Tinjauan Pustaka

TERAPI GEN UNTUK GENODERMATOSIS

Henry Tanojo, Satya Wydya Yenny

Bagian/SMF Ilmu Kesehatan Kulit dan Kelamin

FK Universitas Andalas/ RSUP dr. M. Djamil Padang

ABSTRAK

Penemuan biomolekuler berbagai penyakit genetik pada dekade terakhir telah membuka
wawasan baru dalam bidang kesehatan di antaranya terapi gen. Terapi gen merupakan satu
teknik pengobatan dengan target DNA terutama untuk keganasan dan penyakit genetik yang
diturunkan. Walaupun seluruh organ tubuh dapat menjadi sasaran terapi gen, namun kulit
merupakan orga n yang unik dan menarik karena merupakan organ yang d apat dijangkau
secara langsung.
Pendekatan terapi gen secara umum melalui gene restoration, gene augmentation, gene
correction, dan gene inhibition. Pengantaran terapi gen pada kulit dapat secara in vivo ataupun
ex vivo. Secara teknik terapi gen memerlukan gen dan vektor (virus dan non-virus). Keberhasilan
terapi gen sangat bergantung pada pemilihan vektor yang tepat.
Keterbatasan terapi gen disebabkan karena ekspresi gen terjadi dalam waktu singkat,
munculnya respons imun terhadap asam nukleotida asing, hanya digunakan pada penyakit
monogenik, berisiko menginduksi tumor, efek genotoksisitas, dan gene silencing.
Pada makalah ini dibahas penggunaan terapi gen pada beberapa genodermatosis yang
umum ditemukan, banyak diteliti, dan telah mencapai tahap percobaan klinis, yaitu epidermolisis
bulosa, iktiosis, dan xeroderma pigmentosum.(MDVI 2012; 39/3:134 - 140)

Kata kunci: terapi gen, genodermatosis, epidermolisis bulosa, iktiosis, xeroderma pigmentosum

ABSTRACT

Recent advances of biomolecular technology in genetic diseases has opened a new knowledge
such as gene therapy. Gene therapy is a technique to repair DNA where its usage is to treat
malignancy and inherited genetic diseases. Although all body organs can be the target of gene
therapy, skin remains unique and attractive organ because skin can be reached directly.
Gene therapy approach is through gene restoration, gene augmentation, gene correction,
and gene inhibition. Delivery of gene therapy to skin is in vivo or ex vivo. Gene therapy is a
technique requires a gene and vector, which is divided into viral and non-viral vectors. The success
of gene therapy depends on the selection of the appropriate vector.
Limitations of gene therapy are expressed gene occurs in a short time, emergence of an
immune response against foregin nucleotide acid material, its use only in monogenic diseases,
risk of inducing tumors, genotoxicity, and gene silencing.
In this paper, we discussed the utility of gene therapy in several genodermatosis that are
commonly found, were broadly studied, and their research have reached clinical trials. They are
epidermolysis bullosa, ichthyosis, and xeroderma pigmentosum.(MDVI 2012; 39/3:134 - 140)

Ke ywo rds: g ene th era py, ge node rma tosis, ep ide rmo lysis bullosa, ichthyo sis, x ero derma
Korespondensi : pigmen tosum
Jl. Perintis Kemerdekaan - Padang
Telp. 0751- 32373
Email: henrytanojo@gmail.com

