) sebesar 12 × 0,21 = 2,52 menit. Dalam proses ini dengan F0,
jika setiap kaleng berisi satu spora C. botulinum, satu spora akan bertahan
dalam satu kaleng dari setiap 1012.
Untuk membandingkan proses termal untuk suhu yang berbeda, nilaistandar
F0 diberikan untuk setiap produk. Nilai F0 ini adalah waktu dalam menit (pada
suhu referensi 250 ° F dengan z= 18 ° F) untuk menghasilkan kerusakan sel
(atau spora) yang sesuai (perlindungan kesehatan minimum atau kemandulan
komersial). Karena berbagai faktor, makanan yang berbeda akan
memilikiberbeda F0 yang nilai.
Misalnya, jika F0 6 menit diperlukan untuk
memastikan sterilitas komersial pada pH 6,0, F0 4 menit mungkin cukup jika
makanan diasamkan hingga pH 5,3. Dalam produk daging yang diawetkan yang
mengandung 150 ppm nitrit dan 3–4% air garam, F0 1,5 menit mungkin cukup
untuk mendapatkan produk steril komersial.
Efek mematikan dari proses panas diekspos oleh F. n ilaiNilai F u
ntuk suatu
proses adalah menit yang diperlukan untuk membunuh populasi
mikroorganisme yang diketahui (untuk memberikan keamanan) dalam makanan
tertentu dalam kondisi tertentu.ini F N ilaibiasanya ditetapkan pada 12D nilai
untuk memberikan pengurangan siklus 12 log teoritis yang paling spora
mesofilik tahan panas (C. botulinum)d alam makanan di referensi tempera ture
(Gambar 2.3).
L ˆ 10TTref† =z(2.11) di
Gambar 2.5 Plot tingkat mematikan suatu produk. (Direproduksi dengan izin dari Elsevier
Publishers; Ariri, A., Pemrosesan termal diperlukan untuk pengalengan. Dalam: Ensiklopedia
Mikrobiologi Makanan, Robinson, RK, Batt, CA dan Patel, PD, Academic Pres, New York,
1999, Gambar 9, hal. .1008–1015)
ini menyiratkan bahwa proses sterilisasi lengkap atau tidak. Jumlah yang
diperlukan bakteri (atau spora) telah dihancurkan, ketika perhitungan dari rumus
2.14 sama dengan F.Kontribusi terhadap F p eriode t m
enit pada suhu T
diberikan oleh t × 10(1 21T) / z
. Putus kurva temperatur-waktu menjadi t1 menit
pada T1, t2 menit pada T2,dan seterusnya, total F d
apat diberikan oleh
... 121T † =z ... 121T † =z
F t1 10
1 ‡ t2 10
2 ‡ · …… (2.16)
Tabel 2.5 Waktu penahanan ekivalen yang dihitung selama pemrosesan panas dari
Gambar 2.5. Suhu T ( °C) Waktu t (min) (121 - T) 10(121T) / 10t×
10(121T) / 10
13 12 11 2 3
80 10 12 6 8 × 10 7,9 × 10 0,30
4
90 17 2 14 21 31 41 51 7,9 × 10 7,9 × 0,50
5
7,9 × 10 7,9 × 5
10 7,9 × 10
6
1,34
9510010510810 2
4 3
9107100 2 10 2,5 × 10 7,9 0,00087 0,0063 0,08
3 2
90 80 8 × 10 2,5 × 10 0,015 0,016
2
70 6 5,0 × 10 6,3 × 0,079 0,0016 0,0006
2 2
11 8 41 31 26 21 16 10 7,9 × 10 4,0 0,30 0,00005
6
pasteurisasi susu (Gambar 2.2). Deteksi enzim ini dalam susu olahan biasanya
menunjukkan bahwa susu tidak dipasteurisasi dengan benar. Positif palsu
mungkin terjadi jika terdapat fosfatase mikroba tingkat tinggi.