Buku Ajar Mikrobiologi Panduan Mahasiswa Farmasi Kedokteran Reaksi Reaksi Trigliserida

cu Ajar
MIKROBIOLdGI
Panduan Mahasiswa farmasi b Kedokteran
Kutipan Pasal 72:
Sanksi Pelanggaran Undang-Undang Hak Cipta
(Undang-Undang No. 19 Tahun 2002)
1. B a r a n g s i a p a d e n g a n - s e n g a j a d a n t a n p a h a k m e l a k u k a n p e r b u a t a n
sebagaimana d i m a k s u d d a l a m Pasal 2 ayat ( 1 ) dipidana dengan pidana
penjara masing-masing paling singkat 1 (satu) bulan dan/atau denda paling
sedikit R p . 1.000.000,00 (satu juta rupiah), atau pidana penjara paling l a m a 7
(tujuh) tahun dan/atau denda paling banyak Rp.5.000.000.000,00 (lima miliar
rupiah).
2. B a r a n g s i a p a d e n g a n s e n g a j a m e n y i a r k a n , m e m a m e r k a n , m e n g e d a r k a n , a t a u
m e n j u a l kepada u m u m suatu ciptaan atau barang hasil pelanggaran H a k Cipt a
atau H a k Terkait sebagaimana dimaksu d pada ayat ( 1 ) dipidana dengan
p i d a n a p e n j a r a p a l i n g l a m a 5 ( l i m a ) t a h u n dan/atau d e n d a p a l i n g b a n y a k
R p . 5 0 0 . 0 0 0 . 0 0 0 , 0 0 ( l i m a ratus juta rupiah).
PENTING DIKETAHUI
Penerbit a d a l a h r e k a n a n p e n g a r a n g u n t u k m e n e r b i t k a n s e b u a h b u k u . B e r s a m a
pengarang, penerbit menciptakan b u k u untuk diterbitkan. Penerbit m e m p u n y a i hak
atas p e n e r b i t a n b u k u tersebut serta d i s t r i b u s i n y a , s e d a n g k a n p e n g a r a n g m e m e g a n g
h a k p e n u h atas k a r a n g a n n y a d a n b e r h a k m e n d a p a t k a n r o y a l t i atas p e n j u a l a n b u k u -
nya dari penerbit.
Percetakan a d a l a h p e r u s a h a a n y a n g m e m i l i k i m e s i n c e t a k d a n m e n j u a l j a s a p e n -
cetakan. Percetakan tidak m e m i l i k i hak apa p u n dari b u k u y a n g dicetaknya kecual'
upah. P e r c e t a k a n t i d a k b e r t a n g g u n g j a w a b a t a s i s i b u k u y a n g d i c e t a k n y a .
Pengarang a d a l a h p e n c i p t a b u k u y a n g m e n y e r a h k a n n a s k a h n y a u n t u k d i t e r b i t k a n d i
sebuah penerbit. P e n g a r a n g m e m i l i k i h a k p e n u h atas k a r a n g a n n y a , n a m u n m e n y e -
rahkan h a k penerbitan d a n distribusi b u k u n y a kepada penerbit yang d i t u n j u k n y a
sesuai batas-batas y a n g d i t e n t u k a n d a l a m perjanjian. Pengarang berhak m e n ^
d a p a t k a n r o y a l t i atas k a r y a n y a d a r i penerbit, sesuai d e n g a n k e t e n t u a n d i dala
perjanjian Pengarang-Penerbit.
Pembajak a d a l a h p i h a k y a n g m e n g a m b i l k e u n t u n g a n d a r i k e p a k a r a n p e n g a r a n g
dan kebutuhan belajar masyarakat. Pembajak tidak m e m p u n y a i h a k mencetak-
tidak m e m i l i k i h a k menggandakan, mendistribusikan, dan menjual b u k u yang
d i g a n d a k a n n y a k a r e n a t i d a k d i l i n d u n g i copyright a t a u p u n p e r j a n j i a n p e n g a r a n g -
p e n e r b i t . P e m b a j a k t i d a k p e d u l i atas j e r i h p a y a h p e n g a r a n g . B u k u p e m b a j a k d a p a t
lebih m u r a h karena mereka tidak perlu mempersiapkan naskah mulai dari pe-
m i l i h a n j u d u l , editing sampai persiapan pracetak, tidak m e m b a y a r royalti, d a n
tidak terikat perjanjian dengan pihak mana pun.
PEMBAJAKAN BUKU ADALAH KRIMINAL!

A n d a jangan menggunakan b u k u bajakan, d e m i menghargai jerih payah para
pengarang y a n g notabene adalah para guru. v
PanduanMahasiswafarmasihKedolderan
DR. Maksum Radji, M.Biomed
PENERBIT BUKU KEDOKTERAN

? EGC
EGC 1955
BUKU AJAR MIKROBIOLOGI:
PANDUAN MAHASISWA FARMASI & KEDOKTERAN
Oleh: DR. Maksum Radji, M.Biomed
Editor: July Manurung, S.Si, Apt
Copy editor: Nuraini Septianti
Diterbitkan pertama kali oleh Penerbit Buku Kedokteran EGC
© 2009 Penerbit Buku Kedokteran EGC
PO. Box 4276/Jakarta 10042
Telepon: 6530 6283
Anggota IKAPI
Desain kulit muka: Teddy Kurniawan, S.Sn
Hak cipta dilindungi Undang-Undang

Dilarang mengutip, memperbanyak, dan menerjemahkan sebagian atau
seluruh isi buku ini tanpa izin tertulis dari penerbit.
Cetakan 2011
Perpustakaan Nasional: Katalog Dalam Terbitan (KDT)

Maksum Radji
Buku ajar mikrobiologi: panduan mahasiswa farmasi &kedokteran /
penulis, Maksum Radji ; editor, July Manurung. —Jakarta : EGC, 2010.
xiii,320hlm. ; 15,5 x 24 cm.
ISBN 978-979-044-105-7
1. Mikrobiologi. 1. Judul. II. Manurung, July.
616.904 1
Isi di luar ta nggung ja wa b percetakan

KATA PENGANTAR
Puji syukur saya panjatkan kepada Tuhan Yang Maha Esa atas limpahan petunjuk
dan bimbingan-Nya sehingga Buku Ajar Mikrobiologi: Panduan Mahasiswa
Farmasi dan Kedokteran ini dapat diterbitkan.
Buku ini dibuat dalam rangka membantu proses belajar mengajar mahasiswa pro-
gram studi farmasi dan kedokteran dalam perkuliahan mikrobiologi. Buku ini tidak
saja digunakan di lingkungan Universitas Indonesia, tetapijuga digunakan di beberapa
program studi farmasi dan kedokteran lainnya di Indonesia.
Kerangka susunan buku ini difokuskan pada pemahaman tentang mikroorganisme
khususnya bakteri, baik jenis, bentuk, sifat, peranan, dan patogenisitasnya, sehingga
dapat diketahui cara pencegahan infeksi dan cara pengobatan penyakit yang ditim-
bulkannya.Uraian mekanisme patogenesis bakteri yang dikelompokkan berdasarkan
organ tubuh manusia membuat buku ini menjadi lebih menarik dan memudahkan para
mahasiwa dalam memahami jenis-jenis bakteri yang dapat menginfeksi organ tubuh
manusia. Selain itu, dibahas pengetahuan tentang manfaat mikroorganisme dalam
bidang kefarmasian, antara lain peranan mikroorganisme dalam pengembangan
sediaan farmasi dan industri makanan, serta analisis keamanan sediaan farmasi dan
makanan secara mikrobiologi.
Dengan terbitnya buku ini, diharapkan dapat memudahkan mahasiswa untuk me-
mahami dengan baik tentang mikroorganisme, khususnya bakteri-bakteri penyebab
penyakit infeksi dan bakteri-bakteri yang bermanfaat dalam bidang farmasi dan
kesehatan.
Saya berterima kasih atas semua masukan dan saran untuk perbaikan dan penyem-
purnaan buku ini. Semoga buku ini dapat bermanfaat.
Terima kasih.
Penulis
DAFTAR ISI
KAT A P E N G A N T A R V
D AF T AR T ABE L X
D AF T AR G A M B A R xii
BAB 1 P E N D AH U LU AN
Latar Belakang 2
Sejarah Mikrobiologi 2
Pengertian dan Peranan Mikroorganisme 4
Klasifikasi Mikroorganisme 6
BAB 2 S T R U KT U R D AN M O R F O LO G I S E L BAKT E R I
Bentuk Sel Bakteri 10
Struktur Utama Makromolekul Bakteri 10
Struktur Sel Bakteri 11
Endospora 19
BAB 3 P E R T U M BU H AN BAKT E R I
Pertumbuhan Bakteri 21
Faktor-Faktor yang Memengaruhi Pertumbuhan Bakteri 21
Media Perbenihan 27
Siklus Pertumbuhan Bakteri 33
Pengukuran Pertumbuhan Bakteri 36
BAB 4 M E T ABO LI S M E BAKT E R I

Metabolisme 43
Jalur Metabolisme Produksi Energi 44
Metabolisme Karbohidrat 45
Metabolisme Lemak dan Protein 52
Identifikasi Jenis Bakteri Berdasarkan Sifat Biokimia 53
Daftar Isi
BAB 5 P E N G E N D ALI AN M I KR O O R G AN I S M E
Tujuan Pengendalian Mikroorganisme 56
Pengendalian Mikroorganisme secara Fisika 56
Pengendalian Mikroorganisme secara Kimia 62
Pengendalian Mikroorganisme dengan Antibiotik 68
Penggunaan Kemoterapi Golongan Antimetabolit 69
Penggunaan Antiseptik 69
Penggunaan Bahan Pengawet 70
Uji Koefisien Fenol 71
BAB 6 G E N E T I KA BAKT E R I
Genetika 74
Sifat dan Fungsi Materi Genetik 74
Struktur DNA dan RNA 74
Dogma Sentral • 76
Kromosom Bakteri 81
Perpindahan Gen pada Bakteri 81
Mutasi 82
Teknologi DNA Rekombinan 85
BAB 7 K L A S I F I K A S I D A N I D E N T I F I KAS I B A K T E R I
Klasifikasi Bakteri 95
Identifikasi Bakteri 96
BAB 8 P AT O G E N E S I S I N F E KS I B A K T E R I
Infeksi Bakteri 107
Habitat Mikroorganisme 107
Patogenisitas, Virulensi, dan Infeksi 109
Perjalanan Penyakit Infeksi 111
Penularan Penyakit Infeksi 113
BAB 9 B A K T E R I P AT O G E N P AD A M AN U S I A
Bakteri Patogen 118
Kelompok Bakteri Patogen 118
B A B 10 B A K T E R I P AT O G E N P AD A S A L U R A N C E R N A
Pendahuluan 125
Escherichia coli 125
Salmonelia typhi , 130
Shigelia dysenteriae 138
Vibrio cholerae 141
Vibrio parahaemolyticus 143
vili D a ftar Isi
Vibrio parahaemolyticus 143

Vibrio vulnificus 144
Clostridium perfrmgens 146
Helicobacter pylori 148
Bacilius cereus 150
B A B 11 B A K T E R I P AT O G E N P AD A S A L U R A N N A P A S
Pendahuluan 153
Streptococcus 153
Patogenesis 156
Streptococcus pneumoniae 159
Haemophilus influenzae 160
Corynebacterium diphtheriae 163
Mycobacterium tuberculosis 165
Bordetella pertussis , 173
Mycoplasma pneumoniae 175
Legionelia pneumophila 177
B A B 12 B A K T E R I P AT O G E N P AD A KU LI T D A N M AT A
Pendahuluan 179
Staphyiococcus aureus 179
Staphyiococcus epidermis 194
Ctilamydia trachomatis 194
Streptococcus pyogenes 199
Pseudomonas aeruginosa 201
Propionibacterium acnes 205
B A B 13 B A K T E R I P AT O G E N P AD A S A L U R A N U R O G E N I T A L
Pendahuluan 208
Neisseria gonorrhoeae 208
Treponema pallidum 211
Leptospira interrogans 217
Gardnerella vaginalis 218
B A B 14 B A K T E R I P AT O G E N P AD A S I S T E M S A R A F
Pendahuluan 223
Neisseria meningitidis 223
Listeria monocytogenes 225
Clostridium tetani 227
Clostridium botulinum ' 228
Mycobacterium leprae 229
D a fta r isi jx
B A B 15 B A K T E R I P AT O G E N P AD A S I S T E M K A R D I O V A S K U L A R
D A N S I S T E M LI M F AT I K
Pendahuluan 234
Yersinia pestis 235
Rickettsia 238
Bacilius anthracis 241
Borrelia burgdorferi 243
Brucelia melitensis 244
B A B 16 P E R AN AN M I KR O O R G AN I S M E D A L A M INDUSTR I
M A K A N A N D AN S E D I AAN F AR M AS I
Pendahuluan 247
Mikroorganisme dalam Bahan Makanan 247
Kerusakan Makanan 250
Pengawetan Bahan Makanan 251
Peranan Mikroorganisme dalam Produksi Bahan Makanan 255
Peranan Mikroorganisme dalam Produksi Sediaan Farmasi 259
B A B 17 AN ALI S I S K E A M A N A N S E D I AAN F AR M AS I
D AN M A K A N A N S E C AR A M I KR O BI O LO G I
Pendahuluan 268
Pengujian Cemaran Bakteri 269
Identifikasi Bakteri Patogen 273
Identifikasi bakteri Escherichia coli 273
Identifikasi bakteri Clostridium perfringens 278
Identifikasi bakteri Salmonelia typhi 280
Identifikasi bakteri Staphyiococcus aureus 282
Identifikasi bakteri Pseudomonas aeruginosa 282
Identifikasi bakteri Bacilius cereus 283
Identifikasi bakteri Vibrio parahaemolyticus 284
Identifikasi bakteri Vibrio cholerae 285
Identifikasi Candida albicans 286
Pengujian Sterilitas Sediaan Farmasi dan Alat Kesehatan 287
Pengujian Potensi Antibiotik 295
Pengujian Potensi Vitamin 301
D AF T AR P U S T AKA 306
I N D E KS 307
DAFTAR TABEL
Tabel 2.1. Makromolekul Penyusun Materi Sel Bakteri 11

Tabel 2.2. Struktur, Fungsi, dan Makromolekul Penyusun
Sel Bakteri 18
Tabel 3.1. Pengaruh Oksigen Terhadap Pertumbuhan Berbagai
Tipe Bakteri 28
Tabel 3.2. Daftar Nilai Duga Terdekat (Most Probable ISumber, MPN)
Menggunakan Tiga Buah Tabung 39
Tabel 4.1. Produk Akhir Fermentasi Asam Piruvat oleh Beberapa
Jenis Mikroorganisme 49
Tabel 5.1. Contoh Hasil Pengamatan Uji Koefisien Fenol 72
Tabel 6.1. Sandi Genetik 80
Tabel 6.2. Beberapa Enzim Endonuklease Restriksi dan Lokasi
Pemotongannya 87
Tabel 7.1. Diferensiasi Zat Warna pada Proses Pewarnaan Gram 99
Tabel 7.2. Hasil Uji Sifat Biokimia untuk Identifikasi Bakteri Enterik 103
Tabel 8.1. Perbedaan Eksotoksin dan Endotoksin Mikroorganisme 110
Tabel 8.2. Beberapa Jenis Toksin yang Diproduksi oleh Bakteri 111
Tabel 9.1. Beberapa Jenis Bakteri yang Dapat Menyebabkan
Penyakit pada Manusia 119
Tabel 9.2. Target Organ Tubuh dan Penyakit Infeksi
yang Disebabkan oleh Bakteri Patogen 120
Tabel 11.1. Beberapa Spesies Streptococcus dan Perbedaannya 154
Tabel 12.1. Infeksi pada Kulit dan Mata yang Disebabkan
oleh Bakteri 179
Tabel 16.1. Jenis Bakteri yang Dapat Mencemari Bahan Pangan 248
Tabel 16.2. Jenis Mikroorganisme dan Jenis Kerusakan pada
Bahan Makanan 251
X
D a fta r Tabel xi
Tabel 16.3. Beberapa Produk Fermentasi Berbagai Jenis Bahan Baku

oleh Mikroorganisme 256
Tabel 16.4. Beberapa Jenis Mikroorganisme Penghasil Antibiotik 260
Tabel 16.5. Beberapa Jenis AsamAmino yang Diproduksi
Melalui Proses Fermentasi 262
Tabel 16.6. Beberapa Produk Steroid yang Dihasilkan Melalui
Biokonversi Substrat oleh Mikroorganisme 264
Tabel 16.7. Beberapa Produk Farmasi yang Diperoleh Melalui
Rekayasa Genetika 266
Tabel 17.1. Jenis Pengujian Mikrobiologi pada Produk Farmasi,
Kosmetika, Makanan, Minuman, dan Alat Kesehatan 268
Tabel 17.2. Daftar Nilai Duga Terdekat (Most Probable Number, MPN)
Menggunakan 3 tabung 276
Tabel 17.3. Daftar Nilai Duga Terdekat (Most Probable Number, MPN)
Menggunakan 5 tabung 278
Tabel 17.3. Jumlah Sampel untuk Pengujian Sterilitas Sediaan 288
Tabel 17.4. Volume Sampel dan Volume Media yang Digunakan
untuk Uji Sterilitas 289
Tabel 17.5. Hasil Pengukuran Diameter Zona Hambatan Menurut
Farmakope Indonesia Edisi IV 300
Tabel 17.6. Pengolahan Data untuk Penghitungan Potensi Antibiotik
Menurut Farmakope Indonesia Edisi IV 301
Tabel 17.7. Mikroba Uji, Media Pengujian, dan Suhu Inkubasi
untuk Penentuan Potensi Beberapa Jenis Vitamin 302
DAFTAR GAMBAR
Gambar 2.1 Struktur sel bakteri Gram-negatif 12

Gambar 2.2 Struktur sel bakteri Gram-positif 12
Gambar 2.3 Struktur dasar flagel bakteri Gram-negatif 13
Gambar 2.4 Dinding sel bakteri Gram-positif 15
Gambar 2.5 Dinding sel bakteri Gram-negatif 15
Gambar 3.1 Graflk pertumbuhan beberapa jenis bakteri 22
Gambar 3.2 Pengaruh tekanan osmotik terhadap sel bakteri 24
Gambar 3.3 Bejana anaerob untuk menginkubasi bakteri anaerob
dalam cawan petri 30
Gambar 3.4 Pembelahan biner pada bakteri 34
Gambar 3.5 Siklus pertumbuhan sel bakteri 35
Gambar 3.6 Cara penghitungan jumlah bakteri dengan
menggunakan Ruang Penghitung 40
Gambar 4.1 Peranan ATPdalam reaksi anabolik dan reaksi
katabolik 44
Gambar 4.2 Bagan sederhana jalur metabolisme pengubahan materi
awal Amenjadi produk akhir F 45
Gambar 4.3 Proses fermentasi dan respirasi glukosa dalam sel 46
Gambar 4.4 Bagan reaksi glikolisis jalur Embden-Meyerhof 48
Gambar 4.5 Siklus Krebs merupakan rangkaian reaksi oksidasi
gugus asetil yang menghasilkan ATP, NADH, dan FADH^ 50
Gambar 4.6 Proses respirasi aerob dapat menghasilkan 38 ATP
dari satu molekul glukosa 51
Gambar 4.7 Jalur katabolisme lemak 53
Gambar 4.8 Berbagai jalur katabolisme senyawa organik
yang digunakan oleh bakteri dalam proses respirasi
untuk menghasilkan energi 54
xii
• D a fta r G a mba r' xiil
Gambar 6.1 Struktur paralel DNA untai ganda 75

Gambar 6.2 Dogma sentral biologi 77
Gambar 6.3 Reaksi penambahan nukleotida pada replikasi DNA 78
Gambar 6.4 Salah satu contoh struktur plasmid yang digunakan
sebagai wahana kloning atau vektor 88
Gambar 6.5 Peranan enzim endonuklease restriksi dan enzim DNA
ligase dalam pembuatan DNA rekombinan 90
Gambar 6.6 Tahapan rekayasa genetika 91
Gambar 6.7 Salah satu teknik untuk menyeleksi koloni bakteri
yang mengandung plasmid DNA rekombinan 92
Gambar 7.1 Skema uji sifat biokimia untuk identifikasi genus
golongan bakteri enterik 102
Gambar 10.1 Mekanisme diare akibat infeksi Salmonelia 134
Gambar 11.1 Streptococcus pneumoniae terlihat sebagai sepasang
diplokokus dengan menggunakan mikroskop elektron 159
Gambar 15.1 Bacilius anthracis dalam pewarnaan Gram (1500 x) 241
Gambar 17.1 Skema pemeriksaan angka lempeng total (ALT) 270
Gambar 17.2 Skema pemeriksaan angka kapang-khamir (AKK) 272
Gambar 17.3 Skema pemeriksaan angka coliform dengan metode
Nilai Duga Terdekat menggunakan deretan 3 tabung 275
Gambar 17.4 Skema pemeriksaan angka coliform dengan metode
Nilai Duga Terdekat menggunakan deretan 5 tabung 277
Gambar 17.5 Rancangan penetapan potensi antibiotik menurut
Farmakope Indonesia edisi III 296
Gambar 17.6 Rancangan penetapan potensi antibiotik menurut
Farmakope Indonesia edisi IV 298
B A B 1
PENDAHULUAN
• Latar Belabang
• Sejarah Mikrobiologi
Pengertian dan Peranan Mikroorganisme
• Klasifikasi Mikroorganisme
1
Bubu Ajar Mikrobiologi: P a ndua n Mahasiswa Farmasi da n Kedoktera n
2
LATAR B E L A K A N G
Mikroorganisme merupakan mahluk hidup yang sangat kecil dan sangat penting
dalam memelihara keseimbangan ekologi dan ekosistem di bumi. Beberapa mikro-
organisme bersifat menguntungkan dan ada pula yang merugikan, baik terhadap
manusia maupun hewan. Sebagai contoh, mikroorganisme yang menguntungkan da-
pat dimanfaatkan dalam pembuatan makanan yang dapat dikonsumsi oleh manusia
maupun hewan. Akan tetapi, tidak sedikit mikroorganisme yang dapat merugikan
manusia karena dapat menimbulkan penyakit yang berbahaya bagi tubuh manusia.
Oleh karena itu, penting sekali untuk mengetahui segala sesuatu mengenai mikroor-
ganisme, baik jenis, bentuk, sifat, peranan, maupun patogenisitas mikroorganisme
untuk menghindari infeksi yang disebabkan oleh mikroorganisme ataupun untuk
mengobati penyakit yang ditimbulkannya. Selain itu, pengetahuan tentang mikroor-
ganisme sangat bermanfaat dalamkehidupan kita sehari-hari dalamrangka menjalani
*hidup yang bersih dan sehat.
SEJARAH MIKROBIOLOGI
Salah satu penemuan penting dalam sejarah biologi terjadi pada tahun 1665, ketika
seorang berkebangsaan Inggris, Robert Hooke, melakukan penelitian terhadap
sepotong gabus tipis dan menemukan bahwa struktur paling kecil dari unit kehidupan
adalah sel. Temuan Hooke ini menandai awal mulanya teori sel yang berbunyi:
''Semua struktur kehidupan disusun oleh seF', Anthony van Leeuwenhoek adalah
orang pertama yang meneliti mikroorganisme hidup menggunakan kaca pembesar.
Anthony van Leeuwenhoek menggambar bentuk "hewan" yang terdapat di air hujan,
di dalamair yang telah dicelupi denganjagung, dan di dalam materi yang dikikis dari
giginya, yang pada akhirnya, gambar tersebut dikenal sebagai bentuk bakteri dan
bentuk protozoa.
Sampai pertengahan abad ke-19, banyak ilmuwan dan filsuf yang percaya bahwa
bentuk kehidupan dapat timbul secara spontan dari bahan yang tidak hidup; mereka
menyebutnya sebagai ''teori generasi spontan".
Perlawanan terhadap teori generasi spontan datang dari Francesco Redi, pada
tahun 1668, yang membuat suatu pembuktian bahwa belatung tidak timbul secara
spontan dari daging mentah. Namun, pernyataan Redi (1668) yang berlawanan dengan
teori generasi spontan tidak dapat meyakinkan para ilmuwan lainnya. Mereka me-
nyatakan bahwa air yang segar dibutuhkan dalam proses generasi secara spontan.
Oleh karena itu, Redi melakukan percobaan yang kedua. Dari percobaan kedua
diketahui bahwa belatung muncul hanya ketika lalat dapat meninggalkan telurnya di
dalam daging tersebut.
Hasil percobaan Redi merupakan bantahan yang serius atas keyakinan yang sudah
sangat lama dipercaya bahwa bentuk kehidupan dapat timbul dari suatu yang tidak
hidup. Bagaimanapun juga, banyak ilmuwan yang masih percaya bahwa organisme
kecil yang cukup sederhana dapat hidup secara spontan dari materi yang tidak hidup.
Pendapat bahwa mikroorganisme dapat hidup secara spontan semakin kuat ketika
John Needhampada tahun 1745 menemukan bahwa meskipun cairan nutrisi (air kaldu
Ba b 1 - P e nda hulua n 3
ayam) telah dipanaskan sebelum dituangkan ke dalam labu atau botol yang tertutup,
larutan yang telah dingin segera penuh dengan mikroorganisme. Needham menyatakan
bahwa mikroba berkembang secara spontan dari larutan tersebut. Dua puluh tahun
kemudian, Lazzaro Spallanzani, seorang ilmuwan Italia percaya bahwa mikroorga-
nisme dari udara kemungkinan masuk ke dalam larutan Needham setelah larutan
tersebut dididihkan. Spallanzani menunjukkan bahwa larutan kaldu yang dipanaskan
setelah dimasukkan ke dalam sebuah tabung atau botol yang tertutup tidak menun-
jukkan adanya pertumbuhan mikroorganisme. Needham menanggapi pernyataan
tersebut dengan menyatakan bahwa unsur yang sangat penting untuk beregenerasi
secara spontan telah dirusak oleh panas dan harus dipertahankan di dalam tabung
yang telah ditutup rapat atau disegel.
Rudolf Virchow menentang teori generasi spontan dengan sebuah konsep ''bioge-
nesis" yang menyatakan bahwa sel-sel yang hidup dapat timbul hanya dari sel hidup
lainnya yang telah ada sebelumnya. Argumentasi tentang generasi spontan terus ber-
lanjut sampai tahun 1861, ketika Louis Pasteur mendemonstrasikan bahwa mikro-
organisme ada di udara dan dapat mengontaminasi larutan yang steril, tetapi udara
sendiri tidak menciptakan atau menghasilkan mikroba. Pasteur menunjukkan bahwa
mikroorganisme dapat ada di dalam bahan yang tidak hidup, misalnya dalam padatan,
cairan, dan udara. Selanjutnya, dia mendemonstrasikan secara meyakinkan bahwa
kehidupan mikroorganisme dapat dihancurkan oleh panas dan metode tersebut dapat
digunakan untuk menghambat kegiatan mikroorganisme di udara. Hasil penemuan ini
menjadi dasar telinili aseptili, yaitu teknik untuk mencegah kontaminasi oleh mikro-
organisme yang tidak diinginkan. Teknik itu sekarang digunakan sebagai standar
praktik di dalam laboratorium dan ruang bedah.
Para ilmuwan percaya bahwa generasi spontan mungkin terjadi di bumi yang
primitif ketika kehidupan pertama kali ada. Akan tetapi, mereka sepakat bahwa hal ini
tidak terjadi dalam lingkungan kehidupan yang sekarang ini.
Tahun 1857 sampai 1914 merupakan "masa emas mikrobiologi''. Selama periode
ini, beberapa penemuan spektakuler telah dilakukan oleh beberapa peneliti. Louis
Pasteur dan Robert Koch merupakan orang-orang yang pertama kali mengungkapkan
sebuah pemahaman bahwa mikrobiologi adalah ilmu pengetahuan. Berbagai temuan
selama periode ini telah diperkenalkan, termasuk temuan mikroorganisme penyebab
berbagai macam penyakit dan peranan kekebalan dalam mencegah dan mengobati
penyakit. Selama masa keemasan mikrobiologi, para ahli mikrobiologi mempelajari
aktivitas biokimia mikroorganisme, mengembangkan teknik-teknik mikroskopik
untuk menunjukkan sifat dan morfologi mikroorganisme, serta mengembangkan vak-
sin dan teknik pembedahan.
Salah satu fenomena yang menggambarkan hubungan antara mikroorganisme dan
penyakit yang dapat ditimbulkan ditunjukkan pada saat sekelompok ilmuwan Perancis
mempertanyakan proses perubahan yang terjadi pada pembuatan anggur dan bir yang
rasanya menjadi masam. Banyak ilmuwan yang percaya bahwa udara yang ada di
sekeliling gula yang terdapat di dalam larutan anggur berubah menjadi alkohol. Louis
Pasteur menemukan bahwa mikroorganisme yang dimasukkan dalam larutan itu, ragi,
Buku Ajar Mikrobiologi: P a ndua n Mahasiswa Farmasi da n Kedoktera n
dapat mengubah gula menjadi alkohol tanpa adanya udara. Proses ini kemudian
dikenal sebagai proses fermentasi, yang digunakan untuk membuat anggur dan bir.
Louis Pasteur juga menemukan bahwa pemanasan berulang bir dan anggur akan
membunuh kebanyakan bakteri yang menyebabkan pembusukan. Proses ini disebut
dengan pasteurisasi^ yang sekarang umumnya digunakan untuk membunuh bakteri
yang dapat membuat busuk dan bakteri yang berpotensi membahayakan di dalam
susu dan minuman beralkohol. Fenomena pembusukan makanan yang disebabkan
oleh mikroorganisme ini merupakan landasan untuk menjelaskan hubungan antara
penyakit dan mikroorganisme.
P Sebuah teori yang mengatakan bahwa mikroorganisme dapat menyebabkan pe-
nyakit pada manusia atau hewan disebut dengan ^teori liuman penyebab penyaliit'\
Teori ini awalnya sulit diterima sebab kebanyakan orang percaya bahwa penyakit
merupakan hukuman bagi orang-orang yang sering melakukan kejahatan. Kebanyakan
orang yang lahir di zaman Pasteur meyakini konsep bahwa mikroba yang tidak terlihat
dapat pergi melalui udara untuk menginfeksi tanaman dan hewan dan dapat berpindah
dari satu orang ke orang lain.
Bukti utama bahwa bakteri dapat menimbulkan penyakit dikemukakan oleh Robert
Koch pada tahun 1876. Koch menemukan Bacilius anthracis dalam darah ternak yang
mati karena penyakit antraks. Koch kemudian mencampurkan bakteri tersebut dengan
media dan disuntikkan ke dalamtubuh hewan yang sehat. Ketika hewan yang sehat ini
menjadi sakit dan mati, Koch mengisolasi bakteri yang ada di dalam darah hewan
tersebut dan membandingkan bakteri itu dengan bakteri asal yang telah diisolasi. Ia
menemukan bahwa kedua darah binatang tersebut mengandung bakteri yang sama.
Selanjutnya, Robert Koch melakukan beberapa percobaan yang secara langsung
membuktikan bahwa mikroorganisme yang spesifik dapat menimbulkan penyakit
yang spesifik pula. Langkah-langkah ini dikenal sebagai "postulat Koch*',
PENGERTIAN DAN PERANAN MIKROORGANISME

Mikroorganisme merupakan mahluk hidup yang sangat kecil dan tidak dapat dilihat
dengan mata telanjang, tetapi dapat dilihat dengan bantuan mikroskop. Dalam penye-
barannya, mikroorganisme dapat ditemukan hampir di setiap tempat. Mikroorganisme
terdiri atas bakteri, fungi, protozoa, alga mikroskopik, dan virus,
r: Sebagian besar mikroorganisme mempunyai peranan yang sangat penting bagi
^ kesejahteraan penduduk dunia dengan membantu keseimbangan hidup organisme dan
bahan kimia di lingkungan kehidupan. Sebagai contoh, mikroorganisme tanah mem-
bantu menghancurkan sampah dan mengubah gas nitrogen dalam udara menjadi
senyawa organik yang dapat didaur ulang dengan bahan-bahan kimia di dalam tanah,
air, dan udara. Mikroorganisme berperan dalam proses fotosintesis yang sangat pen-
ting untuk kehidupan di muka bumi. Manusia dan banyak hewan lain bergantung pada
mikroorganisme untuk menyintesis beberapa jenis vitamin yang dibutuhkan untuk'
metabolisme tubuh. Mikroorganisme juga mempunyai banyak kegunaan untuk tujuan
komersial, misahiya untuk menyintesis produk-produk kimia, seperti aseton, asam
organik, enzim, alkohol, dan obat-obatan. Proses biokonversi untuk memproduksi
Ba b 1 - P e nda hulua n
aseton dan butanol menggunakan mikroorganisme telah dilakukan pada tahun 1914
oleh Chaim Weizermann, seorang ahli kimia kelahiran Rusia yang tinggal di Inggris.
Industri makanan juga menggunakan mikroorganisme untuk memproduksi cuka, acar,
minuman beralkohol, minyak zaitun, kecap, susu, keju, yogurt, dan roti.
Meskipun jumlah mikroorganisme patogen hanya sedikit, pengetahuan tentang
sifat-sifat mikroorganisme patogen sangat penting untuk upaya penemuan obat dan
pemeliharaan kesehatan.
Beberapa peranan mikroorganisme yang menguntungkan bagi manusia, hewan,
dan tumbuhan dijelaskan berikut ini.
D a ur ula ng unsur- unsur pe nting
Martinus Beijerrinck dan Sergei Winogradsky (1880) adalah orang-orang pertama
yang menemukan bahwa bakteri membantu mendaur ulang unsur-unsur penting yang
terdapat di tanah dan udara sehingga mikroorganisme diketahui mempunyai hubungan
yang sangat penting dengan lingkungan. Sekarang, pengetahuan tentang ekologi
mikroorganisme telah berkembang, termasuk dalam mempelajari bagaimana populasi
mikroorganisme berinteraksi dengan tanaman, hewan, lingkungan, polusi air, dan
bahan-bahan kimia lain.
Unsur kimia seperti karbon, nitrogen, oksigen, sulfur, dan fosfor sangat penting
dalam kehidupan. Mikroorganisme mempunyai peranan penting dalam mengubah
unsur-unsur tersebut menjadi bentuk yang dapat digunakan oleh tumbuhan dan hewan.
Mikroorganisme, umumnya bakteri dan fungi, berperan dalammengembalikan karbon
dioksida ke udara, yaitu saat mikroorganisme membusukkan sampah organik, tanaman,
dan hewan yang mati. Alga, sianobakteri, dan tumbuhan tingkat tinggi menggunakan
karbon dioksida dalam proses fotosintesis untuk menghasilkan karbohidrat yang
digunakan oleh hewan, fungi, dan bakteri. Nitrogen di udara yang jumlahnya berlim-
pah harus diubah menjadi bentuk yang dapat digunakan oleh tumbuhan dan hewan.
Perubahan unsur-unsur penting ini hanya dapat terjadi secara alami oleh peranan
mikroorganisme.
P e na nga na n polusi de nga n m e t o d e biore me dia si
Pada tahun 1988, para ilmuwan mulai menggunakan mikroorganisme untuk mengatasi
polusi dan membersihkan sampah beracun yang dihasilkan dalam berbagai proses
industri. Beberapa bakteri dapat memanfaatkan polusi sebagai sumber energi. Selain
itu, bakteri menghasilkan enzim tertentu yang dapat menghancurkan racun menjadi
substansi yang kurang berbahaya. Proses mengatasi polusi dan membersihkan bahan
beracun menggunakan bakteri disebut dengan bioremediasi. Enzim bakteri juga dapat
digunakan untuk menghilangkan sumbatan dalam saluran-saluran pembuangan tanpa
menambahkan bahan kimia yang dapat membahayakan lingkungan. Mikroorganisme
yang sering digunakan untuk bioremediasi adalah Pseudomonas dan Bacilius. Enzim
Bacilius ']\xgdi digunakan sebagai detergen rumah tangga untuk menghilangkan noda
pakaian.
6
P e nce ga ha n se ra ngga da n h a m a t a n a m a n
Selain dapat menyebarkan penyakit, serangga dapat menyebabkan kerugian pada ha-
sil pertanian. Hama tanaman biasanya diatasi dengan menggunakan pestisida kimia.
Akan tetapi, penggunaan bahan kimia tersebut sering kali menimbulkan dampak yangj
kurang baik bagi lingkungan. ^
Penggunaan bakteri untuk melindungi hasil pertanian dari serangan hama sudali;
banyak dilakukan. Bacilius thuringiensis telah digunakan secara luas untuk mem-
basmi hama tanaman, seperti ulat, cacing, dan serangga. Bakteri Bacilius thuringiensis
menghasilkan toksin bagi serangga dan hama tanaman lainnya. Dengan kemajuan
teknik rekayasa genetika gen yang menyandi pembentukan toksin Bacilius thuringien-
sis, toksin tersebut dapat dikloning dalamtanaman yang akan dilindungi dari serangan
hama dan serangga sehingga tanaman tersebut dapat menghasilkan toksin Bacilius
thuringiensis. Jika bagian tanaman yang mengandung toksin itu dimakan oleh hama
atau serangga, hama dan serangga tersebut akan mati.
Penggunaan insektisida yang berasal dari bakteri bersifat ramah lingkungan
sehingga menghindari pencemaran lingkungan.
P e ra na n p e n t i n g d a l a m biote knologi m o d e r n da n re ka ya sa
ge ne tika
Peranan mikroorganisme dalam bidang bioteknologi telah sejak lama dikenal.
Beberapa tahun belakangan ini, bioteknologi telah berkembang pesat melalui sebuah
revolusi rekayasa genetika yang memunculkan bioteknologi modem. Teknologi
DNA rekombinan, kloning DNA, dan rekayasa genetika telah memperluas peranan
bakteri, fungi, virus, dan sel-sel lain dalam berbagai bidang kehidupan. Teknik DNA
rekombinan telah digunakan untuk menghasilkan sejumlah protein, vaksin, dan enzim
alami yang mempunyai potensi besar dalam bidang kesehatan. Hasil teknik DNA
rekombinan yang sangat penting dan menarik perhatian para ilmuwan adalah terapi
gen, yaitu suatu cara memasukkan gen untuk menggantikan gen yang cacat/rusak
di dalam sel manusia. Teknik ini menggunakan virus yang tidak berbahaya untuk
membawa gen baru yang dimasukkan sedemikian rupa ke dalam sel inang sehingga
gen tersebut akan dapat disisipkan dan terintegrasi ke dalam kromosom sel inang
KLASIFIKASI M I K R O O R G A N I S M E |
Penamaan dan klasifikasi mikroorganisme sangat penting untuk memudahkan kita;
mengenali dan mengetahui sifat-sifat mikroorganisme. Pada tahun 1735, Carolus
Linnaeus membuat suatu sistem binomial nomenclature (penamaan binomial) untuk
suatu organisme. Dengan sistem ini, suatu organisme diberi nama dengan dua kata,
yaitu nama genus dan diikuti dengan nama spesies. Genus merupakan kata pertama
yang huruf awalnya adalah huruf kapital, sedangkan nama spesies ditulis dengan huruf
kecil. Kedua gabungan kata ini harus diberi garis bawah atau dicetak miring. Nama
spesies dapat mengacu pada berbagai hal, misalnya menggambarkan bentuk organisme,
penghormatan kepada si penemu, atau identitas dari habitat atau tempat tinggal spesies-
[Bab 1 - Pendahuluan^^
tersebut. Sebagai contoh, Staphyiococcus aureus, bakteri yang umumnya ditemukan

di kulit manusia, mempunyai arti berikut: Staphylo menggambarkan susunan dari
sel-selnya; coccus mengindikasikan bahwa bakteri ini berbentuk bulat; dan aureus,
berasal dari bahasa latin, berarti emas, menunjukkan warna koloni bakteri ini.
Je nis- je nis mil< roorga nisme
Bakteri
Bakteri merupakan organisme uniseluler yang relatif sederhana. Karena materi genetik
tidak diselimuti oleh selaput membran inti, sel bakteri disebut dengan sel prokariot.
Secara urpum, sel bakteri terdiri atas beberapa bentuk, yaitu bentuk basil/batang,
bulat, atau spiral. Dinding sel bakteri mengandung kompleks karbohidrat dan protein
yang disebut peptidoglikan. Bakteri umumnya bereproduksi dengan cara membelah
diri menjadi dua sel yang berukuran sama. Ini disebut dengan pembelahan biner.
Untuk nutrisi, bakteri umumnya menggunakan bahan kimia organik yang dapat
diperoleh secara alami dari organisme hidup atau organisme yang sudah mati. Bebe-
rapa bakteri dapat membuat makanan sendiri dengan proses biosintesis, sedangkan
beberapa bakteri yang lain memperoleh nutrisi dari substansi organik.
Arkea
Sebagaimana bakteri, arkea merupakan sel prokariot. Akan tetapi, struktur dinding sel
arkea umumnya tidak mengandung peptidoglikan. Arkea sering ditemukan dalam
lingkungan berkondisi ekstrem dan dapat dibagi dalam tiga kelompok. Pertama,
kelompok metanogen, yang menghasilkan metana sebagai produk buangan proses
respirasi. Kedua, halofil ekstrem, yang hidup di lingkungan yang mengandung garam
dalam jumlah yang ekstrem. Ketiga, termofil ekstrem, yang hidup dalam air yang
mengandung belerang yang panas. Sampai saat ini belum diketahui dengan pasti
apakah arkea dapat menyebabkan penyakit pada manusia.
Fungi
Fungi merupakan organisme eukariot yang sel-selnya mempunyai nukleus (inti sel)
yang jelas/sejati dan mengandung materi genetik (DNA) yang dikelilingi oleh
membran inti sel. Fungi dapat berupa organisme uniseluler, yang disebut dengan
khamir, atau berupa organisme multiseluler, yang disebut dengan jamur. Fungi multi-
seluler yang berukuran besar kemungkinan akan terlihat seperti tumbuhan, tetapi tidak
dapat melakukan proses fotosintesis seperti kebanyakan tumbuhan. Komponen utama
penyusun dinding sel fungi sejati adalah substansi yang disebut dengan kitin. Fungi
dapat bereproduksi secara seksual dan aseksual. Organisme ini memperoleh makanan
dengan menyerap bahan-bahan organik dari lingkungan hidupnya, misalnya dari
tanah, air, atau tumbuhan dan tanaman yang mereka tumpangi.
Protozoa
Protozoa merupakan organisme eukariot uniseluler. Protozoa bergerak menggunakan
pseupodia (perpanjangan dari sitoplasma organisme ini), flagel, atau silia. Protozoa
mempunyai bentuk yang bervariasi dan hidup sebagai mahluk bebas atau sebagai
parasit yang menyerap senyawa organik dari lingkungannya. Protozoa dapat bere-
produksi secara seksual dan aseksual.
Alga
Alga merupakan organisme eukariot yang dapat berfotosintesis, mempunyai bentuk
yang bervariasi, dan dapat bereproduksi secara seksual dan aseksual. Alga umumnya
uniseluler. Dinding sel alga umumnya mengandung selulosa. Alga dapat hidup dengan
baik di dalam air yang segar dan banyak mengandung garam, dalam tanah, dan dapat
tumbuh bergabung dengan tumbuhan. Dalam proses fotosintesis, alga membutuhkan
cahaya dan udara untuk memproduksi makanan dan untuk pertumbuhan, tetapi
umumnya tidak'membutuhkan senyawa organik dari lingkungan. Hasil proses foto-
sintesis alga berupa oksigen dan karbohidrat yang dibutuhkan oleh organisme lain,
termasuk binatang. Alga berperan penting dalam keseimbangan alam dan ekosistem.
Virus
Virus sangat berbeda dengan mikroorganisme lain karena virus sangat kecil dan hanya
dapat dilihat dengan mikroskop elektron. Struktur virus sangat sederhana, yaitu berupa
partikel virus yang mengandung sebuah inti yang hanya terdiri atas satu tipe asam
nukleat (DNA saja atau RNA saja). Inti dikelilingi oleh suatu lapisan protein. Lapisan
protein terkadang diselimuti oleh membran lemak sebagai selubung. Virus hanya
dapat bereproduksi dengan menggunakan nutrisi dan makromolekul sel inang dan
bersifat parasit yang merugikan sel inang.
j
i iJIWflj
BAB 2
STRUKTUR
DAN M ORFOLOGI SEL
BAKTERI
• Bentub Sel Babteri
• Strubtur Ut ama M abromolehul Babteri
• Strubtur Sel Babteri
• Endospora
9
10 Bubu Ajar Mikrobiologi: P a ndua n Mahasiswa Farmasi da n Kedoktera n
B E N T U K SEL BAKTERI
Bakteri mempunyai bentuk dan ukuran yang sangat beragam. Sebagian besar sel bak-
teri memiliki diameter 0,2-2 mikron dan panjang 2-8 mikron. Berdasarkan bentuk,
bakteri digolongkan menjadi tiga golongan utama, yaitu bentuk kokus (bulat), bentuk
basil (batang), dan bentuk spiral.
Bakteri kokus biasanya berbentuk bulat atau lonjong, hidup sendh-i-sendiri, berpa-
sangan, membentuk rantai panjang atau kubus tergantung cara bakteri itu membelah
diri dan kemudian melekat satu sama lain setelah pembelahan. Kokus yang tetap
berpasangan setelah membelah disebut dengan diplokokus {diplococcus). Strepto-
kokus {streptococcus) adalah kokus yang membelah dalam satu bidang dan tidak
memisahkan diri sehingga berbentuk rantai. Kokus yang membelah dalamtiga bidang
yang saling tegak lurus sehingga membentuk kubus adalah Sarcinae, sedangkan
kokus yang membelah membentuk gugusan atau berkelompok seperti buah anggur
adalah bakteri Staphyiococcus. Bentuk morfologi kokus yang berbeda-beda ini sering
kali digunakan untuk mengidentifikasi jenis bakteri golongan kokus.
Bakteri basil adalah golongan bakteri yang memiliki bentuk seperti batang atau
silinder. Bakteri ini mempunyai ukuran yang sangat beragam. Basil umumnya terlihat
sebagai batang tunggal. Beberapa bakteri basil berpasangan setelah pembelahan sel.
Bentuk basil terdiri atas diplobasilus {diplobacillus), streptobasilus {streptobacillus),
dan kokobasilus {coccobacillus).
Bakteri spiral adalah bakteri yang mempunyai bentuk yang tidak lurus seperti
basil, tetapi mempunyai satu atau beberapa lekukan. Bakteri spiral dibagi menjadi (/)
vibrio, yaitu bakteri berbentuk batang yang melengkung menyerupai bentuk koma,
(//) spirilum, yaitu bakteri yang berbentuk spiral atau pilinan dengan sebya yang
kokoh, dan {iii) spiroketa, yaitu bakteri yang berbentuk spiral dan tubuhnya sangat
lentur sehingga dapat bergerak bebas. Kemampuan bergerak ini dimungkinkan karena
adanya kontraksi yang lentur dari sumbu filamen atau flagel yang terdapat di per-
mukaan dinding sel bakteri.
S T R U K T U R UTAMA MAKROMOLEKUL BAKTERI

Komponen utama struktur bakteri terdiri atas makromolekul, yaitu DNA, RNA,
protein, polisakarida, dan fosfolipida. Makromolekul terdiri atas sub-unit primer,
yaitu nukleotida, asam amino, dan karbohidrat.
Struktur dan urutan makromolekul menentukan fungsi makromolekul tersebut.
Sebagai contoh, urutan nukleotida menentukan sifat genetik dari sel âng terdapat
dalam kromosom DNA; urutan asam amino menentukan sifat dan fungsi protein;
urutan gula dalamlipopolisakarida menentukan sifat dan fungsi spesifik pada golongan
bakteri patogen. Secara keseluruhan, struktur utama makromolekul sangat meme-
ngaruhi sifat-sifat suatu sel dan menentukan perbedaan fungsi sel itu dalam setiap
sistem biologi.
Beberapa jenis makromolekul dapat ditemukan di berbagai struktur sel bakteri,
seperti yang tercantum pada Tabel 2.1.
Bab 2 - Struktur da n Morfologi Sel Bakteri 11
Penyusun Materi Sel Bakteri

M a kromole kul S ub- unit prime r Terdapat pada
Asam nukleat Nukleotida (DNA dan RNA) DNA: nukleoid (kromosom),
plasmid
rRNA: ribosom, mRNA
fRNA: sitoplasma
Protein Asam amino Flagel, pili, dinding sel, membran
sitoplasma, ribosom, sitoplasma
Polisakarida Karbohidrat Kapsul bakteri, badan inklusi,

dinding sel
Fosfolipida Asa m lemak Membran sel
S T R U K T U R SEL B A K T E R I
Berdasarkan struktur selnya, bakteri termasuk dalamgolongan prokariot; sel prokariot
memiliki struktur sel lebih sederhana dibandingkan dengan sel eukariot. Sel prokariot
adalah sel yang tidak memiliki membran inti sel. Ciri-ciri sel prokariot, yaitu materi
genetik (DNA) sel ini tidak terstruktur dalam bentuk nukleus, tetapi dalam bentuk
nukleoid yang tidak diselubungi oleh membran plasma.
Struktur sel bakteri, seperti yang ditunjukkan pada Gambar 2.1 dan Gambar 2.2,
terdiri atas tiga bagian penting, yaitu (1) struktur eksternal sel; (2) struktur dinding sel;
dan (3) struktur internal sel.
S t r u k t u r e kste rna l sel ba kte ri
Pada struktur eksternal sel, bagian-bagian penting di permukaan sel adalah glikokaliks,
flagel, fimbria, dan pili.
Glikokaliks
Beberapa bakteri biasanya mampu mengeluarkan bahan yang dapat menutupi bagian
permukaan selnya, yaitu glikokaliks. Glikokaliks yang berarti selubung gula merupa-
kan istilah umum untuk substansi yang dapat menyelimuti permukaan sel. Glikokaliks
bakteri umumnya mengandung polisakarida dan polipeptida yang biasanya dibuat di
bagian internal sel dan disekresikan ke permukaan sel. Jika terstruktur dan menempel
dengan kuat di seluruh dinding sel, glikokaliks ini disebut dengan kapsul atau selubung
bakteri. Keberadaan kapsul dapat ditunjukkan dengan pewarnaan negatif terhadap
kapsul bakteri.
Pada beberapa spesies bakteri patogen, kapsul mempunyai peranan penting dalam
sifat virulensi bakteri tersebut. Kapsul sering kali dapat melindungi bakteri dari proses
fagositosis oleh sel-sel kekebalan hospes. Sebagai contoh, hanya Bacilius anthracis
yang mempunyai selubung yang mengandung D-asam glutamat yang bersifat patogen
G a mba r 2.1 Struktur sel bakteri Gram-negatif.
dan dapat menyebabkan penyakit antraks, sedangkan yang tidak mempunyai kapsul
tidak dapat menyebabkan penyakit. Oleh karena itu, diasumsikan bahwa kapsul dapat
menghambat fagositosis. Streptococcus pneumoniae yang mempunyai kapsul poli-
sakarida saja yang mampu menyebabkan infeksi pneumonia. Demikian pula, hanya
Klebsiella yang mempunyai kapsul polisakarida yang dapat lolos dari fagositosis serta
mampu menempel dan berkolonisasi di saluran napas.
Glikokaliks yang terdiri atas gula disebut dengan polisakarida ekstraseluler (EPS).
EPS dapat membantu bakteri menempel di berbagai permukaan sel sesuai dengan
Membran plasma
G a mba r 2.2 Struktur sel bakteri Gram-positif.

Ba b 2 - S truktur da n Morfologi Sel Ba kte ri 13
habitatnya untuk mempertahankan hidup. Selain itu, glikokaliks dapat mempertahan-

kan kelembapan dan viskositas sel serta menghambat keluarnya nutrisi dan cairan sel
dari dalam tubuh bakteri.
Flagel
Beberapa jenis bakteri mempunyai flagel sehingga bakteri dapat bergerak dengan
bebas dan berenang dalam cairan habitatnya. Flagel adalah bagian bakteri yang
berbentuk seperti benang dengan diameter 12-30nanometer dan pada umumnya
mengandung protein yang disebut dengan flagelin.
Berdasarkan pola keberadaan flagel pada tubuh sel bakteri, flagel dibagi dalam
empat jenis, yaitu monotrik, flagel tunggal berada pada bagian ujung sel bakteri;
amfitrlk, satu atau lebih flagel berada di kedua bagian polar sel bakteri; lofotrik, lebih
dari satu flagel berada di satu bagian polar sel bakteri; dan peritrik, flagel tersebar di
sekeliling tubuh sel bakteri.
Struktur flagel bakteri terdiri atas 3 bagian, yaitu filamen, hook, dantubuh basal,
seperti ditunjukkan pada Gambar 2.3.
Fimbria dan pili
Beberapa bakteri mempunyai organ tambahan berbentuk benang yang lebih pendek,
lebih lurus, dan lebih kecil daripada flagel, yang berfungsi sebagai alat untuk menempel
dan bukan untuk bergerak, yaitu pili. Organ ini mengandung protein yang disebut
pilin.
Fimbria terdapat di seluruh permukaan sel bakteri. Organ ini berperan dalam
adhesi bakteri dengan sel hospes. Sebagai contoh, fimbria yang terdapat pada sel
Neisseria gonorrfioeae berperan penting dalam proses kolonisasi bakteri pada
membran mukosa sehingga dapat menyebabkan penyakit. Jika tidak mempunyai
G a mba r 2.3 Struktur dasar flagel bakteri Gram-negatif.

14 Buku Ajar Mikrobiologi: Panduan Mahasiswa Farmasi dan Kedokteran
fimbria, bakteri Neisseria gonorrhoeae tidak dapat menempel pada mukosa dan
kolonisasi bakteri tidak terjadi sehingga tidak dapat menyebabkan penyakit.
Pili biasanya lebih panjang daripada fimbria danjumlahnya pada setiap sel bakteri
hanya satu atau dua pili. Pili berperan dalam proses konjugasi sel dalam pemindahan
materi genetik (DNA) antara satu sel bakteri dan sel bakteri lain sehingga terkadang
disebut juga dengan pili seks.
S t r u k t u r d i n d i n g se l ba kte ri
Dinding sel bakteri mempunyai struktur yang sangat kompleks yang terdiri atas
komponen yang kaku dan kuat serta berfiangsi untuk mempertahankan bentuk dan
keutuhan sel. Dinding sel bakteri harus mampu mempertahankan sel ketika tekanan
osmotik di dalam sel lebih tinggi daripada di luar sel. Hampir semua sel prokariot
mempunyai dinding sel. Dinding sel relatif kuat dan lentur sehingga dapat menahan
tekanan osmotik yang tinggi di dalam sel bakteri (berkisar antara 5-20 atmosfer).
I Semua dinding sel bakteri mengandung makromolekul yang disebut peptidoglikan
^ atau murein. Komponen ini memberikan kekuatan yang diperlukan untuk memper-
tahankan keutuhan sel. Peptidoglikan adalah molekul yang sangat besar yang terben-
tuk dari polisakarida sebagai kerangka utama. Polisakarida ini terdiri atas A^-asetil
glukosamin (NAG) dan asam A^-asetil muramat (NAM). Walaupun struktur ikatan
polipeptida dalam peptidoglikan selalu bervariasi, rantai tetrapeptida yang terdiri atas
empat asamamino yang terikat pada asamA^-asetil muramat (NAM) sebagai kerangka
utama selalu ditemui.
Padasetiapmolekul asamA^-asetil muramat, terikat tetrapeptida. Untuk memperkuat
ikatan silang jembatan asam amino, tetrapeptida ini menjadi penghubung menyilang
dengan tetrapeptida yang terikat pada asamA^-asetil muramat yang lain. Selain mem-
pertahankan keutuhan sel, dinding sel bakteri berfungsi sebagai berikut.
• Berperan penting dalamproses pembelahan sel.
• Dinding sel dapat melaksanakan biosintesis sendiri untuk membentuk dinding
k.
sel.
• Beberapa lapisan tertentu pada dinding sel merupakan determinan antigenik dari
bakteri tersebut sehingga dapat dimanfaatkan untuk mengidentifikasi jenis bakteri
secara serologi.
Berdasarkan perbedaan struktur dinding sel dan respons terhadap pewarnaan Gram,
bakteri digolongkan menjadi bakteri Gram-positif dan bakteri Gram-negatif. Struktur
dinding sel bakteri Gram-positif dan bakteri Gram-negatif dapat dilihat pada Gambar
2.4 dan Gambar 2.5.
Dinding sei baiiteri Gram-positif
Dinding sel kebanyakan bakteri Gram-positif terdiri atas beberapa lapisan peptido-
glikan yang tebal dan kaku (20-80 nm). Hal inilah yang membedakan dari dinding sel
bakteri Gram-negatif. Dinding sel bakteri Gram-negatif hanya terdu*i atas lapisan
peptidoglikan yang tipis. Di samping itu, dinding sel beberapa bakteri Gram-positif|i
Bab 2 - Struktur da n Morfologi Sel Bakteri 15
Peptidoglikan <
Membran J
plasma I
Sitoplasma
G a mba r 2.4 Dinding sel bakteri Gram-positif.
mengandung substansi dinding sel yang disebut asam teikoat (teichoic acid). Asam
teikoat ada dua jenis, yaitu asamteikoat ribitol dan asamteikoat gliserol. Fungsi asam
teikoat belum sepenuhnya diketahui, tetapi diperkirakan berperan dalam pertumbuhan
dan pembelahan sel. Di samping itu, asam teikoat mempunyai sifat antigen spesifik
sehingga dapat dimanfaatkan untuk mengidentifikasi spesies-spesies bakteri Gram-
positif secara serologi. Dinding sel bakteri Gram-positif, seperti Streptococcus, me-
ngandung berbagai polisakarida sehingga bakteri ini terbagi dalam beberapa golongan
Streptococcus. Selain mengandung peptidoglikan, dinding sel Mycobacterium (bak-
teri Gram-positif yang bersifat tahan asam) terdiri atas 60%asammikolat, malam, dan
lemak.
Lipopolisakarida
?\ > • > } > > > >

v v i v i v
Membran luar -<
Lipoprotein
Periplasma c
Peptidoglikan 5f Protein pengikat periplasmik êrmease
1
Membran
plasma
Sitoplasma
G a mba r 2.5 Dinding sel bakteri Gram-negatif.

Dinding sel bakteri Gram-negatif 'WKB

Dinding sel bakteri Gram-negatif terdu-i atas satu atau lebih lapisan peptidoglikan dan
membran di bagian luar lapisan peptidoglikan. Dinding sel bakteri Gram-negatif tidak :
mengandung asam teikoat. Karena hanya mengandung sedikit lapisan peptidoglikan, j
dinding sel bakteri Gram-negatif umumnya lebih rentan terhadap guncangan fisik, i
Struktur dinding sel bakteri Gram-negatif lebih rumit daripada dinding sel bakteri i
Gram-positif. Membran luar sel bakteri Gram-negatif terdiri atas lipoprotein, fosfoli-
pida, dan lipopolisakarida. Komponen lipopolisakarida dinding sel bakteri Gram-
negatif sangat penting karena menunjukkan toksisitas pada hewan. Karena bersifat
toksik dan tidak terpisahkan dari sel bakteri, komponen ini disebut endotoksin.
Membran luar dinding sel bakteri Gram-negatif mempunyai fungsi yang spesifik.
Selain dapat menghalangi fagositosis, lapisan membran luar dapat menjadi pengha-
lang beberapa jenis antibiotik, misalnya golongan penisilin, dan dapat menghambat
kerja beberapa enzim dan bahan kimia lain, seperti lisozim, detergen, logam berat,
garam empedu, dan beberapa jenis bahan pewarna. Namun demikian, membran luar
dinding sel tidak sepenuhnya dapat menahan semua substansi yang ada di lingkungan
karena nutrisi yang dibutuhkan bakteri harus dapat masuk ke dalam sel. Permeabilitas
membran luar ditentukan oleh adanya protein tertentu yang disebut dengan porin. Po-
rin merupakan pintu masuk bagi beberapa molekul, antara lain nukleotida, disakarida,
peptida, asam amino, vitamin B^^, dan zat besi.
Komponen lipopolisakarida (LPS) pada membran luar bakteri Gram-negatif mem-
punyai peranan penting. Gugus polisakarida dari lipopolisakarida yang disebut dengan
0-polisakarida berfungsi sebagai antigen spesifik yang dapat dimanfaatkan untuk
membedakan spesies-spesies bakteri Gram-negatif Gugus lipid dari lipopolisakarida
yang disebut dengan lipid-A, bersifat sebagai endotoksin. Jika masuk ke dalam saluran
cerna atau peredaran darah, gugus yang bersifat toksik ini dapat menyebabkan demam
dan renjatan pada penderita.
S t r u k t u r inte rna l se l ba kte ri
Setelah mempelajari struktur eksternal dinding sel bakteri, kitajuga perlu memahami
struktur dan fiingsi bagian internal sel bakteri. Struktur internal sel bakteri terdiri atas
membran sitoplasma, sitoplasma, area nukleus, ribosom, mesosom, dan inklusi.
Membran sitoplasma
Membran sitoplasma merupakan lapisan tipis yang berada tepat di dalam dinding sel
yang melapisi sitoplasma sel. Fungsi penting membran sitoplasma adalah sawar
selektif untuk keluar masuknya senyawa kimia dari luar dan dari dalam sel. Selain
mengandung beberapa enzim yang dapat mencerna nutrisi dan menghasilkan energi
ATP, membran plasma juga berfiingsi untuk menjamin pemisahan materi genetik
(DNA) ke sel anakan pada saat terjadi pembelahan sel. Pada spesies bakteri aerob,
membran sitoplasma merupakan tempat transpor elektron dan oksidasi fosforilasi.
Membran sitoplasma merupakan 8-10%bobot kering sel, yang terdiri atas fosfolipida
dan protein.
^HHHjHH Ba b 2 - struktur da n Morfologi Sel Bakteri
Sitoplasma
Sitoplasma merupakan substansi yang berada di dalam membran plasma dan me-
ngandung 80% air. Selain itu, sitoplasma mengandung protein, enzim, karbohidrat,
lipid, ion-ion anorganik, dan berbagai senyawa berbobot molekul rendah. Struktur
utama sitoplasma prokariot terdiri atas area nukleus yang mengandung DNA, ribo-
som, berbagai inklusi, dan granul. •
Area nukleus
Area nukleus atau nukleolus sel bakteri mengandung DNA untai ganda berbentuk
melingkar yang disebut dengan kromosom bakteri. Berbeda dari kromosom sel euka-
riot, kromosom bakteri tidak dikelilingi oleh membran inti sel dan tidak mengandung
protein histon. Selain kromosom, bakteri sering kali mengandung molekul DNA untai
ganda berbentuk melingkar dan berukuran kecil yang disebut dengan plasmid. Plasmid
merupakan elemen materi genetik ekstrakromosomal yang tidak berhubungan dengan
kromosom bakteri.
Plasmid dapat bereplikasi secara otonom dan tidak bergantung pada kromosom
bakteri. Plasmid biasanya mengandung sekitar 5-100 gen yang tidak begitu berperan
pada ketahanan hidup sel dalam lingkungan tertentu. Namun, plasmid terkadang juga
bermanfaat untuk kehidupan sel bakteri. Plasmid dapat membawa gen yang menye-
babkan resistensi terhadap antibiotik, gen yang memberikan ketahanan terhadap sifat
toksik logam berat tertentu, gen yang menghasilkan toksin, atau gen yang menyintesis
berbagai jenis enzim. Plasmid dapat berpindah dari sel bakteri yang satu ke sel bakteri
yang lain.
Ribosom
Semua sel, baik prokariot maupun eukariot, memiliki ribosom, yang berfungsi penting
untuk sintesis protein. Pengamatan dengan mikroskop elektron menunjukkan bahwa
sitoplasma dipenuhi oleh ribosom sehingga sitoplasma tampak bergranul.
Ribosom pada prokariot berbeda dengan ribosom pada eukariot. Ribosom proka-
riot lebih kecil dibandingkan dengan ribosom eukariot. Ribosom prokariot disebut
dengan ribosomTOS, sedangkan ribosomeukariot disebut dengan ribosom 80S. Huruf
S berarti satuan Svedberg, yang menunjukkan kecepatan relatif sedimentasi dengan
menggunakan sentrifugasi ultra-tinggi. Ribosom 70S terdiri atas dua subunit, yaitu
subunit 30S (kecil) yang mengandung 1 molekul RNAribosomal (rRNA) dan subunit
50S (besar), yang terdiri atas 2 molekul rRNA.
Mesosom
Di beberapa tempat tertentu pada membran plasma, terdapat cekungan atau lekukan
ke dalamyang relatif besar yang disebut dengan mesosom. Lekukan membran plasma
ini dapat memperluas permukaan membran dan berfungsi sebagai tempat kerja enzim
yang terlibat dalamrespirasi dan transpor elektron. Mesosom, yang merupakan tempat
menempelnya kromosom bakteri, juga berfungsi dalam proses pembelahan sel.
18 Buku Ajar Mikrobiologi: P a ndua n Mahasiswa Farmasi da n Kedoktera n
Inklusi
Di dalam sitoplasma sel prokariot, terdapat granul-granul yang mengandung berbagai
substansi, seperti glikogen, metafosfat anorganik, asam polihidroksibutirat, belerang,
atau senyawa yang mengandung nitrogen, yang biasanya digunakan sebagai cadangan
nutrisi bagi sel. Substansi cadangan tersebut dikenal dengan inklusi.
Jenis inklusi tertentu terdapat di dalam satu spesies bakteri, sedangkan spesies lain
tidak memilikinya. Oleh karena itu, jenis inklusi sering kali digunakan untuk meng-
identifikasi spesies bakteri.
Salah satu inklusi yang tersusun atas polimer polimetafosfat berbobot molekul
tinggi disebut dengan granul metakromat karena dapat menyerap warna biru apabila
diwarnai dengan biru metilen. Granul metakromat yang juga disebut dengan volutin
ini berfungsi sebagai sumber fosfat dan energi. Selain terdapat pada bakteri, granul
metakromatik ini juga terdapat pada alga, jamur, dan protozoa.
Struktur, fungsi, dan makromolekul penyusun sel bakteri dapat dilihat pada Tabel
2.2.
Ba gia n sel F ungsi M a kromole kul
Flagel Pergerakan bakteri Protein
Pili seks Mating, transfer DNA secara Protein

konjugasi
Fimbria Alat menempel pada permu- Protein

kaan sel hospes
Kapsul bakteri, glikokaliks, Alat menempel pada permu- Polisakarida, polipeptida
dan lapisan lendir kaan sel hospes, mencegah
fagositosis, sebagai cadangan
nutrisi, dan untuk bertahan
terhadap kekeringan
Dinding sel bakteri Mempertahankan keutuhan isi Peptidoglikan, asam teikoat
Gram-positif sel dan bentuk sel, mencegah
lisis sel
Dinding sel bakteri Mempertahankan keutuhan isi Peptidoglikan, lipopolisaka-
Gram-negatif sel dan bentuk sel, mencegah rida, fosfolipida, protein
lisis sel
Membran plasma Sawar permeabilitas sel, tempat Fosfolipida dan protein
transportasi larutan, produksi
energi, terdapat berbagai jenis
enzim
Ribosom Tempat translasi protein RNA dan protein
Inklusi Tempat penyimpanan nutrisi Karbohidrat, lemak, protein,

dan senyawa anorganik
Kromosom Materi genetik sel DNA
Plasmid Materi genetik ekstrakromo- DNA
somal
ENDOSPORA
Apabila nutrisi yang penting untuk kehidupan bakteri terganggu atau tidak tersedia
dalam lingkungan hidup bakteri, beberapa genus bakteri Gram-positif, seperti Clostri-
dium dan Bacilius, dapat membentuk endospora. Masing-masing sel akan membentuk
endospora, yaitu bentuk sel dalam keadaan istirahat. Endospora bersifat sangat tahan
terhadap panas, kekeringan, zat kimia, dan radiasi. Apabila keadaan lingkungan baik
kembali, endospora akan mengalami sporogenesis dan membentuk sel vegetatif.
Struktur endospora terdiri atas bagian-bagian berikut.
• Core, yang merupakan sitoplasma dari endospora yang di dalamnya mengandung
semua unsur yang dibutuhkan untuk kehidupan bakteri, seperti DNA, ribosom,
enzim, RNA dalamjumlali yang sedikit, dan senyawa-senyawa lain.
• Dinding spora, yaitu lapisan paling dalam endospora yang terdiri atas lapisan
peptidoglikan yang akan menjadi dinding sel ketika endospora mengalami sporo-
genesis menjadi sel vegetatif kembali.
• Korteks, yaitu lapisan tebal yang melapisi endospora.
• Coat, yaitu lapisan mengandung keratin yang melindungi spora dari pengaruh
buruk di lingkungan.
• Eksosporium, yaitu membran lipoprotein yang terdapat pada lapisan paling luar.
Endospora dapat bertahan (dorman) selama ribuan tahun sampai memungkinkan
membentuk sel vegetatif kembali melalui proses germinasi. Proses germinasi dapat
diaktifkan secara fisik ataupun kimia yang dapat merusak lapisan coat endospora.
Enzim-enzim endospora kemudian dapat memecah lapisan-lapisan lain yang me-
lindungi endospora sehingga air dapat masuk ke dalam sel dan mulai terjadi meta-
bolisme. Karena setiap satu sel vegetatif membentuk satu sel endospora pada saat
sporulasi, setelah proses germinasi akan tetap menjadi satu sel. Proses germinasi tidak
menambah jumlah sel vegetatif.
Endospora menarik banyak perhatian dalam bidang kesehatan dan industri ma-
kanan karena endospora sangat resisten terhadap proses-proses yang secara normal
dapat membunuh sel vegetatif, antara lain pemanasan, pengeringan, pembekuan,
penggunaan bahan kimia pengawet, atau radiasi.
BAB 3
PERTUMBUHAN
BAKTERI
• Pertumbuhan Babteri
• Fabtor-Fabtor yang Memengaruhi
Pertumbuhan Babteri
• Media Perbenihan
• Siblus Pertumbuhan Babteri
• Penguburan Pertumbuhan Babteri
Bab 3 - P e rtumbuha n Babteri 21*
P E R T U M B U H A N BAKTERI
Ketika berbicara tentang pertumbuhan bakteri, kita membahas tentang pertambahan
jumlah sel, bukan ukuran sel. Bakteri bertumbuh berarti jumlah bakteri tersebut ber-
tambah dan berakumulasi sebagai koloni yang merupakan populasi yang terdiri atas
miliaran sel. Koloni bakteri dapat dilihat dengan mata telanjang tanpa bantuan mi-
kroskop.
Populasi bakteri dapat menjadi luar biasa banyak dalam waktu yang singkat.
Dengan memahami kondisi ini, kita dapat menentukan cara mengontrol pertumbuhan
bakteri penyebab penyakit atau bakteri perusak makanan. Selain itu, kita juga dapat
memahami bagaimana mendorong pertumbuhan bakteri yang menguntungkan bagi
kehidupan.
Pada bab ini, akan diuraikan beberapa faktor yang memengaruhi pertumbuhan sel
bakteri, jenis-jenis media pertumbuhan buatan, proses pembelahan sel, fase pertum-
buhan, dan metode pengukuran pertumbuhan bakteri.
FAKTOR-FAKTOR YANG MEMENGARUHI
P E R T U M B U H A N BAKTERI
S uhu
Sebagian besar bakteri tumbuh optimal pada suhu tubuh manusia. Akan tetapi,
beberapa bakteri dapat tumbuh dalam lingkungan ekstrem yang berada di luar batas
pertahanan organisme eukariot. Bakteri digolongkan menjadi tiga bagian besar
berdasarkan perbedaan suhu tumbuh,
• Psikrofil, hidup di udara dingin.
• Mesofil, hidup di udara bersuhu sedang.
• Termofil, hidup di udara panas.
Sebagian besar bakteri tumbuh hanya di dalam kisaran suhu pertumbuhan minimum
dan maksimum. Bakteri biasanya tidak dapat tumbuh optimal di luar suhu tersebut.
Tiap bakteri tumbuh pada suhu berikut ini.
• Minimum, suhu terendah bakteri masih dapat tumbuh.
• Optimum, suhu bakteri dapat tumbuh subur.
• Maksimum, suhu tertinggi bakteri masih dapat tumbuh.
Dengan membuat grafik pertumbuhan pada kisaran suhu tertentu, kita dapat melihat
bahwa pertumbuhan bakteri pada suhu optimum biasanya sangat tinggi. Hal ini terjadi
karena suhu yang lebih tinggi akan menginaktifkan sistem enzimatik di dalam sel
bakteri. Berdasarkan suhu pertumbuhan, dikenal bakteri psikrofil, bakteri psikrotrof,
bakteri mesofil, dan bakteri termofil.
Bakteri psikrofii
Bakteri psikrofil adalah bakteri yang tumbuh pada suhu 0°C dengan suhu optimum
IS^'Cdan tidak tumbuh pada suhu kamar (25°C). Bakteri ini sering ditemukan di laut
Bubu Ajar Mikrobiologi: Panduan Mahasiswa Farmasi dan Kedokteran^
22
dalam dan di daerah kutub, serta sering menimbulkan masalah pada pengawetan
makanan.
Bakteri psikrotrof
Bakteri psikrotrof atau psikrofil fakultatif adalah bakteri yang tumbuh pada suhu
dengan suhu optimum 20-30"C dan tidak tumbuh pada suhu lebih dari 40°C . Bakteri
ini sering terdapat dalam makanan yang disimpan pada suhu rendah karena dapat
tumbuh pada suhu lemari es.
Pendinginan merupakan cara yang biasa digunakan untuk mengawetkan makanan.
Metode ini didasarkan pada prinsip bahwa reproduksi bakteri menurun pada suhu
rendah. Walaupun biasanya dapat bertahan pada suhu rendah, bakteri akan berkurang
secara perlahan-lahan. Beberapa spesies berkurang lebih cepat daripada spesies lain.
Suhu ruang pendingin lemari es telah diatur untuk menurunkan pertumbuhan sebagian
besar bakteri perusak dan mencegah pertumbuhan bakteri patogen, meskipun bebe-
rapa bakteri patogen tetap dapat tumbuh.
Bakteri mesofil
Bakteri mesofil adalah bakteri yang tumbuh optimal pada suhu 25-40^C dan merupa-
kan bakteri yang paling banyak ditemukan. Bakteri ini dapat beradaptasi untuk hidup
dan tumbuh pada suhu optimum di sekitar suhu inangnya. Suhu optimum bakteri
patogen umumnya sekitar 37°Cdan suhu inkubator untuk menginkubasi biakan
bakteri ini diatur sekitar ST^C. Bakteri mesofil termasuk sebagian besar bakteri yang
menyebabkan kerusakan dan penyakit.
Termofil
-10 O 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110

Suhu rC)
G a mba r 3.1 Grafik pertumbuhan beberapa jenis bakteri.

Bab 3 - P e rtumbuha n Bakteri
Bakteri termofii
Bakteri termofil adalah bakteri yang dapat tumbuh pada suhu tinggi. Sebagian besar
bakteri ini dapat tumbuh pada suhu 50-60''C. Suhu seperti ini dapat terjadi di dalam
tanah yang disinari matahari dan dalam sumber air panas. Bakteri termofil tidak dapat
tumbuh pada suhu di bawah 45°C . Endospora bakteri ini biasanya tahan terhadap
pemanasan dan dapat bertahan di dalam makanan kaleng.
Grafik pertumbuhan beberapa jenis bakteri dapat dilihat pada Gambar 3.1.
pH
pHadalah derajat keasaman suatu larutan. Kebanyakan bakteri tumbuh subur pada pH
6,5-7,5. Sangat sedikit bakteri yang dapat tumbuh pada pH asam(di bawah pH4). Hal
inilah yang menyebabkan makanan tertentu dapat diawetkan dengan penambahan
suasana asam atau secara fermentasi. Beberapa bakteri disebut dengan asidofil karena
dapat menoleransi keasaman. Salah satu tipe bakteri kemoautotrof yang ditemukan di
dalam drainase air di tambang tembaga dan pabrik oksidasi sulfur dari asam sulfat
dapat bertahan pada pH 1. Jamur dan ragi dapat tumbuh pada rentang pH bakteri,
tetapi pH optimum ragi dan jamur biasanya di bawah bakteri, sekitar pH 5-6. Alka-
linitas juga dapat menghambat pertumbuhan bakteri, tetapi jarang digunakan untuk
upaya pengawetan makanan.
Ketika dibiakkan di laboratorium, bakteri sering memproduksi asam yang biasa-
nya berpengaruh pada pertumbuhan bakteri itu sendiri. Untuk menetralkan asam dan
mempertahankan pH, dapar kimia dapat ditambahkan ke dalam media. Pepton dan
asam amino bekerja sebagai dapar dalam beberapa media perbenihan. Banyak media
yang juga mengandung garam fosfat sebagai dapar. Garam fosfat tidak memengaruhi
bakteri bahkan mengandung fosfor sebagai nutrisi.
T e ka na n osmotik
Bakteri memperoleh semua nutrisi dari cairan di sekitarnya. Bakteri membutuhkan air
untuk pertumbuhan. Tekanan osmotik yang tinggi dapat menyebabkan air keluar dari
dalam sel. Penambahan garam dalam larutan yang akan meningkatkan tekanan os-
motik dapat digunakan untuk pengawetan makanan. Ikan asin, madu, dan susu kon-
densasi manis diawetkan dengan menggunakan mekanisme ini. Konsentrasi garam
atau gula yang tinggi menyebabkan air keluar dari sel bakteri sehingga menghambat
pertumbuhan atau menyebabkan plasmolisis, seperti ditunjukkan pada Gambar 3.2.
Efek tekanan osmotik berhubungan dengan jumlah ion dan molekul terlarut di dalam
larutan.
Beberapa organisme disebut halofil ekstrem karena dapat beradaptasi dengan baik
pada kadar garam yang tinggi. Beberapa bakteri bahkan membutuhkan garam untuk
pertumbuhannya. Bakteri yang seperti ini digolongkan sebagai halofil obligat. Orga-
nisme yang hidup di dalam air bergaram tinggi seperti di Laut Mati membutuhkan
hampir 30% garam. Sengkelit {ose) yang digunakan untuk menginokulasi bakteri
harus dicelupkan terlebih dahulu ke dalam larutan garam. Halofil fakultatif tidak
membutuhkan konsentrasi garam tinggi, tetapi dapat tumbuh dalam larutan garam
M e mbra n
Dinding sel plasma
H,0
H,0
M e mbra n
plasma
Sitoplasma
H.O < C
Sitoplasma
H,0
H,0
NaCI 0 . 8 5 % NaCI 1 0 %
Tekanan osmotik da la m Plasmolisis sel da la m
sel sa ma de nga n kadar larutan hipertonik (NaCI
NaCI 0.85 % 10%). Air ce nde rung
keluar dari sel sehingga
pe rtumbuha n te rha mbat
G a mba r 3.2 Pengaruh tekanan osmotik terhadap sel bakteri.
2%; pada konsentrasi ini, bakteri-bakteri lain kemungkinan mati atau terhambat
pertumbuhannya. Beberapa spesies halofil lain bahkan dapat tumbuh pada kondisi
dengan konsentrasi garam mencapai 15%.
Sebagian besar bakteri harus tumbuh dalam media yang berair. Sebagai contoh,
konsentrasi agar yang digunakan untuk memadatkan media pertumbuhan bakteri
adalah 1,5%(agar merupakan kompleks polisakarida yang diisolasi dari ganggang
laut). Jika konsentrasi agar lebih tinggi, tekanan osmotik akan meningkat sehingga
dapat menghambat pertumbuhan beberapa bakteri. Jika tekanan osmotik di sekitar sel
lebih rendah (misalnya dalam air suling), air akan masuk kedalam sel bakteri melalui
dinding sel bakteri.
F a ktor kimia
Selain air, unsur penting yang dibutuhkan untuk pertumbuhan mikroorganisme adalah
unsur kimia, antara lain karbon, nitrogen, sulfur, fosfor, dan unsur kelumit (misalnya,
Cu, Zn, danFe).
Karbon merupakan unsur penting dalam setiap mahluk hidup. Setengah berat
kering suatu bakteri adalah karbon. Kemoheterotrof mendapatkan sebagian besar
karbon dari sumber energi yang diperoleh, seperti protein, karbohidrat, dan lemak,
sedangkan kemoautotrof dan fotoautotrof mendapatkan unsur karbon dari CO,.
Ba b 3 - P e rt u mb u h a n Ba kte ri 25
Beberapa unsur lain juga diperlukan oleh bakteri untuk sintesis materi seluler,
yaitu nitrogen dan sulfur untuk sintesis protein; nitrogen dan fosfor untuk sintesis
DNA, RNA, dan ATP. Molekul ATPsangat penting untuk penyimpanan dan transfer
energi kimia di dalam sel. Kandungan nitrogen kurang lebih 14%berat kering suatu
sel bakteri, sedangkan sulfur dan fosfor sekitar 4%.
Bakteri menggunakan nitrogen terutama untuk membentuk gugus amino berupa
asam amino dan protein. Sebagian besar bakteri mampu menguraikan protein dan
menyusun kembali asam amino menjadi protein baru yang dibutuhkannya. Bakteri
lainnya menggunakan nitrogen dari ion amonium (NH^^), yang sudah dalam keadaan
tereduksi yang terdapat pada bahan-bahan seluler. Bahkan ada pula bakteri yang
mampu memanfaatkan nitrogen yang berasal dari ion nitrat, NO^", dalam larutan.
Beberapa jenis mikroorganisme dapat menggunakan nitrogen berbentuk gas (N^)
langsung dari atmosfer. Proses ini dinamakan fiksasi nitrogen. Sebagian besar mikro-
organisme yang dapat memanfaatkan N, dapat hidup bebas di dalam tanah, tetapi ada
juga yang bekerja sama secara simbiosis dengan akar tumbuhan kacang-kacangan
seperti semanggi, kedelai, buncis, dan kacang tanah. Nitrogen yang difiksasi pada
proses simbiosis dimanfaatkan, baik oleh tumbuhan maupun oleh bakteri.
Sulfur digunakan untuk sintesis asam amino dan vitamin (misalnya, tiamin dan
biotin). Fosfor merupakan unsur penting untuk sintesis asam nukleat dan fosfolipida
untuk membran sel.
Bakteri juga membutuhkan sejumlah kecil unsur mineral (misalnya K, Mg, Ca, Fe,
Cu, Zn, dan Mo) sebagai kofaktor, yang merupakan unsur penting untuk memfungsi-
kan beberapa jenis enzim. Unsur-unsur ini terdapat dalam air dan komponen media
lain secara alamiah.
O ksige n
Berbagai bentuk kehidupan di bumi mempunyai sistem metabolisme yang menggu-
nakan oksigen untuk respirasi. Proses ini menghasilkan sejumlah besar energi seka-
ligus menetralkan gas-gas beracun.
Mikroorganisme yang menggunakan oksigen menghasilkan lebih banyak energi
dari nutrien yang diperoleh daripada mikroba yang tidak menggunakan oksigen
{anaerob). Bakteri yang membutuhkan oksigen untuk hidup disebut bakteri aerob
obligat. Bakteri aerob obligat memiliki kelemahan, yaitu oksigen sangat sedikit
terlarut di dalam media dan air di lingkungan bakteri tersebut. Oleh sebab itu, ke-
banyakan bakteri aerob telah berkembang sehingga mempunyai kemampuan untuk
bertumbuh tanpa ada oksigen. Mikroorganisme seperti ini disebut anaerob fakultatif.
Dengan kata lain, bakteri anaerob fakultatif dapat menggunakan oksigen bila ada
oksigen, tetapi dapat terus bertumbuh dengan menggunakan proses fermentasi atau
respirasi anaerob apabila oksigen tidak cukup tersedia. Walaupun demikian, efisiensi
produksi energi berkurang ketika tidak ada oksigen. Contoh bakteri anaerob fakultatif
adalah Escherichia coli yang dapat ditemukan di dalam intestin manusia dan pada
beberapa jenis ragi.
26 Bubu Ajar Mikrobiologi: P a nduan MahasisvAâ Farmasi da n Kedoktera n
Bakteri anaerob obligat adalah bakteri yang tidak menggunakan oksigen unraP
menghasilkan energi. Sebagian besar bakteri ini bahkan akan mati bila ada oksigen.
Contoh bakteri anaerob obligat adalah genus klostridium yang dapat menyebabkan ;
tetanus dan botulisme.
Bagaimana mekanisme oksigen dapat bersifat toksik terhadap mikroorganisme? •
Berikut ini diuraikan beberapa bentuk oksigen yang bersifat toksik.
Oksigen singiet 0^
Oksigen singlet adalah molekul oksigen normal (O^) yang telah terpajan dengan energi
yang tinggi sehingga menjadi lebih reaktif. Bentuk oksigen ini terdapat dalam sel-sel i
fagosit yang berperan sangat penting di dalam pertahanan tubuh manusia melawan i
bakteri patogen. Ketika sel fagosit menangkap sel bakteri, sel bakteri tersebut akan
terbunuh oleh oksigen singlet.
Radikal bebas superoksida
Radikal bebas superoksida, O^', terbentuk dalamjumlah kecil selama proses respirasi
normal organisme yang menggunakan oksigen sebagai akseptor elektron untuk mem-
bentuk air (HÔ). Bila ada oksigen, bakteri anaerob obligat juga membentuk radikal
bebas superoksida yang sangat beracun untuk komponen selulernya. Oleh karena itu,
semua organisme yang bertahan hidup dalamkondisi ada oksigen harus menghasilkan
enzim superoksida dismutase (superoxide dismutase = SOD) untuk menetralkan
keberadaan radikal bebas superoksida yang toksik. Bakteri anaerob fakultatif dan
anaerob aerotoleran menghasilkan SODyang mampu mengubah radikal bebas super-
oksida menjadi molekul oksigen (O^) dan hidrogen peroksida (Hfl^).
Hidrogen peroksida
Hidrogen peroksida, H2O2, yang dihasilkan dalam reaksi kimia di atas mengandung
anion peroksida (O^^) yangjuga bersifat toksik dan dapat membunuh bakteri. Karena
hidrogen peroksida yang dihasilkan selama proses respirasi aerobik bersifat toksik,
mikroorganisme telah membentuk enzimuntuk menetralkan zat toksik tersebut, yaitu
enzimkatalase, yang dapat mengubah hidrogen peroksida menjadi air dan oksigen.
Radikal hidroksil
Radikal hidroksil adalah bentuk intermediet lain dari oksigen dan kemungkinan me-
rupakan bentuk yang paling reaktif. Zat ini terbentuk dalam sitoplasma sel melalui
ionisasi radiasi. Kebanyakan respirasi aerobik menghasilkan sedikit radikal hidroksil.
Bakteri anaerob obligat biasanya tidak menghasilkan enzim SOD dan enzim ka-
talase. Karena kondisi aerob kemungkinan akan menyebabkan terjadi akumulasi
radikal bebas superoksida di dalamsitoplasma, bakteri anaerob obligat sangat sensitif ,
terhadap oksigen.
Bab 3 - P e rtumbuha n Bakteri 27
Anaerob aerotoleran tidak menggunakan oksigen untuk pertumbuhan, tetapi dapat

mengatasi kondisi beroksigen dengan cukup baik. Pada umumnya, bakteri aerotoleran
dapat memfermentasi karbohidrat menjadi asam laktat. Asam laktat yang terakumulasi
akan menghambat pertumbuhan kompetitor aerobik lain dan menciptakan lingkungan
yang cocok dan diperlukan oleh bakteri penghasil asam laktat. Contoh paling umum
adalah laktobasilus yang digunakan untuk memproduksi makanan fermentasi, seperti
acar, yogurt, dan keju. Bakteri ini mampu tumbuh dalam kondisi ada oksigen karena
memiliki enzim SODatau mekanisme lain yang setara yang dapat menetralkan bentuk
oksigen yang bersifat toksik.
Beberapa bakteri dapat tumbuh hanya jika kadar oksigen di lingkungannya lebih
rendah daripada kadar oksigen di udara. Di dalam tabung reaksi berisi media nutrisi
padat, bakteri ini akan tumbuh di bagian media yang lebih dalam dari permukaan, di
area oksigen telah berdifusi ke dalam media, tidak pada permukaan yang kaya akan
oksigen, atau di bawah zona yang cukup oksigen. Toleransi yang terbatas ini kemung-
kinan disebabkan oleh kepekaan terhadap radikal bebas superoksida dan peroksida
yang dihasilkan dalam konsentrasi mematikan pada kondisi kaya akan oksigen.
Pengaruh oksigen terhadap pertumbuhan berbagai macam tipe bakteri dapat dilihat
pada Tabel 3.1.
F a ktor p e r t u m b u h a n orga nik

Komponen organik penting yang tidak dapat diproduksi sendiri oleh bakteri disebut
faktor pertumbuhan organik. Komponen ini harus didapatkan langsung dari ling-
kungan pertumbuhan bakteri. Salah satu contoh faktor pertumbuhan organik untuk
manusia adalah vitamin. Kebanyakan vitamin berfungsi sebagai koenzim, yaitu ko-
faktor organik yang dibutuhkan beberapa enzimagar berfungsi dengan optimal. Seba-
gian besar bakteri dapat menyintesis vitaminnya sendiri dan tidak bergantung pada
sumber dari luar. Akan tetapi, beberapa bakteri kekurangan enzim untuk menyintesis
beberapa vitamin tertentu. Untuk bakteri-bakteri seperti ini, vitamin tertentu tersebut
disebut sebagai faktor pertumbuhan organik. Faktor pertumbuhan organik lain yang
dibutuhkan oleh bakteri adalah asam amino, purin, dan pirimidin.
M E D I A P E R B E N I H A N
Media perbenihan adalah media nutrisi yang disiapkan untuk menumbuhkan bakteri
di dalam skala laboratorium. Beberapa bakteri dapat tumbuh dengan baik pada setiap
media perbenihan, sedangkan yang lain membutuhkan media khusus.
Media perbenihan harus dapat menyediakan energi yang dibutuhkan untuk per-
tumbuhan bakteri. Media harus mengandung sumber karbon, nitrogen, sulfur, fosfor,
dan faktor pertumbuhan organik.
Sejumlah bakteri yang diinokulasikan pada sebuah media perbenihan disebut
inokulum. Bakteri yang tumbuh dan berkembang biak dalam media perbenihan itu
disebut biakan bakteri.
Bubu Ajar Mikrobiologi: Panduan Mahasiswa Farmasi dan Kedokteran
M a be l 3 . 1 . Pengaruh O ksige n Terhadap P e rtumbuha n Berbagai Tipe Bakteri

Aerob obligat Anaerob Anaerob Anaerob Mikroaerofilik
fakultatif obligat aerotoleran
Pengaruh Hanya aerob Aerob dan Hanya Hanya Hanya
oksigen yang tumbuh; anaerob yang anaerob anaerob aerob yang
terhadap dibutuhkan O2 tumbuh; yang yang tumbuh, tumbuh;
pertum- pertum- tumbuh; tapi ada yang dibutuhkan
buhan buhan terbe- tidak tumbuh di O 2 dalam
sar di bagian tumbuh di bagian yang kadar ren-
yang ada 0^ bagian yang ada O2 dah
ada O2
Penjelasan Memiliki Memiliki Tidak Memiliki Menghasil-
tentang enzim enzim memiliki enzim SOD kan bebe-
pengaruh katalase dan katalase dan enzim untuk yang rapa bentuk
oksigen enzim S O D enzim SOD menetral- menetralkan oksigen yang
terhadap yang yang kan bentuk bentuk toksik jika
pertum- menetral- menetralkan oksigen oksigen yang terpajan
buhan kan bentuk bentuk yang toksik; toksik; dapat dengan O 2 dari
bakteri oksigen yang oksigen yang tidak dapat tumbuh atmosfer.
toksik; dapat toksik; dapat tumbuh bila dengan
V '
ww
menggu-
nakan O 2
mengguna-
kan O2
ada O2 adanya O 2
41
Lokasi
pertum-
buhan
bakteri
dalam
tabung yang
berisi
media padat
Pola pertum- Pertum- Pertum- Pertum- Pertum- Pertumbuhan

buhan buhan hanya buhan ter- buhan buhan terjadi hanya terjadi
terjadi jika baik di area hanya merata; di area ada O 2
ada O2 ada O2. tetapi terjadi di tidak berkadar
berkadar terjadi di area tidak berpenga- rendah yang
tinggi yang seluruh ada O , ruh telah berdifusi
telah berdifusi bagian ke dalam
ke dalam tabung media.
media
SOD = superoksida dismutase
Media perbenihan harus memenuhi persyaratan sebagai berikut.

1. Harus mengandung nutrisi yang tepat untuk bakteri spesifik yang akan dibiakkan.
2. Kelembapan harus cukup, pHsesuai, dankadar oksigen cukup baik.
3. Media perbenihan harus steril dantidak mengandung mikroorganisme lain.
4. Media diinkubasi pada suhu tertentu.
Bab 3 - P e rtumbuha n Bakteri 29
Jilca ingin menumbuhkan bakteri pada media padat, agar ditambahkan ke dalam media
pertumbuhan. Agar adalah kompleks polisakarida yang diperoleh dari ganggang laut.
Beberapa mikroba mampu menyintesis senyawa agar sehingga membentuk padatan.
Agar mencair pada suhu sekitar 100°Cdan tetap cair sampai suhu 40°C . Di laborato-
rium, media agar dipanaskan dalam tangas air bersuhu 50°C . Pada suhu ini, media
agar cair tersebut dapat dituang di atas bakteri dan tidak akan mematikan bakteri. Agar
yang telah membeku dapat digunakan untuk menginkubasi bakteri yang dapat tumbuh
pada suhu mendekati lOO'^C. Pada suhu ini, agar belum mencair kembali. Sifat ini
sangat berguna untuk menumbuhkan bakteri termofilik.
Media agar biasanya dimasukkan ke dalam tabung reaksi atau ke dalam cawan
petri. Agar yang ditempatkan di dalamtabung reaksi dengan posisi tabung dimiringkan
disebut dengan agar miring (slant). Agar miring mempunyai luas permukaan yang
lebih luas untuk pertumbuhan dibandingkan agar tegak.
Je nis- je nis me dia p e r t u m b u h a n ba kte ri
Media sintetiii
Media ini digunakan untuk menumbuhkan bakteri kemoheterotrof. Organisme yang
membutuhkan banyak faktor pertumbuhan disebutfastidious, misalnya Lactobacillus.
Bakteri ini kadang kala digunakan untuk menentukan kadar vitamin tertentu dalam
sebuah bahan. Pada uji kadar vitamin secara mikrobiologis, media yang digunakan
mengandung semua faktor pertumbuhan yang dibutuhkan oleh bakteri kecuali vitamin
yang diuji. Media, bahan uji, dan bakteri kemudian disatukan. Selanjutnya, pertum-
buhan bakteri diamati. Pertumbuhan bakteri yang sebanding dengan kadar asam laktat
yang dihasilkan bakteri akan sebanding dengan jumlah vitamin dalam bahan uji.
Semakin banyak sel Lactobacillus yang tumbuh, semakin banyak asam laktat yang
dihasilkan, semakin tinggi kadar vitamin yang diuji yang terkandung di dalam
media.
Media iiompielis
Media perbenihan ini biasanya digunakan secara rutin di laboratorium. Media ini
mengandung nutrisi tinggi, yang terdiri atas ekstrak ragi, ekstrak daging atau tum-
buhan, ataupun protein sederhana dari sumber lain. Proteio merupakan sumber energi
bagi bakteri, yaitu dengan mengubah proteinmenjadi asamaminodengan menggunakan
enzim atau asam sehingga protein dapat dicerna oleh bakteri. Vitamin, mineral, dan
bahan organik lain yang diperoleh dari ekstrak daging atau ragi merupakan sumber
nutrisi untuk pertumbuhan bakteri. Media kompleks yang berbentuk cairan disebut
nutrlent broth, sedangkan yang ditambahkan agar disebut nutrient agar.
Media anaerob
Penanaman bakteri anaerob harus menggunakan media spesial yang dikenal dengan
reducing media. Media ini mengandung natrium tioglikolat. Di dalam tabung reaksi
berisi media anaerob, ada bagian yang mengandung oksigen dan ada bagian yang
30 Bubu Ajar Mikrobiologi: P a ndua n Mahasiswa Farmasi da n Kedokteran I
Gambar 3.3 Be j a n a a n a e r o b u n t u k m e n g i n k u b a si b ak t er i a n a e r o b d a l a m c a w a n pet r i .
tidak mengandung oksigen, yaitu di bagian dasar tabung. Sebelum digunakan, media
ini dipanaskan terlebih dahulu perlahan-lahan untuk menghilangkan oksigen yang
terserap.
Sebuah bejana anaerob digunakan untuk menginkubasi bakteri anaerob yang di-
inokulasikan dalam media agar di dalam cawan petri. Cawan petri yang telah diino-
kulasi itu dimasukkan ke dalam bejana anaerob, seperti pada Gambar 3.3.
Oksigen yang terdapat di dalam bejana anaerob dipindahkan atau dihilangkan
dengan cara sebagai berikut.
1. Sachet yang berisi bahan kimia natrium bikarbonat (NaHCO^) dan natrium boro-
hidrida (NaBH^) dibasahi dengan beberapa mililiter air dan dimasukkan dalam
bejana anaerob. Bejana itu kemudian ditutup rapat. Reaksi antara bahan kimia dan
air akan menghasilkan hidrogen dan karbon dioksida. Hidrogen yang terbentuk
akan mengikat oksigen yang ada di dalam bejana anaerob membentuk H,0 dengan
katalisator paladium, sedangkan karbon dioksida akan membantu pertumbuhan
bakteri anaerob.
2. Teknik lain yang digunakan untuk mendapatkan lingkungan anaerob adalah meng-
gunakan enzimoksirase yang akan mereduksi oksigen menjadi air. Oksirase adalah
enzim yang dihasilkan oleh membran plasma bakteri tertentu. Jika enzim oksirase
ditambahkan ke dalam media pertumbuhan, akan diperoleh uxyplate yang dengan
sendirinya bersifat anaerob. Metode ini sering digunakan di laboratorium klinik
karena lebih praktis daripada penggunaan bejana anaerob.
Media bialian lihusus
Banyak bakteri tidak dapat tumbuh dalammedia buatan laboratorium. Sebagai contoh,
Mycobacterium leprae\ sampai sekarang, bakteri ini masih ditumbuhkan di dalam
binatang armadillo, yang memiliki suhu tubuh cukup rendah sehingga cocok untuk
pertumbuhan bakteri Mycobacterium leprae.
Pada umumnya, laboratorium klinik mempunyai teknik untuk membiakkan bakteri
aerob yang membutuhkan CO^dengan konsentrasi lebih tinggi ataupun lebih rendah
daripada konsentrasi CO^di udara. Beberapa cara untuk menaikkan konsentrasi
yang dibutuhkan untuk pertumbuhan bakteri antara lain sebagai berikut.
1. Menggunakan stoples lilin {candle jar), yaitu stoples bertutup kedap yang berisi
lilin yang menyala saat akan diinkubasi. Kadar CO^ akan lebih tinggi karena lilin
yang menyala. Biakan bakteri ditempatkan di dalam stoples dengan lilin yang me-
nyala dan ditutup kedap. Proses pembakaran lilin akan menghabiskan oksigen
yang ada dalam stoples dan api lilin akan mati jika oksigen mencapai kadar teren-
dah, tetapi masih cukup untuk pertumbuhan bakteri. Bakteri yang memerlukan
konsentrasi CO^yang tinggi untuk pertumbuhan disebut kapnofil. Kondisi ber-
kadar oksigen rendah dan kadar CO^tinggi menyerupai kondisi di dalam saluran
intestin tempat bakteri patogen dapat bertahan hidup.
2. Kantong penghasil CO^ (CO, generatingpocket). Cara ini dipakai bila hanya satu
atau dua biakan cawan petri yang akan diinkubasi. Kantong plastik kecil dilengkapi
dengan generator gas kimia yang dapat mengeluarkan CO^ yang dibutuhkan de-
ngan meremas kantong plastik atau membasahinya dengan beberapa mililiter air.
Metode ini sering digunakan untuk membiakkan bakteri mikroaerofilik, misalnya
Campylobacter.
Media seieiitif dan diferensial
Dalam mikrobiologi kesehatan dan klinik, media selektif dan diferensial digunakan
untuk mendeteksi ada tidaknya bakteri spesifik yang berhubungan dengan penyakit
atau sanitasi yang buruk. Media selektif dirancang untuk menekan pertumbuhan bak-
teri yang tidak diinginkan dan mendukung pertumbuhan bakteri yang diinginkan.
Sebagai contoh, bismuth sulfite agar digunakan untuk mengisolasi bakteri Salmonelia
typhi dari tinja. Bismut sulfit tidak hanya menghambat bakteri Gram-positif, tetapi
juga sebagian besar bakteri intestin Gram-negatif.
Zat warna brilliant green secara selektif dapat menghambat bakteri Gram-positif.
Senyawa ini digunakan sebagai komponen dasar media brilliant green agar yang
digunakan untuk mengisolasi salmonela. Sabouraud dextrose agar, yang mempunyai
pH 5,6, digunakan untuk mengisolasi jamur karena sebagian besar bakteri tidak dapat
tumbuh pada pH ini.
Media diferensial memudahkan pembedaan koloni bakteri yang diinginkan dari
koloni lain yang tumbuh pada lempeng media yang sama. Agar darah adalah media
yang mengandung sel darah merah dan sering digunakan oleh para ahli mikrobiologi
untuk mengidentifikasi spesies bakteri yang menghancurkan sel darah merah. Spesies
ini, m\s?i\nydi Streptococcus pyogenes, menyebabkan infeksi saluran napas. Bakteri ini
mampu melisls sel darah merah sehingga terbentuk areajernih di sekitar koloni (beta-
hemolisis).
Karakteristik selektif dan diferensial kadang-kadang dikombinasikan di dalam
satu jenis media. Sebagai contoh, Staphyiococcus aureus yang dapat hidup dalam
kadar NaCI yang cukup tinggi ternyata dapat meragi manitol menjadi asam. Media
mannitolsalt agar yang mengandung 7,5%NaCI dapat digunakan untuk mengisolasi
Staphyiococcus aureus karena media ini dapat menghambat pertumbuhan bakteri
yang lain. Media ini juga mengandung indikator perubahan pH untuk mendeteksi
pembentukan asam selama pertumbuhan bakteri. Jadi, Staphyiococcus aureus dapat
dibedakan dari bakteri lain yang tidak meragi manitol.
Media lamyang bersifat selektif dan diferensial adalah MacConkey agar. Media
ini mengandung asam empedu dan kristal violet yang menghambat pertumbuhan
bakteri Gram-positif Karena media ini juga mengandung laktosa, bakteri Gram-
negatif yang menghasilkan asam dari metabolisme laktosa dapat dibedakan dari bak-
teri sejenis yang tidak meragi laktosa. Kemampuan untuk membedakan bakteri yang
meragi laktosa dari bakteri yang tidak meragi laktosa sangat berguna untuk mem-
bedakan sahnonela patogen dari bakteri lain yang berkerabat.
Media pengayaan
Bakteri biasanya terdapat dalamjumlah yang sangat sedikit dan hampir tidak berkeAf-
bangjika ada mikroorganisme lain yang tumbuh dengan lebih baik. Media pengayaan
digunakan untuk mengisolasi bakteri yang berjumlah sangat sedikit.
Media yang digunakan untuk pengayaan biakan bakteri biasanya dalam bentuk
media cair. Media mi hampir sama dengan media selektif, tetapi dirancang untuk
memperbanyak tipe bakteri yang diinginkan sehingga dapat dideteksi. Media ini juga
digunakan untuk mendukung pertumbuhan bakteri tertentu di dalam biakan cam-
puran.
Untuk mengisolasi mikroorganisme yang berasal dari tanah, misalnya bakteri
yang dapat tumbuh dalamfenol, sampel tanah dimasukkan ke dalammedia pengayaan
yang mengandung fenol sebagai satu-satunya sumber karbon dan energi. Dengan de-
mikian, mikroorganisme yang tidak mampu memetabolisme fenol sebagai sumber
energi tidak dapat tumbuh dengan baik. Setelah diinkubasi selama beberapa hari,
biakan dipindahkan ke dalamlabu lainyang berisi media yang sama. Setelah beberapa
kali pemindahan biakan, populasi yang bertahan akan terdiri atas bakteri yang mampu
memetabolisme fenol.
Tahapan pengayaan adalah upaya yang dilakukan untuk menumbuhkan bakteri
dalam beberapa kali pemindahan ke media yang baru. Ketika biakan pengayaan ter-
akhu*disebarkan di atas media padat yang mengandung komposisi yang sama dengan
media cair, hanya koloni yang mampu menggunakan fenol yang bertahan tumbuh.
Aspek lain teknik ini adalah fenol bersifat toksik terhadap sebagian besar bakteri.
C a ra m e m p e r o l e h bia ka n m u r n i
Spesimen klinik, seperti nanah, sputum, urme, dan tinja, mengandung berbagai jenis
mikroorganisme, demikian pula dengan sampel tanah, air, dan makanan.
Secara teoretis, koloni bakteri yang tumbuh berasal dari spora tunggal atau sel ve-
getatif ataupun sekelompok bakteri yang sama dan saling berdekatan. Metode isolasi
yang umum digunakan untuk mendapatkan biakan mumi adalah penanaman di atas
media agar menurut metode lempeng gores {streakplate method). Sengkelit inokulasi
digunakan untuk membuat goresan di atas media dengan sedemikian rupa sehingga
setelah diinkubasi akan menghasilkan pertumbuhan koloni bakteri yang terpisah-
pisah. Koloni yang terpisah tersebut dipindahkan ke dalam media baru sehingga di-
peroleh biakan mumi yang hanya terdiri atas satu jenis bakteri.
P e n y i m p a n a n bia ka n ba kte ri
Cara yang umum dilakukan untuk menyimpan dan mengawetkan biakan bakteri un-
tuk jangka panjang adalah liofilisasi atau penyimpanan di dalam deep freezer. Deep
freezing adalah suatu proses pembekuan cepat, yaitu biakan bakteri dibekukan pada
suhu -50°Csampai dengan -90°C . Liofilisasi dilakukan dengan membekukan biakan
bakteri pada suhu -54°Csampai -72°Cdan air biakan dihilangkan dengan vakum
tinggi (sublimasi). Serbuk bakteri yang telah mengalami proses liofilisasi dapat ber-
tahan tahunan. Bakteri tersebut dapat dihidupkan kembali kapan saja dengan mela-
kukan hidrasi menggunakan media cair yang sesuai.
S I K L U S P E R T U M B U H A N B A K T E R I
P e mbe la ha n ba kte ri
Pertumbuhan bakteri menunjukkan pertambahan jumlah bakteri, bukan pertambahan
ukuran sel. Bakteri bereproduksi dengan pembelahan biner. Beberapa spesies bakteri
bereproduksi dengan membentuk sel anakan (budding). Sel anakan ini dibentuk dan
membesar sampai berukuran sama dengan sel induknya, kemudian memisah, seperti
pada Gambar 3.4. Beberapa bakteri berfilamen bereproduksi dengan membuat rantai
konidiospora pada ujung filamen. Beberapa spesies berfilamen membentuk fragmen
sederhana dan fragmen tersebut menandakan adanya pertumbuhan sel baru.
W a k t u ge ne ra si (generation time)
Waktu generasi atau waktu perbanyakan bakteri adalah waktu yang dibutuhkan oleh
satu sel bakteri untuk membelah dari satu sel menjadi dua sel. Reproduksi pembelahan
sel tersebut adalah pembelahan biner, yang sejauh ini merupakan mekanisme yang
umum terjadi. Sel bakteri dapat membelah dari satu sel menjadi dua, dari dua sel
menjadi empat, dan dari empat menjadi delapan, dan seterusnya. Oleh karena itu,
penggandaan {doubling time) suatu populasi bakteri dikatakan sebagai penggandaan
eksponensial.
Waktu yang dibutuhkan oleh sebuah sel untuk membelah sangat bervariasi di
antara organisme dan sangat bergantung pada kondisi lingkungan, antara lain suhu.
Sebagian besar bakteri mempunyai waktu perbanyakan 1-3 jam, tetapi ada juga yang
membutuhkan waktu lebih dari 24 jam tiap generasi. Jika penggandaan terjadi setiap
20 menit, sebagaimana yang terjadi pada Eschericliia coli, setelah 20 generasi, sebuah
|34 Bubu Aja r M ikrobiologi: P a ndua n Mahasiswa Farmasi da n Ke dokte ra n
Sel memanjang dan

DNA mengalami
replikasi
c ^ ^ ^ ^ ^ DNA
Dinding sel
Dinding sel dan

membran plasma
mulai membelah
Terbentuk dinding sel

yang memisahkan
DNA
Sel membelah
G a mba r 3.4 Pembelahan biner pada bakteri.
sel awal tunggal akan meningkat menjadi lebih dari I juta sel, dalam waktu kurang
lebih 7jam. Dalam 30generasi atau selama 10jam, populasi bakteri akan menjadi I
miliar dan dalam 24jam akan berkembang menjadi 10-'. Grafik pertumbuhan bakteri
seperti ini sangat sulit digambarkan jika menggunakan angka aritmetika biasa. Oleh
sebab itu, skala logaritma lebih umum digunakan untuk membuat grafik pertumbuhan
bakteri.
Fase p e r t u m b u h a n
Setelah bakteri diinokulasikan ke dalam media pertumbuhan cair, jumlah populasi
bakteri dapat dihitung pada interval waktu tertentu. Dengan demikian, dapat dibuat
kurva pertumbuhan sel bakteri pada interval waktu tertentu, seperti yang terlihat pada
Gambar 3.5. Fase pertumbuhan bakteri terdiri atas fase lag, fase log, fase stasioner,
dan fase kematian.
Fase lag
Fase ini merupakan fase awal, yaitu jumlah sel sangat sedikit karena sel belum meng-
alami pembelahan sel dalam media yang baru. Fase lag ini dapat berlangsung selama
I jam atau beberapa hari.
Bab 3 - P e rtumbuha n Bakteri 35l
P
e
r
Fase st asi o ner
u
m
b
u
h
a
n
(log)
O 5 10
Waktu O a m )
G a mba r 3.5 Siklus pertumbuhan sel bakteri.
Fase log
Pada fase ini, sel mulai membelah dan memasuki masa pertumbuhan atau penambahan
jumlah sel secara logaritmik dan disebut dengan fase eksponensial. Reproduksi seluler
paling aktif pada fase ini dan menunjukkan waktu generasi yang konstan sehingga
grafik pertumbuhan berupa garis lurus. Metabolisme sel paling aktif pada fase log.
Oleh karena itu, beberapa perlakuan terhadap sel, baik untuk isolasi protein tertentu
dari dalam sel maupun manipulasi sel, sering dilakukan pada fase log.
Selama fase log, bakteri menjadi lebih sensitif terhadap lingkungan yang buruk.
Sebagai contoh, radiasi dan antibiotik dapat memengaruhi beberapa tahap penting
dalam proses pertumbuhan sel selama fase ini.
Fase stasioner
Bila pertumbuhan berlanjut tanpa terkontrol, dapat dihasilkan jumlah sel yang sangat
besar. Sebagai contoh, secara teoretis, sel bakteri dengan berat 9,5 x 10'^ g per sel
yang membelah setiap 20 menit dapat berkembang menjadi populasi sel dengan berat
mencapai setara dengan 80.000 ton hanya dalam waktu 25,5 jam. Namun demikian,
kenyataannya, hal tersebut tidak terjadi. Pada akhirnya, tingkat pertumbuhan melam-
bat, jumlah sel yang mati mengimbangi jumlah sel yang baru dan populasi menjadi
stabil. Aktivitas metabolisme juga melambat pada fase ini. Periode keseimbangan ini
disebut dengan fase stasioner.
Kekurangan nutrisi, akumulasi produk sisa, dan perubahan pHyang bersifat toksik
bagi sel dianggap menjadi penyebab berhentinya pertumbuhan eksponensial sel.
Dengan bantuan alat khusus yang disebut dengan kemostat {chemostat\ suatu populasi
dapat tetapberada dalamfase pertumbuhan eksponensial dengan memindahkan media
yang sudah terpakai dan mengganti media itu dengan media baru. Teknik biakan ber-
kelanjutan ini dipakai dalam industri fermentasi.
Fase kematian
Jumlah kematian sel pada akhirnya akan melampaui jumlah sel baru yang terbentuk
danpopulasi sel mulai memasuki fase kematian atau fase penurunan. Fase ini berlanjut
sampai populasi menyusut menjadi fraksi kecil atau seluruh populasi mati. Beberapa
spesies melalui seluruh rangkaian fase hanya dalambeberapa hari, tetapi spesies yang
lain masih menyisakan sel yang dapat bertahan dalamjumlah yang sangat kecil.
P E N G U K U R A N P E R T U M B U H A N B A K T E R I
Pertumbuhan bakteri dapat diukur dengan beberapa cara, yaitu dengan menghitung
jumlah sel dandengan mengukur massa total populasi, yang biasanya sebanding de-
ngan jumlah sel. Jumlah populasi biasanya dihitung sebagai jumlah sel dalam 1 ml
cairan atau 1 mg materi padat. Karena populasi biasanya sangat besar, kebanyakan
metode pengukuran didasarkan pada pengukuran sampel yang sangat kecil, baik
secara langsung maupun tidak langsung. Ukuran populasi total kemudian ditentukan
dengan perhitungan. Sebagai contoh, asumsikan bahwa 10"^ ml susu mengandung 70
sel bakteri maka dalam I ml terdapat 70 juta sel bakteri. Namun demikian, cara ini
kurang praktis sehingga dilakukan pengukuran secara tidak langsung dalamsuatu seri
pengenceran. Contohnya, apabila kita tambahkan 1ml susu ke dalam 99ml air, tiap
mililiter pengenceran itu mengandung jumlah bakteri yang sama dengan jumlah
bakteri dalamtiap mililiter sampel asli. Dengan membuat seri pengenceran, kita dapat
memperkirakan jumlah bakteri dalam sampel.
Pertumbuhan bakteri dapat ditentukan dengan beberapa cara penghitungan, antara
lain dengan lempeng hitung, pengenceran berseri, cara filtrasi atau penyarmgan,
metode penghitungan Nilai Duga Terdekat, penghitungan langsung secara mikrosko-
pik, atau dengan memperkirakan jumlah bakteri dengan menggunakan metode tidak
langsung.
Le mpe ng hitung
Cara penghitungan ini sering digunakan untuk menghitung populasi bakteri. Keun-
tungan cara ini adalah menghitung jumlah populasi yang mampu bertahan hidup.
Kerugian cara mi adalah membutuhkan waktu paling sedikit 24jam atau lebih untuk
membiakkan koloni bakteri hingga dapat diamati dandihitung. Untuk beberapa apli-
kasi, misalnya kontrol kualitas susu, hal ini dapat menjadi masalah serius karena susu
segar tidak dapat dibiarkan dalam waktu yang begitu Jama untuk menunggu hasil
pemeriksaan. ||
Dengan teknik lempeng hitung, diasumsikan bahwa masing-masing bakteri yang
hidup, tumbuh, dan membelah membentuk satu koloni. Akan tetapi, hal ini tidak sepe-
g d b 3 - Pertumbuhan Bakteri 37
n u h n y a benar karena kadang-kadang sebuah k o l o n i tidak berasal dari satu bakteri,

tetapi dari sebuah segmen rantai bakteri. U n t u k itu, hasil perhitungan bakteri dengan
c a r a l e m p e n g h i t u n g s e r i n g d i l a p o r k a n s e b a g a i u n i t p e m b e n t u k a n k o l o n i (colony
forming unit).
Bila menggunakan lempeng hitung, penting diperhatikan bahwa inokulum yang
d i b i a k k a n d i atas l e m p e n g agar h a m s d a l a m j u m l a h y a n g terbatas s u p a y a j u m l a h k o -
l o n i y a n g d i h a s i l k a n sesudah i n k u b a s i dapat d i h i t u n g . A p a b i l a t e r l a l u besar, sel a k a n
t u m b u h terlalu padat d a n k u r a n g berkembang sehingga penghitungan k o l o n i sulit
dilakukan dan kurang akurat. K o n v e n s i Badan Pengawas Obat dan M a k a n a n menye-
butkan bahwa j u m l a h koloni yang paling baik untuk dihitung adalah 2 5 - 2 5 0 koloni
d a l a m setiap c a w a n petri. A k a n tetapi, beberapa ahli m i k r o b i o l o g i berpendapat b a h w a
angka 3 0 - 3 0 0 m e m p a k a n angka y a n g lebih disukai. U n t u k tujuan tersebut, i n o k u l u m
harus diencerkan secara berseri u n t u k mencapai j u m l a h k o l o n i y a n g d i i n g i n k a n d i
d a l a m setiap p e n g u k u r a n .
Pengenceran berseri
Secara teoretis, j i k a 1 m l sampel y a n g mengandung 10.000 bakteri per mililiter dituang
k e d a l a m l e m p e n g hitung, 10.000 k o l o n i akan terbentuk pada m e d i a agar d i dalam
c a w a n petri. P o p u l a s i sebesar i n i tentu tidak dapat d i h i t u n g dengan baik dan akurat.
B i l a 1 m l sampel dituang k e dalam 9 m l air steril, tiap mililiter cairan d a l a m tabung
s e k a r a n g m e n g a n d u n g 1.000 s e l b a k t e r i . B i l a c a m p u r a n tersebut d i i n o k u l a s i pada
m e d i a agar d a l a m c a w a n petri, k o l o n i y a n g t u m b u h d a n berpotensi u n t u k d i h i t u n g
masih terlalu banyak. Jika dibuat pengenceran berikutnya, yaitu 1 m l sampel y a n g
m e n g a n d u n g 1.000 b a k t e r i d i t u a n g k e d a l a m 9 m l air steril, tiap m i l i l i t e r t a b u n g h a n y a
m e n g a n d u n g 100 sel b a k t e r i. J i k a 1 m l isi t a b u n g d i i n o k u l a s i k a n a k a n t e r b e n t u k 100
k o l o n i d a l a m c a w a n petri; j u m l a h i n i dapat d i h i t u n g secara akurat.
P e n g h i t u n g a n bakteri dengan l e m p e n g h i t u n g dapat d i l a k u k a n dengan t e k n i k pena-
n a m a n l e m p e n g t u a n g a t a u l e m p e n g sebar. S e b a n y a k 1,0 m l a t a u 0 , 1 m l h a s i l p e n g -
e n c e r a n b a k t e r i d i m a s u k k a n k e d a l a m c a w a n p e t r i . M e d i a nutrient agar y a n g t e l a h
d i c a i r k a n d a n d i p e r t a h a n k a n s u h u n y a d i d a l a m p e n a n g a s a i r b e r s u h u 50°C d i t u a n g k e
atas s a m p e l y a n g terdapat d a l a m c a w a n petri, k e m u d i a n d i c a m p u r h o m o g e n dengan
cara m e n g g o y a n g k a n c a w a n petri secara perlahan-lahan. Setelah d i b i a r k a n beberapa
saat d a n m e d i a agar t e l a h m e m b e k u , l e m p e n g agar d i i n k u b a s i . D e n g a n t e k n i k l e m p e n g
t u a n g i n i , k o l o n i a k a n t u m b u h d i d a l a m m e d i a dan j u g a d i p e r m u k a a n m e d i a agar.
T e k n i k ini m e m i l i k i beberapa kelemahan, yaitu beberapa bakteri y a n g relatif sensitif
t e r h a d a p p a n a s a k a n m a t i s a a t d i c a m p u r d e n g a n m e d i a a g a r b e r s u h u 50°C. S e l a i n i t u ,
k o l o n i y a n g t u m b u h d i b a w a h p e r m u k a a n media agar sulit diidentifikasi. U n t u k
m e n g h i n d a r i h a l i n i , b i a s a n y a d i g u n a k a n t e k n i k p e n a n a m a n l e m p e n g sebar. D a l a m
t e k n i k i n i , 0,1 m l i n o k u l u m d i t a m b a h k a n k e atas p e r m u k a a n m e d i a agar padat. I n o -
k u l u m k e m u d i a n d i s e b a r k a n secara m e r a t a d i atas m e d i a agar d e n g a n b a n t u a n alat
k h u s u s y a n g terbuat dari gelas steril (gelas pengaduk b e r b e n t u k L ) . D e n g a n cara i n i ,
k o l o n i a k a n berada d i p e r m u k a a n dan sel-sel bakter i t e r h i n d a r dari k o n t a k langsung
dengan m e d i a agar y a n g panas, sebagaimana y a n g terjadi pada t e k n i k p e n a n a m an
lempeng tuang.
•||38 Bubu Ajar Mikrobiologi: Panduan Mahasiswa Farmasi dan Kedokteran
Cara filtrasi atau penyaringan

A p a b i l a j u m l a h bakteri y a n g akan dihitung terlalu kecil, bakteri dapat d i h i t u n g dengan
c a r a filtrasi. D e n g a n t e k n i k i n i , p a l i n g s e d i k i t 1 0 0 m l l a m t a n d i l e w a t k a n m e l a l u i filter
bakteri y a n g terbuat dari m e m b r a n tipis berpori-pori sangat kecil sehingga tidak dapat
d i l e w a t i o l e h b a k t e r i . D e n g a n d e m i k i a n , bakteri dapat tersaring dan tertinggal d i per-
m u k a a n filter. F i l t e r b a k t e r i i n i k e m u d i a n d i p i n d a h k a n k e c a w a n p e t r i y a n g b e r i s i
m e d i a a g a r . S e t e l a h d i i n k u b a s i , k o l o n i a k a n t u m b u h d i a t a s p e r m u k a a n filter. M e t o d e
i n i s e r i n g d i g u n a k a n u n t u k m e n d e t e k s i d a n m e n g h i t u n g b a k t e r i coliform, y a n g m e m -
p a k a n i n d i k a t o r p e n c e m a r a n m a k a n a n d a n air.
IVIetode penghitungan Nilai Duga Terdekat

