Tugas:

Persiapan & Karakterisasi Enzim

Minggu ke-9 – Lab Bioproses

Tahun 2021
Pati + E1 → Maltodekstrin + E2 → Glukosa
Penurunan Substrat Peningkatan Produk

Perbandingan pengukuran aktivitas alfa-amilase & amiloglukosidase

Kriteria Alfa-amilase Amiloglukosidase

Substrat Pati Maltodekstrin
Komponen yang Substrat (Pati) Produk (Gula)
dimonitor
Reagen yang Larutan Iodine Reagen Asam
digunakan Dinitrosalisilat
Prinsip pengukuran Pengikatan iodin Reaksi DNS dan
dalam heliks pati glukosa
Pengukuran aktivitas ODblanko-ODsample ODsample-ODblanko
relatif (OD)
A. Pengaruh pH terhadap aktivitas enzim

pH %T (alfa-amilase) %T (amiloglukosidase)
4 8 40
5 10 10
6 40 20
7 85 45
8 65 60
9 35 75
Blanko 1 99

1. Tentukan nilai aktivitas relatif (OD) dari masing-masing enzim!

2. Buatlah grafik hubungan antara pH dan nilai aktivitas relatif (OD)
3. Tentukan pH optimum kerja untuk masing-masing enzim!
4. Mengapa pH mempengaruhi kerja enzim?
A. Pengaruh suhu terhadap aktivitas enzim

Suhu %T (alfa-amilase) %T (amiloglukosidase)

30 10 60
40 12 50
50 20 30
60 30 10
70
50 35
80 70 55
90 95 75
100 90 85
Blanko 1 95
1. Tentukan nilai aktivitas relatif (OD) dari masing-masing enzim!
2. Buatlah grafik hubungan antara suhu dan nilai aktivitas relatif (OD)
3. Tentukan suhu optimum kerja untuk masing-masing enzim!
4. Mengapa suhu mempengaruhi kerja enzim?
5. Pada kondisi optimum, jelaskan fenomena Q10!
C. Pengaruh konsentrasi substrat terhadap aktivitas
enzim
Vol S Vol E %T (alfa-amilase) %T (amiloglukosidase) (ml) (ml)

50 0.5 83 64
50 0.4 82 64
50 0.3 80 65
50 0.2 55 70
50 0.1 25 83
50 0 3 95

1. Tentukan nilai aktivitas relatif (OD) dari masing-masing enzim!

2. Buatlah grafik hubungan antara rasio [E/S] dan nilai aktivitas relatif (OD)
3. Tentukan konsentrasi enzim yang disarankan untuk masing-masing enzim!
4. Mengapa peningkatan konsentrasi enzim tidak selalu meningkatkan laju reaksi?
 D. Pengaruh ion logam Ca2+ terhadap panas
(stabilitas) enzim alfa-amilase
Tabung Menit ke- %T (alfa-amilase) %T (alfa-amilase + Ca2+)
1 0 3 3
2 2 48 50
3 4 40 48
4 6 35 46
5 8 30 44
6 10 26 42
7 12 22 40
8 14 18 38
9 16 14 36
10 18 10 34
11 20 7 32

1. Tentukan nilai aktivitas relatif (OD) dari masing-masing enzim!

2. Buatlah grafik hubungan antara waktu pemanasan dan nilai aktivitas relatif (OD)!
3. Apa peran ion Ca2+ dalam menjaga kestabilan enzim alfa-amilase?
E. Pengaruh inhibitor terhadap aktivitas enzim alfa-amilase

Vol S Vol E [H2O2] %T (alfa- %T (alfa-amilase) + (ml) (ml)

(mg) amilase) H 2 O2

50 0.5 25 83 38
50 0.4 25 82 37
50 0.3 25 80 35
50 0.2 25 55 20
50 0.1 25 25 5
50 0 25 3 3

1. Tentukan nilai aktivitas relatif (OD) dari masing-masing enzim!

2. Buatlah grafik hubungan antara rasio [E/S] dan nilai aktivitas relatif (OD)
3. Bagaimana pengaruh inhibitor H2O2 terhadap aktivitas enzim!