134
MDVI
PENDAHULUAN
Penemuan biomolekuler terhadap berbagai penyakit
genetik telah membuka wawasan baru di bidang kesehatan
di antaranya terapi gen, pemahaman terhadap patofisiologi
berbagai zat karsinogenik, proses penyembuhan luka, reaksi
inflamasi kulit, dan fibrosis.1 Terapi gen merupakan bidang
baru dalam bioteknologi untuk mengobati penyakit dengan
target DNA, penggunaannya terutama pada keganasan dan
penyakit genetik yang diturunkan.2
Sesungguhnya seluruh organ tubuh dapat menjadi
sasaran terapi gen, namun kulit adalah organ yang unik dan
menarik karena dapat dijangkau secara langsung. 3,4 Kulit
dapat menjadi target terapi gen baik secara in vivo ataupun
ex vivo.5 Sel kulit mudah diperoleh dan dikembangkan
secara in vitro melalui biopsi.6 Terapi melalui kulit dapat
menghindari metabolisme obat di hepar,7 monitor langsung
terhadap ekspresi gen, dan membuang sel termodifikasi jika
efek samping muncul.8
Beberapa penyakit kulit akibat kelainan mutasi gen
tunggal atau monogenik dan luka kronis merupakan keadaan
yang dapat diberi terapi gen.1 Di samping untuk pengobatan
dermatosis, kulit juga dapat menjadi ‘perantara’ pengobatan
penyakit sistemik akibat polipetida dalam sirkulasi yang
berkurang atau hilang. Polipeptida tersebut adalah tumor
necrosis factor-, insulin-like growth factor II, faktor-faktor
koagulasi, -human chorionic gonadotropin, atau human
growth hormone.1,8
Terapi gen dapat digunakan untuk mengobati penyakit
genetik yang tidak memberikan respons terhadap
pengobatan umumnya, misalnya pada keadaan
imunodefisiensi, kelainan metabolik, atau penyakit dengan
angka harapan hidup tinggi namun kualitas hidup rendah,
serta pengobatan simtomatis jangka panjang (muscular
dystrophy, cystic fibrosis, dan thalassemia).3 Di bidang
dermatologi, junctional epidermolysis bullosa dan
xeroderma pigmentosum merupakan beberapa penyakit
kulit dengan tahap percobaan klinis terapi gen.2
Terapi gen bersama-sama dengan teknologi kultur sel
punca, memberikan pilihan pengobatan di bidang
dermatologi, walaupun masih jauh dari sempurna.
Pengobatan penyakit yang sebelumnya tampak mustahil
kini dapat dilakukan.3
PRINSIP DASAR TERAPI GEN
Terapi gen adalah satu teknik untuk memperbaiki gen
yang rusak dengan tujuan untuk pengobatan. 9,10 Gen
merupakan unit dasar fisis dan fungsional yang diwariskan
dan berada dalam kromosom inti sel.9 Gen terdiri atas rantai
pasangan basa yang mengkode instruksi perakitan berbagai
protein. Ketika terjadi perubahan gen, protein yang dikode
akan berubah dan tidak dapat berfungsi secara normal
sehingga terjadi penyakit genetik.9
135
Vol. 39 No. 3 Tahun 2012; 134 - 140
Pendekatan terapi gen
Terapi gen pada kasus genodermatosis bermanfaat
untuk mengoreksi abnormalitas genetik melalui gene
restoration, gene augmentation, gene correction, dan gene
inhibition. 1,12
Gene restoration adalah teknik penyisipan gen wild-
type (gen murni dan normal) untuk menggantikan gen
abnormal menggunakan vektor virus atau non-virus,
misalnya pada kasus mutasi resesif yang menyebabkan
hilangnya fungsi. Gene augmentation adalah teknik
meningkatkan ekspresi gen yang diperlukan untuk
pengobatan, misalnya pada kasus anemia yang responsif
terhadap pemberian eritropoetin. Gene correction adalah
penyisipan gen untuk mengoreksi susunan yang berubah,
misalnya pada kasus kelainan resesif atau dominan akibat
mutasi titik. Gene inhibition adalah induksi ‘suicide genes’
untuk membunuh sel-sel kanker dengan cara
membangkitkan respons imun misalnya pada karsinoma atau
sarkoma. 1 Terapi gen paling umum dilakukan secara
pendekatan gene restoration.9
Teknik terapi gen
Secara teknik terapi gen memerlukan gen dan vektor.
Vektor adalah pengantar yang dapat membawa masuk gen
secara efisien ke sel target.2 Keberhasilan terapi gen sangat
bergantung pada pemilihan vektor yang tepat.12 Vektor yang
digunakan dapat berupa vektor virus atau vektor non-
virus.10 Kedua macam vektor tersebut masih dipelajari untuk
efektivitas dalam terapi dan kemampuan mengantarkan gen
ke lokasi kerusakan.13
Virus adalah vektor yang paling sering digunakan. Virus
merupakan pengantar alamiah untuk terapi gen. 14,15 Virus
dapat menunjukkan kemampuan mengantarkan materi
genetik ke dalam sel-sel manusia, sehingga kinerja virus ini
dimanfaatkan untuk memanipulasi gen virus dengan materi
gen yang akan digunakan.9 Vektor virus dengan materi
genetik yang dimodifikasi diharapkan dapat secara efisien
menginfeksi sel target tanpa menyebabkan penyakit dan
menyebar ke sel-sel lainnya. Vektor virus yang umum
digunakan adalah retrovirus dan adenovirus. Beberapa
vektor virus lain adalah adeno-associated virus,10 lentivirus
(berkaitan dengan retrovirus dan diturunkan dari human
immunodeficiency virus), atau herpes simpleks.9
Walaupun vektor non-virus lebih aman dibandingkan
vektor virus, namun efisiensi transduksi vektor non-virus
hanya sekitar 30% dibandingkan vektor virus yang sebesar
90%.16 Vektor non-virus yang umum digunakan adalah:9
1. Pengantaran materi DNA secara langsung. Teknik ini
mempunyai keterbatasan karena memerlukan banyak
DNA dan hanya dapat digunakan untuk jaringan
tertentu.
2. Liposom yang membawa DNA dapat masuk ke dalam
membran sel. Li dkk. melaporkan pengantaran
interleukin 4-murine ke tikus transgenik menggunakan
Henry Tanojo, Satya Wydya Yenny. Terapi gen untuk genodermatosis

Tabel 1. Karakteristik bermacam vektor pada terapi gen.