Metode lain u n t u k mengetahui j u m l a h bakteri dalam sampel adalah penghitungan
N i l a i D u g a T e r d e k a t {mostprobable number, M P N ) . T e k n i k p e r h i t u n g a n s t a t i s t i k i n i
didasarkan pada fakta b a h w a s e m a k i n besar j u m l a h bakteri d a l a m sampel, s e m a k i n
besar pengenceran y a n g d i b u t u h k a n u n t u k m e n g u r a n g i densitas sampai titik k e t i k a
tidak ada bakteri y a n g t u m b u h dalam tabung reaksi pada suatu seri pengenceran.
M e t o d e N i l a i D u g a Terdekat sangat berguna apabila m i k r o b a y a n g akan d i h i t u n g
tidak dapat t u m b u h d a l a m m e d i a padat. M e t o d e i n i j u g a berguna u n t u k m e n g i d e n -
tifikasi bakteri y a n g secara s e l e k t i f m e m f e r m e n t a s i laktosa d a l a m m e d i a cair ( m i s a l n y a
coliform).
N i l a i D u g a Terdekat m e r u p a k a n angka y a n g k e m u n g k i n a n besar m e n u n j u k k a n
9 5 % j u m l a h populasi bakteri dan mempakan angka yang paling m u n g k i n untuk
m e n y a t a k a n j u m l a h populasi bakteri y a n g ada d i dalam suatu sediaan, seperti y a n g
tertera pada Tabel 3.2.
Penghitungan langsung secara mikroskopik

Pada metode penghitungan langsung, suspensi bakteri y a n g v o l u m e n y a telah diuku
ditempatkan pada area y a n g telah ditetapkan pada kaca objek m i k r o s k o p . Sebagai
c o n t o h , 0 , 0 1 m l s a m p e l diteteska n d i atas daerah y a n g sudah d i t e n t u k a n pada kaca
objek. Z a t p e w a m a y a n g dapat m e w a r n a i sel bakteri d i t a m b a h k a n u n t u k m e l i h a t sel
bakteri yang ada dengan mikroskop. Kaca objek yang digunakan untuk penghitungan
l a n g s u n g i n i m e m i l i k i s k a l a (grid) y a n g t e r d i r i a t a s 2 5 k o t a k p e r s e g i u n t u k m e m u d a h -
k a n penghitungan bakteri. Jika j u m l a h bakteri pada beberapa area berbeda sudah
d i h i t u n g , j u m l a h rata-rata bakteri dari setiap k a l i pengamatan dapat d i k a l k u l a s i . D a r i
data m i , j u m l a h b a k t e r i y a n g diteteskan pada area y a n g telah d i t e n t u k a n dapat d i h i t u n g .
Karena j u m l a h sampel yang diteteskan pada kaca objek adalah 0,01 m l J u m l a h bakteri
dalam tiap m i l i l i t e r suspensi adalah j u m l a h bakteri y a n g terhitun g d i k a l i k a n dengan
100.
K e l e m a h a n metode penghitungan langsung adalah bakteri y a n g bergerak akan
sulit dihitung d a n bakteri-bakteri y a n g m a t i akan terhitung. K e l e m a h a n lain adalah
d i p e r l u k a n j u m l a h b a k t e r i y a n g besar agar dapat d i h i t u n g , y a i t u sekitar 10 j u t a b a k t e r i
per m i l i l i t e r . K e u n t u n g a n m e t o d e i n i , y a i t u t i d ak d i p e r l u k a n w a k t u i n k u b a s i . O l e h ^
Bab 3 - Pertumbuhan Bakteri 39
Tabel 3.2. Daftar Nilai Duga Terdekat ( M o s t P r o b a b l e N u m b e r , MPN)

' Menggunakan Tiga Buah Tabung
Kombinasi/jumlah tabung yang positif MPN per ml
1 : 10 1 :100 1 : 1000 atau per gram
0 0 0 <3
0 0 1 3
0 1 0 3
1 0 0 4
1 0 1 7
1 1 0 7
1 1 1 11 '
1 2 0 11
2 0 0 9
2 0 1 14
2 1 0 15
2 1 1 20
2 2 0 21
2 2 1 28
3 0 0 23
3 0 1 39
3 0 2 64
3 1 0 43
3 1 1 75
3 1 2 120
3 2 0 93
3 2 1 150
3 2 2 210
3 3 0 240
3 3 1 460
3 3 2 1100
3 3 3 > 1100
karena itu, cara i n i biasanya digunakan apabila w a k t u m e r u p a k a n pertimbangan

u t a m a . K e u n t u n g a n i n i j u g a b e r l a k u u n t u k p e n g h i t u n g a n sel l a n g s u n g secara e l e k t r o -
n i k , y a i t u m e n g g u n a k a n alat y a n g secara o t o m a t i s m e n g h i t u n g j u m l a h s e l d a l a m
cairan y a n g telah d i u k u r v o l u m e n y a . Alat-alat tersebut digunakan dalam penelitian-
penelitian di laboratorium m i k r o b i o l o g i dan r u m a h sakit.
40
Gambar 3 . 6 C a r a p e n g h i t u n g a n j u m l a h b a k t e r i d e n g a n m e n g g u n a k a n R u a n g P e n g h i t u n g .
V o l u m e suspensi bakteri pada segi e m p a t besar adalah 1/1.250.000 dan jumlah bakteri adalah
12 sel m a k a j u m l a h total bakteri d a l a m 1 m l adalah 12 x 1.250.000 = 15.000.000 bakteri/ml.
Contoh kaca objek yang telah dirancang khusus untuk penghitungan langsung
a d a l a h Petroff-Hausser cell counter, s e p e r t i p a d a G a m b a r 3 . 6 .
Perkiraan jumlah bakteri dengan metode tidak langsung

D a l a m berbagai penelitian, j u m l a h dan aktivitas m i k r o o r g a n i s m e dapat pula ditentukan
secara t i d a k langsung, antara lain berdasarkan k e k e r u h a n , a k t i v i t a s m e t a b o l i k , atau
bobot kering.
Kekeruhan
Cara i n i m e r u p a k a n cara y a n g praktis u n t u k mengetahui adanya p e r t u m b u h a n m i k r o -
o r g a n i s m e . S e i r i n g d e n g a n b e r t a m b a h n y a b a k t e r i d a l a m m e d i a cair, m e d i a tersebut
akan m e n j a d i k e r u h o l e h a d a n y a sel-sel y a n g t u m b u h .
Alat y a n g digunakan u n t u k m e n g u k u r kekeruhan adalah spektrofotometer. Pada
spektrofotometer, berkas cahaya ditransmisikan m e l a l u i suspensi bakteri lalu dite-
ruskan ke detektor sensitif cahaya. Jika j u m l a h bakteri meningkat, sedikit cahaya y a n g
akan diteruskan k e detektor. Perubahan intensitas cahaya akan terlihat pada skala
y a n g terdapat pada alat, y a i t u berupa persentase t r a n s m i s i . S u a t u ekspresi l o g a r i t m a
j u g a d a p a t t e r l i h a t p a d a s k a l a , y a i t u n i l a i a b s o r b a n s a t a u d e n s i t a s o p t i k (optical den-
sity). N i l a i a b s o r b a n s d i g u n a k a n u n t u k m e m a n t a u p e r t u m b u h a n b a k t e r i k e t i k a b a k t e r i
berada pada pertumbuha n logaritma atau m e n u r u n . G r a f i k absorbans terhadap w a k t u
k i r a - k i r a a k a n m e m b e n t u k garis l u n i s . J i k a p e m b a c a a n absorbans c o c o k dengan per-
hitungan l e m p e n g u n t u k biakan y a n g sama, korelasi i n i dapat d i g u n a k a n u n t u k m e m -
p e r k i r a k a n j u m l a h bakter i y a n g ada dengan m e m p e r k i r a k a n k e k e r u h a n .
L e b i h d a r i 1 j u t a s e l / m l harus ada pada a w a l p e n g u k u r a n k e k e r u h a n supaya dapat
terlihat. S e k i t a r 10 j u t a s a m p a i 100 j u t a s e l / m l d i b u t u h k a n u n t u k m e m b u a t suspensi
y a n g c u k u p k e r u h agar dapat terbaca pada spektrofotometer. O l e h sebab i t u , k e k e r u h a n
tidak akurat untuk m e n g u k u r cairan yang terkontaminasi oleh bakteri dalam j u m l a h
kecil.
Aktivitas metaboiik
Cara tidak langsung lain yang digunakan untuk m e n g h i t u n g j u m l a h bakteri adalah
dengan m e n g u k u r aktivitas metabolik populasi bakteri. Pada metode ini, diasumsikan
b a h w a j u m l a h hasil m e t a b o l i s m e tertentu, seperti asam atau k a r b o n dioksida, m e -
nunjukkan proporsi keberadaan bakteri.
Bobot kering
U n t u k bakteri berfilamen dan kapang, metode pengukuran biasa tidak m e m u a s k a n .
M e t o d e lempeng hitung sulit untuk m e n g u k u r peningkatan j u m l a h bakteri berfilamen.
P a d a p e n g h i t u n g a n Actinomycetes d a n k a p a n g m e n g g u n a k a n l e m p e n g h i t u n g , j u s t r u
j u m l a h spora aseksual y a n g terhitung. Salah satu cara p e n g h i t u n g a n y a n g lebih baik
adalah penentuan bobot kering. Pada metode i n i , bakteri atau kapang dipindahkan
dari media pertumbuhan, disaring untuk menghilangka n materi pengganggu lain,
dikeringkan, kemudian ditimbang.
BAB 4
METABOLISME
BAKTERI
• Metabolisme
• Jalur Metabolisme Produksi Energi
• Metabolisme Karbohidrat
• Metabolisme Lemab dan Protein
• identifikasi Jenis Bakteri Berdasarkan Sifat
Biokimia
42
Bab 4 - Metabolisme Babteri 43
METABOLISME
M e t a b o l i s m e adalah s e m u a proses k i m i a y a n g terjadi d i d a l a m sel h i d u p . K a r e n a se-
m u a reaksi k i m i a y a n g terjadi m e m b u t u h k a n atau melepaskan energi, m e t a b o l i s m e
dapat d i g a m b a r k a n sebagai suatu keseimbangan energi y a n g d i b u t u h k a n oleh m a h l u k
h i d u p . M e t a b o l i s m e t e r d i r i atas d u a j e n i s r e a k s i k i m i a , y a i t u p r o s e s k i m i a y a n g m e n g -
hasilkan energi d a n proses k i m i a y a n g m e m b u t u h k a n energi. S e l a m a bakteri hidup
dan m e l a n g s u n g k a n proses hidup (seperti t u m b u h , bergerak, dan b e r k e m b a ng biak),
bakteri selalu m e m e r l u k a n energi. O l e h karena itu, bagian yang penting dalam m e m -
pelajari metabolisme bakteri adalah bagaimana bakteri m e m p e r o l e h energi.
D a l a m sel hidup, proses reaksi k i m i a y a n g menghasilkan energi disebut dengan
kataholisme, s e d a n g k a n p r o s e s r e a k s i k i m i a y a n g m e m b u t u h k a n e n e r g i d i s e b u t
d e n g a n anaholisme. R e a k s i k a t a b o l i k u m u m n y a m e r u p a k a n r e a k s i h i d r o l i s i s y a n g
memecah senyawa organik k o m p l e k s menjadi senyawa-senyawa yang lebih sederhana,
m i s a l n y a r e a k s i p e m e c a h a n s e n y a w a g u l a m e n j a d i k a r b o n d i o k s i d a dan air. R e a k s i i n i
disebut j u g a dengan reaksi katabolisme karbohidrat. Sebaliknya, reaksi anabolik atau
reaksi biosintesis m e r u p a k a n proses y a n g m e m b a n g u n m o l e k u l organik k o m p l e k s
dari senyawa-senyawa y a n g lebih sederhana. C o n t o h reaksi anabolik adalah pemben-
tukan m o l e k u l protein dari asam a m i n o , pembentukan nukleotida dari asam nukleat,
dan p e m b e n t u k a n polisakarida dari monosakarida. Proses biosintesis ini sangat dibu-
t u h k a n d a l a m p e r t u m b u h a n sel.
S e b e l u m proses m e t a b o l i s me terjadi, diperlukan pengaktifan subunit y a n g akan
digunakan dan energi y a n g tinggi, yaitu A T P (adenosin trifosfat). Energi untuk meta-
b o l i s m e d i a m b i l dari proses fermentasi, respirasi, dan fotosintesis. E n e r g i pada proses
fermentasi d a n respirasi diperoleh dari proses katabolisme karbohidrat. Beberapa
g o l o n g a n b a k t e r i heterotrof, t e r m a s u k bakteri patogen, m e n g g u n a k a n zat o r g a n i k se-
bagai sumber k a r b o n u n t u k mendapatkan energi. Bakteri a u t o t r o f mendapatkan energi
dari oksidasi s e n y a w a anorganik. Bakteri i n i m e n g g u n a k a n k a r b o n dioksida sebagai
s u m b e r k a r b o n u n t u k sintesis selnya. N a m u n , d i p e r l u k a n energi d a n k o e n z i m u n t u k
m e n g u b a h k a r b o n d i o k s i d a m e n j a d i bahan sel. Beberapa j e n i s k o e n z i m berperan
sebagai p e m b a w a e l e k t r o n dan sangat penting u n t u k m e m b a n t u e n z i m , yaitu dengan
m e n e r i m a a t o m y a n g dilepas o l e h substrat selama proses m e t a b o l i s m e atau m e m b e r i k a n
a t o m y a n g d i p e r l u k a n o l e h substrat. K o e n z i m y a n g berperan p a l i n g p e n t i n g d a l a m
m e t a b o l i s m e seluler antara lain n i k o t i n a m i d a adenin dinukleotid a ( N A D ^ dan n i k o -
t i n a m i d a adenin d i n u k l e o t i d a fosfat ( N A D P * ) - Bakteri y a n g dapat m e l a k u k a n fotosin-
tesis m e m p e r o l e h energi y a n g d i b u t u h k a n dari cahaya, s e d a n g k a n b a k t e ri a u t o t r o f
harus m e m p e r o l e h energi dari oksidasi k i m i a . Pada proses oksidasi, elektro n y a n g
dibebaskan dari oksidasi s e n y a w a anorganik, seperti belerang dan a m o n i a k , d i s a l u r k a n
m e l a l u i transpor elektron y a n g pada a k h i r n y a akan m e n g h a s i l k a n energi t i n g g i berupa
ATP
E n e r g i A T P u m u m n y a d i b e n t u k p a d a saat t e r j a d i r e a k s i o k s i d a s i - r e d u k s i d i d a l a m
sel. E n e r g i A T P y a n g d i h a s i l k a n s e l a m a p r o s e s k a t a b o l i s m e a k a n d i g u n a k a n k e m b a l i
d a l a m proses a n a h o l i s m e u n t u k m e m b a n g u n k o m p o n e n - k o m p o n e n sel y a n g d i b u t u h -
kan d a l a m p e r t u m b u h a n sel. M o l e k u l A T P t e r d i ri atas g u g u s a d e n i n , ribosa, d a n 3
44 Bubu Ajar Mikrobiologi: Panduan Mahasiswa Farmasi dan Kedokteran
gugus fosfat ( P i ) . A p a b i l a satu gugus fosfat ( P i ) t e r m i n a l terlepas dari A T P , s e n y a w a

adenosin difosfat ( A D P ) d a n energi akan terbentuk. Energi y a n g dilepaskan dalam
reaksi k a t a b o l i s me tersebut k e m u d i a n digunakan d a l a m reaksi A D P d a n P i u n t u k
menyintesis ulang A T P . Reaksi penambahan P i k e dalam senyawa kimia dikenal
dengan fosforilasi.
ATP • A D P + Pi + energi
A D P + Pi + energi • ATP
Peran A T P dalam keseimbangan reaksi anabolik d a n katabolik sangat penting

d a l a m m e m p e r t a h a n k a n k e h i d u p a n sel. Peran A T P dapat d i l i h a t pada G a m b a r 4 . 1 . S e l
hanya m e n g g u n a k a n sebagian dari energi y a n g dilepaskan pada proses katabolisme,
sedangkan sebagian energi lagi dilepaskan k e l i n g k u n g a n sebagai energi panas.
K a r e n a setiap sel m e m e r l u k a n energi u n t u k k e b u t u h a n h i d u p , k e s i n a m b u n g a n energi
selalu d i b u t u h k a n o l e h sel.
JALUR METABOLISME PRODUKSI ENERGI

S u a t u sel dapat m e n y i m p a n dan m e l e p a s k a n energi dari m o l e k u l - m o l e k u l o r g a n i k m e -
lalui serangkaian proses reaksi y a n g terkendali. A p a b i l a suatu energi dilepaskan seke-
tika sebagai energi panas, energi tersebut tidak serta-merta dapat m e m i c u suatu reaksi
k i m i a . A p a b i l a proses i n i tidak terkendali, energi y a n g dilepaskan sekaligus j u s t r u da-
pat m e r u s a k sel. O l e h k a r e n a i t u , d a l a m m e l e p a s k a n d a n m e n g g u n a k a n e n e r g i seluler,
sel h a r u s m e l e p a s k a n e l e k t r o n d a r i s a t u s e n y a w a k e s e n y a w a l a i n m e l a l u i j a l u r y a n g
Molekul tunggal 'T

(glukosa, a s a m amino, gliserol,
dan a s a m lemak)
Energi panas
Reaksi katabolik,
m e n t r a n s f e r energi dari
e Reaksi anabolik,
mentransfer energi dari
molekul kompleks ke ATP ke molekul
ATP kompleks
Energi panas
Molekul kompleks
(karbohidrat, protein, d a n
lemak)
Gambar 4.1 P e r a n a n A T P d a l a m r e a k s i a n a b o l i k d a n r e a k s i k a t a b o l i k .
Bab 4 - Metabolisme Bakteri 45
NAD" N A D H " + H"^
ADP + Pi ATP
Gambar 4.2 B a g a n s e d e r h a n a j a l u r m e t a b o l i s m e p e n g u b a h a n m a t e r i a w a l A m e n j a d i p r o d u k
akhir F .
terkendali dalam serangkaian reaksi oksidasi-reduksi. Serangkaian proses reaksi

k i m i a y a n g dikatalisis oleh suatu e n z i m y a n g terjadi d i dalam sel disebut j a l u r meta-
b o l i s m e (metabolic pathway).
C o n t o h bagan sederhana j a l u r metabolisme yang mengubah materi A menjadi pro-
d u k a k h i r F d a l a m beberapa tahap dapat dilihat pada G a m b a r 4.2.
B a g a n d i atas m e m p e r l i h a t k a n b a h w a tahap p e r t a m a d a l a m tahapan reaksi y a n g
terjadi m e r u p a k a n k o n v e r s i materi a w a l ( A ) menjadi m o l e k u l B . Pada tahap i n i , k o -
e n z i m N A D * tereduksi m e n j a d i N A D H " , dengan e l e k t r o n dan p r o t o n berasal dari m o -
lekul A . D e m i k i a n j u g a , pada tahap perubahan m o l e k u l C menjadi m o l e k u l D (tahap
ketiga) terjadi k o n v e r s i A D P menjadi A T P ; energi y a n g d i b u t u h k a n berasal dari
m o l e k u l C y a n g dipindahkan ke m o l e k u l D . Reaksi antara m o l e k u l D dan E merupakan
r e a k s i b o l a k - b a l i k {reversible), s e d a n g k a n p a d a t a h a p k e l i m a d i b u t u h k a n m o l e k u l
dalam reaksi yang menghasilkan produk akhir ( F ) dengan produk sekunder C O . dan
H , 0 , y a n g j u g a sering disebut dengan p r o d u k l i m b a h . P e r l u d i p e r h a t i k a n b a h w a setiap
reaksi dalam reaksi m e t a b o l i s m e dikatalisis oleh e n z i m spesifik. Selain e n z i m , bebe-
rapa k o e n z i m j u g a berperan penting d a i a m m e t a b o l i s m e , antara lain N A D % N A D P ' ,
F A D (flavin adenin dinukleotida), dan C o A ( k o e n z i m A ) .
METABOLISME KARBOHIDRAT
Pada u m u m n y a , m i k r o o r g a n i s m e mengoksidasi karbohidrat sebagai sumber utama
energi seluler. K a t a b o l i s m e karbohidrat y a n g m e l i b a t k a n reaksi penguraian m o l e k u l
karbohidrat u n t u k m e n g h a s i l k a n energi A T P m e r u p a k a n proses y a n g penting d a l a m
m e t a b o l i s m e sel.
Glukosa merupakan jenis karbohidrat yang paling sering dimanfaatkan oleh m i -

k r o o r g a n i s m e sebagai sumber energi. U n t u k m e m p r o d u k s i energi dari glukosa, m i k r o -
o r g a n i s m e m e n g g u n a k a n d u a j a l u r p r o s e s , y a i t u fermentasi d a n respirasi.
K e d u a proses tersebut biasanya berawal dari satu langkah pertama y a n g sama,
yaitu glikolisis, yang k e m u d i a n disusul dengan j a l u r metabolisme yang berbeda untuk
respirasi dan fermentasi.
Sebagaimana y a n g terlihat pada G a m b a r 4.3, respirasi glukosa terjadi dalam tiga
tahapan, yaitu tahap glikolisis, siklus Krebs, dan rantai transpor elektron. Pada tahap
glikolisis, terjadi oksidasi glukosa menjadi asam piruvat y a n g m e n g h a s i l k an energi
Gambar 4.3 P r o s e s f e r m e n t a s i d a n r e s p i r a s i g l u k o s a d a l a m s e l .
A T P dan N A D H . Pada siklus Krebs, j u g a akan dihasilkan energi A T P d a n N A D H ,

yang k e m u d i a n akan diteruskan k e dalam sistem transpor elektron. Sistem transpor
elektron dapat m e m p r o d u k s i lebih banyak energi A T P .
G l i k o l i s i s m e r u p a k a n langkah a w a l proses katabolisme karbohidrat m e n j a d i asam
p i r u v a t . G l i k o l i s i s j u g a d i k e n a l d e n g a n j a l u r m e t a b o l i s m e Embden-Meyerhof. J a l u r i n i
m e r u p a k a n m e k a n i s m e u m u m u n t u k mengubah glukosa m e n j a di asam piruvat. Seba-
g a i m a n a dapat d i l i h a t pada G a m b a r 4.4, g l i k o l i s i s t e r d i r i atas dua tahap u t a m a , y a i t u
tahap persiapan d a n tahap p e m b e n t u k a n energi A T P . Pada tahap persiapan, setiap
m o l e k u l glukosa m e m b u t u h k a n dua m o l e k u l A T P untuk m e m u l a i j a l u r metabolisme
ini. Pada tahap p e m b e n t u k a n energi A T P , empat m o l e k u l A T P akan dihasilkan m e l a l u i
fosforilasi substrat dengan m e n g u b a h glukosa m e n j a d i asam piruvat. D e n g a n d e m i -
kian, selama proses g l i k o l i s i s , dua m o l e k u l A T P akan d i h a s i l k an dari setiap m o l e k u l
g l u k o s a y a n g t e r o k s i d a s i . S e l a i n j a l u r g l i k o l i s i s , ada beberapa j a l u r m e t a b o l i s m e alter-
natif, antara lain sebagai berikut.
1. J a l u r p e n t o s a f o s f a t (pentose phosphate pathway), y a i t u g l u k o s a d i u b a h m e n j a d i

glukosa-6-fosfat—>6-fosfoglukonat-*pentosa fosfat. G u g u s pentosa m e r u p a k a n
p r o d u k antara y a n g sangat penting d a l a m sintesis asam nukleat, sintesis g l u k o s a
dari k a r b o n d i o k s i d a pada fosfosintesis, d a n beberapa j e n i s asam a m i n o . Jalur
m e t a b o l i s m e pentosa fosfat m e n g h a s i l k a n satu m o l e k u l A T P dari setiap g l u k o s a
y a n g teroksidasi. Beberapa bakteri yang menggunaka n j a l u r m e t a b o l i s m e pentosa
f o s f a t a d a l a h Bacilhis siibtilis, Escherichia coli, d a n Enterococciis faecalis.
2 . J a l u r Entner-Doiidoroffl y a i t u g l u k o s a d i u b a h m e n j a d i 6 - f o s f o g l u k o n a t — • k e t o d i -
o k s i g l u k o n a t — • p i r u v a t d a n g l i s e r a l d e h i d a . J a l u r E n tner-Doiidoroff menghasilkan
dua m o l e k u l N A D P H dan satu m o l e k u l A T P Beberapa j e n i s bakteri dapat m e l a k u -
kan m e t a b o l i s m e m e l a l u i j a l u r ini tanpa g l i k o l i s i s ataupun j a l u r pentosa fosfat.
Beberapa j e n i s bakteri G r a m - n e g a t i f y a n g dapat m e l a k u k a n m e t a b o l i s m e m e l a l u i
j a l u r Entner-Doudoroff a d a l a h Pseudomonas, Rhizobium, d a n Agrobacterium.
Bakteri G r a m - p o s i t i f u m u m n y a tidak melakuka n metabolisme m e l a l u i j a l u r
Entner-Doudoroff.
Setelah g l u k o sa dipecah menjadi asam piruvat, asam piruvat dapat diproses k e m b a l i

m e l a l u i proses fermentasi atau proses respirasi seluler.
Fermentasi
Fermentasi adalah suatu proses metabolisme y a n g dapat m e n g h a s i l k a n energi dari
karbohidrat atau m o l e k u l organik lain tanpa m e m e r l u k a n o k s i g en ataupun m e l a l u i
sistem transpor elektron dan menggunakan m o l e k u l organik sebagai penerima elektron
terakhir.
Beberapa ciri proses m e t a b o l i s me fermentasi adalah sebagai berikut.
• Energi dilepaskan dari karbohidrat atau m o l e k u l organik, seperti asam a m i n o ,
asam organik, purin, dan pirimidin.
• T i d a k m e m e r l u k a n oksigen w a l a u p u n kadang-kadang dapat terjadi dengan adanya
oksigen.
TAHAP PERSIAPAN
oooooo Glukosa
ADP
ooocx=x=>© Glukosa-6-fosfat
ATP J Fruktosa-6-fosfat
@<IXIXIXIXIXI>{^ Fruktosa.1,6.difosfat
©<IXDO ^ ^ CXDO(p) Gliseraldehid-3.fosfat
TAHAP
2NAD
PEMBENTUKAN
E N E R G I ATP
2 NADH <•
2 ADP
2 i ATP t ^
2 CXIXI>-(P) 3-Asam fosfoglisehn
2-Asam fosfogliserin
: 2H,0
Asam fosfoenolpiruvat
2 ADP
2 f A T P J ^
^"^-sj-^ 2 CZXIIXZ^ Asam piruvat
Gambar 4.4 B a g a n r e a k s i g l i k o l i s i s j a l u r Embden-Meyerhof.

• M e n g g u n a k a n m o l e k u l organik sebagai akseptor elektro n terakhir.

• H a n y a m e m p r o d u k s i satu atau d u a m o l e k u l A T P dari setiap m o l e k u l substrat.
Pada proses fermentasi, asam piruvat dapat dipecah m e n j a d i a l k o h o l , asam laktat,
a s a m b u t i r a t , a s a m p r o p i o n a t , dan a s a m asetat, b e r g a n t u n g p a d a j e n i s b a k t e r i . B e b e r a p a
j e n i s m i k r o o r g a n i s m e dapat m e m f e r m e n t a s i berbagai j e n i s substrat. O l e h k a r e n a i t u ,
analisis k i m i a identifikasi produk akhir fermentasi sering digunakan u n t u k mengiden-
tifikasi spesies m i k r o o r g a n i s m e . P r o d u k a k h i r dan j e n i s m i k r o o r g a n i s m e y a n g m e n g -
hasilkan p r o d u k a k h i r tersebut dapat dilihat pada Tabel 4 . 1 .
Tabel 4.1. Produk Akhir Fermentasi^ A s a m Piruvat oieh Beberapa J e n I s

^Mikroorganisme
Jenis bakteri Produk akhir
Streptococcus. Lactobacilius, Bacilius A s a m laktat
Saccharomyces Etanol dan C O ^
Propionibacterium A s a m propionat, a s a m asetat, C O 2 ,
dan H 2
Clostridium A s a m butirat, butanol, aseton, isopropil
a l k o h o l , d a n CO^
Escherichia, Salmoneila Etanol, a s a m laktat, a s a m suksinat, a s a m
asetat, CO^, dan H 2
Enterobacter E t a n o l , a s a m l a k t a t , a s a m f o r m i a t . CO^, d a n
H.
Respirasi seluler
Respirasi seluler atau lebih dikenal dengan istilah respirasi m e r u p a k a n suatu rang-
kaian proses u n t u k m e m p r o d u k s i energi A T P . A s a m piruvat y a n g diperoleh dari
perubahan g l u k o s a akan m a s u k k e dalam proses selanjutnya, y a i t u proses respirasi
seluler.
Proses respirasi d i a w a l i dengan serangkaian reaksi b i o k i m i a y a n g disebut dengan
siklus Krebs. Selanjutnya , m e l a l u i proses rantai transpor e l e k t r o n , akan d i h a s i l k a n
m o l e k u l energi A T P d a l a m j u m l a h y a n g j a u h lebih besar dibandingkan pada proses
fermentasi.
R e s p i r a s i a d a d u a j e n i s , b e r g a n t u n g p a d a s i f a t m i k r o o r g a n i s m e , y a i t u respirasi
aerob d a n respirasi anaerob. R e s p i r a s i a e r o b m e n g g u n a k a n o k s i g e n s e b a g a i p e n e r i m a
elektron terakhir, sedangkan respirasi anaerob m e n g g u n a k a n s e n y a w a anorganik lain
sebagai p e n e r i m a e l e k t r o n terakhir.
Respirasi aerob
M i k r o o r g a n i s m e u m u m n y a menggunaka n oksigen sebagai p e n e r i m a elektron terakhir
pada proses respirasi aerob. Proses respirasi d i m u l a i dengan g l i k o l i s i s , k e m u d i a n d i -
ikuti dengan siklus Krebs, dan diakhiri dengan sistem transpor elektron u n t u k meng-
h a s i l k a n energi y a n g sangat efisien. S e b a g a i m a n a telah d i k e t a h u i , o k s i d a s i satu m o l e -

kul glukosa dalam proses glikolisis akan menghasilkan 2 m o l e k u l asam piruvat, y a n g
pada a k h i r n y a akan m e n g h a s i l k a n 2 m o l e k u l C O , d a n akan m e m b e n t u k 2 m o l e k u l
asetil k o e n z i m A ( C o A ) dan 2 m o l e k u l N A D H . G a m b a r 4.5 m e m p e r l i h a t k a n b a h w a
asam piruvat m e n g a l a m i proses dekarboksilasi m e m b e n t u k gugus asetil y a n g akan
G a m b a r 4.5 S i k l u s K r e b s m e r u p a k a n r a n g k a i a n r e a k s i o k s i d a s i g u g u s a s e t i l y a n g m e n g h a s i l k a n
ATP. NADH. dan FADH^.
Bab 4 - Metabolisme Bakteri 5l|
terikat dengan k o e n z i m A . C o A kemudian akan masuk k edalam siklus Krebs. K e t i k a

asetil k o e n z i m A m a s u k k e dalam siklus Krebs, dua s e n y a w a k a r b o n dari gugus asetil
akan bereaksi dengan empat senyawa karbon dari asam oksaloasetat m e m b e n t u k asam
sitrat. P e m b e n t u k a n asam sitrat m e r u p a k a n tahap pertama d a l a m s i k l u s K r e b s .
B i l a d i p e r h a t i k a n secara k e s e l u r u h a n , setiap 2 m o l e k u l asetil C o A y a n g m e m a s u k i
rangkaian reaksi dalam siklus Krebs akan menghasilkan 4 m o l e k u l C O ^ selama proses
dekarboksilasi, 6 m o l e k u l N A D H , 2 m o l e k u l F A D H , , dan 2 m o l e k u l A T P . K o e n z i m
Glikolisis
Glukosa
G a m b a r 4.6 P r o s e s r e s p i r a s i a e r o b d a p a t m e n g h a s i l k a n 3 8 A T P d a r i s a t u m o l e k u l g l u k o s a
' 52 ' Bufcu Ajdr Mikrobiologi: Pdnd -
|- "
N A D H dan F A D H ^ d a l a m bentuk tereduksi i n i m e r u p a k a n p r o d u k y a n g sangat penting •
u n t u k proses selanjutnya pada tahap terakhir respirasi, y a i t u sistem transpor elektron,;
y a n g akan m e n g h a s i l k a n energi A T P . Sistem transpor elektron berantai dapat meng-:.
h a s i l k a n 3 4 m o l e k u l A T P d a r i setiap satu m o l e k u l glukosa. D e n g a n d e m i k i a n , j i k a :
ditambahkan dengan 2 m o l e k u l A T P y a n g dihasilkan pada proses glikolisis dan 2 m o -
lekul A T P y a n g didapat pada siklus Krebs, total m o l e k u l A T P y a n g dihasilkan selama;
proses respirasi seluler i n i adalah 38 ATP, seperti y a n g terlihat pada G a m b a r 4.6.
Respirasi anaerob
Pada respirasi anaerob, bakteri menggunakan senyawa anorganik selain oksigen
s e b a g a i a k s e p t o r e l e k t r o n t e r a k h i r . B e b e r a p a b a k t e r i a n t a r a l a i n Pseudomonas, Esche-
richia, Rhizobium, Enterobacter, d a n Bacilius d a p a t m e n g g u n a k a n i o n n i t r a t ( N O 3 ' )
sebagai akseptor e l e k t r on terakhir. I o n Nitra t direduksi m e n j a di N O , " , N ^ O , atau gas
n i t r o g e n (N^j. B a k t e r i Desulfovibrio m e n g g u n a k a n i o n s u l f a t ( S O / ' ) s e b a g a i a k s e p t o r
elektron m e m b e n t u k H^S. B a k t e r i lain dapat m e n g g u n a k a n i o n karbonat {CO^)
membentuk metana ( C H ^ .
J u m l a h A T P y a n g diproduksi dalam j a l u r respirasi anaerob sangat bervariasi
bergantung pada j e n i s bakteri. K a r e n a h a n y a sebagian siklus K r e b s dapat berlangsung
pada k o n d i s i anaerob, tidak semua p e m b a w a elektro n dapat m e l a l u i sistem transpor
elektron pada k o n d i s i tersebut sehingga energi A T P y a n g dihasilkan u m u m n y a tidak
sebesar pada respirasi aerob. O l e h sebab i t u , b a k t e r i anaerob t u m b u h l e b i h l a m b a t
daripada bakteri aerob.
METABOLISME L E M A K D A N PROTEIN
K i t a telah mempelajari bahwa karbohidrat, khususnya glukosa, merupakan sumber
utama pembentukan energi bagi mikroorganisme. N a m u n demikian, mikroorganisme
j u g a dapat m e m e t a b o l i s m e nutrisi lain, seperti l e m a k dan protein. Sebagaunana telah
k i t a k e t a h u i , l e m a k terdiri atas asam l e m a k dan g l i s e r o l .
M i k r o o r g a n i s m e dapat m e m b u a t e n z i m lipase, y a i t u e n z i m ekstraseluler y a n g
dapat m e n g u r a i k a n l e m a k m e n j a d i asam l e m a k dan gliserol. M a s i n g - m a s m g k o m p o n e n
ini k e m u d i a n akan dimetabolisme lebih lanjut dalam siklus Krebs.
Pada G a m b a r 4.7, dapat dilihat b a h w a gliserol dipecah m e n j a d i d i h i d r o k s i aseton
fosfat, k e m u d i a n d i k a t a b o l i s m e m e l a l u i g l i k o l i s i s d a n s i k l u s K r e b s . S e m e n t a r a itu,;;
asam l e m a k dioksidasi m e m b e n t u k gugus asetil, y a n g k e m u d i a n bergabung dengan'
k o e n z i m A m e m b e n t u k asetil C o A . Selanjutnya, asetil C o A dikatabolisme m e l a l u i
proses siklus Krebs,
Protein m e r u p a k a n s e n y a w a y a n g j u g a dapat d i m a n f a a t k a n sebagai sumber energi
o l e h m i k r o o r g a n i s m e . E n z r n i protease dan peptidase y a n g d i k e l u a r k a n o l e h m i k r o o r -
ganisme dapat m e m e c a h protein m e n j a d i asam a m i n o .
Sebelum dikatabolisme, asam a m i n o harus terlebih dahulu diubah menjadi suatu
senyawa y a n g dapat m a s u k ke dalam siklus Krebs. Proses deaminasi m e r u p a k a n salah
satu m e k a n ^ m e u n t u k m e m p e r o l e h s e n y a w a tersebut, y a i t u gugus a m i n o dari asam
amino dilepaskan d a n diubah menjadi i o n a m o n i u m ( N H / ) sehingga asam organik
Bab 4 - Metabolisme Bakteri 53&
Lemak
G a m b a r 4.7 J a l u r k a t a b o l i s m e l e m a k .
tersebut dapat m a s u k k e dalam siklus Krebs. Proses lain u n t u k m e n g o n v e r s i asam

a m i n o adalah reaksi dekarboksilasi dan dehidrogenasi.
D a l a m proses respirasi, bakteri dapat m e n g g u n a k a n berbagai j a l u r k a t a b o l i s me
s e n y a w a o r g a n i k u n t u k m e n g h a s i l k a n energi, seperti y a n g terlihat pada G a m b a r 4.8.
IDENTIFIKASI JENIS BAKTERI BERDASARKAN

SIFAT BIOKIMIA
Sifat b i o k i m i a sering dijadikan dasar u n t u k m e n g i d e n t i f i k a si j e n i s bakteri karena
setiap spesies bakteri dapat m e m p r o d u k s i j e n i s e n z i m y a n g berbeda. Keberadaan j e n i s
e n z i m tertentu d a l a m suatu bakteri dapat d i m a n f a a t k a n u n t u k m e n g i d e n t i f i k a s i j e n i s
bakteri tersebut dengan m e n g g u n a k a n uji fermentasi. B a k t e r i d i m a s u k k a n d a l a m l a -
rutan media yang mengandung protein, karbohidrat tertentu (misalnya glukosa,
laktosa, sukrosa, m a n i t o l , atau inositol), dan i n d i k a t o r p H serta t a b u n g D u r h a m u n t u k
m e n g e t a h u i t e r b e n t u k n y a gas selama proses fermentasi. B a k t e r i y a n g d i i n o k u l a s i k e
d a l am m e d i a tersebut akan m e n g g u n a k a n protein atau karbohidrat sebagai sumber
karbon dan energi.
54 Buku Ajar Mil?robiologi: Panduan Mahasisvjva Farmasi dan Kedokteran
G a m b a r 4.8 B e r b a g a i j a l u r k a t a b o l i s m e s e n y a w a o r g a n i k y a n g d i g u n a k a n o l e h b a k t e r i d a l a m
proses respirasi untuk menghasilka n energi.
BAB 5
PENGENDALIAN
MIKROORGANISME
• Tujuan Pengendalian Mikroorganisme

• Pengendalian Mikroorganisme secara Fisika
• Pengendalian Mikroorganisme secara Kimia
Pengendalian Mikroorganisme dengan Antibiotik
• Penggunaan Antiseptik
• Penggunaan Bahan Pengawet
• Uji Koefisien Fenol
55
T U J U A N PENGENDALIAN MIKROORGANISME
M i k r o o r g a n i s m e dapat m e n i m b u l k a n penyakit pada m a h l u k hidup lain karena m e m i -
liki k e m a m p u a n m e n g i n f e k s i , m u l a i dari infeksi ringan sampai infeksi berat dan bah-
kan dapat m e n y e b a b k an kematian. M i k r o o r g a n i s m e j u g a dapat m e n c e m a r i makanan,
m i n u m a n , k o s m e t i k , obat, d a n sediaan f a r m a si lain serta m e n i m b u l k a n perubahan-
perubahan k i m i a d i d a l a m sediaan-sediaan tersebut sehingga tidak l a y a k d i k o n s u m s i
atau digunakan. O l e h karena i t u , pengendalian y a n g tepat perlu d i l a k u k a n agar m i k r o -
organisme tidak menimbulka n kerugian.
T u j u a n p e n g e n d a l i a n p e n c e m a r a n m i k r o o r g a n i s m e a n t a r a l a i n : (a) m e n c e g a h
p e n y e b a r a n p e n y a k i t i n f e k s i , (b) m e m b a s m i m i k r o o r g a n i s m e y a n g a d a d a l a m h o s p e s
y a n g t e r i n f e k s i , (c) m e n c e g a h p e m b u s u k a n d a n p e r u s a k a n m a k a n a n d a n s e d i a a n f a r -
m a s i o l e h m i k r o o r g a n i s m e , d a n (d) m e n s t e r i l k a n p e r a l a t a n - p e r a l a t a n y a n g d i g u n a k a n
u n t u k proses aseptis.
Sterilisasi m e r u p a k a n salah satu u p a y a y a n g dapat d i l a k u k a n u n t u k m e m u s n a h k a n
m i k r o o r g a n i s m e . Pemanasan m e r u p a k a n cara y a n g paling u m u m d i g u n a k a n u n t u k
m e m b u n u h m i k r o o r g a n i s m e beserta sporanya. S e l a m itu, bahan-bahan k i m i a tertentu
j u g a dapat digunakan sebagai disinfektan. Beberapa faktor y a n g m e m e n g a r u h i efekti-
vitas prosedur pemusnahan m i k r o o r g a n i s m e adalah sebagai berikut.
L Jumlah mikroorganisme. Semakin banyak j u m l a h mikroorganisme, semakin lama
w a k t u y a n g d i b u t u h k an u n t u k m e n g e l i m i n a s i populasi secara keseluruhan.
2. K o n s e n t r a s i s e n y a w a a n t i m i k r o b a . K o n s e n t r a s i bahan y a n g d i g u n a k a n u n t u k
m e m b a s m i m i k r o o r g a n i s m e sangat m e n e n t u k a n keberhasilan m e n g h i l a n g k a n
mikroorganisme.
3. P e n g a r u h l i n g k u n g a n . K e b e r a d a a n zat-zat o r g a n i k t e r k a d a n g dapat m e n g h a m b a t
kerja a n t i m i k r o b a k i m i a w i . D i r u m a h sakit, zat-zat o r g a n i k d a l a m darah, m u n t a h ,
dan tinja dapat m e m e n g a r u h i p e m i l i h a n dismfektan y a n g akan digunakan u n t u k
m e m b u n u h m i k r o o r g a n i s m e . L e m a k d a n protein dapat m e l i n d u n g i m i k r o o r g a -
' nisme sehingga lebih tahan terhadap pemanasan.
4. W a k t u pelaksanaan. A n t i m i k r o b a k i m i a w i m e m b u t u h k a n w a k t u p e m a j a n a n y a n g
lebih l a m a u n t u k m e m b u n u h m i k r o o r g a n i s m e y a n g lebih resisten atau endospora.
W a k t u pemajanan y a n g lebih lama dalam pemanasan dapat m e n g i m b a n g i s u h u
yang lebih rendah.
5. S i f a t - s i f a t m i k r o o r g a n i s m e . S i f a t d a n d a y a t a h a n m i k r o o r g a n i s m e m e m e n g a r u h i j
efektivitas prosedur pemusnahan; sebagai contoh, m i k r o o r g a n i s m e y a n g tahan t e r - |
hadap pemanasan m e m e r l u k a n suhu y a n g lebih tinggi atau w a k t u y a n g lebih l a m a j
untuk dimusnahkan.
PENGENDALIAN MIKROORGANISME
SECARA FISIKA
M i k r o o r g a n i s m e d a p a t d i k e n d a l i k a n s e c a r a fisika, y a i t u d e n g a n t e k n i k s u h u , p e n g e -
ringan, tekanan o s m o t i k d a n plasmolisis, sinar radiasi, tegangan p e r m u k a a n , d a n
penyaringan.
Bab 5 - Pengendalian Mikroorganisme 57
Suhu
P e n g g u n a a n s u h u dapat d i b a g i d a l a m d u a k a t e g o r i besar, y a i t u s u h u t i n g g i d a n s u h u
rendah.
Suhu tinggi
Penggunaan suhu tinggi yang dikombinasika n dengan kelembapan tinggi merupakan
cara y a n g p a l i n g e f e k t i f u n t u k m e m a t i k a n m i k r o o r g a n i s m e .
Cara i n i dapat m e m b u n u h m i k r o o r g a n i s m e karena pemanasan dengan k e l e m b a p an
tertentu dapat m e n y e b a b k a n protein-protein y a n g ada dalam m i k r o o r g a n i s m e terko-
agulasi sehingga m i k r o o r g a n i s me tidak m a m p u berkembang dengan baik. Panas l e m -
bap bekerja j a u h l e b i h cepat d a n e f e k t i f d i b a n d i n g k a n dengan panas k e r i n g , y a n g
dapat m e n g h a n c u r k a n m i k r o o r g a n i s m e dengan mengoksidasi k o m p o n e n - k o m p o n e n
k i m i a w i m i k r o o r g a n i s m e . S e b a g a i c o n t o h , s p o r a Clostridium botulimim p e n g h a s i l
toksin b o t u l i s m e dapat d i m a t i k a n hanya dalam w a k t u 4 - 2 0 m e n i t j i k a dipajankan
pada panas l e m b a p s u h u 120''C, tetapi d i p e r l u k a n w a k t u 2 j a m j i k a d i g u n a k a n panas
kering dengan suhu y a n g sama.
Sel vegetatif j a u h lebih peka terhadap panas dibandingkan dengan spora. Pada
u m u m n y a , sel bakteri m a t i pada suhu 6 0 - 7 0 ' 'C selama 5 - 1 0 m e n i t dengan panas l e m -
bap, s e d a n g k a n spora b a k t e r i m e m b u t u h k a n s u h u d i atas IOO"C d a l a m w a k t u . y a n g
lebih lama. Terdapat d u a istilah y a n g digunakan untuk m e n y a t a k a n kepekaan bakteri
t e r h a d a p p a n a s , y a i t u ^ ^ w a k t u k e m a t i a n t e r m a l " {thermcd death point) d a n ^ ' w a k t u
p e n g u r a n g a n d e s i m a l " {decimal reduction time). W a k t u k e m a t i a n t e r m a l m e n g a c u
pada periode w a k t u terpendek y a n g d i b u t u h k a n u n t u k m e m a t i k a n suatu suspensi bak-
t e r i pa'da s u h u t e r t e n t u d a l a m k e a d a a n t e r t e n t u . W a k t u p e n g u r a n g a n d e s i m a l m e n g a c u
pada pengurangan khusus j u m l a h sel hidup, yaitu l a m a n y a w a k t u dala m m e n i t u n t u k
m e n g u r a n g i populasi sebesar 9 0 % .
Prosedur praktis y a n g menggunaka n panas u n t u k m e m a t i k a n m i k r o o r g a n i s m e
mencakup pemanasan basah dan pemanasan kering.
Pemanasan basah
T e k n i k p e m a n a s a n basah t e r d i r i atas:
Uap bertekanan
Panas d a l a m bentuk uap j e n u h bertekanan adalah sarana y a n g paling praktis d a n
dapat d i a n d a l k a n u n t u k sterilisasi. U a p b e r t e k a n a n m e n g h a s i l k a n s u h u j a u h d i atas
titik didih d a n m e m p u n y a i beberapa keunggulan, yaitu pemanasan dapat berlang-
sung dengan cepat dan m e m p u n y a i daya tembus y a n g diperoleh dari kelembapa n
yang tinggi. Semua ini akan mempermudah koagulasi protein dalam selm i k r o o r-
ganisme. A l a t sterilisasi y a n g m e n g g u n a k a n uap dengan tekana n y a n g dapat diatur
adalah a u t o k l a f Saat penggunaan autoklaf, harus diusahakan agar seluruh udara
d a l a m r u a n g a u t o k l a f d i g a n t i k a n dengan ua p j e n u h . U d a r a y a n g m a s i h tersisa
dalam ruang a u t o k l a f m e n y e b a b k a n suhu d i dalam ruang tersebut akan t u r u n j a u h
di b a w a h s u h u y a n g dicapai oleh uap j e n u h m u r n i pada tekanan y a n g sama. T e k a n -
an uap tidak m e m a t i k a n m i k r o o r g a n i s m e , tetapi suhu tinggi dari u a p itulah y a n g
dapat m e m a t i k a n m i k r o o r g a n i s m e . A u t o k l a f u m u m n y a dioperasikan pada tekanan

1,5 a t m d a n s u h u 1 2 P C . W a k t u y a n g d i p e r l u k a n u n t u k s t e r i l i s a s i b e r g a n t u n g p a d a
sifat bahan y a n g disterilkan, tipe w a d a h , d a n v o l u m e bahan. Beberapa z a t t i d ak
dianjurkan u n t u k disterilkan dengan autoklaf. Sebagai contoh, zat-zat y a n g tidak
b e r c a m p u r d e n g a n air, seperti l e m a k d a n m i n y a k , t i d a k dapat d i t e m b u s o l e h u a p
sehingga mikroorganism e yan g terkandung d i dalamnya akan bertahan hidup.
Selain i t u , beberapa substansi y a n g berubah atau rusak apabila terpajan suhu tinggi
tidak dianjurkan u n t u k disterilkan dengan autoklaf. O l e h karena i t u , harus diste-
rilkan dengan cara lain.
Sterilisasi bertahap
B e b e r a p a m e d i a b a k t e r i d a n z a t k i m i a dapat d i p a n a s k a n d i atas s u h u IOC
N a m u n , u n t u k b a h a n - b a h a n y a n g t i d a k t a h a n t e r h a d a p p e m a n a s a n d i a t a s 100°C,
dapat d i l a k u k a n sterilisasi bertahap. D a l a m proses i n i , bahan i t u dipanaskan pada
s u h u 100°C s e l a m a 3 h a r i b e r t u r u t - t u r u t d a n d i s e l i n g i d e n g a n p e r i o d e i n k u b a s i d i
antaranya. Spora-spora y a n g resisten terhadap pemanasan akan berkecambah
selama m a s a inkubasi. Sel-sel vegetatif k e m u d i a n dapat d i h a n c u r k a n pada p e m a -
nasan berikutnya.
Air nnendidih
Sel-sel vegetatif mikroorganisme akan terbunuh dalam w a k t u 10 m e n i t dalam aif^
m e n d i d i h . N a m u n , beberapa spora bakteri dapat bertahan d a l a m k o n d i s i tersebut
selama berjam-jam. M e r e b u s peralatan d idalam air m e n d i d i h d a l a m w a k t u y a n g
singkat cenderung menghasilkan dismfeksi daripada sterilisasi. O l e h karena itu,
air m e n d i d i h tidak dapat diandalkan u n t u k sterilisasi.
Pasteurisasi
Susu, r u m , d a n beberapa m i n u m a n yang mengandung alkohol biasanya d i p r o s e s ^
dengan perlakua n panas terkendali u n t u k m e m a t i k a n j e n i s m i k r o o r g a n i s m e ter-
tentu, tetapi tidak m e m a t i k a n m i k r o o r g a n i s m e y a n g lainnya. Susu dipasteurisasi
berdasarkan w a k t u kematian termal untuk mikroorganisme patogen yang paling-j-l
resisten u n t u k dibasmi. Pemanasan susu pada suhu y a n g terlampau tinggi t i d a k -
d i k e h e n d a k i k a r e n a m e n g h a s i l k a n c i t a r a s a y a n g k u r a n g s e d a p . Mycobacterium^^
tuberculosis d a n Coxiella burnetii a d a l a h m i k r o o r g a n i s m e p a t o g e n y a n g p a l i n g
resisten terhadap panas y a n g terbawa dalam susu mentah. O l e h sebab itu, suhu
p a s t e u r i s a s i d i n a i k k a n m e n j a d i 62,8°C s e l a m a 3 0 m e n i t .
Pemanasan kering
T e k n i k p e m a n a s a n k e r i n g t e r d i r i atas:
Sterilisasi d e n g a n udara panas
Sterilisasi dengan panas k e r i n g dianjurkan j i k a tidak dikehendaki penggunaan
uap bertekanan atau j i k a tidak dikehendaki terjadi k o n t a k antara u a p bertekanan
dan benda y a n g akan disterilkan. Prosedur i n i dilakukan u n t u k peralatan labo-
r a t o r i u m d a n d i b u t u h k a n s u h u 160-180°C s e l a m a 2 j a m .
Pembakaran
Pembakaran bahan yang mengandung mikroorganism e berarti juga m e m b a s m i

mikroorganisme itu. Pembakaran digunakan untuk memusnahkan bangkai, hewan-
h e w a n percobaan y a n g terinfeksi, d a n bahan terinfeksi lain y a n g perlu dibuang.
Pemusnahan m i k r o o r g a n i s m e dengan pembakaran j u g a selalu d i l a k u k a n di labora-
t o r i u m u n t u k m e n s t e r i l k a n j a r u m sengkelit, y a i t u d e n g a n d i p i j a r k a n d i atas alat
pembakar api Bunsen.
Suhu rendah
S u h u d i b a w a h suhu o p t i m u m pertumbuhan m i k r o o r g a n i s m e dapat m e n e k a n laju
m e t a b o l i s m e m i k r o o r g a n i s m e i t u . A p a b i l a s u h u c u k u p rendah , m e t a b o l i s m e dan per-
t u m b u h a n m i k r o o r g a n i s m e akan terhenti. S u h u rendah sangat bermanfaat untuk
m e n g a w e t k a n biaka n karena m i k r o o r g a n i s m e m e m p u n y a i k e m a m p u a n dapat berta-
han hidup pada keadaan y a n g sangat dingin.
Pendinginan
B i a k a n beberapa bakteri, k h a m i r , dan kapang y a n g d i t u m b u h k a n pada m e d i a agar da-
l a m t a b u n g r e a k s i d a p a t t e t a p h i d u p s e l a m a b e r b u l a n - b u l a n p a d a s u h u l e m a r i es, y a i t u
s e k i t a r 4-7°C.
Suhu di bawah titik nol

B a k t e r i d a n v i r u s d a p a t d i p e r t a h a n k a n d i b a w a h s u h u -20°C ( s u h u p e m b e k u m e k a n i s ) ,
-70°C ( s u h u e s k e r i n g ) , - 1 9 5 " C ( s u h u n i t r o g e n c a i r ) . P e n d i n g i n a n m u l a - m u l a d a p a t
m e m a t i k a n sebagian sel, tetapi j u m l a h y a n g dapat bertahan lebih besar d a n dapat
hidup dalam w a k t u yang lama.
Pengeringan
Pengeringan sel m i k r o o r g a n i s m e dan l i n g k u n g a n n y a sangat m e n g u r a n g i atau m e n g -
h e n t i k a n aktivitas m e t a b o l i s m e m i k r o o r g a n i s m e dan diikuti dengan k e m a t i a n s e j u m l a h
sel. M i k r o o r g a n i s m e dapat bertahan hidu p setelah pengeringan d a l a m w a k t u y a n g
bervariasi, y a n g bergantung pada beberapa fakto r berikut.
• Jenis m i k r o o r g a n i s m e .
• Bahan pembawa yang dipakai untuk mengeringkan mikroorganisme.
• K e s e m p u r n a a n proses pengeringan.
• K o n d i s i fisik ( c a h a y a , s u h u , k e l e m b a p a n ) y a n g d i b e r l a k u k a n u n t u k m i k r o o r g a -
nisme yang dikeringkan.
Tekanan osmotik dan plasmolisis

O s m o s i s adalah suatu proses difusi melintasi m e m b r a n s e m i p e r m i a b el y a n g m e m i -
s a h k a n d u a m a c a m l a r u t a n d e n g a n k o n s e n t r a s i zat y a n g berbed a d a n b e r f u n g s i u n t u k
f-
m e n y a m a k a n konsentrasi zat pada kedua sisi m e m b r a n . Sebagai contoh, j i k a s e j u m l a h

bakteri disuspensikan dalam larutan yang mengandung N a C l konsentrasi t m g g i ( 2 0 % ) ,
cairan sel akan m e n g a l i r dari bagian d a l a m sel m e l a l u i m e m b r a n sitoplasma ke d a l a m
- larutan d i s e k e l i l i n g sel; h a l i n i akan m e n y e b a b k a n sel m e n g a l a m i lisis. Proses i n i
d i k e n a l d e n g a n plasmolisis. Sebaliknya, j i k a bakteri berada d i dalam larutan N a C l
I konsentrasi rendah ( 0 , 0 1 % ) , arah aliran air akan sebaliknya, yaitu air akan mengalir
I dari larutan d i l u a r sel k e d a l a m sel b a k t e r i . Proses i n i d i k e n a l d e n g a n plasmoptisls.
X K o n s e n t r a s i g a r a m j a u h d i atas 1 % b e r b a h a y a b a g i b a k t e r i , t e t a p i t e n t u n y a t i d a k
berbahaya bagi m i k r o o r g a n i s m e yang hidup di lautan. D e m i k i a n pula, banyak m i k r o -
o r g a n i s m e y a n g t a h a n terhadap gula, b a h k a n ada p u l a y a n g t a h a n terhadap g u l a k o n -
sentrasi t i n g g i . P e r t u m b u h a n m i k r o o r g a n i s m e u m u m n y a terhambat o l e h adanya kadar
garam N a C l 1 0 - 1 5 % atau kadar gula 5 0 - 7 0 % . Penghambatan pertumbuhan i n i m e -
rupakan dasar p e n g a w e t a n bahan m a k a n a n dengan pengasinan atau dengan larutan
gula berkadar t i n g g i . D e n g a n cara i n i , sel-sel a k a n m e n g a l a m i p l a s m o l i s i s ; sel-sel
m i k r o o r g a n i s m e akan m e n g a l a m i dehidrasi sehingga tidak dapat m e l a k u k a n meta-
b o l i s m e atau b e r k e m b a n g biak. Jika m a s i h ada y a n g dapat bertahan, sel-sel m i k r o -
^ organisme tersebut akan berada dalam keadaan dorman.
Sinar radiasi
Beberapa m a c a m radiasi dapat bersifat letal bagi m i k r o o r g a n i s m e , y a i t u s p e k t r u m
elektromagnetik (radiasi ultraviolet, sinar X , d a n sinar g a m m a ) d a n sinar katode
J (elektron berkecepatan tinggi).
Sinar ultraviolet
B a g i a n u l t r a v i o l e t pada s p e k t r u m e l e k t r o m a g n e t i k m e l i p u t i s e m u a radiasi dari 15
' sampai 3 9 0 n m . Panjang g e l o m b a n g sekitar 265 n m m e m i l i k i efisiensi bakterisida ter-
t i n g g i . M e s k i p u n sebagian energi pancaran sinar m a t a h a r i t e r d i r i atas cahaya u l t r a -
violet, sebagian besar panjang gelombang sinar ultraviolet y a n g pendek i t u tersaring
oleh atmosfer b u m i (lapisan ozon) dan polutan atmosfer. D e n g a n d e m i k i a n , radiasi
ultraviolet m e n j a d i terbatas kisarannya, y a i t u 2 8 0 - 3 9 0 n m . Jadi, dapat d i s i m p u l k a n
b a h w a sinar matahari pada keadaan tertentu m e m i l i k i kapasitas m e m b u n u h bakteri,
{ tetapi terbatas.
f L a m p u U V y a n g dapat m e m a n c a r k a n sinar ultraviolet pada panjang g e l o m b a n g
2 6 0 - 2 7 0 n m banyak digunakan untuk mengurangi populasi hiikroorganisme di ruang
bedah r u m a h sakit; u n t u k pengisian p r o d u k steril k e dala m a m p u l d i ruang aseptik;
dan u n t u k m e n g h i n d a r i k o n t a m i n a s i m i k r o o r g a n i s m e d i industri m a k a n a n . K e k u a t a n
sinar U V d a l a m m e m b a s m i m i k r o o r g a n i s m e m e m i l i k i keterbatasan karena sinar U V
m e m i l i k i daya t e m b u s y a n g sangat kecil, j a d i h a n y a m i k r o o r g a n i s m e y a n g a d a d i
p e r m u k a a n benda y a n g secara langsung terkena sinar U V y a n g dapat d i m u s n a h k a n
I oleh sinar ultraviolet. Sinar U V dapat m e r u s a k struktur asam n u k l e a t m i k r o o r g a n i s m e ,
I y a n g berupa h u b u n g a n silang antara pasangan-pasangan basa t i m i n sehingga dapat
I menyebabkan gangguan pada replikasi D N A mikroorganisme d a n akhirny a m e n y e -
l b a h k an k e m a t i a n m i k r o o r g a n i s m e tersebut.
Sinar X
Sinar X bersifat letal bagi m i k r o o r g a n i s m e j u g a bagi m a h l u k h i d up y a n g lain. T i d a k
seperti radiasi U V , sinar X m e m i l i k i energi dan daya tembus y a n g tinggi. N a m u n , si-
nar X tidak praktis sebagai metode rutin u n t u k pengendalian populasi m i k r o o r g a n i s m e
karena daya t e m b u s n y a sangat besar sehingga m e n y u l i t k a n u p a y a p e r l i n d u n g a n terha-
dap p e m a k a i dan tidak efisien.
Sinar g a m m a
Radiasi sinar g a m m a y a n g lebih kuat daripada radiasi sinar X dipancarkan d a r i isotop-
isotop radioaktif, seperti C o - 6 0 . K a r e n a telah d i l a k u k a n p r o g r a m - p r o g r a m riset u t a m a
y a n g m e n g g u n a k a n energi a t o m , k i n i tersedia s e j u m l a h besar radioisotop sebagai pro-
duk sampingan pemecahan atom. Isotop-isotop ini merupakan sumber radiasi sinar
g a m m a . Sinar g a m m a serupa dengan sinar X , tetapi m e m p u n y a i panjang g e l o m b a n g
y a n g lebih pendek dan energi y a n g lebih t i n g g i . D a y a t e m b u s sinar g a m m a besar dan
bersifat letal terhadap semua bentuk kehidupan termasuk m i k r o o r g a n i s m e . Sinar
g a m m a l e b i h d i s u k a i d a l a m sterilisasi bahan-bahan tebal d a n besar, seperti p e r a l a t an
m e d i a atau bahan m a k a n a n , karena m e m i l i k i daya t e m b u s dan efek m i k r o b i s i d a , serta
m e m i l i k i efisiensi y a n g lebih tinggi dibandingkan dengan sinar X .
Sinar i<atode
Beberapa j e n i s peralatan khusus dapat m e n g h a s i l k a n e l e k t r o n y a n g disebut sinar
katode atau berkas elektron. Elektro n y a n g berintensitas tinggi (jutaan volt) i n i dipacu
sehingga mencapa i kecepatan y a n g sangat t i n g g i .
P e m a c u e l e k t r o n , y a n g m e r u p a k a n suatu alat y a n g m e n g h a s i l k a n berkas e l e k t r o n
bertegangan tinggi tersebut, dapat digunakan u n t u k m e n s t e r i l k a n peralatan bedah,
obat-obatan, d an benda-benda lain. Sebagaimana dengan penggunaan sinar g a m m a ,
salah satu k e u n t u n g a n proses i n i adalah benda dapat d i s t e r i l k a n pada s u h u k a m a r dan
d a l a m keadaan terbungkus. Radiasi berkas e l e k t r o n m e m p u n y a i daya t e m b u s terbatas,
tetapi proses sterilisasi dapat berlangsung d a l a m w a k t u singkat.
Tegangan permukaan
Tegangan p e r m u k a a n m e n y e b a b k a n p e r m u k a a n cairan m e n y e r u p a i m e m b r a n elastis
sehingga dapat m e m e n g a r u h i kehidupan m i k r o o r g a n i s m e . P r o t o p l a s m a m i k r o o r g a -
n i s m e terdapat d i d a l a m sel dan d i l i n d u n g i d i n d i n g sel. D e n g a n d e m i k i a n , perubahan
tegangan p e r m u k a a n d i n d i n g sel a k a n m e m e n g a r u h i p e r t u m b u h a n dan m e n y e b a b k a n
perubahan bentuk m o r f o l o g i sel. S e n y a w a a k t i f p e r m u k a a n dapat m e n g u r a n g i
tegangan p e r m u k a a n karena dapat diabsorpsi pada a n t a r m u k a ( p e r m u k a a n antara
udara dan cairan) sehingga m e n a i k k a n k e m a m p u a n air u n t u k membasahi permukaan
d i n d i n g sel b a k t e r i , seperti sabun, detergen, T w e e n - 8 0 , dan T r i t o n A - 2 0 .
Penyaringan
P e n y a r i n g a n d i l a k u k a n dengan m e n g a l i r k a n cairan m e l a l u i suatu alat p e n y a r i n g y a n g
m e m i l i k i pori cukup kecil untuk menahan mikroorganisme dengan ukuran tertentu.
Saringan akan tercemar, tetapi cairan y a n g m e l e w a t i saringan i t u akan steril. Penya-

ringan d i l a k u k a n u n t u k mensterilkan bahan-bahan y a n g peka terhadap panas, seperti ^
serum, e n z i m , t o k s i n k u m a n , cairan ekstrasel, antibiotik, asam a m i n o , s e n y a w a gula,
v i t a m i n , dan s e n y a w a lain y a n g tidak tahan pemanasan. Sterilisasi larutan-larutan ter-
s e b u t d i l a k u k a n d e n g a n p e n y a r m g a n m e n g g u n a k a n filter y a n g m e m p u n y a i p o r i s a n g a t
h a l u s d a n p o m p a v a k u m u n t u k m e n y e d o t l a r u t a n a g a r d a p a t m e l e w a t i filter d e n g a n
l a n c a r . A d a b e b e r a p a m a c a m filter y a n g b i a s a d i g u n a k a n , y a i t u
1. F i l t e r C h a m b e r l a n d - P a s t e u r
F i h e r i n i berbentuk seperti lilin dan terbuat dari porselen y a n g berpori halus.
2. Filter gelas
F i l t e r i n i b e r u p a p i r i n g a n y a n g t e r d i r i atas b u t i r a n - b u t i r a n gelas y a n g b e r p o r i - p o r i
sangat halus.
3. Filter Seitz
L e m b a r a n filter i n i t e r b u a t d a r i a s b e s d e n g a n u k u r a n p o r i t e r t e n t u . F i l t e r d i l e t a k -
kan d a l a m bejana antikarat. Filter, bejana antikarat, dan l a b u isap h a r us d i s t e r i l k a n
terlebih dahulu sebelum digunakan.
4. Filter membran
F i l t e r i n i terbuat d a r i ester selulosa atau bahan p o l i m e r l a i n d e n g a n d i a m e t e r p o r i -
p o r i 0 , 1 s a m p a i 1 0 m i k r o n . K e t e b a l a n l a p i s a n filter m e m b r a n s a n g a t t i p i s , k u r a n g
lebih 150 m i k r o n . Filter i n i banyak digunakan di laboratorium atau industri u n t u k
m e n s t e r i l k a n larutan. F i l t e r i n i j u g a dapat d i g u n a k a n u n t u k m e n e n t u k a n j u m l a h
m i k r o o r g a n i s m e d a l a m s a m p e l air atau larutan secara m i k r o b i o l o g i s .
5. F i l t e r u d a r a
Filter udara m e m p u n y a i efisiensi tinggi u n t u k m e n y a r i n g udara, y a n g m e n g a n -
d u n g p a r t i k e l , c o n t o h n y a filter H E P A (high efficiency particulate air) s e h i n g g a
m e m u n g k i n k a n udara bersih dialirkan k e dalam ruangan tertutup. Filter H E P A
b a n y a k d i g u n a k a n p a d a r u a n g a n a s e p t i s (laminar airflow bench) u n t u k m e n c e g a h
k o n t a m m a s i m i k r o o r g a n i s m e pada area-area isolasi dan u n t u k m e n c e g a h p e n y e -
baran infeksi.
PENGENDALIAN MIKROORGANISME SECARA KIMIA

B a h a n k i m i a y a n g digunakan untu k m e m b u n u h m i k r o o r g a n i s m e disebut disinfektan.
C a i r a n d i s i n f e k t a n biasanya d i g u n a k a n u n t u k m e m u s n a h k a n m i k r o o r g a n i s m e d i lan-,
tai, ruangan, peralatan m e d i s , pakaian, dan benda-benda m a t i lain. D i s i n f e k t a n sangat
penting u n t u k r u m a h sakit dan k l i n i k sebab dapat m e m b a n t u m e n c e g a h pasien m e n g -
alami infeksi dari peralatan r u m a h sakit yang digunakan.
Hal-hal y a n g harus diperhatikan dalam penggunaan disinfektan adalah sebagai
berikut.
1. T e r s e d i a r u a n g d a n r o n g g a y a n g c u k u p d i a n t a r a p e r a l a t a n y a n g a k a n d i d i s i n f e k s i '
agar seluruh p e r m u k a a n alat dapat berkonta k langsung dengan disinfektan.
2. D i s i n f e k t a n y a n g d i g u n a k a n s e b a i k n y a bersifat g e r m i s i d a .
3. L a m a d i s i n f e k s i h a r u s tepat d a n alat-alat y a n g d i d i s i n f e k s i j a n g a n d i g u n a k a n atau

dipindahkan sebelum waktunya.
4. L a r u t a n y a n g biasa dipakai u n t u k m e m b u n u h spora k u m a n u m u m n y a bersifat
sangat m u d a h menguap. O l e h karena itu, ventilasi ruangan perlu diperhatikan.
5. P e n g e n c e r a n d i s i n f e k t a n h a r u s s e s u a i d e n g a n a n j u r a n d a n s e t i a p k a l i p e n g g u n a a n
harus dibuat pengenceran baru.
6 . B a h a n p e l e m b u t t a n g a n (hanci lotion) s e b a i k n y a d i s e d i a k a n u n t u k m e r a w a t t a n g a n
setelah k o n t a k dengan disinfektan. . .
. Penggolongan disinfektan berdasarkan jenis bahan

Beberapa j e n i s d i s i n f e k t a n y a n g dapat d i g u n a k a n adalah fenol d a n s e n y a w a fenolik;
bisfenol; g o l o n g a n biguanida; g o l o n g a n h a l o g e n ; g o l o n g a n a l k o h o l ; l o g a m berat dan
c a m p u r a n n y a ; surfaktan; quat; bahan pengawet; g o l o n g a n aldehida; gas k e m o s t e r i l i -
sator; dan g o l o n g a n peroksigen.
Fenol d a n s e n y a w a fenolik
Lister adalah orang pertama yang menggunakan fenol untuk mencegah terjadi infeksi
di ruang operasi. F e n o l sekarang j a r a n g d i g u n a k a n sebagai disinfektan karena m e n g -
iritasi kulit dan m e m i l i k i bau y a n g tidak disukai. F e n o l terkadang d i g u n a k a n sebagai
antiseptik lokal untuk pelega tenggorokan, tetapi m e m p u n y a i sedikit efek a n t i m i k r o b a
pada konsentrasi rendah. Pada konsentrasi 1 % , fenol m e m p u n y a i efek antibakteri
yang signifikan.
Disinfektan yang mengandung derivat fenol disebut fenolik, yaitu disinfektan
y a n g m e n g a n d u n g m o l e k u l fenol y a n g telah d i m o d i f i k a s i s e d e m i k i a n rupa secara
k i m i a w i u n t u k m e n u r u n k a n efek iritasinya atau m e n a m b a h efek antibakterinya d a n
d i k o m b i n a s i dengan sabun atau detergen. F e n o l i k m e m i l i k i efek a n t i m i k r o b a dengan
cara m e r u s a k m e m b r a n p l a s m a y a n g m e n g a n d u n g lipid s e h i n g g a terjadi lisis sel y a n g
berakibat isi sel keluar. D i n d i n g sel m i k o b a k t e r i , penyebab tuberkulosis d a n lepra,
m e n g a n d u n g lipid y a n g tinggi sehingga bakteri ini sangat sensitif terhadap fenolik.
Selain i t u , larutan f e n o l i k tetap a k t i f d a l a m bahan o r g a n i k serta stabil d a n bertahan
l a m a setelah penggunaan. Salah satu f e n o l i k y a n g sering d i g u n a k a n adalah k r e s o l ,
yaitu bahan u t a m a f o r m u l a lisol.
Bisfenol
B i s f e n o l adalah derivat fenol y a n g m e n g a n d u n g dua fenolik. Salah satu c o n t o h bis-
fenol adalah heksaklorofen, y a n g sering digunakan u n t u k mengatasi k o n t a m i n a s i d i
r u a n g o p e r a s i d a n r u m a h s a k i t . B a k t e r i G r a m - p o s i t i f s e p e r t i Stciphylococcus d a n
Streptococcus y a n g s e r i n g m e n y e b a b k a n i n f e k s i k u l i t p a d a b a y i b a r u l a h i r s a n g a t
sensitif terhadap heksaklorofen. A k a n tetapi, penggunaan bisfenol y a n g berlebihan
( m i s a l n y a m e m a n d i k a n bayi dengan bisfenol beberapa kali sehari) dapat m e m i c u
kerusakan saraf
Bisfenol lain y a n g sering digunakan adalah triklosan, y a n g m e r u p a k a n bahan
y a n g t e r k a n d u n g d a l a m sabun antiseptik dan pasta gigi. T r i k l o s a n m e n g h a m b a t e n z i m
yang dibutuhkan u n t u k biosintesis asam l e m a k sehingga m e n u n j u k k a n efek terhadap
keutuhan m e m b r a n plasma. T r i k l o s a nterutama efektif terhadap bakteri Gram-positif,
tetapi j u g a bekerja dengan baik u n t u k j a m u r dan bakteri Gram-negatif. Beberapa
b a k t e r i , m i s a l n y a Pseudomonas aeruginosa, s a n g a t r e s i s t e n t e r h a d a p t r i k l o s a n d a n
beberapa golongan antiseptik lain.
Golongan biguanida
K l o r h e k s i d i n adalah j e n i s biguanida y a n g m e m p u n y a i s p e k t r u m aktivitas y a n g luas.
Zat i n i sering digunakan u n t u k m e n g o n t r o l m i k r o b a pada kulit atau m e m b r a n m u k o s a .
Jika d i k o m b i n a s i k a n dengan a l k o h o l atau detergen, k l o r h e k s i d i n j u g a dapat d i g u n a k a n
untuk bahan pencuci tangan sebelum dan sesudah operasi. Pada penggunaannya,
k l o r h e k s i d i n m e m i l i k i afinitas y a n g sangat kuat dan terikat pada k u l i t dan m e m b r a n
m u k o s a , serta t o k s i s i t a s n y a y a n g r e n d a h m e r u p a k a n suatu k e u n g g u l a n . W a l a u p u n
d e m i k i a n , k l o r h e k s i d i n tidak boleh k e n a m a t a karena dapat m e n y e b a b k a n kerusakan.
K l o r h e k s i d i n m e m b u n u h bakteri dengan cara m e r u s a k m e m b r a n sel b a k t e r i . K l o r h e k -
sidin merupakan antiseptik bakteri vegetatif dan jamur. K l o r h e k s i d i n j u g a efektif
terhadap virus y a n g lipofilik (virus yang m e m p u n y a i kapsul/simpai). M i k o b a k t e r i
biasanya resisten terhadap k l o r h e k s i d i n . K l o r h e k s i d i n tidak m e n i m b u l k a n efek pada
endospora dan kista protozoa.
Golongan halogen
Halogen terutama iodin dan klorin merupakan antiseptik yang efektif, baik tunggal
m a u p u n sebagai k o m p o n e n d a l a m bentuk sediaan lain. I o d i n adalah salah satu anti-
septik tertua dan paling efektif. Antiseptik i n i bekerja untuk semua jenis bakteri, en-
dospora, berbagai j e n i s j a m u r , dan virus. I o d i n tersedia d a l a m b e n t u k t i n g t ur dan
sebagai iodofor. l o d o f o r adalah k o m b i n a s i i o d i n dengan m o l e k u l o r g a n i k y a n g dapat
melepas i o d i n secara perlahan-lahan. l o d o f o r m e m p u n y a i efek antiseptik m i r i p i o d i n ,
tetapi tidak terlalu mengiritasi.
K l o r i n sebagai gas atau k o m b i n a s i d e n g a n zat k i m i a l a i n a d a l a h d i s i n f e k t a n y a n g
j u g a banyak digunakan. E f e k germisida klorin disebabkan oleh asam hipoklorit yang
t e r b e n t u k p a d a saat k l o r i n b e r e a k s i d e n g a n air. B a g a i m a n a t e p a t n y a m e k a n i s m e a s a m
hipoklorit m e m b u n u h m i k r o o r g a n i s m e b e l u m diketahui dengan pasti.
B e n t u k cair d a r i gas k l o r i n y a n g d i p a d a t k a n d i g u n a k a n u n t u k d i s i n f e k s i a i r m i -
n u m , a i r k o l a m r e n a n g , d a n l i m b a h s a m p a h . K l o r i n d i o k s i d a a d a l a h b e n t u k gas d a r i
k l o r i n y a n g biasanya digunakan u n t u k disinfeksi lapangan, terutama u n t u k m e m b u n u h
endospora dan bakteri antraks. S e n y a w a lain dari campuran klori n adalah k l o r a m i n ,
y a n g t e r d i r i atas k l o r i n d a n a m o n i a . B a h a n i n i d i g i m a k a n u n t u k d i s i n f e k t a n , antiseptik,
atau sanitasi. K l o r a m i n m e r u p a k a n campuran sangat stabil y a n g melepaskan k l o r i n
selama j a n g k a w a k t u y a n g panjang. K l o r a m i n digunakan u n t u k sanitasi peralatan ge-
las, peralatan m a k a n , d a n peralatan d a l a m i n d u s t r i susu d a n m a k a n a n .
Golongan alkohol
A l k o h o l sangat efekti f u n t u k m e m b u n u h bakteri dan j a m u r , tetapi tidak efektif u n t u k
endospora dan virus yang tidak bersimpai. M e k a n i s m e kerja a l k o h o l biasanya dengan
Bab 5 - Pengendalian Mikroorganisme 65 ,
mendenaturasi protein, tetapi a l k o h o l j u g a dapat m e n g g a n g g u m e m b r a n dan m e l a r u t -

kan l e m a k tennasuk lipid y a n g m e r u p a k a n k o m p o n e n u t a m a s i m p a i virus. K e u n g g u l -
an a l k o h o l adalah dapat bekerja cepat dan m e n g u a p dengan cepat tanpa m e n i n g g a l k a n
residu.
Dua j e n i s a l k o h o l y a n g sering digunakan adalah etanol dan isopropanol. K o n s e n -
trasi m a k s i m u m etanol y a n g d i r e k o m e n d a s i k a n adalah 7 0 % , tetapi konsentrasi 6 0 -
9 5 % j u g a dapat m e m b u n u h dengan sama baiknya. E t a n o l m u r n i k u r a n g efektif d i -
bandingkan dengan campuran etanol d a n a i r karena denaturasi m e m b u t u h k a n air.
Isopropanol j a u h lebih kuat daripada etanol sebagai antiseptik dan disinfektan. Selain
itu, isopropanol lebih m u r a h , lebih m u d a h menguap, d a n lebih m u d a h didapat dari-
pada etanol. E t a n o l d a n isopropanol sering digunakan u n t u k m e n a m b a h efektivitas
antiseptik bahan k i m i a lain.
Logam berat dan campurannya

Beberapa l o g a m berat dapat bersifat sebagai antiseptik, t e r m a s u k perak m e r k u r i d a n
p e r u n g g u . K e m a m p u a n l o g a m berat m e n g h a m b a t p e r t u m b u h a n m i k r o o r g a n i s m e d i -
k e n a l d e n g a n daya oligodinamik. D a y a i n i dapat d i a m a t i dengan m e l e t a k k a n u a n g
l o g a m y a n g terbuat dari perak atau perunggu pada m e d i a padat d a l a m c a w a n petri
y a n g telah d i i n o k u l a s i dengan b a k t e r i. L o g a m berat d a l a m j u m l a h k e c i l y a n g berdifusi
dari k o i n dapat menghamba t pertumbuhan bakteri dalam j a r a k tertentu d i sekitar k o i n
sehingga m e m b e n t u k zona bersih dari pertumbuhan bakteri. E f e k o l i g o d i n a m i k diper-
kirakan terjadi karena logam berikatan dengan gugus sulfhidril pada protein sehingga
terjadi denaturasi protein.
Sulfacine, k o m b i n a s i p e r a k i o d i d a d a n b i g u a n i d a , a d a l a h a n t i m i k r o b a y a n g m e n -
j a n j i k a n dan sangat stabil. Sulfacine dapat m e m b u n u h berbagai j e n i s m i k r o o r g a n i s m e
yang bersentuhan dengan kulit ataupun dalam lingkungan. Perunggu dalam bentuk
perunggu sulfat digunakan untuk menghancurkan ganggang hijau yang t u m b u h d i
t e m p a t p e n a m p u n g a n air, k o l a m renang, dan k o l a m i k a n .
L o g a m lain y a n g d i g u n a k a n sebagai antiseptik adalah Z n . Seng k l o r i d a adalah
bahan y a n g u m u m d i g u n a k a n d a l a m obat k u m u r , sedangkan seng oksida m e r u p a k a n
b a h a n a n t i f u n g i y a n g b a n y a k d i m a n f a a t k a n d a l a m i n d u s t r i cat u n t u k m e n g h a m b a t p e r -
t u m b u h a n j a m u r p a d a p e r m u k a a n y a n g d i l a p i s i d e n g a n cat.
Surfaktan
Surfaktan dapat m e n g u r a n g i tegangan p e r m u k a a n a n t a r m o l e k u l pada cairan. C o n t o h
surfaktan adalah sabun dan detergen. Sabun hanya sedikit berfungsi sebagai antiseptik,
tetapi m e m p u n y a i fungsi penting u n t u k m e m b u a n g m i k r o o r g a n i s m e secara m e k a n i s
m e l a l u i pencucian. K u l i t n o r m a l m e n g a n d u n g sel-sel m a t i , debu, k e r i n g a t k e r i n g ,
m i k r o o r g a n i s m e , dan m i n y a k y a n g berasal dari kelenjar m i n y a k . S a b u n m a m p u m e -
m e c a h lapisan m i n y a k m e n j a d i butiran kecil. Proses i n i dikenal sebagai e m u l s i f i k a s i .
L e m a k dan m a t e r i lain y a n g t e r e m u l s i a k a n diangkat o l e h sabun d a n air, k e m u d i a n
d i s i n g k i r k a n s a a t k u l i t d i b i l a s d e n g a n air. S u r f a k t a n a s a m i o n i k s a n g a t p e n t i n g u n t u k
disinfeksi peralatan dan perlengkapan produk olahan susu dan m a k a n a n .
• 66 Bubu Ajar Mikrobiologi: Panduan Mahasiswa Farmasi dan Kedokteran
Quat
Surfaktan y a n g paling sering digunakan adalah detergen k a t i o n i k , terutama s e n y a w a
a m o n i u m k u a r t e r n e r (guaternary ammonium compound, Qiiat). K e m a m p u a n m e m -
bersihkan yang d i m i l i k i senyawa ini disebabkan oleh muatan positif kation m o l e k u l .
N a m a a m o n i u m kuarterner berasal dari hasil m o d i f i k a s i s e n y a w a a m o n i u m y a n g
m e m p u n y a i e m p a t v a l e n s i . Quat b e r s i f a t b a k t e r i s i d a k u a t t e r h a d a p b a k t e r i G r a m -
positif, tetapi k u r a n g poten terhadap bakteri Gram-negatif.
Quat juga m e r u p a k a n f u n g i s i d a , a m e b i s i d a , d a n v i r u s i d a t e r h a d a p v i r u s y a n g b e r -
simpai, tetapi tidak a k t i f terhadap endospora atau m i k o b a k t e r i .
M e k a n i s m e kerja sebagai antiseptik b e l u m diketahui secara pasti, tetapi diduga
m e m e n g a r u h i m e m b r a n plasma m i k r o o r g a n i s m e dengan cara m e n g u b a h permeabilitas
sel dan m e n y e b a b k a n beberapa s e n y a w a dan k o m p o n e n p e n t i n g s i t o p l a s m a h i l a n g .
B e b e r a p a p r o d u k quat y a n g t e r k e n a l a d a l a h b e n z a l k o n i u m k l o r i d a d a n s e t i l p i r i -
d i n u m klorida. Produk ini merupakan antiseptik yang kuat, tidak berwarna, tidak
berbau, stabil, m u d a h dilarutkan, dan tidak toksik, kecuali pada konsentrasi y a n g
t i n g g i . A k a n t e t a p i , b e b e r a p a b a k t e r i , a n t a r a l a i n Pseudomonas aeruginosa, s a n g a t
r e s i s t e n t e r h a d a p quat, b a h k a n d a p a t b e r k e m b a n g b i a k d i d a l a m quat.
Bahan pengawet
Bahan p e n g a w e t k i m i a s e r i n g d i t a m b a h k a n p a d a s e d i a a n f a r m a s i a t a u p u n p a d a m a -
kanan dan m i n u m a n untuk memperlambat kerusakan yang disebabkan oleh m i k r o o r -
ganisme tertentu. Sulfur dioksida sudah lama digunakan sebagai disinfektan, terutama
untuk m i n u m a n anggur. Zat tambahan y a n g u m u m digunakan sebagai pengawet
adalah n a t r i u m benzoat, asam sorbat, dan k a l s i u m propionat. B a h a n k i m i a i n i m e r u -
pakan asam organi k sederhana atau garam dari asam organik y a n g j u g a diproduks i
oleh tubuh dan sudah dinyatakan aman dalam makanan.
A n t i b i o t i k tertentu j u g a dapat digunakan dala m pengawetan m a k a n a n . N i s i n
adalah a n t i b i o t i k y a n g terkadang d i t a m b a h k a n ke d a l a m kej u u n t u k m e n g h a m b a t per-
t u m b u h a n endospora bakteri tertentu y a n g dapat m e n y e b a b k a n kerusakan. N i s i n
terbentuk secara a l a m i a h d a l a m j u m l a h kecil di beberapa p r o d u k olahan susu. N i s i n
tidak berasa, m u d a h dicerna, dan tidak toksik. N a t a m i s i n adalah a n t i f u n g i y a n g j u g a
sering d i g u n a k a n dan terbukt i a m a n sebagai pengawet m a k a n a n terutam a keju.
Golongan aldehida
A l d e h i d a termasuk antiseptik y a n g efektif. Beberapa di antaranya adalah formaldehida
dan glutaraldehida. B a h a n i n i m e n o n a k t i f k a n protein dengan m e m b e n t u k ikatan k o v a -
len silang dengan beberapa gugus organik fungsional dalam protein. Gas formaldehida
adalah disinfektan y a n g sangat baik. F o r m a l d e h i d a lebih sering tersedia d a l am bentuk
f o r m a l i n , y a i t u l a r u t a n 3 7 % gas f o r m a l d e h i d a . F o r m a l i n p e r n a h d i g u n a k a n secara luas
untuk m e n g a w e t k a n spesimen biologis dan menonaktifka n bakteri dan virus dalam
pembuatan vaksin.
Glutaraldehida lebih efektif dan tidak terlalu mengiritasi dibandingkan formalde-
hida. G l u t a r a l d e h i d a d i g u n a k a n u n t u k disinfeks i peralatan r u m a h sakit, t e r m a s u k alat
Bab 5 - Pengendalian Mibroorgahisme 67
bantu pemapasan. L a r u t a n glutaraldehida dengan konsentrasi 2 % bersifat bakterisida,

t u b e r k u l o s i d a , d a n v i r u s i d a d a l a m 10 m e n i t d a n s p o r o s i d a d a l a m 3 - 1 0 j a m . B a i k g l u -
taraldehida maupun formaldehida digunakan dalam pembalsaman mayat. Pengganti
glutaraldehida y a n g j u g a sering digunakan adalah ortoftalaldehida, y a n g lebih efektif
m e l a w a n banyak mikroorganisme dan tidak terlalu mengiritasi kulit.
Gas kemosteriUsator
Gas kemosterilisator adalah bahan k i m i a yang digunakan untuk mensterilkan ruang
tertutup. G a s y a n g c o c o k u n t u k m e t o d e i n i adalah e t i l e n o k s i d a . A k t i v i t a s gas i n i ber-
gantung pada denaturasi protein. H i d r o g e n y a n g labil pada protein, seperti - S H ,
- C O O H , - O H , d i g a n t i k a n dengan gugus lain, seperti - C H ^ C H . O H . E t i l e n oksida
m e m b u n u h semua m i k r o b a d a n endospora, tetapi m e m b u t u h k a n w a k t u y a n g lama,
yaitu 4 - 1 8 j a m . D a l a m bentuk m u m i , zat ini beracun d a n m u d a h meledak m a k a
biasanya d i c a m p u r dengan gas y a n g tidak m u d a h terbakar, seperti k a r b o n dioksida
dan nitrogen. Salah satu k e u n t u n g a n gas kemosterilisator adalah gas i n i m e m p u n y a i
daya penetrasi y a n g t i n g g i sehingga dapat d i g u n a k an u n t u k m e n s t e r i l k a n pesawat
ruang angkasa y a n g d i k i r i m k e bulan d an planet M a r s . K e r u g i a n t e k n i k in i adalah
s e m u a gas k e m o s t e r i l i s a t o r b e r s i f a t k a r s i n o g e n i k , t e r u t a m a P - p r o p i o l a k t o n .
Golongan peroksigen
Peroksigen bersifat antiseptik dengan mengoksidasi k o m p o n e n sel m i k r o o r g a n i s m e
y a n g t e r k e n a . C o n t o h g o l o n g a n p e r o k s i g e n y a n g s e r i n g d i g u n a k a n a d a l a h o z o n , HÔ^»
dan asam parasetat. B e n z o i l peroksida adalah bahan peroksigen lain y a n g berguna
u n t u k m e n g o b a t i l u k a dan bisul y a n g terinfeksi oleh bakteri anaerob ataupun sebagai
obat jerawat.
A s a m parasetat adalah salah satu cairan sporosida p a l i n g e f e k t i f y a n g tersedia.
Sediaan ini digunakan untuk menghilangkan endospora d a n virus dalam w a k t u 3 0
m e n i t dan m e m b u n u h bakteri vegetatif dan j a m u r d a l a m w a k t u k u r a n g dari 5 m e n i t .
Penggolongan disinfektan berdasarkan pemakaian

di rumah sakit
D a l a m p e m a k a i a n n ya di r u m a h sakit, disinfektan digolongka n menjadi:
1. D i s i n f e k t a n y a n g t i d a k d a p a t m e m b u n u h v i r u s H I V d a n h e p a t i t i s B , m i s a l n y a :
• Klorheksidin
• Setrimida
• Fenolik
Disinfektan ini tidak aman bila digunakan untuk:
• M e m b e r s i h k a n c a i r a n t u b u h (darah, feses, u r i n e , d a n d a h a k ) .
• M e m b e r s i h k a n peralatan y a n g terkena cairan tubuh, m i s a l n y a sarung tangan
yang terkena darah.
2. D i s i n f e k t a n y a n g m e m b u n u h virus H I V dan hepatitis B , m i s a l n y a
• Disinfektan yang melepaskan klorin, yaitu natrium hipoklorit, kloramin T ,
natrium dikloroisosianurat, dan k a l s i u m hipoklorit.
68 B u k u Ajar Mikrobiologi: Panduan Mahasiswa Farmasi dan Kedokteran
• Disinfektan yang melepaskan iodin, yaitu povidon iodin.

• G o l o n g a n a l k o h o l , yaitu isopropil alkohol , spiritus termetilasi, dan etanol.
• G o l o n g a n aldehida, yaitu formaldehida (formalin) dan glutaraldehida.
• Golongan lain.
P E N G E N D A L I A N M I K R O O R G A N I S M E
D E N G A N A N T I B I O T I K
Penemuan kemoterapi danantibiotik merupakan langkah keberhasilan dalam upaya
penanggulangan penyakit infeksi. T e m u a n penting y a n g telah m e r o m b a k cara peng-
obatan penyakit infeksi adalah protonsil pada tahun 1935, y a n g dapat m e n y e m b u h k a n
infeksi yang disebabkan oleh streptokokus. Protonsil akan dimetabolisme d i dalam
tubuh menjadi /?-amino-banzensulfonamida yang bekerja sebagai antibakteri. T e m u a n
lain yang penting adalah antibiotik penisilin. Antibiotik ini d i t e m u k an oleh F l e m i n g
pada tahun 1929. Pada tahun 1940, Florey, dkk. k e m u d i a n m e m p r o d u k s i penisilin u n -
tuk digunakan d a l a m pengobatan berbagai penyakit infeksi. P e n e m u a n i n i diikuti oleh
penemuan streptomisin pada tahun 1944 d a n penemuan-penemuan jenis antibiotik
lain.
A n t i b i o t i k adalah suatu m e t a b o l it y a n g diperoleh atau dibentuk o l e h berbagai j e n i s
mikroorganisme, yang dalam konsentrasi rendah m a m p u menghambat pertumbuhan
m i k r o o r g a n i s m e lain. A n t i b i o t i k m e m e g a n g peranan penting dalam m e n g o n t r o l p o -
pulasi m i k r o b a d i d a l a m tanah, air, l i m b a h , dan l i n g k u n g a n . D a r i berbagai j e n i s a n t i -
biotik y a n g telah d i t e m u k a n , hanya beberapa golongan antibiotiky a n g dapat digunakan
dalam pengobatan.
Penggolongan antibiotik
Berdasarkan mekanisme kerjanya dalam menghambat pertumbuhan mikroorganisme,
antibiotik d i g o l o n g k a n sebagai berikut.
Antibiotik yang dapat m e n g h a m b a t sintesis dinding sei

mikroba
C o n t o h a n t i b i o t i k golongan i n i antara lain penisilin, sefalosporin, f o s f o m i s i n , v a n k o -
m i s i n , sikloserin, d a n basitrasin. D i n d i n g sel bakteri sangat penting u n t u k m e m p e r -
tahankan struktur sel bakteri. O l e h karena itu, zat y a n g dapat merusak d i n d i n g sel
akan m e l i s i s k a n d i n d i n g sel sehingga dapat m e m e n g a r u h i bentuk d a n struktur sel,
y a n g pada a k h i r n y a dapat m e m b u n u h sel b a k t e r i tersebut.
Antibiotik yang dapat mengganggu atau merusak m e m b r a n sei

M e m b r a n sel m e m p u n y a i peranan penting dalam mengatur transportasi nutrisi d a n
m e t a b o l i t y a n g dapat k e l u a r m a s u k sel. M e m b r a n sel j u g a b e r f u n g s i sebagai t e m p a t
b e r l a n g s u n g n y a respirasi dan a k t i v i t a s biosintesis d a l a m sel. B e b e r a p a j e n i s a n t i b i o t i k
dapat m e n g g a n g g u m e m b r a n sel sehingga dapat m e m e n g a r u h i k e h i d u p a n sel b a k t e r i ,
antara lain p o l i m i k s i n , nistatin, golongan m a k r o l i d a , dan poliena ( m i s a l n y a a m f o t e r i -
sin B ) .
Bdb 5 - Pengendalian Mikroorganisme 69
Antibiotik yang m e n g g a n g g u biosintesis a s a m nukleat

Proses replikasi D N A di dalam selmerupakan siklus y a n g sangat penting bagi k e h i -
dupan sel. Beberapa j e n i s a n t i b i o t i k dapat m e n g g a n g g u m e t a b o l i s m e asam n u k l e a t
tersebut s e h i n g g a m e m e n g a r u h i s e l u r u h fase p e r t u m b u h a n sel b a k t e r i . A n t i b i o t i k y a n g
termasuk dalam golongan ini antara lain asam nalidiksat d a n golongan k u i n o l o n .
A n t i b i o t i k ini dapat m e n g h a m b a t e n z i m D N A - g i r a s e y a n g m e m b u a t lilitan pada D N A
untai ganda.
Antibiotik yang m e n g h a m b a t sintesis protein

Sintesis p r o t e i n m e r u p a k a n suatu r a n g k a i a n proses y a n g t e r d i r i atas proses t r a n s k r i p s i
(yaitu D N A ditranskripsi menjad i / w R N A ) dan proses translasi ( y a i t u w R N A ditrans-
lasi m e n j a d i p r o t e i n ) . A n t i b i o t i k y a n g dapat m e n g h a m b a t proses-proses tersebut a k a n
m e n g h a m b a t sintesis protein. A n t i b i o t i k y a n g t e r m a s uk d a l a m g o l o n g a n i n i antara
lain a k t i n o m i s i n, rifampisin, streptomisin, tetrasiklin, k l o r a m f e n i k o l , eritromisin,
klindamisin, dan gentamisin.
P E N G G U N A A N K E M O T E R A P I G O L O N G A N
A N T I M E T A B O L I T
Substansi k i m i a yan g termasuk dalam golongan antimetabolit antara lain asam
p-aminosalisiiat ( P A S ) , sulfonamida, sulfon, t r i m e t o p r i m , etambutol, dan isoniazid.
P E N G G U N A A N A N T I S E P T I K
Pada u m u m n y a , antiseptik lebih e f e k t i f terhadap bakteri G r a m - p o s i t i f daripada ter-
hadap b a k t e r i G r a m - n e g a t i f F a k t o r pentin g dari sifat resistensi tersebut adalah lapisan
l i p o p o l i s a k a r i d a e k s t e r n a l y a n g t e r d a p a t p a d a b a k t e r i G r a m - n e g a t i f Pseudomonas
aeruginosa ( g o l o n g a n b a k t e r i G r a m - n e g a t i f ) s a n g a t r e s i s t e n t e r h a d a p a n t i s e p t i k , b a h -
k a n d a p a t b e r k e m b a n g s e c a r a a k t i f d i d a l a m b e b e r a p a j e n i s d i s i n f e k t a n , t e r u t a m a quat.
Resistensi i n i j u g a berkaitan dengan permeabilitas d a n p o r i - p o r i d i n d i n g sel bakteri.
P o r i - p o r i d i n d i n g se l bakteri G r a m - n e g a t i f sangat s e l e k t i f terhadap m o l e k u l y a n g
dapat m a s u k k e d a l a m sel.
M i k o b a k t e r i merupakan bakteri yang tidak m e m b e n t u k endospora dan m e m p u n y a i
ketahanan terhadap disinfektan. D i n d i n g sel golongan bakteri i n i sangat tebal d a n
kaya akan lipid.
Endospora bakteri hanya sedikit terpengaruh oleh antiseptik. Kista dan oosit pro-
tozoa j u g a relatif resisten terhadap antiseptik, tetapi a da perbedaan antara sel y a n g
m e m i l i k i kapsul lipid d a n yang tidak m e m i l i k i kapsul lipid. A n t i s e p t i k y a n g larut
d a l a m l e m a k lebih e f e k t i f m e l a w a n v i r u s y a n g bersimpai. S e b a l i k n y a , v i r u s t i d a k ber-
simpai y a n g hanya m e m p u n y a i selubung protein lebih resisten sehingga antiseptik
yang aktif untuk m e l a w a n mikroorganisme inijuga lebih sedikit.
Ketepatan kerja antiseptik y a n g digunakan sangat penting d i k e t a h ui d a l a m peng-
awasan dan pengendalian m i k r o o r g a n i s m e . Efektivitas antiseptik u m u m n y a dapat d i -
pastikan j i k a antiseptik tersebut dapat merusak atau m e n g u b a h struktur dan k o m p o s i s i
sel m i k r o b a . K e l a i n a n s t r u k t u r s e l t e r s e b u t a n t a r a l a i n k e r u s a k a n p a d a d i n d i n g s e l ,
perubahan permeabilitas sel, kerusakan pada m e m b r a n sitoplasma, d a n perubahan
struktur m o l e k u l protein dan asam nukleat m i k r o b a .
T i d a k a d a satu sarana atau t e k n i k pengendalian m i k r o o r g a n i s m e terbaik u n t u k
semua penerapan praktis. Z a t atau proses y a n g cocok u n t u k pengendalian m i k r o -
organisme d a l a m sebuah p r o d u k m a k a n a n b e l u m tentu sesuai u n t u k bahan y a n g d i -
b e r i k a n pada pasien. B e g i t u pula, zat y a n g sesuai u n t u k d i g u n a k a n pada p e r m u k a a n
benda m a t i, seperti p e r m u k a a n m e j a y a n g banyak t e r k o n t a m i n a s i , k e m u n g k i n a n tidak
cocok j i k a digunakan pada kulit manusia. Setiap kondisi harus dipertimbangkan dari
berbagai aspek sehingga t e k n i k dan sarana y a n g digunaka n dapat mencapai hasil y a n g
paling baik dan optimal.
P E N G G U N A A N B A H A N P E N G A W E T
B a h a n pengawet adalah bahan atau senyawa y a n g ditambahkan pada sediaan farmasi
untuk m e l i n d u n g i sediaan terhadap aktivitas m i k r o o r g a n i s m e . Pengawet terutama d i -
t a m b a h k a n pada obat d a l a m w a d a h dosis ganda u n t u k m e n g h a m b a t p e r t u m b u h a n
m i k r o o r g a n i s m e y a n g m u n g k i n m a s u k p a d a saat k e m a s a n d i b u k a d a n d i t u t u p s e l a m a
pemakaian ataupun selama proses produksi. Baha n pengawet j u g a sering d i t a m b a h k a n
dalam produk-produk kosmetik, makanan, dan minuman. Bahan antimikroba tidak
boleh digunakan semata-mata untuk menurunkan j u m l a h mikroorganisme yang hidup
dalam produk dan menggantikan Cara Produksi yang Baik.
Setiap bahan pengawet m e m p u n y a i takaran tertentu; karena itu, penggunaannya
harus diperhatikan sedemikian rupa agar kadar bahan pengawet tidak m e n i m b u l k a n
keracunan pada manusia.
Uji efektivitas bahan pengawet

Langkah-langkah y a n g dilakukan untuk menguji efektivitas bahan pengawet adalah
sebagai berikut.
1. M e n y i a p k a n m i k r o b a u j i
M i k r o b a y a n g d i g u n a k a n d a l a m p e n g u j i a n i n i a d a l a h Candida albicans, AspergU-
lus niger, Escherichia coli, d a n Pseudomonas aeruginosa.
2. M e n y i a p k a n m e d i a p e r b e n i h a n
M e d i a perbenihan yang digunakan disesuaikan dengan jenis m i k r o b a uji, misalnya
m e d i a soybean-casein digest agar.
3. M e m b u a t i n o k u l u m
M i k r o b a uji harus dibiakkan dengan m e n g i n o k u l a s i k a n m i k r o b a d a l a m m e d i a agar
y a n g s e s u a i k e m u d i a n d i i n k u b a s i p a d a s u h u 30-35°C s e l a m a 1 8 - 2 4 j a m u n t u k
b i a k a n b a k t e r i a t a u p a d a s u h u 20-25°C s e l a m a 4 8 j a m u n t u k b i a k a n Candida albi-
cans. L a r u t a n N a C l 0 , 9 % s t e r i l d i g u n a k a n u n t u k m e m a n e n Candida albicans,
k e m u d i a n i n o k u l u m d i e n c e r k a n h i n g g a b e r k o n s e n t r a s i 10^ s e l / m j . K o n s e n t r a s i
setiap m i k r o b a u j i y a n g d i g u n a k a n selanjutnya ditetapkan u n t u k m e n e n t u k a n
b a n y a k n y a i n o k u l u m y a n g digunakan dalam pengujian. Jika suspensi m i k r o b a u j i
tidak segera digunakan , suspensi i n o k u l u m harus dipantau secara berkala dengan

metode lempeng agar u n t u k m e n g h i t u n g kadar i n o k u l u m .
4. Prosedur pengujian
Jika w a d a h sediaan y a n g akan diuji dapat ditembu s secara aseptis dengan j a r u m
suntik, pengujian d i l a k u k a n pada 5 w a d a h asli. A k a n tetapi, j i k a w a d a h sediaan
tidak dapat d i t e m b u s dengan j a r u m suntik, 2 0 m l sampe l d i p i n d a h k a n secara
aseptis ke d a l a m 5 t a b u n g reaksi bertutup y a n g sesuai dan steril. S e l a n j u t n y a , salah
satu suspensi i n o k u l u m m i k r o b a u j i d i i n o k u l a s i k a n k e d a l a m m a s i n g - m a s i n g
w a d a h , dengan perbandingan 0,01 m l i n o k u l u m u n t u k 2 0 m l sediaan, k e m u d i a n
d i c a m p u r h i n g g a h o m o g e n . K a d a r m i k r o b a u j i y a n g d i i n o k u l a s i k a n diatur sede-
m i k i a n rupa sehingga j u m l a h m i k r o b a u j i y a n g terdapat d a l a m sediaan setelah
diinokulasi adalah 10^-10^ sel/ml. A n g k a a w a l m i k r o b a uji ditetapkan dengan
metode lempeng, k e m u d i a n m i k r o b a uji diinkubasi pada suhu pertumbuhan y a n g
sesuai. W a d a h d i a m a t i pada h a r i k e - 7 , 14, 2 1 , d a n 2 8 setelah i n o k u l a s i . J u m l a h
m i k r o b a u j i y a n g h i d u p d a l a m setiap w a d a h d i h i t u n g pada h a r i k e - 7 , 14, 2 1 , dan
28 dengan metode lempeng.
D e n g a n m e m b a n d i n g k a n angka m i k r o b a u j i pada a w a l pengujian dengan
angka m i k r o b a uji pada hari ke-7, 1 4 , 2 1 , dan 28, tingkat penurunan angka lempeng
total tiap m i k r o b a u j i d i h i t u n g selama proses pengujian.
5. I n t e r p r e t a s i
Pada interpretasi hasil, suatu bahan pengawet dinyatakan efektif j i k a :
a. J u m l a h b a k t e r i u j i y a n g h i d u p p a d a h a r i k e - 1 4 b e r k u r a n g h i n g g a l e b i h d a r i
0 , 1 % j u m l a h bakteri awal.
b. J u m l a h k a p a n g d a n k h a m i r y a n g h i d u p s e l a m a 14 h a r i p e r t a m a adala h tetap
atau berkurang dari j u m l a h a w a l .
c. J u m l a h t i a p m i k r o b a u j i y a n g h i d u p s e l a m a 2 8 h a r i p e n g u j i a n a d a l a h t e t a p a t a u
k u r a n g d a r i a n g k a p a d a p o i n (a) d a n (b).
UJI KOEFISIEN FENOL

Koefisien fenol atau angka fenol adalah suatu angka y a n g m e n u n j u k k a n aktivitas la-
rutan disinfektan dalam m e m b u n u h mikroorganisme j i k a dibandingkan dengan fenol
s e b a g a i s t a n d a r . B a k t e r i u j i y a n g d i g u n a k a n d a l a m p e n e n t u a n a n g k a f e n o l a d a l a h Sta-
phylococciis aureus y a n g m e w a k i l i b a k t e r i G r a m - p o s i t i f d a n Salmoneila typhi y a n g
m e w a k i l i bakteri G r a m - n e g a t i f K e d u a bakteri uji i n i d i i n o k u l a s i k a n d a l a m berbagai
pengenceran larutan fenol m u m i dan bahan disinfektan y a n g akan ditentukan koefisien
fenolnya.
K o e f i s i e n fenol d i n y a t a k a n sebagai suatu bilangan, y a n g d i h i t u n g dengan cara
m e m b a n d i n g k a n aktivitas larutan bahan disinfektan dengan pengenceran tertentu dan
aktivitas larutan fenol dengan pengenceran baku.
K o e f i s i e n fenol adalah perbandingan tingkat pengenceran setiap bahan y a n g diuji
(fenol d a nbahan disinfektan uji) yang tidak mematikan bakteri uji dalam w a k t u 5
m e n i t , t e t a p i m e m a t i k a n b a k t e r i u j i d a l a m w a k t u 10 m e n i t .
Tabel 5.1. Contoh Hasil Pengamatan Uji Koefisien Fenol

Pengenceran Bahan Lama Kontak
5 menit 10 m e n i t 15 m e n i t
Baku fenol
1 :80
1 :90
1 : 100
-
+
+ --
+ ---
Disinfektan uji
1 : 100
1 : 150
1 : 200
--
+
- --
1 :250 + -+ +-
(-) T i d a k a d a p e r t u m b u h a n b a k t e r i uji
(+) A d a p e r t u m b u h a n b a k t e r i uji
Perhitungan koefisien fenol dilakukan sebagai berikut.
P e n g e n c e r a n tertinggi l a r u t a n b a h a n uji y a n g m e m a t i k a n d a l a m w a k t u
10 menit, tetapi tidak m e m a t i k a n d a l a m 5 menit
Koefisien fenol =
P e n g e n c e r a n tertinggi larutan fenol yan g m e m a t i k a n d a l a m w a k t u 1 0
menit, tetapi tidak m e m a t i k a n d a l a m 5 menit
Dengan demikian , sesuai dengan contoh hasil pengamatan yan g ditunjukkan pada
T a b e l 5 . 1 , b a h a n d i s i n f e k t a n u j i p a d a p e n g e n c e r a n 1:200 dapat m e m a t i k a n b a k t e r i u j i
dalam w a k t u 10 menit, tetapi tidak m e m a t i k a n dalam 5 menit. D ilain pihak, larutan
fenol pada pengenceran 1:90 dapat m e m a t i k a n bakteri u j idalam w a k t u 10 menit,
tetapi tidak m e m a t i k a n d a l a m 5 m e n i t . Jadi, koefisien f e n o l disinfekta n u j i adalah
sebagai berikut.
200
K o e f i s i e n f e n o l d i s i n f e k t a n uji = =2,22
Penjelasan hasil uji koefisien fenol adalah sebagai berikut.
• Jika koefisien fenol yang diperoleh dikalikan dengan faktor 2 0 menghasilkan

angka y a n g lebih kecil dari angka pengenceran y a n g tertera pada etiket, pengenceran
disinfektan tidak m e m e n u h i syarat.
• Jika koefisien fenol yang diperoleh dikalikan dengan faktor 2 0 menghasilkan
angka y a n g sesuai dengan angka pengenceran y a n g tertera pada etiket, pengenceran
disinfektan tersebut m e m e n u h i syarat.
• Jika koefisien fenol yang diperoleh lebih kecil dari 0,05, sampel yang diuji bukan
termasuk disinfektan.
BAB 6
GENETIKA BAKTERI
• Genetiba
• Sifat dan Fungsi Materi Genetib
• Struktur DNA dan RNA
• Dogma Sentral
• Kromosom Babteri
• Perpindahan Gen pada Babteri
• Mutasi
• Teknologi DNA Rekombinan
73
GENETIKA
Genetika adalah telaah mengenai pewarisan dan keragaman ciri-ciri suatu organisme,
baik uniseluler m a u p u n multiseluler. Penelitian genetika pada tahap m o l e k u l e r telah
mengenali asam deoksiribonukleat ( D N A ) , suatu substansi k i m i a w i y a n g m e m b a n g u n
k r o m o s o m , sebagai substansi y a n g m e n g a n d u n g i n f o r m a s i genetik y a n g dapat ditu-
runkan atau diwariskan kepada keturunan. Sandi genetik yang terkandung di dalam
D N A telah dipelajari dan d i u n g k a p k a n sehingga dapat diketahui bagaimana i n f o r m a s i
genetik tersebut dapat m e n g e n d a l i k a n p e r t u m b u h a n dan aktivitas seluler.
Sebagaimana prmsip-prinsip b i o k i m i a w i , prinsip-prinsip genetika j u g a bersifat
universal. Telaah mengenai genetika mikroba telah banyak memberikan sumbangan
dan menjadi m o d e l untuk mengungkap genetika organisme hidup lainnya. Sel-sel pro-
kariot, t e r u t a m a bakteri, m e r u p a k a n sel tunggal y a n g p a l i n g sering dipelajari karena
perubahan-perubahan y a n g terjadi d a l a m m a t e r i genetik sel i n i m e n g a k i b a t k a n per-
ubahan sifat selulernya y a n g dapat segera diketahui dan m u d a h d i a m a t i . Selai n i t u ,
laju p e r t u m b u h a n m i k r o b a dapat dikendalikan dengan baik dan populasi m i k r o b a
dapat b e r k e m b a n g dengan cepat d i d a l a m suatu b i a k a n y a n g sesuai.
S I F A T D A NF U N G S I M A T E R I GENETIK
M a t e r i genetik m e m p u n y a i k e d u d u k a n y a n g sangat penting d a l a m sebuah sel t e r m a s u k
bakteri. O l e h karena itu, materi genetik harus mengandung informasi struktur, fungsi,
dan r e p r o d u k s i sel d a l a m b e n t u k y a n g stabil. I n f o r m a s i tersebut d i j a b a r k a n d a l a m
urutan bahan dasar p e n y u s u n m a t e r i genetik. I n f o r m a s i y a n g disandikan d a l a m m a t e r i
genetik tersebut harus dapat dijabarkan u n t u k m e n g h a s i l k a n m o l e k u l y a n g esensial
u n t u k struktur dan fungsi sel. M a t e r i genetik harus dapat m e l a k u k a n replikasi dengan
cermat sehingga i n f o r m a s i genetik y a n g sama terdapat p u l a d a l a m sel-sel k e t u r u n a n
dan dalam generasi berikutnya.
U n i t biologis dasar y a n g d i w a r i s k a n tersebut disebut gen. G e n m e r u p a k a n asam
deoksmbonukleat, suatu m a k r o m o l e k u l p o l i m e r i ky a n g dikenal dengan D N A . T i d a k
ada s e n y a w a y a n g d e m i k i a n penting seperti D N A karena struktu r D N A m e m b a w a
i n f o r m a s i k e t u r u n a n y a n g m e n e n t u k a n sifat-sifat sebuah sel.
S T R U K T U R D N AD A N R N A
DNA
A s a m deoksiribonukleat atau D N A m e r u p a k a n substansi k i m i a y a n g berperan d a l a m
penurunan i n f o r m a s i k e generasi berikutnya.
D N A adalah m o l e k u l y a n g panjang m e n y e r u p a i sepasang tali y a n g biasanya dise-
b u t h e l i k s g a n d a . S e t i a p utas h e l i k s t e r d i r i atas n u k l e o t i d a - n u k l e o t i d a y a n g m e m b e n -
tuk r a n t a i n u k l e o t i d a . Setiap n u k l e o t i d a t e r d i r i atas t i g a bagian.
1. S e n y a w a c i n c i n m e n g a n d u n g n i t r o g e n y a n g d i s e b u t d e n g a n b a s a n i t r o g e n , t e r d i r i
atas p u r i n dan p i r i m i d i n .
2. S e b u a h g u g u s g u l a (pentosa) y a n g disebut dengan deoksiribosa.
3. S e b u a h m o l e k u l f o s f a t .
Bab 6 - Genetika Bakteri 75
D N A m e m p u n y a i basa-basa p u r i n ( y a n g t e r d i r i atas a d e n i n dan g u a n i n ) d a n basa-basa

p i r i m i d i n ( y a n g terdiri atas s i t o s in d a n t i m i n ) . K e e m p a t j e n i s basa D N A tersebut
tersusun d a l a m empat j e n i s nukleotida, yaitu sebagai berikut.
• Deoksiadenosin-5-monofosfat (adenin-deoksiribosa-fosfat).
• Deoksiguanosin-5-monofosfat (guanin-deoksiribosa-fosfat).
• Deoksisitidin-5-monofosfat (sitosin-deoksiribosa-fosfat).
• Deoksitimidin-5-monofosfat (timin-deoksiribosa-fosfat).
K e e m p a t j e n i s n u k l e o t i d a i n i tergabung m e l a l u i ikatan fosfodiester, y a i t u setiap gugus
fosfat m e n g h u b u n g k a n a t o m karbo n n o m o r 3 pada deoksiribosa dengan a t o m karbon
n o m o r 5 pada deoksiribosa berikutnya. S t r u k t u r D N A tampak sebagai untai y a n g
m e n g a n d u n g gugus fosfat berselang-seling dengan gugus gula dan basa-basanya y a n g
m e n g a n d u n g n i t r o g e n berikatan dengan gugus sula tersebut.
Gambar 6.1 S t r u k t u r p a r a l e l D N A u n t a i g a n d a .
Basa-basa D N A tersebut m e m b e n t u k ikatan k o m p l e m e n t e r m e l a l u i ikatan hidrogen

di antara basa-basa D N A . K a r e n a adanya ikatan hidrogen tersebut, terdapat dua p a -
sang basa komplementer, y a i t u adenin ( A ) dengan t i m i n ( T ) dan guanin ( G ) dengan
sitosin ( C ) , seperti y a n g terlihat pada G a m b a r 6 . 1 .
Ikatan hidrogen pada basa-basa k o m p l e m e n t e r dalam struktur D N A m e m b e n t u k
untai g a n d a pada D N A . Terdapat dua i k a t a n h i d r o g e n pada setiap pasang A - T dan 3
ikatan h i d r o g e n pada setiap pasang G - C .
Prinsip komplementarita s pasangan p u r i n dan p i r i m i d i n m e n e n t u k a n urutan basa
pasangannya. H a l ini penting dalam replikasi untai baru D N A . D a l a m replikasi D N A ,
p e m a n j a n g a n ranta i D N A m e n g i k u t i sifat antiparalel, y a i t u setiap utas m e n u j u arah
y a n g b e r l a w a n a n s e h i n g g a y a n g s a t u d i a k h i r i o l e h g u g u s f o s f a t p a d a p o s i s i 5\ s e d a n g -
ka n y a n g lain diakhiri o l e h gugus h i d r o k s i l bebas pada posisi 3 ' .
RNA
Pada a k h i r abad k e - 1 9 d i t e m u k a n b a h w a sel m e n g a n d u n g asam n u k l e a t kedua; y a n g
sekarang disebut dengan asam ribonukleat ( R N A ) . B a i k D N A m a u p u n R N A m e r u -
pakan m o l e k u l p o l i m e r i k linear. U n i t m o n o m e r disebut n u k l e o t i d a , y a n g pada D N A
disebut deoksiribonukleotida dan pada R N A disebut ribonukleotida.
Perbedaan antara RNA dan DNA S

