Cara Kerja Penelitian

Penyiapan sampel

Daun kelor dan daun salam kering

Penghalusan bahan

Pengayakan dengan 40 mesh

Penimbangan bahan (500 gram daun kelor dan dau salam)

Maserasi dengan etanol 96% (1:10)

Ekstrak etanol 96% (daun kelor dan meniran)

Daun kelor : Daun kelor : Daun kelor :

daun salam (1:2) daun salam (2:2) daun salam(2:1)

Fraksi n-heksana, etil asetat dan metanol

 (fraksi n heksana, etil (fraksi n heksana, etil (fraksi n heksana, etil
asetat dan methanol) asetat dan methanol) asetat dan methanol)
Daun kelor : daun salam Daun kelor : daun Daun kelor : daun
(1:2) salam (2:2) salam (2:1)

Uji Total Fenol

UJI TOTAL FENOL

Pembuatan reagen larutan induk asam galat (1 mg/ml)

50 mg asam galat 1 mL etanol 96%

Campuran Akuades ad 50 mL

Larutan induk asam galat (1mg/mL)

Pembuatan larutan Na2CO3 10 %

10 g Na2CO3 20 mL akuades
Diamkan 24 jam

Larutan Na2CO3 10%

Pembuatan Kurva Kalibrasi Asam galat dengan reagen fenol folin - ciocalteu

Larutan induk asam galat (1mg/mL)

Diambil 1 mL, 1,5 mL, 2 mL, 2,5 mL dan 3

Akuades ad 10 mL
mL

Didapat konsentrasi 100, 150, 200, 250

dan 300 µg/mL asam galat

15, 8 mL akuades dan

0,2 mL tiap konsentrasi asam
1 mL reagen folin-
galat
ciocalteu
Dikocok sampai homogen

Didiamkan selama 8 menit

Campuran homogen 3 mL larutan Na2CO3 10%

Dikosok homogeny didiamkan 2 jam pada suhu kamar

Campuran homogen

Dibaca absorbansi

Pada panjang gelombang serapan maksimum 765 nmuji

Absorbansi
Penetapan kandungan Fenol total dengan metode folin ciocalteu
Dilarutkan
100 mg ekstrak Akuades ad 10 mL

Larutan 10 mg/mL

1mL larutan 10 Dilarutakan

Akuades ad 10 mL
mg/mL

Ekstraks 1 mg/mL

Ditambah
0,2 mL ekstrak 15, 8 mL akuades & 1 mL reagen
folin-ciocalteu
Dikocok dan idiamkan 8 menit

ditambah
Campuran 3 mL Na2CO3 10%

diamkan 2 jam pada suhu kamar

Dibaca absorbansi

pada panjang gelombang 765 nm (triplo)

Absorbansi

Mg ekuivalen asam galat/

gr sampel
UJI ANTIOKSIDAN
Pembuatan larutan DPPH
Dilarutkan
5 mg DPPH Metanol ad 250 mL

Larutan DPPH
konsentrasi ± 50 µM

Penetapan panjang gelombang DPPH

3,8 mL lar. DPPH 50 µM ditambah 0,2 mL metanol

Dibaca absorbansi
panjang gelombang 500-700 nm

Panjang gelombang

Penetapan serapan control ditambah

3,8 mL lar. DPPH 50 µM Akuades ad 0,2 mL

Dibaca absorbansi

Pada panjang gelombang

Absorbansi
Penentuan aktivitas antioksidan
dilarutkan
100 mg ekstrak Akuades ad 100 mL

Larutan konsentrasi 1 mg/mL

dilarutkan
Diambil 1; 1,5; 2; 2,5; 3 mL Akuades ad 100 mL

Didapatkan konsentrasi 100,

150, 200, 250, 300 µg/mL

Diambil 0,2 mL tiap konsentrasi

Campuran homogen
Diamkan 30 menit ditempat gelap

Dibaca absorbansi
Pada panjang gelombang

absorbansi

Pengolahan data
Perhitungan persentase inhibisi serapan DPPH dengan menggunakan rumus
 A kontrol− A sampel
% Inhibisi = x 100%
A kontrol