Vektor gen Keunggulan Kelemahan Manfaat klinis
Non-virus (plasmid) -Mudah diproduksi -Efektivitas rendah -Terapi tumor
-Kapasitas DNA besar -Ekspresi gen singkat -Kerusakan gen herediter
-Pemberian secara in vivo -Tidak ada transfer gen -Luka kronis
(tidak traumatis, hemat selektif pada sel target
waktu, dan murah) yang dikehendaki
-Fleksibel untuk beberapa gen
-Dapat diberikan berulang
(non-imunogenik)
Retrovirus -Efisiensi transduksi in vitro -Membutuhkan pemakaian -Kerusakan gen herediter
(oncovirus) tinggi ex-vivo Penyakit sistemik
-Ekspresi gen jangka panjang -Potensi inaktivasi (“biofactory”)
(integrasi gen) Risiko: mutagenesis,
-Kapasitas pengkodean relatif rekombinasi virus
besar (8-9 kb)
Retrovirus -Efisiensi transduksi in vitro -Membutuhkan pemakaian ex- -Kerusakan gen herediter
(lentivirus) tinggi vivo untuk keratinosit (transfer Penyakit sistemik
-Mungkin diberikan secara in gen merupakan prosedur rumit) (“biofactory”)
vivo (sel target: fibroblas) -Potensi inaktivasi
-Ekspresi gen jangka panjang Risiko: mutagenesis,
-Kapasitas pengkodean relatif rekombinasi virus
besar (8-9 kb)
Adeno- -Pemberian dapat secara in -Kapasitas pengkodean kecil -Kerusakan gen herediter
associated vivo (sel target: keratinosit) (4-5 kb) Penyakit sistemik
virus dan ex vivo -Reaksi imun setelah (“biofactory”)
-Ekspresi gen jangka panjang pengobatan in vivo berulang
(memungkinkan integrasi Risiko: mutagenesis?
gen)

Adenovirus -Efisiensi transduksi in vivo -Ekspresi transitory gene -Pengobatan tumor

sangat tinggi (juga pada sel -Toksisitas; imunogenisitas -Luka kronis
yang tidak membelah)
Kapasitas pengkodean besar
(hingga 37 kb)

ultradeformable cationic liposome untuk efek anti-

psoriasis. 7
3. Reseptor sel molekul yang mengandung DNA akan
masuk ke dalam sel target setelah berikatan dengan
reseptor, kemudian sel akan mengambil molekul dan
materi DNA masuk ke dalam inti sel.

Pengantaran terapi gen pada kulit

Cara pengantaran terapi gen dibagi menjadi dua yaitu

in vivo dan ex vivo. Kulit adalah organ yang baik untuk
kedua jenis terapi gen ini.1,4

Pengantaran in vivo

Terapi gen dengan pengantaran in vivo dilakukan

dengan cara mengantarkan materi genetik secara langsung
ke kulit atau jaringan pasien.4 Kerugian teknik ini adalah Gambar 1. Terapi gen pada kulit.