Beberapa perbedaan antara R N A dan D N A adalah sebagai berikut. 1
1. R N A b i a s a n y a b e r u t a s t u n g g a l .
2. K o m p o n e n gula-fosfat yang menjadi kerangka utama R N A mengandung gula
ribosa, b u k a n gula deoksiribosa.
3. B a s a t i m i n ( T ) d i g a n t i k a n o l e h basa urasi l ( U ) . U r a s i l m e r u p a k a n basa y a n g sangat
m i r i p dengan t i m i n dan j u g a berpasangan dengan adenin ( A ) .
DOGMA SENTRAL
P r o s e s r e p l i k a s i D N A , p r o s e s t r a n s k r i p s i D N A m e n j a d i R N A u t u s a n {messenger
RNA), d a n p r o s e s t r a n s l a s i R N A u t u s a n m e n j a d i p r o t e i n d i s e b u t d e n g a n dogma sen-
t r a l biologi, seperti y a n g terlihat pada G a m b a r 6.2.
Replikasi DNA
Replikasi D N A berjalan m e n g i k u t i prinsip replikasi semikonservatif, yaitu masing-
m a s i n g u n t a i D N A p a d a D N A h e l i k s g a n d a b e r t i n d a k s e b a g a i c e t a k a n (template).
Hasil percobaan Meselson d a nStahl m e n u n j u k k a n bahwa j i k a D N A bereplikasi,
kedua untai penyusun D N A i t u m e m i s a h dan masing-masing bertindak sebagai cetak-
a n (template) u n t u k s i n t e s i s u n t a i D N A y a n g l e n g k a p . M e s e l s o n d a n S t a h l m e m b i a k -
k a n E. coli d a l a m m e d i a k h u s u s , y a i t u s u m b e r N d a l a m m e d i a i t u m e n g a n d u n g i s o t o p
^-^N. D e n g a n d e m i k i a n , D N A y a n g d i s i n t e s i s m e m i l i k i k e r a p a t a n l e b i h t i n g g i d a r i p a d a
n o r m a l karena ^^N tergabung d a l a m cincin p u r i n dan p i r i m i d i n . Selanjutnya, s e j u m l ah
sel b i a k a n tersebut d i b i a k k a n k e m b a l i d a l a m m e d i a y a n g h a n y a m e n g a n d u n g isotop
;78 Bubu Ajar Mikrobiologi: Panduan Mahasiswa Farmasi dan Kedokteran
Seperti y a n g terlihat pada G a m b a r 6 . 1 , ujung dengan gugus hidroksil melekat pada

karbon 3 ' disebut dengan ujung D N A 3', sedangkan ujung dengan gugus fosfat m e l e -
k a t p a d a k a r b o n 5 ' d i s e b u t d e n g a n u j u n g D N A 5\ P a d a p r o s e s r e p l i k a s i D N A ,
penambahan nukleotida baru akan berlangsung dari ujung D N A 5 ' ke ujung D N A 3'.
R a n g k a i a n proses replikasi D N A d i a w a l i oleh kerja e n z i m topoisomerase
melonggarkan pilinan D N A untai ganda. Setelah itu, e n z i m helikase akan m e m b u k a
ikatan h i d r o g e n d i antara basa-basa p e n y u s u n D N A . U n t a i ganda D N A y a n g telah
t e r b u k a i n i a k a n d i s t a b i l k a n o l e h p r o t e i n p e n g i k a t u n t a i t u n g g a l (single strandbinding
protein) s e h i n g g a b a s a - b a s a p a d a D N A u n t a i t u n g g a l y a n g t e l a h t e r b u k a t e r s e b u t t i d a k
saling berikatan kembali. B e n t u k D N A untai ganda yang sebagian untainya telah
d i b u k a m e n j a d i D N A u n t a i t u n g g a l i n i d i s e b u t d e n g a n replication fork\ p a d a l o k a s i
i n i l a h r e p l i k a s i a k a n d i m u l a i , y a n g d i s e b u t d e n g a n origin oj replication ( o r i ) . P r o s e s
selanjutnya adalah e n z i m R N A primase akan menyintesis R N A primer, berupa R N A
untai pendek, u n t u k m e n g a w a l i sintesis D N A . Selanjutnya, e n z i m D N A polimeras e
III akan m e l a k u k a n polimerisasi dengan m e n a m b a h k a n nukleotida baru pada ujung
3', seperti pada G a m b a r 6.3.
Untai cetakan DNA Untai baru Untai cetakan DNA Untai baru
G a m b a r 6.3 R e a k s i p e n a m b a h a n n u k l e o t i d a p a d a r e p l i k a s i D N A . R e p l i k a s i D N A b e r l a n g s u n g
d a r i u j u n g 5 ' k e u j u n g 3 ' . P e m a n j a n g a n b a s a - b a s a D N A o l e h e n z i m D N A p o l i m e r a s e III m e n g i k u t i
prinsip k o m p l e m e n t a r i t a s D N A untai g a n d a , yaitu jika b a s a D N A pada untai c e t a k a n D N A ( D N A
template )adalah adenin (A), nukleotida yang komplementer adalah basa timin (T).
A T G
c 9 A C T A G
c A
M M M M DNA
M c
T A
i G
G T G A T G T
Transkripsi
m
U G u A G A mRNA
/\
J L
~y— Y Y
Kodon
^^^^^^ Translasi
I Metionin "j—| Prolin j— Leusin Alanin Protein
G a m b a r 6.2 D o g m a sentral biologi. D N A ditranskripsikan m e n j a d i m R N A , k e m u d i a n ditranslasi

m e n j a d i protein y a n g terdiri atas rantai a s a m a m i n o .
nitrogen ' ' ' N . Setelah beberapa w a k t u tertentu, cuplikan biakan d i a m b i l . D N A k e -

m u d i a n diekstraksi d a n dianalisis dengan sentrifugasi gradien sesium klorida untuk
membandingkan kerapatan D N A yang mengandung ' ' N dengan D N A yang n o r m a l
('•'N). D a r i percobaan tersebut, d u a hipotesis u t a m a d i k e m u k a k a n u n t u k replikasi
D N A . H i p o t e s i s y a n g p e r t a m a m e n g a t a k a n b a h w a D N A b e r e p l i k a s i s e c a r a semikon-
servatif, y a i t u k e d u a u n t a i h e l i k s D N A m e m i s a h d a n m a s i n g - m a s i n g u n t a i b e r t i n d a k
sebagai cetakan u n t u k sintesis untai k o m p l e m e n t e r y a n g baru. Jadi, m a s i n g - m a s i n g
t u r u n a n h e l i k s ganda m e n g a n d u n g satu untai i n d u k d a n satu u n t a i baru. H i p o t e s i s
k e d u a m e n y a t a k a n b a h w a D N A m e n g a d a k a n r e p l i k a s i s e c a r a konservatif y a i t u h e l i k s
ganda tetap u t u h s e l a ma berfungsi sebagai cetakan u n t u k p e m b e n t u k a n h e l i k s ganda
baru. D a l a m hal i n i , kedua untai k e t u r u n a n D N A disintesis secara baru.
U n t u k mengetahui hipotesis y a n g benar dari kedua hipotesis tadi, hasil replikasi
D N A d i t e n t u k a n k e r a p a t a n n y a dengan cara sentrifugasi g r a d i e n s e s i u m k l o r i d a u n t u k
membandingkan kerapatan D N A yang mengandung ' ^ N dengan D N A yang n o r m a l
('•'N). Pada hipotesis replikasi konservatif, beberapa D N A y a n g m e n g a n d u n g isotop
' • N harus a d a pada setiap generasi d a n s e m u a D N A baru harus m e m p u n y a i kerapatan
n o r m a l . Jadi, pada generasi pertama, setengah D N A heliks ganda harus m e n g a n d u n g
isotop ' ' N d a n setengahnya harus n o r m a l . S e b a l i k n y a , pada generasi pertama m o d e l
replikasi s e m i k o n s e r v a t i f d i p e r k i r a k a n b a h w a semua m o l e k u l D N A m e m p u n y a i satu
untai m e n g a n d u n g isotop ' - N d a n satu u n t a i n o r m a l . H a s i l p e n g a m a t a n pada data pita
percobaan m e m u n g k i n k a n Meselson dan Stahl m e n y i m p u l k a n bahwa hipotesis y a n g
benar adalah m o d e l s e m i k o n s e r v a t i f
Karena proses replikasi D N A m e n g i k u t i prinsip replikasi semikonservatif, yaitu

m a s i n g - m a s i n g u n t a i tunggal akan bertindak sebagai cetakan D N A , satu u n t a i D N A
baru akan disintesis secara k o n t i n u oleh D N A polimerase III m e n g i k u t i arah replikasi
d a r i u j u n g 5 ' k e u j u n g 3 ' , y a n g d i s e b u t d e n g a n leading strand, s e d a n g k a n u n t a i D N A
y a n g l a i n d i s e b u t d e n g a n lagging strand karena d i s i n t e s i s d a l a m b e n t u k f r a g m e n - f r a g -
m e n pendek y a n g dikenal dengan fragmen O k a z a k i .
Proses replikasi D N A akan diakhiri dengan dilepaskannya R N A p r i m e r o l e h e n z i m
D N A polimerase I d a n proses penyambungan fragmen-fragmen D N A pendek o l eh
e n z i m D N A ligase.
Transkripsi
M a t e r i g e n e t i k s e l m e m p u n y a i ftingsi u t a m a m e n g a r a h k a n s i n t e s i s p r o t e i n . D N A s e n -
diri tidak secara langsung m e n j a d i w a d a h sintesis protein. I n f o r m a s i genetik D N A
harus diubah terlebih d a h u l u m e n j a d i m o l e k u l R N A d a l a m proses y a n g disebut trans-
kripsi. Wadah R N A kemudian digunakan untuk menghasilkan urutan asam amino
pada protein d a l a m proses y a n g disebut translasi.
Sintesis R N A terjadi m e l a l u i proses y a n g serupa dengan replikasi D N A . H e l i k s
ganda D N A terlepas pada titik a w a l transkripsi u n t u k m e m u n g k i n k a n d i m u l a i n y a
sintesis R N A . K o m p o n e n u t a m a transkripsi R N A adalah A T P , G T P , C T P , d a n U T P
Z a t - z a t i n i d i p o l i m e r i s a s i m e n j a d i rantai R N A dari u j u n g 5' k e arah u j u n g 3 ' denga n
m e n g g u n a k a n salah satu untai D N A sebagai cetakan. D e n g a n d e m i k i a n , R N A y a n g
terbentuk m e m p u n y a i urutan nukleotida yang komplementer dengan untai D N A .
D a l a m proses transkripsi, reaksi dikatalisis oleh e n z i m R N A polimerase. E n z i m i n i
m e n g i k u t i prinsip komplementaritas sehingga rantai R N A m e r u p a k a n salinan D N A
y a n g tepat, dengan pengecualian b a h w a urasil d i m a s u k k a n k e d a l a m R N A m e n g g a n -
tikan timin yang adapada untai D N A .
Translasi
Translasi atau proses sintesis protein d i d a h u l u i oleh p e n y a l i n a n bagian-bagian tertentu
p a d a D N A m e n j a d i messenger R N A ( m R N A ) m e l a l u i s u a t u p r o s e s y a n g d i s e b u t t r a n s -
kripsi. D a l a m sel bakteri, k e b a n y a k a n protein disandikan o l e h sebuah r a n g k a i an D N A
tunggal d a n m e m a n j a n g y a n g disalin tanpa perubahan u n t u k m e m p r o d u k s i sebuah
m o l e k u l / w R N A . H a l i n i sangat b e r l a w a n a n dengan adanya suatu t e m u a n b a h w a
k e b a n y a k a n s e l e u k a r i o t m e m i l i k i r a n g k a i a n - r a n g k a i a n p e n y a n d i y a n g d i s e b u t ekson
y a n g disela oleh rangkaian-rangkaian bukan penyandi y a n g disebut intron.
D a l a m proses translasi, sintesis m o l e k u l - m o l e k u l protein diatur o l e h w R N A , R N A
transfer ( / R N A ) , d a n R N A ribosomal. Aturan-aturan y a n g dianut oleh rangkaian n u -
kleotida sebuah gen ketika ditranslasikan k e dalam urutan asam a m i n o sebuah protein
d i s e b u t sandi genetik.
R a n g k a i a n nukleotida dalam m o l e k u l m R N A y a n g bertindak sebagai bahan-antara
ternyata harus secara berurut d a l a m k e l o m p o k - k e l o m p o k tiga (triplet). Setiap triplet
n u k l e o t i d a , y a n g d i s e b u t kodon, m e n y a t a k a n s e b u a h a s a m a m i n o .
K o d o n m e r u p a k a n k o m p l e m e n bagi antikodon y a n g d i b a w a oleh / R N A . Peristiwa

y a n g terlokalisasi pada r i b o s o m i n i m e l i b a t k a n m o l e k u l / R N A , y a i t u setiap m o l e k u l
/ R N A m e m b a w a asam a m i n o spesifik sehingga asam a m i n o y a n g tepat d i m a s u k k a n
dalam rantai polipeptida j i k a ada k o d o n tertentu yang terbuka pada r i b o s o m .
K a r e n a R N A adalah sebuah p o l i m e r linear y a n g tersusun atas 4 m a c a m basa n u -
k l e o t i d a , k i t a m e m p u n y a i 4^ = 6 4 t r i p l e t k o d o n . N a m u n d e m i k i a n , h a n y a 2 0 m a c a m
asam a m i n o yang biasanya ditemukan dalam protein sehingga beberapa asam a m i n o
dispesifikasikan o l e h beberapa k o d o n . S a n d i genetik u n t u k setiap k o d o n d a l a m sebuah
m o l e k u l / w R N A y a n g ditranslasikan k e dalam asam a m i n o dapat dilihat pada Tabel
6 . 1 . S a n d i g e n e t i k i n i s a m a d a l a m setiap organisme, baik bakteri, t u m b u h a n , h e w a n ,
maupun manusia.
D a r i 6 4 triplet k o d o n d a l a m sandi genetik, terdapat k o d o n A U G y a n g m e r u p a k a n
k o d o n a w a l proses translasi d a n tiga k o d o n ( U A A , U G A , d a n U A G ) y a n g m e r u p a k a n
stop k o d o n y a n g tidak m e n y a n d i asam a m i n o . K e t i g a k o d o n tersebut m e r u p a k a n
penanda akhir dari proses translasi.
Proses translasi protein berlangsung d i ribosom, yang m e m i l i k i lokasi A ( a m i n o )
sebagai tempat m a s u k n y a / R N A , lokasi P (peptidil) sebagai tempat / R N A y a n g pada
u j u n g n y a m e n e m p e l p o l i p e p t i d a , d a n l o k a s i E {exit) s e b a g a i l o k a s i k e l u a r n y a / R N A
y a n g tidak lagi m e m b a w a asam a m i n o . Proses translasi d i m u l a i dari proses inisiasi,
yaitu / R N A y a n g digunakan u n t u k proses translasi a w a l akan berinteraksi dengan
asam a m i n o pertama m e m b e n t u k a m i n o a s i l - / R N A atau A ^ - f o r m i l m e t i o n i n - / R N A y a n g
m e m b a w a antikodon U A C . F o r m i l m e t i o n i n - / R N A kemudian akan bergabung dengan
k o d o n p e r t a m a (start codon) A U G d a r i / w R N A p a d a l o k a s i P ( p e p t i d i l ) d i r i b o s o m .
T a b e i e . l Sandi Genetik
Posisi Posisi kedua Posisi
pertama ketiga
(ujung 5') U C A G (ujung 3')
U Fenilalanin
Fenilalanin
Serin
Serin
Tirosin
Tirosin
Sistein
Sistein
U
C
Leusin Serin STOP STOP A
Leusin Serin STOP Triptofan G
C Leusin
Leusin
Prolin
Prolin
Histidin
Histidin
Arginin
Arginin
U
C
Leusin Prolin Glutamin Arginin A
Leusin Prolin Glutamin Arginin G
A Isoleusin
Isoleusin
Treonin
Treonin
Asparagin
Asparagin
Serin
Serin
U
C
Isoleusin Treonin Lisin Arginin A
Metionin Treonin LIsin Arginin G
G ValIn
Valin
Alanin
Alanin
Asam
Asam
aspartat
aspartat
Glisin
Glisin
U
C
Valin Alanin Asam glutamat Glisin A
Valin Alanin Asam glutamat Glisin G
Setelah proses inisiasi berlangsung, translasi dilanjutkan, dengan proses pemanjangan

rantai polipeptida dengan terikatnya a m i n o a s i l - / R N A pada lokasi A y a n g m e m b a w a
a n t i k o d o n y a n g k o m p l e m e n t e r terhadap k o d o n pada / ; / R N A . A m i n o a s i l - r R N A i n i
akan berpindah k e lokasi P (peptidil), bergerak ke arah u j u n g 3 ' / ; / R N A , dan k e m u d i a n
b e r p i n d a h k e l o k a s i E (exit) s e t e l a h m e m b e r i k a n a s a m a m i n o y a n g d i b a w a n y a s e s u a i
dengan terjemaha n a n t i k o d o n pada rantai polipeptida y a n g sedang t u m b u h . Proses
p e m a n j a n g a n i n i berlangsung terus sesuai dengan j u m l a h k o d o n y a n g tersqsun pada
m R N A sehingga m e m b e n t u k rantai polipeptida sampai b e r t e m u stop k o d o n y a n g
terdapat pada / ; z R N A y a n g disebut dengan proses t e r m i n a s i translasi.
Proses t e r m i n a s i translasi terjadi k e t i k a r i b o s o m mencapai salah satu dari stop
k o d o n y a n g terdapat pada m R N A , yaitu U A A , U G A , atau U A G . B i l a r i b o s o m telah
mencapai stop k o d o n tersebut, rantai polipeptida y a n g terbentuk akan terlepas; d e m i -
kian pula, / R N A dan r i b o s o m akan m e n g a l a m i disosiasi u n t u k dapat digunakan lagi
ketika d i b u t u h k a n oleh sel.
K R O M O S O M BAKTERI
M a t e r i genetik pada bakteri disebut dengan g e n o m bakteri. G e n o m bakteri biasanya
disebut sebagai g e n saja. G e n b a k t e r i b i a s a n y a terdapat d a l a m m o l e k u l t u n g g a l D N A ,
w a l a u p u n dikena l pula adanya materi genetik di luar k r o m o s o m y a n g disebut dengan
p l a s m i d . P l a s m i d tersebar luas d a l a m populasi bakteri. M e s k i p u n b a k t e r i bersifat ha-
ploid, p e m i n d a h a n gen dari satu generasi k e generasi b e r i k u t n y a berlangsung secara
l i n e a r s e h i n g g a s e l a n a k a n p a s t i m e n e r i m a s a t u set g e n y a n g i d e n t i k d e n g a n s e l i n d u k -
nya setiap s i k l u s p e m b e l a h a n sel.
K r o m o s o m b a k t e r i m e m p u n y a i berat k u r a n g lebih 2 - 3 % berat k e r i n g satu sel. B i l a
d i e k s t r a k s i dari sel b a k t e r i , m o l e k u l D N A biasanya b e r b e n t u k m e l i n g k a r denga n pan-
j a n g k u r a n g l e b i h 1 m m . D N A i n i m e m p u n y a i berat m o l e k u l y a n g t i n g g i k a r e n a terdiri
atas h e t e r o p o l i m e r d a r i d e o k s i r i b o n u k l e o t i d a p u r i n dan p i r i m i d i n .
G e n bakteri pada dasarnya merupakan informasi genetik y a n g amat m e n e n t u k a n
sifat-sifat sel b a k t e r i . D a l a m proses r e p l i k a s i sel, i n f o r m a s i g e n e t i k i n i harus d i t u r u n -
kan secara lengkap k e sel anakan sehingga terjadi kestabilan genetik d a l a m suatu
populasi-bakteri.
PERPINDAHAN G E NPADA BAKTERI

M a t e r i g e n e t i k d a n p l a s m i d d a l a m sel b a k t e r i dapat d i p i n d a h k a n k e sel p e n e r i m a lai n
dengan m e k a n i s m e konjugasi, transduksi, atau transformasi.
Konjugasi
Konjugasi pertama kali ditemukan oleh Joshua Lederberg dan E d w a r d T a t u m . K o n j u -
gasi m e r u p a k a n p e m i n d a h a n m a t e r i genetik d i antara bakteri y a n g sejenis ataupun
d e n g a n j e n i s b a k t e r i l a i n m e l a l u i p r o s e s mating s e l a t a u k o n t a k l a n g s u n g a n t a r - s e l
b a k t e r i . K o n j u g a s i dapat terjadi m e l a l u i dua cara, y a i t u transfer p l a s m i d dan transfer
kromosom.
P l a s m i d adalah m a t e r i g e n e t i k e k s t r a k r o m o s o m y a n g t e r d i ri atas D N A b e n a n g
ganda yang m e l m g k a r dan m e m i l i k i ukuran 0 , 1 - 5 % k r o m o s o m bakteri. Berdasarkan
k e p e m i l i k a n f a k t o r F (fertility plasmid), p o p u l a s i b a k t e r i t e r b a g i m e n j a d i 2 t i p e s e l .
T i p e p e r t a m a a d a l a h s e l b a k t e r i y a n g m e m p u n y a i f a k t o r F (fertility plasmid) y a n g d i -
l a m b a n g k a n d e n g a n F ^ , sedangkan tipe k e d u a adalah sel b a k t e r i y a n g t i d a k m e m p u n y a i
faktor F y a n g d i l a m b a n g k a n dengan F ' . S e l d o n o r (F'") dapat m e m i n d a h k a n m a t e r i
genetik dan p l a s m i d D N A k e sel p e n e r i m a ( F ) m e l a l u i p i l i seks. Beberapa j e n i s plas-
m i d , termasuk p l a s m i d y a n g m e m b a w a gen-gen y a n g resisten terhadap suatu antibiotik,
dapat dipindahka n dari satu bakteri k e bakteri y a n g lain m e l a l u i konjugasi.
Transduksi
Transduksi d i t e m u k an oleh N o r t o n Zinder dan Joshua Lederberg pada tahun 1952.
Virus bakteri, y a n g disebut dengan bakteriofaga, akan mentransfer gen bakteri dari
satu sel bakteri k e sel bakteri lain m e l a l u i proses transduksi. B a k t e r i o f a g a m e m p u n y a i
lapisan protein y a n g mengelilingi materi genetik virus. K e t i k a menginfeksi bakteri
dan m e n g a d a k a n r e p r o d u k s i d i d a l a m sel bakteri dan k e m u d i a n k e l u a r d a r i sel b a k t e r i
dengan melisis sel bakteri, beberapa bakteriofaga y a n g keluar dari sel bakteri dapat
m e m b a w a m a t e r i genetik y a n g berasal dari bakteri. B i l a bakteriofaga y a n g m e n g a n -
d u n g fragmen g e n b a k t e r i t e r s e b u t m e n g i n f e k s i b a k t e r i l a i n , b a k t e r i o f a g a i t u a k a n
mentransfer gen bakteri ke bakteri lain. Proses transduksi sering terjadi dalam transfer
gen bakteri dan dapat terjadi pada berbagai varietas bakteri G r a m - p o s i t i f dan bakteri
Gram-negatif.
Transformasi
Transformasi adalah suatu proses pengambilan fragmen-fragmen D N A oleh bakteri.
F r a g m e n D N A atau p l a s m i d D N A dapat m e l i n t a s i d i n d i n g sel dan bersatu d a l a m ge-
n o m sel tersebut sehingga m e n g u b a h genotipe sel b a k t e r i . Proses p e m i n d a h a n m a t e r i
genetik m e l a l u i transformasi biasanya dilakukan d i laboratorium penelitian, tetapi
dapat p u l a terjadi secara spontan m e s k i p u n d a l am frekuensi y a n g kecil. T i d a k s e m u a
jenis bakteri m e m i l i k i k e m a m p u a n untuk menyerap D N A m e l a l u i dinding selnya.
Kondisi pertumbuhan d a n media pertumbuhan tertentu dibutuhkan a g a r ' m a m p u
m e n y e r a p D N A . Diplococcus pneimoniae d a n Bacilius subtilis r e l a t i f l e b i h m u d a h
m e n e r i m a fragmen D N A , s e d a n g k a n E. coli h a r u s d i i n k u b a s i k a n d a l a m m e d i a y a n g
m e n g a n d u n g kadar k a l s i u m k l o r i d a y a n g t m g g i agar m e m b r a n selnya lebih permiabe l
dan lebih kompeten dalam menyerap D N A .
D a l a m p e r k e m b a n g a n i l m u pengetahuan d a n t e k n o l o g i saat i n i , t r a n s f o r m a s i
memegang peranan penting dalam penelitian, khususnya dalam bidang teknologi
D N A rekombinan.
MUTASI
M u t a s i adalah perubahan y a n g terjadi di dalam struktur dan urutan nukleotida suatu
gen. M u t a s i dapat m e n i m b u l k a n perubahan genotipe suatu sel. M u t a s i sebenarnya
Bab 6 - Genetika Bakteri 83|>
merupai<an p e r i s t i wa y a n g sangat j a r a n g terjadi bila tidak ada perubahan y a n g e k s t r e m

pada l i n g k u n g a n . Kecepatan m u t a s i sangat lambat, k i r a - k i r a satu m u t a s i d a l a m satu
j u t a s a m p a i satu m i l i a r sel b a k t e r i . S e l m u t a n b i a s a n y a t e r s e m b u n y i d i antara sel-sel
lain y a n g b e r j u m l a h sangat besar sehingga sangat sulit m e n g i s o l a s i sel m u t a n . N a m u n ,
para ahli b i o l o g i telah berhasil m e n g e m b a n g k a n t e k n i k - t e k n i k y a n g m e m u d a h k a n
isolasi sel m u t a n y a n g berjumla h kecil dari suatu populasi sel y a n g tidak bermutasi
y a n g b e r j u m l a h besar. S e b a g a i c o n t o h , j e n i s a n t i b i o t i k t e r t e n t u d a p a t d i m a s u k k a n k e
d a l a m m e d i a p e r t u m b u h a n bakteri sehingga kita dapat m e n g i s o l a s i sel m u t a n y a n g
resisten terhadap a n t i b i o t i k tersebut.
Tipe mutasi
Perubahan-perubahan d a l a m rangkaian basa p u r i n dan p i r i m i d i n dapat terjadi d a l a m
berbagai cara sehingga m e n y e b a b k a n m u t a s i gen. Secara u m u m , m u t a s i d i g o l o n g k a n
d a l a m m u t a s i substitusi pasangan basa dan m u t a s i pergeseran k e r a n g k a .
Mutasi substitusi pasangan basa

M u t a s i i n i terjadi akibat a d a n ya substitusi satu n u k l e o t i d a o l e h n u k l e o t i d a lain d i d a -
lam rangkaia n n u k l e o t i d a tertentu suatu gen. Substitusi satu p u r i n o l e h p u r i n lain atau
s a t u p i r i m i d i n d e n g a n p i r i m i d i n l a i n d i s e b u t transisi. P e n g g a n t i a n s a t u p u r i n o l e h p i r i -
m i d i n a t a u s e b a l i k n y a disebut transversi. S u b s t i t u s i p a s a n g a n b a s a i n i d a p a t m e n g a k i -
batkan salah satu dari tiga m a c a m m u t a s i y a n g m e m e n g a r u h i proses translasi, y a i t u
1. M u t a s i s a l a h - a r t i (/7//.s\s'em'^ A 7 7 z / / ^ / / o / 7 )
Perubahan triplet gen y a n g m e n g h a s i l k a n sebuah k o d o n pada w R N A y a n g m e n e -
tapkan asam a m i n o y a n g berbeda dari u r u t a n asam a m i n o y a n g ada d a l a m protein
n o r m a l d i s e b u t m u t a s i s a l a h a r t i (missense miitation). C o n t o h j e n i s m u t a s i i n i p a d a
m a n u s i a a d a l a h p e n y a k i t a n e m i a s e l s a b i t {sickle cell anemia). S u b s t i t u s i s a t u b a s a
tunggal pada k o d o n dari asam a m i n o keenam dalam h e m o g l o b i n A mengubah
a s a m a m i n o k e e n a m tersebut ( y a i t u asam g l u t a m a t m e n j a d i v a l i n ) s e h i n g g a ter-
b e n t u k h e m o g l o b i n S p a d a a n e m i a sel sabit. Pada k o n s e n t r a s i o k s i g e n y a n g r e n d a h ,
m o l e k u l - m o l e k u l h e m o g l o b i n S dapat m e m e n g a r u h i b e n t u k sel darah m e r a h , y a i t u
b e n t u k sel darah m e r a h terlihat m e n y e r u p a i bulan sabit.
2 . M u t a s i t a n m a k n a (nonsense mutation)
Perubahan triplet gen y a n g menghasilka n sebuah k o d o n pada m R N A y a n g m e n g -
akhiri pemanjangan rantai polipeptida sehingga pembentukan protein berakhir
sebelum w a k t u n y a pada proses translasi protein disebut dengan m u t a s i t a n m a k n a
{nonsense mutation). H a s i l n y a a d a l a h s u a t u p o l i p e p t i d a y a n g t i d a k l e n g k a p d a n
tidak berfungsi.
3. M u t a s i n e t r a l (neutral mutation)
Perubahan triplet gen y a n g menghasilkan sebuah k o d o n m R N A y a n g menetapkan
urutan asam a m i n o yang sama dengan protein yang n o r m a l karena k o d o n yang
dihasilkan dari mutasi itu merupakan s i n o n i m dari k o d o n aslinya disebut mutasi
n e t r a l (neutral mutation).
ipiiiiliili^^
Mutasi pergeseran kerangka

M u t a s i i n i disebabkan oleh penambahan atau kehilangan satu atau lebih nukleotida di
dalam suatu gen. H a l ini mengakibatkan bergesernya kerangka pembacaan. Penyisipan
atau pengurangan satu basa D N A dapat m e n y e b a b k a n perubahan y a n g besar pada
komposisi protein yang dihasilkan. Mutasi ini i m i u m n y a akan menghasilkan protein
yang tidak berfungsi karena terbentuknya rangkaian asam amin o yang sama sekali
baru dari rangkaian n u k l e o t i d a / w R N A y a n g telah bergesar kerangkanya, y a n g d i -
transkripsikan dari D N A y a n g telah termutasi. C o n t o h tipe m u t a s i pergeseran kerangka
adalah sebagai berikut.
DNA :A G C GGA CGC T G A T G A
RNA :UCG CCU GCG A C UA C U
Pengurangan basa A pertama pada D N A akan menggeser kerangka bacaan sebagai
berikut.
DNA :GCG GAC GCT GAT GA
RNA :CGC CUG CGA CUA CU
D a r i pergeseran k e r a n g k a tersebut, jelas b a h w a untai polipeptida y a n g d i h a s i l k a n
p a d a saat translasi a k a n m e n u n j u k k a n k o m p o s i s i p r o t e i n y a n g m e m i l i k i u r u t a n a s a m
a m i n o y a n g sangat berbeda antara u r u t a n D N A y a n g asli d a n D N A y a n g telah ter-
mutasi.
M u t a s i sering terjadi pada proses replikasi D N A . Beberapa m u t a s i terjadi akibat
kerusakan y a n g d i t i m b u l k a n oleh cahaya ultraviolet atau sinar X . K a r e n a merupaka n
I bagian tidak terpisahkan dari lingkungan (cahaya U V merupakan k o m p o n e n cahaya
matahari), faktor inilah yang k e m u n g k i n a n menyebabkan banyak terjadi mutasi
spontan. N a m u n d e m i k i a n , laju m u t a s i dapat d i t m g k a t k a n secara n y a t a dengan
m e n y i n a r i b i a k a n dengan sinar-sinar tersebut. U n s u r - u n s u r y a n g dapat m e m p e r c e p a t
laju m u t a s i disebut m u t a g e n . Zat-zat y a n g bersifat m u t a g e n t e r d i r i atas m u t a g e n f i s i k a
d a n m u t a g e n k i m i a . M u t a g e n fisika m e l i p u t i r a d i a s i s i n a r X , s i n a r U V , d a n r a d i a s i
ionik, sedangkan mutagen k i m i a antara lain asam nitrit, senyawa belerang, peroksida,
epoksida, dan zat-zat y a n g terkena sinar radiasi U V .
Pengaruh utama cahaya U V ialah menyebabkan pembentukan dimer m e l a l u i ikat-
an silang antara p i r i m i d i n - p i r i m i d i n y a n g bersebelahan dengan t i m i n sehingga akan
m e n g h a m b a t proses replikasi D N A .
Berbagai penelitian telah dilakukan untuk mempelajari pengaruh senyawa kimia
y a n g dapat bereaksi dengan D N A selama proses replikasi D N A . K a r e n a k e k h a s a n
replikasi D N A (yaitu replikasi bergantung pada ketelitian ikatan antara purin-piri-
m i d i n , m e l a l u i ikatani h i d r o g e n antara gugus a m i n o d a n h i d r o k s i l pada p u r i n d a n
, p i r i m i d i n ) , m o d i f i k a s i gugus a m i n o dan h i d r o k s i l tersebut dapat m e n g a k i b a t k a n m u -
I tasi. S a l a h satu zat k u n i a y a n g dapat m e m e c a h gugus a m i n o dari p u r i n dan p i r i m i d i n
I adalah asam nitrit. Jenis zat k i m i a m u t a g e n i k l a i n n y a adalah analog basa-basa D N A ,
y a i t u zat-zat y a n g m e m p u n y a i struktur m i r i p dengan basa-basa D N A y a n g n o r m a l
L sehingga zat i t u dapat disalahgunakan selama berlangsungnya proses r e p l i k a s i D N A .
I W a l a u p u n s t r u k t u r n y a sangat m i r i p , analog-analog basa i n i t i d a k m e m p u n y a i sifat
ikatan h i d r o g e n y a n g s a m a dengan basa-basa y a n g n o r m a l . H a l i n i dapat m e n y e b a b k a n

terjadi kesalahan pada proses replikasi y a n g a k h i r n y a m e n y e b a b k a n terjadi mutasi.
Reparasi mutasi
Sebagaimana telah d i u r a i k a n , kerusakan D N A dapat disebabkan o l e h radiasi sinar X ,
sinar U V , dan zat-zat k i m i a tertentu. U n t u k m e m p e r t a h a n k a n diri, setiap sel m e m i l i k i
e n z i m - e n z i m khusus y a n g dapat m e m p e r b a i k i D N A y a n g t e r m u t a s i. M e k a n i s m e ini-
lah y a n g m e n y e b a b k a n sel dapat m e m p e r t a h a n k a n fungsi secara n o r m a l .
U n t u k mempertahanka n diri, beberapa jenis bakteri dan k h a m i r m e m i l i k i m e k a -
n i s m e fotoreaktivasi y a n g efisien u n t u k m e m p e r b a i k i kerusakan y a n g disebabkan oleh
radiasi sinar U V. M e k a n i s m e fotoreaktivasi adalah sebagai berikut: k e t i k a terkena
sinar U V , sel a k a n m e n g a k t i f k a n suatu e n z i m khusus y a n g d i a k t i f k a n o l e h sinar t a m -
pak u n t u k m e m o t o n g dan m e n g u r a i k a n ikatan antara d i m e r - d i m e r y a n g terbentuk aki-
bat radiasi sinar U V sehingga dapat m e m u l i h k a n a k t i v i t a s sel-sel tersebut.
M e k a n i s m e lain u n t u k perbaikan D N A yang telah termutasi adalah dengan meng-
gunakan e n z i m endonuklease d a n eksonuklease untuk m e m o t o n g segmen-segmen
D N A y a n g rusak. S e g m e n D N A y a n g terpecah tersebut k e m u d i a n diperbaiki dengan
m e n g g u n a k a n e n z i m D N A polimerase dan D N A ligase, y a i t u denga n m e n g i s i celah-
celah tersebut, k e m u d i a n m e n g g a b u n g k a n untai D N A tadi m e n j a d i satu k e m b a l i .
S a l a h satu c o n t o h k e t i d a k m a m p u a n sel u n t u k m e m o t o n g d i m e r i s a s i p i r i m i d i n ter-
l i h a t p a d a pendeviidL xerodermapigmentosum. K o n d i s i y a n g d i s e b a b k a n o l e h k e l a i n a n
genetik i n i m e n y e b a b k a n kulit penderita sangat peka terhadap sinar U V sehingga
cahaya matahari dapat menyebabkan kelainan pada kulit penderita, y a n g pada a k h i r n y a
dapat m e n y e b a b k a n kanker kulit. H a l i n i disebabkan penderita tidak m e m p u n y a i m e -
kanisme reparasi u n t uk pemotongan dimer-dimer pirimidin y a n g terbentuk akibat
radiasi sinar U V sehingga terjadi k e l a i n a n pada sel k u l i t .
TEKNOLOGI D N A REKOMBINAN
P e r k e m b a n g a n pengetahuan tentang sifat-sifat gen, sifat plasmid, t e k n i k penyisipan
m a t e r i genetik asing k e d a l a m sel, dan p e n e m u a n e n z i m endonukleas e restriksi dan
e n z i m D N A ligase telah m e m b a n g k i t k a n suatu t e k n i k y a n g d i g u n a k a n dengan sangat
luas di d a l a m b i o l o g i m o l e k u l e r m o d e m , y a n g dikenal dengan t e k n o l o g i D N A r e k o m -
binan atau t e k n i k rekayasa genetika.
T e k n o l o g i D N A r e k o m b i n a n telah d i k e m b a n g k a n sejak t a h u n 1973. I n i merupa -
k a n s u a t u t e k n i k u n t u k m e m a n i p u l a s i g e n s e c a r a in vitro, m u l a i d a r i i s o l a s i g e n ,
p e n y i s i p a n g e n asing k e d a l a m g e n o m spesies tertentu, m o d i f i k a s i gen, dan k o n s t r u k s i
plasmid-plasmid rekombinan yang dikehendaki, yang kemudian ditransformasikan ke
d a l a m s i s t e m b i o l o g i s t e r t e n t u , s e p e r t i Escherichia coli a t a u Saccharomyces cerevisiae
sehingga p l a s m i d r e k o m b i n a n tersebut m a m p u mengekspresikan protein d a l a m j u m l a h
besar s e b a g a i m a n a y a n g d i i n g i n k a n . G e n y a n g berasal dari b i n a t a ng dan m a n u s i a da-
pat d i s i s i p k a n k e d a l a m D N A b a k t e r i atau j a m u r s e h i n g g a sel p e n e r i m a g e n a s i n g i t u
dapat mengekspresikan protein y a n g disandi oleh gen y a n g disisipkan. D e n g a n d e m i -
kian, dapat d i p a h a m i b a h w a j i k a gen insulin y a n g berasal dari m a n u s i a disisipkan k e

d a l a m s e l b a k t e r i Escherichia coli, b a k t e r i i n i k e m u d i a n d a p a t m e m b e n t u k i n s u l i n
manusia. Berdasarkan keberhasilan t e k n i k rekayasa genetika, kini telah banyak m i k r o -
organisme ataupun tanaman yang dijadikan "pabrik" produksi senyawa-senyawa
k i m i a seperti protein, h o r m o n , dan s e n y a wa lain y a n g dapat d i m a n f a a t k a n o l e h m a -
nusia u n t u k berbagai keperluan.
Teknik dan perangkat utama rekayasa genetika

Beberapa teknik d a n perangkat utama yang digunakan dalam rekayasa genetika
dijelaskan berikut i n i .
Kloning gen
Pada prinsipnya, k l o n i n g atau pengklonan gen adalah upaya u n t u k mengisolasi frag-
m e n D N A spesifik dengan cara m e m o t o n g gen menggunakan e n z i m endonuklease
r e s t r i k s i d a n m e n y a t u k a n fi-agmen D N A t e r s e b u t d e n g a n p l a s m i d v e k t o r u n t u k d i p e r -
b a n y a k s e c a r a in vivo d i d a l a m h o s p e s b a k t e r i a t a u j a m u r d a n s i s t e m b i o l o g i s l a m .
Tahapan penting d a l a m k l o n i n g gen adalah sebagai berikut.
1. Isolasi d a n p u r i f i k a s i D N A .
2 . P e m o t o n g a n D N A d e n g a n e n z i m e n d o n u k l e a s e u n t u k m e n d a p a t k a n fi-agmen D N A
y a n g d i i n g i n k a n ( b i a s a n y a fi*agmen D N A y a n g d i a m b i l a d a l a h fi*agmen y a n g m e -
ngandung gen y a n g m e n y a n d i ekspresi protein y a n g dikehendaki).
3 . P e n y a t u a n fi*agmen D N A d e n g a n p l a s m i d v e k t o r m e n g g u n a k a n e n z i m D N A l i g a s e
untuk menghasilkan plasmid D N A r e k o m b m a n (gabungan antara plasmid vektor
d e n g a n fi-agmen D N A y a n g d i i n g i n k a n ) .
4. Transformasi plasmid D N A r e k o m b i n a n k e dalam hospes (misalnya, bakteri, j a -
mur, t u m b u h a n , atau hewan).
5. P l a s m i d r e k o m b i n a n m e m p e r b a n y a k d i r i d i d a l a m h o s p e s s e h i n g g a m e n g h a s i l k a n
sejumlah salinan gen yang dikloning.
; 6. P e n y e l e k s i a n t r a n s f o r m a n y a n g m e n g a n d u n g p l a s m i d r e k o m b i n a n .
7. P e m u r n i a n g e n y a n g d i i n g i n k a n dan/atau d i l a n j u t k a n d e n g a n proses p e m u r n i a n
galur y a n g didapat u n t u k d i b i a k k a n dalam skala besar sehingga diperoleh protein
yang diinginkan.
Enzim endonuklease restriksi

Salah satu k e m a j u a n pesat d a l a m bidang rekayasa genetika adalah d i t e m u k a n n y a en-
z i m endonuklease restriksi, suatu e n z i m y a n g dapat m e m o t o n g D N A d i l o k a s i ter-
tentu.
E n z i m e n d o n u k l e a s e r e s t r i k s i p e r t a m a k a l i b e r h a s i l d i i s o l a s i d a r i b a k t e r i Haemo-
philus irfluenzae p a d a t a h u n 1 9 7 0 o l e h H a m i l t o n S m i t h d a r i U n i v e r s i t a s J o h n H o p k i n s
A m e r i k a . E n z k n i n i dapat m e m o t o n g D N A asing y a n g berasal dari virus p e m a k a n
bakteri (bakteriofaga).
S e j a k saat i t u , berbagai j e n i s e n z i m endonuklease r e s t r i k s i dapat diisolasi dari
beberapa j e n i s bakteri. Beberapa e n z u n tersebut dapat m e n g e n a l i gugus spesifik ( g u -
Bab 6 - Genetika Babteri 87
gus palindromik) yang terdiri atas 4 basa, sedangkan yang lain dapat mengenali gugus
pemotongan yang terdiri atas 6 basa. Beberapa contoh enzim endonuklease restriksi
dapat dilihat pada Tabel 6.2.
Vektor kloning
Agar fragmen DNA dapat diklonkan ke dalam hospes, DNA harus diikat terlebih da-
hulu pada suatu wahana kloning atau vektor.
Salah satu vektor untuk pengklonan gen yang sering digunakan adalah plasmid.
Plasmid merupakan gen ekstrakromosomal yang dimiliki oleh bakteri Gram-negatif,
bakteri Gram-positif, khamir, dan fungi. DNA plasmid terdiri atas DNA untai ganda
yang berbentuk melingkar. Plasmid dapat melakukan replikasi secara otonomdi dalam
sel hospes.
Plasmid yang ideal menjadi vektor kloning harus mempunyai sifat berikut.
• Mampu melakukan replikasi sendiri.
• Mempunyai ukuran kecil sehingga mudah diisolasi dan disisipkan.
• Mempunyai banyak situs pemotongan (multiple cloning site) untuk memasukkan
gen yang akan disisipkan.
• Mempunyai gen marker selektif yang mudah diseleksi. Gen yang sering digunakan
sebagai marker selektif adalah gen yang menyandi resistensi terhadap antibiotik
atau gen yang menyandi enzim tertentu.
Beberapa plasmid dapat digunakan dalamberbagai spesies hospes yang disebut shuttle
vector. Shuttle vector dapat digunakan untuk pengklonan fragmen DNA dalam bebe-
rapa organisme, misalnya ke dalam bakteri, jamur, dan sel mamalia atau di antara
bakteri, jamur, dan tanaman.
Struktur plasmid yang digunakan untuk kloning gen umumnya mempunyai gen
Ori untuk memulai replikasi secara otonom; gen marker selektif, misalnya gen amp',
yang menyandi resistensi terhadap ampisilin, dan gen LacZ\ serta lokasi pengklonan
(multiple cloning site, MCS) yang terdiri atas beberapa situs pemotongan enzim en-
frabei 6^2 Beberapa Enzim Endonuklease Restriksi dan Lokasi

^Pemotongannya
Nama Enzim M ikroorga nisme Loka si P e motonga n
BamHI Bacilius amyloliguefaciens GiGATCC

EcoRI Escherichia coli RY13 GiAATTC
Hindlll Haemophilus influenzae AiAGCTT
Hpal Haemophilus parainfluenzae GTTiAAC
Haelll Haemophilus aegyptius GGjCC
PsU Providentia stuartii 164 CTGCAiG
Sall Streptomyces albus G GITCGAC
Hpall Haemophilus parainfluenzae CiCGC
donuklease restriksi, antara lain Xbal, BamHI, dan EcoRI, seperti yang terlihat pada
Gambar 6.4.
Pada saat ini, berbagai jenis plasmid telah dikonstruksi dan telah dipasarkan untuk
berbagai tujuan kloning. Beberapa di antaranya adalah plasmid yang dipakai untuk
kloning bakteri; plasmid untuk transformasi jamur; vektor faga untuk transduksi
DNA; dan plasmid T pada Agrobactehum tiimefaciens untuk transformasi DNA pada
tanaman.
Konstruksi DNA rekombinan
Kita telah membahas enzim endonuklease restriksi dan vektor plasmid DNA sebagai
wahana kloning dalam uraian terdahulu. Peranan enzim endonuklease restriksi dan
plasmid DNA sangat penting dalam pembuatan molekul DNA rekombinan dengan
menyisipkan DNAasing ke dalam wahana plasmid.
me nce rna ve ktor pla smid

de nga n e nz im EcoRI
5'"" OH P O i" ""3'

N G " ^ A A T T C N
^, N C T T A A _ G N ^,
3 ' . . . . — — — PO4 OH — - 5 '
G a mba r 6.4 Salah satu contoh struktur plasmid yang digunakan sebagai wahana kloning atau
vektor. Plasmid ini mempunyai Ori untuk permulaan replikasi secara otonom dan gen marker
selektif, yaitu gen amp', yang menyandi resistensi terhadap antibiotik ampisilin dan gen LacZ
yang menyandi enzim P-galaktosidase. DNA asing dapat disisipkan pada lokasi kloning {multiple
cloning site, MCS). Jenis enzim endonuklease restriksi yang dapat digunakan adalah BamHI,
EcoRI, dan Xbal.
Bab 6 - Genetika Babteri 89
Enzim yang paling banyak digunakan dalam prosedur penyisipan fragmen DNA
adalah enzim endonuklease restriksi yang dapat memotong DNA yang menghasilkan
ujung DNAyang dapat berlekatan {sticky encf) dibandingkan dengan enzim yang
menghasilkan ujung tumpul (bliint encf). Selanjutnya, ujung-ujung yang dapat ber-
lekatan tersebut akan disambung kembali secara kovalen dengan bantuan enzimDNA
ligase.
Pemotongan dengan enzim endonuklease restriksi yang menghasilkan ujung DNA
yang dapat berlekatan akan menghasilkan pengklonan yang efisien. Enzim DNA
ligase berperan untuk menutup celah-celah pada untai DNA yang mempunyai ujung
5' fosforil dan 3' hidroksil sehingga membentuk ikatan fosfodiester pada molekul
DNA. Secara skematis, peranan enzim endonuklease restriksi danenzim DNA ligase
dalam proses pembuatan DNA rekombinan dapat dilihat pada Gambar 6.5.
Pengklonan DNA rekombinan
Molekul DNArekombinan yang telah terbentuk dapat dimasukkan ke dalam sistem
biologis tertentu sebagai hospesnya. Escherichia coli merupakan salah satu spesies
bakteri yang paling sering digunakan dalam kloning gen. Proses memasukkan plas-
mid DNArekombinan ke dalam sel bakteri di laboratorium umumnya dilakukan
dengan cara transformasi atau elektroporasi.
Transformasi adalah suatu teknik memasukkan plasmid DNAdengan cara mening-
katkan permeabilitas dinding sel bakteri dengan menggunakan larutan CaCl, sehingga
plasmid DNA dapat masuk kedalam sel melalui pori-pori yang terdapat pada dinding
sel bakteri.
Elektroporasi adalah suatu teknik memasukkan plasmid DNA dengan menempat-
kan sel bakteri penerima dalam medan listrik agar dinding sel bakteri dapat dilalui
oleh plasmid DNA. Dengan demikian, plasmid DNAdapat masuk ke dalam sel bakteri
tanpa menyebabkan kerusakan pada sel bakteri. Selanjutnya, selama pertumbuhan sel
bakteri Escherichia coli, plasmid akan bereplikasi secara otonom sehingga akan
mengamplifikasi gentertentu yang telah disisipkan ke dalam plasmid DNA tersebut.
Apabila produk yang diinginkan adalah protein yang dihasilkan oleh sel bakteri
Escherichia coli, setelah klon bakteri terpilih diperoleh, klon bakteri tersebut dapat
dibiakkan dalamvolume tertentu untuk menghasilkan protein yang hendak diproduksi.
Tahapan rekayasa genetika tersebut dapat dilihat pada Gambar 6.6.
Seleksi klon bakteri yang mengandung plasmid DNA
rekombinan
Dalam proses kloning gen, seleksi klon bakteri yang mengandung plasmid rekombi-
nan atau tepatnya yang mengandung pilihan yang diklonkan ke dalam sel bakteri
merupakan langkah yang sangat penting. Proses seleksi ini tergolong sulit karena dari
ribuan sel bakteri, hanya beberapa sel bakteri yang kemungkinan dapat menerima
plasmid DNA rekombinan.
Setiap wahana plasmid mengandung gentertentu yang bertindak sebagai marker
selektif untuk mengenali apakah sel bakteri atau sel transforman dapat menerima
plasmid DNA atau tidak.
ONAPIasmid 5' I I ^ ^ ^ ^ I I 3-
i
3' I Zl CTTAAG I Zl 5
DNA dipotong dengan EcoRI
• G AATTC I
II CTTAA G I - J
r
AATTC G
G I m CTTAA
Fragmen DNA asing yang akan
disisipkan telah dipotong dengan
EcoRI
II G AATTC I m G AATTC C
1 CTTAA G I Zl CTTAA G C
Potongan fragmen DNA disambung

dengan bantuan enzim DNA ligase
• GAATTC IHZZZ!ZZ!1 G A A T T C C
II C T T A A G I Z] CTTAAG C
Fragmen DNA asing

yang disisipkan ke
dalam plasmid
Molekul DNA rekombinan
Gambar 6.5 Peranan enzim endonuklease restriksi dan enzim DNA ligase dalam pembuatan
DNA rekombinan.
Bila plasmid DNA yang digunakan mengandung gen amp', yang menyandi eks-
presi enzim yang dapat merusak antibiotik ampisilin, sel bakteri yang mengandung
plasmid dapat tumbuh dengan baik jika dibiakkan dalam media yang mengandung
ampisilin. Sebaliknya, sel bakteri yang tidak menerima plasmid DNAakan mati ketika
dibiakkan dalam media yang mengandung ampisilin (Gambar 6.7.). Dari kondisi ini,
kita dapat mengetahui bahwa sel bakteri yang tumbuh dalam media yang mengandung
ampisilin merupakan transforman yang kita kehendaki.
Bakteri
yang dihasilkan yang dihasilkan
G a m b a r 6.6 Tahapan rekayasa genetika. (1). Isolasi plasmid DNA dan DNA yang mengandung
gen asing yang akan diklonkan. (2). Pemotongan plasmid DNA dan DNA asing dengan enzim
endonuklease restriksi. (3). Penyatuan fragmen gen asing dengan plasmid DNA dengan bantuan
DNA ligase. (4). Transformasi plasmid DNA rekombinan ke dalam sel bakteri. (5). Penyeleksian
klon bakteri yang dikehendaki dan isolasi gen yang dihasilkan. (6). Isolasi produk protein spesifik
sel bakteri, yaitu protein yang ekspresinya disandi oleh gen yang diklonkan ke dalam bakteri.
Namun demikian, hanya mengetahui bahwa kita telah mendapatkan koloni bakteri
yang dapat tumbuh dalam perbenihan ampisilin tidak cukup akurat untuk menentukan
apakah bakteri itu betul-betul membawa fragmen gen yang kita kehendaki. Oleh
karena itu, diperlukan langkah berikutnya untuk mengidentifikasi keberadaan fragmen
itu. Teknik pertama, jika fragmen genyang disisipkan ke dalam bakteri menyandi
protein tertentu yang dapat diidentifikasi, identifikasi protein yang dihasilkan dapat
dilakukan. Teknik kedua yang dapat dilakukan adalah mengidentifikasi gen yang disi-
sipkan tersebut. Untuk tujuan ini, teknik yang umum dilakukan adalah teknik pelacak
DNA(DNA probe), yaitu segmen dari DNAuntai tunggal yang komplementer dengan
gen yang akan dilacak dapat dimanfaatkan untuk mengidentifikasi keberadaan gen
yang telah kita sisipkan dalam sel bakteri tersebut. •
Plasmid DNA rekombinan
• Plasmid DNA rekombinan

• ditransformasikan ke dalam
^ sel bakteri
Koloni yang tumbuh adalah sel transforman yang

resisten terhadap ampisilin
G a mba r 6.7 Salah satu teknik untuk menyeleksi koloni bakteri yang mengandung plasmid DNA
rekombinan. Setelah proses transformasi, ada sebagian sel bakteri yang menerima plasmid DNA
dan sebagian besar lainnya tidak menerima plasmid DNA. Dengan membiakkan bakteri pada
media yang mengandung ampisilin, kita dapat menyeleksi koloni bakteri yang mengandung
plasmid DNA rekombinan.
93
Cara identifikasi lain yang lebih akurat adalah dengan melakukan pengurutan
DNA (seguencing of DNA) gen yang telah dikloning tersebut.
Pemanfaatan dan aplikasi rekayasa genetika
Dalam beberapa tahun terakhir sejak teknologi DNArekombinan dikembangkan, tek-
nologi ini telah banyak digunakan dalam sejumlah besar penelitian, baik mengenai
genom prokariot maupun genom eukariot. Aplikasi teknologi kloning gen antara lain
sebagai berikut.
1. Memproduksi senyawa-senyawa yang bermanfaat secara lebih ekonomis dan efi-
sien.
2. Mendapatkan berbagai informasi dari DNAyang telah diklonkan untuk digunakan
dalam penelitian dasar ataupun dalam bidang kesehatan dan farmasi.
3. Mempelajari karakteristik suatu sel atau organisme melalui kloning gen.
Dengan teknik rekayasa genetika, kita dapat memanfaatkan bakteri atau khamir untuk
memproduksi protein manusia yang penting untuk pengobatan dan untuk keperluan
lain dalam jumlah besar. Berbagai senyawa telah dihasilkan dengan cara ini, antara
lain insulin manusia, interferon-alfa, interferon-beta, interferon-gamma, antigen virus
hepatitis B, dan hormon pertumbuhan manusia.
Teknik rekayasa genetika juga dipercaya mampu membawa kemajuan yang pesat
dalambidang kesehatan dan pertanian. Teknologi ini dapat meningkatkan pengetahuan
kita tentang proses penyakit yang sulit disembuhkan, misalnya penyakit-penyakit
yang disebabkan oleh kelainan genetik. Selain itu, dengan rekayasa genetika, kita da-
pat merekayasa berbagai spesies, baik bakteri, tanaman, ataupun hewan untuk meng-
hasilkan senyawa-senyawa yang bermanfaat bagi manusia, terutama dalam mening-
katkan kesehatan dan pemenuhan kebutuhan pangan.
BAB 7
KLASIFIKASI DAN
IDENTIFIKASI BAKTERI
• Klasifikasi Babteri
• Identifikasi Bakteri
94
KLASIFIKASI BAKTERI
Klasifikasi bakteri didasarkan pada kesamaan atau kemiripan sifat-sifat spesifik dan
unik yang dimiliki bakteri. Suatu penataan klasifikasi secara sistematik ke dalam
kelompok-kelompok disebut taksonomi. Bakteri diklasifikasikan berdasarkan sistem
taksonomi seperti yang dikembangkan oleh Carolus Linnaeus untuk tanaman dan
binatang pada tahun 1735. Sistem taksonomi menempatkan spesies di ujung dan
kingdom di ujung yang lain, dengan urutan sebagai berikut.
Kingdom : Seluruh organisme di dalam hierarki ini
Filum/Divisio : Sekelompok kelas yang berkerabat
Kelas : Sekelompok ordo yang serupa
Ordo : Sekelompok famili yang serupa
Famili : Sekelompok genus yang serupa
Genus : Sekelompok spesies yang serupa
Spesies : Sekelompok organisme yang berkerabat dekat. Individu-individu
di dalam kelompok ini serupa dalam sebagian besar ciri-cirinya.
Klasifikasi bakteri memerlukan metode penamaan {nomenclature) untuk memberi
nama suatu kelompok bakteri tertentu. Pemberian nama untuk bakteri diatur dalam
International Code of Nomenclature of Bacteria, yang memuat suatu tatacara pena-
maan bakteri menggunakan sistempemberian nama binomial (binomialname), seperti
dalam metode yang diajukan oleh Carolus Linnaeus. Sistem penamaan binomial
terdiri atas dua kata, yaitu kata depan merupakan nama genus dan kata belakang me-
rupakan specific epithet (spesies). Nama genus dimulai dengan huruf besar dan spesies
ditulis dengan huruf kecil. Kedua kata ditulis dengan huruf miring atau diberi garis
bawah, misalnya Escherichia coli.
Salah satu cara klasifikasi prokariot yang dianut secara luas adalah metode kla-
sifikasi dan determinasi menurut Bergey dalam Bergey's Manual of Determinative
Bacteriolog)'. Dalam Bergey's Manual, prokariot dibagi dalam 2 golongan besar
(domain), yaitu bakteri (bacteria) dan arkea (ârchaea). Prokariot (organisme bersel
tunggal) mempunyai materi genetik yang terdiri atas DNA yang terbuka dan tidak
terbungkus dalamsuatu selaput atau membran inti. Prokariot berkembang biak dengan
membelah diri menjadi dua bagian. Eubacteria dan Archaebacteria termasuk dalam
prokariot. Bakteri yang patogen pada manusia termasuk dalam Eubacteria.
Klasifikasi prokariot adalah sebagai berikut.
• Kingdom : Procaryote
• Divisio : Cyanobacteria
• Divisio II : Bacteria
Bacteria dibagi dalam 3 kelas dan pembagian selanjutnya adalah sebagai berikut.
• Ordo : Penamaan ordo berakhiran dengan -ales
• Famili : Penamaan famili berakhiran dengan -aceae
• Tribus : Penamaan tribus berakhiran dengan -ieae
• Genus
• Spesies
Sebagai contoh:
Ordo : Eubacteriales
Famili : Micrococcaceae
Genus : Staphylococcus
Spesies : Staphylococcus aureus
Staphylococcus epidermidis
Staphylococcus saprophyticus
Nama bakteri biasanya dapat menunjukkan sifat bakteri, bentuk bakteri, atau nama
penemu bakteri. Sebagai contoh, Bacilius adalah bakteri berbentuk batang; Micro-
coccus adalah bakteri berbentuk butir-butir kecil; Erwinia berasal dari nama Erwin;
Pasteurella berasal dari nama Pasteur; Clostridium welchii ditemukan oleh Welch;
dan Borrelia burgdorferi ditemukan oleh Willy Burgdorferi.
IDENTIFIKASI BAKTERI
Identifikasi jenis bakteri bukan suatu pekerjaan yang mudah karena memerlukan ke-
terampilan dan beberapa informasi untuk menentukan spesies bakteri yang akan di-
identifikasi. Beberapa hal yang perlu diperhatikan antara lain {a) ukuran, bentuk, dan
susunan bakteri; {b) reaksi pewarnaan Gram; (c) gerakan bakteri: apakah dapat ber-
gerak atau tidak; {d) tipe flagel: apakah flagel berada di ujung sel bakteri saja atau di
seluruh tubuh; {e) ukuran dan bentuk koloni bakteri; (/) warna koloni: apakah menye-
kresi pigmen warna tertentu ke dalam media atau tidak; dan (g) konsistensi koloni
bakteri. Identifikasi genus dan spesies bakteri lebih lanjut memerlukan informasi yang
lebih lengkap, misalnya sifat-sifat biokimia bakteri, apakah bakteri dapat memfer-
mentasi jenis karbohidrat tertentu, atau dapat menggunakan senyawa tertentu sebagai
satu-satimya sumber energi. Uji serologi juga sermg digunakan dalam identifikasi
akhir bakteri tertentu. Sebagai contoh, uji serologi untuk memastikan penyakit demam
tifoid. Dengan mereaksikan serumpenderita yang mengandung antibodi dengan anti-
gen yang berasal dari Salmonella typhi, kita dapat memastikan apakah seseorang
mengalami infeksi Salmonella typhi atau tidak.
Identifikasi bakteri, khususnya bakteri yang patogen untuk manusia, dapat dilaku-
kan dengan beberapa cara berikut,
|l. Pengamatan sifat-sifat morfologi koloni bakteri.
2. Pengamatan mikroskopis melalui pewarnaan bakteri.
3. Identifikasi bakteri melalui uji sifat biokimia.
4. Identifikasi bakteri berdasarkan profil DNA.
Pengamatan sifat-sifat morfologi koloni bakteri
Bakteri yang berasal dari bahan yang diperiksa, baik dari sampel klinis maupun dari
sediaan farmasi tertentu, dibiakkan dalam media perbenihan yang sesuai. Sifat-sifat
koloni yang tumbuh dapat diamati secara makroskopis untuk mengidentifikasi jenis'
bakteri yang tumbuh dalam media perbenihan tersebut. Sifat-sifat morfologi koloni;
bakteri yang perlu diamati adalah warna, bentuk, dan konsistensi koloni serta daya!^
hemolitik bakteri.
Bab 7 - Klasifikasi dan Identifikasi Bakteri
Warna koloni
Pigmen yang diekskresikan oleh bakteri, baik dalam koloni maupun dalam media per-
benihan, sering kali bersifat spesifik sehingga dapat dijadikan acuan untuk menentukan
spesies bakteri. Sebagai contoh:
• Staphylococcus aureus : berwarna kuning keemasan
• Staphylococcus citreus : berwarna kuning sitrun
• Staphylococcus albus : berwarna putih
• Serratia marcescens : berwarna merah
• Chromobacterium violaceum : berwarna violet
• Pseudomonas aeruginosa : berwarna hijau
Bentuk koloni bakteri
Pertumbuhan koloni bakteri dalam media perbenihan dapat berbentuk koloni yang
kasar, halus, menjalar, atau beranyam. Bentuk koloni dapat dijadikan petunjuk untuk
mengidentifikasi bakteri tertentu. Sebagai contoh, Proteiis minibilis membentuk ko-
loni yang menjalar dalammedia perbenihan, sedangkan Bacilius mycoicies membentuk
koloni yang berbentuk seperti anyaman.
Konsistensi koloni
Beberapa koloni bakteri menghasilkan lendir yang spesifik.

Daya hemolitik bakteri
Beberapa jenis bakteri dapat menunjukkan kemampuan menghemolisis sel darah
merah jika dibiakkan dalam media agar darah.
Pengamatan mikroskopis melalui pewarnaan bakteri
Bakteri sukar sekali dilihat dengan jelas dengan mikroskop cahaya biasa karena
bakteri tidak berwarna jika diamati secara sendiri-sendiri. Dalam upaya memahami
dan mempelajari struktur, penggolongan sifat, dan morfologi bakteri, dapat dilakukan
pewarnaan bakteri.
Sebelum pewarnaan, bakteri dapat disiapkan dengan membuat sediaan bakteri be-
rupa suspensi bakteri, yaitu satu tetes larutan NaCI fisiologis ditambah biakan kuman.
Sediaan ini kemudian disebarkan setipis mungkin di atas gelas preparat dan dibiarkan
mengering pada suhu kamar. Selanjutnya, sediaan bakteri di atas gelas preparat dire-
katkan/difiksasi dengan dilewatkan dengan cepat di atas api sebanyak dua atau tiga
kali. Setelah dingin, sediaan siap diwarnai. Beberapa hal berikut harus diperhatikan
untuk memperoleh hasil pewarnaan yang baik.
• Umur biakan sebaiknya 18-24 jam, kecuali bakteri Mycobacteriimi yang tumbuh
sangat lambat karena morfologi danstruktur bakteri dapat mengalami perubahan
jika biakan bakteri berumur lebih dari 24 jam.
• Zat warna yang digunakan harus zat warna dengan kualitas yang baik.
• Sediaan bakteri yang disebarkan di atas gelas preparat harus sedemikian tipis
sehingga dapat memperlihatkan morfologi bakteri setelah diwarnai.
Beberapa jenis pewarnaan bakteri yang telah dikenal selama ini adalah sebagai beri-|
kut. I
Pewarnaan negatif |
Pewarnaan ini dilakukan untuk melihat beberapa spesies bakteri yang sukar diwarnai.
Dalam teknik ini, bakteri tidak diwarnai, yang diwarnai adalah latar belakangnya.
Bakteri akan tampak terang dengan latar belakang warna hitam. Zat warna yang di-
pakai adalah zat warna nigrosin atau tinta India. Sediaan bakteri dibuat dengan dise-
bar-ratakan dengan gelas objek lain atau dikenal dengan sediaan hapus. Pewarnaan ini
sangat berguna untuk mengamati bentuk keseluruhan sel yang sangat kecil. Beberapa
spesies bakteri yang diamati dengan pewarnaan negatif antara lain Treponema, Lep-
tospira, dan Borrelia.
Pewarnaan sederhana
Pewarnaan ini merupakan teknik pewarnaan yang sangat sederhana, yaitu hanya de-
ngan menambahkan satu jenis zat warna pada sediaan bakteri di gelas preparat yang
telah difiksasi/direkatkan. Zat warna yang digunakan antara lain biru metilen, gentian
violet, dan air fuksin.
Pewarnaan diferensial
Teknik pewarnaan diferensial menggunakan lebih dari satu macamzat warna. Dengan
pewarnaan ini, bakteri dapat dibedakan menjadi dua kelompok fisiologi sehingga
akan sangat memudahkan identifikasi spesies bakteri. Jenis pewarnaan diferensial
yang banyak digunakan adalah pewarnaan Gram dan pewarnaan tahan asam.
P e wa rna a n G ra m
Pada tahun 1884, seorang dokter berkebangsaan Denmark, Christian Gram, membuat
zat warna khusus yang sangat penting dalambidang bakteriologi. Prosedur pewarnaan
Gramterdiri atas beberapa langkah berikut.
1. Sediaan bakteri difiksasi/direkatkan di atas gelas preparat dan diwarnai dengan
karbol kristal ungu selama 5 menit.
2. Zat warna kristal ungu tersebut kemudian dicuci dan dibilas.
3. Sediaan diwarnai dengan larutan lugol (larutan I^ + KI) dan didiamkan selama
45-60 detik.
4. Larutan lugol ditiriskan dan sediaan dicuci dengan alkohol 96% selama 15-30
detik atau digoyang-goyangkan sampai tidak ada zat warna yang mengalir lagi.
5. Sediaan dicuci dengan air dan diwarnai dengan air fuksin selama 1-2 menit.
6. Sediaan dicuci, dikeringkan, dan diperiksa di bawah mikroskop.
Zat warna karbol kristal ungu dan larutan lugol akan membentuk senyawa kompleks
yang berwarna ungu. Setelah pencucian dengan alkohol 96%, beberapa kelompok
bakteri dapat melepaskan zat warna ungu dengan mudah, sedangkan kelompok yang
lain dapat mempertahankan zat warna ungu tersebut. Bakteri yang tidak memper-
Bab 7 - Klasifikasi dan Identifikasi Bakteri 99
tahankan zat warna ungu pada pencucian dengan alkohol 96% merupakan bakteri
Gram-negatif, sedangkan kelompok bakteri yang mempertahankan zat warna ungu
tersebut merupakan bakteri Gram-positif Karena tidak berwarna setelah dicuci de-
ngan alkohol 96%, bakteri Gram-negatif perlu diwarnai dengan zat warna lain untuk
mengetahui bentuknya di bawah mikroskop, yaitu dengan zat warna merah air fuksin
atau safranin. Dengan demikian, bakteri Gram-negatif akan berwarna merah. Seba-
liknya, zat warna ungu yang tidak tercuci oleh alkohol 96%pada bakteri Gram-positif
menyebabkan penambahan zat warna merah safranin tidak menimbulkan pengaruh.
Dengan demikian, sel bakteri Gram-positif tetap berwarna ungu atau biru lembayung.
Rangkuman tentang diferensiasi warna pada bakteri Gram-positif dan bakteri Gram-
negatif dapat dilihat pada Tabel 7.1.
Perbedaan hasil pewarnaan Gram pada bakteri Gram-positif dan bakteri Gram-
negatif dijelaskan oleh beberapa teori.
• Teori Salton. Teori ini menjelaskan bahwa dinding sel bakteri Gram-negatif me-
ngandung kadar lipid yang tinggi, sekitar 20%. Lipid ini dapat larut pada tahap
pencucian sediaan dengan alkohol 96% sehingga pori-pori pada dinding sel
membesar dan zat warna yang sudah diserap oleh sel akan dilepaskan kembali;
akibatnya, bakteri tersebut menjadi tidak berwarna. Sebaliknya, pada bakteri
Gram-positif, pencucian dengan alkohol 96% akan menyebabkan protein pada
dinding sel mengalami denaturasi sehingga pori-pori mengecil dan kompleks ungu
kristal iodium tetap terperangkap pada dinding sel; akibatnya, bakteri berwarna
ungu.
• Teori lain menyebutkan bahwa perbedaan warna bakteri Gram-positif dan Gram-
negatif berkaitan dengan permeabilitas dinding sel. Teori ini didasarkan pada
ketebalan lapisan peptidoglikan dalam dinding sel. Susunan dinding sel bakteri
Gram-positif terdiri atas lapisan peptidoglikan yang tebal sekali (kurang lebih 30
lapisan) sehingga permeabilitas dinding sel bakteri Gram-positif kurang dan kom-
Tabel 7.1 Diferensiasi Zat Warna pada Proses Pewarnaan Gram

P e rla kua n G ra m- positif G ra m- ne ga tif Ke te ra nga n
Pewamaan dengan Ungu muda Ungu muda Zat warna diserap

karbol ungu kristal dalam dinding sel dan
protoplasma
Pemberian cairan Ungu tengguli Ungu tengguli Terbentuk kompleks
lugol ungu kristal iodium
Pencucian dengan Ungu Tidak berwarna Zat warna dilarutkan
alkohol 9 6 % oleh alkohol dan
keluar dari sel
Pewarnaan dengan Ungu Merah Zat warna kontras air

air fuksin fuksin akan menye-
babkan sel bakteri
Gram-negatif
benA/arna merah
pleks ungu kristal iodiumtidak dapat keluar dari dinding sel. Lapisan peptidoglikan
bakteri Gram-negatif sangat tipis, hanya 1-2 lapisan sehingga permeabilitas din-
ding sel bakteri Gram-negatif lebih besar dan memungkinkan keluarnya kompleks
ungu kristal iodium dari dinding sel.
P e wa rna a n ta ha n a sa m
Pewamaan tahan asam umumnya digunakan untuk membantu mengidentifikasi bak-
teri Mycobacterium, termasuk Mycobacterium tuberculosis dan Mycobacterhtm le-
prae. Pewamaan tahan asamjuga dipakai untuk mengidentifikasi beberapa galur pa-
togen dari genus Nocardia, Jika sediaan bakteri yang diwamai dengan zat wama
karbol fuksin dicuci dengan larutan alkohol asam(etanol 60%dan ^Ô^ 5%), bakteri
tahan asam akan mempertahankan zat wama merah karbol fiiksin. Hal ini karena zat
wama merah karbol fuksin lebih lamt dalam lipid yang terdapat pada dinding sel
bakteri daripada dalam alkohol asam. Sebaliknya, bakteri bukan tahan asam akan
melepaskan zat wama tersebut sehingga tidak berwama. Hal ini karena bakteri tersebut
tidak mengandung lipid pada dinding selnya. Pewamaan tahan asam terdiri atas:
• Pewamaan Ziehl Neelsen
Cara pewamaan Ziehl Neelsen adalah sebagai berikut.
1. Sediaan bakteri yang telah direkatkan di atas gelas objek diwamai dengan la-
rutan karbol fuksin dan dipanaskan di atas api kecil hingga keluar asap, kemu-
dian dibiarkan selama 5 menit.
2. Sediaan dicuci dengan air dan dimasukkan ke dalamlamtan H^SO^ 5% selama
2 detik, kemudian dicuci dengan larutan alkohol 60%hingga tidak ada lagi zat
wama merah yang mengalir.
3. Sediaan dicuci dengan air dan diwamai dengan lamtan bim metilen selama
1-2 menit, kemudian dicuci dengan air dan dikeringkan.
Hasil pewamaan tahan asam: bakteri tahan asamakan berwama merah, sedangkan
bakteri tidak tahan asam akan berwama biru.
• Pewamaan Kinyoun Gabbett
Cara pewamaan Kinyoun Gabbett atau pewamaan Tan Thiam Hok adalah sebagai
berikut.
1. Sediaan bakteri yang telah direkatkan di atas gelas objek diwamai dengan
lamtan Kinyoun selama 3 menit dan dicuci dengan au*.
2. Sediaan kemudian diwamai dengan lamtan Gabbett selama 1 menit, dicuci de-|
ngan air, dan dikeringkan. |
Hasil pewamaan Kinyoun Gabbett: bakteri tahan asamberwama merah, sedangkan
bakteri lain berwama bim.
Pewarnaan spesial
Pewamaan spesial digunakan untuk mewamai bagian-bagian bakteri yang sulit diwar-
nai dengan pewamaan biasa, seperti endospora, flagel, dan simpai atau kapsul bakteri.
Beberapa pewamaan spesial dijelaskan berikut ini.
P e wa rna a n e ndospora
Endospora tidak dapat diwarnai dengan pewarnaan biasa, seperti pewarnaan Gram
atau pewarnaan sederhana karena zat warna sulit masuk ke dalam dinding sel endo-
spora. Pewarnaan spora yang sering dilakukan adalah pewarnaan Schaeffer-Fulton,
dengan langkah-langkah sebagai berikut.
1. Sediaan bakteri yang telah direkatkan di atas gelas objek dipanaskan dan diwarnai
dengan hijau malasit {malachite green) selama 5 menit. Pemanasan dilakukan un-
tuk membuka pori-pori dinding endospora agar zat warna dapat masuk ke dalam
dinding sel endospora.
2. Sediaan dicuci dengan air selama 30 detik atau sampai tidak ada lagi zat warna
yang mengalir.
3. Sediaan kemudian diwarnai dengan safranin untuk mewarnai bagian-bagian sel
selain endospora.
Pada pewarnaan Schaeffer-Fulton, endospora akan berwarna hijau di dalam sel yang
berwarna merah atau merah muda.
Teknik pewarnaan spora lainnya adalah pewamaan Klein. Pada pewarnaan ini,
endospora akan berwama merah, sedangkan badan bakteri akan berwarna biru.
P e wa rna a n flagel
Teknik pewarnaan yang sering digunakan untuk mewamai flagel bakteri adalah
pewarnaan Gray. Pada pewarnaan ini, mordan (zat pengikat warna) digunakan untuk
meningkatkan afinitas flagel terhadap zat wama dan memperbesar diameter flagel.
Suspensi garam asam tanat dapat memperbesar flagel dan dinding sel sehingga flagel
dapat dilihat dengan mudah di bawah mikroskop biasa ketika diwarnai dengan karbol
fuksin.
P e wa rna a n simpa i
Pewarnaan simpai bakteri lebih sulit daripada pewarnaan bagian bakteri lainnya ka-
rena simpai bakteri dapat larut dalam air dan dapat rusak pada proses pewarnaan dan
pencucian. Pewarnaan simpai yang sering digunakan adalah sebagai berikut.
• Pewarnaan Burri-Gins.
Pewamaan ini merupakan kombinasi pewarnaan negatif dan pewarnaan sederhana
menggunakan karbol fuksin. Pada pewarnaan ini, simpai tidak berwarna dan
terlihat sebagai bulatan terang dengan latar belakang gelap, sedangkan badan
bakteri berwarna merah.
• Pewarnaan Muir.
Simpai akan berwarna bim, sedangkan badan kuman berwarna merah.
• Pewarnaan Hiss.
Simpai akan berwama ungu muda, sedangkan badan kuman berwarna ungu tua.
Identifikasi bal<teri melalui uji sifat biokimia
Identifikasi bakteri dapat dilakukan dengan uji biokimia. Bakteri dimasukkan dalam
tabung berisi media perbenihan yang mengandung protein, salah satu jenis karbohi-
drat, larutan indikator pH (bromtimol biru), dan tabung Durham untuk mengetahui
terbentuknya gas selama proses fermentasi. Keberadaan bakteri Escherichia coli
dalam larutan yang mengandung glukosa akan menyebabkan glukosa mengalami
fermentasi. Hal ini ditunjukkan oleh pembentukan gas dan perubahan warna indikator
dari ungu menjadi kuning yang menunjukkan adanya perubahan pH larutan. Prosedur
ini juga dapat dilakukan pada jenis bakteri lain yang dapat memfermentasi larutan
gula tertentu.
Identifikasi bakteri dengan uji biokimia biasanya dilakukan untuk mendeteksi spe-
sies bakteri golongan enterik, suatu kelompok bakteri yang sangat heterogen yang
terdapat dalamsaluran cerna manusia dan hewan. Beberapa bakteri ini bersifat patogen
dan dapat menyebabkan penyakit diare. Semua bakteri yang termasuk dalam famili
Enterobacteriaceae bersifat oksidase negatif, antara lain genus Escherichia, Entero-
bacter, Shigella, Citrobacter, dan Salmonella. Escherichia, Enterobacter, dan Citro-
bacter dapat memfermentasi laktosa dan memproduksi asam dan gas sehingga dapat
dibedakan dari Salmonella danShigella yang tidak dapat memfermentasi laktosa.
Pemeriksaan biokimia selanjutnya untuk membedakan genus-genus dalam famili
Enterobacteriaceae dapat dilihat pada Gambar 7.1 dan Tabel 7.2.
Identifikasi bakteri berdasarkan profil DNA
Apabila mikroorganisme yang akan diidentifikasi sulit dibiakkan dalam media per-
benihan, etiologi penyebab penyakit infeksi tidak dapat ditegakkan. Oleh karena itu,
teknik identifikasi bakteri berdasarkan profil DNA bakteri semakin berkembang. Tek-
nik ini dikembangkan untuk mendeteksi bakteri tertentu secara lebih cepat, khususnya
bakteri yang bersifat patogen.
Meragi laktosa
Tidak) ( Ya
Menggunakan asam sitrat Menggunakan asam sitrat

sebagai sumber karbon sebagai sumber karbon
Tidak) ( Ya ) (Tidak) ( Ya
dekarboksilase
Ciirobacter Enterobacter
G a mba r 7.1 Skema uji sifat biokimia untuk identifikasi genus golongan bakteri enterik
untuk Identifikasi Bakteri Enterik

S pe sie s G lukosa La ktosa S ukrosa Manitol S a lisin Inositol
Escherichia coli AG AG AG/- AG AG/- -
Enterobacter AG AG AG AG AG AG
aerogenes
Salmonella typhi AG - - A - N-
Salmonella AG - - AG - -
paratyphi A
Salmonella AG - - AG - AG
paratyphi B
Salmonella AG - - AG - -
choleraesuis
Shigella A - - - - -
dysenteriae
Shigella flexneh A - - A - -
Shigella boydii A - - A - -
Shigella sonnei A A. RL A. RL A - -
Keterangan: A = menghasilkan asam

G = menghasilkan gas
RL = reaksi berlangsung lambat
Beberapa teknik yang sudah dikembangkan antara lain teknik sidik jari DNA; re-
aksi rantai polimerase (PCR); pengurutan RNA ribosomal; dan teknik hibridisasi
asam nukleat.
Sidik jari DNA (DNA fingerprinting)
Identifikasi dengan pengurutan DNA genom utuh mikroorganisme sebetulnya sudah
dapat dilakukan saat ini. Akan tetapi, untuk tujuan identifikasi rutin di laboratorium
mikrobiologi, cara ini tidak efisien dan memerlukan waktu yang lama. Namun demi-
kian, kita dapat membandingkan perbedaan potongan DNAjenis mikroorganisme ter-
tentu dengan bantuan enzim endonuklease restriksi. Enzim endonuklease restriksi
dapat memotong molekul DNA spesifik yang terdapat pada DNA genom mikroor-
ganisme sehingga menghasilkan ft-agmen potongan DNA yang spesifik untuk setiap
jenis mikroorganisme. Sebagai contoh, bakteri yang akan diidentifikasi adalah Salmo-
nella typhi. Langkah pertama yang dilakukan adalah mengisolasi DNA genom dari
dua tabung biakan Salmonella typhi, yaitu galur Salmonella typhi standar dan galur
Salmonella yang akan diidentifikasi. DNA yang didapat kemudian dipotong dengan
salah satu enzim endonuklease restriksi yang sama, misalnya EcoRI. Setelah itu, frag-
men DNAhasil pemotongan dengan EcoRI dielektroforesis pada gel agarosa. Dengan
membandingkan profil fragmen DNA yang terdapat pada gel agarosa, kita dapat
menyimpulkan apakah kedua bakteri tersebut memiliki persamaan atau perbedaan
genetik, yaitu melalui profil sidikjari DNAkedua bakteri yang diuji.
Reaksi rantai polimerase (polymerase chaIn reaction, PCR) ^

Metode reaksi rantai polimerase (polymerase chain reaction, PCR) merupakan metode
deteksi cepat dan sensitif yang telah dikembangkan untuk mendeteksi berbagai jenis
bakteri. Metode ini merupakan salah satu metode yang paling sering digunakan untuk
mendeteksi beberapa spesies bakteri patogen. Metode PCR ini dapat mengamplifikasi
gen penanda spesifik pada spesies bakteri tertentu yang dapat digunakan sebagai
penentu diagnosis. Fragmen DNAyangberasal dari gen penanda spesifik diamplifikasi
dengan teknik PCRsehingga menghasilkan kadar DNA bakteri yang tinggi. Dengan
demikian, dapat dideteksi dengan teknik elektroforesis gel agarosa. Adanya pita DNA
yang mempunyai ukuran sesuai dengan ukuran gen spesifik yang diamplifikasi me-
nunjukkan keberadaan mikroorganisme dalam bahan yang diuji. Pada saat ini, telah
tersedia primer spesifik untuk setiap spesies mikroorganisme.
Primer spesifik adalah oligonukleotida imtai pendek (berukuran 20-30 pasang
basa), yang komplementer dengan sekuen DNA spesifik yang terdapat pada genom
suatu mikroorganisme. Primer spesifik dapat mengamplifikasi sekuen DNA spesifik
yang terdapat dalam genom suatu mikroorganisme dengan teknik PCR. Oleh karena
itu, metode ini dapat digunakan untuk mengidentifikasi spesies mikroorganisme ter-
sebut.
Pengurutan RNA ribosomal (ribosomal RNA seguencing)
Teknik pengurutan RNA ribosomal [ribosomal RNA (rRNA) seguencing] digunakan
untuk menentukan diversitas dan hubungan filogenik mikroorganisme. Teknik ini
memiliki beberapa keuntungan antara lain: (1) Semua sel mempunyai ribosom; dengan
demikian, jenis bakteri yang berkerabat dekat akan mempunyai sedikit perbedaan
basa rRNA daripada bakteri yang berkerabat lebihjauh. (2) Gen rRNAjarang bermu-
tasi danrRNAyangpaling sering digunakan merupakan sub-unit terkecil dari ribosom.
DNA bakteri yang berasal dari tanah atau air dapat langsung diamplifikasi dengan
teknik PCRmenggunakanprimer rRNA. Gen rRNAhasil amplifikasi ini dapat diurut-
kan untuk menentukan kekerabatan, genus, dan spesies bakteri tersebut.
Teknik hibridisasi asam nukleat (DNA-DNA hybridizatlon)
Teknik hibridisasi DNAdidasarkan pada prinsip bahwa ikatan hidrogen di antara
basa-basa DNAakan terputus apabila molekul DNAuntai ganda dipanaskan sehingga
DNA untai ganda tersebut akan terpisah menjadi dua DNAuntai tunggal. Apabila
kedua DNAuntai tunggal tersebut didinginkan perlahan-lahan, kedua untai DNA ter-
sebut akan bersatu kembali menjadi DNAuntai ganda sesuai dengan kaidah komple-
mentaritas, yaitu basa A(adenin) akan bergabung dengan basa T(timin) danbasa C
(sitosin) akan bergabung dengan basa G(guanin) melalui ikatan hidrogen. Jika teknik
ini digunakan pada masing-masing DNA untai tunggal dari bakteri yang sama atau
bakteri yang berbeda, persamaan dan perbedaan urutan basa DNAdi antara kedua
bakteri tersebut akan dapat ditentukan. Bila urutan DNAsama, DNAuntai ganda
komplementaritas yang sama akan terbentuk. Sebaliknya, bila jenis bakteri berbeda,
/
DNA untai ganda tidak akan terbentuk karena komplementaritas dari basa-basa DNA
tersebut berbeda. Teknik ini dikenal dengan hibridisasi asam nukleat.
Teknik identifikasi dengan menggunakan DNA probe telah dikembangkan untuk
tujuan identifikasi secara cepat. DNA probe adalah suatu fragmen DNA pilihan yang
unik dan spesifik yang berasal dari genom bakteri. Setiap jenis bakteri mempunyai
fragmen DNAyang dipilih untuk dijadikan sebagai DNAprobe. Sebagai contoh, DNA
probe untuk Salmonella harus dapat berhibridisasi dengan DNA semua galur Salmo-
nella, tetapi tidak dengan DNA spesies yang berkerabat dekat dengan bakteri enterik
ini. Hibridisasi antara DNA probe dan DNA genom bakteri dapat dideteksi dengan
melabel DNA probe dengan zat radioaktif atau dengan fluoresensi.
BAB 8
PATOGENESIS INFEKSI
BAKTERI
• Infeksi Bakteri
• Habitat Mikroorganisme
• Patogenisitas, Virulensi, dan Infeksi
• Perjalanan Penyakit Infeksi
• Penularan Penyakit Infeksi
106
Bab 8 - Patogenesis Infeksi Bakteri ]07%
INFEKSI BAKTERI
Penyakit infeksi masih merupakan jenis penyakit yang paling banyak diderita oleh
penduduk di negara berkembang, termasuk hidonesia. Salah satu penyebab penyakit
infeksi adalah bakteri. Bakteri merupakan mikroorganisme yang tidak dapat dilihat
dengan mata telanjang, tetapi hanya dapat dilihat dengan bantuan mikroskop.
Setelah penemuan mikroskop oleh Anthony Van Leeuwenhoek, pengetahuan ten-
tang dunia mikroorganisme berkembang dengan sangat pesat. Penemuan berbagai je-
nis penyakit yang disebabkan oleh mikroorganisme, terutama bakteri, telah menambah
pesatnya perkembangan ilmu kefarmasian. Selain itu, berbagai bentuk interaksi kehi-
dupan dapat dipelajari secara mikroskopis untuk memahami dan menangani berbagai
jenis penyakit infeksi yang disebabkan oleh bakteri.
Pengetahuan tentang seluk-beluk bakteri sangat diperlukan dalam penemuan dan
pengembangan pengobatan penyakit infeksi bakteri. Oleh karena itu, babini akan
membahas hubungan antara bakteri dan hospes serta lingkungannya. Selain itu, akan
dibahas patogenesis infeksi bakteri.
HABITAT MIKROORGANISME
Habitat adalah lokasi atau tempat tinggal spesifik suatu organisme, sedangkan niche
adalah peranan atau fungsi spesifik organisme itu dalam komunitas. Suatu habitat
terdiri atas beberapa faktor, meliputi suhu, tekanan hidrostatik, tekanan osmotik, pH,
cahaya, substansi anorganik (seperti air, CO^, O,, dan mineral), dan substansi organik.
Mikroorganisme yang terdapat di suatu lokasi dapat bersifat transient (tinggal semen-
tara) atau bersifat indigenons (menetap dalam beberapa generasi dan umumnya dapat
bertahan pada kondisi lingkungannya).
Habitat alam mikroorganisme
Tanah
Bakteri patogen yang terdapat di tanah antara lain Clostridium tetani, Clostridium
perfringens, Clostridium botulinum, dan Bacilius anthracis.
Air
Bakteri yang terdapat di dalam air antara lain Salmonella, Shigella, Vibrio cholerae,
Legionella, dan Escherichia coli. Bakteri Escherichia coli biasanya digunakan sebagai
indikator pencemaran air oleh tinja.
Udara
Udara terbuka jarang mengandung bakteri patogen. Hal ini kemungkinan karena ada
efek pengeringan, ozonisasi, dan radiasi sinar ultraviolet. Udara di dalam ruangan ke-
mungkinan mengandung bakteri dan mikroba patogen yang berasal dari kulit, tangan,
pakaian, dan saluran napas atas manusia.
Makanan
Beberapa mikroorganisme patogen dapat ditemukan di dalammakanan dan minuman,
terutama dalam susu, antara lain Mycobacterium tuberculosis, Salmonella, Strepto-
coccus, Corynebacterium diphtheriae, Shigella, Brucella, dan Staphylococcus) bak-
teri-bakteri inilah yang sering kali menjadi penyebab keracunan makanan.
Flora normal
Flora normal adalah mikroorganisme yang hidup di dalamtubuh manusia yang dalam
keadaan tertentu tidak menyebabkan penyakit pada manusia.
Flora normal mulut dan saluran napas
Berbagai mikroorganisme terdapat di mulut dan saluran napas. Mikroorganisme yang
sering ditemukan dalam mulut adalah spesies Staphylococcus, sedangkan mikroor-
ganisme yang paling dominan di dalam saluran napas adalaji spesies Streptococcus,
Flora normal saluran cerna
Mikroorganisme dalam saluran cerna terdapat di usus besar. Akan tetapi, mikroorga-
nisme kadang-kadangjuga ditemukan di ileumdistal individu normal. Mikroorganisme
yang terdapat di usus besar antara lain Bacteroides, Bifidobacterium, Eubacterium,
Lactobacillus, coliform, Streptococcus, dan Clostridium. Flora normal saluran cerna
berperan penting dalam sintesis vitamin K, konversi pigmen empedu dan asam em-
pedu, absorpsi zat makanan, dan merupakan mikroorganisme antagonis bagi mikroor-
ganisme patogen.
Flora normal saluran genital dan saluran urine
Beberapa mikroorganisme dapat ditemukan di saluran genitalis ekstema, saluran ure-
tra anterior, dan vagina. Mikroorganisme yang sering dijumpai pada uretra adalah
Mycobacterium smegmatis. Flora normal pada vulva wanita sangat dipengaruhi oleh
kondisi normal tubuh.
Flora normal kulit, hidung, dan telinga
Bakteri yang sering ditemukan di kulit adalah Staphylococcus epidermidis, Micro-
coccus, Streptococcus hemolyticus alpha, Streptococcus non-hemolyticus, dan Sar-
cina: Staphylococcus aureus dapat menetap di hidung, sedangkan flora yang terdapat
di liang telinga antara lain Streptococcus pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa, dan
Staphylococcus aureus.
Bakteri di dalam darah dan jaringan
Dalamkeadaan normal, darah danjaringan bebas mikroorganisme. Akan tetapi, dalam
keadaan tertentu, seperti mengunyah atau sikat gigi, flora komensal dapat masuk ke
dalam darah atau jaringan. Dalam keadaan noimal, mikroorganisme tersebut segera
dapat dimusnahkan oleh sistemkekebalan tubuh.
Bab 8 - Patogenesis Infeksi Bakteri 109
Hubungan hospes-mikroorganisme
Hospes atau tuan rumah dapat didefinisikan sebagai tempat hidup parasit atau mikro-
organisme. Menurut sifatnya, hospes terdiri atas beberapa jenis.
• Hospes definitif, yaitu tempat mikroorganisme hidup, tumbuh, dan berkembang
biak secara seksual.
• Hospes perantara, yaitu tempat mikroorganisme tumbuh menjadi bentuk infektif
yang siap ditularkan kepada manusia.
• Hospes reservoir, yaitu hewan yang mengandung mikroorganisme dan merupakan
sumber infeksi bagi manusia.
• Hospes paratenik, yaitu hewan yang mengandung mikroorganisme tertentu pada
stadium infektif tanpa menjadi dewasa. Stadium infektif ini dapat ditularkan dan
menjadi dewasa pada hospes definitif.
Wujud hubungan hospes-mikroorganisme ditentukan oleh keseimbangan antara viru-
lensi mikroorganisme dandaya tahan hospes. Virulensi mikroorganisme merupakan
tingkat patogenisitas yang dinyatakan denganjumlah mikroorganisme atau mikrogram
toksin yang dibutuhkan untuk membunuh binatang percobaan dengan syarat-syarat
tertentu.
PATOGENISITAS, VIRULENSI, DAN INFEKSI
Patogenisitas merupakan kemampuan suatu organisme untuk menyebabkan penyakit.
Proses infeksi terjadi ketika mikroorganisme menyerang hospes, yang berarti mikro-
organisme masuk ke dalam jaringan tubuh dan berkembang biak. Respons hospes
terhadap infeksi dapat berupa terganggunya fungsi tubuh, yang disebut dengan pe-
nyakit infeksi. Kemampuan suatu mikroorganisme patogen menimbulkan penyakit
infeksi tidak hanya dipengaruhi oleh sifat-sifat mikroorganisme, tetapi juga oleh ke-
mampuan hospes menahan infeksi. Kemampuan mikroorganisme untuk meningkatkan
patogenisitas sangat bergantung pada faktor virulensi mikroorganisme itu. Faktor vi-
rulensi mikroorganisme adalah daya invasi dan toksigenisitas.
Daya invasi
Daya invasi adalah kemampuan mikroorganisme untuk berpenetrasi ke dalamjaringan
hospes, mengatasi pertahanan tubuh hospes, berkembang biak, danmenyebar ke da-
lam seluruh tubuh hospes. Daya invasi dipengaruhi oleh komponen permukaan dan
enzim-enzim mikroorganisme yang dapat membantu penyebaran kuman dan mem-
buat kuman resisten terhadap fagositosis. Contoh komponen permukaan antara lain
selubung polisakarida yang dihasilkan oleh Streptococcm pneumoniae dan selubung
polipeptida pada Bacilius anthracis.
Toksigenisitas •
Bakteri menghasijkan dua jenis toksin, yaitu endotoksin daneksotoksin. Perbedaan
kedua jenis toksin tersebut dapat dilihat pada Tabel 8.1. Jenis-jenis toksin yang diha-
silkan oleh bakteri dapat dilihat pada Tabel 8.2.
{110 Buku Ajar Mikrobiologi: Panduan Mahasiswa Farmasi dan Kedokteran
pTabel 8.1. Perbedaan Eksotoksin dan Endotoksin Mikroorganisme

P e mbe da E ksotoksin E ndotoksin
Struktur kimia Polipeptida Kompleks polipeptida

Sifat fisik Tidak stabil pada pemanasan Stabil pada pemasanan
Tempat produksi Dikeluarkan oleh kuman hidup Merupakan komponen dinding sel
dengan kadar yang tinggi dalam kuman Gram-negatif
media cair
, Sifat imunologis Bersifat antigenik; menghasilkan Tidak memicu pembentukan
toksin dalam jumlah banyak; dan toksin; tidak dapat dibuat toksoid
dapat dibuat toksoid
Toksisitas Sangat toksik; dapat menimbulkan Kurang toksik; dapat menimbulkan
kematian walaupun dalam dosis kematian bila terdapat dalam
kecil jumlah besar
Reaksi tubuh Tubuh tidak memberikan reaksi Menimbulkan reaksi demam

panas/demam
Beberapa bakteri Gram-positif yang menghasilkan eksotoksin antara lain Corynebac-

terium diphtheriae, Clostridium tetani, Clostridium botulinum, dan Staphylococcus.
Bakteri Gram-negatif yang menghasilkan eksotoksin adalah Shigella dysenteriae.
Vibrio cholerae, Escherichia coli, dan Pseudomonas aeruginosa.
Mikroorganisme patogen harus melalui beberapa tahap berikut sebelum menim-
bulkan infeksi.
• Harus dapat masuk ke dalam tubuh hospes
• Harus dapat berkembang biak di dalamjaringan hospes
• Harus mampu mengalahkan pertahanan tubuh hospes
• Harus dapat merusak jaringan hospes
PERJALANAN PENYAKIT INFEKSI

Suatu penyakit sulit didefinisikan dengan tepat. Secara sederhana, keadaan sakit dapat
dinyatakan sebagai kondisi berikut.
• Penyimpangan dari keadaan normal, baik struktur maupun fungsi.
• Keadaan ketika tubuh atau bagian tubuh tertentu tidak dapat berfungsi sebagaimana
mestinya.
Faktor yang berperan pada kejadian penyakit
Ada beberapa faktor yang berperan pada setiap kejadian penyakit, yaitu sebagai be-
rikut.
1. Penyebab atau keberadaan hama penyakit.
2. Manusia sebagai hospes.
3. Lingkungan yang memengaruhi.
Bab 8 - Patogenesis Infeksi Bakteri 111
.Tabel 8.2. Beberapa Jenis Toksin yang Diproduksi oleh Bakteri

Bakteri Penyakit T oksin
Bacilius anthracis Antraks Toksin edema; toksin letal
Clostridium botulinum Botulisme Toksin botulisme
Clostridium difficile Pseudomembranous colitis Enterotoksin
Clostridium perfringens Gangren, o-toksin, enterotoksin,

keracunan makanan Hialuronidase
Clostridium tetani Tetanus Tetanospasmin
Corynebacterium diphtheriae Difteri Toksin difteri
Escherichia coli Diare, Toksin yang tahan panas,

kolitis berdarah {Hemorrhagic toksin yang tidak tahan
colitis) panas, verotoksin
Pseudomonas aeruginosa Infeksi oportunistik. infeksi Eksotoksin A

nosokomial
Staphylococcus aureus Infeksi oportunistik, o-y-toksin, toksin renjat
keracunan makanan, renjat toksik, leukosidin,
toksik, infeksi pada kulit, enterotoksin, eksfoliatin
sindrom kulit melepuh
{scalded skin syndrome)
Shigella dysenteriae Disentri basiler Toksin Shiga
Vibrio cholerae Kolera Koleragen
Streptococcus pyogenes Scarlet fever, renjat toksik Toksin eritrogenik,

toksin pirogenik
Penyakit dapat muncul setelah terjadi interaksi antara manusia sebagai hospes dan
mikroorganisme patogen. Gambaran tentang interaksi antara manusia, hama penyakit,
dan lingkungan sehingga terjadi penyakit dijelaskan dalam "model Gordon". John
Gordon menggambarkan adanya titik temu antara hospes, hama penyakit, dan ling-
kungan.
Faktor penentu interaksi
Interaksi antara ketiga faktor tersebut dipengaruhi oleh unsur-unsur penentu berikut.
Hama Penyakit
• Jumlah atau konsentrasi hama penyakit yang masuk ke dalam hospes.

• Patogenisitas, toksisitas, dan reaktivitas hama penyakit.
Manusia sebagai hospes
• Tingkat kepekaan hospes.

• Imunitas hospes terhadap hama penyakit.
• Status gizi, pengetahuan, dan pendidikan hospes.
Lingkungan
• Kualitas dan sanitasi lingkungan, seperti udara, tanah, air, dan makanan.
• Perilaku dan kesehatan seseorang.
Model Gordon menyatakan bahwa apabila terjadi keseimbangan antara ketiga faktor
tersebut, masyarakat berada dalamkeadaan sehat, atau sebaliknya. Dengan demikian,
dalam gambaran yang sederhana, hubungan antara ketiga faktor tersebut adalah
sebagai berikut.
1. Orang berada dalam keadaan sehat apabila ketiga faktor tersebut dalam keadaan
seimbang.
2. Orang menderita sakit apabila daya tahannya menurun.
3. Orang akan menderita sakit apabila kemampuan hama penyakit meningkat.
4. Orang akan menderita sakit karena perubahan lingkungan yang merugikan ma-
nusia. ,
Serangan penyakit akan menimbulkan sejumlah gejala pada tubuh hospes. Dengan
mengikuti proses timbul dan naik-turunnya gejala tersebut, kita dapat memperoleh
gambaran riwayat perjalanan penyakit.
Riwayat perjalanan penyakit infeksi
Riwayat perjalanan penyakit infeksi terdiri atas empat tahap, yaitu sebagai berikut.
Tahap infeksi
Tahap infeksi adalah tahap ketika mikroorganisme masuk ke dalam tubuh, tetapi be-
lumtampak gejala apa pun. Tahap inkubasi beberapa jenis penyakit infeksi berbeda.
Contohnya, penyakit kolera mempunyai masa inkubasi beberapa jam sampai 5 hari.
Tahap penyakit dini
Tahap penyakit dini adalah tahap ketika gejala penyakit sudah mulai tampak. Pada
keadaan ini, hospes sudah dalamkeadaan sakit, tetapi masih dapat melakukan aktivitas
sehari-hari; apabila berobat, cukup dengan berobat jalan.
Tahap penyakit lanjut
Tahap penyakit lanjut adalah tahap ketika penyakit bertambah berat sehingga hospes
sudah tidak dapat beraktivitas secara normal; jika berobat, pasien sudah memerlukan
perawatan.
Tahap akhir penyakit
Tahap akhir penyakit adalah tahap ketika perjalanan penyakit sudah mencapai salah
satu keadaan berikut.
• Sembuh sempurna, artinya fungsi tubuh hospes kembali kekeadaan semula.
• Sembuh dengan cacat, artinya penyakit telah sembuh, tetapi hospes mengalami
; cacat. Cacat ini dapat berupa cacat fisik, cacat fungsional, cacat mental, atau cacat
sosial. J
- Bab 8 - Patogenesis Infeksi Bakteri 1131
• Carrier, artinya liospes telah sembuh, tetapi di dalam tubuh hospes tetap mengan-
dung hama penyakit yang sewaktu-waktu dapat menimbulkan sakit kembali dan/
atau dapat menulari orang lain yang ada di sekitar hospes.
• Kronis, artinya penyakit tampaknya sudah sembuh, tetapi sebetulnya hospes be-
lum sembuh sempurna. Gejala penyakit tidak bertambah ringan atau berat dan
menahun.
• Meninggal dunia, artinya hospes tidak mampu bertahan dari penyakit infeksi yang
diderita sehingga terjadi komplikasi dan kematian.
P E N U L A R A N PENYAKIT INFEKSI
Penyakit menular adalah penyakit yang secara alamiah dapat berpindah dari satu
orang kepada orang lain. Penularan terjadi akibat berpindahnya hama penyakit dari
penderita ke calon penderita, baik secara langsung maupun secara tidak langsung.
Beberapa penyakit juga dapat menular dari hewan kepada manusia, seperti antraks
dari ternak dan pes dari tikus. Penyakit yang dapat menular dari binatang ke manusia
disebut dengan zoonosis.
Secara garis besar, penyakit infeksi dapat dibagi menjadi dua golongan.
1. Penyakit infeksi yang menular.
2. Penyakit infeksi yang tidak menular.
Penularan suatu penyakit tidak terjadi begitu saja, tetapi membutuhkan kehadiran
unsur-unsur tertentu, yang biasanya disebut dengan rantai penularan penyakit. Rantai
penularan penyakit merupakan serangkaian faktor yang memungkinkan proses penu-
laran suatu penyakit berlangsung.
Mata rantai penularan penyakit
Faktor-faktor yang menjadi mata rantai penularan penyakit adalah sumber penularan,
hama penyakit, serta pintu keluar dan pintu masuk infeksi.
Sumber penularan
Sumber penularan penyakit infeksi adalah tempat hama penyakit hidup dan berkem-
bang biak secara alamiah. Penyakit menular ke seseorang dari sumber ini.
Penyakit dapat ditularkan melalui sumber-sumber penularan berikut.
• Manusia yang menderita penyakit infeksi, baik penderita dengan gejala yang jelas
(klinis) atau dengan gejala yang tidak jelas (subklinis) maupun carrier (yaitu
orang yang tidak sakit, tetapi tubuhnya mengandung dan mengeluarkan hama
penyakit).
• Hewan yang dapat menjadi sumber penularan. Beberapa jenis hewan, seperti sapi,
kambing, anjing, tikus, babi, dan unggas, dapat menjadi sumber penularan penyakit
infeksi.
• Sumber penularan lain, seperti tanah, air, danudara, yang mengandung hama
penyakit yang dapat^menyebabkan infeksi.
114 Bubu Ajar Mibrobiologi: Panduan Mahasiswa Farmasi dan Kedokteran
i
Hama penyakit
Hama penyakit merupakan mikroorganisme yang dapat menyebabkan penyakit infeksi
pada hospes. Hama penyakit terdiri atas protozoa, bakteri, jamur, virus, dan parasit
lain. Hama penyakit dapat hidup di dalamtubuh hospes sehingga dapat menimbulkan
kerusakan dan kelainan pada sel-sel jaringan tubuh hospes, baik secara langsung
maupun melalui toksin yang dihasilkannya.
Selain yang bersifat patogen sejati (obligat), ada hama penyakit yang bersifat
patogen fakultatif, seperti Clostridium tetani dan Staphylococcus aureus. Clostridium
tetani yang sporanya banyak terdapat di tanah, debu, dan benda-benda yang kotor dan
juga Staphylococcus aureus yang sporanya banyak terdapat di udara hanya akan
menimbulkan penyakit apabila secara kebetulan masuk ke dalam tubuh melalui luka
pada kulit.
Pintu keluar dan pintu masuk Infeksi
Pintu keluar adalah jalan yang dilalui oleh hama penyakit ketika keluar dari dalam
tubuh hospes. Sebaliknya, pintu masuk adalah bagian tubuh hospes yang dilalui oleh
hama penyakit ketika masuk ke dalamtubuh penderita. Pintu keluar dan pintu masuk
infeksi terdiri atas:
• Saluran napas
Mikroorganisme dapat keluar dan masuk melalui hidung dan mulut ketika kita
% bersin, bernapas, berbicara, batuk, dan mendahak. Ini terjadi pada penularan pe-
[ nyakit tuberkulosis, influenza, dan difteri. |
Saluran cerna |
I Mikroorganisme dapat keluar melalui mulut pada saat penderita muntah atau'
I, melalui anus pada waktu buang air besar. Sebagai contoh, mikroorganisme pe-
nyakit kolera, disentri, tifus, dan diare.
• Alat kelamin dan saluran kencing
Beberapa mikroorganisme dapat keluar masuk dan ditularkan melalui alat kelamin
dan saluran kencing.
• Luka pada kulit
Mikroorganisme dapat masuk melalui luka pada kulit, baik melalui gigitan bina-
tang, serangga, nyamuk, ataupun luka yang disengaja (seperti melalui jarum suntik
atau melalui alat tato pada kulit).
Cara penularan
Pada umumnya, penyakit infeksi menular melalui udara, makanan, air, dan serangga
atau terjadi di rumah sakit.
Melalui udara
Salah satu ciri khas penyakit yang ditularkan melalui udara adalah kecenderungan
penyakit itu untuk berjangkit secara epidemik, muncul secara eksplosif, dan menye-
rang penderita dalamwaktu singkat. •
Jika seorang penderita infeksi batuk, muntah, atau bersin, terembuslah percikan
titik air yang mengandung mikroorganisme yang dapat menyebabkan penyakit. Titik
air yang halus dan membawa bibit penyakit ini dapat menguap. Beberapa mikro-
organisme yang dapat menyebabkan infeksi saluran napas tidak dapat bertahan lama
di luar tubuh. Akan tetapi, ada juga beberapa mikroorganisme yang dapat bertahan
sampai beberapa hari dan masih dapat menyebabkan infeksi.
Penyakit infeksi yang ditularkan melalui udara dapat dikendalikan dengan bebe-
rapa cara berikut.
• Mengurangi kontak antara penderita dan orang-orang yang ada di sekitar pende-
rita.
• Mempertinggi daya tahan tubuh terhadap penyakit infeksi.
• Membuat ventilasi udara yang memadai pada bangunan rumah, kantor, sekolah,
rumah sakit, dan angkutan umum.
Melalui makanan
Penyakit infeksi dapat ditularkan melalui makanan dengan beberapa cara.
• Mikroorganisme yang ada dalam makanan menginfeksi hospes sehingga menye-
babkan penyakit.
• Mikroorganisme melepaskan eksotoksin kedalammakanan sehingga menyebabkan
keracunan makanan.
Mikroorganisme yang menyebabkan infeksi usus dapat ditularkan melalui makanan,
tetapi infeksi tidak selalu terjadi jika jumlah mikroorganisme sedikit atau hospes
mempunyai daya tahan tubuh yang baik terhadap mikroorganisme tersebut.
Beberapa faktor yang memungkinkan seseorang tertular penyakit infeksi melalui
makanan antara lain sebagai berikut.
• Tidak memasak makanan dengan baik.
• Menyimpan makanan pada suhu yang tidak sesuai.
• Makanan diperoleh dari sumber yang kurang bersih.
• Keadaan sanitasi yang buruk.
• Proses pengolahan makanan dan minuman menggunakan peralatan yang tidak
memenuhi persyaratan kesehatan.
• Pengawetan makanan yang kurang sempurna.
Melalui air
Penyakit infeksi dapat juga ditularkan melalui air minumyang tercemar. Cara pengen-
daliannya adalah sebagai berikut.
• Pengendalian kesehatan masyarakat melalui penyuluhan tentang mengonsumsi air
yang bersih dan sehat.
• Pengendalian pembuangan limbah yang memenuhi syarat kebersihan.
• Pengawasan terhadap minuman olahan dan susu.
• Pengawasan terhadap sanitasi dan kesehatan karyawan yang bekerja di industri
minuman atau air minum.
|116 Buku Ajar Mikrobiologi: Panduan Mahasiswa Farmasi dan Kedokteran
Melalui serangga
Jenis-jenis serangga tertentu merupakan vektor yang sangat penting dalam mata rantai
penularan penyakit infeksi. Oleh karena itu, dalam penanggulangan infeksi yang di-
perantarai oleh serangga, pemutusan mata rantai penularan melalui pemberantasan
vektor serangga sangat penting dilakukan.
Terjadi di rumah sakit (infeksi nosokomial)
Penularan infeksi dapat terjadi di rumah sakit. Sumber infeksi rumah sakit dapat ber-
sifat endogen atau autogen (sumber infeksi berasal dari penderita sendiri yang dibawa
dari luar rumah sakit) atau eksogen (sumber infeksi berasal dari luar penderita). Infeksi
nosokomial dapat terjadi pada penderita, tenaga kesehatan, dan setiap orang yang
datang ke rumah sakit.
Infeksi di rumah sakit disebabkan oleh beberapa hal berikut ini.
• Adanya mikroorganisme, seperti bakteri, jamur, virus, dan parasit lain, di ling-
kungan rumah sakit.
• Adanya reservoir mikroorganisme, seperti manusia, hewan, dan serangga, di ling-
kungan rumah sakit.
• Kondisi lingkungan rumah sakit yang kurang baik, seperti kelembapan udara,
suhu, dan tekanan udara.
• Terjadi penularan infeksi melalui kontak langsung dengan penderita atau melalui
alat-alat medis, udara, dan vektor.
BAB 9
BAKTERI PATOGEN
PADA MANUSIA
• Babteri Patogen
• Kelompok Babteri Patogen
117
BAKTERI PATOGEN
Bab ini menguraikan tentang kelompok bakteri yang bersifat patogen. Bakteri patogen
adalah bakteri yang dapat menyebabkan penyakit infeksi pada manusia. Fakta bahwa
bakteri dapat menyebabkan infeksi pada manusia telah diketahui sejak lama. Bebe-
rapa bakteri bahkan d^pat menyebabkan banyak kematian. Sampai saat ini, beberapa
penyakit infeksi yang disebabkan oleh bakteri, seperti tuberkulosis, demam tifoid,
difteri, kolera, disentri, danpneumonia, masih merupakan masalah utama dalam
bidang kesehatan di beberapa negara, termasuk Indonesia.
Walaupun penyakit infeksi yang disebabkan oleh bakteri telah lama diketahui,
beberapa spesies bakteri patogen baru diidentifikasi 30 tahun terakhir ini. Selain itu,
banyak sekali jenis bakteri patogen yang telah lama dikenal kini bermutasi menjadi
bakteri yang kebal terhadap berbagai jenis antibiotik. Sebagai contoh, Staphylococcus
aureus dan Mycobacterium tuberculosis telah menjelma menjadi bakteri yang kebal
terhadap berbagai jenis antibiotik sehingga membutuhkan penanganan yang serius
dalam pengendaliannya.
K E L O M P O K BAKTERI PATOGEN
Bakteri-bakteri patogen dikelompokkan berdasarkan kriteria bakteriologisnya, yaitu
pewamaan Gram, metabolisme, morfologi, pembentukan spora, serta kekerabatan
secara filogenik dan genetik. Pada dasarnya, bakteri patogen dibagi dalam kelompok
bakteri Gram-positif dan Gram-negatif, tetapi ada beberapa bakteri yang digolongkan
tersendiri, yaitu mikoplasma, klamidia, spiroketa, dan mikobakterium seperti yang
tercantum pada Tabel 9.1. Target organ tubuh dan penyakit mfeksi yang disebabkan
oleh bakteri patogen dapat diUhat pada Tabel 9.2.
Kelompok bakteri aerob Gram-negatif berbentuk batang
dan bulat
Kelompok bakteri Gram-negatif yang bersifat aerob terdiri atas beberapa bakteri yang
berkerabat dekat dengan genus Pseudomonas. Beberapa bakteri patogen yang penting
dalam kelompok ini antara lain Pseudomonas aeruginosa, Neisseria gonorrhoeae,
Neisseria meningitidis, Bordetella pertussis, Haemophilus influenzae, Legionella
pneumophila, Brucella, dan Franciseila. Banyak bakteri dalam kelompok ini hidup
dalam tanah dan dalam air, tempat bakteri-bakteri ini berperan penting dalamde-
komposisi, biodegradasi, dan siklus penggunaan unsur karbon dan nitrogen.
Pseudomonas aeruginosa merupakan bakteri patogen yang oportunis bagi ma-
nusia, sering menyebabkan infeksi nosokomial, dan sangat sulit diberantas karena
umumnya kebal terhadap berbagai antibiotik. Pseudomonas aeruginosa sering dite.-
mukan dalamseluruhjaringan tubuh orangyangmengalami penurunan atau kehilangan
kekebalan tubuh terhadap bakteri. Bakteri ini dapat menginfeksi jaringan tubuh,
saluran kemih, dan saluran napas.
Bordetella pertussis dapat menyebabkan penyakit yang parah pada bayi dan balita,
berupa batuk rejan dengan tingkat kematian yang cukup tinggi. Demikian pula, Legio-
Bab 9 - Bakteri Patogen pada Manusia 119
Tabel 9.1. Beberapa Jenis Bakteri yang Dapat Menyebabkan Penyakit

pada Manusia
Ba kte ri pa toge n P e nya kit
Bakteri G ra m- ne ga tif
Escherichia coli Gastroenteritis, meningitis neonatus
E. coli 0157:H7 Diare, sindrom uremik hemolitik (HUS)
Salmonella enterica Gastroenteritis
Salmonella typhi Demam tifoid
Shigella dysenteriae Disentri basiler
Yersinia pestis Sampar bubonik (Bubonic plague)
Pseudomonas aeruginosa Infeksi oportunistik, selulitis, pneumonia
Vibrio cholerae Kolera
Bordetella pertussis Batuk rejan (pertusis)
Haemophilus influenzae Meningitis, pneumonia, sinusitis
Helicobacter pylori Ulkus usus dan lambung
Campylobacter jejuni Gastroenteritis
Neisseria gonorrhoeae Gonore
Neisseria meningitidis Meningococcemia dan meningitis
Brucella abortus Demam
Bacteroides fragilis Infeksi anaerob
Ba kte ri G ra m- positif
• Staphylococcus aureus Keracunan makanan, bisul, sindrom renjat toksik
Streptococcus pyogenes (Strep Grup A) Sakit tenggorokan, scarlet fever, mastitis
Streptococcus pneumoniae Pneumonia, otitis media, meningitis
Bacilius anthracis Antraks
Bacilius cereus Keracunan makanan
Clostridium tetani Tetanus
Clostridium perfringens Keracunan makanan, gangren, infeksi uterus
Clostridium botulinum Botulisme
Clostridium difficile Diare, pseudomembranous colitis
Corynebacterium diphtheriae Difteri
Listeria monocytogenes Listeriosis
Ba kte ri golonga n lain
Mycobacterium tuberculosis TB (tuberkulosis)
Mycobacterium leprae Lepra/kusta
Chlamydia trachomatis Klamidia, limfogranuloma venereum, trakoma
Chlamydia pneumoniae Pneumonia
Mycoplasma pneumoniae Pneumonia
Riketsia Riketsiosis
Treponema pallidum Sifilis
Bonrelia burgdorferi Penyakit Lyme
nella pneumophila, yang ditemukan pada tahun 1976, dapat menyebabkan penyakit
pneumonia. Haemophilus influenzae dapat menginfeksi saluran napas dan dapat me-
nyebabkan radang selaput otak. Neisseria gonorrhoeae dapat menyebabkan penyakit
gonore yang dapat ditularkan melalui hubungan seksual, sedangkan Neisseria me-
ningitidis dapat menyebabkan meningitis. Brucella abortus dapat menyebabkan bru-
selosis, yaitu infeksi kronis yang berhubungan dengan kegagalan reproduksi.
.Tabel 9.2. Target Organ Tubuh dan Penyakit Infeksi yang Disebabkan
oleh Bakteri Patogen
Bakteri pa toge n Target orga n P e nya kit
terinfeksi
Streptococcus mutans, S. oralis, Rongga mulut Karies gigi, gingivitis,
S. sang uis, S.gordon ii infeksi periodontal
Helicobacter pylori Saluran cerna Ulkus
Salmonella, Campylobacter, E. coli Saluran cerna Gastroenteritis
Shigella Saluran cerna Diare
Clostridium difficile Saluran cerna Pseudomembranous colitis
Vibrio cholerae Saluran cerna Kolera
Staphylococcus aureus
Bacilius cereus
Clostridium perfringens
Clostridium botulinum Saluran cerna Keracunan makanan
Salmonella
E. coli0157:H7
Campylobacter jejuni
Listeria monocytogenes Saluran cerna Listeriosis

Haemophilus influenzae Saluran napas Sinusitis
Pseudomonas aeruginosa
Streptococcus pyogenes Saluran napas Sakit tenggorokan
Corynebacterium diphtheriae Saluran napas Difteri
Streptococcus pneumoniae
Saluran napas Pneumonia
Haemophilus influenzae
Chlamydia pneumoniae
Mycoplasma pneumoniae
Bordetella pertussis Saluran napas Batuk rejan (pertusis)
Mycobacterium tuberculosis Saluran napas Tuberkulosis paru
Chlamydia trachomatis
Neisseria gononrhoeae
Treponema pallidum Saluran urine
Infeksi kelamin
E. coli dan organ kelamin
Neisseria meningitidis
Haemophilus influenzae Radang selaput otak
Selaput otak
Streptococcus pneumoniae (meningitis)
Escherichia coli
Pseudomonas aeruginosa Telinga Otitis ekstema
Streptococcus pneumoniae Telinga Otitis media

Bab 9 - Bakteri Patogen pdda Manusia 121
Staphylococcus aureus Kulit Jerawat, bisul, folikulitis,

Pseudomonas aeruginosa selulitis
Streptococcus pyogenes
Kelompok bakteri enterik

Bakteri enterik adalah kelompok bakteri yang terdapat di dalam saluran cerna, bersifat
Gram-negatif dan anaerob fakultatif, dan terdiri atas bakteri-bakteri yang termasuk
dalam famili Enterobacteriaceae. Escherichia coli merupakan salah satu spesies bak-
teri enterik. Escherichia coli yang merupakan flora normal usus digunakan sebagai
indikator pencemaran tinja pada air minum, kolam renang, makanan, dan minuman.
Escherichia coli merupakan bakteri yang paling sering digunakan dalam berbagai
percobaan mikrobiologi dan biologi molekuler. Beberapa galur Escherichia coli
bersifat patogen, misalnya galur E. coli 0157:H7 dapat mengontaminasi sayuran,
daging, susu, dan air minum. Escherichia coli juga dapat menimbulkan infeksi pada
saluran intestin dan saluran urine.
Spesies-spesies bakteri enterik yang penting dan bersifat patogen pada manusia
adalah Salmonella dan Shigella. Shigella dysenteriae dapat menyebabkan disentri ba-
siler dan Salmonella enterica dapat menyebabkan gastroenteritis dan keracunan oleh
makanan yang terkontaminasi. Salmonella typhi dapat menyebabkan demam tifoid.
Beberapa jenis bakteri enterik lainnya adalah Proteus, Yersinia pestis, dan Erwinia.
Kelompok bakteri pyogenic cocci

Kelompok bakteri pyogenic cocci terdiri atas bakteri-bakteri yang dapat menyebabkan
berbagai infeksi supuratif (infeksi yang disertai nanah), yang meliputi golongan bak-
teri Gram-positif (misalnya Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, dan
Streptococcus pneumoniae) danbakteri Gxdim-nQgdX\^{m\sa\nyaNeisseriagonorrhoeae
dan N. Meningitidis). Golongan bakteri kokus Gram-positif merupakan bakteri yang
paling sering menginfeksi. Hampir sepertiga kasus penyakit infeksi disebabkan oleh
bakteri kokus Gram-positif, misalnya infeksi tenggorokan, pneumonia, otitis media,
meningitis, keracunan makanan, berbagai infeksi kulit, dan sindrom renjat septik. Dua
spesies Staphylococcus merupakan flora normal pada manusia, yaitu Staphylococcus
epidermidis dan Staphylococcus aureus. Staphylococcus epidermidis terdapat di kulit
dan membran mukosa, sedangkan Staphylococcus aureus dapat hidup normal di bebe-
rapa lokasi dalam tubuh manusia, antara lain kulit, membran hidung, dan saluran
cerna.
Seperti Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, khususnya beta-hemo-
lytic group Astreptococci, dapat menyebabkan infeksi supuratif. S. pyogenes kadang
kala ditemukan sebagai flora normal pada saluran napas bagian atas, tetapi sering
menyebabkan infeksi tenggorokan dantonsilitis. Infeksi akut oleh Streptococcus
sering kali menyebabkan komplikasi yang disebabkan oleh respons imun, yaitu meng-
akibatkan penderita mengalami penyakit demam rematik dan glomeruionefi-itis. Ber-
beda dengan Staphylococcus aureus, Streptococcus tidak resisten terhadap penisilin
«22 Bubu Ajar Mibrobiologi: Panduan Mahasiswa Farmasi dan Kedobteran
dan antibiotik golongan betalaktam lain. Jadi, antibiotik golongan betalaktam masih
menjadi obat pilihan untuk infeksi akut yang disebabkan oleh bakteri Streptococcus,
Kelompok bakteri yang menghasilkan endospora
Kelompok bakteri ini biasanya bersifat Gram-positif, berbentuk batang, dandapa
menghasilkan spora dalamsel (endospora). Dua genus yang penting diperhatikan ada-
lah Bacilius dan Clostridium.
Beberapa bakteri pembentuk spora bersifat patogen karena umumnya menghasil-
kan toksin yang berbahaya bagi tubuh manusia atau hewan. Bacilius anthracis dapat
menyebabkan penyakit antraks pada hewan dan dapat menular pada manusia. Bacilius
cereus, Clostridium perfringens, dan Clostridium botulinum dapat menyebabkan
keracunan makanan. Clostridium tetani dapat menyebabkan tetanus.
Kelompok bakteri Actinomycetes dan kerabatnya
Actinomycetes bukan kelompok bakteri yang patogen, tetapi ada dua genus yang ber-
sifat patogen pada manusia, yaitu Corynebacterium dan Mycobacterium. Mycobac-
terium tuberculosis merupakan bakteri penyebab penyakit tuberkulosis yang telah
menginfeksi lebih dari 1,7 miliar orang per tahun di seluruh dunia dan telah menye-
babkan kematian lebih dari 3 juta orang per tahun. Beberapa galur Mycobacterium
tuberculosis bersifat resisten terhadap beberapa jenis obat antituberkulosis. Spesies
lainnya adalah Mycobacterium leprae, yang dapat menyebabkan penyakit lepra, dan
Corynebacterium diphtheriae, yang dapat menghasilkan toksin yang menyebabkan
penyakit difteri.
Riketsia dan Klamidia
Riketsia dan klamidia tidak mempunyai hubungan kekerabatan, tetapi kedua jenis
bakteri ini merupakan parasit obligat intraseluler pada sel-sel manusia dan hewan.
Riketsia tidak dapat dibiakkan di luar sel hospes karena mempunyai membran yang
tidak sempurna sehingga tidak dapat menggunakan nutrisi dari lingkungannya. Riket-
sia hidup dalamseluran cerna hewan artropoda (serangga) dan dapat ditularkan mela-
lui gigitan serangga tersebut. Riketsia dapat menyebabkan penyakit demam tifus,
Rocky Mountain spottedfever, dan demam Q.
Klamidia tidak mampu memproduksi energi ATP untuk menjalankan metabo-
lismenya sehingga mikroorganisme ini bersifat sebagai parasit energi untuk inangnya.
Klamidia merupakan bakteri sangat kecil yang dapat menginfeksi jaringan mata dan
saluran urogenital. Chlamydia trachomatis dapat menyerang mata dan menyebabkan
kebutaan, sedangkan Chlamydia pneumoniae dapat menyebabkan pneumonia.
Mikoplasma
Mikoplasma merupakan kelompok bakteri yang tidak mempunyai dmding sel. Sel
mikoplasma hanya dibungkus oleh membran sel. Bakteri ini dapat hidup di dalam
tanah, sampah, dan sebagai parasit di dalamrongga mulut dan saluran urine manusia.
^^^^^^^^^^^^^K' Bab 9 - B a b t e r i Patogen padd Manusia 123
Mycoplasma pneumoniae bersifat patogen pada manusia dan dapat menimbulkan

penyakit pneumonia.
Spiroketa
Spiroketa merupakan bakteri yang unik, baik morfologi sel maupun motilitasnya.
Bakteri spiroketa memiliki bentuk yang sangat berbeda dari kelompok bakteri lain-
nya. Spiroketa sangat tipis, lentur, berbentuk seperti spiral, dan mempunyai filamen
aksial atau endoflagel. Sebagian besar bakteri spiroketa hidup bebas dalam lumpur
dan endapan atau hidup dalam rongga mulut dan saluran cerna binatang. Beberapa
Spiroketa bersifat patogen pada binatang dan dapat ditularkan kepada manusia,
misalnya penyakit leptospirosis. Spesies yang patogen pada manusia adalah Trepo-
nema pallidum, yang menyebabkan penyakit sifilis yang ditularkan melalui hubungan
seksual, dan Borrelia burgdorferi, yang menyebabkan penyakit Lyme yang ditularkan
melalui gigitan kutu.
Spirilum
Spirilum merupakan bakteri Gram-negatif yang berbentuk heliks atau spiral. Tidak
seperti spiroketa, bakteri spirilum mempunyai dinding sel yang kaku dan bergerak
dengan flagel yang polar. Dua spesies penting yang bersifat patogen pada manusia
adalah Campylobacter jejuni dan Helicobacter pylori. Campylobacter jejuni dapat
menimbulkan penyakit diare, terutama pada anak-anak dan balita. Bakteri ini ditular-
kan melalui makanan yang terkontaminasi, misalnya daging dan ikan yang tidak
dimasak dengan sempurna, atau melalui air minum. Helicobacter pylori dapat meng-
infeksi sel-sel mukosa usus manusia sehingga menyebabkan tukak usus dan juga
dapat menjadi pemicu penyakit kanker adenokarsinoma.
Vibrio
Vibrio merupakan bakteri Gram-negatif yang memiliki bentuk menyerupai koma atau
melengkung. Beberapa genus vibrio merupakan bakteri yang umumnya terdapat di
perairan, terutama di air laut. Bakteri vibrio bersifat anaerob fakultatif dan mempunyai
flagel yang bersifat polar.
Habitat hidup dan ekologi vibrio hampir sama dengan bakteri genus Pseudomonad,
tetapi Pseudomonad lebih menyukai air tawar, sedangkan genus vibrio menyukai air
laut. Vibrio cholerae merupakan salah satu spesies bakteri vibrio yang dapat menye-
babkan kolera yang bersifat epidemik dengan angka kematian yang tinggi. Toksin
kolera yang dihasilkan oleh Vibrio cholerae dapat menyebabkan diare hebat sehingga
penderita mengalami dehidrasi berat dan kematian.
BAB 1 0
BAKTERI PATOGEN
PADA SALURAN CERNA
• Pendahuluan
• Escherichia coli
m Salmonella typhi
m Shigella dysenteriae
m \/ibrio cholerae
m \/ibrio parahaemolyticus
m \/ibrio uulnificus
m Clostridium perfringens
m Helicobacter pylori
m Bacilius cereus
124
Bab 10 - Bakteri Patogen pada Saluran Cerna 125j
PENDAHULUAN
Bai<teri patogen pada saluran cerna merupakan golongan bakteri yang dapat menye-
babkan penyakit infeksi pada saluran cerna manusia. Jenis bakteri yang paling sering
menyebabkan penyakit infeksi pada saluran cerna adalah bakteri-bakteri famili
Enterobacteriaceae. Bakteri ini dapat hidup dalam usus besar manusia dan hewan,
dalam tanah, dan dalam air. Karena hidup dalam usus besar manusia, bakteri-bakteri
ini sering disebut dengan bakteri enterik.
Sebagian besar bakteri enterik tidak menimbulkan penyakit pada hospes bila
bakteri tetap berada dalam usus besar. Akan tetapi, dalam kondisi tertentu, apabila
terjadi perubahan pada hospes atau apabila bakteri dapat masuk ke dalam bagian
tubuh lain, banyak bakteri enterik dapat menyebabkan penyakit pada jaringan tubuh
manusia.
Beberapa spesies Enterobacteriaceae yang sering menyebabkan infeksi pada sa-
luran cerna manusia adalah Escherichia coli, Salmonella, Shigella, dan Yersinia ente-
rocolitica.
Enterobacteriaceae merupakan bakteri Gram-negatif yang bersifat anaerob fakul-
tatif dan oksidase negatif. Bakteri ini sering ditemukan pada feses dan bagian tubuh
yang terinfeksi. Semua bakteri enterik meragi glukosa menjadi asam dengan atau
tanpa disertai pembentukan gas; mereduksi nitrat menjadi nitrit; ada yang membentuk
indol dan ada yang tidak. Perbedaan jenis karbohidrat yang dapat difermentasi, produk
akhir metabolisme, dansubstrat yang digunakan menjadi dasar pembagian spesies
Enterobacteriaceae. Beberapa serotipe dapat dibedakan berdasarkan struktur antigen
bakteri, yaitu antigen O(lipopolisakarida), antigen H(flagel), dan antigen K(kap-
sul).
Beberapa jenis bakteri lain yang juga dapat menimbulkan kelainan pada saluran
cerna adalah Vibrio, Clostridium, Bacilius, Campylobacter, dan Helicobacter Staphy-
lococcus dapat menyebabkan gangguan pencernaan akibat keracunan makanan yang
ditimbulkan oleh bakteri ini.
Escherichia coli
Morfologi dan fisiologi

Escherichia coli termasuk dalam famili Enterobacteriaceae. Bakteri ini merupakan
bakteri Gram-negatif, berbentuk batang pendek (kokobasil), mempunyai flagel, ber-
ukuran 0,4-0,7 f.mi X 1,4 |im, dan mempunyai simpai. Escherichia CY;//tumbuh dengan
baik di hampir semua media perbenihan, dapat meragi laktosa, dan bersifat mikro-
aerofilik.
Struktur antigen
Escherichia coli mempunyai antigen O, H, dan K. Saat ini, telah ditemukan sekitar
150 tipe antigen O, 90 tipe antigen K, dan 50 tipe antigen H. Berdasarkan sifat-sifat
fisiknya, antigen Kdibedakan lagi menjadi 3 tipe, yaitu L, A, dan B.
Faktor virulensi
1. Antigen Permukaan
Escherichia coli memiliki sedikitnya 2jenis tipe fimbria, yaitu sebagai berikut, j
• Tipe manosa sensitif (pili).
• Tipe manosa resisten {Colonization Factor Antigen, CFAI dan II). ;
Kedua tipe fimbria ini penting sebagai faktor kolonisasi, yaitu untuk pelekatan sel ^
bakteri pada sel hospes. Sebagai contoh, CFAI dan II melekatkan Escherichia coli
enteropatogenik pada sel epitel usus. Enteropatogenik berarti dapat menimbulkan
penyakit pada saluran intestin.
Antigen kapsul Kl sering ditemukan pada Escherichia coli yang diisolasi
dari penderita bakteremia danbayi penderita meningitis. Antigen Kl berperan
menghalangi proses fagositosis sel bakteri oleh leukosit.
2. Enterotoksin
Enterotoksin yang berhasil diisolasi dari Escherichia coli adalah sebagai berikut.
• Toksin LT (termolabil).
• Toksin ST (termostabil).
Produksi kedua jenis toksin tersebut diatur oleh plasmid. Plasmid dapat pindah
dari satu sel bakteri ke sel bakteri yang lain. Bakteri E. coli memiliki dua jenis
plasmid, yaitu plasmid yang menyandi pembentukan toksin LT dan ST dan plas-
mid yang menyandi pembentukan toksin ST saja.
Toksin LTbekerja merangsang enzimadenilat siklase yang terdapat di dalam
sel epitel mukosa usus halus, yang menyebabkan peningkatan permeabilitas sel
epitel usus sehingga terjadi akumulasi cairan di dalam usus dan berakhir dengan
diare. Seperti toksin kolera, toksin LTbersifat sitopatik terhadap sel tumor adrenal
dan sel ovarium serta meningkatkan permeabilitas kapiler pada tes kulit kelinci
{rabbit skin). Kekuatan toksin LT 100kali lebih rendah dibandingkan toksin kolera
dalammenimbulkan diare..
Toksin STtidak merangsang aktivitas enzimadenilat siklase dan tidak reaktif
dalamtes kulit kelmci {rabbit skin). Untuk mendeteksi toksin ST, dipakai suckling
mouse test, yang setelah 4jam inokulasi akan memberikan hasil positif. Toksin ST
adalah asam amino berbobot molekul 1970 dalton dan mempunyai satu atau lebih
ikatan disulfida yang penting untuk mengatur stabilitas suhu dan pH. Toksin ST
bekerja dengan mengaktifkan enzimguanilat siklase menghasilkan guanosin mo-
nofosfat siklik, menyebabkan gangguan absorpsi klorida dan natrium, serta dapat
menurunkan motilitas usus halus.
3. Hemolisin
Pembentukan hemolisin diatur oleh plasmid. HemoUsin merupakan protein yang
bersifat toksik terhadap sel pada biakan jaringan. Peranan hemolisin pada proses
infeksi Escherichia coli belumdiketahui denganjelas. Akan tetapi, galur Escheri-
chia coli hemolitik ternyata lebih patogen daripada galur yang nonhemolitik.
Bab 10-BaMeri Patogen pada Saluran Cernd " 127
Patogenesis dan gejala penyakit

Hampir semua hewan berdarah panas dapat dikolonisasi oleh Escherichia coli hanya
dalambeberapa jam atau beberapa hari setelah dilahirkan. Kolonisasi pada bayi dapat
terjadi oleh bakteri yang adadalam makanan atau air atau dengan kontak langsung
melalui pengasuh bayi. Kolonisasi Escherichia coli dalam saluran cerna manusia
biasanya terjadi setelah 40hari dilahirkan. Escherichia coli dapat melekat pada usus
besar dandapat bertahan selama beberapa bulan bahkan beberapa tahun. Perubahan
populasi bakteri Escherichia co//terjadi dalam periode yang lama; hal ini dapat terjadi
setelah infeksi usus atau setelah penggunaan kemoterapi atau antimikroba yang dapat
membunuh flora normal.
Lebih dari 700 serotipe antigenik Escherichia coli telah dikenal berdasarkan per-
bedaan struktur antigen O(antigen somatik), H(antigen flagel), dan K(antigen kapsul,
selubung). Sebagai contoh, Escherichia coli serotipe 0157:H7 menunjukkan bahwa
serotipe bakteri ini dibedakan berdasarkan jenis antigen 0157 dan antigen H7.
Beberapa galur Escherichia coli menjadi penyebab infeksi pada manusia, seperti
infeksi saluran kemih, infeksi meningitis pada neonatus, daninfeksi intestin (gastro-
enteritis). Ketiga penyakit infeksi tersebut sangat bergantung pada ekspresi faktor
virulensi masing-masing serotipe Escherichia coli, termasuk adanya adhesin, invasin,
jenis toksin yang diproduksi, dan kemampuan mengatasi pertahanan tubuh hospes.
Infeksi Escherichia coli sering kali berupa diare yang disertai darah, kejang perut,
demam, dan terkadang dapat menyebabkan gangguan pada ginjal. Infeksi Escherichia
coli pada beberapa penderita, anak-anak di bawah 5tahun, danorang tuadapat me-
nimbulkan komplikasi yang disebut dengan sindrom uremik hemolitik. Sekitar 2-7%
infeksi Escherichia coli menimbulkan komplikasi.
Sebagian besar penyakit yang disebabkan oleh infeksi Escherichia coli ditularkan
melalui makanan yang tidak dimasak dandaging yang terkontaminasi. Penularan
penyakit dapat terjadi melalui kontak langsung danbiasanya terjadi di tempat yang
memiliki sanitasi dan lingkungan yang kurang bersih.
Berdasarkan sifat virulensi, Escherichia coli dikelompokkan menjadi E. coli yang
menyebabkan infeksi intestin dan E. coli yang menyebabkan infeksi ekstraintestin.
Escherichia coli yang menyebabkan infeksi Intestin
Escherichia coli e nte ropa toge nik (EPEC)

Jenis ini merupakan penyebab utama diare pada bayi. EPEC memiliki fimbria, toksin
yang tahan terhadap panas (ST), dan toksin yang tidak tahan panas (LT), serta meng-
gunakan adhesin, yang dikenal dengan intimin, untuk melekat pada sel mukosa usus.
Infeksi EPEC mengakibatkan diare berair yang biasanya dapat sembuh sendiri, tetapi
ada juga yang menjadi kronis. Lama diare yang disebabkan oleh EPEC dapat diper-
pendek dengan pemberian antibiotik.
Escherichia coli e nte rotoksige nik (ETEC)
ETEC merupakan bakteri penyebab diare pada anak dan wisatawan yang bepergian ke
daerah yang bersanitasi buruk. Oleh karena itu, diare yang disebabkan oleh jenis bak-
128 Bubu Ajar Mii?r6Bibldgi: Panduan Mahasiswa Farmasi dan Kedobteran
teri ini sering dinamakan diare wisatawan. Faktor Icolonisasi ETEC yang spesifil<
untuk manusia adalahfimbrial adhesin. Faktor ini menyebabkan ETEC dapat melekat
pada epitel usus halus sehingga biasanya menyebabkan diare tanpa demam.
Beberapa galur bakteri ini menghasilkan eksotoksin yang tidak tahan panas (LT).
Struktur molekul dan fungsi LTmirip dengan protein toksin kolera (86 kDa). Subunit
Bmelekat pada gangliosida GMl pada bnish border sel epitel usus halus dan memu-
dahkan subunit Amasuk ke dalam sel sehmgga dapat mengaktifkan adenilat siklase.
ETECjuga memproduksi toksin yang tahan terhadap panas (ST). Toksin ini tahan
dalamair mendidih selama 30 menit. Enterotoksin yang stabil terhadap pemanasan ini
merupakan peptida yang memiliki bobot molekul sekitar 4000 dalton. Karena ukuran-
nya yang kecil inilah, toksin ST diperkirakan sulit diinaktifkan oleh pemanasan. Tok-
sin ini dapat menyebabkan konsentrasi guanosin monofosfat siklik dalam sitoplasma
hospes meningkat sehmgga meningkatkan konsentrasi adenosin monofosfat setempat
(cAMP). Hal ini menimbulkan hipersekresi air dan klorida secara terus-menerus dan
lama dandisertai penghambatan resorpsi natrium. Lumen usus teregang oleh cairan
dan mengakibatkan hipermotilitas dan diare.
Untuk menghindari diare wisatawan, sangat dianjurkan untuk berhati-hati dalam
memilih makanan yang kemungkinan terkontaminasi oleh ETEC. Profilaksis dengan
suatu antimikroba dapat efektif, tetapi mungkinjuga menimbulkan peningkatan resis-
tensi bakteri pada antibiotik.
Escherichia coli e nte roinva sif (EIEC)
Mekanisme patogenik EIEC mirip dengan patogenesis infeksi yang disebabkan oleh
Shigella. EIEC masuk danberkembang dalam epitel sel-sel kolon sehingga menye-
babkan kerusakan pada sel kolon. Gejala klinis yang ditimbulkan oleh infeksi EIEC
mirip dengan gejala diare yang disebabkan oleh Shigella. Gejala diare biasanya diser-
tai dengan demam.
Escherichia co/ / e nte rohe mora gik (EHEC)
Jenis bakteri mi menghasilkan suatu toksin yang dikenal dengan verotoksin. Nama
verotoksin sesuai dengan efek sitotoksik toksin ini pada sel vero, yaitu sel ginjal yang
diperolehdari ginjal monyetAfrika {African green monkey). EHECdapat menyebabkan
kolitis berdarah (yakni diare berat yang disertai perdarahan) dansindrom uremik he-
molitik (yakni gagal ginjal akut yang disertai anemia hemolitik mikroangiopatik dan
trombositopenia). Banyak kasus kolitis berdarah dan komplikasinya dapat dicegah
dengan memasak daging sampai matang sebelum dikonsumsi.
Escherichia coli e nte roa gre ga tif ( E AE C )
Bakteri ini menunbulkan diare akut dan kronis dan merupakan penyebab utama diare
pada masyarakat di negara berkembang. EAECmelekat pada sel manusia dengan pola
khas dan menyebabkan diare yang tidak berdarah, tidak menginvasi, dan tidak menye-
babkan infiamasi pada mukosa intestin. EAEC diperkirakan memproduksi EAST
(entero aggregative STtoxin), yang merupakan suatu enterotoksin yang tidak tahan
Bab 10 - Babteri Patogen pada Saluran Cerna 129
panas. Di samping itu, EAEC juga memproduksi hemolisin yang diperkirakan mirip
dengan hemolisin yang diproduksi oleh galur E. coli yang dapat menyebabkan infeksi
saluran kemih. Peranan toksin dan hemolisin dalam virulensi EAEC belum diketahui
dengan jelas. Demikian juga, peranan galur EAEC sebagai penyebab penyakit pada
manusia masih kontroversial.
Escherichia coli yang menyebabkan infeksi ekstraintestin
Escherichia co/ / uropa toge nik (UPEC)

UPEC menyebabkan kira-kira 90% infeksi saluran kandung kemih mulai dari sistitis
sampai pielonefritis. Bakteri yang berkolonisasi berasal dari tinja atau daerah perineum
saluran urine yang masuk ke dalam kandung kemih. Kemungkinan wanita mengalami
infeksi UPEC pada kandung kemih empat belas kali lebih besar daripada pria karena
wanita mempunyai saluran uretra yang lebih pendek. UPEC biasanya menyebabkan
infeksi sistitis tanpa gejala serius pada wanita yang saluran intestinnya telah terinfeksi
UPEC sebelumnya. Bakteri yang terdapat pada daerah periureteral tersebut pada
akhirnya masuk ke dalam kandung kemih ketika melakukan hubungan seksual.
Dengan bantuan adhesin, UPEC dapat berkolonisasi pada kandung kemih penderita.
Protein penting adhesin yang dikaitkan dengan patogenisitas UPEC adalah
P-fimbria atau PAP (pili yang menyebabkan pielonefritis [jjyelonephritis-associated
pili]). P-fimbria dapat berikatan dengan antigen Pyang terdapat pada sel darah merah
yang mengandung residu D-galaktosa-D-galaktosa. Fimbria ini tidak saja dapat ber-
ikatan dengan sel darah merah, tetapi juga dapat berikatan dengan senyawa galaktosa
yang terdapat pada permukaan sel-sel epitel saluran kemih. UPEC biasanya meng-
hasilkan siderofor yang dianggap berperan penting selama proses kolonisasi. Bakteri
ini juga menghasilkan hemolisin yang bersifat sitotoksik terhadap membran sel hos-
pes. Aktivitas hemolisin tidak hanya terbatas pada kemampuan melisis sel darah
merah; tetapi a-hemolisin Escherichia coli dapat melisis limfosit, sedangkan
P-hemolisin dapat menghambat aktivitas fagositosis dan kemotaksis neutrofil.
Escherichia co/ / me ningitis ne ona tus ( N M E C )
NMEC dapat menyebabkan meningitis pada bayi baru lahir. Galur bakteri ini dapat
menginfeksi 1dalam 2000-4000 bayi. Perjalanan infeksi biasanya terjadi setelah
Escherichia coli masuk ke dalam pembuluh darah melalui nasofaring atau saluran
gastrointestinal dan kemudian masuk ke dalam sel-sel otak. Antigen kapsul Kl diang-
gap sebagai faktor virulensi utama yang menyebabkan meningitis pada bayi. Antigen
Kl dapat menghambat fagositosis, reaksi komplemen, danrespons reaksi imunitas
hospes. Selain itu, siderofor dan endotoksin juga berperan penting dalam patogenesis
NMEC.
Pemeriksaan laboratorium
Isolasi dan identifikasi bakteri Escherichia coli dari bahan pemeriksaan klinik meng-
gunakan metode dan media yang sesuai dengan pemeriksaan bakteri enterik lainnya.
Pemeriksaan laboratorium untuk penyakit diare masih sulit dilakukan secara rutin
130 Bubu Ajar Mibrobiologi: Panduan Mahasiswa Farmasi dan Kedobteran
karena pemeriksaan secara tradisional dan serologi sering kali tidak mampu mende-
teksi bakteri penyebab diare tersebut. Deteksi sebagian besar galur Escherichia coli
patogen memerlukan metode khusus untuk mengidentifikasi toksin yang dihasilkan.
Sampai saat ini, metode yang ada memerlukan uji menggunakan binatang percobaan
dan biakanjaringan yang cukup mahal dan kurang praktis. Beberapa metode baru ber-
dasarkan penetapan imunologis {immunoassay test) dan teknik hibridisasi DNA sudah
banyak dikembangkan.
Pengobatan
Bakteri Escherichia co//yang diisolasi dari infeksi yang terjadi di masyarakat biasanya
sensitif terhadap obat antimikroba yang efektif terhadap bakteri Gram-negatif meski-
pun ada beberapa galur yang resisten. Galur yang resisten terutama dijumpai pada
penderita yang memiliki riwayat pengobatan antibiotik. Cairan infiis danelektrolit
perlu diberikan pada penderita diare berat.
Salmonella typhi
Salmonella yang termasuk dalam famili Enterobacteriaceae merupakan bakteri pa-
togen bagi manusia dan hewan. Angka kesakitan akibat infeksi bakteri Salmonella
sangat tinggi. Penyakit ini tidak saja terjadi di negara berkembang, tetapi juga ber-
jangkit di negara maju. Angka kejadian infeksi Salmonella di seluruh dunia mencapai
lebih dari 12,5juta per tahim dan di Amerika Serikat diperkirakan sekitar 2juta pen-
derita salmonelosis setiap tahun.
Infeksi Salmonella terjadi pada saluran cerna dan terkadang menyebar lewat
peredaran darah ke seluruh organ tubuh. Infeksi Salmonella pada manusia bervariasi,
yaitu dapat berupa infeksi yang dapat sembuh sendiri (gastroenteritis), tetapi dapat
juga menjadi kasus yang serius apabila terjadi penyebaran sistemik (demam enterik).
Dalam kondisi seperti ini, diperlukan penanggulangan yang tepat dengan antibiotik
pilihan.
Dalam perkembangannya, taksonomi Salmonella cukup rumit sehingga terdapat
beberapa tata nama yang berbeda. Kauffinan-White menggolongkan Salmonella ber-
dasarkan kekhasan antigenik, sedangkan Ewing, dkk. menyatakan bahwa terdapat
tiga spesies Salmonella, yaitu Salmonella choleraesuis, Salmonella enteritidis, dan
Salmonella typhi. Melalui pemetaan genetika, Salmonella disimpulkan termasuk da-
lam genus Arizona berdasarkan persamaan struktur genetik, filogenik, dan petunjuk
evolusinya.
Salmonella merupakan bakteri Gram-negatif, tidak berspora, tidak mempuyai
simpai, tanpa fimbria, dan mempunyai flagel peritrik, kecuali Salmonella pullorum
dan Salmonella gallinarum. Ukuran 1-3,5^mx 0,5-0,8 ^m. Besar koloni dalam
media perbenihan rata-rata 2-4 mm.
Sifat Salmonella typhi antara lain dapat bergerak, tumbuh pada suasana aerob dan
anaerob fakultatif, memberikan hasil positif pada reaksi fermentasi manitol dan sor-
bitol, dan memberikan hasil negatif pada reaksi indol, DNAse, fenilalanin deaminase,
urease, Voges Proskauer, dan reaksi fermentasi sukrosa dan laktosa. Salmonella typhi
tidak tumbuh dalam larutan KCN, hanya sedikit membentuk gas H.S, dan tidak mem-
bentuk gas pada fermentasi glukosa.
Salmonella tumbuh pada suasana aerob atau anaerob fakultatif, pada suhu 15-
41°C. Suhu pertumbuhan optimum 37,5°Cdengan pH media 6-8. Salmonella mem-
punyai gerak positif, dapat tumbuh dengan cepat pada perbenihan biasa, tidak meragi
laktosa, sukrosa, membentuk asam, dan biasanya membentuk gas dari glukosa, mal-
tosa, manitol, dandekstrin. Sebagian besar isolat Salmonella dari spesimen klinik
membentuk H 2 S . Pembentukan H 2 S bervariasi. Hanya 50% Salmonella enteritidis
serotipe Ayang membentuk H^S.
Dalam perbenihan agar Salmonella-Shigella, agar Endo, danagar MacConkey,
koloni Salmonella berbentuk bulat, kecil, dan tidak berwama. Pada media Wilson-
Blair agar, koloni Salmonella berwarna hitam.
Salmonella mati pada suhu 56°Cdan pada keadaan kering. Dalam air, Salmonella
dapat bertahan selama 4minggu. Bakteri ini hidup subur dalam media yang mengan-
dung garam empedu berkonsentrasi tinggi dan tahan terhadap brilliant green, natrium
tetrationat, dan natriumdeoksikolat. Senyawa-senyawa ini menghambat pertumbuhan
bakteri coliform sehingga dapat digunakan untuk mengisolasi bakteri Salmonella dari
tinja dalam media.
Spesies Salmonella dapat ditentukan dengan uji reaksi biokimia atau uji serologi,
sedangkan penentuan tipe faga berguna dalam bidang epidemiologi.
Struktur dan tipe antigen

Salmonella mempunyai tiga jenis antigen utama, yaitu sebagai berikut.
Antigen somatik atau antigen O
Antigen somatik atau antigen Oadalah bagian dinding sel bakteri yang tahan terhadap
pemanasan 100°C , alkohol, dan asam. Struktur antigen somatik mengandung lipopo-
lisakarida. Beberapa di antaranya mengandungjenis gula yang spesifik. Antibodi yang
terbentuk terhadap antigen Oadalah IgM.
Antigen flagel atau antigen H
Antigen ini mengandung beberapa unsur imunologik. Pada Salmonella, antigen dite-
mukan dalam 2 fase, yaitu fase 1spesifik dan fase 2tidak spesifik. Antigen Hdapat
dirusak oleh asam, alkohol, dan pemanasan di atas 60°C. Antibodi terhadap antigen H
adalah IgG.
Antigen Vi atau antigen kapsul
Antigen Vi atau antigen kapsul merupakan polimer polisakarida bersifat asam yang
terdapat di bagian paling luar badan bakteri. Antigen Vi dapat dirusak oleh asam,
fenol, dan pemanasan 60°Cselama 1 jam.
Faktor virulensi
Ada tiga faktor yang menentukan virulensi bakteri Salmonella.
Daya invasi
Dalam usus halus, bakteri Salmonella yang berpenetrasi di epitel masuk ke dalam
jaringan sub-epitel sampai lamina propria. Mekanisme biokimia yang terjadi saat
penetrasi belum diketahui dengan jelas, tetapi prosesnya menyerupai fagositosis.
Setelah penetrasi, bakteri difagosit oleh makrofag, berkembang biak, dan dibawa oleh
makrofag ke bagian tubuh yang lain,
Endotoksin
Kemampuan Salmonella yang hidup intraseluler diduga karena memiliki antigen
permukaan (antigenVi). Simpai sel5^/wo«e//am engandungkom plekslipopolisakarida
(LPS) yang berfungsi sebagai endotoksin dan merupakan faktor virulensi. Endotoksin
dapat merangsang pelepasan zat pirogen dari sel-sel makrofag dan sel polimorfonu-
klear (PMN) sehingga mengakibatkan demam. Selain itu, endotoksin dapat merang-
sangaktivasi sistemkomplemen, pelepasan kinm, danmemengaruhi limfosit. Su-kulasi
endotoksin dalam peredaran darah dapat menyebabkan renjat septik akibat infeksi. ^
Enterotoksin dan sitotoksin -^j^m

Toksin lain yang dihasilkan oleh Salmonella adalah enterotoksin dan sitotoksffiT^
Kedua toksin ini diduga juga dapat meningkatkan daya invasi dan merupakan faktor .,
virulensi Salmonella. 'M
Patogenesis "^Pl
Salmonelosis adalah infeksi yang disebabkan oleh Salmonella yang masuk ke dalam
tubuh melalui makanan atau minuman yang terkontaminasi. Orang yang terinfeksi
akan mengalami gejala demam, diare, kramperut, pusing, sakit kepala, dan rasa mual
setelah 12 sampai 72jam terinfeksi. Gejala ini dapat berlangsimg selama 7hari. Pen-
derita salmonelosis umumnya dapat sembuh tanpa perawatan dokter. Akan tetapi,
sebagian penderita dapat mengalami diare yang sangat parah sehingga harus dirawat
di rumah sakit. Infeksi parah terutama terjadi pada anak-anak danpenderita yang
memiliki sistempertahanan tubuh yang lemah.
Virulensi Salmonella disobabkm oleh (a) kemampuan menginvasi sel-sel epitel
inang, (b) mempunyai antigen permukaan yang terdiri atas simpai lipopolisakarida,
(c) kemampuan melakukan replikasi interseluler, {d) menghasilkan beberapa toksin
spesifik, (e) kemampuan berkolonisasi pada ileum dan kolon, (f) dan kemampuan
menginvasi lapisan epitel intestin dan berkembang di dalam sel-sel limfoid.
Manifestasi klinik salmonelosis terdiri atas beberapa sindrom, antara lain gastro-
enteritis, demam enterik, septisemia, dan penderita yang tidak menampakkan gejala
sakit.
Bab 10 - Babteri Patogen pada Saluran Cerna 133
Gastroenteritis
Infeksi ini disebabkan oleh Salmonella typhimurium dan Salmonella enteritidis. Masa
inkubasi penyakit ini berkisar antara 12-^8jamatau lebih. Gejala yang timbul pertama
kali adalah mual dan muntah yang mereda dalam beberapa jam, kemudian diikuti
dengan nyeri abdomen dan demam. Diare merupakan gejala yang paling menonjol.
Pada kasus yang berat, diare dapat bercampur darah. Penderita sering kali sembuh
sendiri dalam 1-5 hari, tetapi dapat menjadi berat bila terjadi gangguan keseimbangan
elektrolit dan dehidrasi.
Diare disebabkan oleh meningkatnya sekresi cairan dan elektrolit dari intestin.
Invasi Salmonella pada mukosa intestin akan diikuti oleh aktivasi adenilat siklase
dalam mukosa usus. Peningkatan kadar adenilat siklase ini selanjutnya akan mening-
katkan sekresi AMP siklik. Mekanisme stimulasi peningkatan adenilat siklase belum
diketahui dengan jelas. Prostaglandin, enterotoksin, dan sitotoksin yang dilepaskan
oleh Salmonella diduga berperan pada peningkatan sekresi enzim itu. Dengan mening-
katnya kadar adenilat siklase dan AMP siklik, sekresi cairan dan elektrolit ke dalam
lumen usus dapat meningkat sehingga menyebabkan diare, seperti yang terlihat pada
Gambar 10.1.
Penyebaran infeksi ke organ-organ lain biasanya tidak terjadi. Penyebab gastro-
enteritis yang paling sering ditemukan adalah Salmonella typhimurium. Bakteri pe-
nyebab dapat diisolasi dari tinja penderita dalam beberapa minggu, sedangkan pada
pembawa bakteri {carrier), bakteri dapat ditemukan dalam tinja lebih dari 1tahun.
Demam enterik
Demam enterik disebabkan oleh Salmonella typhi, Salmonella schottmuelleri, dan
Salmonella paratyphi A. Mekanisme demam enterik didahului oleh pelekatan atau
penempelan Salmonella, yang biasanya melalui makanan yang terkontaminasi, pada
protein reseptor yang ada di permukaan sel epitel usus. Setelah terjadi proses fagosi-
tosis atau pinositosis bakteri oleh sel inang, bakteri akan berkolonisasi dan bermul-
tiplikasi. Selanjutnya, terjadi invasi bakteri pada lapisan epitel intestin.
Bakteri Salmonella akan berkembang biak secara intraseluler dan masuk ke
dalam kelenjar getah bening. Bakteri ini kemudian masuk ke dalam peredaran darah
dan sel-sel retikuloendotelium melalui ductus thoracicus, lalu menyebar ke dalam
banyak organ tubuh. Akibat yang menonjol adalah hiperplasia, nekrosis jaringan
limfoid, hepatitis, dan radang kandung empedu.
Salmonelosis akan menimbulkan respons infiamasi yang dapat menyebabkan
ulserasi, terutama yang disebabkan oleh infeksi Salmonella typhi dan Salmonella
paratyphi. Selain itu, sitotoksin bakteri ini diduga juga dapat meningkatkan respons
infiamasi. Invasi bakteri Salmonella dalam mukosa menyebabkan sel-sel epitel
memproduksi dan melepaskan beberapajenis sitokin proinflamasi, seperti interleukin-1
(IL-1), IL-6, IL-8, TNF-2, IFN-U, MCP-1, dan GM-CSF.
Pelepasan faktor-faktor infiamasi ini dapat menyebabkan kerusakan pada intes-
tin. Gejala yang ditimbulkan dapat ringan sampai berat, seperti demam, sakit perut,
leukositosis, sembelit, pembesaran limfa, dan diare. Pada beberapa kasus, penderita
kehilangan nafsu makan, ruam pada wajah, dan bintik-bintik merah.
134 Bubu Ajar Mibrobiologi: Panduan Mahasiswa Farmasi dan Kedobteran
Kolonisasi bakteri dalam

intestin
Bakteri masuk ke dalam

tubuh melalui oral
Invasi bakteri dalam

mukosa usus
Sitotoksin
Infiamasi akut
Ulkus
Enterotoksin
^ SitokIn
Aktivasi adenilat siklase
Peningkatan kadar
AMP siklik
Peningkatan produksi
cairan
Diare
Gambar 10.1 Mekanisme diare akibat infeksi Salmonella.
Gejala demam enterik yang disebabkan oleh Salmonella typhi umumnya muncul
1-3 minggu setelah penderita terinfeksi. Pada infeksi subklinik, beberapa individu
akan membawa bakteri Salmonella dalam tubuhnya dalamjangka waktu yang cukup
lama, tetapi tetap terlihat sehat.
Bab 10 - Bat?teri Patogen pada Saluran Cerna 135
Septisemia
Septisemia merupakan invasi dini bakteri kedalam peredaran darah yang biasanya
disebabkan oleh Salmonella choleraesuis. Bakteri tersebar luas dancenderung me-
nyebabkan nanah setempat, abses, meningitis, osteomielitis, pneumonia, dan endo-
karditis, khususnya pada penderita yang sistem kekebalannya menurun.
Carrier tanpa gejala
Semua individu yang terinfeksi Salmonella mengekskresikan bakteri ini dalam tinja
untuk jangka waktu yang bervariasi. Orang-orang ini disebut dengan convalescent
carrier Pada bulan ketiga, sekitar 90%penderita tidak lagi mengekskresikan bakteri
tersebut. Individu tertentu yang masih mengekskresikan bakteri Salmonella selama 1
tahun atau lebih disebut chronic carrier.
Berbagai penyakit infeksi dapat menyebabkan diare, demam, dansakit perut. Oleh
sebab itu, pemeriksaan laboratorium untuk menentukan etiologi penyakit infeksi
sangat penting dalam menunjang diagnosis klinik.
Spesimen pemeriksaan yang harus diambil adalah darah, urine, dantinja. Untuk
kasus demam enterik danseptisemia, darah biasanya mengandung Salmonella di
minggu pertama, sedangkan pada biakan urine, bakteri ditemukan di minggu kedua.
Biakan bakteri yang diisolasi dari tinja biasanya akan menunjukkan hasil positif di
minggu kedua atau ketiga, sedangkan pada gastroenteritis, bakteri akan positif di
minggu pertama.
Isolasi danidentifikasi Salmonella biasanya dilakukan dengan teknik perbenihan
dan uji serologi.
Teknik perbenihan
P e mbia ka n da la m me dia ya ng dipe rka ya

Spesimen diinokulasikan dalam kaldu selenit Fatau kaldu tetrationat. Media ini akan
menghambat pertumbuhan flora normal intestin, tetapi menumbuhkan bakteri Salmo-
nella. Setelah diinkubasi selama 24^8 jampada suhu 37°C , biakan diinokulasikan
dalam media diferensial.
P e m b i a k a n d a l a m me di a se le ktif
Spesimen pemeriksaan ditanam pada media lempeng Salmonella-Shigella agar atau
pada media deoxycholate citrate agar. Media agar ini dapat menumbuhkan Salmo-
nella lebih subur daripada bakteri coliform.
P e m b i a k a n d a l a m m e d i a dife re nsia l
Media eosin methylene blue (EMB), MacConkey, atau deoxycholate memungkinkan
bakteri bukan peragi laktosa terdeteksi dengan cepat. Selain itu, pertumbuhan bakteri
Gram-positif dapat dihambat dalam media-media tersebut. Perbenihan bismuth sulfite
agar dapat mendeteksi Salmonella typhi dengan cepat karena akan terbentuk koloni
hitamoleh H,Syang dihasilkan oleh bakteri ini.
Koloni-koloni spesifik yang telah ditumbuhkan dalammedia selektif atau diferen-
sial tersebut diidentifikasi lebih lanjut dengan uji reaksi biokimia atau uji serologi
Uji serologi
Metode ini digunakan untuk mengidentifikasi spesies bakteri yang terdapat dalam
darah penderita dan menentukan titer antibodi penderita terhadap bakteri. Aglutinin
serum akan meningkat tajam selama minggu kedua dan ketiga infeksi Salmonella.
Paling sedikit diperlukan 2 bahan serum yang diperoleh dari interval pengambilan
|i7-10 hari untuk membuktikan kenaikan titer.
U ji a g l u t i n a s i ce pa t
Uji ini dilakukan dengan mencampurkan serum yang mengandung antibodi spesifik
dengan biakan yang tidak diketahui pada alat gelas. Reaksi aglutinasi kemudian
diamati di bawah mikroskop. Uji ini berguna untuk pemeriksaan pendahuluan.
U ji w i d a l
Uji ini dilakukan dengan membuat serangkaian pengenceran serum penderita, yang
kemudian direaksikan dengan antigen spesifik yang berasal dari Salmonella. Hasil uji
diinterpretasikan sebagai berikut.
• Titer Oyang tinggi atau kenaikan titer yang tinggi (1:160 atau lebih) menunjukkan
dugaan terjadi infeksi aktif Salmonella.
• Titer H yang tinggi (1:160 atau lebih) menunjukkan bahwa penderita pernah
terinfeksi atau divaksinasi.
> • Titer Vi yang tinggi menunjukkan bahwa penderita adalah pembawa bakteri
m (carrier).
Pencegahan dan pengobatan

Infeksi Salmonella biasanya berlangsung selama 5-7 hari dan pasien memerlukan
perawatanjika mengalami dehidrasi berat dan infeksi telah menyebar dari usus. Peng-
gantian cairan dan elektrolit sangat penting jika penderita mengalami diare parah. ^5
Banyak antibiotik efektif terhadap Salmonella. Kloramfenikol atau ampisilin meru-^
pakan antibiotik pilihan untuk mengatasi sahnonelosis. Pembawa bakteri (carrier)
dalam usus sering dapat diobati dengan ampisilin atau amoksisilin dan probenesid.,
Akan tetapi, pembawa bakteri dalam kandung empedu memerlukan tindakan pembe-;,
dahan (kolesistektonii) selain pemberian ampisilin.
Imunisasi dengan vaksin monovalen Salmonella typhi memberikan proteksi yangi
cukup baik. Vaksin akan merangsang produksi antibodi terhadap antigen Vi, O, dan H.|
Beberapa penelitian menunjukkan bahwa antibodi terhadap antigen H dapat mem-j
berikan perlindungan terhadap Salmonella typhi, tetapi antibodi terhadap antigen Vi'^
dan antigen Otidak. t
Pencegahan dapat dilakukan dengan upaya menjaga kebersihan makanan d a n
m i n u m a n serta upaya mengobati carrieryang berpotensi menjadi sumber infeksi. A d a
dua jenis carrier, yaitu convalescent carrier (bakteri dapat ditemukan dalam tinja
dalam waktu yang bervariasi) dan chronic carrier (bakteri dapat ditemukan dalam
tinja selama I tahun). Selain itu, pencegahan juga dapat d i l a k u k a n dengan memberi-
kan imunisasi vaksin monovalen S a l m o n e l l a typhi.
U p a y a pengobatan d i l a k u k a n dengan cara berikut.
• Obat standar: k l o r a m f e n i k o l.
• D e m a m tifoid: ampisilin, amoksisilin, trimetoprim-sulfametoksazol.
• Carrier tanpa batu empedu: ampisilin, amoksisilin, probenesid.
• Carrier disertai kolelitiasis: antibiotik dan pembedahan.
Epidemiologi
Makanan yang terkontaminasi Salmonella merupakan sumber penularan utama sal-
monelosis. Banyak hewan ternak seperti a y a m , k a l k u n , babi, sapi, atau h e w a n lain
secara alamiah terinfeksi oleh Salmonella dan mengandung bakteri d idalam jaring-
annya. K a r e n a Salmonella dapat hidup d i dalam daging, telur, dan produk-produk
makanan lain, m a k a n a n y a n g tidak dimasak dengan baik merupakan sumber utama
penularan salmonelosis. Sebagai contoh, berdasarkan hasil pemeriksaan rutin yang
dilakukan, 4 1 % daging k a l k u n yang beredar di California, A m e r i k a Serikat, ternyata
terkontaminasi Salmonella. D e m i k i a n pula, 5 0 % daging ayam dan 2 1 % telur ayam
terkontaminasi Salmonella.
Penelitian epidemiologi menunjukkan bahwa penularan demam tifoid dan demam
enterik lain terutama disebabkan oleh penularan orang per orang. Penyebaran Salmo-
nella melalui air yang terkontaminasi tinja yang mengandung Salmonella merupakan
cara penyebaran yang paling sering terjadi. Identifikasi Salmonella melalui penentuan
sidik jari D N A dan tipe faga pada isolat S a l m o n e l l a penting d i l a k u k a n k e t i k a terjadi
wabah salmonelosis untuk mencegah penyebaran Salmonella k elingkungan d i seki-
tarnya.
Faktor penting yang perlu diperhatikan dalam epidemiologi salmonelosis adalah
sekitar 3 % penderita salmonelosis akan menjadi p e m b a w a bakteri Salmonella{carrier)
dan akan menjadi sumber penularan salmonelosis. Oleh sebab itu,orang yang pernah
menderita salmonelosis tidak diperkenankan menjadi pramusaji atau menyiapkan ma-
kanan dan minuman untuk orang lain. H a l lain y a n g penting diperhatikan adalah
penggunaan antibiotik sebagai campuran pakan ternak dapat m e n i n g k a t k a n angka ke-
jadian resistensi Salmonella terhadap berbagai antibiotik sehingga akan mempersulit
upaya penanggulangan bakteri inijika menginfeksi manusia.
Pengawasan
Salmonella sangat sulit dimusnahkan dari lingkungan karena banyak hewan d a n
manusia yang menjadi reservoir bakteri ini. Oleh karena itu, tindakan sanitasi untuk
mencegah kontaminasi m a k a n a n dan m i n u m a n oleh Salmonella sangat penting dila-
138 Bubu Ajar Mikrobiologi: Panduan Mahasiswa Farmasi dan K e d o R t e r a n :
kukan. Daging, telur, dan produk-produknya harus dimasak dengan sempurna. Buah
dan sayuran, terutama yang d i m a k a n mentah, perlu dicuci sebersih mungkin.
Pembawa bakteri tidak diizinkan menyediakan makanan atau m i n u m a n untuk
orang lain dan harus m e l a k u k a n tindakan higienis yang ketat. Pengobatan yang tepat
atau tindakan operasi k a n d u n g empedu perlu dilakukan untuk mencegah penyebaran
Salmonella oleh seorang carrier.
Vaksin tifoid dapat diberikan untuk mencegah salmonelosis, terutama jika se-
seorang akan bepergian k e daerah endemik. Efektivitas daya lindung vaksin tifoid
tidak terlalu lama sehingga perlu pengulangan setelah beberapa tahun.
Seorang yang terinfeksi Salmonelladan berada dalam perawatan medis harus pa-
tuh dalam m i n u m antibiotiksesuai dengan anjuran karena pengobatan yang tidak tun-
tas a k a n m e n y e b a b k a n penderita menjadi pembawa bakteri. Penderita perlu m e m i n t a
uji pemeriksaan tinja d i laboratorium u n t u k m e m a s t i k a n b a h w a bakteri S a l m o n e l l a
typhi benar-benar s u d a h d i m u s n a h k a n .
Shigella dysenteriae
Morfologi d a n fisiologi
Shigella dysenteriae m e r u p a k a n spesies bakteri Shigella y a n g paling u m u m ditemu-
k a n d iA s i a T i m u r d a n A m e r i k a T e n g a h . B a k t e r i i n i m e r u p a k a n b a k t e r i p a t o g e n usus
yang u m u m n y a dikenal sebagai bakteri penyebab disentri (disentri basiler).
Shigella dysenteriae termasuk dalam famili Enterobacteriaceae dan tribus Esche-
r i c h i a . G e n u s iS/z/g^/Zd? d i n a m a k a n s e s u a i d e n g a n n a m a a h l i b a k t e r i o l o g i berkebangsaan
Jepang, Kiyoshi Shiga, yang menemukan basilus disentri pada t a h u n 1897. Genus
Shigella dibedakan dari genus-genus lain karena m e n y e b a b k a n gejala klinik yang
khas. H i n g g a saat i n i , telah d i t e m u k a n 4 spesies Shigella, yaitu S h i g e l l a dysenteriae,
Shigellaflexneri, S h i g e l l a boydii, dan Shigellasonnei. K e e m p a t spesies tersebut dibe-
dakan berdasarkan komponen utama yang dimiliki oleh antigen O yang terdapat pada
setiap genus Shigella. Setiap spesies dari genus Shigella dibedakan m e n j a d i beberapa
serotipe b e r d a s a r k a n k o m p o n e n m i n o r a n t i g e n O .S h i g e l l a dysenteriae m e m p u n y a i 1 0
jenis serotipe.
Shigella dysenteriae merupakan bakteri Gram-negatif berukuran 0,5-0,7 jim x
2-3 ^ m . Bentuk morfologi Shigella dysenteriae adalah batang pendek atau basil
tunggal, tidak berspora, tidak berflagel sehingga tidak bergerak, dan dapat memiliki
kapsul. B e n t u k m o r f o l o g i Shigella dysenteriae sangat m i r i p dengan bakteri Salmo-
nella, tetapi Shigella dysenteriae dapat dibedakan berdasarkan reaksi fermentasi dan
uji serologi. Shigella dysenteriae tidak m e m b e n t u k gaspada reaksi fermentasi dan
lebih rentan terhadap berbagai bahan kimia jika dibandingkan dengan Salmonella.
Dalam media perbenihan, Shigella dysenteriae m e m b e n t u k koloni yang halus dan
mengilap.
Shigella dysenteriae merupakan bakteri yang hidup dalam suasana aerob atau
fakultatif anaerob. S u h u o p t i m u m p e r t u m b u h a n b a k t e r i i n i a d a l a h 37°C d a n p H o p t i -
?•^•^t•«5},•••t^•^•«!^r.t^.•^
Bab 10 - Bakteri Patogen p a d a Saluran Cerna 139
m u m 6,4-7,8. Shigella dapat memfermentasi berbagai macam karbohidrat, kecuali

laktosa, m e n g h a s i l k a n a s a m t a n p a gas. B e r d a s a r k a n r e a k s i f e r m e n t a s i , S h i g e l l a dysen-
teriae dapat dibedakan dari spesies Shigella lain karena m e m b e r i k a n hasil negatif
pada fermentasi manitol.
Shigella dysenteriae memiliki daya tahan yang rendah terhadap berbagai z a t
k i m i a , m a t i p a d a s u h u 55°C, d a n b e r t a h a n h i d u p d a l a m f e n o l 0 , 5 % selama 5 j a m dan
dalam fenol 1 % selama 1j a m . A k a n t e t a p i , b a k t e r i i n i t a h a n t e r h a d a p s u h u d a n kelem-
bapan rendah, y a k n i dapat bertahan hidup d idalam es selama 2 bulan. D i a l a m bebas,
bakteri ini dapat bertahan hidup d iair laut selama 2-5 bulan.
P a t o g e n e s i s d a n gejala p e n y a k i t
Shigella dysenteriae merupakan bakteri patogen penyebab sigelosis, yaitu kondisi
klinis yang ditandai dengan infeksi usus akut/radang usus y a n g disertai diare, buang
air besar bercampur darah, lendir, dan nanah. M a s a inkubasi sigelosis berkisar 1 - 7
hari ( u m u m n y a 4 hari).
Patogenesis Shigella dysenteriae dapat mencaku p tiga hal berikut.
Daya invasi
Shigella dysenteriae mampu menembus d a nm a s u k k e dalam se-sel lapisan epitel
p e r m u k a a n m u k o s a usus d ii l e u m terminal dan kolon. Setelah m e n e m b u s sel, bakteri
ini m e m p e r b a n y a k diri sehingga lapisan selyang telah mati akan mengelupas d a n
terjadi t u k a k pada m u k o s a usus. Reaksi radang m e n y e b a b k a n demam. Infeksi terbatas
hanya pada bagian usus dan jarang menyebar k eorgan lain.
Endotoiisin
Endotoksin yang dihasilkan m a m p u memengaruhi kegiatan biologis dan menyebab-
kan demam.
Elisotoiisin
E k s o t o k s i n terdiri atas enterotoksin, n e u r o t o k s i n , dan sitotoksin.
Enterotoksin
Enterotoksin yang-dihasilkan oleh Shigella dysenteriae m e r u p a k a n enterotoksin L T
(termolabil) yang berbeda dengan yang dihasilkan bakteri lain karena m a m p u m e -
nyerang kolon. Pada hewan percobaan, enterotoksin menyebabkan sekresi enzim ade-
nilat siklase pada m u k o s a usus (ileum terminal) dan peningkatan permeabilitas epitel
usus sehingga t e r j a d i p e n i n g k a t a n c a i r a n d id a l a m u s u s . H a l i n i m e n y e b a b k a n entero-
toksin diduga sebagai penyebab diare berair {watery diarrhea). Proses selanjutnya,
enterotoksin menyerang kolon dan m e n i m b u l k a n disentri.
Neurotoksin dan sitotoksin

Peran t o k s i n - t o k s i n i n i pada sigelosis belum diketahui dengan pasti, tetapi diduga
menyebabkan kejang pada penderita anak-anak.
Gejala yang d i t i m b u l k a n sigelosis dapat berupa d e m a m , kejang perut, nyeri, dan

diare. Diare yang disebabkan sigelosis dapat dibedakan menjadi tiga, yaitu diare
klasik, diare berair, dan kombinasi keduanya. Selain memperhatikan gejala-gejala
yang terjadi, pemeriksaan laboratorium perlu dilakukan untuk memastikan infeksi si-
gelosis, antara lain sebagai berikut.
• Pemeriksaan spesimen yang diperoleh dari usap dubur atau dari tukak mukosa
usus.
• Isolasi b a k t e r i d a l a m tinja h a r u s d i l a k u k a n secepat m u n g k i n k a r e n a S h i g e l l a dy-
senteriae tidak dapat bertahan hidup dalam jangka w a k t u y a n g lama karena adanya
zat-zat yang bersifat asam dalam tinja dan pengaruh bakteri lain d i luar tubuh.
Apabila spesimen tidak dapat dikirim secepatnya ke laboratorium, sebaiknya digu-
nakan media transpor. Identifikasi bakteri dapat d i l a k u k a n m e l a l u i uji serologi dan
uji b i o k i m i a .
Epidemiologi
Shigella merupakan bakteri yang tersebar luas d i seluruh dunia. Spesies Shigella
dysenteriae u m u m n y a ditemukan diAmerika Tengah dan Asia T i m u r , termasuk d i
Indonesia. Penyebaran bakteri ini terjadi dari manusia, baik yang terinfeksi maupun
carrier atau reservoir, ke m a n u s i a lain m e l a l u i lalat, tangan y a n g kotor, tinja, m a k a n a n
dan m i n u m a n , serta barang-barang lain y a n g terkontaminasi.
Pada daerah yang m e m p u n y a i 4 m u s i m , terutama A m e r i k a Serikat, infeksi sigelosis
paling sering terjadi pada m u s i m gugur dan dingin. D iIndonesia, infeksi sigelosis
telah menjadi endemi. K e l o m p o k yang paling rentan terinfeksi adalah anak-anak yang
berusia 1-4 tahun.
e

Infeksi sigelosis merupakan infeksi y a n g berasal dari m a k a n a n dan air. O l e h karena
itu, pencegahan infeksi ini dapat d i l a k u k a n dengan berbagai cara berikut.
• Menjaga kebersihan lingkungan.

• Menjaga kebersihan makanan dan minuman.
• M e l i n d u n g i m a k a n a n dan m i n u m a n dari p e n c e m a r seperti lalat.
• M e l a k u k a n klorinasi air m i n u m .
• Membuang dan mengolah limbah dengan memperhatikan sanitasi lingkungan.
Infeksi sigelosis u m u m n y a dapat sembuh sendiri dalam w a k t u 2 - 7 hari, terutama pada

penderita dewasa. Pada penderita anak-anak atau penderita berusia lanjut, penyakit
dapat berlangsung lama, bahkan pada penderita gizi buruk dapat m e n g a k i b a t k a n ke-
matian. A n t i b i o t i k , seperti ampisilin, tetrasiklin, dan trimetoprim-sulfametoksazol,
dapat digunakan untuk mengobati infeksi dan mengurangi angka kematian. Akan
tetapi, sebelum penggunaan antibiotik, uji kepekaan bakteri terhadap antibiotik perlu
dilakukan. H a l ini karena semaki n banyak d i t e m u k a n galur bakteri yang resisten ter-
hadap antibiotik tertentu.
B a b l O - B a l ^ t e r i Patogen padd Saluran Cernd 141
Vibrio cholerae
Vibrio a d a l a h b a k t e r i y a n g u m u m d i j u m p a i d ip e r m u k a a n a i r d i s e l u r u h d u n i a . Vibrio
dapat hidup d iair laut dan d iair t a w a r dan hidup bersama d e n g a n b i n a t a n g air. Pada
tahun 1883, Robert K o c h berhasil mengisolasi Vibrio cholerae dari saluran cerna pen-
derita kolera dan membuktikan bahwa spesies ini merupakan penyebab penyakit
kolera.
Vibrio cholerae m e r u p a k a n bakteri berbentuk batang b e n g k o k seperti k o m a dan
berukuran 2 - A \im. S p e s i e s i n i t i d a k m e m b e n t u k spora dan bergerak sangat aktif
karena memiliki flagel tunggal atau monotrik. Vibrio cholerae m e r u p a k a n bakteri
Gram-negatif, bersifat anaerof fakultatif, dan dapat m e l a k u k a n metabolisme berupa
respirasi dan fermentasi. Bakteri ini bersifat patogen pada m a n u s i a dan dapat menye-
babkan gangguan pencernaan. Vibrio bergerak dengan flagel di d a l a m m e d i a cair dan
dapat menyintesis banyak flagel lateral pada media padat. Pada biakan yang sudah
lama, bentuk bakteri ini dapat menjadi batang lurus.
Bakteri Vibrio u m u m n y a m e m e r l u k a n faktor pertumbuhan yang relatif sederhana
dan dapat t u m b u h dengan baik dalam media yang mengandung garam mineral dan
asparagin sebagai sumber karbon dan nitrogen. Beberapa media pertumbuhan yang
sering d i g u n a k a n adalah alkaline taurocholate tellurite a g a r dan thiosulfate citrate
bile salt sucrose ( T C B S ) agar.
Vibrio cholerae tidak tahan asam dan hidup pada p H o p t i m u m 8,5-9,5. S u h u per-
t u m b u h a n o p t i m u m 37°C. K o l o n i V i b r i o c h o l e r a e b e r b e n t u k cembung, bulat, halus,
dan tampak bergranul. Spesies ini meragi laktosa dan manosa tanpa menghasilkan
gas. D a l a m m e d i a pepton, b a k t e r i i n i a k a n m e m b e n t u k i n d o l , y a n g d e n g a n a s a m sulfat
akan membentuk warna merah.
P a t o g e n i s i t a s d a n gejala p e n y a k i t
Vibrio cholerae memproduks i enterotoksin berbobot m o l e k u l 90.000 yang tidak tahan
asam d a npanas. Aktivitas enterotoksin mengaktifkan aktivitas adenilat siklase,
meningkatkan konsentrasi A M P siklik, dan menyebabkan hipersekresi cairan dari
usus sehingga menyebabkan diare masif yang mengakibatkan kehilangan banyak
c a i r a n t u b u h . V i b r i o b i o t i p e E l Tor m e m b e n t u k h e m o l i s i n y a n g d a p a t l a r u t d a n mampu
m e l i s i s k a n sel darah merah.
Variasi antigen m e m a i n k a n peranan penting dalam virulensi kolera. A n t i g e n flagel
H Vibrio cholerae sama dengan antigen pada hampir semua Vibrio sehingga tidak
dapat ditentukan spesies y a n g menyebabka n epidemi kolera. A n t i g e n flagel H bersifat
tidak tahan panas. Vibrio cholerae juga m e m i l i k i antigen somatik O yang mengan-
dung lipopolisakarida. Antibodi terhadap antigen O bersifat protektif Serotipe O ,
bertanggung jawab atas e p i d e m i kolera, seperti y a n g terdapat pada biotipe cholerae
d a n E l Tor. A d a t i g a f a k t o r a n t i g e n , y a i t u A , B , d a n C y a n g m e m b a g i serotipe O , m e n -
jadi serotipe O g a w a , Inaba, dan Hikojima.
142 B u k u Ajar Mikrobiologi: Panduan Mahasiswa Farmasi dan K e d o k t e r a n ^
Serotipe Antigen 0
Ogawa A. B
Inaba A, C
Hikojima A , B. C
Vibrio cholerae tidak bersifat invasif, tidak pernah m a s u k d a l a m sirkulasi darah,

dan tetap terlokalisasi di dalam usus. Bakteri ini menghasilkan enterotoksin, musinase,
dan endotoksin. T o k s i n kolera bereaksi dengan m u k o s a epitel usus dan akan merang-
sang hipersekresi air dan klorida serta m e n g h a m b a t absorpsi natrium yang dapat
mengakibatkan diare, kehilangan banyak cairan bebas protein, elektrolit, bikarbonat,
dan ion yang diperlukan oleh tubuh.
Masa inkubasi 1 - 4 hari dengan gejala m u a l , m u n t a h , diare, dan kejang perut.
Kehilangan cairan tubuh dapat menyebabkan dehidrasi, anuria, asidosis, kejang,
bahkan kematian. A n g k a kematian tanpa pengobatan adalah 25-50%.
Epidemiologi
P e n y e b a r a n k o l e r a k eE r o p a d a n A m e r i k a terjadi m u l a i t a h u n 1817. S e t e l a h i t u , e n a m
g e l o m b a n g besar penyebaran kolera terjadi d i seluruh dunia. Vibrio cholerae telah
menyebabkan beberapa epidemi besar di beberapa negara di dunia. Pada tahun 1916,
b i o t i p e E l Tor m e n y e b a b k a n epidemi besar d iFilipina, yang disebut global epidemi
ketujuh. Sejak saat itu, biotipe ini menyebar dengan luas k e seluruh Asia, T i m u r
Tengah, Afrika, dan beberapa negara Eropa.
Kekebalan
Asam l a m b u n g dapat m e m b u n u h bakteri yang masuk dalam j u m l a h kecil. Antibodi
yang terbentuk adalah I g A dan IgG yang hanya ada dalam w a k t u yang relatif sing-
kat.

Vaksinasi dapat melindungi orang-orang yang kontak langsung dengan penderita.
L a m a efek proteksi vaksin ini b e l u m diketahui secara pasti. Peran vaksinasi mengatasi
epidemi belum jelas. Beberapa tindakan pencegahan yang dapat dilakukan adalah
sebagai berikut.
• Menjaga kebersihan makanan dan m i n u m a n .

• Memasak makanan dan m i n u m a n dengan sempurna.
• Menjaga kebersihan dan sanitasi lingkungan.
• Vaksinasi.
Pengobatan yang dilakukan pada prinsipnya adalah menggantikan cairan tubuh dan
elektrolit y a n g hilang dari t u b u h dengan cara rehidrasi dengan cairan dan elektrolit.
Pengobatan dengan antibiotik tetrasiklin dapat mempersingkat periode pemberian
cairan atau rehidrasi.
Bab 10 - Bakteri Patogen pada Saluran Cerna 143
Vibrio parahaemolyticus
Vibrio parahaemolyticus adalah bakteri G r a m - n e g a t i f dan bersifat fakultatif anaerob.
Sifat dan struktur Vibrio parahaemolyticus serupa dengan spesies Vibrio lain, yaitu
berbentuk batang b e n g k o k m e n y e r u p a i k o m a (dapat m e m b e n t u k batang lurus dalam
biakan y a n g lama), berukuran 2 - 4 |im,tidak m e m i l i k i spora, dan bergerak sangat aktif
karena m e m i l i k i flagel monotrik. Metabolisme berupa fermentasi dan respirasi tanpa
mengeluarkan gas.
Vibrio parahaemolyticus m e m b u t u h k a n perbenihan selektif dengan p H optimum
7,6-9,0. M a s a inkubasi biasanya 12-24 j a m , tetapi dapat berkisar 4 - 3 0 j a m . W a k t u
generasi berkisar 9-15 menit. S u h u p e r t u m b u h a n 4^5°C. B a k t e r i i n i a k a n m a t i pada
s u h u l e b i h d a r i 55°C.
Vibrio parahaemolyticus m e r u p a k a n vibrio halofiliky a n g m e m b u t u h k a n m i n i m a l
2 % NaCl, sedangkan biotipe alginolyticus tahan sampai 1 1 % NaCI. Vibrio p a -
rahaemolyticus tumbuh membentuk koloni besar halus dan berwarna hijau dalam
media perbenihan agar T C B S , sedangkan koloni Vibrio cholerae berwarna kuning.
Pada u m u m n y a . Vibrio parahaemolyticus m e n i m b u l k a n reaksi hemolitik yang khas
y a n g disebut dengan f e n o m e n a K a n a g a w a . H a m p i r 9 5 % isolat m e n u n j u k k a n hasil u j i
hemolisis K a n a g a w a positif U j i ini mendeteksi hemolisin yang bersifat tahan panas,
yang melisiskan eritrosit manusia dan kelinci, tetapi tidak melisiskan eritrosit kuda.
H u b u n g a n y a n g pasti antara hemolisin dan enteropatogenik belum jelas. Hemolisin
y a n g d i b e r i k a n k ed a l a m usus k e l i n c i dapat m e n y e b a b k a n kolera serta menyebabkan
dilatasi dan degenerasi usus.
Vibrio parahaemolyticus m e n i m b u l k a n gejala klinik berupa gangguan saluran
cerna, y a n g ditandai dengan diare berair dan k r a m perut. Pada sebagian besar kasus,
terjadi m u a l , m u n t a h , d e m a m , dan sakit kepala. Gejala berupa disentri dengan tinja
mengandung darah dan lendir serta d e m a m tinggi dengan j u m l a h sel darah p u t i h y a n g
meningkat kadang-kadang ditemukan. Penyakit ini khas dengan spektrum sedang
sampai berat. Gejala berlangsung sampai 1 0 hari, rata-rata 72 j a m . P e r a w a t a n intensif
diperlukan pada kasus y a n g berat. Infeksi sistemik dan k e m a t i a n j a r a n g terjadi. H a m -
pir semua orang rentan terhadap penyakit ini.
Diagnosis klinik perlu ditegakkan dengan pemeriksaan laboratorium,yaitu dengan
membiakkan spesimen p e m e r i k s a a n y a n g terdiri atas usap d u b u r atau tinja d i d a l a m
media selektif T C B S dan kaldu alkali pepton dengan penambahan N a C I 3%.
Epidemiologi
P e n y a k i t y a n g disebabkan oleh Vibriop a r a h a e m o l y t i c u s sering kali d i t u l a r k a nm e l a l u i
konsumsi ikan m e n t a h atau ikan yang dimasak kurang sempurna. Penularan juga ter-
jadi dari m a k a n a n yang telah dimasak dengan sempurna, tetapi tercemar oleh tangan
penjamah y a n g p a d a saat y a n g s a m a menangani makanan laut mentah. M e n c u c i ma-

kanan dengan air yang tercemar berisiko terjadi penularan.
Kasus sporadis dan beberapa wabah kejadian luar biasa ( K L B ) dilaporkan dari
berbagai bagian dunia, terutama Jepang, Asia Tenggara, dan A m e r i k a Serikat. Bebe-
rapa K L B dengan korban yang banyak terjadi d i A S , yang disebabkan mengonsumsi
makanan laut yang tidak dimasak dengan sempurna. D i Jepang, 5 %kasus diare dise-
babkan oleh Vibrio parahaemolyticus. Kasus-kasus ini terjadi terutama pada musim
panas. Beberapa K L B yang terjadi disebabkan oleh galur K a n a g a w a negatif dan galur
urease positif
Lingkungan pantai merupakan habitat alami Vibrio parahaemolyticus. Selama
m u s i m dingin, bakteri ini d i t e m u k a n d il u m p u r laut, sedangkan selama musim panas,
ditemukan d iperairan pantai dan dalam tubuh ikan dan kerang-kerangan.
Temuan galur Vibrio yang patogen d iperairan pantai menandakan adanya kontak
dengan limbah industri dan r u m a h tangga, seperti tinja manusia atau sisa makanan
lain, karena bakteri-bakteri tersebut secara langsung akan tumbuh dan berkembang
bila kondisi perairan memungkinkan. Selanjutnya, keadaan ini akan berpengaruh
terhadap biota laut dan pada akhirnya dapat m e m e n g a r u h i manusia.

Pencegahan penularan penyakit yang disebabkan oleh bakteri Vibrio parahaemolyticus
dapat dilakukan dengan mengonsumsi makanan yang telah dimasak dengan sempurna.
Apabila akan dimakan mentah, makanan harus dipastikan bebas dari bakteri ini.
Pengawasan terhadap penderita, kebersihan lingkungan, dan upaya penanggulangan
limbah perlu mendapat perhatian utama. Pengolahan dan penyimpanan makanan laut
harus dilakukan dengan cermat dan tepat.
Perhatian khusus perlu diberikan pada para pekerja kapal, perenang, dan juru
masak makanan laut agar m e r e k a tidak menjadi s u m b e r penularan. Infeksi yang dise-
babkan oleh Vibrio parahaemolyticus biasanya dapat sembuh sendiri. Pada kasus
y a n g berat, rehidrasi dan p e n a m b a h a n cairan elektrolit perlu segera dilakukan. Anti-
biotik yang dapat digunakan dalam pengobatan infeksi ini adalah kloramfenikol,
kanamisin, tetrasiklin, dan sefalotin.
Vibrio vulnificus
Vibrio vulnificus termasuk dalam famili Vibrionaceae dan merupakan bakteri Gram-
negatif yang mempunyai flagel sehingga dapat bergerak. Bakteri ini ditemukan d i
perairan laut dan pada plankton dan kerang-kerangan laut. B a k t e r i Vibrio vulnificus
masih jarang dikenali, tetapi tingkat penyakit infeksi yang disebabkan oleh bakteri ini
dapat mencapai 5 0 % : sebagian besardisebabkan oleh makanan lautyangterkontaminasi
oleh bakteri tersebut. B a k t e r i Vibrio vulnificus bersifat patogen pada m a n u s i a kerena
dapat menyebabkan infeksi pada lambung (gastroenteritis), infeksi luka pada kulit.
Bab 10 - Bakteri Patogen pada Saluran Cerna 145
dan bahkan dapat menyebabkan septisemia. Bakteri ini pertama kali dikenal sebagai
penyebab infeksi pada tahun 1976 dan beberapa kasus infeksi m u l a i didokumentasi-
kan pada t a h u n 1979.
Faktor virulensi
Faktor virulensi bakteri Vibrio vulnificus d a l a m m e n y e b a b k a n penyakit belum dike-
tahui secara pasti, tetapi d i p e r k i r a k a n terdiri atas beberapa komponen yang terdapat
pada d i n d i n g sel bakteri i n i , antara lain sebagai berikut.
1. Selubung atau kapsul bakteri Vibrio vulnificus y a n g mengandung polisakarida.

Galur y a n g tidak m e m p u n y a i kapsul ini tidak bersifat virulen.
2. Pili dan fimbria y a n g m e n g a n d u n g senyawa /V-metilfenilalanin, yang merupakan
alat u n t u k m e n e m p e l pada lapisan epitel sel-sel hospes.
3. L i p o p o l i s a k a r i d a ( L P S ) pada d i n d i n g sel b a k t e r i y a n g bersifat sebagai eksotoksin
dan berperan penting dalam menyebabkan demam dan renjat septik apabila terin-
feksi bakteri i n i . B e r d a s a r k a n tipe antigen lipopolisakarida, bakteri Vibrio vulnifi-
cus d i k e n a l d a l a m 3 biotipe, y a i t u biotipe 1, y a n g d o m i n a n p a t o g e n pada manusia,
b i o t i p e 2 ,y a n g d i t e m u k a n p a d a b i n a t a n g l a u t ( b e l u t ) , d a n b i o t i p e 3 ,y a n g d i t e m u k a n
pada pekerja d ipengolahan produk ikan.
4. Beberapa jenis e n z i m yang diproduksi oleh bakteri Vibrio vulnificus m e r u p a k a n
faktor v i r u l e n s i, antara lain h e m o l i s i n (sitolisin), protease, kolagenase, musinase,
esterase, kondroitinase, hialuronidase, D N A s e , dan sulfatase.
P a t o g e n e s i s d a n gejala penyakit
Bakteri Vibrio vulnificus dapat m e n y e b a b k a n gangguan pencernaan pada seseorang
yang mengonsumsi m a k a n a n laut yang terkontaminasi bakteri ini,biasanya jika d i m a -
kan mentah atau setengah matang. Bakteri ini juga dapat menjadi penyebab infeksi
pada kulit jika ada luka pada kulit, tersengat ikan laut, dan terpajan dengan air laut
yang mengandung bakteri Vibrio vulnificus. Gejala penyakit biasanya m u n c u l dalam
16 j a m setelah penderita mengonsumsi makanan laut yang terkontaminasi, dapat
berupa m u a l , m u n t a h , diare, dan sakit perut. Infeksi biasanya bersifat akut dan jarang
menyebabkan komplikasi. Pada penderita yang memiliki pertahanan tubuh lemah,
misalnya pengidap penyakit hati kronis. Vibrio vulnificus dapat menginvasi k e
peredaran darah secara sistemik, baik m e l a l u i infeksi pada kulit a t a u p un dari saluran
cerna sehingga dapat menyebabkan septisemia, d e m a m tinggi, menggigil, renjat sep-
tik, dan kematian. Para pengidap penyakit gangguan hati, diabetes, kelainan pada
lambung, penyakit ginjal, penyakit kanker, penurunan sistem imunitas,dan pengguna
steroid jangka panjang m e r u p a k a n penderita yang sangat rentan terhadap infeksi bak-
teri Vibrio vulnificus. O l e h karena itu, para penderita ini tidak d i a n j u r k a n mengon-
sumsi m a k a n a n laut y a n g mentah atau tidak dimasak dengan sempurna.
Infeksi bakteri Vibrio vulnificus dapat didiagnosis dengan bantuan pemeriksaan labo-
ratorium. Keberadaan bakteri diperiksa pada sampel pemeriksaan y a n g berasal dari
penderita, yaitu feses, j a r i n g a n kulit y a n g luka infeksi, atau darah. P e m b i a k a n bakteri

Vibrio vulnificus biasanya m e n g g u n a k a n media spesifik u n t u k menghasilka n biakan
yang baik.

Penderita y a n g mengidap berbagai penyakit y a n g dapat m e n u r u n k a n daya tahan t u b u h
disarankan untuk mengonsumsi m a k a n a n laut yang telah dimasak dengan sempurna.
Para tenaga medis hendaknya berhati-hati ketika menangani penderita yang terinfeksi
oleh bakteri ini. Pemberian antibiotik m e r u p a k a n cara pengobatan yang dianjurkan
untuk penderita y a n g terinfeksi.Beberapa antibiotiky a n g efektif antara lain tetrasiklin,
golongan sefalosporin, dan imipenem. Pengobatan infeksi kulit m e m e r l u k a n tindakan
khusus untuk menghilangkan jaringan nekrotik pada luka infeksi.
Clostridium perfringens
Clostridium perfringens termasuk dalam famili Clostridiaceae. Bakteri ini merupakan
bakteri anaerob G r a m - p o s i t i f yang bersifat patogen pada manusia. Bakteri ini t u m b u h
pada suhu 3 T C dan p H 5-8.
Infeksi Clostridiumperfringens ditandai dengan gangguan pencernaan dengan gejala
kolik tiba-tiba dan diikuti dengan diare, rasa m u a l , kadang kala m u n t a h , dan demam.
Penyakit ini u m u m n y a menyebabkan gejala ringan dan berlangsung dalam waktu
singkat, serta j a r a n g m e n y e b a b k a n k e m a t i a n . Penyakit dengan gejala berat disebabkan
oleh necrotizing enteritis, y a n g pernah terjadi pada a k h i r perang dunia I I d i J e r m a n
dan Papua Nugini. Penelitian terhadap penyakit ini m e n u n j u k k a n bahwa Clostridium
perfringens ditemukan pada biakan bakteri anaerob semikuantitatif dari sampel
makanan (sebanyak 1 0 -b a k t e r i p e r g r a m a t a u l e b i h ) a t a u d a r i s a m p e l t i n j a penderita
(sebanyak 1 0 ^b a k t e r i p e r g r a m atau lebih). Masa inkubasi bakteri Clostridium
perfringens berkisar 6-24 j a m dan biasanya 10-12 jam.
Clostridium perfringens tipe A dapat m e n i m b u l k a n penyakit gangren dan kera-
cunan makanan.
Penyakit gangren
Penyakit ini termasuk toksemia, yang terjadi sebelum atau bersamaan dengan terben-
t u k n y a gas d id a l a m j a r i n g a n . K a r b o h i d r a t j a r i n g a n t u b u h d i h a n c u r k a n d e n g a n diikuti
p e m b e n t u k a n gas d a n a k a n t e r j a d i h e m o l i s i s i n t r a v a s k u l a rd a n s e p t i s e m i a . Pencegahan
penyakit gangren dapat d i l a k u k a n dengan cara berikut.
• Pembedahan untuk mengangkat jaringan yang mati dan gumpalan darah di tempat
bakteri berkembang biak.
• Pemberian antitoksin.
• Pemberian antibiotikuntuk menghentikan pertumbuhan bakteri.
Perkembangan bakteri sulit dihentikan dengan pembedahan jaringan setempat jika

bakteri sudah menyebar sehingga perlu dilakukan amputasi bagian anggota badan
yang terkena u n t u k m e n y e l a m a t k a n j i w a penderita.
Keracunan makanan
Beberapa d a g i n g d a n p r o d u k d a g i n g mentah k e m u n g k i n a n m e n g a n d u n g spora Clos-
tridium perfringens. Jika daging tersebut dimasak pada suhu y a ng tidak dapat m e m -
bunuh spora, Clostridium perfringens k e m u n g k i n a n besar dapat berkembang biak
dengan baik. M a k a n a n m a s i h terlihat normal, tetapi setelah dikonsumsi atau dicerna,
bakteri akan berkembang dan mencapai jumlah yang dapat menginfeksi usus. D i
d a l a m usus, Clostridium perfringens dapat m e m b e n t u k dan m e n g e l u a r k a n enterotoksin.
Toksin ini merangsang e n z i m adenilat siklase pada dinding usus y a n g mengakibatkan
konsentrasi c A M P (adenosin monofosfat siklik) meningkat sehingga terjadi hiper-
sekresi air dan klorida pada usus dan menghambat reabsorpsi natrium. Keadaan ini
dapat m e n i m b u l k a n rasa nyeri pada perut, diare, dan kadang-kadang rasa m u a l dan
muntah. Gejala berlangsung sekitar 8-24 j a m setelah m e n g o n s u m s i makanan yang
tercemar dan berakhir 12-18 j a m kemudian.
Penyebaran penyaki t ini sangat luas dan lebih sering terjadi pada negara-negara
yang memiliki masyarakat yang m e m p u n y a i kebiasaan menyiapkan makanan dengan
cara-cara y a n g dapat m e n i n g k a t k a n perkembangbiakan Clostridium perfringens.
Penularan
Penularan bakteri Clostridiumperfringens terjadi m e l a l u i m a k a n a n y a n g t e r k o n t a m i -
nasi oleh tanah dan tinja, terutamaj i k a m a k a n a n tersebut s e b e l u m n y a d i s i m p a n dengan
cara yang m e m u n g k i n k a n bakteri berkembang biak. H a m p i r semua penyakit infeksi
Clostridium perfringens dikaitkan dengan pemasakan makanan dan daging yang k u -
rang baik, m i s a l n y a k a l d u daging, daging cincang, saus y a n g terbuat dari daging sapi,
kalkun, dan a y a m . Spora dapat bertahan hidup pada suhu masak n o r m a l . Spora dapat
tumbuh dan berkembang saat p e n d i n g i n a n , saat p e n y i m p a n a n m a k a n a n p a d a s u h u k a -
mar, dan/atau saat p e m a n a s a n y a n g tidak sempurna. K o n t a m i n a s i bakteri y a n g diper-
l u k a n u n t u k m e n i m b u l k a n gejala k l i n i s c u k u p b a n y a k , y a i t u s e k i t a r 10^ b a k t e r ip e r
gram makanan.
Hampir semua orang rentan terhadap penyakit ini. Berdasarkan penelitian yang
dilakukan terhadap sukarelawan, tidak ditemukan adanya kekebalan setelah terjadi
infeksi berulang kali.

Pencegahan
Upaya yang dapat dilakukan untuk mencegah penularan infeksi bakteri ini adalah
sebagai berikut.
• Penyuluhan tentang penyiapan dan penyediaan m a k a n a n dalam skala besar perlu

diberikan pada masyarakat, khususnya makanan dengan bahan baku daging. Jika
m e m u n g k i n k a n , m a k a n a n s e b a i k n y a d i s a j i k a n setelah d i m a s a k , saat m a s i h panas.
• D a g i n g disaj ikan segera setelah d i m a s a k selagi m a s i h panas atau segera d i m a s u k k a n
ke d a l a m p e n d i n g i n y a n g d i r a n c a n g secara tepat atau d i s i m p a n d id a l a m l e m a r i e s
sampai w a k t u penyajian. Apabila diperlukan, m a k a n a n tersebut dipanaskan kem-
bali secara sempurna. Jangan m e m a s a k daging setengah matang kemudian dipa-
naskan kembali pada hari berikutnya, kecuali daging tersebut telah disimpan pada
temperatur yang aman. Potongan daging dengan ukuran besar hendaknya langsung
dimasak. U n t u k proses pendinginan cepat, m a k a n a n y a n g telah d i m a s a k dimasuk-
kan k e d a l a m alat pendingin cepat.
Pengobatan
Pengobatan dapat d i l a k u k a n dengan cara berikut.
• Pembersihan luka. Tindakan bedah perlu dilakukan untuk menghilangkan jaringan

nekrotik yang menjadi tempat pertumbuhan bakteri.
• Pemberian antibiotik.
• Pemberian oksigen hiperbarik. Penderita d i m a s u k k a n k edalam k a m a r berisi ok-
sigen bertekanan tinggi beberapa kali sehari selama setengah j a m . Perlakuan ini
m e n a i k k a n tingkat oksigenasi jaringan sehingga dapat m e n g h a m b a t pertumbuhan
bakteri anaerob tersebut.
Bahan pemeriksaan berupa spesimen luka, nanah, jaringan, dan tinja penderita. Bahan
pemeriksaan dibiakkan dalam media tioglikolatdan agar darah, selanjutnya diinkubasi
dalam suasana anaerob. U j i konfirmasi dapat dilakuka n dengan uji reaksi biokimia.
Isolat m u r n i dapat dibiakkan dalam perbenihan agar darah untuk melihat adanya
hemolisis. Pemeriksaan lain dapat dilakukan dengan uji lesitinase dengan membiakkan
bakteri d id a l a m m e d i a k u n i n g telur. J i k a positif, a k a n terjadi presipitasi ( k e k e r u h a n )
di sekitar k o l o n i bakteri.
Helicobacter pylori
Pada tahun 1982, R o b i n W a r r e n dan Barry Marshall dari Australiaberhasil m e n e m u k a n
dan m e m b i a k k a n suatu jenis bakteri yang berbentuk spiral dan t u m b u h dalam suasana
mikroaerofilik. Bakteri yang diisolasi dari jaringan biopsi penderita gastritis kronis
dan ulkus peptikum ini hampir selalu ditemukan pada penderita radang lambung,
ulkus usus dua belas jari, atau t u k a k lambung. Bakteri ini semula diberi n a m a Campy-
lobacter pyloridis karena struktur selnya mirip dengan spesies Campylobacter jejuni
y a n g j u g a dapat m e n g i n f e k s i saluran cerna. B a r u pada tahun 1989, berdasarkan sifat-
sifat fungsional dan e n z i m a t i s n y a, bakteri ini diberi n a m a Helicobacter pylori.
^^^^^^K Bab 10 - Bakteri Patogen pad a Saluran Cerna 149
Helicobacter pylori merupakan bakteri Gram-negatif, berbentuk spiral, dan tum-

buh dalam suasana mikroaerofilik. Bakteri ini berukuran panjang 3 fim dan diameter
0,5 f i m serta m e m i l i k i 4 - 6 flagel sehingga dapat bergerak dengan bebas.
Helicobacter pylori merupakan bakteri patogen yang ditularkan melalui oral, yaitu
melalui bahan makanan yang tercemar, dan sering kali ditularkan dari ibu k e bayi
tanpa ada gejala y a n g jelas atau asimtomatis. Bakteri ini m e r u p a k a n penyebab gastri-
tis k r o n i s d a n b e r h u b u n g a n erat dengan penyakit ulkus p e p t i k u m , gastritis atrofi, dan
kanker pada sistem pencernaan. B a k t e r i ini dapat berkolonisasi di saluran cerna bagian
bawah dan d i saluran hepatobilier. Infeksi Helicobacter pylori juga telah ditetapkan
sebagai salah satu faktor risiko adenokarsinoma lambung dan limfoma. Lokasi infeksi
H e l i c o b a c t e r p y l o r i adalah lambung bagian bawah dan mengakibatkan peradangan
yang sering kali disertai dengan komplikasi perdarahan lambung. Helicobacter pylori
berkolonisasi pertama kali di daerah antrum lambung yang tidak terlalu asam. Bakteri
ini m e n g g u n a k a n flagel dan tubuhnya yang berbentuk spiral untu k menembus lapisan
m u k o s a usus. Helicobacter pylori m e m p r o d u k s i adhesin untuk menempel pada resep-
tor yang terdapat pada membran mukosa usus. Beberapa s e n y a w a reseptor adhesin
terdiri atas f o s f a t i d i l e t a n o l a m i n , h e m a g l u t i n i n , l a m i n i n , d a n a s a m sialat. E n z i m urease
berperan penting dalam kolonisasi bakteri Helicobacter pylori di lingkungan lambung
yang asam. E n z i m urease yang terdapat d ibagian luar dan bagian dalam sitoplasma
bakteri dapat m e n g u r a i k a n urea menjadi a m o n i a dan bikarbonat sehingga dapat meng-
ubah suasana asam pada lambung. Dengan demikian, bakteri Helicobacter pylori
dapat bertahan hidup dalam lingkungan bersuasana asam. Proses tersebut sangat ber-
manfaat bagi kelangsungan hidup bakteri, tetapi bersifat t o k s i k pada sel-sel epitel
lambung dan usus.
(NH2)2C = O + + 2 H p "^^^^ • HCO3- + 2 ( N H / )
P r o d u k s i a m o n i a o l e h urease bersifat t o k s i k u n t u k sel hospes. S e l a i n i t u , k e m a m p u a n

bakteri Helicobacter pylori memproduksi enzim protease, katalase, dan fosfolipase
dapat merusak lapisan sel-sel epitel m u k o s a saluran cerna. Lipopolisakarida (LPS)
bakteri Helicobacter pylori mempunyai struktur yang unik karena selain dapat
menghambat glikosilasi lapisan mukosa usus, L P S j u g a dapat memengaruhi fungsi
pertahanan lapisan m u k o s a sehingga sel-sel epitel sangat r e n t an terhadap asam lam-
bung. L P S Helicobacter pylori m a m p u menstimulasi sekresi pepsinogen pada usus.
Peningkatan kadar pepsinogen tersebut dapat memperbesar risiko gangguan usus
berupa ulkus peptikum.
Komponen lipid A pada L P S bakteri Helicobacter pylori m e m p u n y ai struktur
yang berbeda dengan struktur L P S pada bakteri Gram-negatif yang lain. Sifat imuno-
genik L P S Helicobacter pylori lebih rendah; sifat inilah y a n g diduga menyebabkan
bakteri Helicobacter pylori bersifat lebih persisten dibandingkan dengan bakteri pato-
gen lain. D i kondisi tertentu, infeksi bakteri Helicobacter pylori dapat meningkatkan
B50 B u k u Ajar Mikrobiologi: Panduan Mahasiswa Farmasi dan Kedokteran
kadar gastrin sehingga menyebabkan peningkatan asam di dalam duodenum. Keadaan

ini a k h i r n y a dapat m e n y e b a b k an ulserasi dan ulkus duodenal.
Bahan pemeriksaan yang digunakan untuk identifikasi bakteri ini adalah jaringan
biopsi dari ulkus. Berbagai penelitian telah dikembangkan u n t u k mendeteksi bakteri
Helicobacter pylori, baik y a n g bersifat invasif m a u p u n non-invasif, m e l i p u t i uji bio-
kimia, antara lain u j i urease, katalase, pembiakan bakteri, dan identifikasi dengan
pewarnaan G r a m atau pewarnaan Giemsa. Salah satu teknik diagnosis adalah urea
b r e a t h test ( U B T ) . P a d a u j i i n i , p e n d e r i t a d i b e r i u r e a y a n g t e l a h d i l a b e l d e n g a n zat
r a d i o a k t i f ' ^ C a t a u ''^C b e r s a m a makanan. Jika positif, dalam w a k t u 3 0 menit,
yang berlabel akan dikeluarkan melalui napas penderita sehingga dapat dideteksi de-
ngan beta-counter. Beberapa teknik identifikasi secara molekuler juga telah d i k e m -
bangkan, misalnya metode reaksi rantai polimerase {polymerase chain reaction, P C R )
y a n g sangat sensitif dan spesifik. Pemeriksaan y a n g bersifat rutin adalah pemeriksaan
adanya antibodi terhadap bakteri Helicobacter pylori dalam darah dan uji antigen
pada feses penderita. A l a t diagnostik u j i E L I S A j u g a telah tersedia u n t u k u j i antibodi
terhadap Helicobacter pylori dalam serum dan saliva penderita.
Pengobatan
Eradikasi bakteri Helicobacter pylori merupakan prosedur pilihan untuk mengobati
penyakit dan menyembuhkan keluhan ulkus. Jenis antibiotik y a n g menjadi pilihan
pertama adalah klaritromisin dan amoksisilin dan disertai dengan pemberian ome-
prazol. A k a n tetapi, prevalensi resistensi primer Helicobacter pylori terus bertambah
di seluruh dunia sehingga sangat m e m e n g a r u h i keberhasilan pengobatan. Oleh sebab
itu, penggunaan antibiotik y a n g tepat dan rasional m e l a l u i u j i resistensi merupakan
faktor penting dalam penanganan infeksi yang disebabkan oleh bakteri ini.
Bacillus cereus
Bacillus cereus telah l a m a diketahui sebagai bakteri p e n y e b a b k e r a c u n a n makanan
atau gangguan saluran cerna. B a k t e r i ini termasuk dalam famili Bacillaceae, banyak
terdapat d i d a l a m t a n a h , b e r b e n t u k batang d e n g a n u k u r a n 0 , 3 - 2 , 2 |^m x 1 , 3 2 - 7 , 0 j a m ,
m e r u p a k a n bakteri Gram-positif, dan dapat m e m b e n t u k endospora.
Bacillus cereus dapat menyebabkan keracunan makanan. Keracunan terjadi karena
mengonsumsi makanan yang mengandung enterotoksin yang diproduksi oleh bakteri
ini. Keberadaan enterotoksin dalam makanan biasanya disebabkan oleh endospora
Bacillus cereus. Endospora y a n g t e r d a p a t p a d a m a k a n a n t i d a k d a p a t d i m a t i k a n se-
penuhnya oleh panas selama proses pemasakan makanan. Endospora kemudian
Bal7lO^BSwefi'p&ogeh^
bersporulasi dan berkembang sehingga membentuk toksin. Bakteri Bacillus cereus

dapat m e m p r o d u k s i toksin emetik dan 3 jenis enterotoksin, yaitu enterotoksin H B L ,
Nhe, dan EntK. Enterotoksin H B L dan enterotoksin N h e merupakan enterotoksin
yang dapat menyebabkan keracunan makanan, sedangkan enterotoksin E n t K tidak
menyebabkan keracunan makanan . Ketiga jenis enterotoksin ini bersifat sitotoksik
sehingga dapat merusak membran s el hospes. Enterotoksin non-hemolitik Nhe
merupakan enterotoksin yang menyebabkan diare pada keracunan m a k a n a n , sedangkan
toksin emetik menyebabkan m u a l , m u n t a h , dan sakit perut.
Penyakit infeksi Bacillus cereus y a n g d i t u l a r k a n m e l a l u i m a k a n a n dapat m e n i m -
bulkan gejala-gejala berikut.
1. Gejala penyakit y a n g berlangsung cepat y a n g ditandai dengan m u a l , m u n t a h , dan

sakit perut, dengan m a s a inkubasi 1-6 j a m , disebut dengan emeticform. Gejala i n i
menyerupai gejala yang disebabkan oleh bakteri Staphylococcus aureus.
2. Gejala penyakit yang berlangsung lebih lambat dengan masa inkubasi 8-16 jam,
disebut dengan diarrhealform. Bentuk ini ditandai dengan keluhan sakit perut dan
diare. Gejala keracunan ini menyerupai keracunan makanan yang disebabkan
bakteri Clostridiumperfringens.
Gejala keracunan m a k a n a n pada tipe inkubasi cepat disebabkan oleh toksin emetik
y a n g tahan panas, sedangkan tipe yang lambat disebabkan oleh enterotoksin N h e dan
enterotoksin H B L hemolitik. Diare disebabkan oleh kenaikan permeabilitas dinding
sel usus a k i b a t a k t i v a s i e n z i m adenilat siklase.
K e r a c u n a n m a k a n a n y a n g disebabkan oleh Bacillus cereus biasanya dapat sembuh
sendiri. A k a n tetapi, pemberian cairan infiis bagi pasien y a n g diare dan pemberian
antibiotik dan obat lain y a n g sesuai dapat mempercepat penanganan penderita.
m e
BAB 11
BAKTERI PATOGEN
PADA SALURAN NAPAS
• Pendahuluan
• Streptococcus
m Patogenesis
• Streptococcus pneumoniae
m Haemophilus influenzae
m Corynebacterium diphtheriae
m Mycobacterium tuberculosis
m Bordetella pertussis
m Mycoplasma pneumoniae
m Legionelia pneumophila
152
Bab 11 - Bakteri Patogen p a d a Saluran Napas 153
PENDAHULUAN
Bakteri patogen pada saluran napas merupakan golongan bakteri yang dapat menye-
babkan penyakit infeksi pada saluran napas, baik saluran napas bagian atas maupun
saluran napas bagian bawah. Bakteri penyebab penyakit infeksi y a n g paling dominan
p a d a s a l u r a n napas bagian atas adalah Streptococcus p n e u m o n i a e , y a n g dapat menye-
b a b k a n faringitis, laringitis,tonsilitis, a t a u p un epiglotitis. Jenis b a k t e ri lain y a n g dapat
m e n i m b u l k a n i n f e k s i s a l u r a n napas bagian atas adalah H a e m o p h i l u s influenzae, Cory-
nebacterium diphtheriae, Staphylococcus aureus, d a nPseudomonas aeruginosa.
Bakteri patogen pada saluran napas bagian b a w a h antara lain Bordetella pertussis dan
Mycobacterium tuberculosis. Bakteri-bakteri yang dapat menyebabkan pneumonia
adalah Streptococcus pneumoniae, C h l a m y d i apneumoniae, Legionella pneumophila,
dan Mycoplasma pneumoniae.
Streptococcus
Penggolongan Streptococcus didasarkan atas ( a ) reaksi h e m o l i s i s terhadap sel darah
m e r a h dan (b) struktur antigen dan sifat antigenik.
Reaksi iiemoiisis teriiadap sei daraii merati

R e a k s i h e m o l i s i s terhadap sel darah m e r a h telah l a m a d i g u n a k a n u n t u k menggolongkan
Streptococcus. Streptokokus p-hemolitik menghasilkan hemolisin yang mudah larut
dalam lempeng agar d a r a h d a n dapat m e l i s i s sel d a r a h m e r a h di s e k i t a r k o l o n i dengan
sempurna, sedangkan s t r e p t o k o k u s a - h e m o l i t i k melisis sel darah m e r a h secara parsial
akibat reduksi hemoglobin sehingga memperlihatkan warna kehijauan d isekitar ko-
loni. Streptokokus yang tidak menghemolisis s e ldarah m e r a h digolongkan dalam
streptokokus y - h e m o l i t i k. Streptokokus grup A hampir selalu merupakan p-hemolitik,
sedangkan grup B dapat termasuk a , p, atau y - h e m o l i t i k . Sebagian besar Strepto-
coccus p n e u m o n i a e adalah a-hemolitik, tetapi dapat menjadi p - h e m o l i t i k d a l a m sua-
sana anaerob. Metode reaksi hemolisis tidak dapat digunakan secara m u t l a k untuk
mengidentifikasi streptokokus, tetapi telah digunakan secara luas u n t u k mengidentifi-
kasi spesies Streptococcus p n e u m o n i a e dan Streptococcus pyogenes secara cepat.
struktur antigen d a n sifat antigenik

Struktur antigen dan sifat antigenik telah digunakan oleh Lancefield untuk menggo-
longkan Streptococcus secara serologi. Berdasarkan struktur antigen, Streptococcus
digolongkan m e n u r u t abjad ( A , B , C ,D , dst.). S t r u k t u r d i n d i n g sel Streptococcus grup
A paling banyak diteliti d i antara grup bakteri y a ng lain. D i n d i n g sel tersusun atas
unit-unit A^-asetilglukosamin berulang dan asam /V-asetil m u r a m a t , y a n g merupakan
komponen utama dari peptidoglikan. Dulu, Streptococcus diidentifikasi berdasarkan
reaksi serologi antigen polisakarida dinding selnya. Lancefield telah menetapkan 8 0
grup antigen spesifik. Polisakarida grup A adalah polimer dari A^-asetilglukosamin dan
ramnosa. Polisakarida inijuga dikenal dengan golongan antigen karbohidrat.
Genus Streptococcus termasuk kelompok bakteri Gram-positif yang heterogen,

berbentuk bulat, dan tersusun m e n y e r u p a i bentuk rantai. Beberapa galur Streptococcus
berperan penting dalam ekologi dan flora normal manusia dan hewan. Beberapa d i
antara galur ituj u g a bersifat patogen terhadap manusia, seperti y a n g tercantum pada
Tabel 11.1.
Klasifikasi Streptococcus, terutama untuk tujuan medis, didasarkan pada identifi-
kasi serogrup komponen d i n d i n g s e ld a nb u k a n p a d a n a m a spesies. Streptococcus
grup A m e r u p a k a n Streptococcus yang selama ini dianggap patogen dan menjadi p e -
nyebab penyakit infeksi. D u a spesies u t a m a y a n g sering m e n i m b u l k a n penyakit adalah
Streptococcus pyogenes dan Streptococcus pneumoniae.
Streptococcus pyogenes m e r u p a k a n salah satu bakteri streptokokus yan g paling
sering menginfeksi manusia. Sebanyak 5 - 1 5 % diperkirakanterdapat dalam flora nor-
m a l individu,biasanya pada saluran napas, tanpa m e m p e r l i h a t k a ntanda-tanda infeksi.
Bakteri inijuga dapat menyebabkan infeksi akut berupa faringitis, laringitis, scarlet
fever, penyakit j a n t u n g rematik, glomeruloneft-itis,dan s i n d r o m renjat toksik strepto-
kokus.
Pada tahun 1937, Shermann mengelompokkan genus Streptococcus berdasarkan
karakter fisiologis dan pertumbuhan, terutama dengan batasan suhu pertumbuhan, yaitu
{a) k e l o m p o k piogenik, m e l i p u t i Streptococcus y a n g bersifat patogen; {b) kelompok
viridan, ditandai dengan hemolisis alfa pada agar darah; ( c )k e l o m p o k laktat, m e l i p u t i
galur-galur yang m a m p u menghasilkan asam laktat dari a i r s u s u ; d a n{ d ) k e l o m p o k
enterokokus, m e n c a k u p k e l o m p o k yang serupa dengan Streptococcus faecalis.
Lancefield m e n g e m b a n g k a n klasifikasi berdasarkan sifat antigenik y a n g ditentukan
o l e h k e b e r a d a a n k a r b o h i d r a t C pad a d i n d i n g sel b a k t e r i . P a d a saat i n i , p e n g e l o m p o k a n
d i d a s a r k a n p a d a h u r u f a b j a d ( A , B ,C , D , dst).
rapa Ikjpesies; i&trepfococcas dan Per^^^ «.^«^ ff^

Grup Tipe Habitat pada
Spesies antigenik hemolisis manusia Infeksi
S. pyogenes A Beta Tenggorokan dan Faringitis, ^
saluran napas pneumonia, s c a r l e t =
f e v e r , dan impetigo
S. agalactiae B Alfa, beta, Intestin. genital, dan Infeksi saluran
gamma saluran urine urine, bisul, otitis '
media, meningitis,
dan septisemia
S. e q u i C Beta Saluran napas Impetigo dan ;
bagian atas faringitis '
S. faecalis D - Tinja Endokarditis
S. pneumoniae - Saluran napas Pneumonia, otitis
media, meningitis,
dan septisemia
S. mutans Viridan Alfa Mulut dan gigi Endokarditis dan
kerusakan gigi
Beberapa spesies Streptococcus yang cukup penting adalah Streptococcus aga-

lactiae (grup B), yang sering menyebabkan penyakit pada bayi baru lahir; Streptoco-
ccus f a e c a l i s (grup D ) , penyebab u t a ma endokarditis; dan Streptococcus viridans,
yang berpengaruh pada bakteremia, meningitis, dan pneumonia.
Streptococcus adalah bakteri Gram-positi f yang m e m i l i k i k o l o n i m i k r o s k o p i k ber-
bentuk bulat dan tersusun seperti rantai. Bakteri ini m e m i l i k i diameter 0,6-1,0 mikron,
tidak bergerak, dan tidak m e m b e n t u k spora. Streptococcus p n e u m o n i a e berbentuk di-
plokokus dan berdiameter 0,5-1,25 mikron. Bakteri ini tidak menghasilkan enzim
katalase, bersifat anaerob fakultatif, tetapi ada sebagian yang bersifat anaerob obligat.
Beberapa galur Streptococcus membentuk simpai polisakarida. Sebagian besar
Streptococcus grup A , B, dan C m e m p u n y a i simpai yang m e n g a n d u n g asam hialuronat.
S i m p a i ini terlihat paling jelas pada biakan yan g m a s i h m u d a dan dapat menghalangi
fagositosis.
D i n d i n g sel Streptococcus m e n g a n d u n g p r o t e i n a n t i g e n M , T , R d a n F, k a r b o h i d r a t ,
dan peptidoglikan.
Faktor virulensi
Streptococcus grup A m e m p r o d u k s i berbagai jenis faktor virulensi y a ng bertanggung
jawab atas berbagai j e n i s p e n y a k i t infeksi. F a k t o r - f a k t o r v i r u l e n s i tersebut m e l i p u t i
hal-hal berikut.
1. Protein M dan asam lipoteikoat.

2. Simpai asam hialuronat yang menghambat fagositosis.
3. Protein invasin, yaitu streptokinase, streptodornase, D N A s e B ,h i a l u r o n i d a s e , d a n
streptolisin.
4. Eksotoksin, yaitu toksin pirogenik (eritrogenik) yang menyebabkan ruam merah
di kulit pada scarlet fever dan sindrom renjat toksik streptokokus.
Pada Streptococcus grup A , protein R dan T m e r u p a k a n protein y a n g digunakan seba-

gai penanda epidemiologis dan belum diketahui peranannya dalam virulensi. Protein
M jelas berperan d a l a m v i r u l e n s i , yaitu pada fase k o l o n i s a s i d a n m e n g h a m b a t fago-
sitosis. L e b i h d a r i 5 0Streptococcus p y o g e n es tipe protein M telah teridentifikasi ber-
dasarkan spesifisitas antigeniknya. Protein M m e m p u n y a i peran penting d a l a m pertu-
karan dan p e m i n d a h an antigen dalam Streptococcus grup A . Protein F diduga secara
tidak langsung berperan pada pelekatan Streptococcus pyogenes pada gugus asam
amino fibronektin d ip e r m u k a a n mukosa.
Simpai Streptococcus pyogenes y a n g m e n g a n d u n g asam hialuronatsecara kimiawi
mirip dengan jaringan inangnya. Hal ini menyebabkan bakteri dapat menyembunyi-
kan sifat antigenikny a sehingga tidak dikenali sebagai antigen oleh inang. Membran
sitoplasma Streptococcus pyogenes mengandung beberapa antigen yang mirip dengan
komponen j a n t u n g manusia, otot polos, fibroblas katup jantung, dan jaringan saraf
sehingga m a m p u m e n i p u respons i m u n inang.
Kolonisasi Streptococcus pyogenes d a l a m j a r i n g a n diduga akibat k e k e l i r u a n sis-
tem pertahanan tubuh inang dalam mengenali bakteri ini sebagai suatu antigen se-
hingga m e m u n g k i n k a n bakteri masuk ke dalam jaringan inang, terutama pada saluran
156 Buku Ajar Mikrobiologi: Panduan Mahasiswa Farmasi dan Kedokteran |
napas atas atau kulit. A k i b a t n y a , bakteri dapat bermultiplikasidan menimbulkan

gejala peradangan.
Beberapa penelitian m e n u n j u k k a n b a h w a Streptococcus pyogenes menggunakan
a s a m l i p o t e i k o a t d a n p r o t e i n M p a d a d i n d i n g sel sebagai a d h e s i n u n t u k m e l e k a t p a d a
sel epitel inang.
K o l o n i s a s i p a d a s a l u r a n napas atas d a n faringitisa k u t dapat m e n y e b a r k e bagian
lain saluran napas sehingga menyebabkan infeksi pada telinga bagian tengah (otitis
m e d i a ) , s i n u s i t i s ,p n e u m o n i a , d a n b a h k a n m e n i n g i t i s . B a k t e r e m i a j u g a d a p a t b e r a k i b a t
infeksi pada t u l a n g (osteomielitis) dan sendi (artritis). Invasi Streptococcus pyogenes
dan mteraksi toksin dengan komponen darah dan jaringan m a m a l i a dapat merusak
dan m e m b u n u h sel-sel m a n g serta dapat merangsang respons peradangan y a n g m e r u -
gikan sel inang.
Hialuronidase merupakan protein yang berperan dalam penyebaran infeksi dengan
cara m e n g u r a i k a n asam hialuronat y a n g m e r u p a k a n k o m p o n e n penting pada bahan
dasar j a r i n g a n ikat.
Streptokinase berperan d a l a m peristiwa lisis fibrin. E n z i m ini dapat mengubah
plasminogen serum manusia menjadi plasmin, suatu enzim proteolitikyang m a m p u
menghancurkan fibrin dan protein-protein lain. Streptodornase A - D adalah enzim
yang m a m p u m e l a k u k a n depolimerisasi D N A , sedangkan streptodornase B dan O da-
pat m e m e n g a r u h i aktivitas R N A .
P A T O G E N E S I S
Streptococcus pyogenes m e r u p a k a n bakteri patogen yan g dapat menginfeksi inang
dengan m e l a k u k a n kolonisasi dan multiplikasi dengan cepat serta m a m p u mengelabui
sistem i m u n sel inang.
Sebagian besar penyakit yang disebabkan oleh infeksi Streptococcus pyogenes
terjadi pada saluran napas, kulit, dan sistem peredaran darah. Streptococcus pyogenes
m e r u p a k a n penyebab u t a m a tonsilitis dan faringitis. Scarlet fever dan s i n d r o m renjat
toksik streptokokus merupakan respons sistemik terhadap peredaran toksin-toksin
bakteri d a l a m peredaran darah. Selain i t u ,d e m a m r e m a t i k dan glomerulonefritis m e -
rupakan penyakit y a n g timbul setelah infeksi Streptococcus. K e r u s a k a n katup-katup
jantung akibat invasi Streptococcus grup A y a n g m e n y e b a b k a n d e m a m r e m a t i kterjadi
pada l - - 3 % i n f e k s i y a n g tida k ditangani dengan baik. Glomerulonefi-itisa k u t terjadi 3
m i n g g u setelah infeksi Streptococcus. L e b i h dari 2 3 % anak-anak y a n g kulitnya terin-,
feksi oleh galur tertentu Streptococcus m e n g a l a m i nefritis atau hematuria.
G e j a l a klinis
Beberapa jenis infeksi yang disebabkan oleh Streptococcus grup A {Streptococcus
pyogenes) adalah sebagai berikut.
Faringitis
Faringitis merupakan jenis infeksi yang paling sering terjadi akibat Streptococcus^
pyogenes. Bakteri virulen melekat pada epitel faring dengan bantuan asam lipoteikoat!
Bdb 11 - Bakteri Patogen p a d a Saluran Napas 157
y a n g terdapat pada p e r m u k a a n pili. Pada bayi dan anak-anak, infeksi ini dapat meluas
dan menyebabkan otitis media, bahkan infeksi pada selaput otak.
Impetigo
Impetigo merupakan infeksi lokal pada kulit, khususnya pada anak-anak. Infeksi ini
sangat m e n u l a r di kalangan anak kecil.
Endoifarditis
Infeksi katup j a n t u n g akibat bakteremia Streptococcus pyogenes y a n g menetap di k a -
tup-katup jantung menyebabkan endokarditis ulseratifakut.
Giomeruionefritis a§€ut
Kondisi ini t i m b u l setelah beberapa m i n g g u terinfeksi oleh Streptococcus pyogenes.
Penyakit ini diawali dengan terbentuknya kompleks antigen antibodi pada selaput ba-
salis g l o m e r u l u s , y a n g m e r a n g s a n g respons sistem k o m p l e m e n dan imunitas seluler
dan dapat menyebabkan kerusakan pada sel-sel glomerulus. Pada kondisi nefritis
akut, ditemukan darah dan protein dalam urine dan terjadi edema, hipertensi, dan
retensi nitrogen.
Demam rematili
D e m a m rematik m e r u p a k a n salah satu kelainan yang paling berat akibat infeksi Strep-
tococcus grup A . Kondisi demam rematik biasanya didahului oleh infeksi Strepto-
coccus grup A 1 - 4minggu sebelumnya. Jika tidak diobati dengan baik, bakteri ini
akan m a s u k k ed a l a m k a t u p - k a t u p j a n t u n g . W a l a u p u n m e k a n i s m e terjadinya demam
r e m a t i k b e l u m d i k e t a h u i secara pasti, diduga b a h w a respons peningkatan imun yang
berlebihan dapat menyebabkan deformitas katup jantung dan granuloma perivaskular
pada m i o k a r d i u m . Gejala spesifik d e m a m rematik adalah demam, lesu, poliartritis
y a n g berpindah-pindah, dan peradangan pada beberapa bagian jantung. Infeksi Strep-
tococcus berulang a k a n memperberat d e m a m rematik.
Erisipelas
Erisipelas m e r u p a k a n infeksi Streptococcus grup A pada kulit dengan gejala edema
masif dengan pinggiran menonjol.
Demam purpuraiis
D e m a m purpuraiis merupakan demam yang t i m b u l jika Streptococcus masuk k e
dalam uterus setelah proses melahirkan.
Baiiteremia
Infeksi Streptococcus yang menyebar secara sistemik dapat m e n y e b a b k a n sindrom
renjat toksik streptokokus, yaitu sindrom yang disebabkan oleh eksotoksin pirogenik
atau superantigen yan g dilepaskan oleh Streptococcus pyogenes ketika terjadi penye-
baran secara sistemik.
i 158 Buku Ajar Mikrobiologi: Panduan Mahasiswa Farmasi dan Kedokteran
Bahan pemeriksaan
B a h a n u n t u k pemeriksaan laboratorium dapat diperolah dari usap tenggorokan, darah,;
atau serum imtuk u j i serologi.
Cara pemeriksaan
Pemeriksaan langsung
Pemeriksaan langsung dilakukan dengan m e m b u a t preparat dari spesimen dan k e m u -
d i a n m e l a k u k a n p e w a r n a a n G r a m . K o l o n i m i k r o s k o p i k t e r l i h a t b e r b e n t u k b u l a t d a n ,^
tersusun seperti rantai.
Perbenihan
Spesimen pemeriksaan dibiakkan dalam media agar darah. Streptococcus grup A akan '
m e m p e r l i h a t k a n hemolisis d a l a m lempeng agar darah. Inkubasi d a l a m kondisi CO^
1 0 % dapat mempercepat terjadinya hemolisis. Sensitivitas terhadap basitrasin juga
dapat m e m b e d a k a n galur-galurStreptococcus. L e b i h dari 9 5 % Streptococcus pyogenes |
sensitif terhadap basitrasin.
Uji seroiogi
U j i i n i d i l a k u k a n u n t u k m e n g e t a h u i titer antibodi d a l a m s e r u m penderita, t e r u t a m a
antibodi terhadap streptolisin O pada infeksi saluran napas dan anti-hialuronidase
pada i n f e k si kulit. S e l a i n i t u ,j u g a dapat ditetapkan adanya titer antibodi terhadap
s t r e p t o k i n a s e , D N A s e , d a n p r o t e i n M . U j i s e r o l o g i d i l a k u k a n d e n g a n m e n g a d s o r p s i k a n ||
antigen spesifik pada sel darah m e r a h domba, k e m u d i a n m e r e a k s i k a n n y a dengan s e -
rum penderita. Reaksi aglutinasi antara antigen dan antibodi yang terjadi dalam
beberapa m e n i t dapat m e n u n j u k k a n titer antibodi penderita.
Pengobatan dan pencegahan

Penisilin G merupakan antibiotik pilihan pertama untuk mengobati Streptococcus
grup A . Saat i n i , s e m u a Streptococcus grup A peka terhadap penisilin dan sebagian
besar peka terhadap eritromisin. N a m u n demikian, pemeriksaan resistensi terhadap
antibiotik sangat p e n t i n g d i l a k u k a nd a l a m p e m b e r i a n obat y a n g r a s i o n a l . U j i k e p e k a a n
antibiotik serta penentuan dosis dan l a m a pemberian sangat penting d i l a k u k a n u n t u k
mencapai pengobatan yang optimal, terutama untuk kasus endokarditis.
S a m p a i saat i n i ,b e l u m ada v a k s i n y a n g dibuat u n t u k p e n c e g a h a n i n f e k s i Strepto-
coccus. N a m u n , beberapa u p a y a telah d i l a k u k a n u n t u k m e n g u j i protein M spesifik
sebagai calon vaksin.
streptococcus pneumoniae
Streptococcus pneumoniae merupakan bakteri diplokokus Gram-positif, tidak m e m -
bentuk spora, tidak m e m p u n y a i flagel, berbentuk seperti lanset, biasanya berpasangan
dan berselubung terutama galur y a n g virulen, seperti pada G a m b a r 11.1. Diplokokus
ini pertama kali d i t e m u k an dalam saliva manusia oleh Stemberg dan Pasteur pada
tahun 1881 di tempat yang terpisah. Walaupun kedua i l m u w a n ini berhasil m e n i m b u l -
kan kondisi septisemia pada kelinci, mereka tidak menghubungkan kondisi tersebut
dengan penyakit pneumonia. Baru pada tahun 1886, Frunkel dan Weichselbaum
mengetahui b a h w a bakteri diplokokus ini dapat m e n y e b a b k an pneumonia lobaris.
Bakteri Streptococcus pneumoniae biasanya hidup sebagai flora n o r m a l dalam sa-
luran napas bagian atas, tetapi dapat menyebabkan penyakit pneumonia, sinusitis,
otitis, meningitis, dan infeksi lain.
Bakteri Streptococcus pneumoniae dalam sputum kering y a n g tidak terkena sinar
matahari langsung dapat bertahan selama beberapa bulan. Bakteri ini hanya bertahan
selama beberapa hari d a l a m perbenihan biasa dan mati oleh sinar m a t a h a r i langsung.
Streptococcus pneumonia e rentan terhadap senyawa antiseptik, seperti fenol, k a l i u m
permanganat, HgCl2, d a n sabun.
Struktur antigen
A n t i g e n u t a m a pada bakteri Streptococcus pneumoniae adalah simpai polisakarida
y a n g m e n e n t u k a n sifat virulensi bakteri dan lima jenis tipe spesifik. Jika bakteri ini
direaksikan dengan serum anti-spesifik, selubung bakteri akan m e m b e n g k a k. Reaksi
ini disebut dengan reaksi Quellung.
G a m b a r 11. 1 S t r e p t o c o c c u s p n e u m o n i a e terlihat sebagai sepasang diplokokus dengan meng-

gunakan mikroskop elektron.
Bakteri Streptococcus p n e u m o n i a e m e r u p a k a n penyebab u t a m a penyakit pada saluran
napas, p n e u m o n i a lobaris. Selain itu, bakteri i n i dapat m e n i m b u l k a n sinusitis, otitis
media, osteomielitis, artritis, peritonitis, ulserasi kornea, dan meningitis. K o m p l i k a s i
dapat terjadi dari p n e u m o n i a lobaris, berupa septisemia, empisema, dan endokarditis.
P e m e r i k s a a n laboratorium
B a k t e r i S t r e p t o c o c c u s p n e u m o n i a e d a p a t t u m b u h d e n g a n b a i k p a d a s u h u 37,5°C d a l a m
media dengan p H7,6-7,8 d a l a m suasana aerob dan fakultatif anaerob. Bakteri ini
akan membentuk koloni bulat kecil yang dikelilingizona kehijauan dalam perbenihan
lempeng agar darah. Streptococcus pneumoniae menyebabkan lisis d a l a m larutan
empedu 1 0 % atau larutan natrium desoksikolat 2 %dalam w a k t u 1 0menit; sifat i n i
penting untuk membedakan Streptococcus p n e u m o n i a e dari Streptococcus viridans.
Bakteri Streptococcus pneumoniae dapat meragi inulin. P e r t u m b u h a n bakteri i n i di-
hambat oleh optokin. Untuk memperoleh perbenihan yang m u m i dan mengetahui
v i r u l e n s i b a k t e r i i n i ,b a h a n p e m e r i k s a a n d i s u n t i k k a n secara i n t r a p e r i t o n i u mp a d a t i k u s
. putih.
Pengobatan J | |
Sebagian besar tipe Streptococcus pneumoniae sensitif terhadap penisilin. Pada k a s ^
pneumonia dan septisemia, dosis penisilin yang dianjurkan adalah 500.000-1.000.000
satuan unit setiap hari, sedangkan pada kasus meningitis, diperlukan dosis yang lebih
tinggi agar dapat mencapai sawar darah otak.
P a d a saat m i , b a k t e r i Streptococcus p n e u m o n i a e d i k e t a h u i telah resisten terhadap
berbagai jenis antibiotik, seperti tetrasiklin, eritromisin,dan linkomisin .
H a e m o p h i l u s influenzae d i t e m u k a n oleh Pfeififer pada t a h u n 1892 pada w a k t u terjadi
wabah influenza. Bakteri ini ternyata merupakan penyebab infeksi paru sekunder da-
lam wabah tersebut.
Haemophilus influenzae merupakan kokobasilus Gram-negatif dengan ukuran
0 , 2 - 0 , 3 | i m X 0 , 5 - 0 , 8 \mv d a n m e m p u n y a i s i m p a i y a n g d a p a t d i t e n t u k a n d e n g a n reaksi
Quellung.
Bakteri ini tidak bergerak dan memerlukan faktor-faktor pertumbuhan yang ter-
dapat d id a l a m d a r a h u n t u k p e r t u m b u h a n n y a . H a e m o p h i l u s berasal dari k a t a haemo
(berarti darah) dan philos (berarti menyukai).
D a l a m media perbenihan, kolgni bakteri Haemophilus influenzae dapat berbentuk
koloni kasar atau koloni halus. K o l o n i kasar dibentuk oleh bakteri yang tidak bershnpai
yang berasal dari saluran napas, sedangkan koloni halus dibentuk oleh bakteri yang
bersimpai yang berasal dari penyakit-penyakit invasif lain. Bakteri Haemophilus^
influenzae yang berkoloni halus dianggap virulen dan secara serologi dibagi dalam 6
tipe (a-f), yaitu berdasarkan senyawa penyusun simpai Beberapa penelitian menun-
jukkan bahwa Haemophilus influenzae yang tidak bersimpai dapat menyebabkan
penyakit saluran napas kronis, terutama pada orang dewasa, sedangkan Haemophilus
influenzae y a n g bersimpai merupakan penyebab berbagai penyakit invasif, seperti
meningitis, selulitis, pneumonia, p e r i k a r d i t i s , d a ne p i g l o t i t i s a k u t . B a k t e r i \ipe b
merupakan penyebab sebagian besar penyakit i n v a s i f Imunitas terhadap bakteri ini
ditujukan terhadap substansi polisakarida simpai tipe b tersebut.
Beberapa spesies m e m e r l u k a n faktor X dan N A D . Faktor X adalah suatu derivat
hemoglobin yang termostabil; N A D (nikotinamida adenin dinukleotida) juga dikenal
sebagai koenzim Iatau faktor V yang termolabil. Haemophilus influenzae m e m e r l u k a n
kedua faktor tersebut untuk pertumbuhannya. Faktor X dapat diperoleh dari ekstrak
ragi dan juga dapat dihasilkan oleh beberapa bakteri, seperti Staphylococcus aureus.
Spesies Haemophilus u m u m n y a peka terhadap pendinginan dan pengeringan. Bakteri-
bakteri ini merupakan parasit pada manusia dan h e w a n , terutama sebagai penghuni
k o m e n s a l s a l u r a n napas bagian atas pada m a n u s i a . S e k i t a r 3 0 % a n a k sehat d i p e r k i r a k a n
m e m i l i k i Haemophilus influenzae dalam sekret orofaring dan sekret hidungnya. Pada
orang dewasa, bakteri ini d i t e m u k a n dalam persentase yang relatif tinggi. Mekanisme
virulensi galur-galur Haemophilus influenzae tertentu dan terjadinya infeksi yang
berat pada epiglotis, laring, atau percabangan bronkus belum diketahui dengan pasti.
Identifikasi spesies H a e m o p h i l u s y a n g penting pada m a n u s i a didasarkan atas reaksi
hemolisis dan kebutuhan faktor X dan faktor V. S e m u a spesies Haemophilus mereduksi
nitrat, kecuali H a e m o p h i l u s ducreyi.
Haemophilus influenzae menyebabkan meningitis bakterial akut pada bayi dan
anak-anak kecil, serta m e r u p a k a n penyebab beberapa penyakit infeksi bakteri pedia-
trik lain. Pada orang dewasa, bakteri ini sering dihubungkan dengan penyakit paru
kronis.
Pembiakan Haemophilus m e m e r l u k a n media perbenihan agar cokelat dan perbe-
n i h a n L e v i n t h a l (Sc F i i d e . H a e m o p h i l u s d a p a t t u m b u h s e b a g a i s a t e l i t d i s e k i t a r b a k t e r i -
bakteri lain, seperti stafilokokus hemolitik, y a n g juga terdapat dalam spesimen klinik.
K o l o n i - k o l o n i satelit ini t u m b u h lebih subur dibandingkan dengan k o l o n i - k o l o n i lain
y a n g t u m b u h berjauhan dari stafilokokus tersebut. H a l ini karena bakteri stafilokokus
menghasilkan faktor V yang diperlukan untuk pertumbuhan Haemophilus.
Pertumbuhan optimum p a d a s u h u 37°C d a n p H 7 , 4 - 7 , 8 . Inkubasi pada suasana
CO^ 1 0 % dapat m e n i n g k a t k a n pertumbuhan, bahkan kadang-kadang diperlukan oleh
beberapa galur tertentu. Haemophilus influenzae y a n g berasal dari penyakit-penyakit
invasif, yaitu bakteri Haemophilus tipe b y a n g ada dalam.darah dan cairan sere-
brospinal, dapat m e m b e n t u k koloni mengilat dan mukoid. Koloni-koloni yang halus
sering kali berubah menjadi koloni yang kasar karena kehilangan k e m a m p u a n m e m -
bentuk simpai. Tipe koloni berhubungan dengan struktur antigen d a nvirulensi
bakteri.
Haemophilus bersifat aerob dan anaerob fakultatif Beberapa bakteri Haemophilus
influenzae dapat membentuk indol. Reaksi fermentasi atau peragian gula biasanya
tidak dipergunakan dalam identifikasi bakteri ini.
Bubu Ajar Mikrobiologi: Panduan Mdhasisw^^ Farmasi'dan Kedokteran •
Haemophilus influenzae sangat peka terhadap disinfektan dan kekeringan. Bakteri

a k a n m a t i p a d a s u h u 55°C d a l a m w a k t u 3 0 m e n i t . B i a k a n b a k t e r i i n i s u k a r dipelihara/
dipertahankan d idalam laboratorium karena bersifat autolitik. Cara penyimpanan
yang terbaik adalah dengan liofilisasi atau beku-kering.
Struktur antigen
A n t i g e n penentu u t a m a Haemophilus influenzae yang bersimpai adalah polisakarida
simpai. Polisakarida i n i m e n e n t u k a n c m khas tipe bakteri dan menjadi dasar penggo-
longan bakteri tersebut d a l a m 6 serotipe (a-f). Penyelidikan m e n u n j u k k a n b a h w a tipe
koloni berhubungan dengan struktur antigen dan vu-ulensi bakteri. Perubahan bentuk
bakteri y a n g terjadi setelah bakteri dibiakkan dalam perbenihan m e n u n j u k k a n adanya
mutasi berupa hilangnya kemampuan bakteri membentuk polisakarida simpai.
T i p e s e r o l o g i j e n i s p o l i s a k a r i d a y a n g d i l e p a s k a n s e c a r a in v i t r o a t a u in v i v o dapat
ditentukan d e n g a n u j i presipitasi, difusi agar, hemaglutinasi, atau flokulasi.
K a r e n a bakteri tipe b merupakan penyebab penyakit pada lebih dari 9 5 % penyakit
invasif, t e m u a n antigen simpai tipe b dalam cairan tubuh penderita dapat menetapkan
diagnosis secara khas dan cepat.
P a t o g e n e s i s dan gejala penyakit

Infeksi H a e m o p h i l u s influenzae dapat terjadi setelah menghuaip droplet yang berasal
dari penderita, penderita baru sembuh, atau carrier. M a n u s i a merupakan satu-satunya
reservoir bakteri ini. T e m u a n Haemophilus influenzae bersimpai, terutama tipe b , d i
dalam sputimi atau cairan telinga merupakan petunjuk adanya invasi Haemophilus ke
dalam jaringan.
Antibodi terhadap polisakarida tipe b,baik yang diperoleh karena infeksi alamiah
m a u p u n karena vaksinasi, dapat mencegah invasi bakteri ke dalam jaringan.
Haemophilus influenzae menyebabkan sejumlah infeksi pada saluran napas bagian
atas, seperti faringitis, otitis m e d i a , d a n sinusitis, y a n g berperan p e n t i n g p a d a penyakit
paru kronis. Selain itu, infeksi saluran napas agaknya menjadi sumber invasi bakteri
ke*dalam peredaran darah dan penyebaran ke bagian organ tubuh yang lain.
Bakteri Haemophilus yang penting diperhatikan dalam dunia medis adalah sebagai
berikut.
• Haemophilus influenzae tipe b,yang paling sering menjadi penyebab meningitis

bakterial akut pada bayi dan anak-anak.
• Haemophilus influenzae (basilus Koch-Weeks).
• Haemophilus ducreyi (basilus Ducrey).
Penyakit terpenting y a n g disebabkan oleh Haemophilus influenzae adalah meningitis

bakterial akut. Penyakit ini jarang terjadi pada bayi berusia kurang dari 3 bulan dan
tidak u m u m d i j u m p a i pada a n a k - a n a k berusia di atas 6 t a h u n . Pada anak-anak, selain
meningitis, bakteri inijuga menyebabkan epiglotitis bakterial akut.
Bahan pemeriksaan dapat menggunakan cairan serebrospinal, sputum, atau cairan te-
linga. Bahan pemeriksaan selanjutnya diuji dengan pewarnaan Gram dan juga dita-
nam pada perbenihan agar cokelat yang dieramkan dalam suasana CO^ 10%.
Staphylococcus streak technicjue dapat d i l a k u k a n u n t u k m e n g i s o l a s i Haemophilus
influenzae, terutama dari bahan pemeriksaan yang tidak terkontaminasi oleh bakteri
lain, misalnya cairan serebrospinal dan darah.
Reaksi Ouellung yang khas sangat membantu diagnosis, kecuali untuk bakteri-
bakteri tidak bersimpai y a n g berasal dari saluran napas. Deteksi antigen polisakarida
simpai dalam cairan tubu h juga sangat bermanfaat untuk menegakkan diagnosis me-
ningitis. Keberadaan antigen yang khas d i dalam serum atau cairan serebrospinal
memberikan diagnt)sis presumtif adanya infeksi Haemophilus influenzae walaupun
pada pembiakan tidak memberikan hasil positif
P e n c e g a h a n dan pengobatan
Vaksinasi merupakan upaya pencegahan terbaik untuk menghindari infeksi Haemo-
philus influenzae. V a k s i n yang berasal dari polisakarida simpai yang telah berhasil
dibuat masih m e m e r l u k a n uji klinik lanjutan. A k a n tetapi, berbagai hasil uji penda-
huluan memberikan harapan y a n g sangat baik.
Pemilihan antibiotik yang akan digunakan dalam pengobatan infeksi Haemophilus
sebaiknya ditentukan berdasarkan uji kepekaan s e c a r a in v i t r o . W a l a u p u n kebanyakan
Haemophilus influenzae peka terhadap ampisilin, kloramfenikol, tetrasiklin, sulfona-
mida, dan kotrimoksazol, baik terapi tunggal dengan salah satu obat m a u p u n kombi-
nasi obat-obat tersebut, kepekaan bakteri dan hasil suatu terapi tidak dapat diperkirakan
dan diramalkan. Haemophilus influenzae tipe L-form y a n g resisten terhadap penisilin
dapat timbul selama pengobatan dengan penisilin; beberapa galur Haemophilus in-
fluenzae dapat m e m b e n t u k enzim penisilinase.
Corynebacterium dipittlieriae
Bakteri Corynebacterium diphtheriae berbentuk ramping, berukuran 1,5-5 }im x
0,5-1 |im, dan salah satu ujung biasanya menggembung. Bakteri Gram-positif ini
tidak berspora dan tidak bergerak.
Corynebacterium diphtheriae sangat peka terhadap disinfektan, tetapi dapat ber-
tahan dalam air mendidih selama 1 m e n i t d a n p a d a s u h u 58°C s e l a m a IO menit. Bakteri
ini biasanya menyerang saluran napas, terutama laring, amandel, tonsil, tenggorokan,
dan nasofaring. Infeksi bakteri j u g a dapat terjadi pada rongg a h i d u n g bagian depan,
hidung bagian dalam, m u l u t , mata, telinga tengah, dan vagina w a l a u p u n sangat jarang
terjadi.
164 Buku Ajar Mikrobioiogh Panduan Mahasiswa Farmasi dan Kedokteran
Corynebacterium diphtheriaemenyebabkan penyakit difteri. P e n y a k i t ini sering

menyerang anak-anak berusia kurang dari 15tahun yang tidak mendapatkan imuni-
sasi, t e r u t a m a usia 1-9 t a h u n . Difteri j u g a dapat terjadi p a d a o r a n g d e w a s a y a n g t i d a k
divaksinasi d a n p a d a b a y i b a r u lahir.
Difteri m e r u p a k a n penyakit infeksi akut, dengan m a s a inkubasi 1-7 hari. B a k t e r i ditu-
larkan melalui kontak hubungan dekat atau melalui percikan ludah dari batuk dan
bersin penderita. Penularan dapat pula terjadi melalui benda atau m a k a n a n y a n g telah
terkontaminasi dan melalui udara yang dicemari oleh penderita yang akan sembuh
atau carrier.
Jalan m a s u k i n f e k s i y a n g u m u m adalah m e l a l u i saluran napas bagian atas, t e m p a t
bakteri berkembang biak pada lapisan superfisial selaput lendir. Setelah m a s u k k e
dalam tubuh, bakteri melepaskan toksin atau racun yang akan menyebar melalui darah
dan dapat m e n y e b a b k a n kerusakan jaringan d iseluruh tubuh, terutama j a n t u n g dan
saraf. B a k t e r i biasanya b e r k e m b a n g biak p a d a atau di sekitar p e r m u k a a n selaput lendir
mulut atau tenggorokan dan menyebabkan peradangan. Peradangan dapat menyebar
dari tenggorokan k epita suara dan dapat menyebabkan pembengkakan sehingga sa-
luran udara menyempit dan terjadi gangguan pemapasan.
Beberapa gejala klinik yang dijumpai adalah sebagai berikut.
• M u a l saat m e n e l a n , n y e r i tenggorokan, batuk keras, dan suara m e n j a d i parau.