136
MDVI
belum tercapainya keamanan, efisiensi, dan sarana
pengantar yang sesuai untuk transfer materi genetik.
Pengantaran in vivo dapat menggunakan vektor virus dan
vektor non-virus. Vektor non-virus dapat dioleskan secara
topikal, injeksi langsung, dioleskan pada permukaan kulit
yang luka, secara electroporation, dan insersi partikal
bioplastis. 1
Pengolesan topikal dengan vektor berupa plasmid yang
dapat diserap melalui folikel. Efektivitas teknik ini rendah
sehingga penggunaannya masih terbatas untuk vaksinasi.1
Injeksi materi genetik secara langsung ke kulit yang
utuh menggunakan vektor virus dan non-virus dapat
mencapai epidermis, dermis, dan subkutan. Gonzalez-
Gonzalez dkk. memperkenalkan alat berupa protrusion array
device terdiri atas kumpulan microneedle unt uk
mengantarkan small interfering RNA ke sel-sel keratinosit
secara in vivo.17
Pengolesan pada permukaan kulit yang luka atau tidak
utuh melalui dermabrasi dapat membantu pengantaran gen.
Virus diletakkan di bawah luka terbuka (eschar). Pendekatan
ini efektif untuk transfer gen ke sel-sel epidermis dan jaringan
adneksa.10
Pada teknik electroporation kulit dipajan terhadap
muatan elektrik dan secara bersamaan dilakukan injeksi
langsung.10 Pada teknik ini, terapi gen berupa pengantaran
DNA plasmid secara in vivo akan menjadi efektif oleh
perubahan muatan listrik yang bertujuan meningkatkan
permeabilitas membran.18
Bioplastic particle acceleration atau ‘the gene gun’
adalah penggunaan partikel mikro yang diselimuti vektor
untuk imunomodulasi pada vaksinasi dan terapi kanker.10
Pengantaran ex vivo
Pada pengantaran ex vivo, jaringan kulit pasien
dipotong terlebih dahulu, sel keratinosit atau sel fibroblas
dikultur, kemudian ditransplantasikan atau disuntikkan
kembali ke pasien.4 Walaupun teknik ini lebih rumit, mahal,
menimbulkan rasa nyeri, dan meninggalkan jaringan parut,
sebagian besar penelitian difokuskan pada teknik ini karena
menunjukkan banyak keunggulan, di antaranya:1
- Teknik autologous skin grafting yang digunakan pada
pengantaran ex vivo sudah lazim digunakan untuk
pengobatan luka biasa atau luka bakar.
- Efisiensi transfer gen dan jenis sel yang dituju (misalnya:
sel keratinosit atau sel fibroblas) dapat ditentukan
sebelum dihantarkan ke kulit pasien.
- Transfer gen pada kultur bermanfaat untuk merekayasa
sel-sel yang tumbuh melalui vektor virus yang hanya
menginfeksi sel-sel yang sedang membelah.
Pengantaran vektor secara langsung ke pasien dapat
dicegah, sehingga risiko penyebaran sistemik dapat
dihindari.
137
Vol. 39 No. 3 Tahun 2012; 134 - 140
Gambar 2. Perbandingan pengantaran in vivo dan ex vivo.
Keterbatasan terapi gen
Terapi gen merupakan ilmu yang relatif baru dan
mempunyai banyak keterbatasan. Salah satu keterbatasan
berupa ekspresi gen yang hanya berlangsung singkat
sehingga efek terapi dalam jangka panjang belum tercapai.10
Sel epidermis adalah jaringan yang terus memperbaharui
diri, sehingga sel-sel epidermis yang termodifikasi akan
hilang bersama dengan siklus pergantian sel epidermis yaitu
2-4 minggu.2 Hal ini dapat dihindari jika terdapat sel induk
atau progenitor yang terus menerus mentransduksikan
sinyal.13
Keterbatasan lain adalah munculnya mekanisme
pertahanan kulit untuk mencegah masuknya asam
nukleotida asing.10 Terapi gen secara ex vivo dan in vivo
akan menginduksi respons imun. Lu dkk. menemukan
penolakan transfer gen secara in vivo yang didominasi oleh
respons T-helper tipe 1, sedangkan transfer gen secara ex
vivo dikaitkan dengan respons T-helper tipe 2.19 Penggunaan
terapi gen terbatas hanya untuk penyakit monogenik, tidak
untuk kelainan multigenik. Terapi gen juga berisiko
menginduksi tumor.12
Hal lain yang membatasi perkembangan terapi gen
adalah genotoksisitas dan gene silencing terhadap materi
gen. Genotoksisitas adalah proses penghapusan materi gen
yang dianggap berbahaya oleh tubuh, sedangkan gene
silencing adalah proses regulasi untuk menginaktivasi
gen.20
Masa depan penggunaan terapi gen bergantung pada