• M u a l dan muntah.
• D e m a m dan sakit kepala.
• Denyut jantung meningkat.
• Terbentuk selaput^membran yang tebal, berbintik, b e r w a m a hijau kecokelatan
atau keabu-abuan d ik e r o n g k o n g a n sehingga sukar sekali menelan dan terasa sa-
kit.
• Apabila difteri bertambah parah, tenggorokan bengkak sehingga penderita sesak
napas bahkan y a n g lebih m e m b a h a y a k a n , jalan napas dapat tertutup sama sekali.
• Kelenjar akan membesar d a n n y e r i d is e k i t a r leher.
• Telinga kadang kala terasa sakit akibat peradangan.
• P e m b e n g k a k a n kelenjar getah bening pada leher.

Infeksi Corynebacterium diphtheriae dapat dicegah dengan pemberian vaksin D P T
(Difteri, Pertusis, dan Tetanus) pada balita untuk meningkatkan daya tahan tubuh
terhadap serangan penyakit tersebut. A k a n tetapi, kekebalan h a n y a bertahan sekitar 1 0
tahun. O l e h k a r e n a i t u ,i m u n i s a s i d i a n j u r k a n u n t u k d i u l a n g i setiap 1 0t a h u n .
Pengobatan penderita difteri dilakukan dengan m e m b e r i k a n antitoksinu n t u k m e n -
c e g a h t e r j a d i n y a i k a t a n - i k a t a nl e b i h l a n j u t a n t a r a t o k s i n y a n g t e r d a p a t d i d a l a m darah
dan sel-sel j a r i n g a n y a n g m a s i h utuh. Penisilin atau antibiotik lain, seperti tetrasiklin
dan eritromisin,dapat diberikan u n t u k mencegah infeksi sekunder dan u n t u k peng-
obatan chronic carrier. a
Bab 11 - Bakteri Patogen p a d a Saluran Napas 165^
Epidemiologi
Penyakit difteri dapat berjangkit d iseluruh dunia. M a n u s i a merupakan satu-satunya
hospes a l a m i a h . B a k t e r i difteri m e n g h u n i saluran napas bagian atas dan dapat menye-
rang orang lain melalui droplet. Dalam klinik, luka-luka pascabedah kadang kala
dapat terinfeksi oleh bakteri difteri.
Mycobacterium tuberculosis
Mycobacterium tuberculosis berbentuk batang lurus atau bengkok, dengan panjang
1-4 m i k r o n dan lebar 0 , 2 - 0 , 8 m i k r o n . M y c o b a c t e r i u m tuberculosis dapat hidup t u n g -
gal atau bergerombol. Ciri-ciri lain bakteri ini adalah tidak bergerak, tidak berspora,
dan tidak bersimpai. Bakteri ini merupakan bakteri G r a m - p o s i t i f yang bersifat tahan
asam karena memiliki asam mikolat. Bakteri ini tampak seperti m a n i k - m a n i k atau
tidak terwarnai secara merata pada pewarnaan. Mycobacterium tuberculosis merupa-
kan aerob obligat yang dapat tumbuh dengan baik dalam jaringan yang memiliki
kadar oksigen y a n g tinggi seperti paru-paru. Selain itu, bakteri ini bersifat patogen
intraseluler pada h e w a n dan manusia dan biasanya menginfeksi fagosit mononuklear
seperti makrofag. P e r t u m b u h a n bakteri Mycobacterium tuberculosis berlangsung cu-
kup lambat dengan waktu generasi 12-18 jam. Permukaan sel Mycobacterium
tuberculosis bersifat h i d r o f o b i k dan d i n d i n g sel m e m p u n y a i kandungan lemak yang
tinggi.
Penularan
Tuberkulosis adalah penyakit menular yang sebagian besar disebabkan oleh bakteri
M y c o b a c t e r i u m tuberculosis. Spesies lain y a n g dapat m e n y e b a b k a n tuberkulosis ada-
lah M y c o b a c t e r i u m kansasii, M y c o b a c t e r i u m bovis, dan M y c o b a c t e r i u m intracellulare.
Bakteri tuberkulosis dapat bertahan hidup pada keadaan udara kering m a u p u n keadaan
dingin. H a l ini terjadi karena bakteri dapat berada d a l a m keadaan d o r m a n dan selan-
j u t n y a dapat aktif menginfeksi kembali.
S u m b e r p e n u l a r an u t a m a adalah penderita tuberkulosis. Pada saat batuk atau ber-
sin, penderita m e n y e b a r k a n bakteri dalam droplet. Bakteri Mycobacterium tuberculosis
yang terdapat d i dalam droplet dapat bertahan dalam suhu kamar selama beberapa
j a m . B a k t e r i a k a n m a s u k k ed a l a m paru-paru m e l a l u i saluran napas j i k a droplet ter-
sebut t e r h i r u p . S e t e l a h m a s u k k ed a l a m p a r u - p a r u , b a k t e r i dapat m e n y e b a r k e bagian
tubuh lain m e l a l u i sistem peredaran darah dan sistem saluran limfa.
Patogenesis
Tuberkulosis dapat menyerang semua kelompok umur, baik menyebabkah kelainan
pada paru-paru ataupun kelainan pada bagian tubuh lain. Infeksi pada sebagian besar
orang (80-90%) tidak berkembang menjadi penyakit tuberkulosis. Pada umumnya,
bakteri Mycobacterium tuberculosis bersifat d o r m a n (tidur) selama beberapa w a k t ud i
dalam t u b u h penderita dan biasanya dapat berkembang secara aktif setelah sekitar 3-6
bulan terinfeksi.
Tuberkulosis primer
Penularan tuberkulosis paru terjadi karena droplet yang mengandung bakteri dibatuk-
k a n a t a u d i b e r s i n k a n k ed a l a m udara . P a r t i k e l i n f e k t i f i n i dapat m e n e t a p d a l a m udara
bebas selama 1-2 j a m , bergantung pada keberadaan sinar UV , ventilasi y a n g baik, dan
kelembapan. D a l a m suasana lembap dan gelap, bakteri dapat bertahan hidup berhari-
hari sampai berbulan-bulan. Apabila terhirup oleh seseorang, partikel infektif ini akan
menempel pada saluran napas atau paru-paru. Kebanyakan partikel akan mati atau
dibersihkan oleh makrofag sehingga keluar dari cabang trakeobronkus bersama gerak-
an silia dan sekret trakeobronkus. Mycobacterium tuberculosis j u g a dapat m a s u k me-
lalui kulit, m u k o s a , dan saluran gastrointestin.
Apabila menetap pada jaringan paru, bakteri akan t u m b u h dan berkembang biak
dalam sitoplasma makrofag, yang kemudian akan terbawa masuk k e organ-organ
tubuh lain. Bakteri yang bersarang d ijaringan paru-paru akan m e m b e n t u k sarang
tuberkulosis pneumonia kecil, yang disebut sarang primer atau sarang G h o n . Sarang
ini dapat terbentuk d i m a n a saja di j a r i n g a n paru. Peradangan saluran getah bening
akan timbul dari sarang primer ini menuju hilus (limfangitis lokal) dan diikuti pem-
besaran kelenjar getah bening (limfadenitis regional). Sarang primer limfangitis lokal
dan limfadenitis regional dapat membentuk kompleks primer. Proses ini dapat ber-
langsung sekitar 3 - 8minggu. Kompleks primer ini selanjutnya dapat berkembang
menjadi seperti berikut.
1. S e m b u h sama sekali tanpa m e n i n g g a l k a n cacat; hal inilah y a n g b a n y a k terjadi.

2. S e m b u h dengan meninggalkan sedikit bekas berupa garis-garis fibrotik, kalsifikasi
di hilus, dan m e n y e b a b k a n lesi p n e u m o n i a y a n g l u a s n y a lebih dari 5 m m . Sebanyak
10 % di a n t a r a n y a dapat m e n g a l a m i r e a k t i v a s i .
3. Terjadi komplikasi dan penyebaran. Penyebaran dapat terjadi secara berikut.
• Penyebaran secara merata k esekitarnya.

• Penyebaran secara bronkogen pada paru yang bersangkutan dan pada paru
yang d i sebelahnya. Bakteri dapat juga tertelan bersama sputum dan ludah
sehingga menyebar ke usus.
• Penyebaran s e c a r a l i m f o g e n k eo r g a n t u b u h lain.
• Penyebaran secara hematogen k e organ t u b u h lain.
Tuberkulosis sekunder
Bakteri Mycobacterium tuberculosis d o r m a n pada tuberkulosis p r i m e r dapat berkem-
bang bertahun-tahun kemudian sebagai infeksi endogen menjadi tuberkulosis dewasa
(tuberkulosis pasca-primer atau tuberkulosis sekunder). Tuberkulosis sekunder terjadi
karena faRtor imunitas yang m e n u r u n , seperti pada kondisi malnutrisi, penggunaan
alkohol, penyakit maligna, diabetes, A I D S (acguired i m m u n e deficiency syndrome),
dan gagal ginjal. Proses penyakit dimulai dari sarang dini yang berlokasi d i bagian
atas p a r u b e r i n v a s i k e daerah p a r e n k i m paru. S a r a n g i n i m u l a - m u l a j u g a berbentuk
sarang pneumonia kecil. Sarang ini kemudian menjadi tuberkel dalam 2-10 minggu.
T u b e r k e l adalah suatu g r a n u l o m a y a n g terdiri atas sel-sel histiosit dan sel-sel datia-
L a n g h a n s (sel besar y a n g m e m i l i k i b a n y a k inti) y a n g d i k e l i l i n g i o l e h sel l i m f o s i t y a n g
m e m i l i k i berbagai j a r i n g a n ikat.
Bergantung pada j u m l a h bakteri, virulensi bakteri, dan imunitas penderita, sarang
dini dapat m e n g a l a m i perkembangan berikut.
1. Diresorpsi kembali dan sembuh tanpa meninggalkan cacat.

2. Sarang m u l a - m u l a meluas, tetapi segera m e m b a i k dengan meninggalkan jaringan
fibrosis. A d a juga y a n g m e m b u n g k u s diri menjadi keras dan m e n i m b u l k a n penga-
puran. Sarang dini yang meluas sebagai granuloma berkembang menghancurkan
jaringan ikat di sekitarnya. Bagian tengahnya m e n g a l a m i nekrosis m e n j a d i lembek
membentuk jaringan keju. Kavitas akan terbentuk apabilajaringan keju dibatukkan
ke luar. K a v i t a s ini k e m u d i a n dapat m e n g a l a m i hal berikut.
• Meluas kembali dan menimbulkan sarang pneumonia baru. Tuberkulosis milier

a k a n terjadi apabila isi kavitas tersebut m a s u k ke d a l a m peredaran darah arteri.
Isi k a v i t a s tersebut dapat j u g a m a s u k k e d a l a m p a r u y a n g d i s e b e l a h n y a atau
masuk k edalam lambung dan selanjutnya k e dalam usus dan menyebabkan
tuberkulosis usus.
• Memadat dan membungkus diri sehingga terbentuk t u b e r k u l o m a y a n g dapat
mengapur dan m e n y e m b u h atau aktif kembali menjadi cair dan menjadi kavitas
kembali.
• B e r s i h dan m e n y e m b u h , y a n g disebut j u g a open h e a l e d cavity. K a v i t a s k a d a n g
kala berakhir sebagai kavitas yang terbungkus, menciut, dan berbentuk seperti
bintang {satellite shaped).
Penyakit tuberkulosis
Sampai sekarang, para klinisi, ahli radiologi, ahli patologi, ahli mikrobiologi, dan ahli
kesehatan masyarakat belum memiliki kesepakatan tentang klasifikasi tuberkulosis.
Beberapa klasifikasi berikut diperoleh dari sistem lama.
1. Pembagian secara patologis: tuberkulosis primer dan tuberkulosis sekunder.

2. Pembagian berdasarkan aktivitas radiologis: tuberkulosis paru aktif, non-aktif,
d a n cjuiscent ( b e n t u k a k t i f y a n g m u l a i menyembuh).
3. P e m b a g i a n secara radiologis (luas lesi):
• Tuberkulosis m i n i m a l , terdapat sebagian kecil infiltrat nonkavita s pada satu

paru atau kedua paru. A k a n tetapi,j u m l a h n y a tidak melebihi satu lobus paru.
• M o d e r a t e l y a d v a n c e d tuberculosis, terdapat kavitas dengan diameter tidak le-
b i h d a r i 4 c md a n j u m l a h infiltrat b a y a n g a n h a l u s t i d a k l e b i h d a r i 4 c m . Apabila
bayangannya kasar, tidak lebih dari sepertiga bagian satu paru.
• F a r a d v a n c e d tuberculosis, terdapat infiltrat dan kavitas y a n g m e l e b i h i keadaan
pada moderately a d v a n c e d tuberculosis.
Pada tahun 1974, America n Thoracic Society memberikan klasifikasi baru berdasar-
kan aspek kesehatan masyarakat, yaitu sebagai berikut.
1. Kategori 0: Tidak pernali terpajan dan tidak pernah terinfeksi; riwayat kontak
negatif; uji tuberkulin negatif
2. Kategori I :Terpajan tuberkulosis, tetapi tidak terbukti ada infeksi; r i w a y a t k o n t a k
negatif; uji tuberkulin negatif
3. Kategori II: T e r i n f e k s i tuberkulosis, tetapi tidak sakit; u j i t u b e r k u l i n positif; radio-
logi dan s p u t u m negatif
4. Kategori III: Terinfeksi tuberkulosis dan sakit.
Pada tahun 1991, W H O membagi terapi tuberkulosis dalam empat kategori, yaitu
sebagai berikut.
1. Kategori I : Terapi ditujukan untuk kasus baru dengan sputum positif; kasus baru
dengan tuberkulosis berat.
2. Kategori II: Terapi d i t u j u k a n u n t u k kasus s e m b u h dan kasus gagal dengan sputum
B T A (bakteri tahan asam) negatif
3. Kategori III: Terapi ditujukan untuk kasus B T A negatif dengan kelainan paru yang
tidak luas.
4. Kategori IV: Terapi ditujukan untuk tuberkulosis kronis.
Penggolongan tuberkulosis yang banyak dipakai d i Indonesia adalah penggolongan

berdasarkan kelainan klinis, radiologis, dan mikrobiologis, yaitu sebagai berikut.
1. Tuberkulosis paru.
2. Bekas tuberkulosis paru.
3. D u g a a n t u b e r k u l o s i s paru, y a n g terdiri atas d u a tipe.
• Dugaan tuberkulosis paru yang tidak diobati dengan sputum B T A negatif

• Dugaan tuberkulosis paru yang tidak diobati dengan sputum B T A negatif dan
tanda-tanda lain juga meragukan.
Gejala penyakit
Keluhan yang dirasakan oleh penderita dapat bermacam-macam, tetapi dapat pula
tanpa keluhan sama sekali. Beberapa gejala infeksi tuberkulosis yang paling sering
dirasakan dijelaskan berikut ini.
Demam
D e m a m biasanya menyerupai influenza, tetapi panas badan kadang kala dapat men-
capai 4 0 " C - 4 P C . Serangan d e m a m pertama dapat sembuh sebentar, tetapi kemudian
dapat t i m b u l kembali. Keadaan ini sangat dipengaruhi oleh daya tahan t u b u h penderita
dan keparahan infeksi bakteri tuberkulosis.
Batukibatuk darah
Gejala ini disebabkan terjadi iritasi pada bronkus. B a t u k d i p e r l u k a n u n t u k membuang
produk radang dari saluran napas. Sifat batuk m u l a i dari batuk kering dan kemudian
menjadi batuk p r o d u k t i f (menghasilkan sputum) setelah t i m b u l peradangan. Keadaan
lanjut adalah batuk yang bercampur dengan darah karena adanya pembuluh darah
yang pecah.
Bab 11 - Bakteri Patogen'padd Saluran Napas 169
Sesak napas
Sesak napas belum dirasakan pada penyakit paru. Sesak napas akan dirasakan oleh
penderita apabila infeksi sudah berlanjut, yaitu infiltrasi sudah meliputi setengah
bagian paru-paru.
Nyeri dada
Gejala i n ij a r a n g d i t e m u k a n , tetapi n y e r i dada dapat t i m b u l j i k a infiltrasi radang sudah
sampai k epleura sehingga m e n i m b u l k a n pleuritis. Kedua pleura bergesekan ketika
penderita menarik atau melepaskan napas.
Maias
Gejala malas sering d i t e m u k a n berupa anoreksia, tidak ada nafsu m a k a n , badan makin
kurus, sakit kepala, meriang, nyeri otot, dan berkeringat pada m a l a m hari. Gejala
malas m a k i n l a m a m a k i n berat dan hilang t i m b u l secara tidak teratur.
Pemeriksaan
Pemeriksaan fisik
Penderita pada u m u m n y a mengalami konjungtivitis pada mata, pucat karena anemia,
d e m a m , dan badan kurus atau berat badan m e n u r u n . A n a m n e s i s dan pemeriksaan fisik
tuberkulosis sulit dibedakan dengan pneumonia biasa.
Pemeriksaan radiologis
P e m e r i k s a a n radiologis dada m e r u p a k a n cara y a n g praktis u n t u k m e n e n t u k a n lesi t u -
berkulosis. Selain itu,cara ini m e m b e r i k a n keuntungan, yaitu m e m b e r i k a n hasil yang
akurat pada diagnosis tuberkulosis anak-anak dan milier, sedangkan hasil pemeriksaan
s p u t u m h a m p i r selalu negati f Pada satu foto dada, sering kali didapatkan bermacam-
macam bayangan sekaligus, terutama pada tuberkulosis yang sudah lanjut, seperti
infiltrat, garis-garis fibrotik, kalsifikasi kavitas, atelektasis pada alveolus, dan emfi-
sema. ^
Pemeriksaan laboratorium dapat dilakukan dengan m e n g g u n a k a n bahan pemeriksaan
darah atau sputum atau dengan ujituberkulin.
Darah
Pemeriksaan darah kurang mendapat perhatian karena hasilnya kadang kala mera-
gukan, tidak sensitif, dan tidak spesifik. K e t i k a tuberkulosis baru m u l a i aktif, j u m l a h
leukosit akan ditemukan sedikit meninggi. Jumlah limfosit masih d ibawah normal
dan laju endap darah m u l a i meningkat. N a m u n , ketika penyakit m u l a i sembuh, j u m l a h
leukosit kembali normal dan j u m l a h limfosit tinggi. L a j u endap darah mulai turun k e
arah normal. U j i serologi yang pernah dipakai untuk pemeriksaan darah adalah reaksi
Takahashi. N a m u n , hasil positif dan negatif palsu pada uji ini masih besar sehingga
170 B u k u Ajar Mikrobiologi: Panduan Mahasiswa Farmasi dan Kedokteran
k u r a n g m e n d a p a t p e r h a t i a n . B e l a k a n g a n i n i ,d i g u n a k a n u j i p e r o k s i d a s e antiperoksidase
( P A P - T b ) , tetapi juga kurang bermanfaat jika digunakan sebagai sarana diagnosis
tunggal tuberkulosis karena kespesifikan uji ini kurang baik. Selain itu, a d auji
MycoDot, yaitu cara pengujian cepat u n t u k mendeteksi keberadaan antibodi terhadap
mikobakteri dalam darah dengan menggunakan antigen L A M {lipoarabinomannan).
Sputum
Pemeriksaan s p u t u m m e r u p a k a n cara y a n g paling penting karena diagnosis tuberku-
losis sudah dapat d i t e g a k k a n j i k a d i t e m u k a n bakteri B T A . P e m e r i k s a a n i n i m u r a h d a n
m u d a h dan dapat dilakukan d iPuskesmas. Kendala uji ini hanyalah pada kesulitan
mendapatkan sputum, terutama pada penderita dengan batuk nonproduktif D a l a m hal
ini, penderita d i a n j u r k a n u n t u k m i n u m 2 liter air p u t i h dan diajarkan m e l a k u k a n b a t u k
refleks satu hari sebelum pemeriksaan sputum atau dapat j u g a diberi obat m u k o l i t i k
atau ekspektoran atau dengan inhalasi larutan garam hipertonik selama 2 0 - 3 0 menit.
Bila m a s i h sulit, s p u t u m d i a m b i l dengan cara bronkoskopi.
S p u t u m y a n g a k a n diperiksa h e n d a k n y a s p u t u m segar. S p u t u m d i n y a t a k a n B T A
positif jika sekurang-kurangnya ditemukan 3 batang bakteri B T A pada satu preparat.
Dengan kata lain, diperlukan 5000 bakteri dalam 1 m ls p u t u m . P e w a r n a a n sediaan
yang dianjurkan menggunakan c a r a T a n T h i a m Hok, yang merupakan modifikasi
gabungan cara pewarnaan Kinyoun-Gabbett.
Cara pemeriksaan sputum adalah sebagai berikut.
• Pemeriksaan preparat langsung dengan mikroskop biasa.

• Pemeriksaan preparat langsung dengan mikroskop fluoresensi.
• Pemeriksaan dengan biakan (kultur).
• Pemeriksaan resistensi terhadap obat antituberkulosis.
Uji tuberkulin
Uji ini untuk menyatakan apakah seseorang pernah atau sedang mengalami infeksi
Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium bovis, atau mikobakteri patogen lain
atau apakah seseorang pernah mendapat vaksinasi B C G . U j i ini berguna untuk m e m -
bantu menegakkan diagnosis tuberkulosis.
Uji tuberkulin dilakukan dengan menggunakan uji Mantoux, yaitu dengan me-
nyuntikkan 1 m l tuberkulin P P D {purified protein derivative) secara intrakutan dan
m e n g a m a t i reaksi y a n g terjadi setelah 4 8 - 7 2 j a m . Reaksi berupa indurasi kemerahan
a k a n t i m b u l , y a n g terdiri atas infiltrat l i m f o s i t ( y a k n i p e r s e n y a w a a n antara antibodi
seluler dan antigen tuberkulin). Hasil pengujian uji Mantoux dibagi dalam empat
kategori, yaitu sebagai berikut.
• Indurasi berdiameter 0-5 m m : M a n t o u x negatif. D i sini, peran antibodi humoral

paling menonjol.
• Indurasi berdiameter 6-9 m m : Hasil M a n t o u x meragukan. D i sini, peran antibodi
humoral masih menonjol.
• Indurasi berdiameter 10-15 m m : M a n t o u x positif. D i sini, peran kedua antibodi
seimbang.
Bab 11 - Bakteri Patogen pada Saluran Napas 171
• Indurasi berdiameter lebih dari 15 m m : Mantoux positif kuat. D i sini, peran

antibodi seluler paling menonjol.
Hampir semua penderita tuberkulosis m e n u n j u k k a n hasil positif pada uji M a n t o u x

(99,8%). K e l e m a h a n u j i i n i a d a l a h ( 1 )m e m b e r i k a n h a s i l p o s i t i f p a l s u p a d a pasien
yang menerima vaksinasi B C G atau apabila terinfeksi oleh Mycobacterium lain dan
(2) m e m b e r i k a n hasil negatif palsu pada penderita yang baru 2-10 minggu terpajan
tuberkulosis; pasien berusia tua; pasien yang mengalami malnutrisi, uremia, atau
panyakit keganasan; pada pemberian kortikosteroid yang lama; pada pemberian
imunosupresan; d a n pada pasien yang mengalami alergi, morbili, cacar air,d a n
poliomielitis.
Pengobatan
Aktivitas obat
Obat-obat yang digunakan untuk menangani tuberkulosis dapat memiliki aktivitas
bakterisida atau aktivitassterilisasi.
Aktivitas bakterisida
Golongan obat ini dapat m e m b u n u h mikobakteri yang sedang t u m b u h . A k t i v i t a s bak-
terisida biasanya d i u k u r dari kecepatan obat m e m b u n u h bakteri sehingga memberikan
hasil negatif pada pembiakan bakteri ( 2bulan dari permulaan pengobatan).
Aktivitas sterilisasi
Obat ini dapat m e m b u n u h bakteri yang m e m i l i k i pertumbuhan lambat atau metabo-
lisme k u r a n g aktif A k t i v i t a ssterilisasi diukur dari angka k e k a m b u h a n setelah peng-
obatan dihentikan.
Popuiasi bakteri tuberkulosis

Selain aktivitas obat dalam pengobatan tuberkulosis, faktor bakteri juga perlu diper-
hatikan. Mitchison membagi bakterituberkulosis dalam beberapa populasi berdasarkan
obat y a n g dapat m e m b u n u h bakteri tersebut, yaitu sebagai berikut.
Populasi A
Bakteri tuberkulosis yang termasuk dalam kelompok ini adalah bakteri yang tumbuh
dan berkembang biak terus-menerus dengan cepat. B a k t e r i i n i b a n y a k terdapat pada
d i n d i n g kavitas atau di d a l a m lesi y a n g b e r - p H netral. I N H (isoniazid) bekerja sangat
baik pada populasi ini karena m e m i l i k i aktivitas bakterisida yang cepat dan tinggi.
R i f a m p i s i n dan streptomisin juga dapat digunakan pada populasi i n i , tetapi efektivi-
tasnya lebih rendah dibandingkan I N H .
Populasi B
Bakteri dalam kelompok ini b e r t u m b u h sangat lambat dan berada dalam lingkungan
asam ( p H rendah). L i n g k u n g a n asam melindungi bakteri terhadap obat antituberku-
losis tertentu. H a n y a p i r a z i n a m i d a y a n g bekerja pada suasana tersebut.
S ^ ^ K S u b u Ajar Mikrobiologi: Panduan Mahasiswa Farmasi dan Kedokteran
Populasi C
Bakteri dalam kelompok ini berada dalam keadaan d o r m a n (tidak ada aktivitas meta-
bolisme) hampir sepanjang w a k t u . Bakteri ini hanya sesekali mengadakan metabo-
lisme secara aktif dalam w a k t u singkat. Bakteri jenis ini banyak terdapat d i dalam
dinding kavitas. Golongan obat yang dapat bekerja hanya rifampisin.
Populasi D
Bakteri dalam kelompok ini sepenuhnya bersifat d o r m a n sehingga sama sekali tidak
dapat dipengaruhi oleh obat antituberkulosis. J u m l a h populasi D tidak jelas dan hanya
dapat d i m u s n a h k a n oleh m e k a n i s m e pertahanan t u b u h m a n u s i a sendiri.
Penggunaan obat tuberkulosis

D a l a m sejarah penggunaan kemoterapi terhadap tuberkulosis, dulu hanya dipakai satu
jenis obat. N a m u n , resistensi ternyata banyak terjadi pada p e m a k a i a n obat tunggal.
U n t u k terapi tuberkulosis, W H O merekomendasikan strategi p e n y e m b u h a n jangka
pendek dengan pengawasan langsung, yang dikenal dengan istilah D O T S (directly
observedtreatment short course). Strategi D O T S m e n g g u n a k a n k o m b i n a s i obat, yang
sedikitnya terdiri atas dua m a c a m obat bersifat bakterisida. D e n g a n menggunakan
obat kombinasi, k e m u n g k i n a n resistensi a w a l dapat diabaikan karena jarang sekali
d i t e m u k a n resistensi terhadap dua m a c a m obat atau lebih.
Jenis obat y a n g digunakan untuk mengatasi tuberkulosis adalah sebagai berikut.
Obat primer
Obat p r i m e r terdiri atas:
• Isoniazid ( I N H )
• Rifampisin
• Pirazinamida
• Streptomisin
• Etambutol
Obat sekunder
Obat sekunder terdiri atas:
• Kanamisin
• A s a m /7-aminosalisilat (PAS)
• Tiosetazon
• Etionamida
• Protionamida
• Sikloserin
• Siprofloksasin
• Norfloksasin
• Ofloksasin
• Klofazimin
Sebelum rifampisin ditemukan, metode terapi tuberkulosis paru menggunakan sistem

j a n g k a p a n j a n g , y a i t u I N H + s t r e p t o m i s i n H- P A S a t a u e t a m b u t o l . P e n g o b a t a n diberikan
setiap hari dengan fase a w a l selama 3 bulan dan d i l a n j u t k a n dengan I N H + etambutol
atau P A S selama 12-18 bulan.
Setelah rifampisin d i t e m u k a n , panduan obat menjadi I N H + rifampisin + strepto-
m i s i n atau e t a m b u t o l setiap hari (fase a w a l ) dan diteruskan dengan I N H + rifampisin
atau e t a m b u t o l (fase lanjut).
Panduan i n is e l a n j u t n y a berkembang menjadi terapi jangka pendek dengan
pemberian I N H + rifampisin + streptomisin atau etambutol atau pirazinamida setiap
hari sebagai fase a w a l selama 1-2bulan, dilanjutkan dengan I N H + rifampisin atau
etambutol atau streptomisin 2 - 3kali seminggu selama 4-7 bulan. Jadi, lama peng-
obatan keseluruhan adalah 6-9 bulan.
Panduan obat yang dipakai d iIndonesia dan dianjurkan oleh W H O adalah I N H
rifampisin + e t a m b u t o l setiap hari selama 1 bulan dan dilanjutkan dengan I N H + ri-
fampisin 2 kali seminggu selama 5 bulan.
A k a n tetapi, harga rifampisin dan pirazinamida yang mahal menjadi kendala yang
menyebabkan pengobatan jangka pendek sering kali gagal akibat kepatuhan penderita
tuberkulosis yang buruk. Hal ini menyebabkan populasi bakteri tuberkulosis semakin
meluas dan resistensi terhadap obat antituberkulosis semakin meningkat.
Pencegahan
Pencegahan penularan penyakit tuberkulosis dapat d i l a k u k a n dengan menghindarkan
kontak langsung dengan penderita; m e n j a l a n k a n pola hidup sehat, m i s a l n y a makan
makanan bergizi dan seimbang; istirahat yang cukup dan jangan tidur terlalu larut
malam; dan menghindarkan menjadi perokok aktif ataupun pasif Selain itu, sanitasi
lingkungan yang baik perlu dipelihara, misalnya dengan menjemur kasur atau alas
tidur secara teratur agar tidak lembap dan m e m b u k a jendela dari pagi hingga sore
hari.
Pemberian vaksin B C G (hacille calmette giterin) segera setelah bayi lahir (0-1
bulan) dapat m e m b e r i k a n kekebalan aktif terhadap tuberkulosis. Tingkat efektivitas
vaksin B C G berkisar 7 0 - 8 0 % . O l e h karena itu, kita harus tetap waspada terhadap
serangan bakteri penyebab tuberkulosis.
Bordetella pertussis
Bordetella pertussis pertama kali diisolasi oleh Bordet dan G e n g o u pada tahun 1906.
Bakteri ini menyerang saluran napas dan menyebabka n batuk rejan.
Genus Bordetella berbentuk kokobasilus tunggal, berpasangan, atau berkelom-
pok. Pada isolasi primer, bakteri ini u m u m n y a m e n u n j u k k a n bentuk u n i f o r m , tetapi
sub-biakannya berbentuk pleomorfik. Bordetella pertussis tidak dapat bergerak dan
m e m i l i k i kapsul atau simpai yang hanya terlihat dengan pewarnaan khusus. Bentuk
koloni pada biakan agar adalah cembung, halus, mengilap, dan tembus cahaya.
Bordetella pertussis m e r u p a k a n bakteri aerob, tidak m e m b e n t u k H^S, indol, dan

asetilmetilkarbinol, tetapi m a m p u menghasilkan dua m a c a m toksin, yaitu endotoksin
yang bersifat termostabil dan protein yang bersifat termolabil dan dermonekrotik.
Bakteri ini membentuk zona hemolisis pada biakan agar darah. Bakteri ini juga
memiliki antigen permukaan O yang termostabil dan tidak menimbulkan proteksi
terhadap infeksi dan antigen K yang merupakan faktor berdasarkan uji adsorpsi
aglutinin.
Bordetella pertussis m e n y e b a b k a n batuk rejan yang ditandai dengan batuk paroksis-
mal. Pada orang dewasa, bakteri ini dapat m e n y e b a b k a n batuk berkepanjangan. Gejala
sakit u m u m n y a t i m b u l dalam 10 h a r i setelah k o n t a k , d e n g a n m a s a i n k u b a s i 5 - 2 1 hari.
Penyakit ini terbagi dalam 3 stadium, yaitu stadium prodromal/kataral, stadium parok-
sismal (1-6 minggu), dan stadium konvalesen.
Stadium prodromailiiatarai (1-2 minggu)

• Gejala infeksi saluran napas bagian atas y a n g ringan, seperti batuk ringan, bersin,
keluar cairan dari hidung, dan kadang-kadang konjungtivitis.
• Pemeriksaan fisik tidak m e m b e r i k a n hasil yang menentukan.
• Merupakan masa perkembangbiakan b a k t e r i d id a l a m e p i t e l s a l u r a n napas.
stadium paroiisismai (1-6 minggu)

• Peningkatan batuk paroksismal (batuk yang hebat). Dalam 15-20 detik, terjadi
5-20 batuk beruntun, biasanya diakhiri dengan keluarnya lendir/muntah, dan tidak
ada kesempatan bernapas di antara batuk-batuk tersebut.
• Tarikan napas setelah batuk berakhir m e n i m b u l k a n bunyi yang khas.
stadium iionvaiesen
• B a t u k selama beberapa bulan setelah permulaan sakit.
• Keparahan penyakit bervariasi.
Batuk rejan dapat diikuti dengan k o m p l i k a si radang otak y a n g serius dan fatal, tetapi
hal inij a r a n g terjadi. K o m p l i k a s i berat t e r u t a m a terjadi pada bayi, sedangkan stadium
paroksismal biasanya terlihat pada anak-anak dan orang dewasa. Beberapa tipe ade-
novirus dan C h l a m y d i ap n e u m o n i a e dapat menghasilkan gambaran klinis y a n g serupa
dengan kondisi yang disebabkan oleh Bordetella pertussis.
Epidemiologi
Penyakit pertusis atau batuk rejan tersebar d i seluruh dunia dan mudah menular.
M a n u s i a m e r u p a k a n satu-satunya sumber Bordetella pertussis. Penyebaran biasanya
disebabkan oleh orang-orang yang mengalami infeksi aktif Banyak kasus terjadi pada
balita dan sebagian besar meninggal pada usia 1 tahun.
Pencegahan
Pencegahan sebaiknya dilakukan dengan cara-cara berikut.
• Pencegahan terbaik adalah dengan menghindarkan kontak langsung dengan pende-

rita dan imunisasi.
• Vaksinasi aktif pada bayi penting dilakukan untuk menghindarkan komplikasib e -
rat dan m o r b i d i t a s t i n g g i pada usia balita. A n t i b o d i y a n g m a s u k m e l a l u i plasenta
tidak cukup m e m b e r i k a n perlindungan terhadap infeksi bakteri tersebut.
• Setiap bayi sebaiknya m e n e r i m a 3 s u n t i k a n v a k s i n pertusis s e l a m a 1t a h u n p e r t a m a
dan diikuti serum tambahan sampai j u m l a h keseluruhan 5 dosis.
• Pemberian vaksin D P T (Difteri, Pertusis, dan Tetanus).
Pengobatan
Penderita biasanya diberikan eritromisin sebagai antibiotik pilihan utama, tetrasiklin,
kloramfenikol, dan ampisilin.
Isolasi bakteri dari nasofaring dapat mempersingkat masa penularan dan penye- *
baran bakteri. Pengobatan serangan hebat dengan cara inhalasi dan pemberian oksi-
gen dapat m e n c e g a h kerusakan otak.
Mycoplasma pneumoniae
M y c o p l a s m a p n e u m o n i a e m e r u p a k a n bakteri y a n g berbentuk bundar agak datar, ber-
d i a m e t e r 1 0 |.uTi, b e r p i n g g i r a n b e n i n g , b a g i a n t e n g a h k e r u h d a n g r a n u l e r . D a l a m media
perbenihan, bakteri ini t u m b u h j a u h k edalam media agar dan m e m b e n t u k tampilan
seperti telur c e p l o k [fried egg). P e r m u k a a n k o l o n i dapat mengabsorpsi sel darah me-
rah dan m e m b e n t u k zona hemolisis. Bakteri ini t u m b u h sangat lambat, yaitu 5-10 hari
bahkan lebih.
B a k t e r i M y c o p l a s m a p n e u m o n i a e tidak m e m p u n y a i d i n d i n g sel y a n g mengontrol
ketidakstabilan osmosis. Seperti kebanyakan sel e u k a r i o t ( d a l a m m e m b r a n y a n g ter-
susun atas tiga lapis), M y c o p l a s m a pneumoniae menggunakan sterol u n t u k m e m -
b e n t u k s t r u k t u r n y a . B a k t e r i i n i dapat h i d u p t a n p a d i n d i n g sel k a r e n a dapat berosmosis
secara stabil dengan lingkungan hospesnya (manusia atau hewan). Kombinasi struktur
yang unik menyebabkan penanganan infeksi Mycoplasma pneumoniae berbeda d e -
ngan penanganan infeksi bakteri pada u m u m n y a . Karena tidak memiliki dinding sel,
Mycoplasma pneumoniae mudah melakukan interaksi pertukaran senyawa antara
inang dan bakteri. Pertukaran ini tidak hanya pertukaran nutrisi dan suplemen asam
amino, tetapi j u g a senyawa metabolit lain y a n g bersifat toksik. H a l ini menyebabkan
bakteri M y c o p l a s ma p n e u m o n i a e dapat m e n i m b u l k a n berbagai gangguan terhadap sel
inang.
Mycoplasma pneumoniae adalah salah satu anggota kelompok Mollicute yang
berarti *'kulit y a n g halus". Mycoplasma pneumoniae memiliki ukuran genom yang
sangat kecil d a n t i d a k m e m p u n y a i d i n d i n g sel y a n g k a k u seperti k e b a n y a k a n bakteri.
M y c o p l a s m a pneumoniae bersifat anaerob fakultatif, suhu t u m b u h o p t i m u m 36-37"C,

dan p H o p t i m u m 7. Bakteri ini m e m e r l u k a n kolesterol dan asam lemak rantai panjang
untuk pertumbuhannya dan glukosa atau arginin sebagai sumber energi. Ketika per-
t a m a kali d i t e m u k a n , spesies M y c o p l a s m a dikenali sebagai virus karena berukuran
sangat kecil. N a m u n , setelah diteliti, g e n o m Mycoplasma ditemukan mengandung
D N A dan R N A sehingga digolongkan sebagai bakteri. Bakteri ini sangat kecil sehingga
m a m p u melalui membran saringan bakteri yang berukuran pori 450 n m . Mycoplasma
pneumoniae mempunyai genom 800 Kb.
Mycoplasma pneumoniae merupakan evolusi dari bakteri Gram-positif Lactoha-
cillus, Bacillus, Streptococcus, dan 2 spesies Clostridium m e r u p a k a n leluhur Myco-
plasma yang mempunyai genom 2500-2700 Kb. Meskipun kehilangan materi genetik
y a n g signifikan, M y c o p l a s m a p n e u m o n i a e dapat bertahan hidup dengan cara parasitik.
Bakteri ini tidak pernah d i t e m u k a n secara bebas karena ketergantungannya pada inang
untuk mendapatkan asam lemak, asam amino , prekursor sintesis asam nukleat dan
kolesterol. Mycoplasma pneumoniae dijadikan model suatu sistem yang menggam-
b a r k a n syarat u t a m a y a n g harus d i m i l i k i suatu sel u n t u k dapat bereplikasi secara oto-
nom karena memiliki kemampuan bereproduksi dengan genom yang sederhana.
Mycoplasma pneumoniae merupakan penyebab utama pneumonia atipikal primer,
tetapi penyakit ini juga dapat disebabkan oleh virus, klamidia, dan riketsia. Masa
inkubasi infeksi ini adalah 1-4 m i n g g u dengan gejala m i r i p seperti p n e u m o n i a akibat
virus, yaitu rasa lesu, d e m a m , sakit kepala, sakit tenggorokan, batuk kering, dan nyeri
dada. S p u t u m penderita mengandung bercak-bercak darah. Pada foto toraks, dapat
dijumpai patchypneumonicprocess, sedangkan secara patologi anatomik, didapatkan
gambaran interstitial pneumonitis dan peribronkiolitis atau bronkiolitis disertai d e -
ngan nekrosis. Pada uji hemaglutinin, dijumpai sekitar 5 0 % kasus reaksi tidak spesifik
terhadap golongan darah O .Titer penderita yang tidak diobati akan terus meningkat
pada m i n g g u ke-3 sampai ke-4 setelah sakit. Titer lebih dari 3 2m e n d u k u n g diagnosis
infeksi Mycoplasma pneumoniae.
Pemeriksaan l a b o r a t o r i um
Bahan pemeriksaan yang digunakan adalah usap tenggorokan, sputum, eksudat, dan
sekresi saluran napas, uretra, dan genital. Pemeriksaan mikroskopis memerlukan
pembiakan bakteri selama 3-10 hari. M e d i a perbenihan yang digunakan adalah heart
infusionpepton broth, cairan asites 3 0 % , dan s e r u m k u d a atau kelinci.
Uji serologi dapat menggunakan uji pengikatan komplemen dan antigen glikolipid
hasil ekstraksi biakan Mycoplasma dalam k l o r o f o r m metanol. Selain uji tersebut, da-
pat d i l a k u k a n u j i i m u n o f l u o r e s e n s i tidak langsung dan u j i h a m b a t a n hemaglutinasi.
Pengobatan
Pengobatan infeksi Mycoplasma pneumoniae m e m e r l u k a n cara yang sedikit berbeda
dari penanganan infeksi bakteri lain pada u m u m n y a . K a v ^ m M y c o p l a s m a pneumoniae
tidak m e m i l i k i d i n d i n g sel, antibiotik g o l o n g a n betalaktam tidak dapat dipakai u n t u k
mengobati infeksi bakteri ini. Hal ini karena golongan betalaktam (penisilin dan sefa-
losporin) bekerja dengan menghambat sintesis d i n d i n g sel bakteri. O b a t p i l i h a n y a n g
digunakan adalah tetrasiklin dan eritromisin.
Epidemiologi
Mycoplasma pneumoniae bersifat endemik dan dapat ditularkan d i seluruh dunia.
Infeksi M y c o p l a s m a p n e u m o n i a e dapat ditularkan m e l a l u i droplet, batuk, bersin, atau
u d a r a apabila s e s e o r a n g berada d idekat penderita. I n f e k s i i n i dapat m e n y e r a n g siapa
saja, t e r u t a m a m a h a s i s w a dan calon tentara. K a s u s pada m a h a s i s w a dan calon tentara
dapat mencapai 5 0 % dari total kasus yang ada.
Legionella pneumophila
Legionella adalah bakteri yang dapat menyebabkan penyakit saluran napas. Penyakit
ini d u l u d i t e m u k a n pada orang-orang y a n g m e n g h a d i r i suatu k o n v e n s i L e g i o n Veteran
A m e r i k a di Philadelphia pada tahun 1976.
Bakteri Legionella sukar d i w a r n a i , bersifat Gram-positif, dan tidak m e m i l i k i kesa-
m a a n biokimia dengan bakteri yang diketahui patogen pada manusia. B a k t e r i ini dapat
t u m b u h pada telur berembrio atau pada perbenihan kompleks yang diperkaya dengan
suplemen biologik. B a k t e r i Legionella dapat d i t e m u k a n pada biopsi j a r i n g a n paru dan
sesekali d i t e m u k a n pada cairan pleura, darah, dan dahak.
L e g i o n e l l a t i d a k d i t u l a r k a n m e l a l u i k o n t a k l a n g s u n g dari penderita k eo r a n g d i s e k i -
tarnya. Infeksi diperoleh dari sumber-sumber lingkungan d isekitar melalui inhalasi
udara atau melalui debu yang berhubungan dengan sistem pendingin udara atau peng-
galian tanah.
Gejala klinik dapat t i m b u l tiba-tiba, berupa d e m a m tinggi, menggigil, lesu, batuk
tidak produktif, hipoksia, diare, dan lemas. Pemeriksaan darah m e n u n j u k k a n adanya
leukositosis, hiponatremia, hematuria, dan fungsi hati y a n g abnormal.
Diagnosis biasanya didasarkan pada peningkatan titer antibodi terhadap Legionella
dalam serum penderita. Pewarnaan imunofluoresensi bakteri pada jaringan paru yang
diperoleh dari biopsi atau otopsi dapat d i l a k u k a n u n t u k m e n e m u k a n bakteri Legionella.
Pemeriksaan laboratorium jarang dilakukan dengan cara m e m b i a k k a n balcteri i n i .
Pengobatan
Pemberian antibiotik pada penderita merupakan cara pengobatan yang dianjurkan
untuk mencegah komplikasi penyakit. Eritromisin dan antibiotik golongan makrolida
lainnya, seperti azitromisin, m e r u p a k a n obat pilihan u n t u k mengatasi infeksi legione-
losis i n i .
BAB 12
BAKTERI PATOGEN
PADA KULIT DAN MATA
• Pendahuluan
• Staphyiococcus aureus
• Staphviococcus epidermis
m Cfilamydia tracfiomatis
m Streptococcus pi/ogenes
m Pseudomonas aeruginosa
m Propionibacterium acnes
178
Bab 12 - Bakteri Patogen p a d a Kulit dan Mata 179
P E N D A H U L U A N
B e r b a g a i j e n i s balcteri h i d u p sebagai flora n o r m a l pada kulit m a n u s i a , sebagian besar
adalah bakteri Gram-positif. Staphylococcus aureus d a n Streptococcus pyogenes
( G r u p A )a d a l a h j e n i s b a k t e r i patogen y a n g dapat m e n i m b u l k a n i n f e k s i d a n k e l a i n a n
pada kulit. Kelainan kulit yang disebabkan oleh infeksi bakteri Staphylococcus aureus
antara lain impetigo dan folikulitis, sedangkan infeksi kulit yang disebabkan oleh
Streptococcus pyogenes antara lain erisipelas dan nekrosis. Selain kedua bakteri itu,
Pseudomonas juga merupakan bakteri patogen oportunistik yang sering menyebab-
kan infeksi kulit pada pasien luka bakar. Propionibacterium acnes m e r u p a k a n bakteri
anaerob yang sering ditemukan pada jerawat. Beberapa jenis infeksi pada kulit dan
mata yang disebabkan oleh bakteri tercantum pada Tabel 12.1.
Bakteri y a n g sering m e n y e b a b k a n penyakit pada m a t a u m u m n y a berasal dari kulit
atau dari s a l u r a n napas bagian atas, m i s a l n y a H a e m o p h i l u s influenzaed a n C h l a m y d i a
trachomatis y a n g dapat menyebabkan konjungtivitis pada mata.
Bakteri Staphylococcus termasuk dalam famili Micrococcaceae. Bakteri ini berbentuk
bulat. K o l o n i m i k r o s k o p i k cenderung berbentuk menyerupai buah anggur. M e n u r u t
bahasa Y u n a n i , Staphyle berarti anggur dan coccus berarti bulat atau bola. Salah satu
spesies m e n g h a s i l k a n p i g m e n berwama kuning emas sehingga dinamakan aureus
(berarti emas, seperti matahari). Bakteri ini dapat t u m b u h dengan atau tanpa bantuan
oksigen.
Pada tahun 1984, Rosenberg m e n g a j u k a n tata n a m a berdasarkan p i g m e n koloni
Staphylococcus, yaitu Staphylococcus aureus untuk koloni b e r w a m a k u n i n g emas dan
Staphylococcus albus untuk koloni berpigmen putih. Staphylococcus albus sekarang
Tabel 12.1. Infeksi pada Kulit dan Mata yang Disebabkan oleh Bakteri
Bakteri Infeksi
Staphylococcus aureus Impetigo, ruam, infeksi kulit

Folikulitis, infeksi pada folikel rambut
Staphylococcus epidermidis Ruam kulit, infeksi ringan pada kulit
Streptococcus pyogenes Impetigo. erisipelas, kemerahan pada kulit
Fasiitis nekrotik, kerusakan pada jaringan
kulit
Pseudomonas aeruginosa Dermatitis, Infeksi pada pennukaan kulit

Infeksi oportunistik pada luka bakar
Otitis eksterna. Infeksi pada kanal kuping
Chlamydia trachomatis Konjungtivitis, infeksi pada mata
Propionibacterium acnes Jerawat pada kulit
dikenal dengan Staphylococcus epidermidis. Staphylococcus aureus kebanyakan ber-|||

k o l o n i d is a l u r a n h i d u n g d a n d ib a g i a n t u b u h lain. Staphylococcus epidermidis dite-
m u k a n di kulit.
Staphylococcus aureus m e m b e n t u k koloni berwarna k u n i n g pada media yang kaya
nutrisi. Staphylococcus epidermidis membentuk koloni berwama putih dan relatif
kecil Staphylococcus aureus sering kali bersifat h e m o l i t i k pada m e d i a agar yang
mengandung darah, sedangkan Staphylococcus epidermidis bersifat n o n h e m o l i t i k .
Staphylococcus bersifat anaerob fakultatif dan menghasilkan e n z i m katalase. Sta-
phylococcus aureus dapat t u m b u h dalam larutan N a C I 1 5 % . Staphylococcus aureus
menghasilkan enzim koagulase, sedangkan Staphylococcus epidermidis tidak meng-
hasilkan enzim koagulase. Staphylococcus aureus bersifat patogen pada manusia, se-
dangkan Staphylococcus epidermidis bersifat nonpatogen dan dapat hidup sebagai
flora n o r m a l tubuh, seperti pada hidung, tenggorokan, rambut, dan kulit orang sehat.
Staphylococcus d i t e m u k a n d ih i d u n g 6 , 6 % bayi bemsia 1 hari, 5 0 % bayi bemsia 2
hari, 6 2 % bayi berusia usia 3 hari, dan 8 8 % bayi bemsia 4-8 hari.
Keracunan m a k a n a n akibat Staphylococcus dapat terjadi j i k a seseorang mengon-
sumsi makanan yang mengandung toksin yang berasal dari Staphylococcus. Gejala
m u n c u l 6 - 8 J a m setelah m e n g o n s u m s i makanan yang terkontaminasi. Gejala u m u m
yang t i m b u l adalah m u a l , m u n t a h , k r a m perut, diare, dan lemas.
Identifikasi
Staphylococcus adalah bakteri Gram-positif berbentuk bulat. Bakteri Gram-negatif
kadang-kadang ditemukan d ibagian tengah gerombolan bakteri, yaitu bakteri yang
telah difagositosis atau bakteri yang tumbuh pada biakan tua yang hampir mati.
Staphylococcus berdiameter 0,8-1,0 m i k r o n , tidak bergerak, dan tidak berspora.
Staphylococcus dapat dibedakan dari Streptococcus berdasarkan bentuk koloninya.
K o l o n i mikroskopik Staphylococcus berbentuk menyempal buah anggur, sedangkan
Streptococcus biasanya berbentuk seperti rantai.
U j i e n z i m katalase juga dapat m e m b e d a k a n Staphylococcus dari Streptococcus.
Staphylococcus bersifat katalase positif, sedangkan Streptococcus bersifat katalase
negatif. U j i i n i dapat dilakuka n dengan menambahkan hidrogen peroksida 3 % pada
koloni dalam lempeng agar atau agar miring. B i a k a n katalase positif menghasilkan
oksigen dan gelembung. Pengujian ini tidak dapat dilakukan d a l a m agar darah karena
darah sudah mengandung katalase.
Pertumbuhan dan perbenihan

Berbagai spesies Staphylococcus tumbuh dengan baik dalarri k a l d u biasa pada suhu
37°C. K i s a r a n s u h u p e r t u m b u h a n a d a l a h 15-40°C d a n s u h u o p t i m u m a d a l a h 35°C.
Dalam lempeng agar biasa dengan suasana a e r o b d a n s u h u 37°C, b a k t e r i i n i t i d a k
menghasilkan pigmen. Dalam lempeng agar darah pada s u h u 37''C, pembentukan
p i g m e n k u r a n g baik. A k a n tetapi, apabila k o l o n i tersebut dipindahkan k eagar biasa
atau perbenihan Loeffler dan diinkubasi pada suhu kamar, pembentukan pigmen akan
sangat baik. ^
K o l o n i y a n g masih sangat m u d a tidak berwama. A k a n tetapi, pigmen yang larut

d a l a m a l k o h o l , eter, d a n k l o r o f o r m a k a n t e r b e n t u k s e i r i n g p e r t u m b u h a n b a k t e r i .
Staphylococcus aureus membentuk koloni besar berwarna agak kuning dalam
media yang baik. Staphylococcus epidermidis membentuk koloni berwarna putih
yang relatif lebih kecil. Staphylococcus aureus biasanya bersifat h e m o l i t i k pada agar
darah, sedangkan Staphylococcus epidermidis tidak.
Staphylococcus bersifiat a n a e r o b f a k u l t a t i f dan dapat tumbuh karena melakukan
respirasi aerob atau fermentasi dengan hasil u t a m a asam laktat. Staphylococcus aureus
dapat t u m b u h p a d a s u h u 15^5°C d a n d a l a m N a C I berkonsentras i 15%. Hampir semua
Staphylococcus aureus menghasilkan enzim koagulase, sedangkan Staphylococcus
epidermidis tidak menghasilkan enzim ini. Untuk mengisolasi Staphylococcus dari
tinja, digunakan media agar yang m e n g a n d u n g NaC I sampai 1 0 % sebagai pengham-
bat bakteri j e n i s lain dan perbenihan yang mengandung manitol untuk mengetahui
patogenisitas bakteri.
D a y a t a h a n bakteri
D i antara semua bakteri y a n g tidak m e m b e n t u k spora, Staphylococcus aureus terma-
suk bakteri y a n g m e m i l i k i daya tahan paling kuat. Pada agar m i r i n g , Staphylococcus
aureus dapat tetap hidup berbulan-bulan, baik dalam lemari es maupun pada suhu
kamar. D a l a m keadaan kering pada benang, kertas, kain, dan dalam nanah, bakteri ini
dapat tetap hidup selama 6-14 minggu. Staphylococcus aureus jenis tertentu yang
t a h a n s e l a m a 5 m e n i t , tetapi m a t i d a l a m w a k t u 10 m e n i t d a l a m f e n o l 1/90, t e l a h dipa-
kai sebagai bakteri standar untuk menilai daya antiseptik suatu disinfektan dalam uji
koefisien fenol. D a y a tahan bakteri ini dalam berbagai zat k i m i a adalah sebagai beri-
kut.
Tingtura iodii 2 % 1 menit
H , 0 , 3 % 3 menit
H g C \ 10 menit
F e n o f 2 % 15 menit
Alkohol 5 0 - 7 0 % 1 jam
Struktur antigen
Bakteri Staphylococcus mengandung polisakarida dan protein y a n g bersifat antigenik.
Sebagian besar bahan ekstraseluler yang dihasilkan bakteri inijuga bersifat antigenik.
Polisakarida yang ditemukan pada jenis yang virulen adalah polisakarida A dan yang
ditemukan pada jenis yang tidak patogen adalah polisakarida B. Polisakarida A m e r u -
pakan komponen d i n d i n g sel y a n g dapat larut d a l a m a s a m trikloroasetat. A n t i g e n ini
merupakan komponen peptidoglikan yang dapat m e n g h a m b a t fagositosis. Bakterio-
faga terutama menyerang bagian ini.Antigen protein A berada di luar antigen polisa-
karida; k e d u a antigen i n i m e m b e n t u k d i n d i n g sel bakteri.
M e t a b o l i t bakteri
Staphylococcus aureus menghasilkan tiga m a c a m metabolit, yaitu metabolit nontok-
sin, eksotoksin, dan enterotoksin.
w^mmmmmmmmmmmmimmmmm
Metabolit nontoksin ipi

M e t a b o l i t n o n t o k s i n terdiri atas antigen p e r m u k a a n , koagulase, lipase, tributirinase,
fosfatase, d a n katalase.
Antigen permukaan
A n t i g e n i n i berfungsi u n t u k m e n c e g a h reaksi serangan oleh faga, m e n c e g a h reaksi
koagulase, dan mencegah fagositosis.
Koagulase
Enzim i n i dapat menggumpalkan oksalat plasma atau sitrat p l a s m a karena faktor
koagulase reaktif dalam serum. Faktor koagulase reaktif bereaksi dengan koagulase
d a n m e n g h a s i l k a n suatu esterase y a n g dapat m e m b a n g k i t k a n aktivitas p e n g g u m p a l a n
sehingga terjadi deposit fibrin pada p e r m u k a a n sel bakteri y a n g dapat menghambat
fagositosis.
Hialuronidase
E n z i m i n i terutama dihasilkan oleh jenis koagulase positif. Penyebaran bakteri diper-
mudah dengan adanya e n z i m ini. O l e h karena itu, e n z i m ini disebut juga sebagai
faktor penyebar.
Fibrinolisin
Enzim m i melisiskan bekuan darah dalam pembuluh darah yang sedang meradang
sehingga bagian-bagian bekuan y a n g penuh bakteri terlepas dan m e n y e b a b k a n lesi
metastatik di tempat lain.
G e l a t i n a s e dan p r o t e a s e
Gelatinase adalah e n z i m y a n g dapat mencairkan gelatin. Protease dapat menekrosis
jaringan, termasuk tulang.
L i p a s e dan tributirinase
Lipase terutama dihasilkan oleh jenis koagulase positif, tetapi tidak m e m p u n y a i p e -
r a n a n y a n g spesifik. T r i b u t i r i n a s ea d a l a h e n z i m y a n g m e n y e b a b k a n t e r j a d i p e m i s a h a n
lemak dalam perbenihan kaldu yang mengandung glukosa dan k u n i n g telur.
F o s f a t a s e , lisozim, dan penisilinase

Patogenisitas bakteri berkaitan dengan aktivitas fosfatase dan pembentukan koagu-
lase. A k a n tetapi, p e m e r i k s a a n fosfatase j a u h l e b i h sulit d i l a k u k a n . S e l a i n i t u , p e m e -
riksaan fosfatase k u r a n g spesifik j i k a a k a n dipakai sebagai petunjuk virulensi. L i s o z i m
dibuat oleh sebagian besar jenis koagulase positif dan penting untuk menentukan
patogenesis bakteri. Penisilinase diproduksi oleh beberapa jenis Staphylococcus untuk
mempertahankan diri terhadap antibiotikderivat p-laktam.
Katalase
E n z i m ini dibuat oleh Staphylococcus dan Micrococcus, sedangkan Pneumococcus
dan Streptococcus tidak m e m p r o d u k s i katalase. Keberadaan e n z i m i n i dapat diketahui
dengan menuangkan larutan HÔ^ 3 %pada k o l o n i Staphylococcus berumur 24 jam
dan akan timbul gelembung udara.
Eksotoksin
E k s o t o k s i n terdiri atas a - h e m o l i s i n , P-hemolisin, 5 - h e m o l i s i n , l e u k o s i d i n , sitotoksin,
dan toksin eksfoliatin.
a-Hemolisin
Toksin yang dihasilkan oleh Staphylococcus virulen ini bersifat seperti berikut.
• M e l i s i s k a n sel darah m e r a h kelinci, k a m b i n g , d o m b a , d a n sapi.

• T i d a k m e l i s i s k a n sel darah manusia.
• Menyebabkan nekrosis pada kulit manusia dan hewan.
• Dapat membunuh manusia dan hewan apabila terdapat dalam dosis yang cukup
besan
• Menghancurkan sel darah p u t i h kelinci.
• Bersifat sitotoksik terhadap biakan jaringan mamalia.
S e m u a sifat tersebut dapat dinetralkan oleh i m u n o g l o b u l i n G (IgG), tetapi tidak dapat

dinetralkan oleh IgA dan IgM.
p-Hemolisin
Toksin ini terutama dihasilkan oleh jenis Staphylococcus yang berasal dari hewan.
p - H e m o l i s i n dapat m e l i s i s k a n sel darah m e r a h d o m b a d a n sapi. D a l a m h a l i n i , lisis
terjadi setelah inkubasi selama 1 j a m p a d a s u h u 37°C d a n 18 j a m pada suhu 10°C.
T o k s i n dapat dibuat toksoid.
5-Hemolisin
T o k s i n i n i dapat m e l i s i s k a n sel d a r a h m e r a h m a n u s i a d a n k e l i n c i , tetapi e f e k n y a ter-

h a d a p sel d a r a h m e r a h d o m b a k u r a n g .
Leukosidin
L e u k o s i d i n dapat m e r u s a k sel darah p u t i h berbagai j e n i s b i n a t a n g . A d a tiga tipe l e u -

kosidin, yaitu sebagai berikut.
• Toksin yang identik dengan a-hemolisin.

• T o k s i n yang identik dengan 5-hemolisin, bersifat termostabil, dan menyebabkan
perubahan morfologi semua tipe sel darah putih, kecuali yang berasal dari
domba.
• T o k s i n y a n g h a n y a m e r u s a k sel darah p u t i h m a n u s i a d a n k e l i n c i t a n p a a k t i v i t a s
hemolitik. T o k s i n ini terdapat pada 4 0 - 5 0 % jenis Staphylococcus.
Sitotoksin
T o k s i n i n i m e m e n g a r u h i arah gerak sel darah p u t i h dan bersifat termostabil . S i t o t o k s i n
diproduksi dalam suasana berikut ini.
184 Bu&u Ajdr Mikrobiologi: Panduan Mahdsisvwb FarrhasI ddn Kedokterdri
• K o m p l e k s antigen zat menghasilkan suatu kompleks trimolekuler dari komplemen

y a n g terdiri atas C'5, C'6, dan C'7.
• Streptokinase mengubah plasminogen menjadi plasmin yang kemudian bereaksi
dengan C ' 3sehingga membentuk C ' 3aktif. B a k t e r i Staphylococcus sering dite-
mukan pada penyakit granulomatosa septik kronis yang bersifat herediter; pada
p e n y a k i t i n i ,sel darah p u t i h dapat m e l a k u k a n fagositosis, tetapi t i d a k dapat meng-
hancurkan bakteri Staphylococcus,
T o k s i n eksfoliatin
Toksin Staphylococcus ini merupakan suatu protein ekstraseluler yang tahan panas,
tetapi tidak tahan asam dan dapat menyebabkan dermatitis eksfoliatif pada bayi baru
l a h i r { R i t t e r 's d i s e a s e ) , i m p e t i g o , d a n n e k r o s i s p a d a k u l i t .
Enterotoksin
Toksin ini terbentuk jika bakteri ditanam dalam perbenihan semisolid yang mengan-
dung 3 0 % . T o k s i n i n i terdiri atas p r o t e i n y a n g bersifat b e r i k u t i n i .
• Nonhemolitik.
• Nondermonekrotik.
• Nonparalitik.
• Termostabil, dalam air mendidih tahan selama 3 0 menit.
• Tahan terhadap pepsin dan tripsin.
Toksin ini merupakan penyebab keracunan makanan, terutama yang mengandung

hidrat arang dan protein. M a s a inkubasi 2 - 6 j a m dan gejala t i m b u l secara mendadak,
yaitu m u a l , m u n t a h , dan diare. Pingsan kadang kala dapat terjadi sehingga sering
diduga kolera. K o n d i s i i n i j a r a n g berakibat fatal dan p e n y e m b u h a n biasanya terjadi
setelah 2 4 - 4 8 j a m . E f e k m u n t a h terjadi karena toksin merangsang pusat m u n t a h d i
susunan saraf pusat. Salmonella dan Clostridium dapat m e n i m b u l k a n keracunan yang
serupa.
Belimi d i t e m u k a n cara yang mudah untuk mendeteksi bakteri Staphylococcus
yang mengandung enterotoksin, tetapi ada hubungan antara pembentukan enterotoksin
dengan koagulase.
Staphylococcus aureus menghasilkan dua tipe toksin y a n g m e m p u n y a i aktivitas
superantigen, y a i t u enterotoksin dan toxic shock syndrome toxin (TSST-1). Staphy-
lococcus aureus y a n g m e m b e n t u k enterotoksin bersifat koagulase positif, tetapi tidak
semua koagulase positif dapat m e m b e n t u k enterotoksin.
Patogenesis
Staphylococcus aureus menyebabkan berbagai jenis infeksi pada manusia, antara lain
mfeksi pada kulit, seperti bisul dan furunkulosls; infeksi y a n g lebih serius, seperti
pneumonia, mastitis, flebitis, dan meningitis; dan infeksi pada saluran urine. Selain
itu, Staphylococcus aureus]ugdi menyebabkan infeksi kronis, seperti osteomielitis dan
endokarditis. Staphylococcus aureus merupakan salah satu penyebab u t a m a infeksi
nosokomial akibat luka tindakan operasi dan pemakaian alat-alat perlengkapan pera-
watan d i r u m a h sakit. Staphylococcus aureus juga dapat menyebabkan keracunan
makanan akibat enterotoksin yang dihasilkannya dan menyebabkan sindrom renjat
t o k s i k {toxic shock syndrome) akibat pelepasan superantigen k ed a l a m aliran darah.
Faktor virulensi
Staphylococcus aureus m e m p u n y a i beberapa faktor virulensi berikut.
• Protein permukaan yang berfungsi untuk memudahkan kolonisasi pada jaringan

inang.
• Beberapa protein invasin yang berfungsi untuk m e m b a n t u invasi dan penyebaran
b a k t e r i k ed a l a m t u b u h , seperti l e u k o s i d i n , k i n a s e , d a n hialuronidase.
• Beberapa faktor p e r m u k a a n yang dapat m e n g h a m b a t fagositosis, seperti simpai
dan protein A .
• Zat-zat b i o k i m i a lain yang diproduksi untuk meningkatka n pertahanan terhadap
fagositosis, seperti karotenoid dan katalase.
• E n z i m koagulase dan faktor pembeku {clotting factor) y a n g m e m e n g a r u h i kerja
imunoglobulin tertentu.
• Beberapa toksin yang berfungsi untuk melisis m e m b r a n sel inang, seperti hemo-
lisin, leukotoksin, dan leukosidin
• Beberapa eksotoksin yang mampu merusak jaringan selinang sehingga dapat
memperberat gejala penyakit.
• G e n resistensi terhadap antimikroba tertentu sehingga bakteri kebal terhadap anti-
mikroba tersebut.
Staphylococcus aureus menyebabkan berbagai infeksi bernanah dan keracunan pada

manusia. Impetigo atau bisul pada bayi baru lahir m e r u p a k a n penyakit kulit akibat
infeksi Staphylococcus yang paling sering terjadi. Impetigo sering terjadi pada anak-
anak, biasanya d isekitar hidung. Penyebaran penyakit ini cukup tinggi, terutama d i
daerah endemik.
Pneumonia Staphylococcus merupakan penyakit yang penting karena menunjuk-
kan tingkat kematian yang tinggi, yaitu lebih dari 5 0 % . Sekitar 7 5 % kasus pneumonia
terjadi pada bayi berusia kurang dari 1 tahun. P n e u m o n i a Staphylococcus terjadi jika
bakteri menyerang aliran darah dan menyebabkan septisemia. Septisemia dapat ber-;
akibat fatal, dan bakteri dapat menyebar k e seluruh organ tubuh lain, seperti paru-
paru, ginjal, hati, otot rangka, dan otak.
Infeksi Staphylococcus aureus dapat menginvasi dan menyerang setiap bagian
tubuh kita. B a k t e ri ini dapat d i t e m u k a n pada hidung, m u l u t , kulit, mata, jari, usus, dan
hati. Bakteri ini akan bertahan dalam w a k t u yang lama di berbagai tempat. Staphylo-
coccus aureus dapat tinggal sementara d idaerah kulit yang basah dan dimiliki oleh
2 0 - 5 0 % manusia. Anak-anak, penderita diabetes, tenaga kesehatan, d a n pasien
penyakit kulit biasanya berisiko tinggi mengalami infeksi Staphylococcus aureus. Ini
disebabkan infeksi Staphylococcus aureus biasanya terjadi pada luka terbuka atau
luka potong.
Gejala yang ditimbulkan bervariasi, bergantung pada lokasi infeksi. Infeksi ini
dapat menyebar k ej a r i n g a n t e t a n g g a terdekat, menyebar melalui pembuluh darah,
ataupun menyebar ke organ-organ, seperti j a n t u n g dan ginjal. Penyebaran ke tempat-
tempat tersebut dapat m e n m i b u l k a n indikasi yang mengancam jiwa. Pasien pengidap
penyakit kronis, seperti diabetes, hepatids, kanker, atau gangguan ginjal, atau para
pemakai narkoba sangat rentan terinfeksi bakteri ini.
M e k a n i s m e infeksi
Infeksi Staphylococcus aureus dapat terjadi dengan mekanisme: (a) pelekatan pada
p r o t e i n sel i n a n g ; {b) i n v a s i ; (c) p e r l a w a n a n terhadap sistem p e r t a h a n a n i n a n g ; d a n {d)
pelepasan beberapa jenis toksin.
Pelekatan pada protein sel Inang

S t r u k t u r s e lStaphylococcus aureus memiliki protein permukaan yang membantu
penempelan b a k t e r i p a d a sel inang. P r o t e i n tersebut adalah l a m i n i n d a n fibronektin
yang m e m b e n t u k matriks ekstraseluler pada permukaan epitel dan endotel. Selain itu,
beberapa galur m e m p u n y a i ikatan protein fibrin/fibrinogen yang m a m p u meningkat-
kan penempelan bakteri pada darah dan jaringan. Sebagian besar galur Staphylococcus
aureus m e m p u n y a i protein ikatan terhadap fibronektin d a n fibrinogen. Adhesin yang
dapat berikatan dengan kolagen ditemukan pada galur bakteri yang menyebabkan
osteomielitis dan artritis septik: Interaksi dengan kolagen penting untuk penempelan
bakteri pada jaringan.
Fakta bahwa protein pengikat matriks (matriX'bindingprotein) merupakan faktor
vuiilensi Staphylococcus aureus didasarkan pada suatu penelitian menggunakan galur
m u t a n Staphylococcus aureus yang tidak mempunyai fibronektin dan protein pengikat
fibrinogen {fibrinogen bindingprotein). Virulensi Staphylococcus untuk endokarditis
pada tikus percobaan ternyata dapat berkurang karena k e t i d a k m a m p u a n galur m u t a n
tersebut m e n e m p e l pada jaringan/sel inang. Selain itu,virulensi galur m u t a n Staphy-
lococcus aureus yang tidak m e m p u n y a i gen yang mengekspresikan protein pengikat
kolagen {collagen-binding protein) ternyata j a u h lebih kecil sehingga tidak dapat
menyebabkan infeksi artritis septik pada tikus percobaan. H a l ini diduga karena
penempelan dan kolonisasi bakteri ddak efektif Kegagalan ikatan ligan dengan resep-
tor fibrinogen, fibronektin, dan kolagen juga telah menghambat penempelan bakteri
p a d a p r o t e i n reseptor sel i n a n g y a n g bersangkutan.
Invasi
Invasi Staphylococcus aureus terhadap jaringan inang melibatkan sejumlah besar ke-
l o m p o k protein ekstraseluler. Beberapa protein berperan penting dalam proses invasi
Staphylococcus aureus k e d a l a m sel inang.
a-Toksin
a-Toksin adalah toksin yang paling dikenal sebagai toksin y a n g dapat merusak m e m -
bran sel/jaringan inang. Toksin inimerupakan m o n o m e r yang berikatan dengan m e m -
bran sel yang rentan. Sub-unit ini kemudian akan beroligomerisasi membentuk cincin
heksamerik sehingga membentuk pori dalammembran sel yang mengakibatkan mem-
bran sel bocor. Sel-sel yang rentan memiliki reseptor spesifik untuk a-toksin sehingga
toksin tersebut dapat terikat pada sel itu. Ini menyebabkan terbentuknya pori-pori
kecil yang dapat dilewati kation-kation monovalen. Pada manusia, platelet dan mono-
sit sensitif terhadap a-toksin. Setelah terikat dengan toksin ini, serangkaian reaksi
sekunder yang dapat menyebabkan pelepasan sitokin akan terjadi. Rangkaian reaksi
ini akan mempercepat pembentukan mediator inflamasi. Kejadian ini dapat menye-
babkan gejala-gejala renjat septik selama infeksi Staphylococcus aureus yang berat.
p-Toksin
p-Toksin adalah suatu spingomielinase yang merusak membran yang kaya kandungan
lipid. Uji klasik untuk menentukan P-toksin adalah berdasarkan kemampuan toksin
ini melisiskan eritrosit domba. Sebagian besar Staphylococcus aureus yang diisolasi
dari manusia tidak terlihat menghasilkan P-toksin. p-Toksin dapat ditemukan dalam
bakteriofaga lisogenik.
8- T o k s i n
5-Toksin adalah peptida pendek yang diproduksi oleh sebagian besar galur Staphylo-
coccus aureus. Toksin ini juga diproduksi oleh Staphylococcus epidermidis. Peranan
toksin ini pada penyakit belum diketahui.
y - T o k s i n dan leukosidin
y-Toksin (yang dikenal sebagai leukotoksin) dan leukosidin adalah dua kompleks
protein toksin yang dapat merusak membran sel yang rentan. Protein ini diproduksi
secara terpisah, tetapi berperan bersamaan dalam merusak membran. Tidak ada bukti
bahwa protein-protein ini membentuk multimer terlebih dulu sebelum penyisipan ke
dalam membran. Leukosidin berbeda dengan leukotoksin. Leukosidin merupakan
produk dari gen yang berbeda. Leukotoksin bersifat.hemolitik, sedangkan leukosidin
tidak bersifat hemolitik. Hanya 2%isolat Staphylococcus aureus menunjukkan adanya
leukosidin dan hampir 90%isolat yang diisolasi dari luka nekrotik kulit menunjukkan
adanya leukotoksin. Oleh karena itu, protein ini diduga merupakan faktor penting
pada infeksi nekrotik pada kulit.
Koagulase
Koagulase adalah protein ekstraseluler yang dapat berikatan dengan protrombin inang
untuk membentuk sebuah kompleks yang disebut stafilotrombin. Aktivitas spesifik
protease dari trombin adalah mengubah fibrinogen menjadi fibrin. Uji koagulase
merupakan salah satu cara yang dilakukan di laboratorium klinik untuk mengidentifi-
kasi keberadaan Staphylococcus aureus dan untuk menunjukkan sifat virulensi bakteri
ini, yaitu dapat melindungi dirinya dari fagositosis dan menghalangi kerja sistem imu-
nitas inang.
Stafilokinase
Stafilokinase adalah suatu enzim yang diproduksi oleh Staphylococcus aureus yangj
berfimgsi sebagai aktivator plasminogen sehingga enzim ini dapat melisiskan fibrin. J
Terbentuknya kompleks antara stafilokinase dan plasminogen akan mengaktifkan;
plasmin yang akan melarutkan bekuan fibrin. Walaupun belum ada bukti kuat bahwa ]
stafilokinase merupakan faktor virulensi, enzim yang bersifat fibrinolisis ini dapat
dikatakan dapat membantu penyebaran bakteri dalamjaringan inang.
E n z i m ekstraselule r lain
Staphylococcus aureus memproduksi enzim protease, lipase, deoksiribonuklease

(DNAse), dan enzimpemodifikasi asamlemak (fatty acid modifying enzyme, FAME^.
Enzim-enzim ini berperan penting dalam pertahanan diri bakteri dan kemungkinan
membantu penyediaan nutrisi bagi bakteri.
P e r l a w a n a n t e r h a d a p s i s t e m p e r t a h a n a n inang 'wM
Staphylococcus aureus memiliki kemampuan mempertahankan diri terhadap meka-^
nisme pertahanan inang. Beberapa faktor pertahanan diri yang dimiliki oleh Staphylo-l
coccus aureus dijelaskan berikut ini.
S i m p a i polisakarida
Sebagian besar Staphylococcus aureus yang diisolasi secara klinis memiliki polisaka-
rida, yang terdapat pada permukaan selnya. Polisakarida ini disebut sebagai raikro-
kapsul karena hanya dapat dilihat dengan mikroskop elektron; hal ini berbeda dari
simpai bakteri lainnya yang dapat dilihat dengan mikroskop biasa. Staphylococcus
aureus yang diisolasi dari infeksi memiliki kadar polisakarida yang tinggi. Akan
tetapi, ketika dibiakkan dalamlaboratorium, polisakarida tersebut menghilang. Fungsi
kapsul dalam virulensi bakteri tidak terlalu jelas. Walaupun demikian, kapsul ini di-
duga dapat menghalangi proses fagositosis.
Protein A
Protein Aadalah protein permukaan yang terdapat pada Staphylococcus aureus yang
berikatan dengan daerah Fc molekul IgG. Di dalam serum, bakteri akan bergabung
dengan molekul IgG dengan orientasi yang keliru dengan permukaannya sehingga
akan mengganggu opsonisasi dan fagositosis bakteri. Galur mutan Staphylococcus
aureus yang tidak memiliki protein A akan lebih mudah difagositosis secara in vitro
dan memiliki virulensi yang lebih rendah.
Leukosklin
Leukosidin adalah toksin yang dihasilkan oleh Staphylococcus aureus yang secara
spesifik ditujukan untuk menghalangi kerja polimorfonuklear leukosit. Fagositosis
merupakan pertahanan terpenting untuk melawan mfeksi Staphylococcus aureus.
Oleh sebab itu, leukosidin dapat dikatakan sebagai salah satu faktor virulensi.
P e l e p a s a n b e b e r a p a jenis toksin
Eksotoksin
Proses infeksi Staphylococcus aureus akan menghasilkan berbagai jenis toksin yang
bertanggung jawab atas gejala-gejala yang ditimbulkan selama infeksi berlangsung.
Jenis-jenis toksin yang dapat merusak membran sel inang telah dibahas pada invasi.
Beberapa toksin tersebut dapat melisiskan eritrosit dan menyebabkan hemolisis. Pele-
pasan a-toksin ke dalam sistem peredaran darah dapat menyebabkan renjat (shock).
Superantigen
Staphylococcus aureus menghasilkan dua tipe toksin yang memiliki aktivitas super-
antigen, yaitu enterotoksin yang memiliki enam tipe antigenik (SE-A, SE-B, SE-C,
SE-D, SE-E, dan SE-G) dan sindrom renjat toksik (TSST-1). Enterotoksin merupakan
penyebab diare, mual, dan muntah, pada kasus keracunan makanan. TSST-1 dapat
menyebabkan sindrom renjat toksik apabila dilepaskan ke dalam peredaran darah.
Demikian pula, enterotoksin dapat menyebabkan sindrom renjat toksik jika berada
dalam sistemik. TSST-1 bertanggung jawab atas 75% kasus sindrom renjat toksik.
Lima puluh persen kasus sindrom renjat toksik akibat enterotoksin disebabkan oleh
SE-B dan SE-C. Superantigen dapat menstimulasi sel T yang nonspesifik. Satu dari 5
sel Takan terstimulasi oleh adanya superantigen, sedangkan keberadaan antigen biasa
umumnya hanya menstimulasi 1 dari 10.000 sel T Dengan demikian, sitokin akan
dilepaskan dalam jumlah besar; hal inilah yang dapat menyebabkan terjadi gejala
sindrom renjat toksik.
T o k s i n eksfoliatin
Toksin ini menyebabkan sindrom kelainan kulit {scalded skin syndrome) pada bayi,
dengan gejala pembengkakan dan pengelupasan epidermis. Toksin ini memiliki dua
tipe antigenik, yaitu tipe Adan tipe B. Toksin ini memiliki aktivitas esterase dan di-
duga juga memiliki aktivitas protease. Akan tetapi, mekanisme enzim ini merusak
lapisan epidermis kulit belum diketahui secara pasti. Toksin ini diduga menyerang
protein spesifik yang terlibat dalam pertahanan lapisan epidermis sehingga terjadi
pemisahan lapisan dermis dan epidermis kulit.
Gejala penyakit
Beberapa jenis penyakit yang ditimbulkan oleh infeksi Staphylococcus adalah sebagai
berikut.
I m p e t i g o
Impetigo adalah penyakit infeksi kulit yang menimbulkan bintil-bintil berisi nanah.
Folikulitis
Folikulitis adalah infeksi superfisial pada folikel-folikel rambut dan mengeluarkan
pustula berwarna putih. Tempat pustula-pustula itu tumbuh akan terasa gatal selama I
sampai 2 hari sebelumnya.
Furunkel
Furunkel adalah infeksi Staphylococcus aureus yang menginvasi bagian dalam dari
folikel rambut. Furunkel merupakan paradangan yang disertai pembengkakan dan
menyakitkan. Walaupun dapat terjadi di seluruh bagian tubuh, infeksi ini lebih sering
dijumpai di daerah wajah, leher, ketiak, dan anus. Furunkel dikenal dengan nama
borok atau bisul.
K a r b u n k e l
Karbunkel adalah radang di bawah kulit, yaitu kumpulan peradangan yang terikat satu
dengan yang lain di bawah kulit. Karbunkel sering ditemukan di bagian belakang
leher dan lebih banyak dijumpai pada pria dibandingkan pada wanita.
Hidradenitis
Hidradenitis adalah infeksi pada kelenjar tertentu di wilayah ketiak dan alat genital.
Mastitis
Mastitis adalah infeksi pada payudara. Infeksi ini terjadi pada payudara ibu yang
sedang menyusui melalui luka atau melalui puting payudara yang terluka. Infeksi ini
menyebabkan luka yang menyakitkan.
Selulitis
Selulitis adalah infeksi di bagian terdalam lapisan kulit. Walaupun jarang terjadi, in-
feksi ini cukup serius. Selulitis biasanya disebabkan oleh Streptococcus dan hanya
beberapa yang disebabkan oleh Staphylococcus. Infeksi biasanya dimulai dari bengkak
yang lunak, kemerahan di sekitar luka, kemudian secara bertahap menyebar ke jari-
ngan terdekat. Garis merah yang memanjang dari daerah infeksi sampai kelenjar ge-
tah bening, yangjuga dapat terinfeksi, membengkak 2-3 kali ukuran normal. Kondisi
yang serius disebut limfadenitis.
Piomiositis
Piomiositis adalah infeksi pada otot. Infeksi ini umumnya terjadi di daerah tropis.
Endokarditis
Endokarditis adalah infeksi pada katup jantung. Infeksi ini dapat terjadi jika Staphy-
lococcus aureus menyerang endokardium yang merupakan bagian paling dalam dari
jantung. Kondisi ini menyebabkan kerusakan permanen padajantung. Hal ini terutama
terjadi pada pecandu narkoba yang menggunakan narkoba melalui injeksi intravena.
Osteomielitis
Osteomielitis merupakan infeksi pada tulang dan pada otot-otot di sekitar tulang.
Artritis Septik
Artritis septik adalah infeksi Staphylococcus aureus yang menyebar ke pembuluh
darah, tangan, kaki, dan punggung tempat abses kemudian berkembang. Bagian-
bagian yang terinfeksi akan membengkak dan berisi nanah. Bila ini dibiarkan, bagian-
bagian itu akan menjadi kaku.
P n e u m o n i a
Infeksi Staphylococcus aureus pada paru-paru dapat menyebabkan pneumonia. Pneu-
monia dapat timbul setelah seseorang menderita flu.
S i n d r o m kulit terbakar
Sindromkulit terbakar merupakan infeksi pada kulit yang mengelupas seperti terbakar.
Sindrom ini sering menyerang bayi, anak-anak, dan penderita gangguan sistem
kekebalan. Infeksi biasanya berupa keropeng yang terisolasi, yang menyerupai
impetigo, dan terjadi di daerah yang tertutup popok atau di sekitar pusar (pada bayi
baru lahir). Pada anak-anak yang berusia 1-6 tahun, sindrom diawali dengan sebuah
keropeng di hidung atau telinga, diikuti dengan timbulnya daerah berwarna merah tua
di sekitar keropeng tersebut, dan membentuk lepuhan-lepuhan yang mudah pecah.
Blefaritis
Blefaritis adalah bentuk infeksi yang menyerang bagian tepi kelopak mata. Infeksi ini
dapat juga menyebabkan mata merah dan bernanah.
Paronikia
Paronikia adalahjenis infeksi yangterjadi pada tepi-tepi kuku yang dapat menyebabkan
peradangan dan kulit melepuh atau dipenuhi nanah.
S i n d r o m renjat toksik
Sindrom infeksi ini menyebabkan demam tinggi, tekanan darah rendah, kulit terkelu-
pas, dan kerusakan organ-organ tertentu. Sindrom ini dapat mengakibatkan kematian.
Wanita yang menggunakan tampon berisiko terkena infeksi ini.
K e r a c u n a n m a k a n a n
Kondisi ini biasanya terjadi karena makanan yang dikonsumsi tercemar Staphylo-
coccus aureus. Toksin yang dihasilkan oleh Staphylococcus aureus dapat menyebab-
kan keracunan yang ditandai dengan gejala mual, muntah, kejang perut, dan diare.
Resistensi S t a p h y l o c o c c u s terhadap antimikroba

Galur Staphylococcus aureus yang diisolasi dari rumah sakit umumnya telah resisten
terhadap berbagai antimikroba, bahkan telah resisten terhadap semua antibiotik yang
beredar, kecuali terhadap vankomisin. Galur Staphylococcus aureus yang resisten
terhadap vankomisin masih jarang dilaporkan. Galur MRSA {methicillin resistant
Staphylococcus aureus) merupakan penyebab utama infeksi nosokomial yang bersifat
multiresisten terhadap antibiotik, bahkan telah resisten terhadap antiseptik golongan
amonium kuarterner sehingga dapat bertahan hidup di lingkungan rumah sakit.
192 Buku Ajar Mikrobiologi: Panduan Mahasiswa Farmasi dan K e d o k t e r a n ^
Pada tahun 1950-an dan awal tahun 1960, Staphylococcus merupakan penyebab
utama infeksi nosokomial dan menjadi masalah yang berkepanjangan di bidang kli-
nik. Walaupun saat ini infeksi nosokomial lebih sering disebabkan oleh Escherichia
coli dan Pseudomonas aeruginosa, infeksi yang disebabkan oleh Staphylococcus
tetap menjadi masalah dalam bidang kesehatan. Tingginya angka kesakitan dan multi-
resistensi terhadap antibiotik memerlukan penanganan yang serius.
Multiresistensi terhadap antibiotik disebabkan oleh hal-hal berikut.
• Gen tertentu pada bakteri mengalami mutasi kromosomal sehingga bakteri kebal
terhadap antibiotik tertentu.
• Bakteri mendapatkan gen resistensi ekstrakromosomal melalui proses transformasi,
transduksi, transposon, ataupun melalui pemindahan fragmen DNA lainnya.
Sejak era antibiotik yang ditandai dengan penggunaan penisilin pada tahun 1940-an,
proses resistensi Staphylococcus terjadi dalam waktu singkat. Akibatnya, beberapa
galur Staphylococcus aureus telah resisten terhadap semua antibiotik konvensional.
Strategi baru dalam industri farmasi untuk penemuan antibiotik baru meliputi iden-
tifikasi target dengan pendekatan molekuler. Strategi ini diharapkan dapat bermanfaat
dalam menemukan antimikroba baru yang mampu mengatasi infeksi yang disebabkan
oleh Staphylococcus.
B a h a n p e m e r i k s a a n
Bahan untuk pemeriksaan laboratorium dapat diperoleh dari usap tenggorokan, darah,
nanah, sputum, atau cairan spinal.
Cara p e m e r i k s a a n
Pemeriksaan dapat dilakukan secara langsung atau dengan perbenihan.

Pemeriksaan langsung
Bakteri yang berasal dari nanah atau sputum langsung dibuat preparat dan diperiksa
dengan pewarnaan Gram. Di bawah mikroskop, bakteri yang bersifat Gram-positif ini
akan terlihat tersusun sendiri, berpasangan, atau bergerombol menyerupai buah
anggur.
Perbenihan
Bahan pemeriksaan ditanam dalam lempeng media agar darah. Koloni yang khas akan
terbentuk setelah diinkubasi pada suhu 37°Cselama 18 jam. Hemolisis dan pemben-
tukan pigmen baru terlihat jelas setelah beberapa hari dibiarkan pada suhu kamar. Jika
bahan pemeriksaan mengandung berbagai jenis mikroba, dapat dipakai suatu perbe-
nihan yang mengandung NaCl 10%. Pada media perbenihan telurit, Staphylococcus
koagulase positif membentuk koloni berwarna hitam karena dapat mereduksi telurit.
Bab 12 - Bakteri Patogen p a d a Kulit dan Mata 193|^
Uji iioaguiase
Uji koagulase dapat^dilakukan dengan menggunakan gelas objek atau dengan tabung
reaksi.
M e n g g u n a k a n gelas objek
Cara ini digunakan untuk menentukan adanya reaksi koagulase atau dampingfactor.
Cara ini tidak dianjurkan untuk keperluan pemeriksaan rutin karena banyak faktor
yang dapat memengaruhinya, antara lain harus menggunakan plasma manusia segar
dan diperlukan bakteri Staphylococcus dalamjumlah yang cukup besar.
M e n g g u n a k a n tabung reaksi
Cara ini dilakukan untuk menemukan adanya koagulase bebas dan cukup menggunakan
plasma kelinci. Hasil positifjika terjadi penggumpalan atau bila tabung reaksi dibalik,
gumpalan plasma tidak terlepas dan tetap melekat pada dinding tabung.
P e n e n t u a n tipe batiteriofaga
Cara ini penting untuk menentukan tipe Staphylococcus yang diisolasi dari lingkungan
rumah sakit. Sebanyak 70-80%flora Staphylococcus dari rumah sakit resisten terha-
dap penisilin. Selain itu, pemeriksaan tipe faga dapat digunakan untuk menentukan
jenis galur bakteri yang berasal dari manusia atau hewan.
Pengobatan
Uji sensitivitas antibiotik diperlukan untuk memilih antibiotik yang tepat untuk meng-
atasi infeksi. Penisilin atau derivatnya dapat diberikan, kecuali pada pasien yang
alergi. Terapi oral penisilin semisintetik, seperti kloksasilin atau dikloksasilin, cukup
berhasil untuk infeksi akut. Oksasilin dan nafsilin tidak dianjurkan untuk terapi oral
karena absorpsinya kurang baik dalam saluran cerna. Jika penderita alergi terhadap
penisilin, eritromisin dapat digunakan. Pengobatan parenteral dengan injeksi nafsilin
atau oksasilin dianjurkan untuk infeksi Staphylococcus yai^g berat dan sistemik. Untuk
pasien yang alergi, dapat diganti dengan vankomisin atau sefalosporin. Pemberian
antibiotik kadang kala harus dilengkapi dengan tindakan bedah, baik untuk pengeringan
abses maupun untuk nekrotomi.
Pencegahan
Belum ada vaksin yang tersedia untuk menstimulasi kekebalan tubuh manusia me-
lawan infeksi Staphylococcus, Serum hiperimun manusia dapat diberikan pada pasien
rumah sakit sebelum tindakan bedah. Upaya pengembangan vaksin dapat dilakukan
jika telah diketahui mekanisme molekuler interaksi antara protein adhesin Staphy-
lococcus dan reseptor spesifik pada jaringan inang. Komponen yang dapat mengham-
bat interaksi tersebut sehingga dapat mencegah penempelan dan kolonisasi bakteri
kemungkinan akan dirancang.
Pengawasan
Di rumah dan terutama di rumah sakit, penyebaran infeksi Staphylococcus hanya
dapat dibatasi dengan meningkatkan sanitasi higienis, membuang barang-barang yang
terkontaminasi, dan mensterilkan alat-alat yang terkontaminasi. Penderita luka yang
terinfeksi Staphylococcus harus dijauhkan dari bayi yang baru lahir dan orang dewasa
yang rentan terhadap infeksi bakteri. Penggunaan antibiotik yang tidak rasional
sebaiknya dihindari agar tidak mempercepat resistensi. Proses pembedahan dan peng-
gunaan alat-alat harus dilakukan secara aseptis. Penularan melalui udara, terutama di
' ruang bedah rumah sakit, dapat dihindari dengan mensterilkan ruangan dengan meng-
gunakan sinar ultraviolet.
Staphylococcus epidermis
Bakteri Staphylococcus epidermidis merupakan bakteri Gram-positif, koloni berwarna
putih atau kuning, dan bersifat anaerob fakultatif. Bakteri ini tidak mempunyai lapisan
protein A pada dinding sel, dapat meragi laktosa, tidak meragi manitol, dan bersifat
koagulase negatif.
Gejala penyakit
Staphylococcus epidermidis dapat menyebabkan infeksi kulit ringan yang disertai
dengan pembentukan abses. Staphylococcus epidermidis biotipe-1 dapat menyebabkan
infeksi kronis pada manusia.
Chiamydia trachomatis
Chiamydia trachomatis termasuk dalam famili Chlamydiaceae. Bakteri ini dapat
membentuk badan inklusi intrasitoplasma yang padat dan mengandung glikogen.
Chiamydia trachomatis umumnya peka terhadap sulfonamida, dapat menyebabkan
pneumonitis pada tikus dan manusia, serta dapat menyebabkan penyakit trakoma,
konjungtivitis inklusi, uretritis nonspesifik, salpingitis, servisitis, pneumonitis pada
bayi, dan limfogranuloma.
Klamidia merupakan bakteri intraseluler yang bersifat obligat dan diketahui se-
bagai penyebab penyakit pada manusia, seperti penyakit menular seksual, infeksi
mata, dan infeksi paru pada bayi baru lahir yang ditularkan pada saat dilahirkan dari
ibu yang mengidap infeksi klamidia.
Bakteri Chiamydia trachomatis dapat ditumbuhkan pada kantong kuning telur
bertunas dan dapat membentuk badan inklusi elementer.
T r a k o m a
Konjungtivitis yang disebabkan oleh infeksi klamidia dapat muncul tiba-tiba atau
secara pelan-pelan. Infeksi dapat berlangsung tahunan jika tidak diobati. Namun,
penyakit yang berlangsung lama di daerah hiperendemis disebabkan oleh terjadinya
re-infeksi berulang kali. Ciri khas dari penyakit ini adalah timbulnya folikel limfoid
dan inflamasi pada konjungtiva.
Dalam perjalanan penyakit, sesuai dengan keparahan penyakit dan lama inflamasi,
penyakit ini dapat menimbulkan terbentuknya jaringan parut di sekitar kelopak mata
sehingga dapat menimbulkan deformitas pada kelopak dan bulu mata. Deformitas
pada kelopak dan bulu mata selanjutnya dapat menyebabkan abrasi kronis pada kor-
nea mata dan terbentuk jaringan parut yang dapat mengganggu penglihatan dan dapat
menimbulkan kebutaan pada usia dewasa.
Trakoma pada anak-anak di negara berkembang merupakan penyakit endemis.
Akan tetapi, pada usia dini, trakoma sering tidak dapat dibedakan dari konjungtivitis
yang disebabkan oleh bakteri lain.
Diagnosis banding trakoma adalah nodulus pada ^êlopak mata yang disebabkan
oleh Molluscum contagiosimu reaksi toksik atau pengobatan jangka panjang dengan
tetes mata, dan infeksi Staphylococcus kronis pada pinggir kelopak mata. Reaksi
alergi karena pemakaian lensa kontak juga dapat menimbulkan gejala menyerupai tra-
koma, yaitu terbentuk nodulus tarsalis, jaringan parut pada konjungtiva, dan pannus
pada kornea. Beberapa galur klamidia yang dapat menyebabkan penyakit trakoma
adalah Chiamydia trachomatis serovar A, B, Ba, dan C.
Konjungtivitis inklusi
Konjungtivitis inklusi atau swimming pool cunjungtivitis merupakan kunjungtivitis
jinak yang dapat dijumpai pada bayi yang baru lahir atau pada orang dewasa. Secara
klinis, konjungtivitis inklusi berbeda dengan trakoma karena tidak menunjukkan
adanya pannus dan parut pada kornea. Meskipun dianggap sebagai penyakit yang da-
pat sembuh sendiri, penyakit ini dapat menetap selama beberapa bulan atau bahkan
bertahun-tahun pada orang dewasa. Bakteri penyebab penyakit ini adalah Chiamydia
trachomatis serotipe E sampai K.
Bahan pemeriksaan dapat diambil dari serviks seorang ibu atau mata seorang bayi.
Masa inkubasi pada bayi yang baru lahir adalah 5-12 hari. Penyakit ini timbul secara
mendadak dan ditandai dengan infiltrasi konjungtiva dari kelopak mata bagian bawah
disertai dengan eksudat purulenta. Konjungtiva terlihat menebal, terdapat infiltrasi sel
polimorfonuklear (PMN) pada jaringan epitel, dan terlihat adanya badan basofilik
intrasitoplasma yang tidak dapat dibedakan dari trakoma. Stadium akut berlangsung
selama.2 minggu. Gejala kemudian menurun secara bertahap, tetapi kelainan kornea
tidak kembali normal dalam beberapa bulan dan dapat menimbulkan filtrasi selama I
tahun.
Pada orang dewasa, penyakit ini timbul berupa konjungtivitis folikuler akut,.yang
disertai dengan pembentukan sedikit sekret dan pembesaran ringan kelenjar folikuler.
Folikel ini ditemukan pada trakoma, tetapi hipertrofi lebih jelas pada kelopak mata
bagian bawah. Kornea tidak mengalami perubahan. Pada pemeriksaan mikroskopis,
sampel folikel tidak menunjukkan perubahan nekrotik. Penyakit ini dapat sembuh
spontan pada orang dewasa, tanpa meninggalkan kelainan pada kornea atau kon-
jungtiva. Akan tetapi, penyakit ini cenderung berlangsung lebih lama pada bayi.
Meskipun sebenarnya merupakan penyakit pada mata, infeksi dapat pula terjadi
pada saluran urogenital, yang ditularkan lewat hubungan seks.
Badan inklusi dapat ditemukan dalam kerokan saluran urogenital ibu dari bayi
yang sakit. Infeksi umumnya terbatas pada muara serviks bagian luar dan pada epitel
transisi yang secara histologis serupa dengan epitel konjungtiva. Infeksi pada seorang
wanita dapat tidak menimbulkan keluhan apa pun. Sebaliknya, infeksi ini dapat me-
nimbulkan gejala uretritis pada pria.
Bayi dapat tertular dari ibunya pada waktu lahir, sedangkan orang dewasa sering
kali terkena infeksi dari kolam renang yang tercemar oleh seseorang yang mengidap
infeksi pada saluran urogenitalnya. Penyakit ini dapat dicegah dengan pemberian
perak nitrat (AgN03), sediaan sulfa, atau tetrasiklin yang diberikan secara topikal.
P n e u m o n i a
Penyakit paru yang disebabkan oleh infeksi bakteri Chiamydia trachomatis bersifat
sub-akut. Penyakit ini menyerang neonatus yang lahir dari ibu yang mengidap infeksi
pada serviks. Secara klinis, penyakit ini ditandai dengan serangan yang berlangsung
perlahan-lahan, tetapi berbahaya, berupa batuk, demam ringan, bercak-bercak infiltrat
pada fototoraks akibat hiperinfiltrasi, eosinofilia, dan peningkatan IgM dan IgG.
Sekitar setengah dari kasus pada bayi mempunyai gejala prodromal berupa rinitis dan
kunjungtivitis. Lama sakit umumnya 1-3 minggu sampai 2 bulan. Spektrum penyakit
ini cukup luas, yaitu mulai dari rinitis sampai pneumonia berat. Pneumonia yang
terjadi pada bayi sering kali akhirnya berkembang menjadi asma atau penyakit paru
destruktif.
Diagnosis biasanya ditegakkan dengan teknik imunofluoresensi langsung. Titer
antibodi spesifik IgG yang tinggi mendukung diagnosis klinik.
Masa inkubasi penyakit tidak diketahui, tetapi pneumonia dapat muncul pada bayi
berusia I sampai 18 minggu (lebih sering terjadi pada bayi berusia 4-12 minggu).
Infeksi nasofaring biasanya tidak terjadi sebelum usia 2 minggu.
Kiamidiasis
Infeksi klamidia dapat ditularkan melalui hubungan seksual. Pada pria, infeksi klami-
dia dapat berupa uretritis; pada wanita, berupa servisitis mukopurulen. Manifestasi
klinis uretritis terkadang sulit dibedakan dengan gonore, yang meliputi adanya sekret
mukopurulen dalamjumlah sedikit atau sedang, gatal pada uretra, dan rasa panas ke-
tika buang air seni. Infeksi tanpa gejala ditemukan pada 1-25% pria dengan aktivitas
seksual aktif. Komplikasi dan gejala yang terjadi pada infeksi uretra pada pria berupa
Bab 12 - Bakteri Patogen p a d a Kulit dan Mata 197-
epididimitis, infertilitas, dan sindrom Reiter. Pada pria homoseksual, hubungan seks
anorektal dapat menyebabkan proktitis klamidia.
Pada wanita, manifestasi klinis kiamidiasis kemungkinan sama dengan gonore
dan sering kali muncul sekret endoserviks mukopurulen, disertai dengan pembeng-
kakan, eritema, dan mudah menyebabkan perdarahan endoserviks akibat peradangan
epitel endoserviks. Akan tetapi, 70%wanita dengan aktivitas seksual aktif yang men-
derita klamidia tidak menunjukkan gejala. Komplikasi dan gejala lain dapat berupa
salpingitis dan risiko infertilitas, kehamilan di luar kandungan, atau nyeri pelvis
kronis.
Infeksi kronis tanpa gejala pada endometrium dan saluran tuba dapat menunjuk-
kan manifestasi klinis yang sama. Manifestasi klinis lain yang jarang terjadi adalah
bartolinitis; sindrom uretral berupa disuria dan piuria (kencing nanah); perihepatitis
(sindrom Fitz-Hugh-Curtis); dan proktitis. Infeksi selama kehamilan dapat mengaki-
batkan ketuban pecah dini dan menyebabkan kelahiran prematur, serta dapat menye-
babkan konjungtivitis dan radang paru pada bayi yang baru lahir. Infeksi klamidia
pada endoserviks meningkatkan risiko terkena infeksi HIV{human immunodeficiency
virus).
Infeksi klamidia dapat terjadi bersamaan dengan gonore dan tetap bertahan walau-
pun gonore telah sembuh. Karena servisitis yang disebabkan oleh gonokokus dan
klamidia sulit dibedakan secara klinis, pengobatan untuk kedua bakteri ini dilakukan
setelah diagnosis pasti dilakukan. Pengobatan gonore tidak selalu dilakukan jika
diagnosis penyakit disebabkan oleh Chiamydia trachomatis.
Masa inkubasi penyakit belum diketahui dengan jelas, diperkirakan 7-14 hari atau
lebih. Sebanyak 35-50%kasus uretritis non-gonokokus di Amerika Serikat ditemukan
disebabkan oleh Chiamydia trachomatis serotipe Dsampai K.
L i m f o g r a n u l o m a v e n e r e u m
Limfogranuloma venereum adalah penyakit seksual menular yang disebabkan oleh

Chiamydia trachomatis. Penyakit ini terutama ditemukan di daerah tropis dan subtropis.
Galur Chiamydia trachomatis yang menyebabkan limfogranuloma venereum berbeda
dengan galur Chiamydia trachomatis yang menyebabkan uretritis dan servisitis.
Gejala penyakit timbul dalam 3-12 hari atau lebih setelah terinfeksi. Pada penis
dan vagina, timbul lepuhan kecil berisi cairan yang tidak disertai nyeri. Lepuhan ini
berubah menjadi ulkus (luka terbuka) yang segera membaik sehingga sering kali tidak
diperhatikan oleh penderita. Selanjutnya, terjadi pembengkakan kelenjar getah bening
pada salah satu atau kedua selangkangan. Kulit di atas kelenjar getah bening tersebut
akan tampak kemerahan; jika tidak diobati, lubang (sinus) akan terbentuk pada kulit
di atas kelenjar getah bening tersebut. Nanah atau cairan kemerahan akan keluar dari
lubang ini dan dapat membaik, tetapi biasanya meninggalkan jaringan parut atau
kambuh kembali.
Gejala lain adalah demam, tidak enak badan, sakit kepala, nyeri sendi, nafsu ma-
kan berkurang, muntah, sakit punggung, dan infeksi rektum yang menyebabkan
keluarnya nanah bercampur darah.
Pembuluh getah bening dapat mengalami penyumbatan karena penyakit yang ber-
ulang dan berlangsung lama sehingga terjadi pembengkakan jaringan. Infeksi pada
daerah rektum dapat menyebabkan pembentukan jaringan parut yang selanjutnya
mengakibatkan penyempitan rektum. Pada kasus seperti ini, tindakan bedah biasanya
diperlukan.
Pemeriksaan laboratorium Chlamydici trachomatis perlu dilakukan untuk menegak-
kan diagnosis infeksi klamidia secara klinis. Spesimen pemeriksaan diambil dari
organ yang terinfeksi. Spesimen diperiksa dengan metode imunofluoresensi langsung
menggunakan antibodi monoklonal; penetapan imunologis enzim (ElA); DNA probe;
uji amplifikasi asam nukleat (nucleic acid amplification test, NAAT), dan dengan
menggunakan biakan sel. NAAT dapat dilakukan pada spesimen urine.
Epidemiologi
Penyakit yang disebabkan oleh infeksi klamidia tersebar di seluruh dunia. Infeksi ini
banyak ditemukan di negara berkembang dan bersifat endemis, terutama pada masya-
rakat yang kurang mampu. Di daerah endemis, trakoma muncul pada masa kanak-
kanak, dan kemudian, meninggalkan jaringan parut di masa remaja dengan tingkat
distabilitas yang bervariasi dan kemungkinan dapat menjadi buta.
Penularan infeksi terjadi melalui kontak langsung dengan penderita yang terinfeksi,
yaitu melalui sekret yang keluar dari mata dan nasofaring, ataupun secara tidak lang-
sung melalui benda-benda yang terkontaminasi, seperti handuk, pakaian, dan benda
lain yang terkontaminasi. Masa penularan berlangsung selama masih ada lesi aktif di
konjungtiva. Lalat, terutama Miisca sorbens di Afrika dan Timur Tengah, dan jenis
Hippelates di Amerika Selatan merupakan binatang yang ikut berperan dalam penye-
baran penyakit.
Konjungtivitis d a n traiioma
Pencegahan dan pengobatan konjungtivitis dan trakoma yang disebabkan oleh klami-
dia dapat dilakukan dengan cara berikut.
1. Memberikan penyuluhan pada masyarakat tentang pentingnya menjaga keber-
sihan perorangan, terutama yang berkaitan dengan risiko penggunaan sarana dan
prasarana umum.
2. Memperbaiki fasilitas sanitasi dasar, selalu menggunakan air dan sabun, serta
sering mencuci muka dan menghindarkan penggunaan peralatan mandi bersama.
3. Menyediakan fasilitas pelayanan kesehatan dan pengobatan yang cukup serta
fasilitas untuk menemukan penderita, terutama anak-anak prasekolah.
4. Melakukan investigasi epidemiologis untuk mencari faktor yang berperan dalam
proses penularan penyakit pada situasi tertentu.
5. Melakukan disinfeksi serentak terhadap seluruh peralatan yang tercemar.
6. Melakukan investigasi terhadap kontak dan sumber infeksi pada seluruh anggota
keluarga, teman bermain, dan teman sekolah penderita.
7. Memberikan pengobatan spesifik. Di daerah penyebaran penyakit yang merata,
pengobatan massal dapat dilakukan, terutama ditujukan pada anak-anak dan balita
(yaitu dengan memberikan salep mata tetrasiklin atau eritromisin 2 kali sehari
selama 5 hari).
8. Memberikan pengobatan oral dengan antibiotik tetrasiklin, eritromisin, sulfona-
mida, dan azitromisin.
Infeksi urogenital
Pencegahan dan pengobatan infeksi urogenital yang disebabkan oleh klamidia dapat
dilakukan dengan cara sebagai berikut.
1. Memberikan penyuluhan kesehatan dan pendidikan seksual dengan penekanan
pada penggunaan kondom ketika melakukan hubungan seksual dengan bukan pa-
sangan.
2. Melakukan pemeriksaan pada wanita yang aktif secara seksual, orang-orang yang
akan menikah atau baru menikah, dan orang-orang yang mempunyai beberapa
pasangan seksual atau yang tidak konsisten menggunakan kondom.
3. Melakukan disinfeksi serentak terhadap benda-benda yang terkontaminasi oleh
sekret uretra dan vagina.
4. Melakukan investigasi riwayat kontak dengan penderita atau sumber infeksi.
5. Tidak melakukan hubungan seksual dengan pasangan yang diketahui menderita
infeksi klamidia.
6. Menggunakan kondom atau tidak berganti-ganti pasangan seksual.
Profilaksis dapat diberikan pada pasangan seksual penderita dan pengobatan yang
sama diberikan pada pasangan tetap. Bayi yang dilahirkan dari ibuyang terinfeksi dan
belum mendapat pengobatan sistemik perlu mendapat pemeriksaan fototoraks pada
usia 3 minggu dan diulangi lagi sesudah 12-18 minggu untuk mengetahui adanya
pneumonia klamidia subklinis.
Pengobatan spesifik dapat dilakukan dengan pemberian doksisiklin 100 mg 2 kali
sehari selama 7 hari atau tetrasiklin 500 mg 4 kali sehari selama 7 hari. Eritromisin
merupakan obat alternatif dan obat pilihan untuk bayi baru lahir dan wanita hamil.
Selain itu, dapat juga diberikan azitromisin dosis tunggal 1 gram/hari.
Streptococcus pyogenes
Streptococcus pyogenes atau yang dikenal dengan Streptococcus beta hemolyticus
groupA merupakan bakteri Gram-positif berbentuk kokus dengan diameter 0,5-1 |.im.
Streptococcus pyogenes tumbuh tersusun menyerupai bentuk rantai yang khas. Dalam
media perbenihan cair yang sesuai, Streptococcus pyogenes dapat membentuk rantai
panjang yang terdiri atas 8 buah kokus atau lebih. Seperti yang diuraikan dalam Bab
11, Streptococcus dapat menimbulkan berbagai jenis penyakit infeksi. Bab ini akan
200 Buku Ajdr Mikrobiologi: Panduan Mahasiswa Farmasi dan Kedokteran
menguraikan lebih lanjut tentang beberapa hal yang berhubungan dengan penyakit
infeksi kulit yang disebabkan oleh Streptococcus pyogenes.
Penyakit infeksi S t r e p t o c o c c u s pyogenes

Streptococcus pyogenes dapat menyebabkan infeksi kulit berupa erisipelas, impetigo,
atau infeksi kulit lain.
Erisipelas
Erisipelas merupakan penyakit infeksi pada kulit yang cukup serius yang disebabkan
oleh Streptococcus pyogenes. Jika bakteri masuk melalui kulit atau selaput lendir,
erisipelas dapat terjadi, yaitu berupa selulitis superfisialis dengan batas lesi yang tegas,
berwarna merah terang, terjadi edema, dan sangat nyeri. Keadaan ini dapat menye-
babkan destruksi lokal pada lapisan dalam kulit, bahkan dapat terjadi invasi ke dalam
peredaran darah dan dapat menyebabkan sepsis. Penderita akan tampak sakit berat
disertai dengan demam tinggi. Pada pemeriksaan laboratorium, tampak terjadi leuko-
sitosis, yaitu jumlah leukosit lebih dari 15.000. Titer antistreptolisin O (ASO)
meningkat setelah 7-10 hari. Pada kondisi ini, bakteri Streptococcus pyogenes tidak
ditemukan di dalam darah melainkan di dalam cairan getah bening dari pinggir lesi
yang sedang meluas, terutama di dalamjaringan subkutan.
Pengobatan dengan antibiotik dianjurkan untuk mencegah komplikasi yang fatal
sehingga biasanya dapat menekan mortalitas. Namun, penyakit ini dapat berkembang
dengan sangat cepat pada bayi, pada penderita yang kekebalan tubuhnya menurun,
dan pada penderita yang menggunakan kortikosteroid sehingga dapat menyebabkan
kematian.
Penyakit ini cenderung kambuh pada tempat yang sama sehingga terbentuk sum-
batan pada saluran getah bening yang bersifat menahun. Kulit setempat tumbuh secara
tidak teratur sehingga terjadi elephantiasis nostras verrucosa. Jika lokasi infeksi
terjadi di bibir, dapat terjadi makrokeilia, yaitu pembengkakan bibir yang bersifat
persisten.
Impetigo
Seperti Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes dapat menimbulkan infeksi

kulit yang disebut dengan impetigo. Infeksi impetigo bersifat superfisial disertai de-
ngan pembentukan vesikulopustular (erupsi berupa vesikula dan pustula) di lapisan
bawah stratum komeum. Infeksi ini biasanya terjadi pada anak-anak usia sekolah dan
sangat menular. Bagian kulit yang mengelupas diliputi oleh krusta (kulit yang menge-
rak) berwarna kuning madu. Infeksi yang disebabkan oleh Streptococcus pyogenes
biasanya bersifat lokal. Namun, jika dapat mencapai lapisan kulit yang lebih dalam,
bakteri akan merusak jaringan kulit yang lebih dalam dan memproduksi berbagai
senyawa yang dapat mempercepat terjadi invasi bakteri. Beberapa senyawa yang
dapat menjadi faktor invasi bakteri Streptococcus pyogenes melalui lesi pada kulit
Bab 12 - Bakteri Patogen p a d a Kulit dan Mata 20l|;
• Streptokinase, yaitu enzim yang dapat menguraikan bekuan darah {dot).