temuan teknik baru yang dapat meningkatkan efektifitas
transfer gen ke kulit, dengan peningkatan vektor pengantar
gen serta strategi pengantaran gen.1
PENGGUNAAN TERAPI GEN UNTUK
GENODERMATOSIS
Terapi gen menunjukkan berbagai manfaat di bidang
dermatologi, misalnya pengobatan genodermatosis
monogenik; keganasan; luka kulit; pengantaran sitokin,
Henry Tanojo, Satya Wydya Yenny.
hormon, dan faktor pertumbuhan secara sistemik; serta
genetic imunization.10 Sel yang menjadi target pada terapi
gen adalah keratinosit, fibroblas, melanosit, makrofag,
endotel, atau sel punca.
Sel punca merupakan target yang baik untuk
mendapatkan efek terapi gen jangka panjang. Sel punca
pada keratinosit dapat dibagi menjadi holoclones,
meroclones, dan paraclones. 21 Holoclones adalah sel
dengan kapasitas reproduksi tertinggi dan merupakan target
terbaik untuk terapi gen. Paraclones adalah sel dengan
kapasitas dan diferensiasi rendah. Meroclones adalah
campuran keduanya.12
Genodermatosis yang merupakan kandidat terbaik
untuk terapi gen berupa kelainan genetik resesif monogenik,
yaitu dermatosis akibat kerusakan gen tunggal, dan bukan
merupakan interaksi beberapa gen. 6 Pada makalah ini
dibahas penggunaan terapi gen pada beberapa
genodermatosis yang umum ditemukan, telah banyak diteliti,
dan sudah mencapai percobaan klinis, yaitu epidermolisis
bulosa, iktiosis, dan xeroderma pigmentosum.1
Epidermolisis bulosa
Epidermolisis bulosa (EB) adalah kelompok penyakit
lepuh kongenital dengan sejak klinis mulai dari ringan
berupa lepuh pada kulit akibat trauma (EB simpleks) hingga
bentuk parah berupa epidermolisis yang tersebar luas
disertai ulserasi kronis dan pembentukan skar (junctional
EB dan recessive dystrophic EB).22 Terapi gen bertujuan
mengembalikan kadar protein struktural yang hilang.1
Pada penelitian yang dilakukan menggunakan teknik
transfer gen ex vivo pada skin graft manusia atau model
tikus yang mengalami imunodefisiensi, Seitz dkk. melaporkan
keberhasilan transfer gen BP180 pada junctional EB,24
sedangkan Robbins dkk. melaporkan keberhasilan
pengembalian ekspresi laminin-5 β3 secara in vivo pada
junctional EB.13
Mavilio dkk. melakukan percobaan transplantasi biakan
sel epidermis dari sel punca pasien junctional EB yang dapat
Tabel 2. Klasifikasi molekuler epidermolisis bulosa dengan mutasi gen terkait*
Subtipe EB Pola warisan
Simpleks DA, RA
Hemidesmosom RA
- GABEB
- EB-PA
- EB-MD
Junctional RA
Distrofik DA, RA
Keterangan: GABEB: generalized atrophic benign EB; EB-PA: EB dengan atresia pilorikum; EB-MD: EB dengan distrofi muskular;
DA: dominan autosomal; RA: resesif autosomal; KRT5: keratin 5; KRT14: keratin 14; COL17A1: kolagen tipe XVII a1;
BPAG2: bullous pemphigoid antigen 2; LAMB3: laminin b3; ITGB4: integrin b4; PLEC1: plectin 1; ITGA6: integrin a6;
LAMA3: laminin a3; LAMC2: laminin g2; COL7A1: kolagen tipe VII a1.
Terapi gen untuk genodermatosis
dikoreksi melalui retrovirus secara ex vivo. Percobaan ini
menunjukkan hasil toleransi yang baik dan efek terapeutik
dalam jangka waktu cukup lama.25 Pada penelitian tersebut,
Mavilio dkk. melakukan biopsi kulit telapak tangan pasien
junctional EB yang mengalami mutasi titik E210K. Kulit
tersebut ditransduksi dengan vektor retrovirus yang
mengandung DNA laminin b3 sehingga dapat mensintesis
dan mengekspresikan kembali laminin 332. Sel-sel keratinosit
yang telah ditransduksi kemudian ditanam pada kedua
tungkai bawah. Setelah pengamatan jangka panjang selama
3,5 tahun, regenerasi kulit tampak stabil, sehat, dan terkesan
normal dengan sekitar kulit ditandai oleh lesi lepuh kronis
pada umumnya. Pada kulit regenerasi tersebut tidak
didapatkan tanda-tanda peradangan dan melalui uji khusus
sekitar 3 dan 6 bulan pasca transplantasi tidak didapatkan
respons imunitas terhadap kulit regenerasi tersebut. 25
Penelitian oleh Mavilio dkk. ini dapat dikerjakan secara
klinis. Walaupun tidak mengobati kulit secara luas, teknik
ini mampu mengobati daerah-daerah kelainan kulit yang
tidak sembuh.22 Kelemahan percobaan tersebut dikarenakan
hanya dilakukan pada satu pasien, perlu banyak graft untuk
mengobati seluruh permukaan kulit, tidak dapat digunakan
pada permukaan mukosa, dan tidak dapat mengobati
epidermolisis bulosa bentuk dominan autosom.22
Kecacatan pada recessive dystrophic EB (RDEB)
diakibatkan mutasi pada COL7A1, yaitu gen yang mengkode
kolagen tipe VII. Woodley dkk. melaporkan koreksi kolagen
tipe VII pada ekspresi RDEB secara in vivo menggunakan
injeksi fibroblas intra-dermis secara langsung.26 Gen mini
COL7A1 dikembangkan untuk membawa gen ini karena
ukuran gen COL7A1 terlalu besar untuk diangkut oleh vektor
retrovirus.27 Murauer dkk. mentransduksi gen COL7A1
wild-type, secara parsial melalui retrovirus pada sel-sel
keratinosit pasien RDEB dan mendapatkan ekspresi penuh
kolagen tipe 7. 28 Gache dkk. melaporkan keberhasilan
pengobatan RDEB pada dua ekor anjing untuk percobaan
terapi gen secara ex vivo menggunakan vektor retrovirus
yang membawa gen cDNA COL7 wild-type anjing yang
kemudian ditanam kembali ke kulit yang sakit di punggung
Gen
KRT5, KRT14
COL17A1 (BPAG2), LAMB3
ITGB4, PLEC1,ITGA6
PLEC1
LAMA3, LAMB3, LAMC2, COL17A1
COL7A1
138
MDVI
anjing. Setelah dievaluasi selama 2 tahun, tumbuh kulit yang
mengekspresikan COL7 layaknya kulit normal dan
menyebabkan terbentuknya ikatan dermis-epidermis.
Melalui penelitian ini diharapkan dapat dilakukan uji coba
hal serupa pada manusia.29
Goto dkk. menyatakan bahwa sel-sel fibroblas dapat
menjadi sel target yang lebih potensial dibandingkan
dengan sel-sel keratinosit untuk terapi gen COL7A1 pada
pasien dystrophic epidermolysis bullosa.30
Iktiosis
Iktiosis merupakan kelompok penyakit monogenetik
akibat gangguan keratinisasi.31 Gambaran klinis iktiosis
berupa peningkatan produksi skuama, abnormalitas
ketebalan stratum korneum, dan peradangan kulit. Hal ini
menyebabkan skuama yang tebal, kulit kering, hipohidrosis,
konstriksi pada persendian, ektropion, dan eklabium. 32
Penelitian terapi gen sudah pernah dicobakan pada kedua
bentuk iktiosis, yaitu X-linked ichthyosis dan lamellar
ichthyosis. Pengembalian jaringan kulit pasien X-linked
ichthyosis dan lamellar ichthyosis telah dilakukan melalui
percobaan xenograft.1
X-linked ichthyosis (XLI) adalah penyakit genetik
resesif monogenik akibat hilangnya fungsi gen steroid
sulfatase arylsulfatase C (STS).32 Freiberg dkk. melakukan
transfer STS pada pasien XLI secara in vivo menggunakan
vektor retrovirus.33 Pada penelitian tersebut didapatkan
ekspresi protein STS pada pasien XLI dan protein tersebut
berfungsi secara normal. Dalam penelitian tersebut muncul
reaksi imunitas terhadap vektor, bagian yang dikoreksi
menunjukkan efisiensi rendah, serta hilangnya ekspresi gen
dalam waktu 2-7 hari.33
Iktiosis lamelar terjadi akibat mutasi gen yang
mengkode keratinocyte transglutaminase type 1 (TGM1).32
Choate dkk. meneliti model xenograft kulit manusia-tikus,
dan melakukan transfer TGM1 fungsional ke sel-sel
keratinosit pasien iktiosis lamelar kemudian ditanam pada
kulit tikus tanpa imunitas. Keratinosit yang telah diterapi
menunjukkan gambaran epidermis normal, peningkatan
ekspresi fillagrin, dan kulit berfungsi normal.34
Xeroderma pigmentosum
Xeroderma pigmentosum (XP) adalah penyakit
autosom resesif dengan gejala hipersensitivitas terhadap
matahari dan kecenderungan terjadi kanker kulit.35 Hingga
sekarang pengobatannya masih terbatas pada menghindari
pajanan sinar ultraviolet dan tindakan bedah pada tumor
kulit. Mayoritas penelitian terapi gen ditujukan pada
penyakit lepuh sehingga hanya sedikit penelitian yang
berfokus pada XP.2
Mayoritas kelainan pada XP terjadi akibat mutasi salah
satu dari 7 macam gen XP-A hingga XP-G yang diperlukan
139
Vol. 39 No. 3 Tahun 2012; 134 - 140
untuk memperbaiki kerusakan DNA akibat pajanan sinar
matahari.35 Zeng dkk. melakukan terapi gen pada sel-sel
fibroblas pasien XP tipe XP-A, XP-B, dan XP-C
menggunakan retrovirus dan menghasilkan perbaikan DNA
pasien XP.36 Arnaudeau-Bégard dkk. melakukan koreksi