• Hialuronidase, yaitu enzim yang dapat menguraikan asam hialuronat.
• Deoksiribonuklease, yaitu enzim yang dapat mendegradasi DNA.
• Leukosidin Streptococcus, yaitu senyawa yang mampu merusak leukosit sehingga
bakteri tahan terhadap sel-sel kekebalan tubuh hospes.
• Toksin eritrogenik, yaitu senyawa yang dapat menyebabkan demam, dan ruam
merah pada kulit.
Infeksi lain
Infeksi lain yang disebabkan oleh Streptococcus pyogenes yang menyerang jaringan
kulit yang lebih dalam adalah selulitis, miositis, dan fasiitis nekrotik.
Pengobatan
Pemberian antibiotik yang tepat merupakan cara pengobatan yang terbaik untuk in-
feksi yang disebabkan oleh Streptococcus pyogenes.
Sampai saat ini, semua Streptococcus beta hemolyticus group A sensitif terhadap
penisilin G. Uji sensitivitas bakteri Streptococcus beta hemolyticus group A terhadap
berbagai jenis antibiotik penting dilakukan dalam pemilihan obat yang rasional.
P s e u d o m o n a s aeruginosa
Bakteri Pseudomonas aeruginosa termasuk dalam famili Pseudomonadaceae. Bakteri
ini merupakan bakteri Gram-negatif, mempunyai flagel tunggal yang bersifat polar
atau terkadang terdiri atas 2-3 flagel, dan mempunyai ukuran 0,5-1 |im x 3- 4 f.im.
Bila ditumbuhkan pada perbenihan tanpa sukrosa, bakteri ini dapat memproduksi
lapisan lendir polisakarida ekstraseluler. Galur yang diisolasi dari bahan klinik sering
kali mempunyai pili yang berperan penting dalam pelekatan pada permukaan sel dan
resistensi bakteri terhadap fagositosis.
Pseudomonas aeruginosa sering kali dihubungkan dengan penyakit yang ditular-
kan secara nosokomial pada manusia, yaitu infeksi yang didapat di rumah sakit. Bak-
teri ini sering diisolasi dari penderita luka dan luka bakar yang berat. Selain dapat
menyebabkan infeksi pada kulit, mata, atau telinga, Pseudomonas aeruginosa dapat
menyebabkan infeksi^ pada saluran napas bagian bawah, saluran kemih, dan organ
lain.
Bakteri Pseudomonas aeruginosa sangat mudah beradaptasi dan dapat tumbuh
dalam lingkungan yang sangat kekurangan sumber energi, bahkan dapat hidup dan
tumbuh dalamair suling. Bakteri ini dapat menggunakan asetat sebagai sumber karbon
dan amonia sebagai sumber nitrogen. Suhu pertumbuhan optimum adalah 37"C, tetapi
juga dapat tumbuh pada suhu 42"C.
Pseudomonas aeruginosa merupakan satu-satunya bakteri yang menghasilkan
pigmen piosianin, yang berwarna biru kehijauan dan dapat larut dalam kloroform. dan
pigmen fluoresen, pioverdin, yang larut dalam air.
202 Buk u Ajar Mikrobiologi: Panduan Mahasiswa Farmasi dan Kedokteran
Daya tahan
Pseudomonas aeruginosa lebih tahan terhadap lingkungan fisik dan bahan kimia dari-
pada bakteri lain. Bakteri ini resisten terhadap beberapa jenis disinfektan, antiseptik,
dan antibiotik yang sudah sering kali digunakan dalam pengobatan. Bakteri ini dapat
hidup dalam suasana lembap dan pada alat kesehatan, lantai, kamar mandi, dan tem-
pat-tempat air. Disinfektan yang efektif adalah fenol dan p-glutaraldehida. Bakteri ini
akan mati dengan pemanasan tinggi, misalnya dalam air mendidih.
Sebagaimana diuraikan sebelumnya, Pseudomonas aeruginosa merupakan bakteri
oportunistik. Oleh karena itu, perjalanan penyakit infeksi bakteri ini tentunya didahu-
lui oleh penurunan kondisi atau kekebalan tubuh penderita. Infeksi yang disebabkan
oleh Pseudomonas aeruginosa umumnya bersifat invasif dan toksigenik.
Tahapan infeksi bakteri Pseudomonas aeruginosa terdiri atas {a) penempelan bak-
teri dan kolonisasi; {b) invasi lokal; dan (c) penyebaran bakteri melalui sistem per-
edaran darah. Namun demikian, tahapan infeksi tersebut tidak harus dilalui semua
karena proses infeksi dapat berhenti di setiap tahap, bergantung pada sifat dan kondisi
penderita.
P e n e m p e l a n bakteri d a n kolonisasi
Walaupun proses kolonisasi umumnya terjadi setelah bakteri menempel pada sel hos-
pes, mekanisme transmisi bakteri Pseudomonas aeruginosa menjadi patogen bagi
penderita belum diketahui secara pasti karena bakteri ini banyak tersebar di dalam
lingkungan dan merupakan flora normal tubuh manusia.
Pili dan fimbria sel bakteri Pseudomonas aeruginosa akan menempel pada sel-sel
epitel penderita. Adhesin bakteri akan berikatan dengan reseptor yang terdapat pada
sel-sel epitel yang mengandung senyawa galaktosa, manosa, atau asam sialat. Setelah
menempel pada reseptor di sel epitel, bakteri tersebut akan berkembang biak dengan
pesat atau melakukan kolonisasi.
Pseudomonas aeruginosa yang bersifat mukoid memproduksi eksopolisakarida
sebagai simpai dinding sel bakteri yang dapat melindungi bakteri dari sel-sel perta-
hanan tubuh penderita, seperti sel limfosit, sel fagosit, antibodi, dan sistem komplemen
sehingga bakteri dapat tumbuh dengan baik.
Invasi
Kemampuan Pseudomonas aeruginosa menginvasi jaringan tubuh bergantung pada
kemampuan bakteri ini memproduksi berbagai enzim ekstraseluler yang dapat meru-
sak fungsi sel-sel kekebalan tubuh penderita. Enzim ekstraseluler yang berperan
adalah protease, yang terdiri atas enzim elastase dan alkalin protease. Enzim ektra-
seluler ini dapat merusakjaringan kolagen, IgA, IgG, komplemen, dan dapat melisiskan
fibronektin serta merusakjaringan epitel.
Pseudomonas aeruginosa juga memproduksi beberapa protein yang membantu
proses invasi, yaitu sitotoksin, hemolisin, dan leukosidin. Selain itu, produksi pigmen
piosianin juga dianggap sebagai salah satu faktor virulensi bakteri Pseudomonas
aeruginosa. Bakteri ini juga memproduksi eksotoksin Adan eksotoksin S yang juga
merupakan faktor penting dalam proses invasi Pseudomonas aeruginosa.
P e n y e b a r a n bakteri melaiui s i s t e m p e r e d a r a n d a r ah
Mekanisme diseminasi atau penyebaran bakteri Pseudomonas aeruginosa ke dalam
sistem peredaran darah belum sepenuhnya diketahui secara pasti. Beberapa produk
ekstraseluler bakteri diperkirakan memegang peranan sangat penting dalam disemi-
nasi Pseudomonas aeruginosa ke dalam sistem peredaran darah. Pseudomonas aeru-
ginosa resisten terhadap fagositosis karena memiliki kapsul bakteri yang bersifat
mukoid dan lipopolisakarida (LPS). Selain itu, bakteri ini memiliki enzim protease
yang dapat menghambat kerja komplemen, merusak antibodi IgG, dan menginaktif-
kan interferon dan sitokin. Endotoksin Pseudomonas aeruginosa dapat menimbulkan
gejala-gejala septisemia, antara lain demam, hipotensi, dan koagulasi di pembuluh
darah.
Penyakit infeksi P s e u d o m o n a s aeruginosa
Pseudomonas aeruginosa dapat menyebabkan beberapa penyakit infeksi pada kulit
dan mata.
Dermatitis
Dermatitis merupakan infeksi kulit yang disebabkan oleh Pseudomonas aeruginosa.
Penyakit yang biasanya dapat sembuh sendiri ini sering kali berjangkit di antara pe-
renang yang menggunakan kolam renang yang terkontaminasi oleh Pseudomonas
aeruginosa. Tempat-tempat umum lain yang sering menjadi sumber penularan antara
lain tempat mandi sauna dan kamar mandi hotel dan penginapan. Dermatitis Pseu-
domonas juga sering dialami oleh bayi atau orang tua yang menggunakan pembalut
(dia per).
Otitis e k s t e r n a
Infeksi ini sering diderita oleh perenang atau anak-anak melalui air kolam renang atau
air mandi yang terkontaminasi oleh Pseudomonas aeruginosa. Air yang tercemar
tersebut masuk melalui telinga dan menyebabkan infeksi pada kanal telinga sampai
bagian tengah telinga.
Folikulitis
Infeksi ini disebabkan oleh bakteri Pseudomonas aeruginosa yang menyerang folikel
rambut. Infeksi kemudian dapat berkembang menjadi lesi kulit yang parah atau je-
rawat yang sulit disembuhkan.
Infeksi p a d a m a t a
Jika bakteri Pseudomonas aeruginosa dapat berkolonisasi pada jaringan epitel kornea
mata, terutama ketika sistem kekebalan tubuh penderita menurun, invasi bakteri akan
terjadi. Hal ini dapat menyebabkan kerusakan jaringan kornea dan dapat menyebab-
kan kebutaan.
Infeksi p a d a luka b a k a r
Pseudomonas aeruginosa merupakan bakteri oportunistik yang sering ditemukan
pada penderita luka bakar, khususnya luka bakar yang sangat parah.
Selain infeksi lokal, sebagaimana yang telah dijelaskan, infeksi Pseudomonas
aeruginosa dapat berkembang menjadi infeksi sistemik di berbagai organ tubuh lain,
terutama ketika daya tahan tubuh menurun atau ketika penderita juga mengidap ber-
bagai penyakit lain, seperti kanker, diabetes, AIDS, neutropenia, atau menderita luka
bakar yang parah. Pseudomonas aeruginosa dapat menyebabkan bakteremia, septise-
mia, dan beberapa infeksi lain, seperti endokarditis, pneumonia, osteomielitis kronis,
dan infeksi saluran kemih. Selain itu, Pseudomonas aeruginosa dapat menyebabkan
infeksi pada saluran cerna, mulai dari orofaring sampai rektum.
Pemeriksaan laboratorium untuk menentukan keberadaan bakteri Pseudomonas aeru-
ginosa perlu dilakukan untuk memastikan penyebab infeksi. Bakteri ini dapat tumbuh
pada berbagai media yang biasanya digunakan untuk mengisolasi bakteri. Media se-
lektif yang digunakan biasanya adalah media agar darah atau media eosin-methyl
thionine blue agar.
Pseudomonas aeruginosa dapat diidentifikasi dengan pewarnaan Gram, tidak
meragi laktosa, memberikan reaksi oksidase positif, dan dapat tumbuh pada suhu
42''C. Koloni Pseudomonas aeruginosa berbau seperti buah-buahan dan berwarna
spesifik.
Beberapa jenis antibiotik tidak efektif terhadap Pseudomonas aeruginosa. Oleh sebab
itu, uji resistensi bakteri perlu dilakukan untuk memilih antibiotik yang tepat. Bakteri
ini biasanya peka terhadap amikasin, gentamisin, tobramisin, dan kolistin. Kombinasi
antibiotik gentamisin dan karbenisilin sering digunakan untuk mengobati infeksi
Pseudomonas aeruginosa yang berat.
Bakteri Pseudomonas aeruginosa sangat penting diperhatikan karena merupakan
bakteri utama dalam infeksi nosokomial agar penyebarannya tidak semakin meluas.
Sterilitas alat-alat medis dan alat bantu medis hendaknya diperhatikan dan lingkungan
rumah sakit dijaga agar tetap bersih dan higienis.
Epidemiologi
Infeksi Pseudomonas aeruginosa biasanya terjadi pada penderita yang mempunyai
daya tahan tubuh yang menurun, misalnya penderita yang mengidap penyakit meta-
bolik tertentu yang dapat menurunkan daya tahan tubuhnya; penderita luka bakar atau
sakit berat; pasien yang mengonsumsi obat imunosupresan; atau pasien yang meng-
gunakan alat-alat bantu medis.
Selain terdapat pada tanah dan air, Pseudomonas juga merupakan flora di kulit dan
saluran cerna individu normal. Pada umumnya, Pseudomonas aeruginosa dapat dite-
mukan di lingkungan rumah sakit dan peralatan yang digunakan di dalamrumah sakit,
seperti pada kateter, peralatan suntik dan infiis, peralatan makan, makanan, minuman,
peralatan mandi, dan alat kesehatan lain. Penyebaran nosokomial melalui pasien ke
pasien dan antarpetugas kesehatan lebih sering terjadi daripada penyebaran melalui
udara. Pengawasan terhadap penyebaran bakteri ini, khususnya di rumah sakit, perlu
mendapatkan perhatian utama. Di bangsal luka bakar atau unit perawatan penyakit
kanker, prevalensi bakteri Pseudomonas aeruginosa mencapai lebih dari 30% dari
semua penyebab infeksi.
Propionibacterium a c n e s
Propionibacterium acnes merupakan bakteri anaerob yang ditemukan pada kulit.
Bakteri ini tumbuh dengan lambat dan bersifat Gram-positif
Jerawat adalah penyakit kulit yang menyerang lebih dari 85% kalangan remaja di
seluruh dunia. Jerawat atau acne dapat dibagi dalam tiga kategori, yaitu komedo,
inflamasi, dan nodular cystic acne. Jerawat timbul karena beberapa faktor, yaitu pro-
duksi sebum yang berlebihan, hiperkeratinasi abnormal pada folikel, hiperkeratinosit,
kolonisasi bakteri Propionibacterium acnes, dan inflamasi.
Jerawat terjadi apabila saluran ke permukaan kulit untuk mengeluarkan sebum
yang diproduksi oleh kelenjar minyak rambut pada lapisan dermis tersumbat. Dalam
keadaan normal, sel-sel folikel rambut dapat keluar. Akan tetapi, jika terjadi jerawat,
sel-sel folikel rambut bersama dengan sebum akan menggumpal dan menyumbat sa-
luran folikel rambut pada lapisan epidermis kulit sehingga membentuk komedo yang
menonjol di permukaan kulit. Komedo ini akan berkembang menjadi inflamasi (in-
jiammatory acne) apabila terinfeksi oleh bakteri, terutama bakteri Propionibacterium
acnes. Bakteri ini menggunakan gliserol dalam sebum sebagai sumber nutrisi. Pro-
pionibacterium acnes membentuk asam lemak bebas dari sebum, yang menyebabkan
sel-sel neutrofil menunjukkan respons untuk mengeluarkan enzimyang dapat merusak
dinding folikel rambut. Keadaan ini dapat menyebabkan inflamasi sehingga timbul
pustula dan papula pada kulit.
Pada beberapa individu, jerawat dapat berkembang menjadi nodular cystic acne,
yang ditandai dengan terbentuknya nodula atau parut akibat peradangan. Lesi pada
kulit ini disertai dengan adanya nanah pada jerawat dan akan meninggalkan bekas
luka yang permanen pada kulit ketika sembuh.
Pengobatan
Obat-obat topikal tidak dapat mengurangi sebum yang diproduksi oleh kelenjar
minyak rambut pada lapisan kulit karena produksi sebum berhubungan dengan faktor
hormonal seseorang. Perubahan hormonal individu dapat mengurangi produksi se-

bum.
Obat-obat topikal untuk komedo antara lain sediaan asam salisilat, retinoid, treti-
noin, tazaroten, dan adapalen. Jerawat yang disertai peradangan dapat diobati dengan
antibiotik yang dapat menghilangkan atau menghambat pertumbuhan bakteri Propio-
nibacterium acnes, antara lain eritromisin dan benzamisin. Beberapa sediaan topikal
juga sering digunakan, yaitu salep yang mengandung benzoil peroksida atau tretinoin.
Sediaan isotretinoin dapat digunakan untuk jerawat yang semakin parah. Akan tetapi,
sediaan ini harus digunakan secara hati-hati terutama untuk wanita hamil, walaupun
hanya untuk beberapa hari, karena mempunyai efek teratogenik.
BAB 1 3
BAKTERI PATOGEN
PADA SALURAN
UROGENITAL
• Pe n d a h u l u a n
• Neisseria gonorrhoeae
m Treponema pallidum
m Leptospira interrogans
m Cardnerella uaginalis
207
208 Bubu Ajar Mikrobiologi: Pand
PENDAHULUAN
Berbagai jenis bakteri dapat menimbulkan penyakit infeksi pada saluran urine dan
alat reproduksi. Sistem saluran urine terdiri atas ginjal, ureter, kandung kemih, dan
uretra. Sistemreproduksi wanita adalah ovarium, saluran telur, uterus, serviks, vagina,
dan alat genital bagian eksternal. Sistem reproduksi pria terdiri atas testis, kelenjar
prostat, dan penis.
Urine steril dalam keadaan normal, tetapi dapat terkontaminasi oleh bakteri yang
merupakan flora normal kulit di sekitar uretra tempat urine tersebut dikeluarkan. Oleh
karena itu, urine yang dikeluarkan langsung dari kandung kemih mengandung jumlah
bakteri yang jauh lebih sedikit dibandingkan urine yang dikeluarkan secara normal
melalui uretu^.
Infeksi saluran urine dan alat reproduksi biasanya disebabkan oleh bakteri yang
dapat masuk dari luar ke dalam sistem saluran urine dan sistem reproduksi. Karena
letak alat kelamin dan anus berdekatan, infeksi saluran urine umumnya berasal dari
bakteri enterik yang terdapat dalamsaluran cerna.
Sebagian besar infeksi saluran urine disebabkan oleh Escherichia coli, Proteus,
Klebsiella, Enterococcus, Pseudomonas, dan Leptospira. Bakteri yang menyebabkan
infeksi pada sistem reproduksi adalah bakteri yang ditularkan melalui hubungan
seksual.
Di antara beberapa golongan bakteri yang dapat ditularkan melalui hubungan sek-
sual, bakteri yang palmg sering menjadi penyebab infeksi pada sistem reproduksi
adalah Neisseria gonorrhoeae dan Treponema pallidum. Seperti yang telah dibahas
pada Bab 12 tentang kiamidiasis, bakteri Chiamydia trachomatis merupakan bakteri
yang dapat menyebabkan uretritis non-gonokokus, berupa limfogranuloma veiiereum,
yangjuga merupakan salah satu penyakit seksual menular.
Neisseria gonorrltoeae
Neisseria gonorrhoeae atau gonokokus termasuk dalam famili Neisseriaceae. Bakteri
ini berbentuk. diplokokus, berdiameter 0,8 |im, selalu berpasangan, berkapsul, tidak
bergerak secara aktif, dantidakberspora. Secaraumum, struktav Neisseria gonorrhoeae
miripNeisseria meningitidis, tetapi keduanya dapat dibedakan dari hasil fermentasinya,
yaitu Neisseria gonorrhoeae tidak menghasilkan asam dari peragian maltosa.
Perbedaan antara galur yang berasal dari isolasi primer dan galur hasil subkultur
terletak pada sifat virulensi bakteri. Galur gonokokus yang berasal dari isolasi primer
mempunyai pili pada permukaan selnya, sedangkan galur yang berasal dari subkultur,
tidak atau sedikit mempunyai pili. Pili berfungsi sebagai alat penempel pada sel epitel
uretra, mukosa mulut, atau sperma. Pili juga dapat menghambat fagositosis dan ber-
fungsi sebagai alat pemindah plasmid, baik antar-gonokokus maupun dengan bakteri
lain, seperti Escherichia coli.
Koloni bakteri hasil isolasi primer berbentuk cembung dengan permukaan yang
mengilap, bersifat mukoid, dan berdiameter 1-5 mm. Galur subkultur membentuk
Bab 13 - Bal?teri Patogen p a d a Saluran Urogenital 209|
koloni yang kurang cembung dan kurang mengilap. Bakteri ini bersifat aerob atau
mikroaerofilik. Untuk menumbuhkan bakteri ini, diperlukan kondisi udara yang me-
ngandung kadar CO^ sekitar 5%.
Berdasarkan jenis protein yang terdapat pada membran selnya, Neisseria gonor-
rhoeae memiliki 16 serotipe.
Penyakit yang disebabkan oleh infeksi gonokokus disebut gonore. Pada umumnya,
infeksi primer dimulai pada epitel silindris dari uretra atau beberapa kelenjar di seki-
tarnya. Bakteri dapat masuk melalui mukosa serviks, konjungtiva, atau saluran rek-
tum. Bakteri menempel pada permukaan sel epitel atau mukosa, mencapai jaringan
ikat di bawah kulit dalam tiga hari, dan menembus ruang antarsel. Selanjutnya, terjadi
peradangan berupa infiltrasi leukosit polimorfonuklear dan terbentuk kista retensi dan
abses karena penyumbatan saluran/kelenjar eksudat. Kerusakan pada epitel menye-
babkan terbentuknya celah pada mukosa sehingga dapat mempermudah dan mem-
percepat masuknya bakteri.
Penularan gonore banyak terjadi melalui kontak seksual. Infeksi pada pria ditandai
dengan keluhan disuria dan pengeluaran nanah ketika buang air kecil. Sekitar 10%
penderita tidak menunjukkan gejala sehingga berpotensi menjadi sumber penularan.
Demam dan leukositosis terkadang timbul, tetapi jarang dijumpai gejala sistemik
yang lain.
Infeksi pada wanita umumnya menunjukkan gejala yang ringan. Gejala biasanya
berupa disuria atau poliuria, keluar getah dari vagina, demam, atau nyeri perut. Kom-
plikasi juga dapat timbul berupa radang pelvis, yang merupakan kelanjutan infeksi
yang terjadi dalam saluran tuba falopi (tuba uterus). Hal ini dapat menyebabkan ter-
jadi kemandulan di kemudian hari. Meskipun dapat disembuhkan, jaringan parut yang
terbentuk akan menghalangi keluarnya sel telur dan cairan dari ovarium. Keluhan
lainnya adalah perihepatitis atau peritonitis. Kolonisasi gonokokus di dalam rektum
ditemukan pada 50% penderita. Vulvovaginitis dapat ditemukan pada anak perem-
puan berusia 2-8 tahun atau pada wanita menopause.
Infeksi pada anak juga dapat terjadi pada masa perinatal, saat melewati jalan lahir,
yaitu konjungtivitis pada neonatus. Jika dibiarkan, kondisi ini dapat menyebabkan
kebutaan. Neonatus juga dapat terkena artritis gonore destruktif pada saat kelahiran
karena sang ibu menderita gonore diseminata pada saat melahirkan. Infeksi gonore
diseminata (IGD) terjadi apabila gonokokus mukosa menginvasi aliran darah. Dise-
minasi dapat terjadi dari saluran urogenital, anorektal, atau faring. Kejadian diseminasi
dipengaruhi oleh faktor bakteri dan daya tahan hospes.
Faktor bakteri
Gonokokus yang diperoleh dari darah, cairan sendi, mukosa uretra pria asimtomatik,
serviks, uterus wanita ketika menstruasi, atau bahan peritoneum biasanya membentuk
koloni transparan. Sebaliknya, gonokokus yang diambil dari uretra pria yang menderita
uretritis simtomatik atau dari serviks wanita pada pertengahan siklus haid biasanya
f; 210 Bubu Ajar Mikrobiologi: Panduan Mahasiswa Farmasi dan Kedol?teran
i membentuk koloni legap. Oleh karena itu, koloni transparan tampaknya merupakan
bentuk gonokokus invasif. Akan tetapi, perubahan sifat invasif koloni tersebut belum
^ diketahui secara pasti. Galur IGDumumnya sangat peka terhadap penisilin G, kecuali
I yang mampu memproduksi p-laktamase. Di samping itu, kebutuhan nutrisi arginin,
- hipoxantin, dan urasil, yang dikenal dengan tipe oksotipe Arg', Hyx-, dan Ura", sering
; dihubungkan dengan infeksi mukosa asimtomatik.
i D a y a t a h a n h o s p e s
^ Faktor hospes yang penting dalam perkembangan infeksi gonore diseminata (IGD)
adalah defisiensi atau kelainan salah satu komponen komplemen C5 ,C7, atau C8
karena komponen tersebut penting untuk kerja bakteriolisis dalam serum.
Faktor hormonal pada wanita kemungkinan memegang peranan penting karena
kebanyakan kasus IGDterjadi pada masa menstruasi atau kehamilan.
Patogenesis manifestasi klinik artritis septik, meningitis, dan endokarditis lebih
berhubungan dengan invasi aktif gonokokus, sedangkan patogenesis mioperikarditis,
hepatitis, dan artritis steril belum jelas. Mekanisme hipersensitivitas diduga terjadi
melalui pembentukan kompleks imun. Selain itu, efek toksik endotoksin gonokokus
padajaringan kemungkinan dapat menimbulkan manifestasi klinik tersebut.
Epidemiologi
Gonore metastatik dapat terjadi karena penyebaran secara hematogen. Angka kejadian
sekitar 1%dari penderita gonore. IGD (infeksi gonore diseminata) terjadi setelah in-
feksi mukosa gonokokus, dengan prevalensi 1-5%. Angka kejadian lebih tinggi pada
populasi yang memiliki risiko tinggi mengalami infeksi mukosa dan pada dewasa
muda dibandingkan pada orang tua. Kejadian gonore bervariasi berdasarkan jenis
kelamin. Pada era pra-antibiotik, kebanyakan kasus infeksi gonokokus diseminata
terjadi pada pria. Setelah adanya antimikroba dan terapi infeksi simtomatik pada pria,
infeksi gonokokus diseminata lebih sering terjadi pada wanita dan kemungkinan pada
pria homoseksual. Kira-kira separuh kasus infeksi gonokokus diseminata pada wanita
terjadi lima hari sebelum menstruasi sampai selesai menstruasi atau pada kehamilan.
Penelitian Amstrong dkk. (1976) menunjukkan bahwa galur IGDditemukan pada
hampir separuh isolat yangdiperoleh dari penderita infeksi gonokokus diseminata dan
hanya 5%isolat pada penderita infeksi mukosa lokalisata.
Masa inkubasi IGDkemungkinan dipengaruhi oleh faktor hospes dan sifat invasif
bakteri. Data menunjukkan kasus-kasus IGD terjadi beberapa hari setelah infeksi
mukosa, tetapi masa inkubasi umumnya 7-30 hari. Pada wanita, IGD sering terjadi
pada menstruasi pertama setelah infeksi mukosa.
Pencegahan infeksi gonokokus pada mata bayi dapat dilakukan dengan meneteskan
larutan AgNOj 1%ke dalamsaccus conjimctivalis (kantong konjungtiva) pada setiap
bayi yang lahir.
Pengobatan kasus infeksi gonore diseminata (IGD) terdiri dari beberapa prosedur.
Bab 13 - Bakteri Patogen p a da Saluran Urogenital 211
1. Kemoterapi
Pemberian antimikroba merupakan terapi utama IGD, antara lain sebagai berikut.
• Penisilin G intravena 100.000 unit/kg bb/hari sampai terjadi perbaikan, kemu-
dian diikuti ampisilin oral 0,5 g sebanyak 4 kali sehari selama 7 hari.
• Ampisilin oral 3,5 gram+ 1 gram probenesid atau 3 gram amoksisilin + 1 gram
probenesid diikuti ampisilin 0,5 g sebanyak 4 kali sehari selama 7 hari.
• Tetrasiklin oral 0,5 g sebanyak 4 kali sehari selama 7 hari.
• Eritromisin oral 0,5 g sebanyak 4 kali sehari selama 7 hari.
• Spektinomisin intramuskular 2 g sebanyak 2 kali sehari selama 3 hari.
• Sefazolin intramuskular atau intravena 1,5 g sebanyak 3 kali sehari selama 7
hari.
• Sefoksitin intravena 4-6 g sehari selama 7 hari.
• Trimetoprim-sulfametoksazol 3 tablet sebanyak 3 kali sehari selama 5 hari.
2. Istirahat
Penderita artritis septik sebaiknya dirawat untuk mencegah kerusakan sendi yang
lebih parah dan untuk pemberian obat yang teratur, sedangkan penderita tenosi-
novitis dan/atau lesi kulit dapat berobat jalan.
3. Analgetik
Pemberian analgetik kadang-kadang diperlukan, terutama jika timbul rasa nyeri.
4. Tempat dan cara penularan juga perlu diketahui agar penyakit ini dapat diobati
dengan baik dan untuk menghindari penularan lebih lanjut.
T r e p o n e m a pallidum
Treponema pallidum adalah bakteri yang berbentuk seperti spiral halus dan berukuran
panjang 5-15 mikron dan garis tengah 0,009-0,5 mikron. Setiap lekukan gelombang
berjarak 1 mikron dan setiap bakteri rata-rata terdiri atas 8-14 gelombang. Bakteri ini
bergerak sangat aktif karena bentuk spiralnya yang halus sehingga hanya dapat terlihat
dengan mikroskop medan gelap atau teknik imunofluoresensi. Treponema pallidum
sukar diwarnai dengan zat warna anilin, tetapi dapat mereduksi perak nitrat menjadi
logam perak yang melekat pada permukaan bakteri.
Treponema pallidum mempunyai membran luar atau selubung yang disebut peri-
plasma. Selubung ini melindungi komponen-komponen sel (secara keseltiruhan
disebut dengan silinder protoplasma). Suatu filamen aksial yang terdiri atas tiga
sampai enam fibril terletak di antara periplasma dan silinder protoplasma.
Bakteri berkembang biak dengan pembelahan melintang. Akan tetapi, bakteri
yang patogen pada manusia belum pernah dapat dibiakkan pada media perbenihan
biasa, perbenihan jaringan, ataupun telur bertunas. Galur Reiter yang berhasil ditanam
secara anaerob inv/7rodiduga hanya merupakan bakteri saprofit yang secara morfologis
serupa dengan Treponema pallidum. Galur ini memerlukan media pertumbuhan yang
mengandung 11 macam asam amino, vitamin, garam, mineral, dan serum albumin.
Galur-galur Treponema pallidum non-virulen, seperti galur Reiter dan Noguchi, telah
berhasil dibiakkan secara in vitro dan menjadi sumber antigen untuk identifikasi dan
pemeriksaan laboratorium.
Dalam keadaan anaerob pada suhu 25°C , Treponema pallidum dapat tetap hidup
dan bergerak aktif selama 4-7 hari jika disimpan dalam perbenihan cair yang
mengandung albumin, natrium karbonat, piruvat, sistein, dan ultrafiltrat serum sapi.
Bakteri tetap dapat bertahan hidup paling sedikit 24 jam dalam darah segar atau
plasma yang disimpan pada suhu 4°C. Kenyataan ini harus diperhatikan jika akan
melakukan transfusi darah. Satu galur Treponema pallidum dapat dibiakkan dalam
testis kelinci, yaitu galur Nichols. Treponema pallidum cepat mati dalam keadaan
kering dan pada suhu 42°C . Kondisi ini dimanfaatkan dalam terapi demam untuk
penyakit sifilis. Arsen, air raksa, dan bismut dapat menyebabkan imobilisasi dan
kematian bakteri penyebab sifilis. Efek tersebut dapat dipercepat dalam suhu tinggi.
Sebaliknya, bakteri dapat aktif kembali jika diberikan zat yang mengandung gugus
-SH, misalnya sistein.
Struktur antigen
Treponema pallidum mempunyai tiga jenis antigen, yaitu protein yang tidak tahan
panas, polisakarida yang tahan panas, dan antigen lipoid yang serupa dengan senyawa
yang terdapat dalam kardiolipin.
Permukaan bakteri Treponema pallidum mengandung asam sialat yang berfungsi
untuk menghambat aktivasi jalur komplemen alternatif dan hialuronidase yang dapat
menguraikan asam hialuronat sehingga dapat meningkatkan ke'mampuan invasi bak-
teri ini.
Ditmjau dari kespesifikan, antigen dibagi dalamdua kelompok, yaitu antigen yang
terdapat pada genus yang berbeda dan antigen yang terbatas pada suatu spesies saja.
Antigen Treponema yang khas adalah antigen yang dapat ditentukan dengan uji
imobilisasi {Treponema pallidum immobilization test, TPI). Uji ini merupakan suatu
reaksi yang memerlukan adanya komplemen dan inkubasi dalam suasana anaerob
selama 18jam pada suhu 35°C . Hasil uji dinyatakan positifjika bakteri tidak bergerak
lagi, yang berarti telah mati. Uji ini dapat membedakan antara bakteri penyebab sifilis
dan bakteri penyebab treponematosis lainnya.
Treponema pallidum masuk ke dalam tubuh penderita saat melakukan hubungan
seksual melalui luka-luka goresan yang amat kecil pada epitel, dengan menembus
selaput lendir utuh, atau kemungkinan melalui kulit yang utuh lewat kantung rambut.
Masa inkubasi bakteri ini 10-90 hari dengan rata-rata selama 21 hari setelah infeksi.
Infeksi Treponema pallidum menyebabkan penyakit sifilis. Walaupun penyebaran
bakteri ini tidak seluas penyakit kelamin lain, kerusakan organ yang diakibatkan
infeksi ini sangat berat dan dapat memengaruhi seluruh organ tubuh.
Pada dasarnya, dikenal dua macam sifilis, yaitu sifilis akuisata dan sifilis kongeni-
tal. Sifilis akuisata adalah sifilis yang didapatkan melalui hubungan seksual, sedangkan
sifilis kongenital adalah sifilis yang ditularkan dari ibu pengidap penyakit sifilis ke
bayi yang dilahirkan. Perjalanan penyakit ini terdiri atas beberapa stadium.
Bab 13 - Bakteri Patogen pad a Saluran Urogenital 213^
1. Stadium primer
Kondisi ini ditandai dengan munculnya bisul kecil keras pada lokasi infeksi,
biasanya pada ujung batang pelir pria atau pada leher rahim atau vagina wanita.
Bisul ini tidak gatal ataupun sakit.
Sifilis primer dapat berkembang tanpa diketahui. Pada stadium ini, bakteri
menyerang kelenjar getah bening sehingga menyebabkan pembesaran dan me-
ngeras. Setelah 3-5 minggu, bisul akan sembuh dan penyakit ini tampak tidak
menunjukkan adanya gejala dari luar. Akan tetapi, selama kurun waktu tersebut,
bakteri disebarkan lewat aliran darah ke seluruh tubuh.
2. Stadium sekunder
Stadium ini didahului oleh adanya ruamyang timbul setiap saat pada 2-12 minggu
setelah hilangnya pembengkakan, yang menyebabkan limfadenopati. Gejala sifilis
sangat mirip dengan penyakit menular yang lain. Selain ruam, gejala lainnya ada-
lah radang tenggorokan, pembengkakan kelenjar getah bening, demam, lesu, pu-
sing, dan kadang kala disertai dengan sebagian rambut rontok. Luka patogenik
terjadi pada selaput lendir, mata, dan sistem saraf pusat. Luka-luka ini penuh de-
ngan bakteri Trepomma.
Stadium ini hanya berlangsung beberapa minggu. Gejala-gejala stadium
sekunder, termasuk luka patogenik, akan hilang tanpa pengobatan. Bila berlang-
sung selama 2 tahun, seorang penderita sifilis pada stadium primer dan sekunder
dapat menularkan penyakitnya kepada orang lain.
3. Stadium laten
Apabila tidak diobati dengan baik, sifilis sekunder akan berlanjut ke tahap sifilis
laten. Pada tahap ini, sifilis tidak menunjukkan gejala yangjelas. Stadium ini dapat
berlangsung selama berbulan-bulan, bertahun-tahun, dan bahkan seumur hidup.
Stadium ini dapat diketahui dengan pemeriksaan darah penderita.
Empat tahun pertama stadium laten disebut dengan fase laten dini. Periode
sesudahnya disebut dengan fase laten lanjut. Pada fase laten lanjut, tidak ada
tanda-tanda sifilis aktif, tetapi hasil pemeriksaan serologik menunjukkan hasil
positif
4. Stadium lanjut
Apabila stadium laten tidak mendapatkan pengobatan dan perawatan yang baik,
penyakit sifilis akan berlanjut ke stadium tersier atau lanjut. Stadium ini dialami
oleh sekitar 30% penderita yang tidak mendapatkan pengobatan dan biasanya
terjadi 5-40 tahun kemudian. Luka-luka patogenik terjadi pada sistem saraf pusat,
sistem pembuluh darah jantung, kulit, dan organ-organ vital lain, seperti mata,
otak, tulang, ginjal, dan hati. Luka-luka ini disebut gumata, yang kemudian pecah
menjadi borok. Penderita dapat terserang penyakit jiwa, kebutaan, atau penyakit
jantung.
P e n y a k i t sifilis
Sifilis saraf
Selama stadium lat-en dini, sepertiga penderita sifilis dapat mengalami serangan pada
susunan saraf pusatnya. Setengah dari golongan ini akan menderita neurosifilis laten
jika tidak mendapat pengobatan. Stadiumprimer dapat berlangsung lebih dari 5 tahun.
Penyakit ini tanpa gejala, tetapi gejala klasik dapat timbul dalam bentuk demensia
paralitik.
Sifilis kardiovaskular
Setelah kurun waktu 10-40 tahun sejak terjadi sifilis primer, penderita yang tidak
mendapatkan pengobatan dapat menunjukkan gejala-gejala terinfeksi sifilis kardio-
vaskular. Kelainan serius terjadi pada aorta dan arteri paru-paru. Reaksi peradangan
yang terjadi dapat menyebabkan stenosis yang berakibat angina dan insufisiensi mio-
kardium sehingga dapat menyebabkan kematian.
Sifilis kongenital
Penyakit sifilis kongenital terjadi pada bayi, yaitu beberapa waktu atau beberapa tahun
setelah lahir. Wanita hamil yang menderita sifilis, terutama pada stadium sekunder,
dapat menularkan sifilis pada bayi yang dikandungnya melalui plasenta (transpla-
senta). Trepomma pallidum yang terkandung dalam darah ibu masuk ke dalam janin
pada kehamilan 16 minggu. Jika infeksi terjadi secara masif, dapat mengakibatkan
kematian janin atau bayi yang dilahirkan. Infeksi sifilis dapat mengakibatkan gang-
guan pertumbuhan janin di dalamatau di luar uterus. Jika sifilis terjadi pada 6 minggu
terakhir kehamilan, janin biasanya tidak terkena sifilis karena bakteri belum sempat
tersebar ke dalam darah ibu. Ada dua jenis sifilis kongenital yang diketahui, yaitu
sifilis kongenita prekoks, dan sifilis kongenita tarda.
Sifilis kongenita p r e k o k s
Penyakit ini mulai timbul pada bayi baru lahir atau setelah berusia 1-3 bulan. Terlihat
bula pada telapak tangan, condylomata lata, osteokondritis, atau periostitis epiphysis
tulang panjang, yang dapat menyebabkan pseudoparalisis, kelainan pada tulang tibia,
patah tulang spontan, atau penonjolan tulang dahi. Selain itu, dapat terjadi gejala
penyumbatan hidung, hepatosplenomegali, atau atrofi dan distrofi otot sehingga berat
badan tidak bertambah.
Sifilis kongenita tarda
Penyakit ini mulai menunjukkan gejala pada bayi yang berusia 1 tahun sampai usia
6-7 tahun, yaitu berupa tuli saraf Jce-8 atau tuli perseptif, deformitas gigi seri atas
tengah, dan keratitis interstitialis (radang stroma kornea).
Sifilis d ' e m b l e e
Penularan penyakit ini terjadi melalui infeksi tusukan jarum yang dalam, misalnya
transfiisi darah. Biasanya tidak dijumpai stadium primer, tetapi langsung dijumpai
tanda-tanda stadium sekunder.
Diagnosis penyakit sifilis biasanya dapat ditentukan dari gabungan informasi dan
pemeriksaan gejala, riwayat kontak dengan penderita lain, dan laboratorium. Peme-
Bab 13 - Bakteri Patogen p a d a Saluran Urogenital 215
riksaan laboratorium dilakukan melalui pemeriksaan darah secara serologi atau

pemeriksaan bakteri dengan mikroskop medan gelap.
Pengamatan produk luka dengan mikroskop medan gelap untuk mengetahui mor-
fologi dan gerak bakteri Treponema pallidum merupakan cara standar untuk memas-
tikan diagnosis sifilis primer.
Gerak bakteri dalam preparat segar berupa bahan yang diambil dari jaringan di
tempat lesi pada tubuh penderita, tanpa pewarnaan, dapat dilihat dengan menggunakan
mikroskop medan gelap. Darah atau nanah dalam preparat dapat menyulitkan peme-
riksaan.
Uji serologi biasanya dilakukan dengan menggunakan antigen nontreponema (uji
reagin) atau menggunakan antigen treponema. Uji ini dilakukan untuk mengukur titer
antibodi terhadap treponema yang terkandung di dalam darah penderita.
Uji r e a g i n ( n o n t r e p o n e m a l antigen test)
Reagin terdiri atas antibodi IgMdan IgAyang ditujukan pada beberapa antigen yang
tersebar luas dalamjaringan normal. Reagin dapat ditemukan dalam serum penderita
sifilis yang belum mendapatkan pengobatan, yaitu 2-3 minggu setelah terinfeksi.
Dalam cairan serebrospinal, ditemukan 4-8 minggu setelah infeksi. Contoh uji ini
adalah uji flokulasi dan uji pengikatan komplemen. Kedua uji tersebut dapat membe-
rikan hasil yang kualitatif, yaitu dengan menentukan kadar reagin dalam serum yang
telah diencerkan dalam suatu pengenceran berseri. Pengenceran tertinggi yang masih
menunjukkan hasil uji positif merupakan titer serum yang sebenarnya. Positif palsu
dapat terjadi apabila keberadaan reagin dalamserumdisebabkan oleh berbagai kondisi
lain, misalnya lepra, malaria, morbili, mononukleosis infeksiosa, vaksinasi, dan
penyakit kolagen (lupus eritematosus sistemik, poliarteritis nodosa).
1. Uji flokulasi
Uji ini berdasarkan flokulasi partikel antigen yang berupa lipid dalam beberapa
menit setelah dikocok dengan reagin. Uji flokulasi yang semula positif akan
berubah menjadi negatif setelah 6-24 bulan setelah pengobatan yang efektif pada
sifilis stadium laten dini. Contoh uji flokulasi adalah uji Kahn, uji VDRLiVenereal
Disease Research Laboratory), dan uji RPR {RapidPlasma Reagin).
2. Uji pengikatan komplemen
Uji ini berdasarkan kemampuan serum yang mengandung reagin mengikat kom-
plemenjika terdapat kardiolipin sebagai antigen. Hasil positif palsu dapat diperoleh
jika serum yang diperiksa bersifat antikomplemen. Contoh uji ini adalah uji WR
(Wassermann reaction). Uji WR menggunakan sel darah merah*domba sebagai
indikator. Hasil uji positif apabila tidak terjadi hemolisis; sebaliknya, hasil negatif
jika terjadi hemolisis.
Uji a n t i b o d i t r e p o n e m a
Antigen yang digunakan untuk uji ini adalah bakteri Treponema yang masih hidup,
telah dimatikan, atau salah satu fraksi Treponema. Hasil uji ini diharapkan lebih spe-
sifik. Beberapa contoh uji antibodi Treponema:
1. Uji fluoresensi antibodi treponema

Uji ini sangat spesifik dan sensitif terhadap antibodi Treponema. Serum penderita
yang diperiksa terlebih dulu diabsorpsi oleh antigen Reiter yang diolah dengan
getaran berfi-ekuensi tinggi (sonikasi). Dalam uji ini, bakteri Treponema yang
telah dimatikan direaksikan dengan seruni penderita dan y-globulin yang telah
dilabel. Bakteri akan terlihat berfluoresensi jika terkena sinar ultraviolet.
Uji akan menunjukkan hasil positif pada stadium laten dini dan biasanya
tetap positif sampai beberapa tahun setelah pengobatan yang efektif. Oleh karena
itu, hasil uji ini tidak dapat digunakan untuk menilai efektivitas pengobatan. Kan-
dungan IgM dalam darah bayi yang baru lahh* dapat membuktikan terjadinya
infeksi di dalam uterus (sifilis kongenital). Hasil akan negatif apabila ibu terkena
sifilis pada bulan-bulan terakhir kehamilan. Hasil uji positif palsu dapat terjadi
jika IgMyang dibentuk oleh tubuh bayi dideteksi sebagai infeksi sifilis.
2. Uji imobilisasi
Uji imobilisasi Treponema pallidum (TPI) menggunakan treponema yang masih
bergerak aktif sebagai antigen. Dalam serum penderita sifilis yang ditambahkan
komplemen, bakteri yang semula masih dapat bergerak aktif akan mengalami
imobilisasi. Peristiwa imobilisasi relatif lambat, memerlukan waktu peremajaan
selama 18 jam.
3. Uji pengikatan komplemen
Uji pengikatan komplemen Treponema pallidum menggunakan antigen yang ber-
asal dari fi-aksi protein bakteri Treponema pallidum galur Reiter, contohnya uji
RPCF {Reiter Protein Complement Fixation). Hasil positif palsu dapat terjadi
apabila fi*aksi protein tersebut kurang mumi, misalnya mengandung lipopo-
lisakarida.
4. Uji hemaglutinasi pasif
Uji hemaglutinasi pasif Treponema pallidum menggunakan sel darah merah domba
yang telah diolah dengan Treponema pallidum. Uasil uji positif apabila terjadi
aglutinasi sel darah merah domba tersebut.
Epidemiologi
Sejak tahun 1962, kasus sifilis di Amerika Serikat yang dilaporkan bertambah setiap
tahun sekurang-kurangnya 4,7%. Seperti halnya gonore, jumlah sifilis dini (kasus
primer, sekunder, dan laten dini) yang dilaporkan tidak menunjukkan angka kejadian
yang sebenarnya karena kebanyakan kasus tidak dilaporkan.
Belum ada vaksin yang dikembangkan untuk penyakit sifilis sehingga upaya pence-
gahan sangat penting. Upaya perorangan dapat dilakukan dengan penggunaan kondom
'dan tidak berganti pasangan seksual.
Untuk masyarakat, cara pencegahan utama adalah melakukan pengendalian de-
ngan pemeriksaan rutin dan pengobatan penderita. Sifilis bawaan dapat dicegah de-
ngan perawatan pralahir.
Leptospira interrogans
Leptospira merupakan bakteri penyebab penyakit leptospirosis. Bakteri ini berbentuk
spiral halus dengan ujung bengkok, bergerak sangat aktif, dan berukuran 0,1 |.un x
6-20 )im. Leptospira bersifat aerob obligat. Suhu pertumbuhan bakteri ini adalah
28-30°C . Bakteri ini tumbuh dengan baik pada perbenihan yang mengandung serum
kelinci 10%dan dapat juga dibiakkan pada selaput korioalantois. Perbenihan yang
sering digunakan untuk membiakkan bakteri Leptospira antara lain perbenihan Ver-
voot, Fletcher, Cox, dan Noguchi.
Penularan Leptospira terjadi lewat makanan atau minuman yang tercemar urine bina-
tang yang menjadi reservoir bakteri ini. Bakteri juga dapat masuk melalui kulit yang
terluka atau konjungtiva sewaktu mandi dalam kolam, air sungai, atau ketika banjir
yang biasanya tercemar oleh Leptospira.
Infeksi Leptospira dimulai dengan masuknya bakteri ke dalam tubuh melalui kulit
yang terluka atau mukosa tanpa menimbulkan kelainan setempat. Selanjutnya, bakteri
Leptospira akan masuk ke dalam peredaran darah dan menimbulkan leptospiremia
sehingga bakteri masuk ke dalam organ-organ tubuh, terutama ginjal dan hati.
Masa inkubasi infeksi Le/?/ayp/>Y/berkisar 10-12 hari. Setelah itu, beberapa gejala
akan muncul, antara lain demam mendadak, sakit perut, menggigil, mual, dan muntah.
Penderita umumnya mengeluh sakit otot, sakit kepala hebat, mimisan {epistaxis), dan
dapat terjadi konjungtivitis. Pada minggu kedua, Leptospira mulai menyerang ginjal.
Leptospira dapat ditemukan dalam urine pada akhir minggu kedua sampai hari ke-40.
Kerusakan pada ginjal dapat menyebabkan gagal ginjal dan berakibat fatal sehingga
sering kali harus diatasi dengan dialisis. Infeksi Leptospira dapat menyerang susunan
saraf pusat sehingga menimbulkan gejala meningitis dan ensefalitis.
Isolasi dan identifikasi Leptospira dapat dilakukan pada bahan pemeriksaan berupa
urine, darah, atau cairan serebrospinal. Bahan pemeriksaan dibiakkan dalam media
perbenihan cair atau media semisolid yang mengandung 10%serum kelinci. Morfo-
logi bakteri dapat dilihat dengan pewarnaan Burri, Becker Kranz, atau Giemsa.
Uji serologi sangat penting untuk mendiagnosis leptospirosis. Antibodi baru
umumnya dapat ditemukan setelah hari ketujuh atau kesepuluh. Titer antibodi akan
semakin meningkat sampai minggu ketiga atau keempat.
Beberapa jenis antibiotik dapat diberikan untuk pengobatan leptospirosis, antara lain
penisilin, tetrasiklin, streptomisin, atau antibiotik golongan makrolida. Pengobatan
sebaiknya dilakukan sedini mungkin untuk mencegah komplikasi penyakit.
Leptospirosis sebenarnya merupakan penyakit pada hewan, tetapi dapat menular

ke manusia. Sumber infeksi utama adalah tikus dan hewan lain, seperti babi, dan
hewan peliharaan, seperti anjing. Orang-orang yang bekerja dengan bersinggungan
dengan hewan reservoir berisiko tinggi tertular leptospirosis, misalnya petani, peter-
nak, penangkap ikan di sungai, pekerja tambang, penggali parit, dan pekerja di rumah
potong hewan. Leptospirosis juga dapat melanda masyarakat yang terkena musibah
banjir karena air banjir dapat tercemar oleh urine tikus atau urine hewan reservoir
lain.
Pencegahan dapat dilakukan dengan memberikan vaksin Leptospira untuk mem-
berikan kekebalan bagi mereka yang berisiko tinggi tertular atau dengan membasmi
hewan yang menjadi reservoir bakteri Leptospira.
Gardnerella vaginalis
Infeksi pada vagina awalnya disebut dengan vaghutis, yang di dalamnya termasuk
vaginitis yang disebabkan oleh Trichomonas vaginalis dan bakteri anaerob lain,
seperti Peptococcus dan Bacteroides sehingga disebut vaginitis nonspesifik. Namun,
setelah Gardner dan Dukes menemukan spesies baru yang menjadi penyebab utama
infeksi ini pada tahun 1955, istilah vaginitis nonspesifik mulai ditinggalkan. Spesies
bakteri yang menjadi penyebab utama inflamasi pada vagina atau vaginosis bakterial
{bacterial vaginosis) ini kemudian diberi nama Gardnerella vaginalis.
Vaginosis bakterial adalah suatu keadaan abnormal pada ekosistem vagina yang
disebabkan bertambahnya pertumbuhan flora vagina bakteri anaerob menggantikan
Lactobacillus yang mempunyai konsentrasi tinggi sebagai flora normal vagina.
Gardnerella vaginalis merupakan bakteri anaerob berbentuk batang yang meng-
alami hiperpopulasi sehingga menggantikan flora normal vagina. Akibatnya, suasana
vagina yang semula bersifat asam menjadi basa. Perubahan ini terjadi akibat berku-
rangnya jumlah Lactobacillus yang membantu menjaga keasaman vagina dan meng-
hambat pertumbuhan mikroorganisme anaerob lain di vagina.
Meskipun vaginosis bakterial tidak dikategorikan sebagai penyakit menular sek-
sual, penularan penyakit ini berkaitan dengan hubungan seksual. Berdasarkan hasil
beberapa penelitian, angka kejadian vaginosis bakterial ditemukan meningkat seiring
dengan meningkatnya frekuensi hubungan seksual. Bakteri Gardnerella vaginalis
juga dapat ditemukan pada pria yang menjadi pasangan wanita yang mengidap vagi-
nosis bakterial, tetapi tanpa gejala. Gardnerella vaginalis ditemukan pada sebagian
besar wanita menikah yang mengalami tanda dan gejala vaginosis bakterial; Gard-
nerella vaginalis ]\xgdi ditemukan pada 70%pria pasangan seksualnya.
Vaginosis bakterial didefinisikan sebagai suatu keadaan abnormal pada ekosistem va-
gina yang ditandai oleh pergantian konsentrasi Lactobacillus yang tinggi sebagai flora
normal vagina oleh konsentrasi bakteri anaerob yang tinggi, terutama Bacteroides,
Mobiluncus, Gardnerella vaginalis, dan Mycoplasma hominis. Jadi, vaginosis bakte-
rial bukan suatu infeksi yang disebabkan oleh satu mikroorganisme, melainkan timbul
akibat perubahan kimiawi dan berlebihnya pertumbuhan bakteri yang berkolonisasi di
vagina.
Sampai sekarang belum diketahui dengan pasti bagaimana bakteri Gardnerella
vaginalis dapat menyebabkan vaginosis bakterial. Bakteri ini merupakan flora normal
dalam vagina dan dapat ditemukan pada 50%wanita sehat meskipun dalam jumlah
sedikit.
Kolonisasi bakteri Lactobacillus dijumpai pada wanita normal. Bakteri-bakteri ini
mampu mempertahankan suasana asam pada vagina dan memproduksi H,0, yang
diketahui bersifat toksik dan dapat menghambat pertumbuhan mikroorganisme lain
yang dapat menyebabkan vaginosis bakterial. Pada penderita vaginosis bakterial, ter-
jadi penurunan populasi bakteri Lactobacillus secara menyeluruh, sementara populasi
yang tersisa tidak mampu menghasilkan H.O^-
Pertumbuhan beberapa jenis bakteri anaerob secara berlebihan dapat mengubah
asam amino menjadi senyawa amin sehingga dapat menaikkan pH cairan vagina dan
menurunkan populasi Lactobacillus, serta menciptakan suasana yang kondusif untuk
populasi dan kolonisasi bakteri Gardnerella vaginalis. Dalam suasana pH vagina
yang lebih tinggi, beberapa senyawa amin akan mudah menguap dan menimbulkan
bau amis. Senyawa amin juga diketahui menyebabkan iritasi kulit dan mempercepat
pelepasan sel-sel epitel vagina sehingga sekret vagina yang keluar berbau tidak sedap.
Senyawa amin aromatik yang menimbulkan bau amis tersebut adalah trimetilamin,
suatu senyawa amin yang dominan pada penderita vaginosis bakterial. Berbagai
senyawa amin lain yang terdapat pada sekret vagina antara lain putresin, kadaverin,
metilamin, isobutilamin, feniletilamin, histamin, dan tiramin, yang berasal dari bak-
teri ini. Selain itu, terdapat asam-asam organik di dalam vagina penderita vaginosis,
yaitu asamasetat dan suksinat, yang bersifat sitotoksik dan menyebabkan pengelupasan
epitel vagina. Hasil pengelupasan yang terkumpul membentuk sekret vagina. Dalam
pH alkalis, bakteri Gardnerella vaginalis melekat erat pada sel-sel epitel vagina yang
lepas dan membentuk clue cell. Clue cell adalah sel-sel epitel yang sarat dengan bak-
teri. Secara mikroskopis, clue cell terlihat granular dengan pinggiran sel yang hampir
tidak terlihat.
Hampir separuh penderita vaginosis bakterial tidak mengeluh karena vaginosis
bakterial bersifat asimtomatik. Jika ada keluhan, gejala pertama yang timbul adalah
adanya cairan vagina yang berbau amis. Wanita yang menderita vaginosis bakterial
akan mengeluh adanya cairan vagina yang berbau tidak enak. Bau lebih menusuk se-
telah sanggama dan mengakibatkan darah menstruasi berbau abnormal. Iritasi daerah
vagina atau sekitarnya, berupa gatal dan rasa terbakar, relatif lebih ringan daripada
trikomoniasis. Sepertiga penderita mengeluh gatal dan rasa terbakar, sementara yang
lain mengeluhkan kemerahan dan edema pada vulva. Biasanya tidak ada keluhan
pruritus, disuria, nyeri abdomen, dispareunia, atau nyeri waktu kencing. Pada peme-
riksaan, terlihat sekret vagina yang encer berwarna putih keabu-abuan di sekitar va-
gina.
D i a g n o s i s v a g i n o s i s bakterial
Secara klinik, penegakan diagnosis vaginosis bakterial memerlukan tiga dari empat
kriteria berikut: (a) ada clue cell pada pemeriksaan mikroskopik preparat basah, (b)
tercium bau amis setelah penetesan KOH 10%pada cairan vagina, (c) terlihat sekret
vagina yang homogen, kental, tipis, dan berwarna seperti susu, dan (d) pH vagina
lebih dari 4,5.
Dari keempat kriteria tersebut, petunjuk yang paling baik adalah pemeriksaan
basah untuk mencari adanya clue cell (sel epitel vagina yang diliputi oleh coccobacilius
yang padat) dan bau amis pada penetesan KOH 10%. Namun, bau amis tidak selalu
dapat dievaluasi, misalnya pada keadaan tertentu, seperti menstruasi. Oleh sebab itu,
diperlukan uji tambahan untuk menunjang diagnosis vaginosis bakterial, antara lain
pewarnaan Gram.
Pewarnaan Gram dapat dilakukan pada pulasan cairan vagina. Kombinasi pH
vagina lebih dari 4,5 dan pewarnaan Gram terhadap cairan vagina merupakan metode
diagnosis yang baik Meskipun vaginosis bakterial sering ditentukan dengan isolasi
bakteri anaerob Gardnerella vaginalis, sampai sekarang cara ini tidak dapat dipakai
untuk kriteria diagnosis. Pewarnaan Gram terhadap cairan vagina pasien vaginosis
bakterial memperlihatkan sesuatu yang khas, yaitu banyak mikroorganisme Gram-
negatif berukuran kecil menyerupai Gardnerella vaginalis pada keadaan tidak ditemu-
kan Lactobacillus.
Diagnosis vaginosis bakterial memerlukan tiga keadaan secara bersamaan, yaitu
jumlah Lactobacillus menurun, jumlah bakteri lain meningkat, dan pH vagina juga
meningkat.
Kriteria diagnosis vaginosis bakterial berdasarkan pewarnaan Gram didasarkan
pada sistem skoring, yaitu sebagai berikut.
• Derajat 1: Normal, didominasi oleh Lactobacillus.
• Derajat 2: Intermediet, jumlah Lactobacillus berkurang.
• Derajat 3: Abnormal, tidak ditemukan Lactobacillus atau hanya ditemukan sejum-
lah kecil bakteri tersebut, disertai dengan bertambahnya jumlah Gardnerella vagi-
nalis atau bakteri yang lain.
Akhir-akhir ini, tingkat kepercayaan dalam mengenali berbagai morfologi kuman
menggunakan pulasan vagina melalui pewarnaan Gram telah dievaluasi karena ting-
kat kepercayaannya tidak terlalu tinggi. Hal ini karena morfologi kuman berdasarkan
pewarnaan Gram sangat variabel dan sangat bergantung pada kemampuan interpretasi
hasil pewarnaan Gram. Sistem skoring yang digunakan untuk melihat flora vagina
dengan pewarnaan Gram adalah berdasarkan pengenalan morfologi kuman yang pa-
ling dapat dipercaya, yaitu bentuk batang Gram-positif dengan ukuran besar {Lacto-
bacillus), bentuk batang/halus Gram-negatif dengan ukuran bervariasi {Bacteroides
atau Gardnerella), dan bentuk batang/bengkok Gram-negatif dengan ukuran bervariasi
{Mobiluncus). Meskipun demikian, sistem skoring tetap mempunyai keuntungan,
yaitu dapat menyingkirkan flora normal; dengan kata lain, sistem ini dapat membantu
. B a b 13 - Bakteri Patogen p a d a Saluran Urogeriital 22li
menentukan apakah yang terlihat dengan pewarnaan Gram merupakan gambaran flora
normal atau vaginosis bakterial.
Epidemiologi
Berdasarkan beberapa hasil penelitian, bakteri penyebab vaginosis dapat ditemukan
pada cairan amnion, korioamnionitis, endometritis setelah melahirkan, dan baktere-
mia. Tingginya angka kematian bayi yang disebabkan oleh berat badan lahir yang
rendah, kelahiran prematur, dan ketuban yang pecah secara dini sering kali disebabkan
oleh vaginosis. Oleh karena itu, upaya pencegahan vaginosis bakterial diharapkan
dapat menurunkan tingkat kematian bayi secara tidak langsung.
BAB 14
B A K T E R I PATOGEN
PADA S I S T E M S A R A F
• Pendahuluan
• Neisseria meningitidis
m Listeria m o n o c y t o g e n e s
• Clostndium tetani
m Clostridium botulinum
m Mycobacterium leprae
222
Bab 14 - Bakteri Patogen pad a Sistem Saraf 223
PENDAHULUAN
Infeksi bakteri pada sistem saraf pusat jarang terjadi, tetapi dapat berakibat fatal bagi
penderitanya. Salah satu penyakit infeksi yang serius pada sistem saraf pusat adalah
meningitis. Gejala umum meningitis tidak spesifik, tetapi sering kali ditandai dengan
demam, sakit kepala, dan kaku pada leher. Selain itu, dapat menimbulkan kejang dan
koma. Meningitis dapat disebabkan oleh berbagai mikroorganisme termasuk bakteri,
antara lain Streptococcus pneumoniae, Haenwphilus influenzae, dan Neisseria me-
ningitidis. Lebih dari 50spesies bakteri, termasuk bakteri oportunistik, telah dilaporkan
dapat menyebabkan meningitis, antara lain Listeria monocytogenes, Streptococcus
grup B, Staphylococcus, dan beberapa bakteri Gram-negatif
Selain itu, beberapa jenis bakteri patogen pada sistem saraf dapat menimbulkan
penyakit yang disebabkan oleh neurotoksin yang dihasilkan oleh bakteri tersebut,
misalnya Clostridium tetani dan Clostridium botulinum. Mycobacterium leprae meru-
pakan satu-satunya bakteri yang dapat tumbuh dan berkembang di dalam sistem saraf
perifer.
Neisseria meningitidis «
Neisseria meningitidis termasuk dalam famili Neisseriaceae. Bakteri Gram-negatif ini
berbentuk kokus dan terdiri atas beberapa grup, yaitu Neisseria meningitidis A, B, C,
D, X, Y, Z, dan Z'; penggolongan didasarkan atas reaksi aglutinasi. Bakteri Neisseria
meningitidis grup A, B, dan C merupakan penyebab utama penyakit di klinik. Bakteri
ini mempunyai kapsul dan pili.
Meningokokus masuk ke dalamtubuh lewat saluran napas bagian atas dan berkembang
biak dalam selaput nasofaring. Setelah itu, dapat terjadi penyebaran sistemik. Masa
inkubasi bakteri Neisseria meningitidis berkisar dari beberapa hari sampai 1 minggu.
Penyakit ditandai dengan gejala-gejala berikut.
• Lesi metastatik di berbagai tempat di^badan, misalnya kulit, selaput otak, persen-
dian, mata, dan paru-paru.
• Demam ringan yang dapat disertai dengan faringitis.
• Meningokoksemia.
• Meningitis.
• Artritis.
• Perikarditis.
• Status hipoadrenergik (sindrom Waterhouse-Friderichsen).
Penularan
Penularan bakteri Neisseria meningitidis terjadi lewat kontak langsung, misalnya
melalui droplet dari hidung dan tenggorokan penderita. Bakteri ini biasanya menye-
babkan infeksi sub-klinis pada mukosa. Invasi dengan jumlah bakteri yang cukup
untuk menyebabkan terjadinya penyakit sistemik sangat jarang dijumpai. Prevalensi
carrier yang mencapai 25% atau lebih dapat terjadi tanpa ada gejala meningitis.
Selama terjadi wabah, lebih dari setengah penderita dapat menjadi pembawa bakteri
{carrier) Neisseria meningitidis. Penyebaran bakteri ini melalui barang dan alat-alat
tidak terbukti.
Penularan dapat terus terjadi sampai bakteri meningokokus tidak ditemukan lagi
di hidung dan mulut. Meningokokus biasanya hilang dari nasofaring dalam waktu 24
jam setelah pengobatan dengan antibiotik. Penisilin dapat menekan jumlah bakteri
untuk sementara, tetapi biasanya tidak menghilangkan bakteri ini dari orofaring.
Untuk menghindari penularan infeksi Neisseria meningitidis, pengawasan yang ketat
sebaiknya dilakukan terhadap anggota keluarga penderita, rumah penitipan anak, dan
kerabat dekat lain untuk menemukan penderita secara dini. Pengobatan dini yang
tepat harus segera dilakukan khususnya pada penderita yang demam. Pemberian obat
kemoterapi profilaksis yang efektif perlu dilakukan untuk melindungi terhadap kontak
antara penderita dan anggota keluarga lainnya. Selain itu, kontak di antara anggota
keluarga dalam satu rumah, personel militer yang berbagi tempat tidur, dan orang-
orang yang secara sosial sangat dekat dan saling bertukar peralatan makan, seperti
teman dekat di sekolah dan sebagainya, perlu diperhatikan. Anak-anak di tempat
penitipan perlu mendapatkan perhatian. Terapi profilaksis perlu diberikan jika dite-
mukan salah satu di antara mereka terinfeksi. Harus dilakukan pembersihan secara
menyeluruh dari sekret hidung dan tenggorokan, serta barang-barang yang terkonta-
minasi.
Pengobatan profilaksis dapat dilakukan dengan pemberian rifampisin 2 kali sehari
selama 2 hari, yaitu sebesar 600 mg per dosis untuk orang dewasa; 10 mg/kg berat
badan untuk anak berusia di atas 1 tahun; dan 5 mg/kg berat badaii untuk bayi berusia
kurang dari 1 bulan. Rifampisin tidak dianjurkan untuk wanita hamil. Pengobatan un-
tuk orang dewasa dengan seftriakson 250 mg secara intramuskular dapat diberikan
sebagai dosis tunggal dan terbukti cukup efektif, sedangkan untuk anak berusia di
bawah 15 tahun, diberikan 125 mg secara i/itramuskular. Siprofloksasin 500 mg per
oral dapatjuga diberikan untuk orangdewasa. Bila bakteri sensitif terhadap sulfadiazin,
obat ini dapat diberikan pada orang dewasa dengan dosis 4 gramdibagi dalam4 dosis;
dosis untuk bayi dan anak-anak adalah 125-150 mg/kg berat badan per hari dibagi
dalam4 dosis.
Epidemiologi
Infeksi yang disebabkan oleh bakteri Neisseria meningitidis dapat terjadi setiap saat,
tetapi biasanya terjadi pada akhir musim dingin dan awal musim semi. Infeksi
meningokokus awahiya terjadi pada anak-anak dan dewasa muda. Laki-laki lebih
banyak terserang daripada wanita dan sering terjadi pada pendatang baru yang ber-
kumpul atau berjejalan^ di barak-barak atau asrama penampungan. Wilayah yang
Bab 14 - Bakteri Patogen p a d a Sistem Saraf 225
selama ini dikenal sebagai daerah endemis adalah Afrika Tengah. Di sana, infeksi
Neisseria disebabkan oleh Neisseria meningitidis grup A. Pada tahun 1996, wabah
meningokokus dilaporkan berjangkit di Afrika Barat dengan total penderita yang dila-
porkan sebanyak 150.000 penderita. Wabah terjadi di Burkina Faso Chad, Mali, dan
Nigeria. Dalam kurun waktu 10 tahun terakhir, kejadian luar biasa (KLB) yang
disebabkan oleh Neisseria meningitidis grup A dilaporkan terjadi di Nepal, India,
Etiopia, Sudan, dan beberapa negara Afrika lain. Selama tahun 1980 dan 1990-an,
Neisseria meningitidis grup Bdiketahui sebagai penyebab infeksi di benua Eropa dan
Amerika. Wabah yang terjadi biasanya ditandai dengan peningkatan jumlah kasus
5-10 kali dari biasanya. Akhir-akhir ini, wabah dilaporkan terjadi di Selandia Baru,
daerah timur laut negara bagian Amerika Serikat yang menghadap ke laut pasifik.
Sejak tahun 1990-an, KLByang disebabkan oleh grup Cdilaporkan terjadi di Amerika
Serikat dan Kanada. KLB ini biasanya menyerang anak-anak usia sekolah dan maha-
siswa, yang penularannya kadang kala terjadi di tempat-tempat banyak orang berkum-
pul. Di Amerika Serikat, grup Y ternyata makin sering dijumpai sebagai penyebab
infeksi seperti halnya grup B dan C. Penyebaran galur meningokokus baru biasanya
ditandai dengan meningkatnya angka kejadian infeksi meningokokus yang menyerang
hampir semua kelompok umur.
Listeria m o n o c y t o g e n e s
Listeria monocytogenes adalah bakteri yang dapat menyebabkan infeksi pada sistem
saraf pusat sehingga menyebabkan meningitis. Bakteri ini terdapat dalam feses bina-
tang dan tersebar di dalam tanah dan air. Listeria monocytogenes berbentuk koko-
basilus, bersifat Gram-positif, dan cenderung membentuk rantai-rantai pendek yang
terdiri atas 3-4 bakteri. Bakteri ini berukuran 0,4 x 0,5-2,0 nm dan mempunyai flagel
peritrik. Listeria monocytogenes tumbuh dengan baik pada perbenihan agar darah dan
agar triptosa. Pada perbenihan agar darah, koloni bakteri ini dikelilingi oleh zona
hemolisis beta, sedangkan pada perbenihan agar triptosa, koloninya bening. Bakteri
ini tumbuh optimal pada suhu 37"C.
Listeria monocytogenes bersifat aerob, tetapi pertumbuhannya dapat meningkat
jika dibiakkan pada kondisi O, dikurangi dan kadar CO. 5-10%. Bakteri ini membentuk
katalase dan dapat meragi beberapa jenis gula membentuk asam tanpa gas, tidak
membentuk indol atau H,S, dan tidak menghidrolisis urea atau mereduksi nitrat.
Penyakit listeriosis yang disebabkan oleh Listeria monocytogenes dapat menyerang
orang dewasa dan bayi yang baru lahir. Orang dewasa biasanya menunjukkan gejala
ringan atau tanpa gejala. Akan tetapi, bakteri ini dapat menginvasi sistem saraf pusat
sehingga menyebabkan meningitis. Hal ini sering terjadi pada orang-orang yang sis-
tem kekebalan tubuhnya menurun karena adanya penyakit lain, seperti diabetes.
kanker, dan AIDS, atau menerima obat-obat imunosupresan. Mortalitas penyakit me-
ningitis yang disebabkan oleh Listeria monocytogenes sangat tinggi, yaitu sekitar
50%. Listeria monocytogenes kadang kala dapat masuk ke dalam peredaran darah
sehingga dapat menimbulkan beberapa penyakit, terutama sepsis. Salah satu faktor
vhoilensi Listeria monocytogenes adalah ketika bakteri masuk ke dalamsel-sel makro-
fag, tetapi tidak dapat dimusnahkan oleh sel makrofag. Akibatnya, terjadi proliferasi
bakteri yang cepat di dalam sel sehingga dapat menginfeksi sel-sel lain yang ada di
sekelilingnya.
Listeria monocy^togenes sangat berbahaya jika menginfeksi wanita hamil. Jika ter-
infeksi oleh Listeria monocytogenes, ibu yang sedang hamil tidak menunjukkan gejala
yang spesifik, tetapi hanya terjadi gejala seperti infeksi flu biasa. Namun, janin yang
dikandungnya dapat terinfeksi melalui plasenta sehingga dapat menyebabkan kegu-
guran, kelainan prematur, dan lahir mati (stillbirth). Pada beberapa kasus, infeksi |
tersebut tidak menimbulkan gejala dalam beberapa minggu setelah lahir atau bayi
mengalami meningitis seperti yang disebabkan oleh bakteri lain. Akan tetapi, kondisi
ini sebenarnya dapat menimbulkan kerusakan otak sehingga menyebabkan kematian.
Angka kematian bayi yang disebabkan oleh listeriosis sangat tinggi, yaitu mencapai
60%.
Penularan bakteri Listeria monocytogenes pada umumnya berasal dari makanan.
Berbagai jenis makanan dapat menjadi sumber penularan bakteri ini. Listeria mono-
cytogenes merupakan salah satu bakteri patogen yang dapat hidup pada suhu dingin
sehingga dapat berkembang biak selama proses penyimpanan makanan dalam ruang
pendingin.
P e m e r i k s a a n l a b o r a t o r i um
Bahan pemeriksaan yang dipakai untuk diagnosis laboratoriumbakteri Listeria mono-
cynogenes adalah sekret serviks, sekret vagina, darah tali pusat, darah, dan cairan sere-
brospinal. Pemeriksaan bahan dengan pewarnaan Gramjuga dapat dilakukan secara
langsung untuk mengetahui keberadaan bakteri Listeria monocytogenes. Beberapa
cara deteksi juga telah dikembangkan, antara lain pembiakan dalam media selektif
dan uji biokimia cepat. Uji serologi menggunakan antibodi monoklonal juga telah
dikembangkan atau dengan menggunakan metode reaksi rantai polimerase (PCR) dan
DNA probe untuk mendeteksi gen spesifik yang terdapat dalamgenomListeria mono-
|v cytogenes.
W
Obat yang sering digunakan untuk mengatasi infeksi listeriosis adalah penisilin G,
eritromisin, dan tetrasiklin. Pencegahan terhadap infeksi Listeria monocytogenes
sangat sulit dilakukan karena sukarnya mengenali infeksi listeriosis, baik pada hewan
maupun pada manusia. Listeriosis dapat dicegah pada neonatus dengan melakukan
pengobatan segera terhadap ibunya. Pencegahan harus ditujukan untuk menyingkirkan
hewan reservoir dan perlu dilakukan pasteurisasi susu dan makanan lamnya.
Bab 14 - Bakteri Patogen pada Sistem Saraf 227
Clostridium tetani
Clostridium /^/a;?/termasuk dalam famili Clostridiaceae. Bakteri anaerob ini bersifat
Gram-positif, berbentuk basil, dan dapat bergerak karena mempunyai flagel peritrik.
Clostridium tetani tumbuh subur padajaringan yang mati di sekitar luka dalam kondisi
anaerob dengan suhu ST^'C dan pH 7-7,5. Spora bakteri ini lonjong atau bulat yang
biasanya lebih besar dari badan bakteri sehingga terlihat menggembung. Spora resisten
terhadap pemanasan dan zat kimia.
Infeksi Clostridium tetani dapat terjadi setiap saat jika luka terkontaminasi oleh tanah
atau kotoran hewan. Kontaminasi biasanya terjadi pada luka kecelakaan atau luka
tembakan. Kebanyakan kasus infeksi bakteri terjadi akibat luka tusukan yang dalam
dan terkontaminasi oleh spora Clostridium tetani. Bakteri ini menghasilkan eksotoksin
yang berbahaya bagi tubuh manusia atau hewan. Toksin yang diproduksi selama bak-
teri ini berkembang masuk melalui aliran darah menuju sistem saraf pusat. Toksin
dapat menyebabkan kontraksi muskular spasmodik atau lebih dikenal dengan tetanus.
Gejala tetanus yang sangat kuat berupa kontraksi otot yang menyakitkan, biasanya di
leher dan dagu, disebabkan oleh neurotoksin yang dihasilkan oleh bakteri ini, yaitu
tetanospamin. Gejala ini merupakan gejala awal yang biasanya diikuti dengan keka-
kuan otot kerongkongan sehingga menyebabkan kesulitan menelan dan kejang hebat
pada otot tenggorokan. Akibatnya, terjadi kesulitan bernapas sehingga menyebabkan
kematian.
Tetanus neonatal dapat terjadi pada janin dari ibu yang belum memiliki kekebalan
terhadap tetanus. Bayi yang dilahirkan oleh ibu yang tidak mempunyai kekebalan
terhadap Clostridium tetani tidak memiliki imunitas yang diturunkan oleh ibu ketika
janin masih dalam kandungan. Hal ini dapat menyebabkan janin sangat rentan ter-
infeksi oleh bakteri Clostridium tetani sehingga bayi yang terinfeksi dapat meninggal
pada saat dilahirkan.
Toksin tetanus
Toksin tetanus merupakan substansi yang paling beracun. Toksin ini diproduksi oleh
bakteri dan dilepaskan saat sel melisis. Toksin ini memiliki afinitas yang tinggi untuk
jaringan saraf sehingga sering disebut sebagai neurotoksin. Akan tetapi, neurotoksin
sebenarnya tidak memberikan keuntungan apa-apa pada bakteri Clostridium tetani.
Toksin ini labil terhadap oksigen, panas, dan rusak pada 56^C selama 5 menit.
Imunitas
Tidak seperti penyakit lain, kesembuhan dari tetanus tidak memberikan efek kekebalan
tubuh. Tetanospasmin tingkat letal sekalipun tidak cukup merangsang respons imun.
Imunisasi profilaksis terdiri atas toksoid tetanus, bagian dari vaksin DPT (Difteri Per-
tusis, dan Tetanus), atau vaksin DT (Difteri dan Tetanus). Tiga dosis diberikan pada
tahun pertama kelahiran bayi, vaksmasi diulangi satu tahun kemudian, dan diulangi
lagi pada saat anak berusia 6 tahun.
Epidemiologi
4
Bakteri Clostridium tetani dapat ditemukan sebagai saprofit di saluran cerna herbivora
dan terdistribusi luas di tanah, terutama yang mengandung pupuk kandang.
; Clostridium botulinum
I Morfologi d a n fisiologi
I Bakteri Clostridium botulinum termasuk dalamfamili Clostridiaceae. Bakteri anaerob
I ini berbentuk batang, berspora (endospora), dan bersifat Gram-positif. Clostridium
I botulinum tersebar di seluruh dunia dan dapat ditemukan dalam tanah dan kadang-
I kadang dalam feses hewan. Spora bakteri ini sangat tahan terhadap pemanasan pada
f suhu lOO^Cselama 3-4 jam.
f Selama pertumbuhan, Clostridium botulinum menghasilkan toksin yang dapat
dikeluarkan ke dalam lingkungan sekitarnya. Beberapa tipe toksin Clostridium botu-
linum telah dikenal, antara lain tipe A, B, C, D, E, dan F. Toksin tipe A, B, dan E sering
menjadi penyebab penyakit pada manusia. Tipe C dapat mengakibatkan leher lemas
pada unggas; tipe Ddapat menyebabkan botulisme pada sapi. Toksin tipe A, B, dan E
merupakan toksin yang paling toksik pada manusia. Ketiga toksin ini dapat dirusak
dengan pemanasan pada lOO^'Cselama 20 menit.
P a t o g e n e s i s dan gejala penyakit
Penyakit infeksi yang disebabkan oleh Clostridium botulinum disebut dengan botu-
lisme, yaitu suatu gejala intoksikasi akibat mengonsumsi makanan yang tercemar
oleh toksin yang dihasilkan oleh bakteri Clostridium botulinum. Penyebab paling
sering adalah kontaminasi makanan dalam wadah kaleng, makanan yang disimpan
dalam kondisi kedap udara, atau makanan yang diasap dengan rempah-rempah dan
dimakan tanpa dimasak lagi. Dalammakanan seperti ini, Clostridium botulinum akan
tumbuh dalam suasana anaerob dan menghasilkan toksin. 1
Toksin Clostridium botulinum diperkirakan bekerja dengan menghambat pcm-
I bentukan asetilkolin pada ujung saraf sehingga menyebabkan paralisis flaksid.
Gejala penyakit mulai muncul setelah 18-96 jam mengonsumsi makanan yang
mengandung Clostridium botulinum, dengan gejala berupa gangguan penglihatan,
sulit menelan, kesulitan bicara, dan tanda-tanda paralisis. Kematian dapat terjadi aki- ^
bat paralisis pemapasan atau henti jantung (cardiac arrest). m
Gejala-gejala gangguan intestinal jarang terjadi, tidak ada demam, dan penderita"
I tetap sadar sampai mengalami kematian. Tingkat kematian akibat intoksikasi toksin
Clostridium botulinum sangat tinggi. Penderita yang sembuh tidak membentuk zat
antitoksin dalam darahnya.
Uji laboratorium yang digunakan untuk menetapkan adanya infeksi Clostridium
botulinum biasanya dilakukan dengan mengidentifikasi toksin yang dihasilkan bakteri
ini. Toksin kadang kala dapat ditemukan dalam darah penderita dan dalam sisa ma-
kanan yang terkontaminasi. Mencit yang disuntikkan toksin ini secara intraperitoneal
akan segera mati.
Tipe antigenik toksin dapat diidentifikasi dengan uji netralisasi dengan antitoksin
spesifik. Toksin botulinumdalammakanan dapatjuga ditentukan dengan uji aglutinasi
sel darah merah yang dilapisi dengan serumantitoksin yang spesifik.
Pengobatan
Untuk menyelamatkan penderita botulisme, dapat diberikan antitoksin. Antitoksin tri-
valen (A, B, dan E) telah tersedia dan dapat segera diberikan secara intravena pada
penderita.
Epidemiologi, p e n c e g a h a n , dan p e n g a w a s a n
Sebagaimana telah diuraikan, Clostridium botulinum tersebar luas di dalam tanah
sehingga spora bakteri ini sering kali mencemari sayuran, buah-buahan, dan bahan-
bahan yang lain. Jika dikalengkan atau diawetkan, makanan harus dipanaskan terlebih
dahulu sebelumdihidangkan dandimakan untuk memastikan spora bakteri Clostridium
botulinum telah dirusak dengan pemanasan yang baik. Makanan yang toksik mungkin
rusak dan tengik dan kalengnya menggembung, tetapi dapat juga tidak kelihatan
berbahaya sama sekali. Oleh sebab itu, makanan kaleng, terutama makanan kaleng
yang tidak diproduksi dengan cara pembuatan makanan dalam kaleng yang baik,
harus dimasak terlebih dahulu.
Mycobacterium leprae
Penyakit lepra atau kusta atau Morbus Hansen adalah penyakit kronis yang disebabkan
oleh infeksi Mycobacterium leprae. Bakteri ini belumdapat dikembangbiakkan dalam
media perbenihan bakteri ataupun biakan sel. Mycobacterium leprae dapat dibiakkan
pada jaringan telapak kaki tikus dengan jumlah mencapai 10^per gramjaringan atau
dapat diinokulasikan padabinatangpercobaan, yaituarmadillo. Bakteri Mycobacterium
leprae dapat berkembang di dalam tubuh armadillo mencapai 10^-10'^ bakteri per
gramjaringan.
Mycobacterium leprae merupakan bakteri tahan asam yang dapat dilihat secara
mikroskopis dengan pewarnaan Ziehl Neelsen.
Penyakit ini pertama-tama menyerang susunan saraf tepi, kemudian dapat menyerang
kulit, mukosa mulut, saluran napas atas, dan organ tubuh lain. Manifestasi klinis pe-
230 Bubu Ajar Mikrobiologi: Panduan Mahasiswa Farrnasi dan Kedokteran
nyakit ini sangat bervariasi dengan spektrum yang berada di antara dua bentuk klinis
penyakit kusta, yaitu bentuk lepromatosa dan bentuk tuberkuloid.
K u s t a b e n t u k l e p r o m a t o s a
Pada kusta bentuk lepromatosa, kelainan kulit berbentuk nodula, papula, makula, dan
infiltrat yang tersebar simetris dalamjumlah banyak. Bentuk ini menyerang daerah
hidung dan dapat membentuk krusta, menyumbat jalan napas, dan dapat terjadi
epistaksis. Serangan pada mata dapat menipibulkan iritis dan keratitis.
K u s t a b e n t u k tuberkuloid
Pada kusta tipe tuberkuloid ini, lesi kulit biasanya tunggal danjarang, batas lesi tegas,
dan mati rasa. Bentuk ini menyerang saraf dan mengakibatkan rangsang yang diterima
oleh saraf menjadi lebih berat.
Kusta bentuk lainnya adalah borderline leprosy. Jenis kusta ini merupakan gambaran
dari kedua bentuk kusta tersebut dan lebih labil. Jenis kusta ini cenderung menjadi
lepromatosajika tidak diobati dengan benar dan dapat menjadi tuberkuloidjika diobati
dengan benar.
I Bentuk awal kusta ditandai dengan munculnya makula hipopigmentasi dengan
batas lesi yang tegas dan dapat berkembang menjadi bentuk tuberkuloid, borderline,
atau lepromatosa. Gejala klinis kusta dapat juga berupa "reaksi kusta" yang akut dan
berat. Reaksi kusta ini disebut dengan erythema nodosum leprosum pada penderita
tipe lepromatosa.
Habitat dan penularan

Sampai saat ini, manusia merupakan satu-satunya yang diketahui berperan sebagai
reservoir. Di Lusiana dan Texas, hewan armadillo liar diketahui secara alamiah dapat
menderita penyakit kusta sehingga diduga secara alamiah dapat terjadi penularan dari
armadillo ke manusia. Penularan kusta ditemukan terjadi pada monyet dan simpanse
yang ditangkap di Nigeria dan Sierra Leone.
Meskipun cara penularan yang pasti belum diketahui dengan jelas, penularan di
rumah tangga dan kontak hubungan dekat dalamwaktu yang lama tampaknya sangat
berperan dalam penularan. Berjuta-juta basil dikeluarkan melalui lendir hidung pen-
derita kusta tipe lepromatosa yang tidak diobati dan basil tersebut terbukti dapat hidup
selama tujuh hari pada lendir hidung yang kering. Ulkus kulit pada penderita kusta
lepromatosa dapat menjadi sumber penyebaran Mycobacterium leprae. Bakteri ini
kemungkinan masuk melalui saluran napas danjuga melalui kulit yang terluka. Pada
anak-anak berusia di bawah satu tahun, penularan diduga terjadi melalui plasenta.
Masa inkubasi berkisar dari 9 bulan sampai 20 tahun dengan rata-rata 4 tahun un-
tuk kusta tuberkuloid dan 2 kali lebih lama untuk kusta lepromatosa. Penyakit ini
jarang sekali ditemukan pada anak-anak berusia di bawah 3 tahun, meskipun lebih
dari 50 kasus telah ditemukan pada anak-anak berusia di bawah I tahun danjuga dite-
mukan pada bayi berusia 2,5 bulan.
L M
Bab 14 - Bakteri Patogen pad a Sistem Saraf 231
Sampai saat ini, penyakit kusta masih merupakan masalah besar, terutama di
negara berkembang. Jumlah penderita kusta di Indonesia menempati urutan keempat
di dunia. Keadaan iiy menunjukkan bahwa beberapa provinsi di Indonesia masih
merupakan daerah endemik penyakit kusta, antara lain beberapa daerah di kawasan
timur Indonesia. Papua menempati urutan pertama dan diikuti oleh Maluku, Sulawesi
Selatan, Aceh, Kalimantan Selatan, dan Jawa Timur.
D i a g n o s i s penyal<it
Diagnosis klinis dilakukan melalui pemeriksaan kulit secara lengkap dengan mene-
mukan tanda-tanda terserangnya saraf tepi, berupa gejala hipestesia, anestesia, para-
lisis pada otot, dan ulkus tropikum. Pemeriksaan dilakukan dengan uji sensasi kulit
dengan rabaan halus, ditusuk dengan jarum, dan diskriminasi suhu. Diagnosis banding
harus dilakukan terhadap penyakit lain yang menimbulkan penyakit kulit yang infil-
tratif, seperti limfoma, lupus eritematosus, psoriasis, skleroderma, dan neurofibroma-
tosis.
Gejala klinis leismaniasis difosa, infeksi jamur pada kulit, pakidermoperiostosis
{pachydermoperiostosis), dan miksedema (myxedema) dapat mirip dengan kusta
lepromatosa, tetapi tidak ditemukan bakteri tahan asam. Karena kekurangan gizi,
jaringan parut pada kulit dapat mirip dengan kusta tuberkuloid.
Diagnosis penyakit kusta lepromatosa ditegakkan dengan ditemukannya bakteri
tahan asampada preparat yang diambil dari jaringan kulit. Pada kusta tipe tuberkuloid,
jumlah bakteri kemungkinan sangat sedikit sehingga sulit ditemukan pada pemerik-
saan. Dalam keadaan ini, media kulit hendaknya dikirim pada ahli patologi yang ber-
pengalaman dalam menegakkan diagnosis kusta. Gejala terserangnya saraf dan
ditemukannya bakteri tahan asam merupakan gejala kusta.
Terapi kombinasi sangat dianjurkan karena angka resistensi bakteri Mycobacterium
leprae terhadap dapson dan rifampisin sangat tinggi. Pengobatan yang dianjurkan
oleh WHO untuk kusta tipe lepromatosa adalah rifampisin, dapson, dan kiofazimin
selama 24 bulan. Kusta tipe tuberkuloid diobati dengan rifampisin dan dapson selama
6 bulan. Jika diperlukan, pengobatan dapat diperpanjang sampai pemeriksaan spesi-
men kulit menunjukkan hasil negatif Penderita yang mendapatkan pengobatan harus
dipantau untuk melihat kemungkinan terjadi efek samping obat. Komplikasi tertentu
yang ditemukan selama pengobatan perlu dirujuk ke pusat rujukan penyakit kusta.
Beberapa upaya yang dilakukan untuk mencegah infeksi Mycobacterium leprae
1. Penyuluhan kesehatan yang menekankan pada pemberian informasi tentang keter-
sediaan obat-obatan yang efektif, tidak terjadinya penularan dari penderita yang
berobat secara teratur, dan upaya pencegahan cacat fisik dan sosial.
2. Pencarian penderita, khususnya penderita tipe multibasiler yang menular, dan
pengobatan kombinasi sedini mungkin secara teratur agar penderita tersebut tidak
menjadi sumber penularan.
3. Pemeriksaan dini terhadap orang-orang yang kontak dengan sumber infeksi. Hal
ini sangat bermanfaat. Pemeriksaan berkala di rumah tangga dan orang-orang
yang kontak dekat sebaiknya dilakukan 12 bulan sekali sglama 5 tahun setelah
kontak terakhir dengan kasus yang menular.
4. Uji coba lapangan di Uganda, India, Malawi, Myanmar, dan Papua Nugini terhadap
pemberian vaksin BCGmenunjukkan vaksin ini dapat mengurangi risiko penyakit
kusta tuberkuloid pada orang-orang yang kontak dengan penderita. Penelitian
terapi profilaksis dengan dapson menunjukkan terapi ini dapat memberikan per-
lindungan sekitar 50%terhadap penyakit ini. Namun, metode ini tidak dianjurkan,
kecuali dengan pengawasan yang intensif.
5. Isolasi tidak diperlukan untuk penderita kusta tipe tuberkuloid. Isolasi terhadap
kontak harus dilakukan untuk kasus kusta lepromatosa sampai pengobatan kom-
binasi diberikan. Perawatan di rumah sakit biasanya dilakukan untuk penanganan
reaksi obat. Tidak ada pembatasan bagi penderita yang sudah dianggap tidak me-
nular lagi untuk bekerja atau bersekolah.
0
BAB 15
BAKTERI PATOGEN
PADA SISTEM
KARDIOVASKULAR DAN
SISTEM LIMFATIK
• Pendahuluan
• Versinia pestis
m Richettsia
m Bacilius anthracis
m Borrelia burgdorferi
m Brucella melitensis
233
PENDAHULUAN
Sistem kardiovaskular berfungsi untuk mengalirkan darah ke seluruh tubuh yang
berpusat padajantung. Dalam sistemkardiovaskular, darah dipompakan oleh jantung
melalui pembuluh darah arteri di paru-paru ke seluruh tubuh. Selanjutnya, melalui
pembuluh darah kapiler, darah akan dialirkan kembali melalui vena ke dalamjantung.
Sistem iimfatik merupakan bagian yang penting dalam sirkulasi darah karena sistem
limfatik berfungsi untuk menyaring plasma darah yang terdapat di antarajaringan dan
pembuluh darah kapiler.
Sistem limfatik terdiri atas limpa, pembuluh limfa, pembuluh limfa kapiler, cairan
limfa atau cairan getah bening, dan nodus limfa atau kelenjar limfa. Cairan getah
bening dalampembuluh limfa mengalir di seluruh tubuh dan kontak dengan jaringan
yang berada di sekitar pembuluh limfa kapiler. Pembuluh limfa kapiler sangat per-
meabel sehingga dapat dimasuki oleh mikroorganisme dan produk mikroorganisme
dalamkeadaan tertentu. Kelenjar limfajuga berperan penting dalamsistem kekebalan
tubuh. Oleh karena itu, jika ada bakteri yang masuk ke dalam kelenjar limfa, kinerja
sel-sel yang berperan dalam ununitas tubuh akan terpengaruh.
Dalam keadaan normal, tidak ada mikroorganisme apa pun dalam darah (steril).
Namun, begitu bakteri dapat mencapai saluran darah, bakteri tersebut dapat menyebar
ke seluruh tubuh. Dalam keadaan tertentu, bakteri dapat masuk ke dalam sistem per-
edaran darah, tetapi tidak menimbulkan penyakit. Ketika seseorang dirawat di rumah
sakit, darah sering kali terkontaminasi oleh bakteri, yang disebabkan oleh beberapa
perlakuan, misahiya penggunaan kateter dan pemberian obat melalui intravena. Darah
dan cairan limfa mengandung berbagai sel fagosit untuk mempertahankan tubuh dari
aktivitas bakteri. Akan tetapi, apabila sistem pertahanan tubuh dalam sistem kardio-
vaskular dan sistem limfatik gagal mengatasi invasi bakteri yang masuk, bakteri akan
berkembang dengan cepat di dalam darah sehingga dapat menyebabkan septisemia
atau sepsis. Sepsis sering kali dapat menimbulkan kelainan pada sistem limfatik, yaitu
terjadi inflamasi kelenjar limfa yang disebut limfangitis. Gejala sepsis yang paling
menonjol adalah demam, menggigil, napas tersengal-sengal, dan detak jantung me-
ningkat dengan cepat. Jika menyebabkan penurunan tekanan darah dan disfungsi
organ tertentu, sepsis dapat menyebabkan severe sepsis, yang apabila tidak ditangani
dengan cepat dapat menimbulkan renjat septik {septic shock) dan kematian.
Sebagian besar kejadian renjat septik disebabkan oleh invasi bakteri Gram-negatif
di dalam darah. Seperti kita ketahui, dinding sel bakteri Gram-negatif mengandung
endotoksin yang dikeluarkan ketika sel bakteri lisis. Endotoksin ini menyebabkan;
penurunan tekanan darah dengan cepat sehingga menimbulkan renjat.
Bakteri Gram-positif juga sering menyebabkan penyakit yang berhubungan^
dengan sistem peredaran darah. Invasi bakteri Staphylococcus dan Streptococcus da- i
lam aliran darah dapat menimbulkan sindrom renjat toksik {toxic shock syndrome).
Beberapa perlakuan selama perawatan di rumah sakit dapat menyebabkan infeksi:
nosokomial yang disebabkan oleh bakteri Gram-positif.
Sebagaimana diuraikan pada Bab 11, Streptococcus juga dapat menyebabkan
kelainan padajantung, yaitu endokarditis bakterial. Penyakit ini timbul akibat bakte-
Bab 15 - Bakteri Patogen pada Sistem Kardiovaskular dan Sistem Limfatik 235
remia oleh Streptococcus li-henwlyticus, Pneumococciis, Staphylococcus, atau bakteri

coliform. Penyakit ini dapat terjadi pada katup jantung yang normal ataupun yang
telah mengalami deformasi sehingga dapat terjadi endokarditis bakterial ulseratif
yang akut. Destruksi katup jantung yang cepat sering kali dapat menyebabkan kema-
tian.
Beberapa Streptococcus lain, seperti Streptococcus viridans dan Streptococcus
faecalis, dapat menyebabkan endokarditis bakterial subakut. Penyakit ini umumnya
terjadi karena infeksi pada katup jantung yang abnormal dan penyakit jantung
kongenital. Selain itu, infeksi ini dapat terjadi setelah pencabutan gigi; 30% penderita
mengalami bakteremia oleh Streptococcus a-hemolyticus dan Streptococcus faecalis.
Lesi bersifat progresif sehingga proses penyembuhan yang sedang terjadi akan disertai
dengan suatu peradangan yang aktif Pada tahap tersebut, suatu proses vegetasi akan
terjadi, yang terdiri atas fibrin, trombosit, dan bakteri yang melekat pada daun katup
jantung. Tanpa penanganan dan pengobatan yang tepat, endokarditis bakterial subakut
dapat berakibat fatal.
Jenis bakteri lain yang dapat menimbulkan kelainan pada sistem peredaran darah
adalah Yersiniapestis, Rickettsia, Brucelia melitensis, Bacilius anthracis, dan Borrelia
burgdorferi.
Yersinia pestis
Yersinia pestis termasuk dalam famili Enterobacteriaceae. Bakteri Gram-negatif ini
berbentuk kokobasil dan membentuk koloni berantai ataupun sendiri-sendiri. Ketika
berada dalam hospes reservoir, bakteri Yersinia pestis tidak memiliki kapsul. Sebalik-
nya, pada hospes definitif (hewan pengerat dan manusia), Yersinia pestis memiliki
kapsul atau simpai. Bakteri ini mempunyai flagel sehingga dapat bergerak.
Yersinia pestis merupakan bakteri patogen pada tikus atau binatang pengerat lainnya.
Namun, bakteri ini dapat juga menyebabkan infeksi pada manusia melalui gigitan
tikus. Pada umumnya, penyakit yang ditimbulkan berupa pembengkakan kelenjar
limfa atau radang paru-paru, disebut dengan penyakit pes atau sampar.
Yersinia pestis hidup dalam saluran cerna tikus. Infeksi pada manusia terjadi bila
seseorang digigit oleh tikus sehingga bakteri dapat masuk melalui pembuluh darah.
Selama berada di dalam pembuluh darah, bakteri tersebut kehilangan kapsulnya.
Namun, sebagian besar bakteri tersebut akan difagosit oleh sel-sel darah putih dan
makrofag; hanya sejumlah kecil bakteri yang dapat bertahan hidup di dalam makrofag.
Di dalam makrofag, bakteri akan menyintesis ulang kapsul pelindungnya dan bebe-
rapa antigen virulen. Bakteri yang telah memiliki kapsul tersebut akan menghancurkan
makrofag dan bebas ke dalam lingkungan ekstraseluler. Setelah memiliki kapsul,
bakteri resisten terhadap fagositosis oleh sel polimorfonuklear leukosit. Infeksi akan
segera penyebar melalui pembuluh limfa dan menyebabkan demam, pembengkakan,
dan perdarahan. Dalam beberapa jam setelah infeksi, bakteri akan menyebar melalui
pembuluh darah ke hati, limpa, dan paru-paru. Bakten yang terdapat di dalam paru-
paru penderita dapat keluar melalui batuk atau bersin sehingga dapat ditularkan
kepada orang lain.
I Penyakit yang ditimbulkan oleh Yersinia pestis dapat berupa bubonic plague dan
pneumonic plague.
B u b o n i c p l a g u e
Bubonic plague (pes bubonik) ditandai dengan pembengkakan pada kelenjar li
yang disertai dengan ruam berwarna hitam, pneumonia, dan perdarahan pada organ-
organ dalam. Angka kematian penderita yang tidak diobati dapat mencapai 90%.
Infeksi biasanya disebabkan oleh gigitan binatang pengerat, dengan masa inkubasi
berkisar 2-6 hari.
P n e u m o n i c p l a g u e
Pneumonic plague (pes pneumonia) ditularkan melalui batuk atau bersin penderita
yang terinfeksi. Masa inkubasi berkisar 1-3 hari. Infeksi biasanya ditandai dengan
pneumonia. Angka kematian penderita yang tidak diobati mencapai 100%.
Faktor virulensi
Daya virulensi Yersinia pestis ditimbulkan oleh faktor-faktor berikut.
1. Angka pertumbuhan bakteri. Daya virulensi galur Yersinia pestis biasanya da
disamakan dengan angka pertumbuhan bakteri tersebut di dalam kelenjar limfa.
Galur berdaya virulensi tinggi dapat berkembang biak secara eksponensial (log
phase) tanpa adanya fase penyesuaian {lag phase) terlebih dahulu, dan sebaliknya
galur berdaya virulensi rendah.
2. Antigen yang dihasilkan. Antigen yang menghasilkan daya virulensi dan paling
banyak dihasilkan oleh sel-sel Yersinia pestis adalah antigen V, antigen W, dan
antigen selubung fraksi I (FI). Kemampuan Yersinia pestis untuk tidak dapat di-
makan oleh sel-sel kekebalan, seperti makrofag atau sel polimorfonuklear (PMN),
biasanya disebabkan oleh antigen Vdan W. Antigen fraksi I (FI) merupakan suatu
antigen imunogen dan antifagosit yang dapat ditemukan pada galur Yersinia pestis
yang memiliki daya invasi tinggi.
3. Produksi bakteriosin. Yersinia pestis memproduksi bakteriosin yang mirip dengan
pestisin I, yaitu suatu substansi yang dapat menyebabkan pembentukan koagulase
serta memiliki aktivitas fibrinolisis.
4. Kemampuan menghasilkan enzim guanosin monofosfat sintetase. Enzim ini digu-
nakan dalam pembentukan purin. Yersinia pestis yang memiliki daya virulensi
rendah tidak menghasilkan enzim ini.
Epidemiologi
Bubonic plague atau yang biasa disebut penyakit "hlack death"" merupakan penyakit
yang bersifat epidemi pada manusia, tersebar di Eropa dan Asia selama al:fed per-
tengahan. Saat i t u , p e n y a k i t i n i dianggap sebagai penyebab k e m a t i a n h a m p i r sepertiga
p e n d u d u k d u n i a . T a n p a d i k e t a h u i d e n g a n p a s t i , bubonic plague k e m u d i a n t i d a k l a g i
m e n j a d i w a b a h e p i d e m i . W a l a u p u n b e g i t u , s e c a r a s p o r a d i s , Yersinia pestis m a s i h
dapat d i t e m u k a n pada kelenjar air liur binatang pengerat.
Perubahan y a n g drastis d a l a m e p i d e m i o l o g i penyaki t pes tersebut k e m u n g k i n a n
disebabkan o l e h beberapa faktor nonspesifik, seperti peningkatan k o n t r o l terhadap
h e w a n pengerat d a n penggunaan insektisida yang telah meluas d i seluruh dunia se-
h i n g g a m a m p u m e n g h a m b a t p e r t u m b u h a n v e k t o r - v e k t o r tersebut. S e l a i n i t u , f a k t or
virulensi tersebut k e m u n g k i n a n dapat m e n g i n d u k s i sistem kekebalan t u b u h m a n u s i a
s e h i n g g a s a n g a t e f e k t i f d a l a m m e n c e g a h i n f e k s i o l e h b a k t e r i Yersinia pestis.
Diagnosis
D i a g n o s i s i n f e k s i Yersinia pestis h a r u s s e s e g e r a m u n g k i n d i t e g a k k a n m e n g i n g a t s i f a t
v i r u l e n s i b a k t e r i i n i y a n g s a n g a t l u a r b i a s a . P e s p n e u m o n i a (pneumonic plague) d a p a t
m e n y e b a b k a n k e m a t i a n , bahkan dapat terjadi d a l a m 2 4 j a m sejak m u n c u l n y a gejala
klinis pertama.
D i a g n o s i s dapat d i l a k u k a n d e n g a n m e n e m u k a n d a n m e n g i d e n t i f i k a s i b a k t e ri ter-
sebut pada biopsi j a r i n g a n kelenjar l i m f a penderita. Beberapa gejala k l i n i k y a n g dapat
m u n c u l p a d a saat gejala a w a l adalah sebagai b e r i k u t .
• Rasa n y e r i hebat di daerah sekitar kelenjar l i m f a y a n g m e n g a l a m i inflamasi.

• D e m a m tinggi, lemas, dan sakit kepala.
• R i w a y a t kontak dengan binatang pengerat.

Pencegahan dapat d i l a k u k a n secara nonspesifik dan spesifik. Pencegahan nonspesifik
d i l a k u k a n dengan m e m e l i h a r a sanitasi l i n g k u n g a n sekitar agar terhindar dari vektor-
vektor penyakit, yaitu tikus dan binatang pengerat lainnya.
Pencegahan spesifik dapat d i l a k u k a n dengan m e m b e r i k a n v a k s i n y a n g m e n g a n -
d u n g b a k t e r i Yersinia pestis i n a k t i f A k a n t e t a p i , p e n g g u n a a n v a k s i n i n i t e r b a t a s p a d a
o r a n g d e w a s a saja ( 1 8 - 6 1 t a h u n ) k a r e n a d a p a t m e n i m b u l k a n e f e k s a m p i n g y a n g t i d a k
diinginkan, y a i t u dapat m e n y e b a b k a n reaksi inflamasi y a n g berulang.
M e n g i n g a t angka k e m a t i a n y a n g sangat tinggi j i k a tidak mendapatkan perawatan
y a n g i n t e n s i f , p e n g o b a t a n s e s e g e r a m u n g k i n s a n g a t d i b u t u h k a n p a d a i n f e k s i Yersinia
pestis. P e r a w a t a n y a n g i n t e n s i f d a p a t m e n u r u n k a n a n g k a k e m a t i a n p e n d e r i t a s a m p a i
dengan 5-20%.
Obat yang paling efektif untuk mengobati penyakit i n i adalah streptomisin. Selain
itu, obat p i l i h a n lain j u g a dapat digunakan, y a i t u tetrasiklin, sulfadiazin, dan k l o r a m -
fenikol. p - L a k t a m tidak selalu m e m b e r i k a n hasil y a n g baik. Penderita sebaiknya se-
gera diisolasi selama lebih dari 4 8 j a m setelah didiagnosis mengingat penyakit i n i
sangat m u d a h ditularkan m e l a l u i udara.
238 Bubu Ajar Mikrobiologi: P a ndua n Mahasiswa Farmasi da n Ke dokte ra n
Rickettsia

Rickettsia t e r m a s u k d a l a m f a m i l i R i c k e t t s i a c e a e . M e s k i p u n b e r u k u r a n s a n g a t k e c i l
s e p e r t i v i r u s , Rickettsia t e r g o l o n g d a l a m b a k t e r i . B a k t e r i i n i m e m i l i k i a s a m n u k l e a t
D N A dan R N A , b e r k e m b a n g b i a k dengan pembelahan biner, d i n d i n g sel m e n g a n d u n g
mukopeptida, m e m p u n y a i ribosom, m e m p u n y a i e n z i m yang aktif pada metabolisme,
dapat m e m b e n t u k A T P sebagai sumber energi, dan p e r t u m b u h a n n y a dapat dihambat
dengan antibakteri.
Bakteri i n i merupakan bakteri intraseluler obligat, berbentuk batang, k o k o i d , atau
pleomorf, berukuran 0 , 3 - 1 m i k r o n , dan bersifat Gram-negatif.
B e b e r a p a s p e s i e s y a n g p e n t i n g a n t a r a l a i n Rickettsia prowazekii, Rickettsia
rickettsii, Rickettsia tsutsugamushi, d a n Rickettsia typhi.
Rickettsia d a p a t t u m b u h d e n g a n b a i k j i k a m e t a b o l i s m e s e l h o s p e s d a l a m t i n g k a t
r e n d a h , m i s a l n y a d a l a m t e l u r b e r t u n a s p a d a s u h u 3 2 ' ' C . P a d a s u h u 0°C d a n 36°C, b a k -
teri i n i akan kehilangan aktivitasnya, berupa aktivitas h e m o l i t i k , respirasi, toksisitas,
dan infektivitas.
p Rickettsia t u m b u h d a l a m b e r b a g a i b a g i a n d i d a l a m s e l h o s p e s , s e p e r t i d a l a m s i t o -
plasma dan inti sel. Secara m i k r o s k o p i s , bakteri i n i dapat dilihat d i b a w a h m i k r o s k o p
dengan pewarnaan Giemsa berwarna biru.

B a k t e r i Rickettsia d a p a t b e r k e m b a n g d e n g a n b a i k d i d a l a m s e l e n d o t e l p e m b u l u h
darah sehingga terjadi inflamas i dan dapat m e n y e b a b k a n nekrosis. Selanjutnya, dapat
mengakibatkan trombosis p e m b u l u h darah. Vaskulitis dapat terjadi pada beberapa
organ sebagai pertanda terjadi gangguan hemostatik. P e n u m p u k a n limfosit, leukosit
p o l i m o r f o n u k l e a r , dan m a k r o f a g dapat d i t e m u k a n pada j a r i n g a n otak. P e m b u l u h darah
j a n t u n g dan organ-organ lain j u g a dapat terkena k e l a i n a n y a n g serupa.
P a d a u m u m n y a , i n f e k s i Rickettsia d i t a n d a i d e n g a n k e l u h a n d e m a m , s a k i t k e p a l a ,
malas, lesu, k e l a i n a n d i k u l i t , serta pembesaran kelenjar l i m f a dan h a t i . P e n y a k i t i n i
k a d a n g k a l a disertai dengan perdarahan d i b a w a h kulit. Pada kasus berat, d i t e m u i
g e j a l a s t u p o r , d e l i r i u m , r e n j a t (shock\ d a n b e r c a k - b e r c a k g a n g r e n d i k u l i t a t a u j a r i n g a n
s u b k u t a n . J e n i s p e n y a k i t y a n g d i t i m b u l k a n o l e h b a k t e r i Rickettsia t e r d i r i a t a s t i g a
g o l o n g a n , y a i t u g o l o n g a n t i f i i s , g o l o n g a n spottedfever, d a n g o l o n g a n d e m a m s e m a k .
Golongan tifus
P e n y a k i t i n i d i s e b a b k a n o l e h Rickettsia p e n y e b a b t i f u s e p i d e m i k d a n t i f u s e n d e m i k ,
y a i t u Rickettsia prowazekii d a n Rickettsia typhi. B a k t e r i b e r k e m b a n g b i a k d i d a l a m
sitoplasma sel hospes dan m e n i m b u l k a n d e m a m tinggi. M a s a inkubasi 5-18 hari.
Gejala penyakit pada tifus endemik biasanya lebih ringan dibandingkan dengan tifus
epidemik dan jarang berakibat fatal.
Bab 15 - Babteri Patogen pada Sistem Kardiovaskular dan Sistem Limfatik 239
T i f u s e pide mil<
P e n y a k i t i n i d i s e b u t j u g a d e n g a n lq^se'borne typhus, camp fever, a t a u jail fever, y a n g
d i s e b a b k a n o l e h Rickettsia prowazekii. P a d a t a h u n 1 9 1 5 , t e r j a d i w a b a h b e s a r y a n g
menelan korban 315.000 orang meninggal d i Serbia. Sekarang, penyakit ini relatif
j a r a n g d i t e m u k a n dan kebanyakan terjadi di A f r i k a Utara.
P e n y a k i t i n i d i t u l a r k a n o l e h k u t u m a n u s i a Pediculus vesimenti, y a n g b e r s a r a n g d i
d a l a m lipatan pakaian. D a l a m sehari, k u t u tersebut beberapa k a l i k e l u a r u n t u k m e n g -
hisap darah hospes. J i k a darah y a n g dihisap m e n g a n d u n g bakteri, bakteri akan ber-
k e m b a n g b i a k d i d a l a m usus k u t u d a n k e l u a r b e r c a m p u r d e n g a n t i n j a k u t u . P a d a saat
menghisap darah, k u t u mengeluarkan tinja. G i g i t a n k u t u m e n i m b u l k a n gatal. Jika
digaruk, tinja y a n g i n f e k t i f dapat m a s u k m e l a l u i l u k a gigitan sehingga m e n g a k i b a t k a n
infeksi pada hospes dengan gejala d e m a m tinggi.
T i f u s e nde mil<
P e n y a k i t i n i d i s e b a b k a n o l e h Rickettsia typhi, y a n g d a h u l u d i s e b u t Rickettsia mooseri.
Penyakit i n i ditularkan dari tikus k etikus dan dari tikus k emanusia oleh k u t u tikus
Polyplax spinulosa. K u t u m a n u s i a j u g a d a p a t m e n u l a r k a n p e n y a k i t i n i . M e k a n i s m e
infeksi serupa dengan m e k a n i s m e tifus epidemik, y a i t u m e l a l u i tinja k u t u dan luka
pada kulit. P e n y a k i t i n i banyak d i j u m p a i pada daerah pelabuhan dan pedesaan atau
tempat-tempat yang k u m u h .
Rickettsia prowazekii d a n Rickettsia typhi m e m p u n y a i s t r u k t u r a n t i g e n y a n g s e -
rupa. O l e h karena i t u , setelah sembuh, penderita akan kebal terhadap kedua j e n i s
bakteri tersebut.
Golongan spotted fever

P e n y a k i t i n i d i t a n d a i d e n g a n d e m a m b e r a t y a n g d i s e b a b k a n o l e h Rickettsia y a n g s u k a r
dibedakan dengan g o l o n g a n tifus. B a k t e r i dapat berkembang biak di dalam sitoplasma
dan inti sel hospes. P e n y a k i t i n i d i t u l a r k a n m e l a l u i g i g i t an k u t u , dan b a k t e r i dapat ber-
k e m b a n g di dalam tubuh k u t u , termasuk di dalam o v a r i u m dan kelenjar ludah k u t u ,
sehingga penularan dapat terjadi m e l a l u i air ludah k u t u atau sengkenit tersebut. Selain
sebagai vektor, k u t u atau sengkenit j u g a merupakan reservoir primer.
G o l o n g a n p e n y a k i t i n i m e n c a k u p Rocky Mountain spotted fever ( y a n g d i s e b a b k a n
o l e h Rickettsia rickettsii), Mediterranean fever, South African tick-bite fever, Kenya
tick fever, d a n Indian tick typhus ( s e m u a n y a d i s e b a b k a n o l e h Rickettsia conorii).
S e c a r a k l i n i s , g e j a l a p e n y a k i t g o l o n g a n spotted fever m e n y e r u p a i g o l o n g a n t i f u s ,
h a n y a berbeda pada kelainan kulit y a n g d i t i m b u l k a n . Gejala penyakit dapat ringan,
m i s a l n y a Mediterranean fever, d a n d a p a t p u l a b e r a t , m i s a l n y a Brazilian spottedfever.
Mortalitas golongan penyakit in ij u g a beragam. Mortalitas pada orang tua yang m e n -
d e r i t a Rocky Mountain spotted fever d a p a t m e n c a p a i 6 0 % .
Golongan demam semak

P e n y a k i t i n i d i s e b u t d e m a m s e m a k a t a u scrub typhus. P e n y e b a b p e n y a k i t i n i a d a l a h
Rickettsia akamushi, Rickettsia nipponica, Rickettsia orientalis, d a n Rickettsia tsutsu-
ganiushi. D e m a m s e m a k t e r j a d i d i d a e r a h s e m a k b e l u k a r a t a u d a e r a h p a n t a i . D i d a e r a h
p a n t a i , d e m a m s e m a k d i t u l a r k a n m e l a l u i t u n g a u trombiculid, d e n g a n g e j a l a k l i n i s
mirip penyakit tifus endemik. ,
Antigen dan antibodi

Rickettsia u m u m n y a m e m p u n y a i t i g a m a c a m a n t i g e n u t a m a , y a i t u a n t i g e n g r u p , a n t i -
g e n s p e s i e s , d a n a n t i g e n y a n g m i r i p d e n g a n Proteus. A n t i g e n g r u p l a r u t d a l a m e t e r
berasal dari lapisan luar selubung bakteri. A n t i g e n spesies adalah antigen y a n g berasal
d a r i b a d a n b a k t e r i . K e m i r i p a n s t r u k t u r a n t i g e n d e n g a n Proteus d a p a t d i m a n f a a t k a n
untuk tujuan identifikasijenis bakteri, yaitu dengan reaksi Weil-Felix.
A n t i b o d i riketsiosis m u l a i m u n c u l pada m i n g g u kedua sejak t i m b u l gejala sakit
dan mencapai puncak s e w a k t u atau setelah p e n y e m b u h a n. U n t u k diagnosis, titer anti-
b o d i d a l a m s e r u m y a n g d i a m b i l p a d a saat d e m a m t i n g g i d i b a n d i n g k a n dengan t i t e r
antibodi dalam masa konvalcsen.
B a h a n pemeriksaan y a n g d i g u n a k a n adalah darah penderita y a n g d i i n o k u l a s i k a n paHa
m a r m u t , tikus, atau telur bertunas. Gejala-gejala y a n g khas akan d i j u m p a i pada mar- j
m u t jantan, berupa d e m a m , pembengkakan skrotum, nekrosis, perdarahan, dan akhir- i
n y a kematian. Jika darah penderita d i a m b i l pada m i n g g u pertama sakit, bahan y a n g
diinokulasikan haruslah darah y a n g tidak mengandung serum. Selain itu, serum pen-
derita dapat diperiksa secara s e r o l o g i k dengan reaksi W e i l - F e l i x , i m u n o f i u o r e s e n s i ,
a t a u r e a k s i fiksasi k o m p l e m e n .
R e a k s i W e i l - F e l i x a d a l a h r e a k s i a g l u t i n a s i t e r h a d a p b a k t e r i Proteus. A n t i b o d i p e n -
derita akan bereaksi dengan antigen O polisakarida bakteri. G a l u r i n i hanya akan
b e r e a k s i d e n g a n a n t i g e n O y a n g t i d a k t e r t u t u p o l e h a n t i g e n H flagel, y a i t u Proteus
O X . Pada reaksi W e i l - F e l i x , d i g u n a k a n tiga m a c a m galur, y a i t u 0 X - 2 , O X - 1 9 , d a n
O X - K . H a s i l reaksi tersebut dapat d i g u n a k a n u n t u k m e m b e d a k a n berbagai m a c a m
riketsiosis. 0 X - 1 9 positif pada tifus e n d e m i k dan epidemik; O X - K positif pada de-
m a m s e m a k ; 0 X - 2 d a n 0 X - 1 9 p o s i t i f p a d a Rocky Mountain spotted î-wr Mediter-
ranean fever, d a n South African tick-bite fever.

Beberapa upaya pencegahan dapat dilakuka n untuk menghindari riketsiosis, y a i t u
sebagai berikut.
1. M e m u m s m a t a r a n t a i i n f e k s i , m i s a l n y a m e m b a s m i k u t u d e n g a n i n s e k t i s i d a d a n
membasmi tikus yang menjadi pembawa bakteri.
2. M e n j a g a kebersihan sanitasi dan lingkungan.
3. M e n d i r i k a n b a n g u n a n sehat sehingga t i d a k m e n j a d i l e m p a i bersarangnya t i k u s
4. M e l a k u k a n p r o g r a m vaksinasi secara teratur dan berkala.
B a k t e r i i n i peka terhadap pemanasan d a n pengeringan. Pengobatan bagi penderita
y a n g terinfeksi dapat d i l a k u k a n dengan pemberian antibiotik, antara lain tetrasiklin
dan kloramfenikol.
f "B a B T s ' ^B a ^^P a t o g e â ^
Bacilius antitracis

P a d a t a h u n 1 8 7 7 , R o b e r t K o c h b e r h a s i l m e n g i s o l a s i b a k t e r i Bacilius anthracis y a n g
m e n j a d i p e n y e b a b p e n y a k i t a n t r a k s p a d a h e w a n . Bacilius anthracis b a n y a k d i t e m u k a n
pada penyakit zoonosis, infeksi pada ternak lembu, kambing, domba, dan babi.
B a k t e r i y a n g d i k e l u a r k a n m e l a l u i feses, u r i n e , d a n s a l i v a h e w a n y a n g t e r i n f e k s i
dapat bertahan hidup d i ladang m e m b e n t u k endospora y a ng dapat bertahan l a m a
s a m p a i l e b i h d a ri 6 0 t a h u n . B i l a endospora i n i tertelan o l e h h e w a n , sepsis y a n g fatal
dapat terjadi pada h e w a n ternak tersebut.
Penularan pada m a n u s i a biasanya terjadi pada peternak, keluarga peternak, d a n
lingkungan d i sekitarnya atau m e l a l u i produk ternak yang terkontaminasi.
Bacilius anthracis m e r u p a k a n b a k t e r i b e r u k u r a n b e s a r ( y a i t u 1 - 1 , 2 } i m x 3 - 7 j i m ) ,
bersifat Gram-positif, berbentuk batang dengan endospora sentral, dan dapat tersusun
seperti b a m b u , seperti y a n g terlihat pada G a m b a r 15.1. B a k t e r i i n i tidak dapat bergerak
d a n dapat t u m b u h secara aerob atau anaerob pada m e d i a perbenihan biasa.