genetik pada sel keratinosit 2 orang pasien XP tipe XP-C
menggunakan vektor retrovirus. 37 Marchetto dkk.
melakukan percobaan pada tikus XP-A dengan
menginjeksikan rekombinan adenovirus yang membawa
DNA XP-A manusia secara in vivo. Percobaan tersebut
menunjukkan bahwa setelah 5 bulan terpajan sinar
ultraviolet-B, tidak ditemukan keganasan pada tikus yang
sudah diterapi gen, sedangkan pada seluruh tikus yang tidak
diterapi muncul karsinoma sel skuamosa. Penelitian tersebut
memberikan harapan kepada pasien XP pada masa depan,
namun terdapat keterbatasan pada penelitian itu yaitu vektor
adenovirus yang dipakai dapat menimbulkan respons imun,
dan ekspresi gen yang singkat membutuhkan terapi gen
berulang.38
Simpulan
1. Berkembangnya teknologi pada bidang kedokteran telah
membuka wawasan terhadap berbagai patofisiologi
penyakit terutama bidang biomolekuler. Walaupun telah
diketahui sejumlah kelainan genetik yang mendasari
genodermatosis, penggunaan terapi gen masih jauh dari
sempurna.
2. Keterbatasan terapi gen hingga kini disebabkan oleh
ekspresi terjadi dalam waktu singkat, munculnya reaksi
imun terhadap terapi gen, genotoksisitas, gene silencing,
hanya dapat dilakukan pada kelainan monogenik, serta
terdapat risiko menginduksi tumor.
3. Pada masa depan, keberhasilan penggunaan terapi gen
didasarkan pada peningkatan efektivitas transfer gen
ke kulit sehingga terjadi perbaikan vektor pengantar gen,
dan strategi-strategi untuk mengoptimalkan efektivitas
terapi.
Percobaan terapi gen telah dilakukan pada beberapa
genodermatosis misalnya epidermolisis bulosa, iktiosis, dan
xeroderma pigmentosum.
DAFTAR PUSTAKA
1. Khavari PA, Rollman O, Vahlquist A. Cutaneous gene transfer
for skin and systemic diseases. J Intern Med. 2002; 252: 1-
10.
2. Hengge UR. Progress and prospects of skin gene therapy: a
ten year history. Clin Dermatol. 2005; 23: 107-14.
3. De Luca M, Pellegrini G, Mavilio F. Gene therapy of inherited
skin adhesion disorders: a critical overview. Br J Dermatol.
2009; 161: 19-24.
4. McGrath JA, McLean WHI. Genetics in relation to the skin.
Dalam: Wolff K, Goldsmith LA, Katz SI, Gilchrest BA, Paller
AS, Leffell DJ, penyunting. Fitzpatrick’s dermatology in
Henry Tanojo, Satya Wydya Yenny.
general medicine. Edisi ke-7. New York: McGraw-Hill; 2008.
h.73-87.
5. Aiuti A, Bachoud-Lévi A, Blesch A, Brenner M, Cattaneo F,
Chiocca E, dkk. Progress and prospects: gene therapy clinical
trials (part 2). Gene Ther. 2007; 14: 1555-63.
6. Carretero M, Escamez M, Prada F, Mirone I, Garcia M,
Holguin A, dkk. Skin gene therapy for acquired and inherited
disorders. Histol Histopathol. 2006; 21: 1233-47.
7. Li J, Li X, Zhang Y, Zhou K, Yang HS, Chen XC, dkk. Gene
therapy for psoriasis in the K14-VEGF transgenic mouse
model by topical transdermal delivery of interleukin-4 using
ultradeformable cationic liposome. J Gene Med. 2010; 2: 481-
90.
8. Therrien JP, Pfutzner W, Vogel JC. An approach to achieve
long-term expression in skin gene therapy. Toxicol Pathol.
2008; 36: 104-11.
9. Human genome project information: gene therapy. 2009.
Disitasi tanggal 17 Juli 2011. Tersedia dari: http://
www.ornl.gov/sci/techresources/Human_Genome/medicine/
genetherapy.shtml
10. Vogel J, Yee C, Darling T. Molecular biology. Dalam: Callen
JP, Horn TD, Mancini AJ, Salasche SJ, Schaffer JV, Schwarz
T, dkk, penyunting. Dermatology. Edisi ke-2. Spanyol:
Mosby-Elsevier; 2008. h.49-62.
11. Gene therapy. 2011. Disitasi tanggal 31 Juli 2011. Tersedia
dari: http://en.wikipedia.org/wiki/Gene_therapy
12. Sarma N. Gene therapy in dermatology. Indian J Dermatol.
2006; 51: 211-6.
13. Robbins PB, Lin Q, Goodnough JB, Tian H, Chen X, Khavari
PA. In vivo restoration of laminin 5 â3 expression and function
in junctional epidermolysis bullosa. Proc Natl Acad Sci USA.
2001; 98: 5193-8.
14. Eming SA, Krieg T, Davidson JM. Gene therapy and wound
healing. Clin Dermatol. 2007; 25: 79-92.
15. Pfützner W. Vectors for gene therapy of skin diseases. J
Dutsch Dermatol Ges. 2010; 8: 582-90.