I n f e k s i y a n g d i s e b a b k a n o l e h Bacilius anthracis t e r j a d i m e l a l u i e n d o s p o r a . B e g i t u
m a s u k ke d a l a m t u b u h , endospora a k a n d i m a k a n o l e h m a k r o f a g . N a m u n , sel m a k r o f a g
t i d a k d a p a t m e n g h a n c u r k a n b a k t e r i i n i . D i d a l a m s e l m a k r o f a g , Bacilius anthracis
b e r m u l t i p l i k a s i dengan cepat dan b a h k a n dapat m e r u s a k sel-sel m a k r o f a g .
F a k t o r v i r u l e n s i u t a m a Bacilius anthracis a d a l a h d u a j e n i s e k s o t o k s i n . T o k s i n
y a n g p e r t a m a a d a l a h edema toxin, y a n g m e n y e b a b k a n e d e m a a t a u p e m b e n g k a k a n ,
d a n t o k s i n y a n g k e d u a a d a l a h lethal toxin, y a n g d a p a t m e m b u n u h s e l - s e l m a k r o f a g
sehingga bakteri i n i dapat terhindar dari sistem kekebalan t u b u h penderita. Selain i t u .
G a mba r 15.1 Bacilius anthracis dalam pewarnaan Gram (1500 x). Sel bakteri berbentuk batang
dengan ujung segi empat; di dalam sel bakteri terdapat endospora sentral di tengah-tengah spo-
rangium.
242 Bubu Ajar Mikrobiologi: P a ndua n Mahasiswa Farmasi da n Ke dokte ra n
s e l u b u n g s e l a t a u k a p s u l b a k t e r i Bacilius anthracis s a n g a t u n i k k a r e n a t i d a k m e n g a n -
d u n g p o l i s a k a r i d a s e b a g a i m a n a k a p s u l b a k t e r i l a i n , t e t a p i m e r u p a k a n s u a t u poly-D-
glutamyl capsule, y a i t u k a p s u l y a n g m e n g a n d u n g p o l i p e p t i d a p o l i - D - g l u t a m a t . O l e h
s e b a b i t u , i n f e k s i Bacilius anthracis d i p e r k i r a k a n t i d a k d a p a t m e n s t i m u l a s i r e s p o n s
s i s t e m k e k e b a l a n t u b u h . J a d i , b e g i t u Bacilius anthracis d a p a t m a s u k k e d a l a m p e r e -
daran darah, infeksi akan cepat berkemban g tanpa dihambat o l e h sistem pertahanan
tubuh penderita. D e n g a n d e m i k i a n , penderita akan m e n g a l a m i septisemia dan renjat
septik, y a n g pada a k h i r n y a dapat m e n y e b a b k an k e m a t i a n .
P e n y a k i t a n t r a k s d a p a t m e n y e r a n g m a n u s i a d a l a m t i g a b e n t u k , y a i t u antraks kulit,
antraks saluran cerna, d a n antraks paru.
Antraks kulit
A n t r a k s k u l i t {cutaneous anthrax) a d a l a h i n f e k s i Bacilius anthracis p a d a k u l i t .
E n d o s p o r a Bacilius anthracis m a s u k k e d a l a m t u b u h m e l a l u i l e s i a t a u l u k a p a d a k u l i t ,
k e m u d i a n m e n y e b a b k a n pustula y a n g khas pada kutan. Infeksi i n i biasanya terjadi
pada peternak atau pekerja r u m a h pemotongan h e w a n . B a k t e r i u m u m n y a tidak dapat
m a s u k k e d a l a m sistem peredaran darah. A k a n tetapi, j i k a bakteri m a s u k k e d a l a m
peredaran darah, a n g k a k e m a t i a n dapat mencapai l e b i h dari 2 0 % .
Antraks saluran cerna

A n t r a k s s a l u r a n c e r n a (gastrointestinal anthrax) a d a l a h m f e k s i y a n g d i s e b a b k a n p e n -
d e r i t a m e n e l a n e n d o s p o r a Bacilius anthracis y a n g t e r d a p a t d a l a m m a k a n a n a t a u
daging y a n g terkontaminasi. Gejala antraks i n i antara lain m u a l , m u n t a h , sakit perut,
dan diare disertai darah. L u k a akan terjadi pada saluran cerna, d i sekitar m u l u t , teng-
gorokan, dan terutama pada usus halus. A n g k a k e m a t i a n infeksi saluran cerna y a n g
disebabkan oleh antraks lebih dari 5 0 % .
Antraks paru
A n t r a k s p a r u (pulmonary anthrax) a d a l a h i n f e k s i y a n g d i s e b a b k a n p e n d e r i t a m e n g -
h i r u p e n d o s p o r a Bacilius anthracis. I n f e k s i s e p e r t i i n i s a n g a t b e r b a h a y a b a g i m a n u s i a
karena endospora k e m u n g k i n a n besar m u d a h m a s u k k e d a l a m peredaran darah. G e j a l a
k l i n i s i n f e k s i i n i t i d a k spesifik, sama seperti infeksi biasa, y a i t u d e m a m r i n g a n , batuk,
dan n y e r i dada. J i k a t i d a k d i t a n g a n i dengan cepat, endospora dapat m a s u k k e d a l a m
peredaran darah. B e g i t u h a l tersebut terjadi, bakteri akan segera b e r k e m b a n g dengan
pesat dan penderita a k a n m e n g a l a m i renjat septik d a l a m w a k t u 2 - 3 h a r i . K e m a t i a n
akan terjadi dalam w a k t u 2 4 - 3 6 j a m . A n g k a kematian akibat antraks paru mencapai
100%.
P e m e r i k s a a n l a b o r a t o r i u m b a k t e r i Bacilius anthracis b i a s a n y a d i l a k u k a n d e n g a n c a r a
isolasi dan identifikasi bakteri dari bahan pemeriksaan, m e l i p u t i p e m b i a k a n bakteri,
u j i s e r o l o g i u n t u k m e n e n t u k a n k e b e r a d a a n Bacilius anthracis d e n g a n m e n g g u n a k a n
antibodi m o n o k l o n a l , dan pemeriksaan D N A spesifik dengan t e k n i k reaksi rantai
p o l i m e r a s e ( P C R ) d a n DNA probe.
Bab 15 - Bakteri Patogen pada Sistem Kardiovâskular dan Sistem Limfatik 243

P e m b e r i a n a n t i b i o t i k m e r u p a k a n cara pengobatan y a n g d i a n j u r k a n bagi penderita
y a n g b e l u m pernah mendapatkan imunisasi antraks. A n t i b i o t i k y a n g dapat digunaka n
antara lain p e n i s i l i n , siprofloksasin, d a n d o k s i s i k l i n . A n t i b i o t i k j u g a dapat diberika n
sebagai terapi p r e v e n t i f bagi m e r e k a y a n g berisiko tinggi terinfeksi endospora bakteri
Bacilius anthracis.
P e m b e r i a n v a k s i n pada h e w a n ternak m e r u p a k a n prosedur tetap y a n g harus dila-
k u k a n d i daerah endemis. Selain itu, pemberian vaksin antraks bagi manusia j u g a
dapat d i l a k u k a n secara bertahap s e b a n y a k 6 k a l i d a l a m k u r u n w a k t u 18 b u l a n , k e -
m u d i a n d i u l a n g setiap tahun .
Borrelia burgdorferi

Pada tahun 1975 d i k o t a L y m e , Connecticut, A m e r i k a Serikat, terjadi sebuah kasus
infeksi y a n g b e l u m pernah dikenal sebelumnya. Infeksi tersebut berjangkit d i antara
anak-anak m u d a . Pada a w a l n y a , m e r e k a diduga menderita suatu penyakit y a n g ge-
jalanya menyerupai artritis reumatoid. Penyakit yang disebabkan oleh gigitan kutu ini
k e m u d i a n d i b e r i n a m a sesuai dengan n a m a k o t a pertama kali p e n y a k i t i n i d i t e m u k a n ,
y a i t u p e n y a k i t L y m e {Lyme disease). P e n y a k i t L y m e p e r t a m a k a l i d i t e m u k a n o l e h D r .
A l l e n Steere. Saat i n i , penyaki t L y m e j u g a d i t e m u k a n d i beberapa negara, antara lain
Eropa, Jepang, Cina, dan Australia. D i A m e r i k a , penyakit L y m e merupakan penyakit
y a n g u m u m d i j u m p a i , dengan angka kesakitan lebih dari 10.000 kasus per tahun.
Pada tahun 1983, penyebab u t a m a penyakit L y m e dapat diidentifikasi oleh W i l l y
Burgdorfer. D i a berhasil mengisolasi suatu bakteri y a n g termasu k dalam golongan
s p i r o k e t a , g e n u s Borrelia, d a r i s a l u r a n c e r n a k u t u lxodes. B a k t e r i i n i t e r n y a t a d a p a t
bereaksi secara spesifik dengan serum penderita penyakit L y m e . D e n g a n d e m i k i a n ,
bakteri penyebab p e n y a k i t L y m e dapat diidentifikasi. B a k t e r i tersebut k e m u d i a n diberi
n a m a Borrelia burgdorferi. V e k t o r u t a m a b a k t e r i Borrelia burgdorferi a d a l a h k u t u
/xodes scapularis, y a n g d a p a t m e n u l a r k a n Borrelia burgdorferi m e l a l u i g i g i t a n n y a .
Borrelia burgdorferi m e r u p a k a n b a k t e r i p a t o g e n p a d a m a n u s i a , b e r u k u r a n 2 0 -
3 0 f i m X 2 - 3 |.nn, dan m e m p u n y a i endoflagel sehingga dapat bergerak bebas. B a k t e r i
ini tersebar luas d i l i n g k u n g a n y a n g basah, d a l a m usus binatang, d a n rongga m u l u t
m a n u s i a . T i d a k s e p e r t i b a k t e r i g o l o n g a n s p i r o k e t a y a n g l a i n , Borrelia burgdorferi
d a p a t d i b i a k k a n p a d a m e d i a p e r b e n i h a n , y a i t u m e d i a Barbour-Stoenner-Kelly (BSK),
y a n g m e n g a n d u n g s e r u m k e l i n c i . Borrelia burgdorferi t u m b u h d e n g a n b a i k p a d a s u h u
32°C d e n g a n s u a s a n a m i k r o a e r o b i k . P e r t u m b u h a n b a k t e r i i n i t e r g o l o n g l a m b a t , y a i t u
m e m i l i k i w a k t u generasi 1 0 - 1 2 j a m .

Gejala pertama penyakit L y m e adalah reaksi r u a m pada kulit d i sekitar gigitan. Lesi
k e m e r a h a n i n i k e m u d i a n m e m b e s a r h i n g g a m e n c a p a i d i a m e t e r 15 c m . G e j a l a r u a m i n i
dialami ole h sekitar 7 5 % penderita. Gejala lain y a n g m u n c u l adalah d e m a m ringan

dan gejala y a n g m e n y e r u p a i gejala f l u biasa selama k u r a n g lebih beberapa m i n g g u .
B i l a k e a d a a n i n i t i d a k diatasi d e n g a n b a i k , gejala p e n y a k i t a k a n m e m a s u k i fase k e d u a ,
yaitu terjadi kelainan jantung. D e n y u t jantung u m u m n y a menjadi tidak teratur dan
k a d a n g k a l a d i b u t u h k a n alat pacu j a n t u n g . K e a d a a n i n i dapat berlanjut, y a n g ditandai
d e n g a n t e r j a d i n y a k e l a i n a n - k e l a i n a n saraf, m i s a l n y a paralisis p a d a m u k a , m e n i n g i t i s ,
dan ensefalitis. Beberapa bulan atau beberapa tahun k e m u d i a n penderita akan m e n g -
alami gangguan artritis kronis dan kerusakan persendian. Pada j a n g k a panjang, gejala
penyakit L y m e m e n y e r u p a i gejala penyakit sifilis y a n g disebabkan o l e h j e n i s spiro-
keta lain.
Pengobatan
Pengobatan y a n g sedini m u n g k i n sangat d i a n j u r k an u n t u k m e n g h a m b a t perjalanan
penyakit. P e m b e r i a n antibiotik y a n g tepat harus d i l a k u k a n u n t u k m e n g o b a t i p e n y a k i t
L y m e agar tidak m e n i m b u l k a n k o m p l i k a s i y a n g berkepanjangan.
Brucella melitensis

B a k t e r i Brucella melitensis m e r u p a k a n p a r a s i t o b l i g a t p a d a h e w a n d a n m a n u s i a .
B a k t e r i ini pertama kali d i t e m u k a n oleh D a v i d Bruce pada t a h u n 1887 pada seorang
penderita bruselosis di pulau Malta. Pada tahun 1897, bakteri yan g serupa d i t e m u k a n
p a d a h e w a n t e r n a k y a n g m e n g a l a m i a b o r s i d a n d i s e b u t d e n g a n Brucella abortus.
Selanjutnya, pada t a h u n 1914, T r a u m m e n e m u k a n bakteri sejenis pada babi, y a n g
d i b e r i n a m a Brucella suis. Brucella m e r u p a k a n b a k t e r i y a n g d a p a t t u m b u h d i d a l a m
uterus h e w a n y a n g rentan. Pertumbuhan bakteri i n i m e m b u t u h k a n karbohidrat
m e s o e r i t r i t o l y a n g b a n y a k terdapat pada fetus dan m e m b r a n d i s e k e l i l i n g fetus.
Bakteri G r a m - n e g a t i f ini berbentuk kokobasil, berukuran 0,5-0,7 f i m x 0,6-1,5 ^ m ,
t i d a k d a p a t b e r g e r a k , t i d a k b e r s p o r a , d a n b e r s i f a t a e r o b . Brucella melitensis t u m b u h
lambat d a n m e m e r l u k a n perbenihan yang k o m p l e k s , terutama pada isolasi primer.
Pada perbenihan agar serum dekstrosa atau agar triptikase, bakteri i n i m e m b e n t u k
k o l o n i y a n g halus, m u k o i d , dan j e r n i h atau sedikit k e r u h . B a k t e r i ini tersebar di seluruh
d u n i a d a n m e r u p a k a n p e n y e b a b p e n y a k i t p a d a h e w a n . Brucella melitensis d a p a t h i d u p
d a l a m tanah y a n g l e m b a p selama 7 2 hari, d a l a m susu selama 17 hari, dan d a l a m a i r
laut selama 7 2 hari. Berdasarkan hal tersebut, penularan antara h e w a n d a n m a n u s i a
k e m u n g k i n a n besar dapat terjadi.

T r a n s m i s i b a k t e r i Brucella melitensis d a p a t t e r j a d i k a r e n a k o n t a k l a n g s u n g d e n g a n
bahan-bahan y a n g terkontaminasi , m i s a l n y a pada r u m a h potong h e w a n d a n m e l a l u i
p r o d u k h e w a n d a n s u s u . O r a n g y a n g b e r i s i k o t i n g g i t e r t u l a r b a k t e r i Brucella melitensis
adalah petugas l a b o r a t o r i u m , peternak, pemerah susu, dan dokter h e w a n y a n g sering
k o n t a k dengan bakteri i n i . B a k t e r i dapat m a s u k m e l a l u i kuli t y a n g terluka, k e m u d i a n
m e n g i n v a s i m e l a l u i peredaran darah, m a s u k k e dalam p e m b u l u h l i m f a dan kelenjar
limfa.
Gejala penyakit y a n g d i t i m b u l k a n adalah d e m a m , m e n g g i g i l , d a n lemah. Pada
kasus y a n g berat, penderita berkeringat deras dan d e m a m pada m a l a m h a r i . I n f e k s i
y a n g d i s e b a b k a n o l e h Brucella melitensis b i a s a n y a b e r a t d a n d a p a t m e n y e b a b k a n
k e m a t i a n . P e n d e r i t a i n f e k s i Brucella melitensis b i a s a n y a a k a n m e n g a l a m i d e m a m
t i n g g i s a m p a i 40°C s e t i a p s o r e . O l e h s e b a b i t u , d e m a m y a n g d i s e b a b k a n o l e h b a k t e r i
i n i s e r i n g k a l i d i s e b u t d e n g a n undulant fever.
S e l a i n m e l a l u i l u k a p a d a k u l i t , b a k t e r i Brucella melitensis b i a s a n y a m a s u k k e
dalam tubuh m e l a l u i susu h e w a n ternak yang tidak dipasteurisasi dengan baik. Bakteri
m a s u k m e l a l u i lesi abrasi pada kulit atau m e m b r a n m u k o s a m u l u t , tenggorokan , dan
saluran cerna. B e g i t u m a s u k k e d a l a m tubuh, bakteri akan d i m a k a n o l e h m a k r o f a g .
D a l a m makrofag, bakteri akan bermultiplikasi, kemudian masuk melalui sistem l i m -
fatik ke dalam kelenjar getah bening. Dari sini, bakteri akan menyebar ke dalam hati,
g i n j a l , d a n s u m s u m t u l a n g . K e m a m p u a n b a k t e r i Brucella melitensis u n t u k b e r k e m -
bang dan t u m b u h d i dalam makrofag merupakan faktor virulensi bakteri d a n daya
tahan bakteri terhadap antibiotik.
B a h a n pemeriksaan untu k menegakkan diagnosis infeksi bruselosis adalah darah,
cairan serebrospinal, s u m s u m t u l a n g , j a r i n g a n biopsi k e l e n j a r l i m f a dan h a t i , serta
s e r u m u n t u k u j i s e r o l o g i . B a h a n p e m e r i k s a a n d a p a t d i b i a k k a n p a d a m e d i a Brucella
agar. S e b a g i a n b i a k a n d i i n k u b a s i d a l a m s u a s a n a C O ^ 1 0 % u n t u k m e n u m b u h k a n Bru-
cella abortus, t e r u t a m a p a d a i s o l a s i p r i m e r . U j i s e r o l o g i m e r u p a k a n c a r a p e m e r i k s a a n
y a n g penting u n t u k mengetahui adanya infeksi bruselosis. Tes aglutinasi pada serum
penderita atau pada susu ternak merupakan cara y a n g sering digunakan u n t u k m e n e -
g a k k a n d i a g n o s i s i n f e k s i b a k t e r i Brucella melitensis.

S a m p a i saat i n i , p e m b e r i a n a n t i b i o t i k t e t r a s i k l i n tetap m e r u p a k a n t e r a p i p i l i h a n u n t u k
pengobatan bruselosis. Pemberian antibiotik sering kali harus diperpanjang karena
bakteri dapat t u m b u h d e n g a n baik pada sel-sel m a k r o f a g . K o m b i n a s i t e t r a s i k l i n dan
streptomisin j u g a sering digunakan dalam beberapa m i n g g u pengobatan.
U p a y a pencegahan bruselosis terutama ditujukan terhadap h e w a n sumber infeksi.
Imunisasi h e w a n ternak dapat d i l a k u k a n dengan pemberian v a k s i n y a n g m e n g a n d u n g
b a k t e r i y a n g d i l e m a h k a n . V a k s i n y a n g m e n g a n d u n g g a l u r b a k t e r i Brucella abortus
strain 19 d i g u n a k a n u n t u k v a k s i n a s i s a p i ; Brucella melitensis strain Rev I d i g u n a k a n
untuk vaksinasi biri-biri dan k a m b i n g. Pencegahan bruselosis pada manusia terutama
ditujukan pada pengawasan pengolahan produk ternak dan produk susu yang menjadi
sumber infeksi. I m u n i s a s i a k t i f pada manusia b e l u m d i l a k u k a n secara massal.
s
B A B 16
PERANAN
MIKROORGANISME
DALAM INDUSTRI
MAKANAN DAN SEDIAAN
FARMASI
• Pendahuluan
• Mikroorganisme d a l a m B a h a n M a k a n a n
• Kerusakan Makanan
• Pengawetan Bahan Makanan
• P e r a n a n Mikroorganisme d a l a m Produksi
Bahan Makanan
• P e r a n a n Mikroorganisme d a l a m Produksi
Sediaan Farmasi
246
Bab 16 - Peranan Mibroorganisme 2471
PENDAHULUAN
K e m a m p u a n manusia dalam menghasilkan produk yang dibutuhkan untuk keperluan
h i d u p sangat terbatas. N a m u n , k e b u t u h a n m a n u s i a s e m a k i n l a m a s e m a k i n besar se-
hingga m a n u s i a berusaha u n t u k m e m e n u h i berbagai m a c a m k e b u t u h an tersebut. Salah
satu cara y a n g d i l a k u k a n m a n u s i a u n t u k m e m e n u h i k e b u t u h a n h i d u p adalah dengan
m e l a k u k a n p e n e l i t i a n g u n a m e n d a p a t k a n t e k n o l o g i tepat g u n a u n t u k m e n d a p a t k a n
berbagai produ k y a n g dibutuhka n dalam kehidupan.
D a l a m bidang pangan, m u n c u l kesulitan m e m e n u h i kebutuhan m a k a n a n dengan
s e m a k i n bertambahnya j u m l a h populasi di dunia, tanpa m e l a k u k a n upaya-upaya untuk
mengawetkan bahan makanan.
Selain m e r u p a k a n sumber gizi bagi manusia, bahan m a k a n a n j u g a m e r u p a k a n
sumber mikroorganisme. Pertumbuhan bakteri dalam bahan pangan d a n makanan
dapat m e n y e b a b k a n perubahan fisik atau k i m i a y a n g tidak d i i n g i n k a n sehingga m a -
k a n a n tersebut tidak l a y a k d i k o n s u m s i . O l e h karena i t u , beberapa cara p e n g a w e t a n
m a k a n a n telah d i k e m b a n g k a n u n t u k mengatasi proses k e r u s a k an m a k a n a n y a n g dise-
babkan oleh bakteri.
Penyebaran beberapa gangguan kesehatan diperantarai oleh m a k a n a n d a n m i -
n u m a n y a n g terkontaminasi oleh bakteri, antara lain tifus, kolera, diare, dan disentri.
P e n y e b a r an b a k t e r i - b a k t e ri tersebut dapat m e n y e b a b k a n w a b a h p e n y a k i t . Peredaran
m a k a n a n d a n m i n u m a n harus mendapatkan pengawasan y a n g ketat agar m a k a n a n
y a n g d i k o n s u m s i tidak mengandung m i k r o o r g a n i s m e y a n g berbahaya bagi manusia.
S a l a h satu s i s t e m y a n g saat i n i d i a n u t o l e h B a d a n P e n g a w a s O b a t d a n M a k a n a n d i
s e l u r u h d u n i a a d a l a h s i s t e m Hazani Amlysis and'Critical Control Point. S i s t e m i n i
m e r u p a k a n perangkat u t a m a bagi lembaga pemerintah u n t u k m e l a k u k a n pengawasan,
pemantauan, dan identifikasi masalah kesehatan yang disebabkan oleh m a k a n a n y a n g
t e r k o n t a m i n a s i , serta panduan u n t u k m e l a k u k a n u p a y a m e n g h i n d a r i k o n t a m i n a s i
m i k r o b a patogen pada proses pengolahan makanan.
Peranan m i k r o o r g a n i s m e dalam industri sediaan farmasi telah l a m a d i k e m b a n g k a n
u n t u k m e n g g a n t i k a n proses sintesis k i m i a y a n g lebih r u m i t d a n m a h a l , antara lain
dalam proses pembuatan antibiotik, vaksin, asam a m i n o , v i t a m i n , e n z i m , dan steroid.
Bab ini akan membahas peranan m i k r o o r g a n i s me dalam menghasilkan produk m a -
k a n a n d a n p r o d u k farmasi y a n g dapat d i m a n f a a t k a n u n t u k m e n i n g k a t k a n kesehatan
masyarakat.
M I K R O O R G A N I S M E DALAM BAHAN MAKANAN

Bahan makanan alamiah mengandung mikroorganisme yang beberapa d i antaranya
bersifat patogen. M i k r o o r g a n i s m e tersebut berasal dari l i n g k u n g a n y a n g k e m u n g k i n a n
m a s u k k e d a l a m m a k a n a n selama proses penanganan, pengolahan, dan p e n y i m p a n a n .
Tabel 16.1 m e r a n g k u m beberapa m i k r o o r g a n i s m e y a n g dapat m e n c e m a r i bahan
makanan sehingga berpotensi menjadi sumber penyakit.
Bubu Ajar Mikrobiologi: Panduan Mahasiswa Farmasi dan Kedokteran 'j
Tabel 16.1 . Je nis Bakteri ya ng Dapat Mencemari Bahan Pangan

M ikroorga nisme Ba ha n pa nga n
Salmonella Daging ternak dan daging unggas mentah, susu segar, telur,
dan makanan basah
Clostridium perfringens Daging ternak dan daging unggas, makanan kering, buah.
sayuran, dan rempah-rempah
Staphylococcus aureus Makanan dingin dan produk susu. terutama yang
menggunakan bahan baku susu mentah
Bacilius cereus Sereal, makanan kering, produk susu, daging, rempah-
rempah, dan sayuran
Escherichia coli Bahan pangan mentah
Vibrio parahaemolyticus Ikan segar dan olahannya, kerang, dan makanan laut
Shigella Makanan basah, susu. kacang-kacangan, kentang, tuna,
udang, kalkun, salad, dan makaroni
Streptococcus Susu, es krim, telur, lobster, salad kentang, dan salad telur
Daging
D a g i n g h e w a n ternak, seperti sapi, k a m b i n g , kerbau, dan babi dapat t e r k o n t a m i n a s i
oleh berbagai m i k r o o r g a n i s m e dari udara, peralatan, tempat p e m o t o n g a n , atau dari
petugas pengolahan. F l o r a y a n g u m u m terdapat d a l a m daging segar antara lain
Pseudomonas, Staphylococcus, Enterococcus, d a n coliform. S e l a i n i t u , b a n y a k h e w a n
y a n g d i s e m b e l i h d a n d i p o t o n g m e m b a w a m i k r o o r g a n i s m e e n t e r i k , s e p e r t i Salmonella,
Campylobacter, Escherichia coli, Yersinia enterocolitica, histeria monocytogenes,
d a n Clostridium perfringens. P r o s e s p e m o t o n g a n h e w a n y a n g t i d a k b a i k d a p a t m e -
n i n g k a t k a n penularan m i k r o o r g a n i s m e dari h e w a n satu ke h e w a n y a n g lain. D e m i k i a n
pula, k o n t a m i n a s i m i k r o o r g a n i s m e dapat terjadi pada penggilingan daging dalam
pembuatan daging g i l i n g sehingga proses i n i m e m e r l u k a n pengawasan pengolahan
yang baik.
Unggas
F l o r a pada daging unggas segar berasal dari flora n o r m a l y a n g terdapat pada kuli t
unggas atau berasal d a r i k o n t a m i n a s i pada saat p e n y e m b e l i h a n , p e n g u l i t a n , d a n p e m -
bersihan isi perut unggas. Jenis bakteri y a n g biasanya terdapat pada daging unggas
s e g a r a d a l a h Pseudomonas.
Telur
B a g i a n sebelah d a l a m telur y a n g baru keluar biasanya bebas dari m i k r o o r g a n i s m e .
K u l i t t e l u r k e m u n g k i n a n m e n g a n d u n g Salmonella y a n g b e r a s a l d a r i k o t o r a n a y a m d a n
dapat m e n g o n t a m i n a s i i s i t e l u r pada saat t e l u r d i p e c a h k a n . B a n y a k n y a m i k r o o r g a -
n i s m e y a n g terdapat d a l a m t e l u r sangat bergantung pada k e b e r s i h a n dan cara p e n y i m -
panan.
Susu
Susu y a n g d i o l a h dengan benar dan baik, m i s a l n y a dengan pasteurisasi dan sterilisasi,
m e r u p a k a n p r o d u k y a n g a m a n d i k o n s u m s i . A k a n tetapi, susu segar y a n g diperoleh
dari h e w a n dapat t e r k o n t a m i n a si dari h e w a n y a n g m e n y u s u i atau dari peralatan dan
lingkungan tempat pemerahan susu. Ganggua n pencernaan dapat d i a l a m i orang y a n g
m e n g o n s u m s i susu y a n g t i d a k d i o l a h secara h i g i e n i s k a r e n a susu sangat berpotensi
m e n g a n d u n g Salmonella, Staphylococcus aureus, Bacilius cereus, Yersinia entero-
colitica, d a n Lis teria monocytogenes.
Pengasaman susu d a n fermentasi susu dapat m e n g h i l a n g k a n atau m e n g h a m b a t
pertumbuhan bakteri enterik yang patogen.
Ikan dan kerang-kerangan

Flora n o r m a l pada ikan d a n h e w a n laut lain ditentukan oleh kualitas m i k r o b a y a n g
terdapat di perairan tempat h e w a n laut itu ditangkap. Ikan dan kerang-kerangan j u g a
d a p a t t e r k o n t a m i n a s i d a r i l i n g k u n g a n t e m p a t p e n g o l a h a n n y a . B a k t e r i Vibrio para-
haemolyticus d a n Vibrio cholerae m e r u p a k a n k o n t a m i n a n y a n g u m u m t e r d a p a t p a d a
ikan d a n m a k a n a n laut lain. Bakteri penyebab gastroenteritis i n i dapat d i h i l a n g k a n
dengan pemanasan. D a l a m kerang-kerangan, j u g a dapat d i t e m u k a n beberapa bakteri
p a t o g e n , a n t a r a l a i n Salmonella, Escherichia coli. Vibrio parahaemolyticus, d a n Clos-
tridium.
Buah dan sayuran

B a g i a n sebelah d a l a m t a n a m a n y a n g sehat biasanya bebas d a r i m i k r o o r g a n i s m e pato-
gen. N a m u n , p e r m u k a a n t a n a m a n tersebut dapat d i c e m a r i o l e h berbagai m i k r o o r g a -
n i s m e . P e n c e m a r a n buah dan sayuran dapat terjadi selama proses panen, penanganan
pascapanen, d a n penyimpanan. Buah-buahan m e m p u n y a i p H relatif lebih rendah
daripada sayuran d a n m e m i l i k i k e m u n g k i n a n terkontaminasi oleh m i k r o o r g a n i s m e
lebih rendah daripada sayuran. Sanitasi dan penggunaan air y a n g bersih m e r u p a k a n
faktor penting d a l a m penanganan buah dan sayuran. Beberapa bakteri dapat mence-
m a r i b u a h d a n s a y u r a n , a n t a r a l a i n Salmonella, Shigella, d a n Vibrio cholerae.
Makanan kering
J e n i s b a k t e r i y a n g s e r i n g k a l i m e n c e m a r i m a k a n a n k e r i n g a d a l a h Clostridium d a n
Bacilius. S p o r a k e d u a b a k t e r i i n i s a n g a t t a h a n t e r h a d a p p r o s e s p e n g e r i n g a n . P r o s e s
p e n g e r i n g a n y a n g k u r a n g b a i k m e m u n g k i n k a n b a k t e r i Salmonella d a n Escherichia
coli t e t a p a d a s e t e l a h p e n g e r i n g a n . M a k a n a n - m a k a n a n k e r i n g i n i a m a n d i k o n s u m s i
s e l a m a d a l a m keadaan k e r i n g . A k a n tetapi, j i k a proses p e n g o l a h a n n y a dengan cara
r e h i d r a s i , m a k a n a n tersebut harus d i p e r l a k u k a n s a m a seperti m a k a n a n segar. P e n a m -
bahan r e m p a h - r e m p a h harus d i l a k u k a n s e b e l u m proses pemanasan karen a r e m p a h -
rempah sering kali terkontaminasi oleh mikroorganisme.
250 Bubu Ajdr Mikrobiologi: Panduan Mahasiswa Fdrrridsi dan Kedokteran
K E R U S A K A N MAKANAN
B a h a n pangan atau m a k a n a n disebut rusak atau tidak layak d i m a k a n j i k a sifat-sifat
bahan pangan atau m a k a n a n tersebut telah berubah. K e r u s a k a n pangan dapat disebab-
kan oleh berbagai faktor, antara lain adanyapertumbuhan dan aktivitas m i k r o o r g a n i s m e,
kerusakan k a r e n a serangga atau binatang pengerat, adanya aktivitas e n z i m dan n o n -
e n z i m d a l a m b a h a n m a k a n a n , d ^ a d a n y a k e r u s a k a n fisik, m i s a l n y a k a r e n a p r o s e s
pembekuan, pengermgan, pemanasan, dan tekanan.
Gejala keracunan sering terjadi ketika seseorang m e n g o n s u m s i m a k a n a n y a n g
mengandung bahan-bahan berbahaya, termasuk m i k r o o r g a n i s m e , y a n g tidak dapat
terdeteksi langsung dengan indra m a n u s i a . B a h a n - b a h a n k u n i a berbahaya y a n g ter-
dapat d a l a m m a k a n a n sulit d i k e t a h u i secara langsung sehingga sering m e n y e b a b k a n
keracunan makanan.
M i k r o o r g a n i s m e berbahaya y a n g terdapat d a l a m m a k a n a n kadang-kadang dapat
dideteksi j i k a p e r t u m b u h a n m i k r o o r g a n i s m e tersebut m e n y e b a b k a n perubahan ter-
tentu pada makanan, misalnya m e n i m b u l k a n bau asam, bau busuk, dan lain-lain. A k a n
tetapi, tidak semua m i k r o o r g a n i s m e m e n i m b u l k a n perubahan y a n g m u d a h diketahui
sehingga sering m e n i m b u l k a n masalah j i k a kita m e n g o n s u m s i m a k a n a n tersebut.
K e r u s a k a n m a k a n a n dapat diketahui dari berbagai tanda berikut.
: 1. K e k e n y a l a n produk daging d a n ikan berubah, yang disebabkan oleh pecahnya
^ struktur d a g m g oleh berbagai jenis bakteri.
i 2 . T e k s t u r s a y u r a n m e l u n a k , t e r u t a m a d i s e b a b k a n o l e h Erwinia carotovora, Pseudo-
monas marginalis, d a n Sclerotinia sclerotiorum.
f 3. K e k e n t a l a n susu dan santan berubah, yang disebabkan oleh penggumpalan protein
dan pemisahan serum.
I 4 . Terbentuk lendir pada produk daging, ikan, d a n sayuran, y a n g disebabkan Oleh
f p e r t u m b u h a n b e r b a g a i m i k r o o r g a n i s m e , t e r u t a m a b a k t e r i a s a m l a k t a t , Lactobacil-
t lus, Enterococcus, d a n Bacilius,
Proses penguraian bahan pangan oleh m i k r o o r g a n i s m e dapat dijabarkan sebagai be-
rikut.
I 1. M a k a n a n berprotein + mikroorganisme proteolitik akan membentuk asam amino,
\ amin, amonia, dan H^S,
I 2 . M a k a n a n berkarbohidrat + mikroorganisme yang memfermentasi karbohidrat
I a k a n m e m b e n t u k a s a m , a l k o h o l , d a n gas.
i; 3 . M a k a n a n b e r l e m a k + m i k r o o r g a n i s m e l i p o l i t i k a k a n m e m b e n t u k a s a m l e m a k d a n
|: gliserol.
Perubahan pada m a k a n a n y a n g disebabkan o l e h m i k r o o r g a n i s m e t i d a k terbatas pada
p e n g u r a i a n saja, t e t a p i b e b e r a p a m i k r o o r g a n i s m e dapat m e n g u b a h w a r n a m a k a n a n
atau m e n g u b a h tekstur makanan. Beberapa perubahan m a k a n a n y a n g disebabkan oleh
m i k r o o r g a n i s m e dapat dilihat pada T a b e l 16.2 b e r i k u t i n i .
Tabel 16.2. Je nis M ikroorga nisme dan Je nis Ke rusa kan pada Ba ha n Makanan |
M a ka na n Ke rusa ka n ma ka na n M ikroba pe nye ba b
Acar Menjadi hitam Bacilius nigrificans
Berlendir Lactobacillus plantarum
Daging babi Menjadi masam * Clostridium putrefaciens
Daging masak Menjadi hijau Lactobacillus
Daging mentah Pembusukan Escherichia coli

Proteus vulgaris
Pseudomonas
Ikan Penguraian Clostridium sp.
Perubahan tekstur Pseudomonas
Roti Rusak Bacilius mesentericus

Kemerahan Serratia marcescens
Kehijauan Rhizopus nigncans
Penicillium glaucum
Telur Pembusukan Clostridium sporogenes

Berjamur Penicillium glaucum
CIadosporium herbarum
Makanan kaleng Pembusukan Clostridium botulinum

Pembentukan gas, asam, Clostridium
dan HjS thermosaccharolyticum
Clostridium nigrificans
Bacilius sp.
PENGAWETAN BAHAN MAKANAN

P a d a p r i n s i p n y a , u p a y a p e n g a w e t a n b a h a n m a k a n a n d i d a s a r k a n p a d a (a) p e n c e g a h a n
a t a u p e n g h i l a n g a n k o n t a m i n a s i m i k r o o r g a n i s m e , (b) p e n g h a m b a t a n p e r t u m b u h a n d a n
metabolisme mikroorganisme, dan (c) pembunuhan mikroorganisme kontaminan.
P e m i l i h a n m e t o d e pengawetan m a k a n a n harus m e m p e r h a t i k a n j e n i s d a n sifat m a -
k a n a n y a n g akan d i a w e t k a n dan j u g a jenis spora bakteri y a n g tahan terhadap pema-
nasan y a n g k e m u n g k i n a n terdapat d a l a m bahan m a k a n a n tersebut.
Penanganan bahan m a k a n a n secara aseptis sangat penting d i l a k u k a n agar m a k a n a n
tidak tercemar serta m e n g u r a n g i kerusakan m a k a n a n dan m e m p e r k e c i l k e m u n g k i n a n
kontaminasi oleh bakteri patogen.
Pengepakan, pengemasan, d a n pengalengan makanan yang telah diolah harus
m e m e n u h i C a r a P r o d u k s i M a k a n a n y a n g B a i k agar m a k a n a n terhindar dari m i k r o -
organisme y a n g dapat merusak m a k a n a n.
S e l a i n cara p e n a n g a n a n y a n g b a i k d a n aseptis, b e b e r a p a cara p e n g a w e t a n b a h a n
m a k a n a n berikut dapat dilakukan.
252 Bubu Ajdr Mikrobiologi: P a ndua n Mahasiswa Farmasi da n Kedoktera n
Pemanasan
Pemanasan pada s u h u t i n g g i dapat d i l a k u k a n u n t u k m e n g o n t r o l p e r t u m b u h a n m i k r o -
o r g a n i s m e d a l a m m a k a n a n dan telah d i k e n a l sejak z a m a n d u l u . S a m p a i saat i n i , peng-
g u n a a n s u h u t i n g g i m a s i h b a n y a k d i g u n a k a n k a r e n a cepat, m u r a h , dan tepat sasaran.
M e t o d e pemanasan y a n g dikembangkan penggunaannya pada m a k a n a n adalah
pasteurisasi. M e t o d e i n i p e r t a m a k a l i d i k e m b a n g k a n o l e h L o u i s P a s t e u r u n t u k m e n -
cegah p e m b u s u k a n pada m i n u m a n anggur. M i n u m a n y a n g b a i k d i h a s i l k a n dari g u l a
anggur y a n g diubah menjadi alkohol. Jika bakteri atau j a m u r t u m b u h d i dalam m i -
numan itu,alkoholyang diproduksi akan mengalami metabolisme yang menyebabkan
rasa y a n g tidak enak. Pasteur m e n e m u k a n b a h w a pemanasan y a n g t e r k e n d a l i dapat
m e m u s n a h k a n m i k r o o r g a n i s m e penyebab p e m b u s u k a n tanpa m e n g u b a h rasa m i -
n u m a n anggur tersebut. Pasteurisasi tidak mensterilka n z a t atau bahan, tetapi dapat
m e n g u r a n g i sebagian besar m i k r o o r g a n i s m e y a n g sensitif pada suhu tinggi , termasuk
m i k r o o r g a n i s m e y a n g p a t o g e n , a n t a r a l a i n Salmonella, Mycobacterium, d a n Brucella.
M e t o d e p a s t e u r i s a s i m u l a - m u l a d i l a k u k a n p a d a s u h u 62°C s e l a m a 3 0 m e n i t . N a m u n ,
sejalan dengan b e r k e m b a n g n y a pengetahuan tentang sifat-sifat m i k r o o r g a n i s m e , telah
d i t e m u k a n j e n i s m i k r o o r g a n i s m e y a n g lebih resisten terhadap pemanasan. O l e h sebab
itu, suhu pasteurisasi ditetapkan berdasarkan w a k t u k e m a t i a n t e r m a l jenis m i k r o o r -
ganisme patogen y a n g paling resisten.
Pemanasan susu pada suhu y a n g terlampau tinggi tidak d i k e h e n d a k i karena dapat
m e r u s a k k o m p o n e n y a n g t e r k a n d u n g d a l a m s u s u t e r s e b u t . S e l a m a i n i , Mycobacterium
tuberculosis d i p e r k i r a k a n m e r u p a k a n m i k r o o r g a n i s m e d a l a m s u s u m e n t a h y a n g p a -
l i n g r e s i s t e n t e r h a d a p p a n a s . O l e h k a r e n a i t u , s u h u p a s t e u r i s a s i s u s u a d a l a h 61,7°C
s e l a m a 3 0 m e n i t ; b a k t e r i Mycobacterium tuberculosis t e r b u n u h p a d a s u h u 60°C
s e l a m a 1 5 m e n i t . N a m u n , r i k e t s i a k e m u d i a n d i t e m u k a n d a l a m s u s u , y a i t u Coxiella
burnetii. B a k t e r i i n i l e b i h r e s i s t e n t e r h a d a p p a n a s d a r i p a d a Mycobacterium tuberculo-
sis. D e n g a n d e m i k i a n , s u h u p a s t e u r i s a s i s u s u d i n a i k k a n m e n j a d i 6 2 , 8 ' ' C s e l a m a 3 0
menit.
Saat ini, industri p r o d u k s i susu m e n g g u n a k a n salah satu m e t o d e pasteurisasi y a n g
telah dikembangkan berikut.
1. Metode Suhu T i n g g i - W a k t u Singkat (High TemperatureShort Time, HTST)
V M e t o d e i n i menggunakan peralatan y a n g m a m p u m e m a n a s k a n susu pada suhu
71°C s e l a m a 1 5 d e t i k . P e n g a t u r a n s u h u d a n w a k t u b e r g a n t u n g p a d a s i f a t b a h a n
^ y a n g a k a n d i a w e t k a n . Sebagai c o n t o h , es k r i m y a n g m e m i l i k i k a d a r l e m a k y a n g
• l e b i h t i n g g i m e m e r l u k a n s u h u 82°C s e l a m a 2 0 d e t i k .
2 . Metode Suhu R e n d a h - W a k t u L a m a ( L o w T e m p e r a t u r e - H o l d i n g , LTH)
P a d a p r o s e s i n i , s u s u d i p a n a s k a n p a d a s u h u 6 1 , 7 - 62,8°C s e l a m a 3 0 m e n i t .
3 . Metode Pemanasan Suhu U l t r a - r m g g i ( U i t r a - H i g h Temperature, UHT)
M e t o d e i n i dapat m e m b u a t m a k a n a n atau m i n u m a n terbebas dari m i k r o o r g a n i s m e
• tanpa m e m e n g a r u h i rasa dan n i l a i g i z i m a k a n a n atau m i n u m a n tersebut. Beberapa
p r o d u k , antara lain susu, p r o d u k susu, es k r i m , j u s , dan m i n u m a n l a i n n y a , dapat
diproses m e n g g u n a k a n cara i n i , y a i t u dengan m e m a n a s k a n p r o d u k pada s u h u
1 4 0 - 1 5 0 " C selama 1-2 detik. Selanjutnya , p r o d u k d i p i n d a h k a n secara cepat k e

d a l a m ruan g pendingin u n t u k d i d i n g i n k a n . P r o d u k k e m a s a n i n i dapat d i s i m p a n
dengan aman dalam suhu kamar untuk jangka w a k t u yan g cukup lama.
Peralatan y a n g digunakan dalam masing-masing metode pasteurisasi tersebut harus
dirancang dan d i o p e r a s i k a n s e d e m i k i a n rupa sehingga setiap p e r t i k e l susu y a n g dipa-
naskan dapat dipertahankan pada suhu tersebut selama w a k t u y a n g telah ditetapkan.
P r o d u k y a n g t e l a h d i p r o s e s h a r u s d i s i m p a n p a d a s u h u 10°C a t a u l e b i h r e n d a h u n t u k
m e n c e g a h p e r t u m b u h a n m i k r o o r g a n i s m e y a n g bertahan h i d u p s e l a m a proses pas-
teurisasi.
Pengalengan
Pengalengan m e r u p a k a n m e t o d e dasar sterilisasi bahan m a k a n a n y a n g telah l a m a
digunakan dalam pengolahan makanan. Pada tahun 1810, seorang Perancis bernama
N i c h o l a s A p p e r t t e l a h m e n e r b i t k a n L ' Art de Conserver, y a n g b e r i s i u r a i a n h a s i l
risetnya d a l a m pengawetan m a k a n a n . Pada tahun y a n g sama, Peter D u r a n d dianuge-
rahi paten Inggris u n t u k uraian mengenai pemanfaatan w a d a h t i m a h ( k a l e n g ) d a l a m
pengawetan makanan. Cara kerja pengalengan makanan menggunakan prinsip auto-
k l a f U a p b e r t e k a n a n d e n g a n s u h u d i atas lOO^C d i d a l a m r u a n g y a n g j e n u h d e n g a n
uap air m e r u p a k a n m e t o d e y a n g paling e f e k t i f karena dapat m e m a t i k a n seluruh sel
vegetatif dan spora bakteri. T e k n i k pengawetan m a k a n a n dengan pengalengan perlu
m e m p e r t i m b a n g k a n beberapa faktor, antara lain resistensi m i k r o o r g a n i s m e terhadap
panas, laju penembusan panas ke dalam bahan m a k a n a n y a n g m e m p u n y a i konsistensi
y a n g berbeda-beda, dan u k u r a n w a d a h tempat m a k a n a n tersebut d i k e m a s . B a k t e r i ter-
p e n t i n g y a n g h a r u s d i m u s n a h k a n d a r i m a k a n a n y a n g d i k a l e n g k a n a d a l a h Clostridium
botulinum, y a i t u b a k t e r i a n a e r o b y a n g m a m p u m e n g h a s i l k a n t o k s i n y a n g s a n g a t
mematikan.
K o n s e p penting y a n g perlu diperhatikan d a l a m proses pengalengan m a k a n a n ada-
lah j i k a suhu y a n g digunakan lebih tinggi, w a k t u y a n g d i b u t u h k a n u n t u k m e m b u n u h
seluruh m i k r o o r g a n i s m e lebih singkat. S e m a k i n tinggi konsentrasi bakteri, semakin
lama proses pemanasan y a n g dibutuhkan u n t u k m e n g h i l a n g k a n seluruh m i k r o o r g a -
nisme.
Penggunaan suhu rendah

Seperti telah d i k e t a h u i , p e r t u m b u h an bakteri sangat bergantung pada suhu o p t i m a l
p e r t u m b u h a n bakteri. P e r t u m b u h a n bakteri d a n aktivitas m e t a b o l i s m e bakteri dapat
dihambat pada suhu 0 " C atau lebih rendah. Penggunaan suhu rendah u n t u k peng-
a w e t a n m a k a n a n dapat berupa pendinginan atau p e m b e k u a n .
Pendinginan
P e n g a w e t a n m a k a n a n d e n g a n cara p e n d i n g i n a n dapat m e n u r u n k a n p e r t u m b u h a n
m i k r o o r g a n i s m e . B a n y a k bakteri, t e r m a s u k bakteri patogen, tidak dapat m e m p e r b a -
nyak diri dalam suhu rendah. Aktivitas e n z i m akan berhenti pada suhu rendah. O l e h
ipii
k a r e n a i t u , p e n y i m p a n a n m a k a n a n pada s u h u rendah sangat d i p e r l u k a n d a l a m proses

pengawetan makanan. Kendati begitu, perlu diperhatikan bahw a beberapa jenis bak-
t e r i d a p a t t u m b u h p a d a s u h u d i n g i n ( s e k i t a r 4°C), m i s a l n y a Pseudomonas.
Pembekuan
Proses p e m b e k u a n sering kali m e n j a di metode p i l i h an u n t u k pengawetan m a k a n a n
karena dapat m e n g h e n t i k a n p e r t u m b u h a n m i k r o o r g a n i s m e . P e m b e n t u k a n kristal es
dapat m e n y e b a b k a n kerusaka n sel m i k r o o r g a n i s m e . S e l a i n i t u , p e m b e k u a n m e n g h e n -
tikan p e r t u m b u h a n bakteri karena air berada dalam bentuk padatan sehingga tidak
m e n d u k u n g reaksi b i o l o g i s d i d a l a m sel bakteri.
Dehidrasi
D e h i d r a s i a d a l a h proses p e n i a d a a n air. Proses i n i dapat d i l a k u k a n d e n g a n b e b e r a ^
cara, seperti p e n g e r i n g a n d e n g an sinar m a t a h a r i , pemanasan, atau p e n g g u n a a n g u l a
atau garam dengan kadar tinggi.
Pengeringan m a k a n a n dengan m e n j e m u r m a k a n a n d ib a w a h sinar matahari atau
dengan pemanasan buatan d i d a l a m o v e n besar m e r u p a k a n cara y a n g e f e k t i f u n t u k
menghentikan pertumbuhan mikroorganisme.
L i o f i l i s a s i a t a u b e k u - k e r i n g (freeze-drying) t e l a h d i g u n a k a n s e c a r a l u a s u n t u k
pengawetan k o p i , susu, daging, dan sayuran. Pada proses ini, m a k a n a n harus d i b e k u k a n
terlebih dahulu sebelum dikeringkan dalam ruang v a k u m . Kualitas bahan makanan
h a s i l l i o f i l i s a s i l e b i h b a i k d i b a n d i n g k a n h a s i l d e h i d r a s i atau p e m b e k u a n saja k a r e n a
massa y a n g didapat lebih ringan dan lebih stabil.
M e s k i p u n pengeringan dapat m e n g h e n t i k a n pertumbuha n m i k r o o r g a n i s m e , proses
ini tidak m e n j a m i n m a k a n a n bebas dari m i k r o o r g a n i s m e karena dehidrasi h a n y a
m a m p u menghambat pertumbuhan.
Tekanan osmotik
M e n g e r i n g k a n m a k a n a n atau m e n a m b a h k a n gula atau garam d a l a m konsentrasi t i n
dapat m e n g h a m b a t p e r t u m b u h a n m i k r o o r g a n i s m e dengan m e n u r u n k a n suplai k e l e m -
bapan y a n g dibutuhkan. Selama beberapa tahun, garam d a n gula telah digunakan
sebagai bahan p e n g a w e t m a k a n a n . K e d u a bahan i n i m e n u r u n k a n a k t i v i t a s air d a l a m
m a k a n a n d i b a w a h batas y a n g d i p e r l u k a n u n t u k p e r t u m b u h a n sebagian besar m i k r o -
organisme. Perbedaan tekanan o s m o t i k l i n g k u n g a n di luar sel m i k r o o r g a n i s m e dapat
m e n y e b a b k a n p l a s m o l i s i s d a n k e m a t i a n sel m i k r o o r g a n i s m e .
P e n a m b a h a n g u l a dan g a r a m akan m e n y e b a b k a n air keluar dari sel bakteri karena
adanya perbedaan tekanan o s m o t i k antara l i n g k u n g a n di luar sel dan cairan d i d a l a m
sel bakteri. D e n g a n d e m i k i a n , suasana l i n g k u n g a n a k a n m e n y e b a b k a n sel m e n g a l a m i
dehidrasi sehmgga sel tidak dapat t u m b u h . Konsentrasi garam dan gula y a n g tinggi
dapat d i m a n f a a t k a n u n t u k m e n g a w e t k a n m a k a n a n . Sebagai contoh, pengawetan buah
dalam bentuk selai dan j e l l y dengan m e n a m b a h k a n gula dan pengawetan ikan atau
daging dengan m e n a m b a h k a n g a r a m agar dapat d i s i m p a n lebih l a m a . N a m u n d e - j
I.
m i k i a n , perlu diperhatikan b a h w a beberapa j e n i s bakteri dapat hidup d a l a m k o n d i s i

kadar garam yang tinggi.
P E R A N A N M I K R O O R G A N I S M E DALAM P R O D U K S I
BAHAN MAKANAN
Pemanfaatan m i k r o o r g a n i s m e dalam produksi bahan makanan d i l a k u k an dengan be-
berapa cara, antara lain m e m a n f a a t k a n aktivitas m e t a b o l i s m e spesifik m i k r o o r g a n i s m e
y a n g dapat m e n g u b a h s e n y a w a tertentu m e n g h a s i l k a n suatu p r o d u k y a n g l e b i h ber-
manfaat dan m e m p u n y a i nilai gizi y a n g lebih tinggi. Selain itu, m i k r o o r g a n i s m e dapat
m e n g h a s i l k a n produk m e t a b o l i k y a n g m e m p u n y a i nilai gizi tinggi atau p r o d u k meta-
b o l i k y a n g dapat m e m p e r k a y a cita rasa m a k a n a n . B e r b a g a i u p a y a telah d i l a k u k a n
untuk memperoleh beberapa jenis enzi m penting yang dibentuk oleh mikroorganisme.
E n z i m - e n z i m tersebut dapat d i m a n f a a t k a n u n t u k berbagai tujuan , t e r m a s u k u n t u k
m e n i n g k a t k a n m u t u p r o d u k m a k a n a n dan m i n u m a n .
Beberapa jenis produk makanan dan m i n u m a n yang memanfaatkan mikroorga-
nisme dijelaskan berikut ini.
Produk makanan dan minuman fermentasi

P e n g o l a h a n bahan m a k a n a n secara fermentasi dengan m e m a n f a a t k a n m i k r o o r g a n i s m e
telah lama dilakukan. Penggunaan fermentasi dalam pengolahan makanan diawali
dengan pembuatan bir sekitar 6 0 0 0 tahun S M dan pembuatan roti dengan bantuan ragi
pada 4 0 0 0 tahun S M . Selanjutnya, pembuatan kecap dan taoco d i m u l a i sejak tahun
722 S M . Pada abad ke-17, produksi hasil fermentasi m u l a i d i l a k u k a n , antara lain
p e m b u a t a n a s a m a s e t a t m e n g g u n a k a n Acetobacter d a n a n g g u r s e b a g a i b a h a n d a s a r .
Pada tahun 1817, m u l a i diproduksi e n z i m dari t u m b u h a n dan j a r i n g a n h e w a n y a n g
dapat m e m e c a h pati m e n j a d i gula maltosa. Pada tahun 1860, d i t e m u k a n suatu e n z i m
dari ragi y a n g dapat mengubah sukrosa menjadi glukosa dan fruktosa.
F e r m e n t a s i adalah proses perubahan k i m i a suatu substrat o r g a n i k m e n j a d i suatu
produk tertentu melalui aktivitas enzim yang dihasilkan oleh mikroorganisme.
Pada saat i n i , berbagai j e n i s m a k a n a n dan m i n u m a n hasil f e r m e n t a s i t e l a h b a n y a k
dimanfaatkan u n t u k m e m e n u h i nilai gizi masyarakat dan banyak beredar di pasaran,
bahkan d i m a s u k k a n d a l a m m e n u m a k a n a n sehari-hari karena dapat dibuat dengan
cara y a n g m u d a h , praktis, m u r a h , dan a m a n . Beberapa p r o d u k hasil fermentasi dapat
dilihat pada Tabel 16.3.
Berdasarkan jenis bahan baku pangan yang digunakan, produk fermentasi terdiri
atas beberapa m a c a m .
Produk fermentasi kacang-kacangan

K e c a p m e r u p a k a n salah satu c o n t o h hasil fermentas i k a c a n g - k a c a n g a n y a n g terbuat
d a r i k e d e l a i d e n g a n b a n t u a n Aspergilius sp. d a n Rhizopus sp. P e m b u a t a n k e c a p m e m -
butuhkan bahan-bahan y a n g sederhana, yaitu kedelai dan larutan garam. Kedelai y a n g
oleh M ikroorga nisme

Ba ha n ba ku pa nga n M ikroorga nisme P roduk fe rme nta si
Susu Streptocx)ccus sp. Keju
Leuconostoc sp.
Penicillium roqueforti
Susu Lactobacillus bulgaricus Yoghurt
Streptococcus ttiermophilus Krim asam
Streptococcus lactis
Daging Pediococcus cerevisiae Sosis
Ikan kecil Bacilius sp. haiofilik Saus ikan
Buah cokelat Candida krusei Biji cokelat
Buah kopi Erwinia dissolvens Biji kopi
Kubis, sayuran Lactobacillus sp. Kimchi (Korea)
Kedelai Aspergilius oryzae Kecap
Aspergilius soyae
Kedelai Rhizopus oligosporus Tempe
Rhizopus oryzae
Kedelai hitam Aspergilius oryzae Taoco
Rhizopus oligosporus
Kedelai Bacilius natto Natto (Jepang)
Kedelai Aspergilius oryzae Miso (Jepang)
Zygosaccharomyces rouxii
Sawi hijau Lactobacillus sp. Acar
Tepung terigu Saccharomyces cerevisiae Roti

Bungkil kacang Neurospora sp. Oncom merah
Rhizopus sp. Oncom putih
Beras Monascus purpureus Angkak/nasi merah
Beras ketan Amylomyces rouxii Tape ketan
Saccharomyces cerevisiae
Singkong Saccharomyces cerevisiae Tape singkong
Susu kuda.domba Lactobacillus bulgaricus Kumiss (Rusia)
Lactobacillus leichmannii
Nasi dan kacang hijau Leuconostoc mesenteroides Idll (India)
Torulopsis candida
sudah dibersihkan m u l a - m u l a direbus d a n direndam, k e m u d i a n dicuci d a n dikupas

untuk difermentasi menjadi semacam tempe kedelai. Tempe kedelai ini k e m u d i a n di-
keringkan d a n direndam dalam larutan garam. G a r a m merupakan senyawa yang
selektif terhadap p e r t u m b u h a n m i k r o b a , hany a m i k r o b a tahan g a r a m y a n g dapat t u m -
buh dengan baik. D a l a m proses pembuatan kecap, m i k r o b a tahan g a r a m y a n g dapat
b e r p e r a n a d a l a h Zygosaccharomyces d a n Lactobacillus.
Produk fermentasi kedelai lainnya yang kita kenal adalah tempe dan taoco. T e m p e
m e r u p a k a n salah satu p r o d u k tradisional Indonesia y a n g m e r u p a k a n s u m b e r protein
nabati. P e m b u a t a n temp e pada dasarnya m e l a l u i beberapa tahap, yait u perendaman,
perebusan, pengupasan, d a n proses fermentasi dengan p e n a m b a h a n ragi tempe.
M i k r o o r g a n i s m e y a n g s e r i n g d i g u n a k a n d a l a m p e m b u a t a n t e m p e a d a l a h Rhizopus
oligosporus, Rhizopus oryzae, d a n Klebsiella, B e b e r a p a j e n i s b a k t e r i l a i n j u g a d a p a t
b e r p e r a n d a l a m p r o s e s f e r m e n t a s i t e m p e , a n t a r a l a i n Bacilius sp., Lactobacillus sp.,
Pediococcus sp., Streptococcus s p . , d a n b e b e r a p a b a k t e r i p e n g h a s i l v i t a m i n B , , .
N a m u n d e m i k i a n , k e b e r a d a a n b e b e r a p a b a k t e r i s e p e r t i Bacilius sp t i d a k d i k e h e n d a k i
karena m e r u p a k a n bakteri k o n t a m i n a n y a n g dapat m e n y e b a b k a n gangguan pada pen-
cernaan.
Produk fermentasi susu

P r o d u k fermentasi susu y a n g paling kita kenal adalah y o g h u r t dan keju. Pembuatan
y o g h u r t m e n g g u n a k a n b a h a n d a s a r s u s u d a n b a k t e r i a s a m l a k t a t , y a i t u Lactobacillus
bulgaricus d a n Streptococcus lactis. P e m b u a t a n k e j u m e n g g u n a k a n b a k t e r i a s a m
l a k t a t , s e p e r t i Streptococcus lactis, Streptococcus thermophilus, Lactobacillus helve-
ticus, Lactobacillus bulgaricus, d a n Lactobacillus lactis.
D e n g a n proses f e r m e n t a s i , rasa y o g h u r t m e n j a d i asam k a r e n a terjadi perubaha n
l a k t o s a m e n j a d i a s a m laktat. A p a b i l a t i d a k d i i n g i n k a n rasa y a n g t e r l a l u a s a m , p e m a n i s
(gula atau sirup) dapat d i t a m b a h k a n . Selain itu, dapat d i t a m b a h k a n bahan perasa
buatan lain y a n g berasal d a r i rasa b u a h y a n g d i k e h e n d a k i .
Y o g h u r t m e r u p a k a n p r o d u k fermentasi y a n g b a n y a k m e n g a n d u n g zat g i z i . Proses
fermentasi y a n g terjadi pada pembuatan y o g h u r t m e n i n g k a t k a n nilai gizi produk i n i
sehingga lebih t i n g g i daripada nilai gizi susu sebagai bahan b a k u . Y o g h u r t m e n g a n -
d u n g b e b e r a p a j e n i s v i t a m i n , k h u s u s n y a v i t a m i n B , d a n B,„dan b e b e r a p a j e n i s a s a m
a m i n o y a n g berguna bagi kesehatan.
Selain m e n g a n d u n g beberapa jenis vitamin , yoghurt berkhasiat m e m p r o d u k s i zat
y a n g d a p a t m e n g h a m b a t p o p u l a s i m i k r o b a e n t e r i k y a n g m e r u g i k a n . Lactobacillus
bulgaricus m e r u p a k a n b a k t e r i a s a m l a k t a t y a n g m e n g h a s i l k a n z a t y a n g d i s e b u t bul-
garikan. Z a t i n i d a p a t m e n g h a m b a t p e r t u m b u h a n b a k t e r i Staphylococcus aureus, Shi-
gella dysenteriae, Salmonella typhi, d a n Clostridium botulinum.
Produk fermentasi beras, ketan, dan singkong

Proses f e r m e n t a s i beras atau s i n g k o n g m e n g g u n a k a n ragi tape d a n m i k r o b a asam
laktat. B e b e r a p a p r o d u k hasil f e r m e n t a s i y a n g kita k e n a l adalah tape s i n g k o n g , tape
ketan, b r e m ( B a l i ) , badek ( J a w a T e n g a h ) , sake (Jepang), d a n b r e m padat ( J a w a
Timur).
Proses f e r m e n t a s i d a l a m p e m b u a t a n tape dan b r e m sering k a l i m e n g g u n a k a n dua
j e n i s b i a k a n m i k r o b a y a n g berbeda. M i k r o o r g a n i s m e y a n g p a l i n g berperan d a l a m
f e r m e n t a s i t a p e a d a l a h Amylomyces rouxii, Endomycopsis hurtonii, d a n Saccharomy-
ces cerevisiae.
258 Buku Ajar Mikrobiologi: P a ndua n Mahasiswa Farmasi da n Ke dokte ran
Produk fermentasi buah dan sayuran

Beberapa jenis p r o d u k fermentasi buah dan sayuran antara lain anggur, sake dari tebu,
a c a r b u a h , a c a r s a y u r a n , a s i n a n , d a n nata de coco.
Salah satu produk fermentasi buah dan sayuran yang dibuat dalam skala industri
a d a l a h nata de coco. Nata de coco m e r u p a k a n h a s i l f e r m e n t a s i a i r k e l a p a d e n g a n b a n -
t u a n Acetobacter xylinum. B a k t e r i i n i s e c a r a a l a m i d i t e m u k a n p a d a t a n a m a n b e r g u l a
y a n g telah m e n g a l a m i fermentasi atau pada sayuran dan buah-buahan bergula y a n g
sudah m e m b u s u k .
G u l a pada a i r k e l a p a d i u b a h m e n j a d i a s a m asetat dan b e n a n g - b e n a n g selulosa.
S u a t u m a s s a y a n g p a d a t d e n g a n k e t e b a l a n t e r t e n t u k e m u d i a n a k a n t e r b e n t u k . Nata de
coco m e r u p a k a n s e l u l o s a y a n g b e r b e n t u k p a d a t , k e n y a l , b e r w a r n a p u t i h , d a n m a n i s .
P r o d u k f e r m e n t a s i i n i dapat d i k o n s u m s i sebagai m i n i m i a n y a n g k a y a a k a n serat.
P r o d u k fermentasi buah d a n sayuran l a i n n y a y a n g telah d i k e n a l adalah acar
(pickle). A c a r b i a s a n y a d i b u a t d a r i m e n t i m u n , t o m a t , b u n c i s , l o b a k , d a n s a y u r a n .
Buah, m i s a h i y a m e n t i m u n , y a n g m a s i h m u d a dicuci bersih dan d i m a s u k k a n ke dalam
wadah tertentu y a n g berisi larutan fermentasi yang mengandung garam 8 - 16%, gula
1 % , d a n b a k t e r i a s a m l a k t a t Leuconostoc mesenteroides, Lactobacillus brevis, d a n
Lactobacillus plantarum. S e l a m a p r o s e s f e r m e n t a s i b e r l a n g s u n g , g a r a m d i t a m b a h k a n
secara bertahap dengan interval satu m i n g g u s a m p a i kadar larutan g a r a m a k h i r
mencapai 16%. Fermentasi biasanya berlangsung 6 - 9 m m g g u . Beberapa bakteri
k o n t a m i n a n y a n g berasal dari bahan dasar biasanya a k a n t u m b u h l e b i h d a h u l u ,
misdLlnysiPseudofnonas.Akm t e t a p i , b a k t e r i t e r s e b u t a k a n d i k a l a h k a n p e r t u m b u h a n n y a
o l e h b a k t e r i a s a m l a k t a t Leuconostoc mesenteroides. S e l a n j u t n y a , b a k t e r i Lactobacillus
brevis d a n Lactobacillus plantarum y a n g l e b i h t a h a n t e r h a d a p a s a m d a n g a r a m a k a n
t u m b u h dan berperan d a l a m m e n y e l e s a i k a n proses fermentasi. Setelah proses fer-
m e n t a s i selesai, acar m e n t i m u n tersebut d i m a s u k k a n k e d a l a m b o t o l atau k a l e n g dan
disterilkan.
Produk fermentasi sereal

Salah satu p r o d u k fermentasi sereal adalah roti. R o t i adalah m a k a n a n y a n g dibuat dari
t e r i g u y a n g d i f e r m e n t a s i m e n g g u n a k a n r a g i Saccharomyces cerevisiae. D a l a m p e m -
buatan roti, jeni s terigu y a n g digunakan adalah tepung terigu y a n g bersifat sangat
elastis d a n k u a t u n t u k m e n a h a n p e n g e m b a n g a n a d o n a n a k i b a t t e r b e n t u k n y a gas k a r -
bon dioksida (CO^). Pengembangan v o l u m e adonan mengakibatkan roti yang dioven
akan mekar. H a l i n i terjadi karena struktur berongga y a n g terbentuk d i dalam roti.
S e l a m a p r o s e s f e r m e n t a s i , d i h a s i l k a n gas d a n a l k o h o l . J i k a k a d a r a l k o h o l t e l a h m e n -
c a p a i 4 - 5 % , a k t i v i t a s Saccharomyces cerevisiae a k a n b e r h e n t i . A l k o h o l y a n g d i h a s i l -
k a n s e l a m a proses f e r m e n t a s i a k a n m e n g u a p pada saat p e m a n g g a n g a n a d o n a n r o t i
Protein sel tunggal (sing/e celi protein, SCP)

Pencarian sumber bahan makanan baru terus-menerus dikembangkan karena semakin
bertambahnya populasi dunia dan semakin terbatasnya sumber m a k a n a n bagi m a n u -
Bab 16 - Peranan Mikroorganisme 259|
sia. D e n g a n p e r k e m b a n g a n b i o t e k n o l o g i , k i t a d ap at m e m a n f a a t k a n m i k r o o r g a n i s m e
t e r t e n t u secar a l uas u n t u k m e m e n u h i k e b u t u h a n m a n u s i a , t e r m a s u k b ah an p an g an .
K a r e n a m e m i l i k i k e m a m p u a n m e m p e r b a n y a k se l n y a d a l a m w a k t u si n g k at , m i k r o o r -
g a n i s m e d i p e r k i r a k a n d ap at m e n j a d i su at u w a h a n a y a n g u n g g u l u n t u k m e m p r o d u k s i
s e n y a w a t e r t e n t u y a n g d i b u t u h k a n o l e h m a n u si a . Be r b a g a i j e n i s s e n y a w a p e n t i n g ,
an t ar a l ai n p r o t e i n , k a r b o h i d r a t , l e m a k , v i t a m i n , d an m i n e r a l , d ap at d i h a si l k a n o l e h
m i k r o o r g a n i s m e m e l a l u i su at u p r o ses r e k ay asa, b ai k secar a k i m i a m a u p u n d e n g an
m em an f aat k an t ek n i k -t ek n i kb io t ekno l o gi.
Se l m i k r o o r g a n i s m e y a n g m a m p u m e m p r o d u k s i su at u s e n y a w a y a n g p e n t i n g
seb ag ai b ah an p an g an d an u n t u k k e se h at an m a n u s i a d i k e m b a n g b i a k k a n d a l a m j u m l a h
y a n g besar . D e n g a n d e m i k i a n , s e n y a w a y a n g d i i n g i n k a n d ap at d i p e r o l e h d a l a m w a k t u
si n g k at , b ai k u n t u k s u p l e m e n m a k a n a n a t a u p u n seb ag ai s u m b e r m a k a n a n a l t e r n a t i f
Sal ah sat u c o n t o h p e n g e m b a n g a n y a n g t e l ah d i l a k u k a n ad al ah p r o t e i n se l t u n g g a l
{singlc celI protein, SCP) .
Pr o t e i n sel t u n g g a l ad al ah b ah an m a k a n a n y a n g m e m i l i k i k a n d u n g a n p r o t e i n y a n g
t i n g g i , b e r u p a t o t a l b i o m a ssa sel m i k r o o r g a n i s m e at au p r o t e i n y a n g d i i so l asi d ar i sel
m i k r o o r g a n i s m e . Pr o t e i n se l t u n g g a l d i k e m b a n g k a n u n t u k m e n j a d i s u m b e r p r o t e i n
a l t e r n a t i f k a r e n a s e m a k i n m e n i n g k a t n y a k e b u t u h a n p r o t e i n , se d a n g k a n s u m b e r p r o t e i n
y a n g d i p e r o l e h d ar i l ah an secar a t r a d i si o n al s e m a k i n b e r k u r a n g .
SCP m e r u p a k a n sal ah sat u u p a y a m e m a n f a a t k a n k e m a m p u a n m i k r o o r g a n i s m e
u n t u k b e r k e m b a n g b i ak d e n g an san g at cep at se h i n g g a d ap at m e m p r o d u k s i p r o t e i n
d a l a m w a k t u y a n g l e b i h si n g k at d i b a n d i n g k a n d e n g an p r o d u k s i p r o t e i n o l e h h e w a n
at au t u m b u h a n . Pr o d u k s i p r o t e i n sel t u n g g a l d ap at d i l a k u k a n d e n g a n car a m e m b i a k -
k a n b e r b ag ai j e n i s b a k t e r i , al g a, k ap an g , d a n k h a m i r d a l a m b i a k a n sk al a besar ,
k e m u d i a n d i k e r i n g k a n u n t u k d i p r o se s seb ag ai b ah an p an g an y a n g k a y a p r o t e i n . M e s -
k i p u n p e m b i a k a n m i k r o o r g a n i s m e d a l a m p r o ses p r o d u k si S CP t e r u t a m a d i l a k u k a n
u n t u k m e m p e r o l e h k a n d u n g a n p r o t e i n , sel m i k r o o r g a n i s m e j u g a m e n g a n d u n g k a r b o -
h i d r at , l e m a k , v i t a m i n , d an m i n e r a l . I st i l ah p r o t e i n sel t u n g g a l d i g u n a k a n u n t u k m e m -
b e d ak an d ar i p r o t e i n y a n g b er asal d ar i t u m b u h a n d an h e w a n m u l t i se l u l e r . Pr o t e i n
m i k r o b a d i h a r a p k a n d ap at b e r p e r an p e n t i n g d a l a m m e n c u k u p i k e b u t u h a n p r o t e i n
d u n i a se h i n g g a d ap at m e n g u r a n g i k e b u t u h a n p an g an y a n g b er asal d ar i k e d e l a i , i k a n ,
d an d ag i n g .
P E R A N A N M I K R O O R G A N I S M E DALAM P R O D U K S I
SEDIAAN FARMASI
Se b a g a i m a n a t e l a h d i u r a i k a n , p e r an m i k r o o r g a n i s m e d a l a m i n d u st r i m a k a n a n d a n
m i n u m a n san g at p e n t i n g k ar e n a m i k r o o r g a n i s m e m a m p u m e r o m b a k b ah an b a k u at au
su b st r at t e r t e n t u m e n j a d i su at u p r o d u k b ar u . Be r d a sa r k a n f e n o m e n a t e r se b u t , k i t a
ak an m e m b a h a s b e b e r ap a p e r an m i k r o o r g a n i s m e d a l a m m e n g h a s i l k a n p r o d u k - p r o d u k
y a n g d ap at b e r m a n f a a t d a l a m b i d a n g f a r m a si .
B e r i k u t i n i d i u r a i k a n b eb er ap a j e n i s sed i aan f a r m a s i y a n g d i h a si l k a n o l e h m i k r o -
o r g a n i sm e .
Antibiotik
Era m o d e m penggunaan antibiotik untuk mengatasi penyakit mfeksi d i m u l a i ketika
A l e x a n d e r F l e m i n g pada tahun 1928 m e n e m u k a n penisilin y a n g dihasilkan o l e h
Penicillium notatum.
Pada tahun 1940, sebuah k e l o m p o k peneliti yang diketuai oleh H o w a r d Flory dan
E m s t C h a i n dari Universitas O x f o r d berhasil m e l a k u k a n u j i k l i n i k pertama u n t u k
m e m b u k t i k a n efektivitas penisilin dalam pengobatan penyakit infeksi. Para i l m u w a n
Inggris i n i kemudian melakukan penelitian yang intensif bersama i l m u w a n A m e r i k a
S e r i k a t s e h i n g g a d i t e m u k a n s u a t u g a l u r Penicillium y a n g l e b i h p r o d u k t i f u n t u k p r o -
d u k s i s k a l a i n d u s t r i . S e j a k saat i t u , berbagai u p a y a p e n c a r i a n a n t i b i o t i k b a r u t e l a h
dilakukan dan beberapa jenis antibiotik baru telah ditemukan dan diproduksi dalam
skala industri.
Sebetuhiya, antibiotik tidak terlalu sulit ditemukan, tetapi sangat sedikit y a n g
dapat d i p r o d u k s i d a l a m skala besar dan dapat digunaka n d a l a m pengobatan. D a l a m
T a b e l 16.4, dapat d i l i h a t b a h w a sebagian besar a n t i b i o t i k y a n g d i p r o d u k s i saat i n i
d i d a p a t k a n d a r i g o l o n g a n Streptomyces y a n g u m u m n y a h i d u p d i d a l a m t a n a h . H a n y a
s e d i k i t a n t i b i o t i k y a n g d i h a s i l k a n o l e h Bacilius d a n s e l e b i h n y a d i h a s i l k a n o l e h j a m u r ,
t e r u t a m a g e n u s Penicillium d a n Cephalosporium,
Enzim
Beberapa j e n i s m i k r o o r g a n i s m e dapat m e n g h a s i l k a n e n z i m y a n g dapat d i g u n a k a n
u n t u k berbagai keperluan. E n z i m tersebut dapat diisolasi dari m i k r o o r g a n i s m e karena
enzim yang dihasilkan u m u m n y a disekresikan k e dalam media pertumbuhan
mikroorganisme sehingga m u d a h dipisahkan dan dimurnikan . Beberapa jenis e n z i m
y a n g dihasilkan o l e h m i k r o o r g a n i s m e antara lain amilase, pektinase, pektinesterase,
invertase, streptokinase, dan streptodomase.
S e l a m dapat menghidrolisis pati menjadi dekstrin dan gula, e n z i m amilase dapat
digunakan u n t u k berbagai keperluan, seperti u n t u k m e m b u a t l e m atau bahan perekat,
m e n j e m i h k a n sari buah, dan dapat d i g i m a k a n dala m industri kertas dan industri far-
masi.
Pektinase digunakan u n t u k m e n j e m i h k a n sari buah. Selain itu, e n z i m i n i digunakan
u n t u k m e n g h i d r o l i s i s p e k t i n d a l a m batang t a n a m a n r a m i u n t u k m e n g u r a i serat selulosa
yang digunakan dalam pembuatan kain linen dan k a m n g goni.
Invertase adalah j e n i s e n z i m y a n g dapat m e n g h i d r o l i s is sukrosa m e n j a d i g l u k o s a
dan levulosa sehingga banyak digunakan dalam pembuatan kembang gula dan pro-
duksi simp.
Protease digunakan u n t u k memperhalus tekstur kulit dan pengolahan kulit lainnya;
u n t u k m e l e p a s k a n perekat dari k a i n sutera; u n t u k m e n j e m i h k a n k e k e m h a n b i r o l e h
protein; dan sebagai campuran dalam sabun cuci pakaian.
Aspergilius foetidus d a n Byssochlamys fulva m e n g h a s i l k a n b e b e r a p a j e n i s e n z i m
y a n g dapat m e n g u r a i k a n p e k t i n , antara lain pektinesterase, poligalakturonase, d a n
galaktanase.
pa be rT 6 . 4 . 'Be be ra pa Je nis M ikroorga nisme PenghasiJ Antibiotik
Antibiotik M ikroorga nisme pe ngha sil Efektif te rha da p
Penisilin G, Sefalotin Penicillium notatum Bakteri Gram-positif

Ceptialosporium sp.
Asam lîavulanat Streptomyces clavuligerus Bakteri Gram-positif dan Gram-negatif
Aztreonam Ctiromobacterium violaceum Bakteri Gram-positif dan Gram-negatif

Imipenem Streptomyces cattleya Bakteri Gram-positif dan Gram-negatif
Streptomisin Streptomyces griseus Bakteri Gram-positif dan Gram-negatif
Gentamisin Micromonospora sp. Bakteri Gram-positif dan Gram-

negatif, khususnya Pseudomonas
Vankomisin Amycolatopsis orientalis Bakteri Gram-positif, khususnya
(Nocardia orientalis) Staphylococcus aureus
Klindamisin Streptomyces lincoinensis Bakteri Gram-positif dan Gram-

negatif, khususnya Bacteroides
anaerob
Eritromisin, Streptomyces eryttireus Bakteri Gram-positif dan Gram-negatif

Azitromisin selain bakteri enterik, Neisseria,
Legionelia, Mycoplasma
Polimil^sln Bacilius polymyxa Bakteri Gram-negatif
Basitrasin Bacilius subtilis Bakteri Gram-negatif
Amfoterisin Streptomyces nodosus Fungi (Histoplasma)
Nistatin Streptomyces noursei Fungi (Candida)
Rifampisin Streptomyces mediterranei Bakteri Gram-positif dan Gram-
negatif, Mycobacterium tuberculosis
Tetrasiklin Streptomyces sp. Bakteri Gram-positif dan Gram-
negatif, riketsia
Kloramfenikol Streptomyces venezuelae Bakteri Gram-positif dan Gram-negatif
B e b e r a p a s p e s i e s b a k t e r i Streptococcus d a p a t m e n g h a s i l k a n e n z i m y a n g b e r m a n f a a t
u n t u k terapi, antara lain streptokinase dan streptodomase. Filtrat biakan perbenihan
b a k t e r i Streptococcus juga m e n g a n d u n g e n z i m h i a l u r o n i d a s e , p r o t e i n a s e , d a n b e b e r a p a
e n z i m yang memengaruhi asam nukleat.
Streptokinase dapat digunakan u n t u k m e m b a n t u e n z i m proteolitik d a l a m darah
dan dapat m e n g a k t i f k a n p l a s m i n o g e n darah. Jadi, streptokinase dapat m e m b a n t u
m e n g h i l a n g k a n bekuan darah d i d a l a m p e m b u l u h darah. E n z i m streptodomase dapat
menguraikan deoksiribonukleoprotein ( D N P ) dan D N A , yang merupakan senyawa
k o m p l e k s y a n g ada d a l a m nanah. Dengan d e m i k i a n , penggunaan e n z i m streptodomase
dapat m e n g u r a n g i viskositas nanah penderita.
P a d a saat i n i , berbagai j e n i s e n z i m telah berhasil d i i s o l a s i d a r i berbagai j e n i s bak-
teri atau j a m u r d a n telah dimanfaatkan u n t u k berbagai keperluan, termasuk d a l a m
bidang industri farmasi.
P e n g e m b a n g a n t e k n i k a m p l i f i k a s i D N A s e c a r a in vitro, y a i t u r e a k s i r a n t a i p o l i -
m e r a s e (polymerase chain reaction, P C R ) , t i d a k t e r l e p a s d a r i d i t e m u k a n n y a e n z i m
polimerase yang tahan terhadap pemanasan tinggi. E n z i m ini dihasilkan oleh bakteri
Thermus aguaticus. T e k n i k P C R k i n i t e l a h d i g u n a k a n s e c a r a l u a s d a l a m p e n e l i t i a n -
penelitian b i o l o g i molekuler, dalam diagnosis berbagai penyakit infeksi y a n g
disebabkan o l e h bakteri, v i r u s , j a m u r , dan parasit, serta d a l a m diagnosis k e l a i n a n -
k e l a i n a n D N A pada sel m a n u s i a .
Vitamin
V i t a m i n m e r u p a k a n s e n y a w a y a n g sangat penting dalam m e m b a n t u m e t a b o l i s m e dan
sering digunakan u n t u k m e n i n g k a t k a n kesehatan dan daya tahan tubuh. M i k r o o r g a -
nisme dapat menjadi sumber y a n g m u r a h u n t u k mendapatkan bahan b a k u v i t a m i n .
V i t a m i n B , ^ d i p r o d u k s i o l e h Pseudomonas denitrificans d a n Propionibactehum sher-
manii. R i b o f l a v i n j u g a d a p a t d i p r o d u k s i m e l a l u i p r o s e s f e r m e n t a s i d e n g a n b a n t u a n
Ashbyagossypii. D e m i k i a n p u l a , v i t a m i n C d a p a t d i p r o d u k s i m e l a l u i p r o s e s m o d i f i k a s i
g l u k o s a d e n g a n b a n t u a n Acetobacter.
Dekstran
D e k s t r a n m e r u p a k a n eksopolisakarida y a n g dihasilkan o l e h beberapa spesies bakteri
a s a m l a k t a t , a n t a r a l a i n Leuconostoc mesenteroides d a n Leuconostoc dextranicus.
Dekstran dapat d i m a n f a a t k an dalam bidang pengobatan u n t u k substitusi plasma darah.
Jika dekstran diberikan secara intravena, sejumla h efek f a r m a k o l o g i s y a n g m e n g u n -
tungkan bagi kesehatan dapat diperoleh karena dekstran m e m p u n y a i efek antiplatelet,
antifibrin, serta berguna sebagai p e n a m b a h v o l u m e plasma pada keadaan h i p o v o l e m i a
dan dapat menghalangi agregasi trombosit.
A s a m amino
Beberapa m i k r o o r g a n i s m e dapat menghasilkan beberapa j e n i s asam a m i n o d a l a m
j u m l a h y a n g cukup banyak. Sebagai contoh, lisin, asam glutamat, dan triptofan diha-
s i l k a n o l e h Corynebacterium glutamicum. P a d a T a b e l 1 6 . 5 , d a p a t d i l i h a t b e b e r a p a
jenis asam a m i n o y a n g diproduksi m e l a l u i proses fermentasi oleh berbagai jenis m i -
kroorganisme.
Steroid
Steroid m e r u p a k a n s e n y a w a y a n g sangat penting dan digunakan d a l a m pengobatan.
Sebagai contoh, k o r t i s o n digunakan u n t u k mengatasi inflamasi, sedangkan estrogen
dan progesteron d i g u n a k a n sebagai obat kontrasepsi oral. S e n y a w a g o l o n g a n steroid
sangat sulit d i p r o d u k s i m e l a l u i proses k i m i a atau isolasi dari h e w a n . A k a n tetapi,
m i k r o o r g a n i s m e m a m p u m e n g o n v e r s i substrat tertentu y a n g m u d a h didapat m e n j a d i
steroid.
D e n g a n b i o k o n v e r s i , s e n y a w a prekursor dapat diubah m e n j a d i p r o d u k farmasi
y a n g lebih bermanfaat. Sebagai contoh, sterol dapat diubah m e n j a di steroid o l e h
PSbel 16.5. Beb4JPMUWimilHlyang D iproduksi IVIelalui Proses

[ Fermentasi
Je nis a sa m a mino M ikroorga nisme
oL-Alanin Microbacterium ammoniaphilum
L-Alanin Streptomyces coelicolor

L-Arginin Brevibacterium flavum
L-Asam glutamat Corynebacterium glutamicum
Brevibacterium flavum
Arttirobacter paraffineus
L-Glutamin Corynebacterium glutamicum
L-HJstidin Brevibacterium flavum
L-Isoleusin Brevibacterium flavum

L-Leusin Brevibacterium lactofermentum
L-Lisin Corynebacterium glutamicum

Brevibacterium flavum
L-Metionin Corynebacterium glutamicum
L-Fenilalanin Corynebacterium glutamicum
L-Prolin Brevibacterium flavum

L-Ornitin Corynebacterium glutamicum
L-Treonin Brevibacterium flavum
L-Triptofan Corynebacterium glutamicum
L-TIrosin Corynebacterium glutamicum

L-Valin Brevibacterium lactofermentum
Streptomyces, p r o g e s t e r o n d a p a t d i u b a h m e n j a d i 1 1 - a - h i d r o k s i p r o g e s t e r o n o l e h
Rhizopus nigricans. T a b e l 1 6 . 6 m e m p e r l i h a t k a n c o n t o h b i o k o n v e r s i b e b e r a p a j e n i s
substrat o l e h m i k r o o r g a n i s m e u n t u k m e n g h a s i l k an p r o d u k - p r o d u k steroid.
A s a m sitrat
A s a m sitrat m e r u p a k a n salah satu p r o d u k fermentasi y a n g d i p r o d u k s i dengan bantuan
m i k r o o r g a n i s m e . Pada a w a l n y a , asam sitrat diekstraksi dari buah j e r u k , k e m u d i a n
pada tahun 1923, d i k e m b a n g k a n suatu proses fermentasi u n t u k m e n g h a s i l k a n asam
sitrat. Saat i n i , dua per tiga asam sitrat total y a n g d i p r o d u k s i d i g u n a k a n d a l a m p e m -
buatan m a k a n a n d a n m i n u m a n , antara lain m i n u m a n bersoda, permen, buah y a n g
d i b e k u k a n , selai, es k r i m , anggur, d a n berbagai j e n i s k u e . D a l a m i n d u s t r i f a r m a s i ,
a s a m sitrat d i g u n a k a n sebagai bahan pengawet sediaan tablet dan salep. M i k r o o r g a -
n i s m e y a n g s a n g a t b e r p e r a n d a l a m p r o s e s f e r m e n t a s i a d a l a h Aspergilius niger.
A s a m sitrat m e r u p a k a n produk pertama y a n g dihasilkan m e l a l u i penggunaan m i -
k r o b a dengan fermentasi p e r m u k a a n . Substrat y a n g d i g u n a k a n berasal dari berbagai
gula, tetapi substrat y a n g m e m b e r i k a n hasil paling bai k adalah sukrosa dan glukosa.
Riibii Ajar Mikrobiologi: Panduan Mahasiswa Farmasi dan Kedokteran
; S ubstra t oleh M ikroorga nisme

Je nis substra t P roduk M ikroorga nisme
.Progesteron 1-Dehidrostonolakton Cylindrocarpon radicicola
Progesteron 1,4-Androstadien-3,17-dion Fusarium solani
Progesteron 15a-Hidroksi-4-pregnen-3,20-dion Streptomyces aureus
4-Androsten-3,17-dion 11 a-Hldroksi-4-androsten-3,17- Rtiizopus arrtiizus
dion
Hidrokortison Prednisolon Arttirobacter simplex
Kolesterol 1,4-Androstadien-3,17-dion Arttirobacter simplex
P-Sitosterol 9a-Hidroksi-4-androsten-3,17-dion Mycobacterium fortuitum
Kolesterol
Stigmasterol
Kampesterol
B i l a fermentasi d i l a k u k a n dengan baik, sekitar 7 0 % substrat a k a n d i u b ah m e n j a d i

asam sitrat.
Vaksin
V a k s i n adalah suatu p r o d uk biologis y a n g terbuat dari m i k r o o r g a n i s m e , k o m p o n e n
m i k r o o r g a n i s m e , atau t o k s i n y a n g telah d i l e m a h k a n atau d i m a t i k a n y a n g berguna
u n t u k m e r a n g s a ng t i m b u l n y a kekebalan t u b u h seseorang secara spesifik terhadap
jenis m i k r o o r g a n i s m e y a n g terkandung dalam v a k s i n y a n g diberikan. Salah satu ben-
tuk v a k s i n adalah v a k s i n y a n g m e n g a n d u n g bakteri atau v i r u s y a n g telah d i l e m a h k a n
dengan m e n g g u n a k a n bahan seperti formaldehida dan timerosal. Berbagai j e n i s v a k s i n
telah dikembangka n dan dimanfaatkan untuk merangsang sistem imunitas tubuh.
D a l a m p r o d u k s i v a k s i n y a n g berasal dari bakteri, d i b u t u h k a n s e j u m l a h besar
bakteri u n t u k proses pembuatan v a k s i n . Pada pembuatan v a k s i n , bakteri dapat dile-
m a h k a n atau d i m a t i k a n . D e n g a n k e m a j u a n b i o t e k n o l o g i saat i n i , t e k n i k r e k a y a s a ge-
netika sering digunakan untuk mengembangkan dan m e m p r o d u k s i sub-unit vaksin.
Sebagai produk biologis, v a k s i n m e m i l i k i karakteristik tertentu dan m e m e r l u k a n
penanganan khusus sejak diproduksi hingga digunakan pada u n i t - u n i t pelayanan.
S u h u y a n g b a i k u n t u k p e n y i m p a n a n v a k s i n a d a l a h 2-8°C. P e n y i m p a n a n d i l u a r k e t e n -
tuan y a n g dipersyaratkan akan m e n u r u n k a n atau m e n g h i l a n g k a n potensi v a k s i n .
K e r u s a k a n v a k s i n dapat m e n g a k i b a t k a n kerugian sumber daya y a n g tidak sedikit,
bahkan dapat m e n i m b u l k a n efek pasca-imunisasi y a n g tidak d i i n g i n k a n .
Pada u m u m n y a , v a k s i n akan rusak j i k a terpajan panas atau terkena sinar matahar i
langsung. A k a n tetapi, beberapa vaksin j u g a tidak tahan terhadap pembekuan, bahkan
dapat rusak d a l a m w a k t u y a n g lebih singkat daripada j i k a v a k s i n terpajan panas. O l e h
karena i t u , tenaga kesehatan, terutama apoteker, harus sangat m e m p e r h a t i k a n pena-
nganan dan penyimpanan vaksin.
Beberapa jenis vaksin yang telah digunakan untuk meningkatkan kekebalan tubuh
terhadap penyakit infeksi antara lain sebagai berikut.
Bab 16 - Peranan Mibroorganisme;
Vaksin BCG
V a k s i n i n i d i b u a t d a r i Mycobacterium bovis g a l u r Bacilius Calmette Guerin (BCG)
y a n g sudah dilemahkan dan digunakan untuk mencegah penyakit tuberkulosis.
Vaksin DPT
V a k s i n i n i m e n g a n d u n g t o k s o i d tetanus m u m i , t o k s o i d d i f t e r i m u m i , dan b a k t e r i per-
tusis y a n g d i i n a k t i f k a n dan digunakan u n t u k mencegah penyakit difteri, tetanus, dan
pertusis.
Vaksin campak
Vaksin ini dibuat dari virus campak yang dilemahkan dan digunakan untuk mencegah
penyakit campak.
Vaksin itepatitis B rekombinan

V a k s i n i n i m e n g a n d u n g antigen virus hepatitis B , H B s A g , y a n g tidak m e n g i n f e k s i
y a n g d i h a s i l k a n d a r i b i a k a n sel r a g i d e n g a n t e k n o l o g i r e k a y a s a D N A . A n t i g e n y a n g
d i h a s i l k a n o l e h s e l r a g i Hansenula polymorpha i n i d i m u m i k a n d e n g a n m e t o d e u l t r a -
sentrifugasi, kromatografi k o l o m , dan diinaktifkan dengan formaldehida. V a k s i n i n i
digunakan u n t u k mencegah infeksi virus hepatitis B .
Vaksin orai poiio

V a k s i n i n i m e m p a k a n v a k s i n t r i v a l e n y a n g m e n g a n d u ng suspensi tiga tipe v i m s p o l i o
h i d u p galur S a b i n , y a i t u tipe 1, tipe 2 , dan tipe 3, y a n g telah d i l e m a h k a n . V a k s i n i n i
digunakan untuk mencegah infeksi v i m s polio.
Protein rekombinan manusia

Peranan m i k r o o r g a n i s m e dalam pengembangan protein r e k o m b i n a n m a n u s i a sangat
besar. H a l i n i d i p a c u o l e h p e r k e m b a n g a n t e k n o l o g i b i o l o g i m o l e k u l e r d a n r e k a y a s a
genetika.
Salah satu contoh produk protein hasil rekayasa genetika y a n g pertama kali d i -
produksi adalah H u m u l i n , yaitu insulin rekombinan manusia yang diproduksi pada
tahun 1982 oleh E l i Lilly, sebuah pemsahaan farmasi A m e r i k a Serikat. D N A manusia
yang menyandi produksi insulin disisipkan k e dalam plasmid vektor, kemudian
d i k l o n k a n k e d a l a m s e l Escherichia coli s e b a g a i i n a n g . A p a b i l a s e l Escherichia coli
ini dibiakkan, bakteri ini akan menghasilkan insulin yang sama dengan insulin endo-
gen y a n g diproduksi oleh pankreas manusia karena d i d a l a m se l tersebut terdapat
fragmen D N A manusia yang menyandi protein insulin.
D e n g a n proses s e m p a , berbagai j e n i s p r o t e i n r e k o m b i n a n saat i n i t e l a h d i h a s i l k a n ,
s e b a g a i m a n a t e r c a n t u m pada Tabel 16.7.
H o r m o n insulin sangat dibutuhkan u n t u k terapi diabetes melitus, t e m t a m a bagi
penderita diabetes tipe 1 y a n g sangat bergantung pada i n s u l i n eksogen.
266 Bubu Ajar Mikrobiologi: Panduan Mahasiswa Farmasi dan Kedokteran j
S e b e l u m insulin r e k o m b i n a n m a n u s i a d i p r o d u k s i secara rekayasa genetika, s u m b e r

insulin diperoleh dari pankreas h e w a n , seperti sapi, kuda, dan babi.
Insulin y a n g diperoleh dari pankreas h e w a n dapat digunakan pada m a n u s i a karena
hanya berbeda beberapa asam a m i n o j i k a dibandingkan dengan insulin manusia. Insu-
lin y a n g berasal dari babi paling banya k digunaka n u n t u k m e n g g a n t i k a n insulin
m a n u s i a karena h a n y a berbeda 1 asam a m i n o , sedangkan i n s u l i n sapi m e m p u n y a i per-
bedaan tiga asam a m i n o dibandingkan insulin manusia. Pada pemakaia n j a n g k a pan-
jang, k h u s u s n y a bagi penderita diabetes m e l i t u s tipe 1, penggunaan insulin h e w a n
ternyata m e n i m b u l k a n efek alergi. O l e h karena itu, upaya m e m p r o d u k s i insulin m e -
lalui teknik rekayasa genetika dengan m e n g k l o n gen insulin pada bakteri atau j a m u r
telah dilakukan.
Pada saat i n i , i n s u l i n y a n g d i g u n a k a n d a l a m p e n g o b a t a n diabetes m e r u p a k a n i n -
sulin r e k o m b i n a n manusia yang dihasilkan dengan teknik rekayasa genetika.
Tabel 16.7. Beberapa P roduk Farmasi ya ng Diperoleh Melalui Rekayasa

Genetika
P roduk rekayasa ge ne tika D iproduksi ole h Ke guna a n
Insulin manusia Esctierichiia coli Terapi diabetes
Hormon pertumbuhan Escherichia coli Terapi kekurangan hormon

manusia pertumbuhan pada anak
Interferon-alfa Escherichia coli dan Terapi leukemia, melanoma,

Saccharomyces cerevisiae dan hepatitis
Interferon-gamma Escherichia coli Terapi penyakit

granulomatosa kronis
Taxol Escherichia coli Terapi kanker ovarium
Interleukin Escherichia coli Terapi kanker dan mening-

katkan sistem imun
Faktor pertumbuhan Escherichia coli Terapi kulit akibat luka bakar,

epidennal {epidermal growth ulkus
factor, EGF)
Relaxin Escherichia coli Membantu mempemnudah

proses kelahiran bayi
Prourokinase Escherichia co//dan Antikoagulan

Saccharomyces cerevisiae
Faktor nekrosis tumor {tumor Escherichia coli Terapi tumor
necrosis factor, TNF)
Faktor pemicu koloni {colony Escherichia coli dan Meningkatkan daya tahan
stimulating factor, CSF) Saccharomyces cerevisiae tubuh terhadap infeksi dan
terapi leukemia
BAB 17
ANALISIS KEAMANAN
SEDIAAN FARMASI
DAN MAKANAN S E C A R A
MIKROBIOLOGI
• Pendahuluan
• Pengujian C e m a r a n Bakteri
• Identifikasi Bakter i P a t o g en
• Pengujian Sterilitas S e d i a a n F a r m a s i
d a n A l a t Kesehatan
• Pengujian Potensi Antibiotik
• Pengujian Potensi Vitamin
267
268 Bubu Ajar Mihrobiologi: P a ndua n Mahasiswa Farmasi da n Kedoktera n S
PENDAHULUAN
Pengawasan m u t u d a n keamanan produk farmasi d a n m a k a n a n sangat penting
dilakukan guna m e m b e r i k a n j a m i n a n kepada masyarakat b a h w a produk-produk y a n g
mereka gunakan dan k o n s u m s i m e m e n u h i persyaratan yang telah ditentukan.
T i n g k a t k o n s u m s i m a s y a r a k a t terhadap sediaan farmasi, y a n g m e l i p u t i obat, obat
tradisional, m a k a n a n , m i n u m a n , k o s m e t i k a , dan alat kesehatan, cenderun g terus ber-
tambah seiring dengan perubahan pola konsumsi masyarakat. N a m u n demikian, masih
banyak masyarakat yang belum menyadari risiko d a n dampak mengonsumsi suatu
p r o d u k y a n g tidak m e m e n u h i kualitas secara m i k r o b i o l o g i s terhadap kesehatan. O l e h
sebab i t u , t u j u a n pengawasan d a n pemeriksaan m u t u p r o d u k secara m i k r o b i o l o g i s
adalah m e n j a m i n keamanan, keselamatan, dan kesehatan masyarakat d a l a m m e n g o n -
sumsi atau m e n g g u n a k a n sediaan farmasi. R u a n g l i n g k u p pengujian m i k r o b i o l o g i
yang akan dijelaskan dalam bab ini mencakup pengujian cemaran bakteri dan j a m u r
pada obat, obat tradisional, m a k a n a n , m i n u m a n , dan k o s m e t i k a ; u j i sterilitas p r o d u k
farmasi; u j i koefisien fenol; u j i potensi a n t i b i o t i k; d a n u j i potensi v i t a m i n . Jenis
pengujian m u t u dan k e a m a n a n secara m i k r o b i o l o g i s dapat d i l i h a t pada T a b e l 1 7 . 1 .
Makanan, M inuma n, dan Alat Kesehatan 1

P roduk Pengujian
Obat tetes mata, salep mata Uji sterilitas

Obat suntik/infus Uji sterilitas
Alat kesehatan steril Uji sterilitas
Antibiotik Uji potensi

Vitamin Uji potensi
Obat non-steril (sediaan oral dan sediaan Uji angka lempeng total (ALT)
topikal) Uji angka kapang-khamir (AKK)
Uji mikroba patogen
Obat tradisional Uji angka lempeng total (ALT)
Uji angka kapang-khamir (AKK)
Uji mikroba patogen
Kosmetika Uji angka lempeng total (ALT)
Uji mikroba patogen
Makanan dan minuman Uji angka lempeng total (ALT)

Uji mikroba patogen
Angka coliform
Produk komplemen, suplemen makanan Uji angka lempeng total (ALT)
Uji mikroba patogen
Bab 17 - Analisis Keamanan Sediaan Farmasi 269
PENGUJIAN CEMARAN BAKTERI

Pengujian c e m a r a n bakteri d i l a k u k a n pada sediaan obat, obat tradisional, m a k a n a n ,
m i n u m a n , k o s m e t i k a , d a n alat kesehatan. S e b e l u m pengujian c e m a r a n bakteri d a l a m
sampel dilakukan, sampel perlu dihomogenkan. Pengujian cemaran bakteri mencakup
berbagai cara berikut.
1. A n g k a lempeng total ( A L T ) .
2. M e t o d e filtrasi.
3. Angka kapang-khamir ( A K K ) .
4. Pemeriksaan bakteri patogen.
Homogenisasi sampel pemeriksaan

H o m o g e n i s a s i adalah suatu cara penyiapan sampel p e m e r i k s a a n u n t u k m e m p e r o l e h
distribusi m i k r o b a sebaik m u n g k i n d i dalam sampel y a n g akan diperiksa. T u j u a n
h o m o g e n i s a s i adalah m e m b e b a s k a n sel-sel bakteri atau j a m u r y a n g m u n g k i n t e r l i n -
d u n g d i d a l a m bahan pemeriksaan d a n u n t u k m e n o r m a l k a n k e m b a l i sel-sel bakteri
dan j a m u r yang m u n g k i n viabilitasnya berkurang karena kondisi yang kurang meng-
u n t u n g k a n d a l a m sediaan farmasi y a n g akan diperiksa.
Setelah dibersihkan dengan alkohol 7 0 % , wadah sampel yang akan diperiksa d i -
b u k a secara aseptis. S a m p e l d i t i m b a n g atau d i u k u r d a n d i h o m o g e n k a n d a l a m larutan
p e n g e n c e r , misalnyapeptone diliitionfliiid, bufferedpeptone water, a t a u l a r u t a n d a p a r
f o s f a t , m e n g g u n a k a n a l a t h o m o g e n i s a s i (blender, stomacher).
Perbandingan antara sampel d a n larutan pengencer y a n g d i g u n a k a n adalah sebagai
berikut.
• Sampel makanan
S e b a n y a k 2 5 g r a m s a m p e l d i l a r u t k a n d a l a m 2 2 5 m l peptone dUution fluid (?DF)
a t a u buffered peptone water ( B P W ) .
• Kosmetika
S e b a n y a k 5 g r a m s a m p e l d i l a r u t k a n d a l a m 4 5 m l l a r u t a n letheen broth,
• Obat d a n obat tradisional
S e b a n y a k 1 0 g r a m s a m p e l d i l a r u t k a n d a l a m 9 0 m l l a r u t a n letheen broth a t a u
peptone dilution fluid ( P D F ) j i k a o b a t t i d a k m e n g a n d u n g b a h a n p e n g a w e t a t a u
bukan antimikroba.
Angka lempeng total (ALT)

Pengujian angka lempeng total adalah pengujian y a n g d i l a k u k an untu k m e n g h i t u n g
angka bakteri aerob mesofil y a n g terdapat dalam suatu sampel.
Cara penentuan
Sampel y a n g akan diuji terlebih dahulu dihomogenka n dalam larutan pepton peng-
e n c e r {peptone dilution fluid, P D F ) s e h i n g g a d i d a p a t p e n g e n c e r a n 1 0 ' . D a r i h a s i l
pengenceran tersebut, dipipet sebanyak I m l k e d a l a m tabung pertama y a n g berisi 9 m l
larutan pengencer P D F sehingga diperoleh pengenceran 1 0 1 C a m p u r a n d i k o c o k
homogen. Pengenceran d i l a k u k a n d e m i k i a n seterusnya sehingga diperoleh pengen-
c e r a n b e r t i n g k a t \0\ 1 0 ^ 1 0 " ^ d a n s e t e r u s n y a . L a r u t a n letheen broth d i g u n a k a n
u n t u k obat, obat tradisional, d a n k o s m e t i k a y a n g m e n g a n d u n g pengawet. L a r u t a n
p e n g e n c e r letheen broth d i g u n a k a n k a r e n a d a p a t m e n g i n a k t i f k a n p e n g a w e t y a n g b i a s a
terdapat d a l a m sediaan. K e b e r a d a a n p e n g a w e t d a l a m s a m p e l dapat m e n g h a m b a t per-
tumbuhan bakteri.
D a r i s e t i a p h a s i l p e n g e n c e r a n , d i p i p e t 1 m l k e d a l a m c a w a n p e t r i d a n d i b u a t duplo.
S e l a n j u t n y a , k e d a l a m s e t i a p c a w a n p e t r i , d i t u a n g s e b a n y a k 1 5 - 2 0 m l m e d i a plate
count agar ( P C A ) y a n g d i c a i r k a n p a d a s u h u 45° ± 1 °C. C a w a n p e t r i s e g e r a d i g o y a n g k a n
perlahan supaya sampel tercampur rata dengan m e d ia perbenihan. Setelah m e d i a
m e m b e k u , c a w a n p e t r i d i i n k u b a s i p a d a s u h u 35-37°C s e l a m a 2 4 ^ 8 j a m d e n g a n p o s i s i
terbalik. S k e m a p e m e r i k s a a n angka l e m p e n g total dapat dilihat pada G a m b a r 1 7 . 1 .
P e r t u m b u h a n k o l o n i pada setiap c a w a n y a n g m e n g a n d u n g 3 0 - 3 0 0 k o l o n i dicatat.
Pada setiap pemeriksaan, selalu disertakan m e d i a k o n t r o l u j i ( b l a n g k o ) . A n g k a l e m -
peng total u n t u k 1 g r a m atau 1 m l sampel dihitung dengan m e n g a l i k a n j u m l a h rata-
rata k o l o n i pada c a w a n dengan faktor pengenceran.
Sampel
10-2 10-3
10-4J 10-5 Ij J
w 1 ml \ ^ 1 ml \ ^ v ^ 1 ml
Iml >• duplo
Plate count agar 15 - 20 ml
G a mba r 17.1 Skema pemeriksaan angka lempeng total (ALT). Pemeriksaan ini bertujuan untuk
menentukan jumlah kandungan bakteri aerob mesofil dalam suatu sampel.
Contoh perhitungan
Jumla h koloni bakteri
P e nge nce ra n
Petri 1 Petri 2 Re rata
10-^ 129 131 130
10-2 26 24 25
D a r i d a t a t e r s e b u t , d a p a t d i s i m p u l k a n b a h w a a n g k a l e m p e n g t o t a l ( A L T ) = 1,3 x 10^
koloni/gram (menggunakan aturan j u m l a h koloni 3 0 - 3 0 0 ) .
Metode filtrasi
M e t o d e ini dapat d i l a k u k a n apabila kandungan bakteri diperkirakan rendah. P r o d u k
yang biasanya mengandun g j u m l a h bakteri y a n g rendah antara lain obat oral, m i n u m a n
ringan, air m i n u m dalam kemasan, atau produk lain y a n g diproses dengan baik. Prinsip
penentuan angka bakteri dengan cara filtrasi adalah p e r t u m b u h a n bakteri aerob mesofil
p a d a p e n y a r i n g m e m b r a n s e t e l a h d i i n k u b a s i p a d a s u h u 37°C s e l a m a 2 4 - ^ 8 j a m d a l a m
perbenihan y a n g sesuai.
Cara penentuan
Sebanyak 100 m l sampel atau sejumlah y a n g diperlukan disaring dengan peralatan
p e n y a r i n g v a k u m m e n g g u n a k a n filter b a k t e r i y a n g b e r d i a m e t e r 0 , 4 5 n m , k e m u d i a n
dibilas dengan air suling steril y a n g b e r v o l u m e sama dengan v o l u m e sampel y a n g d i -
s a r i n g . P e r a l a t a n p e n y a r i n g d i b u k a . S e l a n j u t n y a , filter b a k t e r i d i p i n d a h k a n s e c a r a
aseptis d e n g a n pinset d a n d i l e t a k k a n d i atas p e r m u k a a n m e d i a p e r b e n i h a n P C A d a l a m
c a w a n petri. Pengerjaan diupayakan sedemikia n rupa agar tidak ada g e l e m b u n g udara
a n t a r a filter b a k t e r i d a n m e d i a P C A . C a w a n d i i n k u b a s i d a l a m p o s i s i t e r b a l i k p a d a
s u h u 37°C s e l a m a 2 4 - 4 8 j a m . J u m l a h k o l o n i y a n g t u m b u h p a d a m e m b r a n d i h i t u n g .
J u m l a h tersebut m e n y a t a k a n j u m l a h bakteri dalam 100 m l sampel.
Angka kapang-khamir (AKK)

Perhitungan angka kapang-khamir bertujuan untuk menentukan j u m l a h koloni kapang
dan k h a m i r y a n g terdapat dalam suatu sampel. Pada prinsipnya, pengujian i n i m e n g -
gunakan metode yang hampir sama dengan penentuan A L T , hanya berbeda pada m e -
d i a p e r b e n i h a n y a n g d i g u n a k a n . P a d a p e n e n t u a n A K K , d i g u n a k a n m e d i a sabouraud
dextrose agar ( S D A ) a t a u potato dextrose agar ( P D A ) .
Cara penentuan
Pada pemeriksaan A K K , v o l u m e larutan sampel yang dipipetkan k e dalam media
S D A / P D A pada setiap p e n g e n c e r a n adalah 0,5 m l . M e d i a p e r b e n i h a n S D A / P D A d i -
t u a n g t e r l e b i h d a h u l u , k e m u d i a n sebanya k 0,5 m l s a m p e l d i p i p e t k a n k e atas p e r m u k a a n
media, lalu digoyang perlahan sambil diputar sampai merata. Pemeriksaan dilakukan
duplo d a n d i s e r t a k a n b l a n g k o m e d i a S D A / P D A .
G a mba r 17.2 Skema pemeriksiaan angka kapang-khamir (AKK). Pemeriksaan ini bertujuan untuk
menentukan jumlah kandungan kapang dan khamir dalam suatu sampel.
S e l u r u h c a w a n p e t r i d i i n k u b a s i p a d a s u h u 20-25°C d a n d i a m a t i m u l a i h a r i k e t i g a
sampai hari kelima. Jumlah koloni yang tumbuh dihitung dengan menjumlahkan k o -
loni yang t u m b u h pada kedua cawan petri. S k e m a pemeriksaan angka kapang-khamir
dapat dilihat pada G a m b a r 17.2.
Contoh perhitungan
Jumla h koloni bakteri

P e nge nce ra n
Petri 1 Petri 2 Rerata
10-^ 29 30 59
D a r i d a t a t e r s e b u t , d i p e r o l e h A K K = 5 , 9 x 10^ k o l o n i / m l . P e n j u m l a h a n k o l o n i d a l a m
cawan petri 1 dan 2 dapat d i l a k u k a n j i k a v o l u m e larutan sampel hasil pengenceran
y a n g d i i n o k u l a s i k a n adalah 0,5 m l .
Bab 17 - Analisis Ke a ma na n Sediaan Farmasi 273
Pemeriksaan bakteri patogen

K e b e r a d a a n b a k t e r i patogen d a l a m sediaan f a r m a s i , m a k a n a n , m i n u m a n , d a n alat
kesehatan harus dihindar i agar pengguna produk terlindung dari efek y a n g m e r u g i k a n
yang disebabkan oleh produk yang dikonsumsi. Pemeriksaan bakteri patogen bertujuan
untuk m e n e n t u k a n apakah suatu produk m e n g a n d u n g bakteri patogen y a n g tidak
d i p e r b o l e h k a n terdapat d a l a m suatu sediaan f a r m a s i , m a k a n a n d a n m i n u m a n , serta
alat kesehatan.
Beberapa m i k r o o r g a n i s m e patogen yang harus diidentifikasi dalam suatu produk
• Escherichia coli.
• Staphylococcus aureus.
• Salmonella typhi.
• Vibrio cholerae.
• Vibrio parahaemolyticus.
• Clostridium perfringens.
• Bacilius cereus.
• Pseudomonas aeruginosa.
• Candida albicans.
IDENTIFIKASI B A K T E R I PATOGEN
Identifikasi bakteri Escherichia coli

U n t u k m e n g i d e n t i f i k a s i a d a n y a b a k t e r i Escherichia coli d a l a m s a m p e l , p e r l a k u a n
p e r t a m a adalah m e n g h o m o g e n k a n sampel d a l a m larutan pengencer y a n g sesuai
s e h i n g g a d i d a p a t k a n h a s i l pengenceran 1 0 ' . S e l a n j u t n y a , dibuat pengenceran ber-
tingkat sehingga diperoleh pengenceran 1 0 - d a n 1 0 ^ Dari hasil pengenceran 1 0 ' ,
dipipet masing-masing 1m l untuk diinokulasikan k edalam 3 buah tabung yan g telah
b e r i s i m e d i a MacConkey broth ( M C B ) d a n t a b u n g D u r h a m . L a n g k a h i n i j u g a d i l a -
k u k a n u n t u k s a m p e l d e n g a n p e n g e n c e r a n 1 0 - d a n \0'\ K e s e m b i l a n t a b u n g y a n g t e l a h
d i i n o k u l a s i d i i n k u b a s i p a d a s u h u 35-37°C s e l a m a 2 4 - 4 8 j a m . G a s y a n g t e r b e n t u k
pada t a b u n g D u r h a m d i a m a t i . S e t i a p t a b u n g y a n g p o s i t i f , y a i t u t i m b u l gas, d i i n o k u -
l a s i k a n k e d a l a m m e d i a Escherichia coli broth ( E C B ) d a n d i i n k u b a s i p a d a s u h u 44°C
selama 2 4 j a m . A p a b i l a t i m b ul gas, biakan diinokulasikan pada permukaan media
p a d a t s e l e k t i f , y a i t u eosin methylene blue agar ( E M B A ) , k e m u d i a n d i i n k u b a s i p a d a
suhu 37"C selama 24 j a m . Jika bagian tengah k o l o n i y a n g t u m b u h pada medi a E M B A
m e n u n j u k k a n kilap l o g a m d a n bintik biru kehijauan, k o l o n i d i i n o k u l a s i k a n pada
m e d i a mitrient agar ( N A ) d a n d i i n k u b a s i p a d a s u h u 3 7 " C s e l a m a 2 4 j a m . L a n g k a h
selanjutnya adalah pengujian konfirmasi, yaitu uji I M V I C , dengan menginokulasika n
b i a k a n b a k t e r i p a d a m e d i a N A k e d a l a m indol, metil merah, voges proskauer, d a n
sitrat ( I M V l C ) . H a s i l u j i k o n f i r m a s i Escherichia coli p o s i t i f j i k a u j i I M V I C m e n u n -
j u k k a n hasil berikut.
Uji indol Positif

Uji metil merah Positif
Uji voges proskauer Negatif
Uji sitrat Negatif
Ujlindol
D a r i b i a k a n m u m i nutrient agar m i r i n g , d i i n o k u l a s i k a n 1 s e n g k e l i t b i a k a n k e d a l a m
m e d i a tryptone broth, k e m u d i a n d i i n k u b a s i p a d a s u h u 37°C s e l a m a 1 8 - 2 4 j a m .
Sebanyak 0,2-0,3 m l pereaksi indol ditambahkan k edalam tabung. W a r n a m e r a h tua
pada permukaan media m e n u n j u k k a n reaksi indol positif.
Uji metil meralt

m e d i a methyl red-voges proskauer ( M R - V P ) , k e m u d i a n d i i n k u b a s i p a d a s u h u 37°C
selama 4 8 j a m . D e n g a n m e n g g u n a k a n pipet, 5 m l b i a k a n d i p i n d a h k a n k e d a l a m tabung
reaksi, d i t a m b a h k a n 5 tetes m e r a h m e t i l , dan d i k o c o k sampai h o m o g e n . W a m a k u n i n g
menunjukkan reaksi negatif dan w a m a merah menunjukkan hasil positif
Uji voges prosliauer

m e d i a metlryl red-voges proskauer ( M R - V P ) , k e m u d i a n d i i n k u b a s i p a d a s u h u 3TC
selama 4 8 j a m . D e n g a n m e n g g u n a k a n pipet, 1 m l biakan dipindahkan k e d a l a m tabung
reaksi, d i t a m b a h k a n 0,5 m l larutan a-nafto l dan 0,2 m l l a m t a n k a l i u m h i d r o k s i d a , k e -
m u d i a n dikocok sampai h o m o g e n dan didiamkan selama 2 - 4 j a m . W a m a merah m u d a
hingga m e r a h tua m e n u n j u k k a n reaksi positif, sedangkan w a m a tidak berubah m e -
nunjukkan reaksi negatif
Uji sitrat
D a r i b i a k a n m u m i nutrient agar m h i n g , d i i n o k u l a s i k a n 1 s e n g k e l i t b i a k a n k e d a l a m
m e d i a simmons citrate, k e m u d i a n d i i n k u b a s i p a d a s u h u Sl^'C s e l a m a 4 8 - 9 6 j a m .
W a m a b i m m e n u n j u k k a n reaksi positif, sedangkan w a m a hijau m e n u n j u k k a n reaksi
negatif.
Identifikasi dan penghitungan bakteri coliform

Coliform a d a l a h g o l o n g a n b a k t e r i y a n g t e r d i r i a t a s b a k t e r i f e k a l d a n b a k t e r i n o n - f e k a l .
I
P e n g u j i a n d a n p e n g h i t u n g a n b a k t e r i coliform m e n g g u n a k a n m e d i a brilliant green
lactose bile 2% ( B G L B 2 % ) .
P r i n s i p p e n e n t u a n a n g k a b a k t e r i coliform a d a l a h a d a n y a p e r t u m b u h a n b a k t e r i
coliform y a n g d i t a n d a i d e n g a n t e r b e n t u k n y a g a s p a d a t a b u n g D u r h a m s e t e l a h d i i n k u -
basi pada m e d i a y a n g sesuai, k e m u d i a n d i c o c o k k a n dengan angka y a n g tertera pada
Tabel 17.2 atau 17.3. Pengujian m e n g g u n a k an metode N i l a i D u g a Terdekat terdiri atas
dua cara, y a i t u m e n g g u n a k a n deretan 3 tabung reaksi dan deretan 5 t a b u n g reaksi.
S a m p e l d i h o m o g e n k a n dan diencerkan d a l a m larutan pengencer y a n g sesuai se-
h i n g g a d i p e r o l e h h a s i l p e n g e n c e r a n 1 0 ' , 1 0 ^ d a n \0\ S e l a n j u t n y a , s e b a n y a k 1 m l
larutan sampel 1 0 ' dipipet k e dalam 3 tabung reaksi yang masing-masing berisi ta-
b u n g D u r h a m t e r b a l i k d a n 5 m l m e d i a lauryl sulphate tryptose broth ( L S T B ) a t a u
lactose broth.
P e r l a k u a n y a n g s a m a d i b e r i k a n t e r h a d a p l a r u t a n h a s i l p e n g e n c e r a n 10"^ d a n 10"^
pada 3 deret t a b u ng k e d u a dan ketiga, seperti y a n g d i t u n j u k k a n pada s k e m a p e m e r i k -
saan pada G a m b a r 17.3.
S e l u r u h t a b u n g d i i n k u b a s i p a d a s u h u 3TC s e l a m a 2 4 - 4 8 j a m . S e t e l a h 2 4 j a m ,
dicatat j u m l a h t a b u n g y a n g m e m b e n t u k gas p a d a m a s i n g - m a s i n g p e n g e n c e r a n . S e l a n -
j u t n y a , tabung y a n g tidak m e m b e n t u k gas diinkubasi k e m b a l i selama 2 4 j a m dan d i -
c a t a t j u m l a h t a b u n g y a n g m e m b e n t u k gas.
Uji konfirmasi dilakukan dengan m e m i n d a h k a n sebanyak 1 sengkelit dari tiap
t a b u n g y a n g m e m b e n t u k g a s p a d a m e d i a lauryl sulphate tryptose broth k e d a l a m
t a b u n g y a n g b e r i s i 1 0 m l brilliant green lactose bile 2 % ( B G L B 2 % ) . S e m u a t a b u n g
d i i n k u b a s i p a d a s u h u 37°C s e l a m a 2 4 - 4 8 j a m .
P e m b e n t u k a n gas p a d a t a b u n g D u r h a m d a l a m m e d i a B G L B 2 % m e m p e r k u a t b u k t i
a d a n y a b a k t e r i coliform.
J u m l a h tabung y a n g positif pada u j i konfirmasi i n i dicatat dan d i c o c o k k a n dengan
a n g k a coliform t o t a l p a d a D a f t a r N i l a i D u g a T e r d e k a t m e n g g u n a k a n d e r e t a n 3 t a b u n g
pada Tabel 17.2.
1 2 3
G a mba r 17.3 Skema pemeriksaan angka coliform dengan metode Nilai Duga Terdekat meng-
gunakan deretan 3 tabung.
Tabel 17.2. Daftar Nilai Duga Terdekat (Most Probable Numben IVIPN)
M e ngguna ka n 3 Tabung .
Kombina si/ jumla h ta bung ya ng positif
MPN per gra m
1 :1 0 1 : 100 1 :1 0 0 0 a ta u per ml
0 0 0 <3
0 0 1 3
0 1 0 3
1 0 0 4
1 0 1 7
1 1 0 7
1 1 1 11
1 2 0 11
2 0 0 9
2 0 1 14
2 1 0 15
2 1 1 20
2 2 0 21
2 2 1 28
3 0 0 23
3 0 1 39
3 0 2 64
3 1 0 43
3 1 1 75
3 1 2 120
3 2 0 93
3 2 1 150
3 2 2 210
3 3 0 240
3 3 1 460
3 3 2 1100
3 3 3 >1100
T o t a l a n g k a coliform d a l a m s a m p e l y a n g d i p r o d u k s i d e n g a n b a i k d a n h i g i e n i s
k a d a n g k a l a sangat s e d i k i t , a n t a r a l a i n d a l a m p r o d u k air, a i r m i n u m d a l a m k e m a s a n ,
d a n s u s u . J a d i , u n t u k p e n e n t u a n a n g k a coliform d a l a m p r o d u k a i r , a i r m i n u m d a l a m
kemasan, dan susu, digunakan metode N i l a i D u g a Terdekat m e n g g u n a k a n deretan 5
tabung. Pada prinsipnya, cara penentuan menggunakan deretan 5 tabung sama dengan
metode N i l a i D u g a Terdekat m e n g g u n a k a n deretan 3 tabung.
9
5*^
'^ Bab"l7-'AnalisisKedmarian Sediaan Fdfmasi**"^77
Sampel air
1 2 3
10 ml LSTB 5 ml LSTB 5 ml LSTB