16. Chen M, Li W, Fan J, Kasaharat N, Woodley DT. An efficient
gene transduction system for studying gene function in primary
human dermal fibroblasts and epidermal keratinocytes. Clin
Exp Dermatol. 2003; 28: 193-9.
17. Gonzalez-Gonzalez E, Speaker TJ, Hickerson RP, Spitler R,
Flores MA, Leake D, dkk. Silencing of reporter gene expression
in skin using siRNAs and expression of plasmid DNA delivered
by a soluble protrusion array device (PAD). Mol Ther. 2010;
18: 1667-74.
18. Isaka Y, Imai E. Electroporation-mediated gene therapy. Expert
Opin Drug Deliv. 2007; 4: 561-71.
19. Lu Z, Ghazizadeh S. Loss of transgene following ex vivo gene
transfer is associated with a dominant Th2 response:
implications for cutaneous gene therapy. Mol Ther. 2007; 15:
954-61.
20. Zahid S, Brownell I. Gene therapy in skin disease. J Drugs
Dermatol. 2007; 6: 1055-8.
21. Barrandon Y, Green H. Three clonal types of keratinocyte
with different capacities for multiplication. Proc Natl Acad
Sci USA. 1987; 84: 2302-6.
22. Featherstone C, Uitto J. Ex vivo gene therapy cures a blistering
Terapi gen untuk genodermatosis
skin disease. Trends Mol Med. 2007; 13: 219-22.
23. Uitto J. Progress in heritable skin diseases: translational
implications of mutation analysis and prospects of molecular
therapies. Acta Derm Venereol. 2008; 89: 228-35.
24. Seitz CS, Giudice GJ, Balding S, Marinkovich M, Khavari
PA. BP180 gene delivery in junctional epidermolysis bullosa.
Gene Ther. 1999; 6: 42-7.
25. Mavilio F, Pellegrini G, Ferrari S, Di Nunzio F, Di Lorio E,
Rechhia A, dkk. Correction of junctional epidermolysis bullosa
by transplantation of genetically modified epidermal stem
cells. Nat Med. 2006; 12: 1397-402.
26. Woodley DT, Krueger GG, Jorgensen CM, Fairley JA, Atha
T, Huang Y, dkk. Normal and gene-corrected dystropic
epidermolysis bullosa fibroblasts alone can produce type VII
colagen at the basement membrane zone. J Invest Dermatol.
2003; 121: 1021-28.
27. Lanuti EL, Wikramanayake TC, Kirsner RS. Overcoming
obstacles for gene therapy for recessive dystrophic
epidermolysis bullosa. J Invest Dermatol. 2011; 131: 5.
28. Murauer EM, Gache Y, Gratz IK, dkk. Functional correction
of type VII collagen expression in dystrophic epidermolysis
bullosa. J Invest Dermatol. 2011; 131: 74-83.
29. Gache Y, Pin D, Gagnoux-Palacios L, Carozzo C, Meneguzzi
G. Correction of dog dystrophic epidermolysis bullosa by
transplantation of genetically modified epidermal autografts.
J Invest Dermatol. 2011; 131: 2069-78.
30. Goto M, Sawamura D, Ito K, dkk. Fibroblast show more
potential as target cells than keratinocytes in COL7A1 gene
therapy of dystrophic epidermolysis bullosa. J Invest
Dermatol. 2006; 126: 766-72.
31. Fernandes NF, Janniger CK, Schwartz RA. X-linked
ichthyosis: an oculocutaneous genodermatosis. J Am Acad
Dermatol. 2010; 62: 480-5.
32. Vahlquist A, Ganemo A, Virtanen M. Congenital ichthyosis:
an overview of current and emerging therapies. Acta Derm
Venereol. 2008; 88: 4-14.
33. Freiberg R, Choate KA. A model of corrective gene transfer in
X-linked ichthyosis. Hum Mol Genet. 1997; 6: 927-33.
34. Choate KA, Medalie DA, Morgan JR, Khavari PA. Corrective
gene transfer in the human skin disorder lamellar ichthyosis.
Nat Med. 1996; 2: 1263-7.
35. Nourgauer J, Idzko M, Panther E, Hellstern O, Herouy Y.
Xeroderma pigmentosum. Eur J Dermatol. 2003; 13: 4-9.
36. Zeng L, Quilliet X, Chevallier-Lagente O, Eveno E, Sarasin A,
Mezzina M. Retrovirus-mediated gene transfer corrects DNA
repair defect of xeroderma pigmentosum cells of
complementation groups A, B, and C. Gene Ther. 1997; 4:
1007-84.
37. Arnaudeau-Bégard C, Brellier F, Chevallier-Lagente O, dkk.
Genetic correction of DNA repair-deficient/cancer-prone
xeroderma pigmentosum group C keratinocytes. Hum Gene
Ther. 2003; 14: 983-96.
38. Marchetto MCN, Muotri AR, Burns DK, Friedberg EC,
Menck CFM. Gene transduction in skin cells: preventing
cancer in xeroderma pigmentosum mice. Proc Natl Acad Sci
USA. 2004; 101: 17759-64.
140