Kekuatan ganda Kekuatan tunggal Kekuatan tunggal
G a mba r 17.4 Skema pemeriksaan angka coliform dengan metode Nilai Duga Terdekat meng-
gunakan deretan 5 tabung.
P a d a p e n e n t u a n a n g k a coliform d e n g a n m e t o d e N i l a i D u g a T e r d e k a t m e n g g u n a k a n
5 t a b u n g , d i p a k a i m e d i a lauryl sulphate tryptose broth ( L S T B ) d e n g a n k e k u a t a n
ganda dan kekuatan tunggal. Cara penentuan dengan menggunakan 5 tabung lebih
peka daripada menggunakan 3 tabung.
S a m p e l dipipet m a s i n g - m a s i n g sebanyak 10 m l d a n d i m a s u k k a n k e d a l a m 5 t a b u n g
p e r t a m a y a n g b e r i s i 1 0 m l m e d i a lauryl sulphate tryptose broth ( L S T B ) a t a u lactose
broth, k e k u a t a n g a n d a , y a n g d i d a l a m n y a t e r d a p a t t a b u n g D u r h a m y a n g t e r b a l i k .
Selanjutnya, sebanyak 1 m lsampel dipipet dan d i m a s u k k a n k e dalam deretan 5 tabung
yang kedua y a n g masing-masing berisi 5 m l L S T B dengan kekuatan tunggal. D e m i k i a n
pula, k e d a l am deretan 5 tabung yang ketiga, sebanyak 0,1 m l sampel dipipet d a n
d i m a s u k k a n k e d a l a m 5 m l L S T B dengan kekuatan tunggal, seperti ditunjukkan pada
s k e m a p e m e r i k s a a n a n g k a coliform p a d a G a m b a r 1 7 . 4 .
S e l u r u h t a b u n g d i i n k u b a s i p a d a s u h u 37°C s e l a m a 2 4 - 4 8 j a m . S e t e l a h 2 4 j a m ,
dicatat j u m l a h tabung y a n g m e m b e n t u k gas pada m a s i n g - m a s i n g deretan tabung.
T a b u n g y a n g tidak m e m b e n t u k gas diinkubasi k e m b a l i selama 2 4 j a m d a n dicatat
j u m l a h t a b u n g y a n g m e m b e n t u k gas.
U j i konfirmasi dilakukan dengan m e m i n d a h k a n sebanyak 1 sengkelit dari tiap
t a b u n g y a n g m e m b e n t u k g a s p a d a m e d i a lauryl sulphate tryptose broth k e d a l a m
t a b u n g y a n g b e r i s i 1 0 m l brilliant green lactose bile 2 % ( B G L B 2 % ) . S e m u a t a b u n g
d i i n k u b a s i p a d a s u h u 37°C s e l a m a 2 4 - 4 8 j a m . G a s y a n g t e r b e n t u k p a d a t a b u n g D u r -
h a m d a l a m m e d i a B G L B 2 % m e m p e r k u a t b u k t i a d a n y a b a k t e r i coliform.
BuS uAja ?^liS ro^^
|Tabel 17.3. Daftar Nilai Duga Terdekat {Most Probable Number, IVIPN)
I M e ngguna ka n 5 Tabung
Kombina si/ jumla h ta bung ya ng positif MPN/100 ml
0-0-0 <2
0-0-1 2
0-1-0 2
0-2-0 4
1-0-0 2
1-0-1 4
1-1-0 4
1-1-1 6
1-2-0 6
2-0-0 4
2-0-1 7
2-1-0 7
2-1-1 9
2-2-0 9
2-3-0 12
3-0-0 8
3-0-1 11
3-1-0 11
3-1-1 14
3-2-0 14
3-2-1 17
4-0-0 13
4-0-1 17
4-1-0 17
4-1-1 21
4-1-2 26
4-2-0 22
4-2-1 26
4-3-0 27
4-3-1 33
5-0-0 23
5-0-1 30
5-0-2 40
'TT*^ ^
5-1-0 30
5-1-1 50
5-1-2 60
5-2-0 50
5-2-1 70
5-2-2 90
5-3-0 80
5-3-1 110
5-3-2 140
5-3-3 170
5-4-0 130
5-4-1 170
5-4-2 220
5-4-3 280
5-4-4 350
5-5-0 240
5-5-1 300
5-5-2 500
5-5-3 900
5-5-4 1600
5-5-5 >1600
J u m l a h t a b u n g y a n g p o s i t i f p a d a u j i k o n f i r m a s i d i c a t a t . N i l a i D u g a T e r d e k a t coli-
form p e r 1 0 0 m l s a m p e l k e m u d i a n d i h i t u n g d e n g a n m e n g g u n a k a n D a f t a r N i l a i D u g a
Terdekat m e n g g u n a k a n 5 tabung, seperti d i t u n j u k k a n pada T a b e l 17.3.
Identifikasi bakteri Clostridium perfringens

S a m p e l y a n g a k a n d i p e r i k s a d i h o m o g e n k a n d a n d i e n c e r k a n d e n g a n l a r u t a n peptone
dilution fluid ( P D F ) h i n g g a d i d a p a t k a n p e n g e n c e r a n 1 0 ' . L a r u t a n s a m p e l h a s i l p e n g -
enceran dipipet sebanyak 2 m l dan d i m a s u k k a n k e d a l a m tabung y a n g berisi 18 m l
fluid thioglycollate medium, k e m u d i a n d i i n k u b a s i p a d a s u h u 37°C s e l a m a 2 4 j a m .
Bila terlihat pertumbuhan, biakan diinokulasikan ke dalam cawan petri yang berisi
m e d i a s e l e k t i f sulfite polymyxin sulfadiazine agar ( S P S A ) d a n d i i n k u b a s i p a d a s u h u
37°C s e l a m a 2 4 - 4 8 j a m d e n g a n p o s i s i t e r b a l i k p a d a b e j a n a a n a e r o b . B i l a t e r l i h a t
p e r t u m b u h a n k o l o n i s p e s i f i k y a n g d i d u g a b a k t e r i Clostridium perfringens, i d e n t i f i k a s i
dilanjutkan dengan u j i k o n f i r m a s i , antara lain pewarnaan spora, u j i m o t i l i t a s d a l a m
m e d i a s e m i s o l i d , d a n u j i r e d u k s i n i t r a t . B i a k a n d i i n o k u l a s i k a n p a d a m e d i a nitrate
broth d a n d i i n k u b a s i p a d a s u h u 37°C s e l a m a 2 4 j a m . S e t e l a h i t u , s e b a n y a k 0 , 5 - 1 m l
larutan a - n a f t i l a m i n dan 0,5-1 m l asam sulfanilat ditambahkan k e dalam biakan.
W a m a m e r a h m u d a sampai m e r a h akan t i m b u l apabila bakteri m e r e d u k si nitrat m e n -
jadi nitrit.
Identifikasi bakteri Salmonella typhi

Sampel y a n g akan diperiksa terlebih dahulu dihomogenkan dan dilakukan pra-penga-
y a a n d e n g a n l a m t a n lactose broth ( L B ) , y a i t u d e n g a n m e m i n d a h k a n 2 5 m l s a m p e l
s e c a r a a s e p t i s k e d a l a m b o t o l y a n g b e r i s i 2 2 5 m l m e d i a lactose broth ( L B ) , k e m u d i a n
d i i n k u b a s i p a d a s u h u 37°C s e l a m a 2 4 j a m .
S e b a n y a k 10 m l b i a k a n pra-pengayaa n d i p i n d a h k a n k e d a l a m m e d i a p e n g a y a a n
y a n g t e r d i r i a t a s 1 0 0 m l m e d i a tetrathionate brilliant green agar ( T B G B ) d a n 1 0 0 m l
m e d i a selenite cysteine broth ( S C B ) , k e m u d i a n d i i n k u b a s i p a d a s u h u 2>TC s e l a m a 2 4
jam.
B a k t e r i Salmonella typhi d i i d e n t i f i k a s i d e n g a n m e n g i n o k u l a s i k a n 1 s e n g k e l i t b i a k -
a n p e n g a y a a n p a d a c a w a n p e t r i y a n g b e r i s i m e d i a brilliant green agar ( B G A ) d a n
bismuth sulfite agar ( B S A ) a t a u p e r b e n i h a n s e l e k t i f l a i n n y a , s e p e r t i Salmonella-
Shigella agar ( S S A ) , xylose lysine desoxycholate agar ( X L D A ) , d a n hektoen enteric
agar ( H E A ) . P e r b e n i h a n k e m u d i a n d i i n k u b a s i p a d a s u h u 37°C s e l a m a 2 4 j a m . K o l o n i
y a n g t u m b u h p a d a m e d i a d i d u g a m e m p a k a n Salmonella typhi ykdi m e n u n j u k k a n c i r i -
ciri sebagai berikut.
• Pada B G A , k o l o n i b e r w a m a merah m u d a hingga merah atau bening hingga buram
dengan lingkaran merah m u d a sampai merah.
• Pada B S A , k o l o n i b e r w a m a cokelat, abu-abu sampai h i t a m , dan kadang-kadang
dengan kilap l o g a m . W a m a media di sekitar k o l o n i m u l a - m u l a cokelat, k e m u d i a n
menjadi h i t a m j i k a masa inkubasi ditambah. Pada beberapa galur, k o l o n i b e r w a m a
hijau dengan daerah d i s e k e l i l i n g n y a b e r w a m a lebih gelap.
• Pada S S A , k o l o n i tidak b e r w a m a sampai merah muda, bening sampai buram.
• Pada X L D A , k o l o n i b e r w a m a merah m u d a dengan bintik h i t a m di tengah.
• Pada H E A , k o l o n i b e r w a m a b i m hija u dengan atau tanpa b i n t i k h i t a m di tengah.
L a n g k a h berikutnya adalah u j i konfirmasi.Pada u j i ini, dipilih 2 - 5 k o l o n i spesifik dari

m e d i a s e l e k t i f d a n d i i n o k u l a s i k a n p a d a m e d i a nutrient agar ( N A ) , k e m u d i a n d i i n -
k u b a s i p a d a s u h u 37°C s e l a m a 2 0 - 2 4 j a m . K o l o n i p a d a nutrient agar k e m u d i a n d i i n o -
kulasikan dengan metode tusukan dan goresan u n t u k mengerjakan uji-uji berikut.
Bab 17 - Analisis Ke a ma na n Sediaan Farmasi
Penanaman pada media triple sugar Iron agar (TSIA)

K o l o n i d u g a a n Salmonella d i p i n d a h k a n k e p e r b e n i h a n m i r i n g T S I A d e n g a n c a r a
menggores pada bagian m i r i n g dan m e n u s u k pada bagian tegak perbenihan, k e m u d i a n
d i i n k u b a s i p a d a s u h u 3TC s e l a m a 2 4 ^ 8 j a m . P e r u b a h a n y a n g t e r j a d i d i a m a t i .
Pada bagian tegak, Salmonella akan:
• Memfermentasi glukosa, w a m a media bembah dari ungu menjadi kuning.
• T i d a k m e m f e r m e n t a s i sakarosa, w a m a m e d i a tetap ungu.
• M e m b e n t u k H^S, w a m a media bembah dari ungu menjadi hitam.
Pada bagian miring, Salmonella akan:
• M e m f e r m e n t a s i laktosa atau sakarosa, w a m a m e d i a m e n j a d i k u n i n g .
• T i d a k m e m f e r m e n t a s i laktosa dan sakarosa, w a m a m e d i a tetap m e r a h atau tidak
bembah.
UJI pada urea agar ,

K o l o n i d u g a a n Salmonella d i g o r e s k a n p a d a p e r m u k a a n m e d i a urea agar m i r i n g ,
k e m u d i a n d i i n k u b a s i p a d a s u h u 37°C s e l a m a 2 4 j a m . T i m b u l n y a w a m a m e r a h m u d a
m e n u n j u k k a n reaksi positif, sedangkan tidak ada perubahan w a m a m e n u n j u k k a n
reaksi negatif.
UJI dekarboksllasi llsin

K o l o n i d u g a a n Salmonella d i i n o k u l a s i k a n p a d a p e r b e n i h a n c a i r lysine decarboxylase
broth, k e m u d i a n d i i n k u b a s i p a d a s u h u 37°C s e l a m a 4 8 j a m . T i m b u l n y a w a m a u n g u
menunjukkan reaksi positif
UJI voges proskauer

K o l o n i d u g a a n Salmonella d i m a s u k k a n m a s i n g - m a s i n g 1 s e n g k e l i t k e d a l a m 2 t a b u n g
r e a k s i y a n g m a s i n g - m a s i n g b e r i s i 0 , 2 m l p e r b e n i h a n voges proskauer ( V P ) . T a b u n g
k e - I d i i n k u b a s i p a d a s u h u k a m a r d a n t a b u n g k e - 2 d i i n k u b a s i p a d a s u h u 37°C s e l a m a
2 4 - 4 8 j a m . S e l a n j u t n y a , pada tiap tabung, diteteskan 2 tetes l a m t a n k r e a t i n , 3 tetes
l a m t a n a - n a f t o l , dan 2 tetes pereaksi K O H . P e n g o c o k a n d i l a k u k a n tiap k a l i pereaksi
d i t a m b a h k a n . P e n g a m a t a n d i l a k u k a n s e l a m a 15 m e n i t , t e r b e n t u k n y a w a m a m e r a h
j a m b u sampai m e r a h tua m e n u n j u k k a n reaksi positif, sedangkan j i k a tidak bembah,
menunjukkan reaksi negatif
UJI Indol
K o l o n i d u g a a n Salmonella d i i n o k u l a s i k a n s e b a n y a k 1 s e n g k e l i t k e d a l a m m e d i a i n d o l
d a l a m t a b u n g , k e m u d i a n d i i n k u b a s i p a d a s u h u 37°C s e l a m a 2 4 j a m . S e l a n j u t n y a ,
ditambahkan 1 m lpereaksi indol. Terbentuknya gelang merah m e n u n j u k k a n reaksi
positif, sedangkan bila tidak b e r w a m a atau k u n i n g kecokelatan, m e n u n j u k k a n reaksi
negatif
Uji serologi
K o l o n i d u g a a n Salmonella d i a m b i l s e b a n y a k 1 s e n g k e l i t d a n d i s u s p e n s i k a n d e n g a n j
s a t u t e t e s l a r u t a n N a C l fisiologis p a d a k a c a o b j e k . S e l a n j u t n y a , s u s p e n s i d i t e t e s i d e -
n g a n a n t i s e r u m Salmonella p o l i v a l e n O d a n d i h o m o g e n k a n d e n g a n m e n g g o y a n g k a n •
k a c a o b j e k a t a u m e n g g u n a k a n s e n g k e l i t . P e n g a m a t a n d i l a k u k a n s e l a m a 5 m e n i t . Sal- \
monella p o s i t i f j i k a t e r j a d i a g l u t i n a s i .
I d e n t i f i k a s i b a k t e r i Staphylococcus aureus
S a m p e l y a n g a k a n d i p e r i k s a d i h o m o g e n k a n d a n d i e n c e r k a n d e n g a n l a r u t a n peptone \
dilution fluid ( P D F ) h i n g g a d i d a p a t k a n p e n g e n c e r a n 1 0 ' . S e b a n y a k 2 , 0 m l l a r u t a n \
sampel hasil pengenceran 1 0 ' diambil dan dimasukkan k e dalam tabung reaksi y a n g \
b e r i s i 1 8 , 0 m l m e d i a ttypticase soy broth ( T S B ) , l a l u d i m k u b a s i p a d a s u h u 37°C ;
selama 2 4 - 4 8 j a m . B i a k a n dalam T S B kemudian diinokulasikan dengan menggunakan
s e n g k e l i t p a d a l e m p e n g m e d i a Baird Parker agar ( B P A ) . P e r l a k u a n y a n g s a m a d i b e - \
r i k a n j u g a u n t u k k o n t r o l p o s i t i f d e n g a n m e n g g o r e s k a n Staphylococcus aureus p a d a
m e d i a y a n g s a m a . S e m u a b i a k a n d i i n k u b a s i p a d a s u h u 37°C s e l a m a 2 4 - 4 8 j a m d e n g a n j
p o s i s i c a w a n t e r b a l i k . K o l o n i y a n g d i d u g a m^rwpdkm Staphylococcus aureus a d a l a h ;
k o l o n i spesifik y a n g b e r w a m a h i t a m mengkilat dengan lingkaran cerah di sekeliling- '
nya.
Selanjutnya, k o l o n i dugaan y a n g spesifik dipiUh dari biakan B P A u n t u k d i l a k u k a n 4
u j i k o n f i r m a s i , y a i t u u j i k o a g u l a s e . K u r a n g - l e b i h 1 0 k o l o n i d u g a a n Staphylococcus :;
d i p i l i h d a r i b i a k a n B P A d a n d i i n o k u l a s i k a n k e d a l a m m e d i a brain-heart infusion broth j
( B H I B ) . B i a k a n d i i n k u b a s i p a d a s u h u 3 7 ' ' C s e l a m a 2 0 - 2 4 j a m . S e b a n y a k 0 , 1 m l d a r i 'k
setiap b i a k a n d a l a m B H I B dipipet d a n d i p i n d a h k a n k e d a l a m t a b u n g r e a k s i steril. |
S e l a n j u t n y a , d i t a m b a h k a n 0,3 m l p l a s m a k e l i n c i p a d a m a s i n g - m a s i n g t a b i m g . T a b u n g '
k e m u d i a n d i i n k u b a s i p a d a s u h u 37°C s e l a m a 4 - 6 j a m . D i a m a t i a d a n y a r e a k s i p e n g - 'i
g u m p a l a n p l a s m a . P e n g g u m p a l a n m e n u n j u k k a n k o a g u l a s e Staphylococcus aureus |
positif.
i d e n t i f i k a s i b a k t e r i Pseudomonas aeruginosa
Uji bakteri i n i biasanya dilakukan untuk pemeriksaan kualitas dan j a m i n a n m u i
produk kosmetika. D a r i hasil homogenisasi pada penyiapan sampel, dipipet 2,0 m l
sampel hasil pengenceran 1 0 ' dan dimasukkan k e dalam tabung reaksi yang berisi
1 8 , 0 m l m e d i a trypticase soy broth ( T S B ) . B i a k a n d i i n k u b a s i p a d a s u h u 37°C s e l a m a
2 4 - 4 8 j a m . D a r i b i a k a n T S B , d i a m b i l satu sengkelit d a n d i i n o k u l a s i k a n pada per-
m u k a a n m e d i a cetrimide agar, k e m u d i a n d i i n k u b a s i p a d a s u h u 37°C s e l a m a 4 8 - 7 2
j a m . D i a m a t i adanya pertumbuhan k o l o n i b e r w a m a kehijauan. K o l o n i spesifik y a n g I
b e r w a m a k e h i j a u a n tersebut d i a m b i l dan d i s u s p e n s i k a n d a l a m 0,5 m l T S B , k e m u d i a n
d i i n k u b a s i p a d a s u h u 37°C s e l a m a 2 j a m . S a t u s e n g k e l i t b a k t e r i d i a m b i l d a r i m e d i a i n i
d a n d i b i a k k a n p a d a m e d i a Pseudomonas agar P ( P A P ) d a n m e d i a Pseudomonas agar
F ( P A F ) p a d a 37°C s e l a m a 7 2 j a m . S e l a n j u t n y a , d i l a k u k a n u j i p i g m e n . S a t u s e n g k e l i t
l a i n n y a d i g o r e s k a n p a d a nutrient agar m i r i n g d a n d i i n k u b a s i p a d a s u h u 37°C s e l a m a
Ba b 17 - Analisis Ke a ma na n Sediaan Farmasi 283
24 j a m . Selanjutnya, d i l a k u k a n u j i oksidase, uji katalase, uji p e r t u m b u h a n pada 41 "C,

. an uji mikroskopis dengan pewarnaan G r a m .
Uji pigmen
C o l o n i Pseudomonas aeruginosa y a n g t u m b u h p a d a m e d i a Pseudomonas agar F
P A F ) b e r w a m a k u n i n g k e h i j a u a n , s e d a n g k a n k o l o n i y a n g t u m b u h p a d a m e d i a Pseu-
iomonas agar P ( P A P ) b e r w a r n a h i j a u k e b i r u a n .
Uji oiisidase
S a t u s e n g k e l i t b i a k a n d i a m b i l d a r i b i a k a n nutrient agar m i r i n g d a n d i t o t o l k a n p a d a
. ertas s i t o k r o m , y a i t u kertas y a n g telah d i j e n u h k a n dengan yV,A^-dimetil-/7-fenilen-
diamin dihidroklorida. Pembentukan warna merah yang kemudian berubah menjadi
ungu m e n u n j u k k a n uji oksidase positif.
Uji iiataiase
S a t u s e n g k e l i t b i a k a n d i a m b i l d a r i b i a k a n nutrient agar m i r i n g d a n d i c a m p u r d e n g a n
setetes larutan h i d r o g e n p e r o k s i d a 3 % pada kaca objek . P e m b e n t u k a n g e l e m b u n g gas
m e n u n j u k k a n u j i katalase p o s i t i f
Uji pertumbuiian pada suit u 41° C

S a t u s e n g k e l i t b i a k a n d i a m b i l d a r i b i a k a n nutrient agar m i r i n g d a n d i i n o k u l a s i k a n
p a d a m e d i a trypticase soy broth, k e m u d i a n d i i n k u b a s i p a d a s u h u 41°C s e l a m a 2 4 - 4 8
j a m . K e k e r u h a n m e n u n j u k k a n p e r t u m b u h a n pada suhu 41''C p o s i t i f H a l i n i m e n u n -
j u k k a n b a h w a b a k t e r i t a h a n t e r h a d a p s u h u 4 1 °C; b a k t e r i g o l o n g a n Pseudomonas t a h a n
terhadap pemanasan.
Pewarnaan Gram
P a d a p e w a m a a n G r a m , Pseudomonas aeruginosa m e r u p a k a n b a k t e r i G r a m - p o s i t i f
berbentuk batang.
I d e n t i f i k a s i b a k t e r i Bacilius cereus
U j i b a k t e r i Bacilius cereus b i a s a n y a d i l a k u k a n u n t u k p e m e r i k s a a n k u a l i t a s d a n j a -
m i n a n m u t u produk m a k a n a n dan obat tradisional. D a r i hasil homogenisasi , 1 m l s a m -
p e l d i p i p e t k e d a l a m c a w a n p e t r i y a n g b e r i s i m e d i a Kim & Goepfert agar a t a u Bacilius
cereus agar. B i a k a n k e m u d i a n d i i n k u b a s i p a d a s u h u 37°C s e l a m a 2 4 - 4 8 j a m d e n g a n
p o s i s i c a w a n t e r b a l i k . K o l o n i y a n g d i d u g a Bacilius cereus d i i n o k u l a s i k a n p a d a m e d i a
nutrient agar m i r i n g d a n d i i n k u b a s i p a d a s u h u 3 7 ' ' C s e l a m a 2 4 j a m . S e l a n j u t n y a , d i -
lakukan uji konfirmasi, yang m e l i p u t i uji pencairan gelatin, uji reduksi nitrat, dan uji
voges proskauer.
Uji pencairan gelatin

D a r i b i a k a n m u r n i nutrient agar m i r i n g , d i i n o k u l a s i k a n 1 s e n g k e l i t k e d a l a m m e d i a
tryptone broth y a n g m e n g a n d u n g 1 2 % g e l a t i n . B i a k a n d i i n k u b a s i p a d a s u h u 3 7 ' ' C
s e l a m a 2 4 j a m , k e m u d i a n d i d i n g i n k a n p a d a s u h u 4°C s e l a m a 3 0 m e n i t . A p a b i l a b i a k a n
tetap cair, gelatinase p o s i t i f . B i l a m e d i a d a l a m t a b i m g k e m b a l i m e n j a d i padat, gela-
t i n a s e n e g a t i f . Bacilius cereus m e m b e r i k a n r e a k s i p o s i t i f
Uji redulisi nitrat

D a r i b i a k a n m u m i nutrient agar m i r i n g , d i i n o k u l a s i k a n 1 s e n g k e l i t k e d a l a m m e d i a
nitrate broth. B i a k a n d i i n k u b a s i p a d a s u h u 3TC s e l a m a 2 4 j a m , k e m u d i a n d i t a m -
bahkan pereaksi nitrat ( 0 , 5 - 1 m l lamtan a-naftilamm dan 0,5-1 m l asam sulfanilat).
Jika timbul w a m a jingga sampai merah, biakan m e n u n j u k k a n reduksi nitrat positif.
Bacilius cereus m e m b e r i k a n r e a k s i p o s i t i f
Uji voges prosliauer

D a r i b i a k a n m u m i nutrient agar m i r i n g , d i i n o k u l a s i k a n 1 s e n g k e l i t k e d a l a m me<
voges proskauer. B i a k a n d i i n k u b a s i p a d a s u h u 3TC s e l a m a 2 4 - 4 8 j a m . S e b a n y a k 0 , 6
ii
m l l a m t a n a - n a f t o l dan 0,2 m l l a m t a n k a l i u m hidroksid a 4 0 % d i t a m b a h k a n k e d a l a m
1 m l biakan d a n didiamkan selama 2 - 4 j a m . W a m a merah m u d a hingga merah
m e n u n j u k k a n r e a k s i p o s i t i f . Bacilius cereus m e m b e r i k a n r e a k s i p o s i t i f .
I d e n t i f i k a s i b a k t e r i Vibrio parahaentolyticus
U j i b a k t e r i Vibrio parahaemolyticus b i a s a n y a d i l a k u k a n u n t u k p e m e r i k s a a n k u a l i t a s
dan j a m i n a n m u t u produk makanan dan m i n u m a n . Sampel yang akan diuji d i h o m o -
g e n k a n d e n g a n l a m t a n m e d i a alkalinepeptone water d a n d i i n k u b a s i p a d a s u h u 3TC
selama 2 4 j a m . P e n a n a m an d i l a k u k a n dari biakan i n i dengan cara digoreskan pada
m e d i a s e l e k t i f thiosulphate citrate bile salt sucrose ( T C B S ) agar, k e m u d i a n d i i n k u - ;
b a s i p a d a s u h u 37°C s e l a m a 2 0 - 2 4 j a m . Vibrio parahaemolyticus a k a n t u m b u h s e b a - ;
gai k o l o n i bulat berdiameter 2 - 3 m m , dengan w a m a hijau atau b i m di bagian tengah \
koloni. Selanjutnya, dilakukan u j i konfirmasi terhadap k o l o n i dugaan, y a n g m e l i p u t i
penanaman pada m e d i a T S I A , u j i fermentasi karbohidrat, u j i m o t i l i t a s, u j i sifat h a l o -
p i k , u j i d e k a r b o k s l l a s i l i s i n , u j i p e r t u m b u h a n p a d a s u h u 42°C, d a n p e w a m a a n G r a m .
Penanaman pada media triple sugar Iron agar (TSIA)

K o l o n i d u g a a n d i i n o k u l a s i k a n d e n g a n c a r a d i g o r e s k a n p a d a p e r m u k a a n d a n ditusi3P?
k a n hingga dasar tabung y a n g berisi m e d i a T S I A , k e m u d i a n d i i n k u b a s i pada s u h u i
37°C s e l a m a 2 4 j a m . Vibrio parahaemolyticus m e n y e b a b k a n p e r m u k a a n m e d i a m e n - ^
j a d i m e r a h dan bagian dasar m e d i a b e r w a m a k u n i n g (asam), tetapi tidak menghasil-
k a n gas a t a u H ^ S .
Uji fermentasi karbohidrat

K o l o n i d u g a a n d i i n o k u l a s i k a n p a d a s e j u m l a h m e d i a peptone sugar broth, y a n g
masing-masing ditambahkan sukrosa, maltosa, d a n manitol, k e m u d i a n diinkubasi
p a d a s u h u 37**C s e l a m a 2 4 j a m . W a m a k u n i n g m e n u n j u k k a n t e r b e n t u k n y a a s a m , y a n g
berarti terjadi proses fermentasi.
Ba b 17 - Analisis Ke a ma na n Sediaan Farmasi 285^
Vibrio parahaemolyticus d a p a t m e m f e r m e n t a s i m a l t o s a d a n m a n i t o l , t e t a p i t i d a k
memfermentasi sukrosa.
Uji motilitas
K o l o n i dugaan d i i n o k u l a s i k a n dengan cara d i t u s u k k a n k e d a l a m m e d i a m o t i l i t a s ,
k e m u d i a n d i i n k u b a s i p a d a s u h u 37°C s e l a m a 2 4 j a m . D i a m a t i a d a n y a d i f u s i p e r t u m -
b u h a n d i s e k i t a r t u s u k a n . Vibrio parahaemolyticus m e r u p a k a n b a k t e r i y a n g m o t i l
(bergerak).
Uji sifat liaiofiiili

K o l o n i d u g a a n d i i n o k u l a s i k a n k e d a l a m 4 t a b u n g b e r i s i m e d i a salt trypticase broth
y a n g masing-masing mengandun g 0 % , 6 % , 8%, dan 1 0 % N a C l , k e m u d i a n diinkubasi.
Vibrio parahaemolyticus t u m b u h p a d a m e d i a y a n g m e n g a n d u n g 6 % d a n 8 % N a C l ,
tetapi tidak t u m b u h pada media y a n g mengandung 0 % dan 1 0 % N a C l .
Uji dekarboiisiiasi lisin

K o l o n i d u g a a n d i i n o k u l a s i k a n p a d a m e d i a lysine decarboxylase broth d a n d i i n k u b a s i
pada suhu 37"C s e l a m a 4 hari . Pengamata n d i l a k u k a n setiap h a r i . A p a b i l a terjadi
d e k a r b o k s l l a s i , m e d i a a k a n b e r w a r n a u n g u . Vibrio parahaemolyticus m e m b e r i k a n
reaksi positif
Uji pertumbulian pada Suhu 42?C

K o l o n i d u g a a n d i i n o k u l a s i k a n p a d a m e d i a trypticase soy broth d a n d i i n k u b a s i p a d a
s u h u 4 2 ' ' C s e l a m a 2 4 j a m . Vibrio parahaemolyticus d a p a t t u m b u h p a d a s u h u t e r -
sebut.
Pewarnaan Gram
Vibrio parahaemolyticus m e r u p a k a n b a k t e r i G r a m - n e g a t i f y a n g b e r b e n t u k k o m a a t a u
batang.
I d e n t i f i k a s i b a k t e r i Vibrio cholerae
U j i b a k t e r i Vibrio cholerae b i a s a n y a d i l a k u k a n u n t u k p e m e r i k s a a n k u a l i t a s d a n j a -
m i n a n m u t u produk makanan dan m i n u m a n .
S a m p e l y a n g t e l a h d i h o m o g e n k a n d e n g a n l a r u t a n m e d i a alkaline peptone water
d i i n k u b a s i p a d a s u h u 37°C s e l a m a 6 j a m . S a t u s e n g k e l i t ( b e r d i a m e t e r 5 m m ) d i i n o k u -
l a s i k a n p a d a m e d i a thiosulphate citrate bile salt sucrose ( T C B S ) agar, k e m u d i a n
d i i n k u b a s i pada suhu 37"C selama 1 8 - 2 4 j a m . D i a m a t i p e r t u m b u h a n k o l o n i besar
d e n g a n d i a m e t e r 2 - 3 m m , halus, b e r w a m a k u n i n g , datar, bagian t e n g a h k e r u h d a n
b e n i n g d i s e k e l i l i n g n y a . K o l o n i y a n g d i d u g a Vibrio cholerae d i i n o k u l a s i k a n p a d a
m e d i a nutrient agar m i r i n g d a n d i i n k u b a s i p a d a s u h u 37°C s e l a m a 2 4 j a m .
Selanjutnya, dilakukan u j i konfirmasi terhadap k o l o ni dugaan, yang meliputi
penanaman pada m e d i a T S I A , uji oksidase, uji fermentasi karbohidrat, uji motilitas,
dan p e w a m a a n G r a m .
Penanaman pada media tripie sugar iron agar (TSIA)

p a d a m e d i a T S I A , k e m u d i a n d i i n k u b a s i p a d a s u h u 3TC s e l a m a 2 4 j a m . B i a k a n Vibrio
cholerae a k a n b e r w a m a k u n i n g d i p e r m u k a a n d a n d i d a s a r t a b u n g t a n p a p e m b e n t u k a n
gas H . S .
UJI oksidase
Kertas saring ( 6 x 6 c m ) disiapkan di dalam cawan petri. Bagia n tengah kertas diberi •
3 tetes p e r e a k si t e t r a m e t i l p a r a f e n i l e n d i a m i n . S e l a n j u t n y a , satu sengkeli t b i a k a n
d i a m b i l d a r i b i a k a n nutrient agar m i r i n g d a n d i t o t o l k a n p a d a b a g i a n k e r t a s s a r i n g
y a n g sudah j e n u h dengan pereaksi sepanjang 3 - 6 m m . Pembentukan w a m a u n g u tua
y a n g c e p a t m e n u n j u k k a n r e a k s i p o s i t i f . Vibrio cholerae m e m b e r i k a n r e a k s i o k s i d a s e •
positif
Uji fermentasi karbohidrat j | |

S a t u s e n g k e l i t b i a k a n d i a m b i l d a r i b i a k a n nutrient agar m i r i n g d a n d i i n o k u l a s i k m T ^
p a d a s e j u m l a h m e d i a peptone sugar broth y a n g m a s i n g - m a s i n g d i t a m b a h k a n g l u k o s a ,
s u k r o s a , m a n o s a , d a n m a n i t o l . S e l a n j u t n y a , d i i n k u b a s i p a d a s u h u 3TC s e l a m a 4 - 5
hari d a n d i a m a t i setiap hari. M u n c u l n y a w a m a k u n i n g m e n u n j u k k a n t e r b e n t u k n y a
a s a m , y a n g b e r a r t i t e r j a d i p r o s e s f e r m e n t a s i . Vibrio cholerae d a p a t m e m f e r m e n t a s i
glukosa, sukrosa, manosa, dan manitol.
Uji motilitas
dengan cara ditusukkan k e dalam media motilitas, k e m u d i a n dimkubasi pada suhu
37°C s e l a m a 1 8 - 2 4 j a m . A d a n y a p e r t u m b u h a n m e n y e b a r d i a m a t i d i s e k i t a r t u s u k a n .
Vibrio cholerae m e n u n j u k k a n m o t i l i t a s p o s i t i f .
Pewarnaan Gram
Vibrio cholerae m e m p a k a n b a k t e r i G r a m - n e g a t i f , y a n g b e r b e n t u k b a t a n g b e n g k o k .
I d e n t i f i k a s i Cattdida albicans
P e m e r i k s a a n Candida albicans b i a s a n y a d i l a k u k a n t e r h a d a p p r o d u k - p r o d u k k o s m e -
tika.
Bahan pemeriksaan yang akan diuji dihomogenkan dan diencerkan dengan peng-
e n c e r a n 1 : 1 0 . D a r i h a s i l p e n g e n c e r a n s a m p e l 1:10 i n i , d i p i p e t s e b a n y a l 1 0 m l , 1 m l ,
dan 0,1 m l , dan d i m a s u k k a n k e dalam 3 buah wada h y a n g masing-masing berisi 4 0
m l , 1 0 m l , d a n 1 0 m l m e d i a sabouraud dextrose broth ( S D B ) . B i a k a n d i i n k u b a s i p a d a
s u h u 20-25°C s e l a m a 4 8 j a m . K o l o n i y a n g t u m b u h d e n g a n c i r i - c i r i p u t i h k e k u n i n g a n
dengan tepi y a n g tidak rata d i a m b i l untuk u j i m i k r o s k o p is dan pengamatan m o r f o l o g i
k o l o n i d a n b e n t u k k l a m i d o s p o r a C . albicans.
B a b 17 - Analisis K e a m a n a n S e dia a n F a rma si 287
Pengamatan klamidospora
Koloni yang diduga sebagai koloni Candida alhicans pada media sabourauddextrose
broth diambil dan diinokulasikan ke dalam cawan petri yang berisi media corn meal
agar (CMA). Inokulasi dilakukan dengan membuat 2 goresan pada media perbenihan
corn meal agar (CMA), masing-masing sepanjang 3,5 cm dan berjarak 1,2 cm.
Goresan melintang terhadap kedua goresan tersebut kemudian dibuat dari koloni yang
telah diencerkan dengan NaCl 0,9%. Perpotongan keempat goresan ditutup dengan
kaca penutup steril berukuran 22 x 22 mm. Uji kontrol dengan Candida alhicans
pembanding dibuat pada salah satu sektor media corn meal agar (CMA) pada cawan
petri yang sama. Cawan petri diinkubasi pada suhu 22-25°Cselama 48 jam. Tutup
cawan petri dibuka, kemudian biakan diamati langsung tanpa membuka kaca penutup
dengan menggunakan mikroskop pembesaran 10 dan 40 kali.
Ciri-ciri mikroskopis Candida albicans adalah berbentuk bulat telur, berkelompok,
satu-satu, atau berderet-deret. Candida albicans dapat membentuk pseudomiselia,
yaitu sel yang memanjang, dan membentuk blastospora, yaitu spora bulat pada bagian
ujung sel. Candida albicans membentuk klamidospora, yaitu sel yang membesar dan
berdinding tebal. Jika dibiakkan pada serum manusia atau hewan dan diinkubasi pada
suhu kamar selama 3-5 jam, C albicans akan membentuk germ tube, yaitu tunas me-
nonjol panjang yang keluar dari sel.
PENGUJIAN STERILITAS SEDIAAN FARMASI

DAN ALAT KESEHATAN
Uji sterilitas adalah suatu pengujian yang dilakukan untuk mengetahui ada tidaknya
mikroorganisme hidup atau yang mempunyai daya hidup dalam suatu sediaan yang
telah disterilkan.
Pengujian sterilitas dilakukan terhadap sediaan farmasi dan alat kesehatan yang
pada kemasannya ditandai dengan tulisan STERIL. Sediaan farmasi tersebut antara
lain sebagai berikut.
• Sediaan yang disuntikkan, misalnya obat suntik dan infus.
• Sediaan obat mata steril, misalnya tetes mata dan salep mata.
• Sediaan bedak tabur steril.
• Sediaan tablet impian.
• Sediaan larutan steril.
• Alat kesehatan untuk tindakan bedah, misalnya benang bedah, kapas steril, kasa
steril, dan peralatan steril lain.
Prinsip uji sterilitas adalah menginokulasikan atau membiakkan mikroorganisme
yang terdapat di dalam sediaan uji pada media perbenihan yang sesuai. Uji sterilitas
sediaan yang sering digunakan adalah sebagai berikut.
1. Pengujian secara langsung
Pengujian ini dilakukan dengan menginokulasikan sediaan yang akan diuji ke da-
lammedia perbenihan yang sesuai secara aseptis. Sediaan yang dapat diuji dengan
cara ini antara lain sebagai berikut.
C 288 Buku Ajar Mikrobiologi: Panduan Mahasiswa Farmasi dan Kedokteran
a. Sediaan yang bervolume kurang dari 10 ml.

b. Sediaan yang tidak mengandung antibiotik atau antimikroba. Apabila sediaan
mengandung antimikroba, antimikroba tersebut harus diinaktifkan terlebih da-
hulu dengan larutan inaktivator.
2. Pengujian dengan penyaringan menggunakan filter yang sesuai
Pengujian ini dilakukan dengan menyaring larutan sediaan melalui suatu membran
yang sesuai, kemudian meletakkan membran tersebut pada media perbenihan yang
sesuai secara aseptis.
Sediaan yang dapat diuji dengan cara ini antara lain sebagai berikut.
a. Sediaan larutan bervolume besar, misalnya cairan infus.
b. Serbuk yang dapat larut.
c. Sediaan lemak/minyak.
d. Sediaan bervolume lebih dari 10 ml.
e. Sediaan yang mengandung antibiotik dan antimikroba.
Penyiapan sampel
Berikut ini diuraikan beberapa hal yang sangat perlu diperhatikan dalam penyiapan
sampel untuk pengujian sterilitas suatu sediaan.
Jumlah sampel
Jumlah sampel yang diperlukan dalam setiap pengujian disesuaikan dengan yang
tertera pada Tabel 17.3.
Volume sampel yang diinokulasikan
Volume sampel dari tiap wadah yang harus diinokulasikan ke dalam media disesuai-
kan dengan yang tertera pada Tabel 17.4.
Sediaan yang mengandung bahan pengawet
Jika sediaan mengandung bahan pengawet, dilakukan percobaan pendahuluan untuk
mendapatkan volume media yang sesuai agar daya pengawet tidak menghambat per-
tumbuhan mikroorganisme.
Mikroba uji yang digunakan untuk uji daya pengawet adalah sebagai berikut.
• Bacillus subtilis ATCC 6633.
• Bacteroides vulgatus ATCC 8482.
• Candida albicans ATCC 10231.
I j a be i 17.3. Jumla h Sampel untuk Pengujian Sterilitas Sediaan
Jumla h wa da h dalam tiap bets Jumla h sa mpe l uji
< 100 10% atau 4. diambil yang lebih besar

>100-500 10
>500 2 % atau 20. diambil yang lebih kecil
Tabel 17.4. V olume S a mpe l da n Volume Media ya ng D iguna ka n untuk Uji
^Sterilitas
Volume me dia cair V olume me dia cair

V olume se dia a n V olume sa mpe l FTM da la m tia p TSB da la m tiap
pada tia p wa da h ya ng diinokula sika n ta bung ta bung
< 1 ml Seluruh isi wadah 15 ml 15 ml
1 - 1 0 ml 1 ml 15 ml 15 ml
1 0 - < 5 0 ml 5 ml 40 ml 40 ml
5 0 - < 1 0 0 ml 10 ml 80 ml 80 ml
Volume sampel dan volume media yang dipakai pada cara penyaringan
5 0 - < 1 0 0 ml Seluruh isi wadah 100 ml 100 ml
1 0 0 - 5 0 0 ml Seluruh isi wadah 100 ml 100 ml
> 500 ml 500 ml 100 ml 100 ml
FTM = fluidthioglycollate medium

TSB = Trypticasesoybroth
Inokulum ketiga mikroba uji tersebut dibuat dengan konsentrasi mikroba 100-1000
sel/ml. Bacillus subtilis ATCC 6633 dan Bacteroides vulgatus ATCC 8482 digunakan
untuk fluid thioglycollate medium, sedangkan suspensi Candida albicans ATCC
10231 digunakan untuk media trypticase soy broth.
Sediaan yang akan diuji diencerkan dalam sejumlah pengenceran bertingkat, mi-
salnya dengan melakukan pengenceran 2kali, 4kali, 8kali, dan 16 kali, yang dise-
suaikan dengan dosis pengawet. Setelah itu, setiap hasil pengenceran sampel tersebut
dimasukkan kedalam media trypticase soy broth dan fluid thioglycollate medium
yang telah disiapkan. Volume media dapat dilihat pada Tabel 17.4. Jumlah tabung
media trypticase soy broth dan fluid thioglycollate medium disesuaikan dengan jumlah
tabung hasil pengenceran sampel.
Sebanyak 0,1 ml suspensi mikroba uji diinokulasikan ke dalam masing-masing
tabung. Seluruh tabung diinkubasi selama 7hari pada suhu 35°Cuntuk fluid thiogly-
collate medium dan25°Cuntuk trypticase soybroth. Diamati adanya pertumbuhan
mikroba uji dalam tabung percobaan. Pertumbuhan mikroba pada pengenceran sam-
pel yang terendah dicatat. Dengan mengetahui faktor pengenceran sampel, dapat
diketahui volume media yang dapat menginaktifkan daya pengawet dalam sampel.
Volume inilah yang akan digunakan untuk penetapan sterilitas sediaan selanjutnya.
Sediaan yang bersifat bakteriostatili dan fungistatik
Pengujian sterilitas sediaan antibiotik yang bersifat sebagai bakteriostatik dan fungi-
statik tidak dapat dilakukan dengan penyaringan. Karena itu, daya menghambat
pertumbuhan bakteri atau jamur harus diinaktifkan terlebih dahulu dengan meng-
gunakan suatu inaktivator, yaitu senyawa kimia atau enzim.
Mikroba uji yang digunakan untuk uji inaktivasi bakteriostatik dan fungistatik
• Bacillus subtilis ATCC 6633.

• Candida alhicans ATCC \023\.
• Escherichia coli ATCC 10536.
• Pseudomonas aeruginosa ATCC 10940.
• Staphylococcus aureus ATCC 653S.
Inoivulum mikroba-mikroba uji tersebut dibuat dengan konsentrasi 100-1000 sel
mikroba/ml. Bacillus subtilis ATCC 6633, Escherichia coli ATCC 10536. Pseudomonas
aeruginosa ATCC 10940, dan Staphylococcus aureus ATCC"6538 digunakan untuk
fluid thioglycollate medium, sedangkan suspensi Candida albicans ATCC 10231 di-
gunakan untuk media trypticase soy broth. Disiapkan sejumlah tabung yang masing-
masing berisi 15 m\ fluid thioglycollate medium (FTM) dan sejumlah tabung yang
masing-masing berisi 15 ml trypticase soy broth (TSB).
Sampel yang akan diuji diencerkan dengan pengenceran yang disesuaikan dengan
dosis bakteriostatik atau fungistatik sampel tersebut. Setelah itu, larutan inaktivator
dengan dosis tertentu ditambahkan pada setiap pengenceran sampel, kemudian di-
diamkan. Sebagai contoh, jika yang akan diuji adalah antibiotik golongan penilisin,
larutan inaktivator yang ditambahkan adalah enzim penisilinase.
Setelah 15 menit masa inaktivasi, sebanyak 1ml campuran diambil dari masing-
masing tabung dan dimasukkan ke dalam media FTM dan media TSB. Selanjutnya,
sebanyak 0,1 ml suspensi mikroba uji diinokulasikan ke dalam tabung percobaan ter-
sebut. Percobaan ini dilakukan beberapa kali, tetapi dengan variasi masa inaktivasi,
yaitu 30, 60, 90, dan 120 menit.
Seluruh tabung diinkubasi selama 7 hari pada suhu 35"C untuk fluid thioglycollate
medium dan 25"C untuk trypticase soy broth.
Diamati adanya pertumbuhan pada tabung percobaan dengan dosis yang tertinggi
dan masa inkubasi tertentu, yang berarti mikroba masih dapat hidup. Dosis yang dida-
pat merupakan dosis yang digunakan untuk penetapan selanjutnya.
Fertilitas media yang digunakan
Uji fertilitas media perlu dilakukan untuk mengetahui apakah media yang digunakan
dalam uji sterilitas cukup baik dan layak digunakan.
Empat tabung berisi fluid thioglycollate medium (FTM) dan dua tabung berisi
trypticase soy broth (TSB) disiapkan. Sebanyak 0,1 ml suspensi inokulum Bacillus
subtilis (1000 spora hidup/ml) diinokulasikan ke dalam 2 tabung FTM dan sebanyak
0,1 ml suspensi Bacteroides vulgatus (1000 sel/ml) diinokulasikan ke dalam 2 tabung
FTM lainnya. Ke dalam 2 tabung TSB, diinokulasikan suspensi Candida albicans
(1000 sel/ml). Seluruh tabung diinkubasi selama 7 hari pada suhu 35"C untuk fluid
thioglycollate medium dan 25°Cuntuk trypticase soy broth. Pengujian ini dilakukan
bersamaan dengan pengujian sterilitas sampel.
Sterilitas media
Uji sterilitas media dilakukan untuk menjamin bahwa media yang digunakan benar-
benar steril. Sebuah tabung berisi fluid thioglycollate medium dan sebuah tabung
berisi trypticase soy broth dari bets yang sama dengan yang akan digunakan untuk
pengujian sterilitas sampel diinkubasi pada suhu dan waktu yang sama dengan media
yang digunakan untuk uji sterilitas.
Pengujian
Pengujian sterilitas secara langsung
Pada dasarnya, pengujian ini dilakukan dengan secara langsung menginokulasikan
sediaan yang akan diuji ke dalam fluid thioglycollate medium dan trypticase soy broth.
Perlu diperhatikan bahwa setiap sampel membutuhkan penanganan yang berbeda
sesuai dengan bentuk dan jenis sampel.
Pengujian sterilitas sampel biasanya digolongkan berdasarkan bentuk sampel, se-
bagaimana akan dibahas berikut ini.
S a mpe l be rbe ntuk ca ira n
Sejumlah volume sampel yang akan diuji diambil, sesuai dengan Tabel 17.4, secara
aseptis menggunakan pipet steril atau jarum suntik dan diinokulasikan ke dalam
tabung yang berisi fluid thioglycollate medium dantabung yang berisi trypticase soy
broth. Campuran dihomogenkan dengan hati-hati. Selanjutnya, inkubasi dilakukan
selama 14 hari pada suhu SS^'Cuntuk fluid thioglycollate medium danpada suhu 25°C
untuk trypticase soy broth. Pengamatan dilakukan setiap hari sesering mungkin secara
visual, dimulai pada hari ke-3 sampai hari terakhir.
Bila sampel yang diuji menyebabkan media menjadi keruh atau tidak ada pertum-
buhan mikroorganisme antara hari ke-3dan ke-7sejak pengujian dimulai, sejumlah
tertentu dari perbenihan tersebut dipindahkan ke dalam tabung berisi media yang
baru. Perbenihan pertama dan perbenihan yang baru diinkubasi selama tidak kurang
dari 7 hari sejak dilakukan pemindahan kedua dan selama total waktu tidak kurang
dari 14 hari.
S a mpe l be rbe ntuk pa da t
Sejumlah tertentu sediaan uji dalam bentuk padat atau yang terlebih dahulu dibuat
larutan atau suspensi dalam larutan pengencer atau pendispersi yang sesuai, yaitu
tidak kurang dari 300mgsampel dari setiap wadah atau seluruh isi wadah jika sampel
kurang dari 300 mg, disiapkan, kemudian diinokulasikan dalam fluid thioglycollate
medium dantrypticase soy broth, yang masing-masing bervolume 40ml, dan dihomo-
genkan dengan hati-hati. Selanjutnya, inkubasi dilakukan selama 14 hari pada suhu
35°Cuntuk fluid thioglycollate medium dan pada suhu 25°Cuntuk trypticase soy
broth. Pengamatan dilakukan seperti pada pengamatan sampel berbentuk cairan.
S a m p e l b e r b e n t u k sa le p, m i n y a k , a ta u le ma k y a n g tida k la rut d a l a m
isopropil mirista t
Sampel dibagi dalam duakelompok yang masing-masing terdiri atas 10wadah. Dari
kesepuluh wadah tersebut, diambil danditimbang masing-masing sebanyak 100 mg.
' 292 B u k u A j a r M i k r o b i o l o g i : P a n d u a n M a ha siswa F a r m a s i d a n K e d o k t e r a n
kemudian dimasukkan ke dalam 100 ml larutan pendispersi dan dikocok hingga ho-
mogen. Larutan pendispersi disesuaikan dengan sampel dan tidak bersifat antimi-
kroba. Sebanyak 10 ml suspensi dimasukkan ke dalam 80 ml media trypticase soy
broth dan 80 ml fluid thioglycollate medium, kemudian dihomogenkan dengan hati-
hati. Selanjutnya, inkubasi dilakukan selama 14 hari pada suhu 35°Cuntuk fluid
thioglycollate medium dan pada suhu 25°Cuntuk trypticase soy broth. Pengamatan
dilakukan seperti pada pengamatan sampel berbentuk cairan.
Ka pa s, pe rba n, pe mba lut, be na ng be da h, da n se je nisnya
Kira-kira 100-500 mg sampel dari bagian paling luar dan bagian paling dalam dari
bahan yang akan diuji atau keseluruhan bahan yang akan diuji jika ukurannya kecil
diambil secara aseptis. Sampel kemudian dimasukkan ke dalam fluid thioglycollate
medium dan trypticase soy broth, dan dihomogenkan dengan hati-hati. Selanjutnya,
inkubasi dilakukan selama 14 hari pada suhu 35°Cuntuk fluid thioglycollate medium
dan pada suhu 25°Cuntuk trypticase soy broth. Pengamatan dilakukan seperti pada
pengamatan sampel berbentuk cairan.
P e r a l a t a n ste ril
Apabila bentuk dan ukurannya memungkinkan, alat-alat dimasukkan secara keselu-

ruhan ke dalammedia sebanyak tidak lebih dari 1000 ml, kemudian diinkubasi. Untuk
alat-alat yang berlubang, seperti alat transfusi dan infus, atau alat-alat yang bentuknya
tidak memungkinkan untuk memakai cara perendaman, hanya saluran yang dilalui
cairan yang harus steril. Lubang dan saluran alat yang diuji, masing-masing sebanyak
20 alat, dibilas dengan tidak kurang dari 15 ml fluid thioglycollate medium dan
trypticase soy broth. Bilasan kemudian diinokulasikan ke dalam 100 ml fluid thio-
glycollate medium dan 100 ml trypticase soy broth. Biakan dikocok sampai homogen.
Selanjutnya, inkubasi dilakukan selama 14 hari pada suhu 35°Cuntuk fluid thiogly-
collate medium dan pada suhu 25°Cuntuk trypticase soy broth. Pengamatan dilakukan
seperti pada pengamatan sampel berbentuk cairan.
Untuk peralatan yang lubang atau lumen salurannya sangat kecil sehingga larutan
fluid thioglycollate medium tidak dapat mengalir, digunakan alternative thioglycollate
medium. Selanjutnya, inkubasi dilakukan secara anaerob.
A l a t s u n t i k ste ril a t a u a l a t s u n t i k sia p p a k a i
Pengujian alat suntik siap pakai yang terpasang jarum steril dilakukan dengan mem-
bilas rongga alat dengan media nutrient broth sesuai dengan volume alat suntik.
Apabila alat suntik dikemas dengan jarum terpisah, jarum dipasang secara aseptis
pada alat suntik, kemudian dibilas dengan nutrient broth. Setelah itu, cairan pembilas
dimasukkan ke dalam fluid thioglycollate medium dan trypticase soy broth. Biakan
dikocok sampai homogen. Selanjutnya, inkubasi dilakukan selama 14 hari pada suhu
35°Cuntuk fluid thioglycollate medium dan pada suhu 25°Cuntuk trypticase soy
broth. Pengamatan dilakukan seperti pada pengamatan sampel berbentuk cairan.
B a b 17 - Analisis K e a m a n a n S e dia a n F a rma s i 293j
Pengujian sterilitas dengan penyaringan

Pengujian sterilitas dengan cara penyaringan menggunakan membran filter yang
mempunyai ukuran pori-pori 0,45 jamdan garis tengah 47 mm. Kecepatan aliran
larutan 55sampai 75ml/menit pada tekanan 70 cmHg.
Ada tiga jenis membran filter, yaitu sebagai berikut.
• Membran hidrofilik.
• Membran hidrofobik.
• Membran hidrofilik-hidrofobik.
Untuk beberapa jenis sediaan, biasanya dilakukan pembilasan membran filter setelah
penyaringan sediaan. Larutan pembilas yang digunakan untuk membilas membran
filter adalah sebagai berikut.
• Larutan A, yaitu larutan pepton 0,1%. Larutan ini digunakan untuk larutan air.
• Larutan D, yaitu larutan pepton 0,1%danTween 800,1%. Larutan ini digunakan
untuk larutan yang mengandung minyak/lemak.
• Larutan K, yaitu larutan pepton 0,5%, ekstrak daging sapi 0,3%{beef extract
0,3%), dan polisorbat 80 1%. Larutan ini digunakan untuk larutan selain lemak/
minyak, contohnya petrolatum.
Pengujian sterilitas dengan cara penyaringan pada dasarnya dapat digunakan untuk
pengujian sterilitas sediaan yang berbentuk larutan atau serbuk yang dapat larut dalam
larutan pengencer.
S a m p e l b e r b e n t u k c a i r a n y a n g d a p a t b e r c a m p u r d e n g a n a ir
Sejumlah volume tertentu sediaan uji berbentuk cairan yang dapat bercampur dengan
pembawa air, misalnya larutan infus atau obat suntik, disaring melalui satu atau dua
membran terpisah, dibantu dengan pompa vakum. Salah satu membran atau setengah
bagian membran, apabila hanya digunakan satu membran, dimasukkan secara aseptis
ke dalam 100ml fluid thioglycollate medium, kemudian diinkubasi pada suhu 35*'C
selama tidak kurang dari 7 hari. Membran atau setengah bagian yang satu lagi dima-
sukkan ke dalam trypticase soy broth, kemudian diinkubasi pada suhu 25"Cselama
tidak kurang dari 7 hari.
Apabila sediaan yang akan diuji bersifat bakteriostatik atau fungistatik, membran
dibilas sebanyak tiga kali dengan 100 ml Larutan A setelah penyaringan. Setelah di-
bilas, membran dimasukkan kedalam media perbenihan seperti cara di atas.
S a m p e l b e r u p a c a i r a n y a n g t i d a k b e r c a m p u r d e n g a n p e m b a w a a ir
Sejumlah volume tertentu, tidak kurang dari 20wadah atau 40wadah jika volume se-
diaan sedikit, disaring melalui satu atau duabuah membran terpisah. Jika sediaan uji
berupa cairan kental yang sulit disaring, larutan pengencer yang steril dapat di-
tambahkan secukupnya untuk menambah kecepatan aliran penyaringan. Bila sediaan
uji bersifat bakteriostatik atau mengandung zat pengawet, membran dibilas sebanyak
294 B u k u A j a r M i k r o b i o l o g i: P a n d u a n M a ha siswa F a rma si d a n K e d o k t e r a n
tiga kali dengan 100 ml Larutan A setelah penyaringan. Bila sediaan mengandung
lesitin atau minyak, cairan pembilas yang dipakai adalah Larutan D. Selanjutnya,
membran diperlakukan seperti pada prosedur sediaan cairan yang dapat bercampur
dengan pembawa air.
S a m p e l b e r u p a sa le p d a n m i n y a k y a n g l a rut d a l a m i s o p r o p i l m i r i s t a t
Disiapkan 20 wadah sediaan uji atau 40 wadahjika isinya sedikit. Dari masing-masing
wadah, diambil paling sedikit 100 mg, kemudian dilarutkan dalam paling sedikit 100
ml larutan isopropil miristat yang telah disterilkan dengan penyaringan menggunakan
membran 0,22 |im, pH 6,5. Bila diperlukan, sediaan dihangatkan pada suhu 45°C
selama 15 menit, kemudian disaring melalui membran filter dengan bantuan pompa
vakum. Setelah penyaringan, membran dicuci dua kali dengan 200 ml Larutan D,
kemudian dibilas sekali lagi dengan 100 ml Larutan A. Selanjutnya, membran diper-
lakukan seperti pada prosedur sediaan cairan yang dapat bercampur dengan pembawa
air.
Bila sediaan uji mengandung vaselin (petrolatum), cairan pembilas yang digunakan
adalah Larutan K. Sebelum penyaringan, membran dibasahi dengan kira-kira 200 ml
cairan pembilas. Setelah penyaringan, membran dibilas tiga kali dengan 100 ml cairan
pembilas. Selanjutnya, membran diperlakukan seperti pada prosedur sediaan cairan
yang dapat bercampur dengan pembawa air.
P e ra la ta n y a n g be rl uba ng
Sterilitas peralatan yang mempunyai bagian berupa saluran atau lumen steril dapat
diuji dengan cara mengalirkan sejumlah tertentu Larutan D ke dalam saluran alat
yang akan diuji tersebut, yaitu masing-masing 100 ml untuk paling sedikit 20 alat.
Cairan bilasan dikumpulkan dan disaring melalui membran filter menurut prosedur
untuk sampel cairan yang dapat bercampur dengan air.
Penafsiran hasil uji
Tahap pertama
Setelah interval waktu tertentu dan akhir masa inkubasi, pertumbuhan mikroorga-
nisme diamati pada semua wadah. Pertumbuhan ditandai dengan terjadi kekeruhan
atau pertumbuhan pada permukaan media. Jika tidak terjadi pertumbuhan, sampel
dinyatakan memenuhi syarat. Apabila ditemukan pertumbuhan mikroorganisme, se-
diaan uji dinyatakan tidak memenuhi syarat sterilitas, kecuali dapat dibuktikan dengan
pengujian ulang atau dengan cara lain bahwa pengujian tidak memenuhi syarat.
Sebagai contoh, jika pertumbuhan mikroorganisme terbukti disebabkan oleh penyiap-
an sampel dan teknik pengujian yang kurang aseptis, pengujian dapat diulang pada
tahap kedua.
T a ha p ke dua
Jumlah sampel yang diambil untuk uji tahap kedua minimal 2 kali jumlah tahap per-
tama. Volume yang diuji dari sediaan uji dan volume media sama dengan pengujian
tahap pertama. Jika tidak terdapat pertumbuhan mikroorganisme, sediaan uji dinya-
takan memenuhi syarat sterilitas. Jika ditemukan pertumbuhan mikroorganisme, hasil
yang diperoleh membuktikan bahwa sampel uji tidak memenuhi syarat.
PENGUJIAN POTENSI AN T I BI O T I K
Antibiotik adalah suatu senyawa yang dihasilkan oleh mikroorganisme yang pada
konsentrasi rendah dapat memusnahkan atau menghambat pertumbuhan mikroorga-
nisme lain. Pengujian potensi antibiotik dilakukan untuk memberikan jaminan bahwa
kualitas dan mutu antibiotik yang digunakan dalampengobatan memenuhi persyaratan
yang telah ditentukan.
Prinsip penetapan potensi antibiotik dalam sediaan obat adalah membandingkan
dosis larutan sediaan uji terhadap dosis larutan baku pembanding yang menghasilkan
derajat hambatan yang sama pada mikroorganisme uji.
Pada umumnya, pengujian potensi antibiotik secara mikrobiologi menggunakan
dua metode, yaitu metode tabung atau turbidimetri dan metode lempeng silinder atau
difusi agar.
Metode turbidimetri
Prinsip metode ini adalah berdasarkan hambatan pertumbuhan biakan mikroorga-
nisme dalam media cair yang mengandung larutan antibiotik. Pada metode ini, mikro-
organisme uji yang sesuai diinokulasikan ke dalam media cair yang mengandung
antibiotik di dalam tabung. Kemampuan antibiotik menghambat pertumbuhan mikro-
organisme uji ditunjukkan dengan kekeruhan media pada tabung uji. Kekeruhan
media dalam tabung uji dengan kekeruhan media dalam tabung antibiotik baku pem-
banding merupakan rasio potensi antibiotik.
Metode lempeng silinder
Prinsip metode ini adalah membandingkan zona hambatan pertumbuhan mikroorga-
nisme uji oleh dosis senyawa antibiotik yang diuji terhadap zona hambatan oleh dosis
antibiotik baku pembanding pada media lempeng agar. Metode ini dilakukan dengan
menginokulasikan mikroorganisme uji yang sesuai dan peka ke dalam media lempeng
agar pada cawan petri. Silinder besi tahan karat diletakkan di atas permukaan media
lempeng agar. Larutan antibiotik dimasukkan ke dalam silinder besi tahan karat
tersebut dan diinkubasi. Larutan antibiotik akan berdifusi ke dalam media dan meng-
hambat pertumbuhan mikroorganisme uji di sekeliling silinder. Rasio potensi antibio-
tik merupakan perbandingan ukuran garis tengah zona hambatan yang disebabkan
larutan antibiotik uji dan antibiotik baku pembanding.
Penetapan potensi antibiotik menurut Farmakope
Indonesia edisi III
Penetapan potensi antibiotik menurut Farmakope Indonesia edisi 111 memerlukan 6
buah cawan petri untuk satu jenis sediaan uji. Jika akan dilakukan pengujian potensi
296 B u b u A j a r M i k r o b i o l o g i : P a n d u a n M a ha siswa F a rma si d a n K e d o k t e r a n
antibiotik dalam sediaan uji yang lain yang memiliki baku pembanding yang sama,
diperlukan kelipatan 6 cawan petri lagi. Jadi, dibandingkan dengan pengujian menurut
Farmakope Indonesia edisi IV, penetapan potensi antibiotik menurut Farmakope
Indonesia edisi III memiliki kerugian dari segi praktis dalam hal penyiapan sediaan
karena menurut Farmakope Indonesia edisi IV, cukup menambah 3 lempeng, dan
masing-masing lempeng berisi 3 silinder untuk S3 dan 3 silinder untuk U3. Gambar
17.5 menunjukkan pola peletakan silinder dalam cawan petri untuk penetapan potensi
antibiotik menurut Farmakope Indonesia edisi 111.
Penyiapan larutan antibiotik baku pembanding
Sejumlah tertentu antibiotik baku ditimbang dengan saksama dan dilarutkan dalam
pelarut yang sesuai hingga diperoleh konsentrasi larutan induk baku setara dengan 1
mg/ml. Pengenceran selanjutnya dilakukan dengan larutan pengencer yang sesuai
hingga diperoleh larutan baku dengan dosis baku tinggi (St), dosis baku menengah
(Sm), dan dosis baku rendah (Sr) yang sesuai.
Um Um
St
-o
Ur Ut Ur Ut
Sm Sm
Um Um
S t ^. ^^^^~ ^- \ S r S t ^^ ^ S r
o
«o
Ur Ut Ur
Sm
Um
St
Ur Ut
Sm
G a mba r 17.5 Rancangan penetapan potensi antibiotik menurut Farmakope Indonesia edisi III.
Dibutuhkan 6 buah cawan petri dengan pola penempatan silinder pada setiap cawan seperti pa-
da gambar. Semua cawan diinkubasi pada suhu ST^'C selama 24 jam, kemudian zona hambatan
yang terbentuk diukur.
Penyiapan larutan antibiotik uji

Larutan induk uji diencerkan dengan pengenceran yang sesuai hingga diperoleh la-
rutan uji dengan dosis uji tinggi (Ut), dosis uji menengah (Um), dan dosis uji rendah
(Ur) yang sesuai.
Cara penetapan
Enam buah cawan petri disiapkan untuk penetapan ini. Sejumlah 20 ml media uji yang
sesuai (45-50°C )dituangkan ke dalam setiap cawan petri dan dibiarkan memadat
(lapisan dasar). Agar inokulum sebanyak 5 ml dituangkan ke permukaan lapisan,
kemudian digoyangkan perlahan-lahan hingga membentuk lapisan yang merata dan
dibiarkan memadat. Pada permukaan agar inokulum dalam setiap cawan, diletakkan 3
silinder besi tahan karat untuk larutan baku dan 3 silinder besi tahan karat untuk
larutan uji, sebagaimana pola peletakan silinder pada Gambar 17.5.
Sejumlah 0,250 ml larutan baku dan larutan uji diteteskan ke dalam setiap silinder
dan dibiarkan selama kurang lebih 1 jam. Semua cawan diinkubasi pada suhu 37"C
selama 18-24 jam. Zona hambatan pertumbuhan yang terbentuk di sekeliling silinder
diamati. Diameter zona hambatan pertumbuhan tersebut kemudian diukur.
Perhitungan potensi antibiotik menurut Farmakope Indonesia edisi III adalah
sebagai berikut.
Standar (S) Uji (U)

Jumlah zona konsentrasi rendah 81 U1
Jumlah zona konsentrasi menengah 82 U2
Jumlah zona konsentrasi tinggi 83 U3
Jumlah sediaan 81 + 8 2 + 8 3 = 8 U1 + U 2 + U3 = U
Kontras linear 8 3 - 8 1 = Ls U 3 - U 1 = Lu
Ls + Lu
b= S
(d-^)\r^h Ys = —
nd
U Yu-Ys
nd
Rasio potensi Ru = antilog Mu Potensi = Ru x 100%
Keterangan:
b = Kemiringan (slope) regresi zona log konsentrasi semua sediaan
d= Banyaknya ragam konsentrasi setiap sediaan = 3
h = Banyaknya sediaan termasuk standar = 2
n = Banyaknya penggandaan setiap perlakuan = 6
/= Interval log konsentrasi berdampingan
(log 81 - log 82 = log 82 - log 83)
M29S B u b u A j d r M i k r o b i o l o g i : P a n d u a n M a ha siswa F a r m a si d a n K e d o b t e r a n
Penetapan potensi antibiotik menurut Farmakope Indonesia

edisi IV
Prinsip penetapan potensi antibiotik menurut Farmakope Indonesia edisi IV adalah
menginterpolasikan derajat hambatan pertumbuhan mikroorganisme uji yang diper-
oleh secara difusi agar dari dosis sediaan uji terhadap kurva baku dari dosis-dosis
sediaan baku. Penetapan menggunakan rancangan satu tingkat dengan kurva baku
menggunakan 5 dosis larutan baku pembanding (SI, S2, S3, S4, S5) dan satu dosis
larutan uji dengan konsentrasi yang sama dengan dosis standar (S3), yang disebut U3.
S3 S3
S1 S2
3 cawan petri S3 3 cawan petri
3 cawan petri 3 cawan petri
Gambar 17.6 Rancangan penetapan potensi antibiotik menurut Farmakope Indonesia edisi IV.
Dibutuhkan 15 buah cawan petri dengan pola penempatan silinder pada setiap cawan seperti
pada gambar.Tiap perlakuan dikerjakan secara triplo. Semua cawan diinkubasi pada suhu 37°C
selama 24 jam. Selanjutnya, zona hambatan yang terbentuk diukur.
Penetapan potensi antibiotik sediaan uji memerlukan 15 cawan petri karena pe-
netapan dilakukan secara triplo. Untuk memperoleh kurva baku, keenam silinder pada
setiap lempeng diisi selang-seling dengan dosis tengah baku (S3) dan dosis pengenceran
baku lainnya (SI, S2, S4, atau S5). Perlakuan ini dikerjakan secara triplo untuk setiap
dosis. Jadi, pada setiap 3 lempeng, 9 silinder diisi dengan dosis tengah baku (S3) dan
9 silinder sisa diisi dengan dosis pengenceran baku lainnya (SI, S2, S4, atau S5).
Untuk setiap sediaan uji, keenam silinder pada lempeng diisi selang-seling dengan
dosis tengah baku (S3) dan enceran larutan uji yang sebanding (U3). Jadi, pada ketiga
lempeng untuk sediaan uji, 9silinder diisi dengan dosis tengah baku (S3) dan 9 silinder
sisa diisi dengan U3.
Skema rancangan penetapan potensi antibiotik menurut Farmakope Indonesia
edisi IV ditunjukkan pada Gambar 17.6. Hal yang penting diperhatikan dalam pene-
tapan potensi antibiotik adalah inokulum, larutan antibiotik pembanding, dan tingkat
dosis.
Inokulum
Pada pembuatan inokulum mikroorganisme uji dalam media cair, konsentrasi inoku-
lumyang dibutuhkan pada penetapan potensi antibiotik adalah 10^sampai 10"^sel/ml.
Mikroorganisme uji yang digunakan adalah galur murni berupa galur koleksi labora-
torium yang terstandar, peka terhadap antibiotik yang akan diuji, dan selalu dilakukan
peremajaan minimal satu minggu sekali.
Larutan antibiotik pembanding
Penentuan potensi antibiotik memerlukan antibiotik standar sebagai baku pemban-
ding. Baku pembanding terdiri atas baku pembanding internasional, baku pemban-
ding nasional, dan baku pembanding kerja. Baku pembanding yang biasa digunakan
untuk penetapan potensi sediaan antibiotik adalah baku pembanding kerja {working
Standard).
Tingkat dosis
Perbandingan dosis antibiotik yang akan diuji harus dibuat sedemikian rupa agar ting-
kat dosisnya selalu tetap. Pada Farmakope Indonesia edisi IV, tingkat dosis adalah 4:5.
Terdapat 5 tingkat dosis, yaitu SI, S2, S3, S4, dan S5, dengan S3 sebagai acuan.
Contoh:
S3 =10 f-ig/ml maka dosis baku lainnya adalah
S2 =4/5x lOîg/ml = 8 ^g/ml
SI =4/5x8 ng/m 1 = 6,4 |ig/mI
84 =5/4x lOîg/ml = 12,5 ^g/ml
85 = 5/4 X 12,5 Mg/ml = 15,625 [ig/m\
Perhitungan potensi antibiotik menurut Farmakope Indonesia edisi IV menggunakan
metode garis lurus, transformasi logaritma dengan prosedur penyesuaian kuadrat ter-
kecil, dan uji linearitas.
, B u b u A j a r M i k r o b i o l o g i : P a n d u a n M a ha siswa F a rma si d a n K e d o b t e r a n l
" "iiiitfr.niirfrairitiiir'iifiiir-r
Berdasarkan hasil pengukuran zona hambatan yang terbentuk sesuai dengan pola
penetapan pada Gambar 17.6, data zona hambatan pertumbuhan yang dihasilkan oleh
antibiotik baku pembanding danantibiotik uji diolah lebih lanjut seperti pada Tabel
17.5.
^^^îbef^T^sTH
yndone sia Edisi IV 1
Diameter z ona ha mba ta n pe rtumbuha n ( mm)
Ba ku pe mba nding S a mpe l
No S1 "s3 i2 ii i4 S3 iT 83 U3 33
"e
7
s"
Jumlah
Rerata
Korektor
Hasil
koreksi
Rerata 8 3 = Rerata semua baku pembanding 8 3

Korektor 8 1 = Rerata 8 1 - rerata 8 3
Korektor 8 2 = Rerata 8 2 - rerata 8 3 , dan seterusnya.
Hasil koreksi 8 1 = Rerata 8 1 + korektor 8 1
Hasil koreksi 8 2 = Rerata 8 2 + korektor 8 2 , dan seterusnya.
Kurva baku dibuat dari data hasil koreksi, dengan log dosis baku (S) sebagai
sumbu X dan diameter zona hambatan pertumbuhan sebagai sumbu Y. Kurva baku
kemudian dibuat berdasarkan data yang diperoleh pada Tabel 17.6 berikut.
Pengolahan Data untuk Penghitungan Potensi Antibiotik Menurut

iF a rma kope Indonesia Edisi IV
La ruta n ba ku Log S =X Diameter z ona ha mba ta n
( mm) = Y
Dosis S I
Dosis 8 2
Dosis 8 3
Dosis 8 4
Dosis 8 5
Setelah itu, nilai a (intersept) dan b (slope) dicari dari regresi linear sehingga dapat
diperoleh persamaan regresi linear Y =a +b X
Dengan memasukkan harga log S3 ke dalam variabel X pada persamaan tersebut,
nilai Yakan didapat berdasarkan ekstrapolasi terhadap kurva baku.
Untuk antibiotik uji (Yu):
Vi; = y + f U 3 - 8 3 ;
=a + bXu
Dosis uji = antilogX^
dosisuji
Potensi antibiotikuji = x 100%
83
PENGUJIAN POTENSI VITAMIN

Pengujian potensi vitamin pada dasarnya dilakukan dengan membandingkan dosis
larutan sediaan uji terhadap dosis larutan baku pembanding yang menghasilkan dera-
jat pertumbuhan yang sama pada mikroba uji. Uji potensi vitamin merupakan kebalikan
dari uji potensi antibiotik, yaitu uji potensi vitamin didasarkan atas peningkatan per-
tumbuhan mikroba uji. Media perbenihan yang digunakan adalah media yang me-
ngandung semua faktor pertumbuhan, kecuali faktor yang akan diuji. Sebagai contoh,
untuk menentukan potensi asam pantotenat digunakan pantothenate assay medium,
yaitu suatu media perbenihan yang tidak mengandung asam pantotenat, tetapi me-
ngandung semua nutrisi dan vitamin yang esensial untuk pertumbuhan mikroba uji
" ^ I T i f i r l i r " ^ " A j a r M ibrobiologi : P a n d u a n M a ha siswa F a rma si d a n K e d o b t e i g n i
yang digunakan (yaitu Lactobacillus plantarum). Penambahan vitamin (asam pan-

totenat) dalam berbagai konsentrasi ke dalam media perbenihan akan meningkatkan
derajat pertumbuhan mikroba uji yang dapat diukur secara turbidimetri.
Penyiapan inokulum mikroba uji
Mikroba uji yang akan digunakan dalam penetapan potensi vitamin dibiakkan pada
perbenihan agar miring dan diinkubasi pada suhu yang sesuai selama 24 jam. Satu
sengkelit biakan dari biakan agar miring dipindahkan ke dalammedia micro inoculum
broth dan diinkubasi pada suhu yang sesuai selama 24 jam.
Biakan inokulum dalammedia cair ini kemudian disentrifugasi. Cairan supematan
dibuang dan endapan dicuci tiga kali dengan 10 ml larutan NaCl 0,9%sambil disen-
trifugasi. Setelah dicuci, endapan sel disuspensi dengan 10 ml larutan NaCl 0,9%,
kemudian diencerkan 1:100 dengan NaCl 0,9%, atau setara dengan 35-40% trans-
mitan (T)jika diukur dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 660 nm. Satu
tetes inokulum diinokulasikan ke dalam 10ml media pengujian yang digunakan untuk
penetapan potensi vitamin.
Pembuatan kurva baku
Larutan standar untuk pembuatan kurva baku senantiasa dibuat baru saat akan dila-
kukan penetapan potensi vitamin. Pada umumnya, pembuatan kurva baku dilakukan
dengan membuat larutan vitamin yang akan diuji dalam berbagai konsentrasi, yaitu
konsentrasi 0,1; 0,2; 0,3; 0,4; 0,5; 0,6; 0,7; 0,8; 0,9; dan 1 ^g dalam 10 ml larutan yang
mengandung media pengujian yang sesuai untuk masing-masing jenis vitamin yang
akan ditetapkan potensinya. Satu tetes atau 20 fil inokulum kemudian diinokulasikan
ke dalamderetan tabung ini dan dikocok sampai homogen. Seluruh tabung diinkubasi
pada suhu yang sesuai selama 24 jam. Setelah diinkubasi, kerapatan optik masing-
masing media di dalam setiap tabung diukur dengan spektrofotometer pada panjang
gelombang 540 nm. Selanjutnya, kurva baku dibuat berdasarkan hasil pengukuran
kerapatan optik media perbenihan terhadap logaritma dosis larutan vitamin.
Jenis mikroba uji dan media penetapan potensi vitamin dapat dilihat pada Tabel
17.7.
Pembuatan larutan uji
Tiga dosis larutan baku vitamin dipilih berdasarkan kurva baku, yaitu dosis yang
terletak di daerah pusat kurva. Berdasarkan konsentrasi atau dosis larutan baku vitamin
tersebut, dibuat 3jenis konsentrasi larutan vitamin yang akan diuji, dengan konsentrasi
yang sama dengan ketiga dosis vitamin baku yang telah dipilih dari kurva baku. Ketiga
dosis larutan uji ini digunakan untuk penetapan potensi vitamin.
Bab 17 - Analisis Keamanan Sediaan Farmasi . 303
Lla be l 17.7. M ikroba Uji, Media Pengujian, dan S uhu Inkubasi untuk
^Penentuan Potensi Beberapa Je nis Vitamin
M ikroba uji Media S uhu V ita min
inkuba si
Lactobacillus plantarum Pantothenate assay 37°C Asa m pantotenat

ATCC 8014 medium
Lactobacillus deibrueckii Vitamin B^^ assay . Vitamin B^^
ssp. lactisATCC 4797 medium
Lactobacillus plantarum Biotin assay medium 37°C Biotin
ATCC 8014
Saccharomyces cerevisiae Inositol assay medium 25-30°C Inositol
ATCC 8090
Enterococcus hirae Folic acid assay medium 37°C Asa m folat
ATCC 8043
Lactobacillus plantarum Niacin assay medium 37°C Niasin
ATCC 8014
Lactobacillus rhamnosus Riboflavin assay medium 37°C Riboflavin

ATCC 4769 (vitamin B^)
Lactobacillus femientum Thiamine assay medium 37°C Tiamin

ATCC 9338 (vitamin B^)
Cara penetapan
Enambuah tabung reaksi steril disiapkan untuk penetapan ini. Sejumlah 0,5 ml larutan
dari tiap dosis larutan baku yang dipilih dipipet ke dalamtiga buah tabung. Demikian
juga, ketiga dosis larutan vitamin yang akan diuji potensinya dipipet ke dalam tiga
buah tabung lainnya. Sebanyak 4,5 ml media uji steril yang sesuai ditambahkan ke
dalamsetiap tabung dan dikocok sampai homogen. Sebagai blangko, digunakan 0,5 ml
air suling steril ditambah dengan 4,5 ml media steril. Selanjutnya, satu tetes atau 20 ^1
inokulumdiinokulasikan ke dalam masing-masing tabung dan dikocok sampai homo-
gen. Semua tabung diinkubasi pada suhu yang sesuai selama 24 jam. Setelah masa
inkubasi, kerapatan optik media dalam setiap tabung diukur menggunakan spek-
trofotometer pada panjang gelombang 540 nm.
Berdasarkan data yang didapat, potensi vitamin dapat ditentukan secara biometri,
yaitu dengan membandingkan dosis larutan sediaan uji terhadap dosis larutan baku
vitamin yang menghasilkan derajat pertumbuhan yang sama pada mikroba uji.
DAFTAR PUSTAKA
Batzing, B, L. 2002. Microbiology: An Introduction. USA: Brooks/Cole Thomson

Leaming.
Brown, T. A. 1995. Gene Cloning: An Introduction. 3'Êd. Manchester, United King-
dom: Stanley Thomes Publisher, Ltd.
Crueger, W., andCrueger,A. 1988. Biotechnology: TextbookofIndustrial Microbiology.
New York: Madison, Inc.
Departemen Kesehatan RI. 1979. Farmakope Indonesia, Edisi III. Jakarta: Departemen
Kesehatan RI.
Departemen Kesehatan RI. 1992. Prosedur Operasional Baku Pengujian Mikrobiologi.
Jakarta: Pusat Pemeriksaan Obat dan Makanan, Dirjen POM.
Departemen Kesehatan RI. 1995. Farmakope Indonesia. Edisi IV. Jakarta: Departemen
Kesehatan RI.
Harmitadan Radji, M. 2008. Buku Ajar Analisis Hayati. Edisi 3. Jakarta: EGC Penerbit
Buku Kedokteran.
Harvey, R. A., Champe, R C, and Fisher, B. D. 2007. Microbiology. 2"^Êd. USA:
Lippincott Williams & Wilkins.
Hidayat, N., Masdiana, C. P, dan Suhartini, S. 2006. Mikrobiologi Industri. Yogyakarta:
Penerbit ANDI.
Hugo, W. B., and Russel, A. D. 2000. Pharmaceutical Microbiology. 6^ Ed. London:
Blackwell Scientific Publication.
Jawetz, E., Melnick, J. L., and Adelberg, E. A. 2002. Medical Microbiology. 22"** Ed.
USA: Lange Medical Publications, McGraw-Hill.
Pelezar, M. J., dan Chan E. C. S. 1986. Dasar-dasar Mikrobiologi. Jakarta: UI Press.
Radji, M. 2006. Penuntun Praktikum Mikrobiologi Farmasi. Edisi 2. Depok: Depar-
temen Farmasi FMIPA, UI.
Sardjoko. 1991. Bioteknologi: Latar Belakang dan Beberapa Penerapannya. Jakarta:
Gramedia Pustaka Utama.
Schlegel, H. G. 1993. General Microbiology. Ed. England: Cambridge University
Press.
Staf Pengajar FKUI. 1994. Buku Ajar Mikrobiologi Kedokteran. Jakarta: Binarupa
Aksara.
Tortora, G. J., Funke, B. R., and Case, C. L. 2004. Microbiology: An Introduction. 8^
Ed. New York: Pearson Benjamin Cummings.
Volk, W. A., and Wheeler, M. F. 1988. Mikrobiologi Dasar. Edisi 5. Jakarta: Penerbit
Erlangga.
304
INDEKS
A Angka,
Acne, 205 kapang-khamir, 268t, 269, 271, 272g
nodular cystic acne, 205 lempeng total, 71, 268t, 269, 270g
Actinomycetes, 41, 122 Anthony van Leeuwenhoek, 2, 107, 108
Adenilat siklase, 126, 128, 133, 139, Antibiotik, 66, 68-69, 83, 87, 137, 260,
141, 147, 151 260t, 295-300
Adenosin difosfat, ADP, 44 Antifungi, 65, 66, 260t
Adenosin monofosfat, AMP, 128, 147 Antigen, llOt, 125, 126, 131, 141-142,
Adenosin trifosfat, ATP, 43 153, 154t, 159, 162, 181, 182,
Aerob, 26, 28t, 130 212,240
obligat, 28t, 165,217 flagel. Lihat Ai\X\gQr\ H, 125, 127, 131
Agar, 24, 29 glikolipid, 176
Agrobacterium, 47 H. Z./77a/Antigen flagel, 125, 127, 131
A. tumefaciens, 88 H7, 127
AHEC, 128 K. Lihat An\\gQn kapsul, 125, 127,
Air mendidih, 58 174
Aktivitas metabolik, 41 Kl, 126, 129
dL-alanin, 262t kapsul. Lihat AnWgm K, 125, 127, 131
L-alanin, 262t LAM, 170
Alanin, 80t lipoid,212
Alga, 8, 18, 259 lipopolisakarida, 125, 145
Amfitrik, 13 O. I/T/a/Antigen somatik, 125, 127,
Amfoterisin, 68, 260t 131, 142, 240
Amilase, 261 P, 129
Amycolatopsis orientalis, 260t permukaan, 126, 174, 182
Anabolik, 43, 44, 44g protein A, 181
Anabolisme, 43 Reiter, 216
Anaerob, 25 selubung fraksi I (FI), 236
aerotoleran, 27, 28t somatik. L/T/a/antigen O, 127, 131
fakultatif, 25, 28t treponema, 212
obligat, 28t tuberkulin, 170
l,4-androstadien-3,l7-dion, 264t V, 236
4-androsten-3,l 7-dion, 264t Vi, 131
305
virus hepatitis B, 93, 265 B
W, 236 Bacillaceae, 150
Antikoagulan, 266t âc/7/w.ssp.,251t, 256t, 257
Antiseptik, 69 Bacillus, 96
Antitoksin, 147, 164, 228, 229 B. amyloliguefaciens, 87t
Antraks, 4, 12, lllt, 113, 119t, 122, 241- B anthracis,4, 11, 108, 110, lllt,
243 119t, 122, 241-243
kulit, 242 B cereus, U% 120t, 122,150-151,2481
paru, 242 B. mesentericus, 2511
saluran cerna, 242 B. mycoides, 97
L-Arginin, 262t B. nigrificans, 2511
Arkea, 7, 95 B. polymyxa, 260t
Armadillo,3\,229, 230 B. subtilis, 47, 82, 260t
Arthrobacter, /<rCC6633, 288-290
A. paraffineus, 262t thuringiensis, 6
A. simplex, 264t Bacillus Calmette Guerin, BCG, 265
Artritis, 156, 160, 223 Bacillus cereus agar, 283
septik, 186, 190,211 Bacteroides,
Asam amino, 10, llt, 52, 77g, 79, 262t, B.fragilis,\m
263 B. vulgatus ATCC 8482, 288-290
Asam folat, 303t Badan inklusi, llt, 194, 196
L-Asam glutamat, 262t Bahan pengawet, 66, 70, 288
Asam klavulanat, 260t Baird Parker agar, BPA, 282
Asam nukleat, 8, 1 It, 25,47, 69, 76, Bakteremia, 126, 155, 157, 204, 221
104, 176, 198 Bakteri, 7, 10-11
Asam organik, 47, 52, 66, 219 aerob, 16, 25, 31, 119, 269, 270g, 271
Asam pantotenat, 301, 302t obligat, 25, 28t
Asam piruvat, 46-47, 49, 49t anaerob, 29, 30g
Asam sitrat, 51,263-264 aerotoleran, 26, 27, 28t
Aseptik, 3, 60 fakultatif, 25, 26, 28t
Aseptis, 56, 71, 194, 251, 269, 280, 291 obligat, 26, 28t
AsetilCoA, 50-51,50g bentuk sel, 10
Ashbya gossypii, 262 enterik, 102g, 103t, 121, 125
Asidofil, 23 mikroaerofilik, 31
Aspergillus, patogen, 118, 118t, 124, 152, 178, 207,
foetidus, 261 222, 233, 273
niger, 70, 263 pyogenic cocci, 121
oryzae, 256t termofil, 23, 29
soyae, 256t Bakteriofaga, 82, 86, 181, 193
Aspergillus sp., 255 Basilus Ducrey, 162
ATP, 25, 43-44, 47, 49, 44g, 50g Basilus Koch-Weeks, 162
Autoklaf, 57-58 ,253 Basitrasin, 68, 158, 260t
. Azitromisin, 177, 199, 260t Batuk rejan, 118t, 119, 120t, 173, 174
Aztreonam, 260t Bejana anaerob, 30g, 30, 280
Bentuk sel bakteri, 10 Chlamydia,
Bergey's Manual, 95 pneumoniae, 119t, 120t, 122,' 153, 174
Bifidobacterium, 108 trachomatis, 119t, 120t, 122, 179, 194-
Binomial nomenclaiure, 6 199,208
Biogenesis, 3 Christian Gram, 98
Biokonversi, 5, 263, 264t Chromobacterium violaceum, 97, 260t
Bioremediasi, 5 Cladosporium herbarum, 2511
Bioteknologi modem, 6 Clostridium sp., 2511
Biotin, 25, 302t C. botulinum, 57, 107, 110, llOt, 119t,
Biotin assay medium, 302t 120t, 122, 223,228-229, 251t,
Bismuth sulfite agar, 31, 135, 280 253
Bobot kering, 41 C difficile, llOt, 119t, 120t
Bordetella pertussis, 118t, 119, 120t, C. nigrificans, 25\t
173-175 C. perfi-ingens, 107, llOt, 119t, 120t,
Borrelia burgdorferi, 96, 119t, 123, 235, 122, 146-148, 248t, 278-280
243-244 C. putrefaciens, 2511
Botulisme, 26, 57, lllt, 119t,228 C sporogenes, 2511
Brain-heart infusion broth (BHIB), 282 C. tetani, 107, llOt, 114, 119t, 227-228
Brevibacterium, C. thermosaccharolyticum, 2511
B.flavum, 262-263t C welchii, 96
B. lactofermentum, 262-263t Coccobacillus, 10, 220
Brilliant green,3\, 131 Coliform, 38, 108,131,248,268t, 274-278
Brilliant green agar, 31, 280 Colonization Factor Antigen, 126
Brilliant green lactose bile 2%, 274, Colony stimulating factor (CSF), 266t
275,277 Condylomata lata, 214
Brucella, 108, 119, 244 Corn meal agar, CMA, 287
B abortus, 118t, 119, 244, 245 Corynebacterium
B. melitensis, 235, 244-245 diphtheriae, 108, llOt, 119t, 120t, 122,
B. suis, 244 163-165
Bruselosis, 119, 244-245 glutamicum, 262-263t
Bubonic plague, 118t, 236 Coxiella burnetii, 58, 252
Buffered peptone water, BPW, 269 Cutaneous anthrax, 242
Byssochlamys fulva, 261 Cylindrocarpon radicicola, 264t
C D
Campylobacter, 31, 120t, 125,248 Daging, 2, 121, 137, 147, 242, 248, 248t,
CJejuni, 118t, 120t, 123, 148 250, 256t
Candida albicans, 70, 286-287 Daya invasi, 109, 132, 139
identifikasi, 286 Deep fi'eezing, 33
ATCC 10231,289-290 Dehidrasi, 60, 123, 133,254
Cara produksi makanan yang baik, 251 1-Dehidrostonolakton, 264t
Cephalosporium sp., 260t Dekstran, 262
Cetrimide agar, 282 Demam,
Chaim Weizermann, 5 enterik, 130, 133, 135
[ B 2 i ^ J ^ M i ^ ? r o b i o l o g i : P a n d u a n M a ha siswa F a rma si d a n Ke dobte ^^^
purpuralis, 157 Endospora, 19, 101, 122, 150,228, 241,

rematik, 121, 157 241g, 242
semak, 239 Endotoksin, 16, 109, llOt, 132, 139, 142,
Deoksiribonuklease, 188, 201 174, 203,234
Dermatitis, 179t, 203 Energi, 18t, 25,43,44, 54g
eksfoliatif, 184 Enterobacter aerogenes, 103t
Desulfovibrio, 52 Enterobacteriaceae, 102, 121, 125, 130,
Diagnosis penyakit, 214, 231 138, 235
Diare, 102, llOt, 118-120t, 127-128, 134g Enterococcus,
berair, 127, 139, 143 faecalis, 47
wisatawan, 128 hirae ATCC 8043, 303t
Difteri, llOt, 114, 119t, 164 Enterotoksin, llOt, 126, 128, 132, 139,
Dinding sel bakteri, 7, 14-16, 15g, 18t, 151, 184
99, 131, 145, 154 EntK, 151
Diplococcus, 10, 155, 159, 159g, 208 HBL, 151
D. pneumoniae, 82 LT, 139
Disentri basiler, lllt, 118t, 121, 138 Nhe, 151
Disinfektan, 56, 63-68, 71-72, 202 Entner-Doudoroff, 47
dL-alanin, 262t Enzim, 5, 19,261
DNA, 74 adenilat siklase, 126, 139, 147
fingerprinting, 103 amilase, 261
probe, 92, 105, 198, 226, 242 Bacillus, 5
DNA-girase, 69 deoksiribonuklease, 188, 201
DNA-ligase,79,89,90g,91g DNA ligase, 79, 90g
DNA-polimerase, 78, 79 DNA polimerase, 78, 79
DNA-rekombinan, 6, 85, 88, 89, 90g DNA-girase, 69
Dogma sentral biologi, 76, 77g eksonuklease, 85
Doubling time, 33 , endonuklease, 85, 86, 87t, 90g, 103
fibrinolisin, 182
E fosfatase, 182
EAEC, 128 B-galaktosidase, 88g
EIEC, 128 gelatinase, 182
Eksonuklease, 85 guanilat siklase, 126
Eksotoksin, 109, llOt, 139, 155, 183, 189 guanosin monofosfat sintetase, 236
A, not, 203 helikase, 78
pirogenik, 157 hialuronidase, 182, 201
S, 203 invertase, 261
tidak tahan panas (LT), 128 katalase, 26, 28t, 180, 182
Ekstrak daging, 29, 293 koagulase, 180, 182, 185
Embden-Meyerhof, 47, 48g lipase, 52, 182, 188
Endoflagel, 123, 243 lisozim, 182
Endokarditis, 135, 154t, 157, 184, 190 oksirase, 30
bakterial, 234-235 pektinase, 261
Endonuklease, 85, 86, 87t, 90g, 103 penisilinase, 163, 182
peptidase, 52 Faktor pertumbuhan epidermal, 266t
polimerase, 262 Faktor virulensi, 109, 126, 127, 132, 145,
protease, 52, 182, 188, 261 155, 185, 226, 236, 241,245
RNA primase, 78 Faringitis, 153, 154t, 156
stafilokinase, 188 Fase kematian, 35g, 36
streptodomase, 261 Fase lag, 34, 35g
streptokinase, 201, 261 Fase log, 35, 35g
superoksida dismutase, SOD, 26, 28t Fase pertumbuhan, 34, 36, 69
topoisomerase, 78 fase kematian, 35g, 36
tributirinase, 182 fase lag, 34, 35g
urease, 149 fase log, 35, 35g
Eosin methylene blue agar, 273 fase stasioner, 35, 35g
Eosin methylene blue (EMB), 135 Fase stasioner, 35, 35g
EPEC, 127 L-Fenilalanin, 263t
Epidemiologi, 137, 140, 142, 143, 165, Fermentasi, 4, 23, 46, 47, 53, 255
174, 177, 198,204,210,216,221, asam piruvat, 49t
224, 228, 229, 236 glukosa, 46g
Epidermal growth factor (EGF), 266t produk,
Erisipelas, 157, 179, 179t,200 asam amino, 262t, 263
Eritromisin, 69, 160, 175, 177, 199,206, asam sitrat, 263
260t makanan dan minuman, 255-258,
Erwinia carotovora, 250 256t
Erythema nodosum leprosum, 230 air kelapa, 258
Escherichia coli, 25, 47, 70, 85, 103t, beras, 257
108, not, 118t, 121, 125-130, buah, 258
248t, 2511, 266t, 273 kacang-kacangan, 255
AHEC, 128 ketan, 257
EAEC, 128 sayuran, 258
EIEC, 128 sereal, 258
EPEC, 127 singkong, 257
ATCC 10536, 290 susu, 257
RY13, 87t susu, 249
ETEC, 127 Fibrinolisin, 182
NMEC, 129 Filter, 38, 271, 288
UPEC, 129 Chamberland-Pasteur, 62
0157: H7, 118t, 120t, 121 gelas, 62
ETEC, 127 HEPA, 62
Eubacterium, 108 high efficiency particulate air, 62
membran, 62
F Seitz, 62
FAD, 45 udara, 62
FADH2,50g, 51 Filtrasi, 38, 271
Faktor nekrosis tumor, 266t Fimbria, 13, 18t, 126, 145
Faktor pemicu koloni, 266t tipe manosa,
310 B u b u A j a r M i k r o b i o l o g i : P a n d u a n M a ha siswa F a rma si d a n K e d o k t e r a n
resisten, 126 164, 168, 174, 176, 177, 189,

sensitif, 126 194, 195,202, 205,209,212,
Fimbrial adhesin, 128 217,218,223,225,227,228,
Flagel, llt, 13, 13g, 18t, 96, 101 229, 235,238, 241,243,244
amfitrik, 13 Gelatinase, 182,284
antigen, 125, 127, 131 Gen, 74
endoflagel, 123,243 Generasi spontan, 2, 3
lofotrik, 13 Genetika, 74
monotrik, 13, 143 Genom bakteri, 81, 105
peritrik, 13, 130, 225,227 Gentamisin, 69, 204, 260t
Flavin adenin dinukleotida (FAD), 45 Glikokaliks, 11, 18t
Flora normal, 108 Glikolisis, 46-47, 46g, 48g
hidung, 108 Glomerulonefritis, 121, 154, 156, 157
kulit, 108, 179,208 Glukosa, 46, 46g, 47, 51g, 103t, 261
mulut, 108 L-Glutamin, 262t
saluran cerna, 108, 121, 135 Gonokokus, 197, 208-211
saluran genital, 108 Gonore, 118t, 119, 209-210
saluran napas, 108, 121, 159 diseminata, 209-210
saluran urine, 108 metastatik, 210
telinga, 108 Gram-negatif, 12g, 13g, 14, 15g, 16, 18t,
vagina, 218 99, 99t, 118t, 119, 260t
Fluid thioglycollate medium, 278, 289- Gram-positif, 12g, 14, 15g, 18t, 99, 99t,
293 119t,260t
Folic acid assay medium, 303t Granul metakromat, 18
Folikulitis, 1211, 179t, 189, 203 Guanilat siklase, 126
Fosfatase, 182 Guanosin monofosfat sintetase, 236
Fosfolipida, 10, llt, 16, 18t, 25
Fotosintesis, 4, 8, 43 H
Fragmen Okazaki, 79 Habitat mikroorganisme, 107
Francesco Redi, 2 Haemophilus,
Fungi, 7 H. aegyptius, 87t
Fungisida, 66 H. influenza, 86, 87t, 118t, 120t, 160-
Fungistatik, 289 163
Furunkel, 190 H. parainfluenzae, 87t
Fusarium solani, 264t Halofil,
ekstrem, 7, 23
G fakultatif, 23
P-Galaktosidase, 88g obligat, 23
Gangren, llOt, 119t, 146, 238 Hansenula polymorpha, 265
Gardnerella vaginalis, 218-221 Hazard Analysis and Critical Control
Gastroenteritis, 118t, 120t, 133 Point, 247
Gastrointestinal anthrax, 242 Hektoen enteric agar, HEA, 280
Gejala penyakit, 127, 139, 141, 143, 145, Helicobacter pylori, 118t, 120t, 123, 148-
146, 149, 150, 151, 160, 162, 150
Helikase, 78 Inaba, 142
Hemolisin, 126, 129, 183,202 Industri makanan, 5, 19, 246
a-hemolisin, 129, 153, 183 Infeksi bakteri, 107
P-hemolisin, 129, 153, 184 Infeksi nosokomial, llOt, 116, 119, 191,
y-hemolisin, 153, 183 204
Hialuronidase, 182, 201 Inflamasi, 128, 133, 187,205,218,263
Hibridisasi asam nukleat, 104 Infus, 268t, 287, 292, 293
Hidradenitis, 190 Inklusi, 18, 18t, 194, 196
Hidrokortison, 264t Inokulum, 27, 37, 70, 299, 302
9a-hidroksi-4-androsten-3,l7-dion, 264t Inositol, 103t,303t
11P-hidroksi-4-androsten-3,17-dion, 264t Inositol assay medium, 3031
15Y-hidroksi-4-pregnen-3,20-dion, 264t Insulin, 86, 93, 265, 266, 266t
High efficiency particulate air, 62 interferon, 203
High Temperature-Short Time, 252 alfa, 93, 266t
Hikojima, 142 beta, 93
Hipertermofil, 229 gamma, 93, 266t
L-Histidin, 262t Interleukin, 133, 266t
Homogenisasi sampel, 269 International Code of Nomenclature, 95
Hormon pertumbuhan, 93, 266t Inulin, 160
Hospes, 11,86, 109, 111,210 Invasi, 133, 156, 186, 202
definitif, 109, 235 Invasin, 127, 155, 185
perantara, 109 Invertase, 261
reservoir, 109,235 L-Isoleusin, 262t
paratenik, 109
Humulin, 265 J
Jalur Embden-Meyerhof 47, 48g
I Jalur Entner-Doudoroff, 47
Identifikasi bakteri, 273-287 Jalur glikolisis, 47
Bacillus cereus, 282 Jalur metabolisme, 44, 45, 45g, 47
Candida albicans, 286 Jalur pentosa fosfat, 47
Clostridium perfringens, 278 Jerawat, 121t, 179, 203, 205-206
coliform, 21A
Escherichia coli, 273 K
Pseudomonas aeruginosa, 282 Kampesterol, 264t
Salmonella typhi, 280 Karbunkel, 190
Staphylococcus aureus, 282 Katabolisme, 43, 45, 54g
Vibrio cholerae, 285 lemak, 53
Vibrio parahaemolyticus, 284 Katalase, 26, 28t, 180, 182
Ikan, 123, 143,248t, 249, 25It Kekebalan, 3, 108, 119, 142, 173, 227,
Imipenem, 146, 260t 234, 265
Impetigo, 154t, 157, 189, 200 Kekeruhan, 40, 148, 283,295
Imunitas, 111,227, 264 Kemoterapi, 69, 127, 172, 211, 224
Imunofluoresensi, 176, 177, 196, 198, Kerang, 144, 248t, 249
211,240 Kerusakan makanan, 247, 250, 2511
Kim &Goepfert agar, 283 L
Klamidia, 118, 119t, 122, 176, 194-199 L' Art de Conserver, 253
Klamidiasis, 196 Lactobaci!lus,29,4% 109,218-220, 2511
Klasifikasi, 6 L deibrueckii ssp. lactis ATCC 4797,
bakteri, 95 302t
mikroorganisme, 6 Lfermentum ATCC 9338, 303t
Streptococcus, 154, 154t L plantarum, 25It, 258, 302
tuberkulosis, 167 ATCC 8014, 302-303t
Klebsiella, 12,208, 257 L rhamnosus ATCC 4769, 303t
Klindamisin, 69, 260t Lactose broth, 275, 277, 280
Klon bakteri, 89, 91g Lagging strand, 79
Kloning, 86, 88 Lauryl sulphate tryptose broth, LSTB,
DNA, 6 275, 277
gen, 86, 89, 93 Lazzaro Spallanzani, 3
vektor, 87 Leading strand, 79
wahana, 87, 88g Legionelia pneumophila, 119, 177
Kloramfenikol, 69, 136, 144, 163,237,
261t Legionelosis, 177
Koagulase, 180, 182, 185, 187, 193,282 Lempeng hitung, 36, 37, 41
Kodon, 79, 80-83 Lepra. Lihat Kusta, 119t, 122, 229
Koefisien fenol, 71, 72, 72t, 181, 268 Lepromatosa, 230, 231, 232
Koenzim, 27, 43 Leptospira, 98, 208,217
NAD\ 43, 161 L interrogans,2\l'2\S
NADP\ 43 Leptospiremia, 217
flavin adenin dinukleotida (FAD), 45 Leptospirosis, 123,217,218
A, 45, 50, 50-5Ig, 52 Letheen broth, 269, 270
Kolera, lllt, 118t, 141-143 Leuconostoc,
Kolesterol, 176, 264t dextranicus, 262
Koloni bakteri, 21, 92g, 96, 97 mesenteroides, 256t, 258, 262
Kolonisasi bakteri, 13, 149, 205, 219 Leukosidin, 111, 183, 187, 188, 201
Komedo, 205, 206 L-Leusin, 262t
Konjugasi, 14, 18t, 81 Limfogranuloma venereum, 119, 197,208
Konjungtivitis, 169, 179t, 195, 198, 209, Lipase, 52, 182, 188
217 Lipopolisakarida, 10, 16, 18t, 69, 125, 145
folikuler akut, 196 L-Lisin, 262t
inklusi, 194, 195 Lisozim, 182
Kosmetika, 268, 268t, 269, 282, 286 Listeria monocytogenes, 119t, 120t, 225-
Kota Lyme, 243 226, 248, 249
Kromosom, 6, 10, 17, 18t, 74, 81 Listeriosis, 119t, 120t, 225-226
bakteri, 17, 81 Lofotrik, 13
Kusta, 229-232 Louis Pasteur, 3, 4, 252
borderline leprosy, 230 Low Temperature-Holding, 252
lepromatosa, 230, 231, 232 Lyme disease, 243
tuberkuloid, 230, 231,233 Lysine decarboxylase broth, 281, 285
M Metode lempeng gores, 33
MacConkey agar, 32 Metode lempeng silinder, 295
Makanan fermentasi, 27, 255-258 Metode turbidimetri, 295
Makromolekul, 10, llt, 14, 18t Micro inoculum broth, 302
Mannitol sal t agar, 32 Microbacterium ammoniaphilum, 262t
Martinus Beijerrinck, 5 Micromonospora sp., 260t
Masa emas mikrobiologi, 3 Mikoplasma, 122
Mastitis, 119t, 184, 190 Mikroaerofilik, 28t, 125, 148, 209
Materi genetik, 17, 18t, 74, 79, 81 Mikrobiologi, 2, 3
Media anaerob, 29 Mikroskop elektron, 8, 17, 159g, 188
Media biakan khusus, 31 Minuman fermentasi, 257
Media diferensial, 31, 135 Missense mutation, 83
Media kompleks, 29 * Model Gordon, 111, 112
Media pengayaan, 32, 280 Monotrik, 13, 143
Media perbenihan, 23, 27, 28, 29, 70 Morbus Hansen, 229
Media pertumbuhan bakteri, 29-32 mRNA,'llt,69,77g,79, 83
anaerob, 29 Mutasi, 82, 83
biakan khusus, 31 pergeseran kerangka, 84
diferensial, 31, 135 substitusi pasangan basa, 83
kompleks, 29 tanmakna, 83
pengayaan, 32, 280 netral, 83
selektif, 31, 135, 143, 204, 226, 280 salah-arti, 83
Mycobacterium,
sintetik, 29 M. bovis, 165, 170, 265
Media selektif, 31, 135, 143, 204, 226, M.fortuitum, 264t
280 M. leprae, 31, 100, 119t, 122, 229-232
Media sintetik, 29 M. smegmatis, 108
Membran plasma, 11, 16, 17, 18t, 63 M. tuberculosis, 58, 100, 108, 119t,
Membran sitoplasma, llt, 16 120t, 122, 165-173,252
Meningitis, 118, 119, 120t, 161,223,224 Mycoplasma, 260t
neonatus, 118t, 129 M. hominis, 219
Meningokoksemia, 223 M. pneumoniae, 119t, 120t, 123, 175-
Meningokokus, 223, 224, 225 177
Mesofil,21,22, 22g, 269 N
Mesosom, 17 NAD,43, 161
Messenger RNA, 16, 79 NADH, 47, 50g
Metabolisme, 43 NADP, 43
karbohidrat, 45 a-Nastrol, 274, 281,284
lemak, 52 Nata de coco, 258
protein, 52 Neisseria,
Metabolit bakteri, 181 N. gonorrhoeae, 13, 118t, 119, 120t,
Metanogen, 7 208-211
Methyl red-voges proskauer, MR-VP, 21A N. meningitidis, 118t, 119, 120t, 223-
L-Metionin, 262t 225
^ ^ • B u k u A j a r M i k r o b i o l o g i : P a n d u a n M a ha siswa F a rma si d a n K e d o k t e r a n
Neisseriaceae, 208, 223 PCR, 104, 150, 226, 262

Neurotoksin, 139, 223,227 Pektinase, 261
Neutral mutation, 83 Pemanasan, 57, 252
Niacin assay medium, 303t basah, 57
Niasin, 303t air mendidih, 58
Nilai Duga Terdekat, 38-39,274-277,278t pasteurisasi, 4, 58, 249, 252
Nistatin, 68, 260t sterilisasi bertahap, 58
NMEC, 129 uap bertekanan, 57, 253
Nocardia, 100 kering, 58
A^. orientalis, 260t pembakaran, 59
Nodular cystic acne, 205 sterilisasi dengan udara panas, 58
Nonsense mutation, 83 Pembakaran, 59
Nontreponemal antigen test, 215 Pembekuan, 33, 254
Nucleic acid amplification test, 198 Pembelahan biner, 7, 33, 34g, 238
Nukleoid, 11 Pemeriksaan,
Nukleus, 7, 17 bakteri patogen, 273-287
Nutrient agar, 29, 274, 283-284, 286 Bacillus cereus, 283
Nutrient broth, 29, 292 bakteri coliform, 274
Candida albicans, 286
O Clostridium perfringens, 278
Obat non-steril, 268t Escherichia coli, 273
Obat suntik, 268t, 287 Pseudomonas aeruginosa, 282
Obat tetes mata, 268t Salmonella typhi, 280
Obat tradisional, 268, 268t, 269, 283 Staphylococcus aureus, 282
Obat tuberkulosis, 172 Vibrio cholerae, 285
primer, 172 Vibrio parahaemolyticus, 284
sekunder, 172 laboratorium, 129, 135, 145, 148, 150,
Ogawa, 142 158, 160, 163, 169, 176, 177,
Okazaki, 79 192, 198, 204,214,217, 226,
Oksirase, 30 229, 240, 242, 245
L-Omitrin, 263t Penamaan binomial, 6, 95
Osteomielitis, 156, 190 Pendinginan, 22, 59, 253
Otitis ekstema, 120t, 179t, 203 Pengalengan, 253
Pengawasan mutu, 268
P Pengawet, 66, 70, 288
Pantothenate assay medium, 301, 302t Pengawetan makanan, 22, 66, 116, 247,
Paronikia, 191 251
Pasteurisasi, 4, 58, 249, 252 Pengenceran berseri, 37, 215
Patogenesis, 106, 127, 132, 139, 143, Pengenceran bertingkat, 270, 273, 289
145, 146, 149, 150, 156, 160, Pengendalian mikroorganisme, 56
162, 164, 165, 174, 176, 177, antibiotik, 68
184,212,217,218, 223,225, antiseptik, 69
227, 228, 229, 235,238, 241, autoklaf, 57-58 ,253
243,244 kemoterapi, 69
pengeringan, 59, 254 Pentose phosphate pathway, 47
penyaringan, 61 Penularan penyakit, 113-116, 198,214,
secara fisika, 56 218
secara kimia, 62 Penyakit infeksi, 107, 111, 113, 114, 118t
sinar radiasi, 56, 60 Penyakit Lyme, 119t, 123, 243, 244
suhu rendah, 59, 253 Penyaringan, 38, 61, 288, 289t, 293
tujuan, 56 Peptidase, 52
Pengeringan, 59, 254 Peptidoglikan, 7, 14, 15g, 18t, 99, 153
Penghitungan langsung, 38, 40 Peptone dilutionfluid, 269, 278, 282
Pengklonan DNA rekombinan, 89 Peptone sugar broth, 284, 286
Pengobatan, 130, 136, 140, 142, 144, Peranan mikroorganisme, 4, 5, 255, 259,
146, 147, 148, 150, 158, 160, 265
163, 164, 171, 175, 176, 177, Perbenihan agar cokelat, 161, 163
193, 198,201,204,205,210, Perbenihan Levinthal & Filde, 161
216,217, 224, 226, 229, 231, Peritrik, 13, 130, 225,227
237, 240, 243, 244, 245 Pertumbuhan bakteri, 21
Pengujian cemaran bakteri, 269 faktor-faktor, 21
angka kapang-khamir, 268t, 271, 272g media, 29
angka lempeng total, 268t, 269, 270g pengukuran, 36
metode filtrasi, 271 siklus, 33
pemeriksaan bakteri patogen, 268t, 273 Pes bubonik, 236
Pengujian potensi antibiotik, 295-301 Petrofl'-Hausser cell counter, 40
menurut Farmakope Indonesia, Pewarnaan bakteri, 97-101
edisi III, 295-297 diferensial, 98-100
edisi IV, 297-301 Gram, 14, 98, 99, 99t, 283, 285, 286
metode lempeng silinder, 295 tahan asam, 100
metode turbidimetri, 295 Kinyoun Gabbett, 100, 170
Pengujian potensi vitamin, 301-305 Ziehl Neelsen, 100, 229
Pengukuran pertumbuhan bakteri, 36 negatif, 11, 98
lempeng hitung, 36 sederhana, 98
metode tidak langsung, 40 spesial, 100
aktivitas metabolik, 41 endospora, 101
bobot kering, 41 Schaeflfer-Fulton, 101
kekeruhan, 40 flagel, 101
Nilai Duga Terdekat, 38-39, 274-277, Gray, 101
278t Simpai, 101
pengenceran berseri, 37 Burri-Gins, 101
penghitungan langsung, 38, 40 Hiss, 101
penyaringan, 38 Muir, 101
Penicillium, Pewarnaan Burri-Gins, 101
P. glaucum, 2511 Pewarnaan diferensial, 98-100
P notatum, 260, 260t Pewarnaan endospora, 101
Penisilin G, 158, 201,226, 260t Pewarnaan flagel, 101
Penisilinase, 163, 182 Pewarnaan Giemsa, 150, 238
f 316 Buku Ajar Mikrobiologi: Panduan Mahasiswa Farmasi dan Kedokteran
Pewarnaan Gram, 14, 98, 99, 99t, 283, Proses aseptis, 56

285, 286 Protease, 52, 182, 188,261
Pewarnaan Gray, 101 Protein, 52, 69, 76, 77g
Pewarnaan Hiss, 101 Protein A, 185, 188
Pewarnaan Kinyoun Gabbett, 100, 170 Protein M, 155, 156
Pewarnaan Muir, 101 Protein pengikat,
Pewarnaan negatif, 11, 98 fibrinogen, 186
Pewarnaan Schaeffer-Fulton, 101 kolagen, 186
Pewarnaan sederhana, 98 matriks, 186
Pewarnaan simpai, 101 untai tunggal, 78
Pewarnaan spesial, 100 Protein rekombinan, 265
Pewarnaan tahan asam, 100 Protein sel tunggal, 258, 259
Pewarnaan Ziehl Neelsen, 100, 229 Proteus,
Pili, 12g, 13, 126, 129, 208 P mirabilis, 97
seks, 14, 18t, 82 P vulgaris, 2511
Piomiositis, 190 Protozoa, 7, 69, 114
Plasmid, 111,17, 18t, 81,82,87, 126 Prourokinase, 266t
DNArekombinan, 86, 89, 92g Providentia stuartii, 87t
rekombinan, 85, 89 Pseudomonas, 5, 2511
Plasmolisis, 23, 59, 60, 254 P aeruginosa, 69, 97, 11 It, 118t, 119,
Plasmoptisis, 60 120t, 201-205,282
Plate count agar, 270, 270g P ATCC 10940, 290
Pneumonia, 12, 118t, 119t, 159, 176, 191, P. denitrificans, 262
196, 236 P. marginalis, 250
Pneumonicplague, 236, 237 Pseupodia, 7
Polimerase, 262 Psikrofil,21,22g
Polimiksin, 68, 260t Psikrotrof, 22, 22g
Polisakarida, 10, llt, 14, 16, 24, 29, 110, Pulmonary anthrax, 242
131,153
ekstraseluler, EPS, 12,201 Q
Polymerase chain reaction, PCR, 104,
150, 262 Quellung, 159, 160, 163
Postulat Koch, 4
Potato dextrose agar, PDA, 271 R
Prednisolon, 264t Reaksi anabolik, 43, 44, 44g
Primer spesifik, 104 Reaksi fiksasi komplemen, 240
Produk farmasi, 266t, 268t Reaksi katabolik, 43, 44g
Produk fermentasi, 255-258, 263 Reaksi kusta, 230
Profilaksis, 128, 199, 224, 227, 232 Reaksi Quellung, 159, 160, 163
Progesteron, 263, 264t Reaksi Weil-Felix, 240
L-Prolin, 263t Reducing media, 29
Propionibacterium, Rekayasa genetika, 6, 85, 86, 91g, 93,
P acnes. 179,205-206 266t
P. shermanii, 262 Relaxin, 266t
Replikasi DNA, 69, 76, 78g
Resistensi, 17, 87, 185, 191 Sampar bubonik, 118t
Respirasi, Sandi genetik, 79, 80, 80g
aerob, 49, 51g Sarcinae, 10
anaerob, 25, 49, 52 Sayuran, 121, 248t, 249, 258
glukosa, 46, 46g Sclerotinia sclerotiorum, 250
seluler, 47, 49, 52 Sediaan farmasi, 259, 287
Rhizobium, 47, 52 Sefalotin, 144,260t
Rhizopus, Sejarah mikrobiologi, 2
R. arrhizus, 264t Selenite cysteine broth (SCB), 280
R. nigricans, 2511, 263 Selulitis, 118t, 121t, 190, 201
Riboflavin, 262, 303t Sepsis, 200, 234
Riboflavin assay medium, 303t Septisemia, 135, 154t, 204, 234
Ribosom, llt, 17, 18t Sergei Winogradsky, 5
Ribosomal RNA seguencing, 104 Serotipe,
Rickettsia, 238-240 Hikojima, 142
Rifampisin, 69, 172, 2611 Inaba, 142
Riketsia, 119t, 122 Ogawa, 142
RNA, 74, 76 Serratia marcescens, 97, 25 It
RNA primase, 78 Shigella, 102, 108, 120t,248t
RNAtransfer, 79 S boydii, 103t, 138
Robert Hooke, 2 S dysenteriae, 103t, lllt, 118t, 138-140
Robert Koch, 3, 4, 141,241 Sflexneri, 103t, 138
Rocky Mountain spottedfever, 122, 239 S. sonnei, 103t, 138
/-RNA, llt, 104 Shuttle vector, 87
Ruangan aseptis, 60, 62 Sidik jari DNA, 103, 137
Sifilis, 119t, 123,212-214
S akuisata, 212
Sabouraud dextrose agar (SDA), 31, 271 d'emblee,214
Saccharomyces cerevisiae, 85, 256t, 257, kardiovaskular, 214
258, 266t kongenital, 212, 214, 216
ATCC 8090, 303t prekoks, 214
Salep mata, 268t, 287 tarda, 214
Salmonella,4% 102, 108, 120t, 134g,248t primer, 213,215
S choleraesuis, 103t, 130, 135 saraf, 213
S. enterica, 118t, 121 sekunder, 213
S enteritidis, 130, 131, 133 Sigelosis, 139-140
S. gallinarum, 130 Siklus Krebs, 46, 49, 50g, 52
SparatyphiA, 103t, 133 Siklus pertumbuhan bakteri, 33
SparatyphiB, \03t Simmons citrate, 274
S pullorum, 130 Sinar gamma, 61
S. schottmuelleri, 133 Sinar katode, 61
S typhi, 31,96, 103t, 118t, 130-138,280 Sinar radiasi, 56, 60
S. typhimurium, 133 gamma, 61
Salmonella Shigella agar (SSA), 135, 280 katode, 61
318 . B u b u A j a r M i k r o b i o l o g i : P a n d u a n M a ha siswa F a rma si d a n K e d o k t e r a n
ultraviolet, 60, 194 Streptokokus

X,61,84, 85 a-hemolitik, 153
Sitoplasma, llt, 17, 19, 166, 238 p-hemolitik, 153
B-Sitosterol, 264t y-hemolitik, 153
Sitotoksin, 132, 139, 183,202 Streptolisin O, 158
Soybean-casein digest agar, 70 Streptomisin, 68, 172, 237, 260t
Spirilum, 10, 123 Streptomyces sp., 2611
Spiroketa, 10, 118, 123,243 Streptomyces,
Spottedfever, 239 S albus G, 87t
Stafilokinase, 188 S. aureus, 264t
Staphylococcus, 10, 96, 108, 121, 191 S. cattleya, 260t
S albus, 97, 179 S. clavuligerus, 260t
S aureus, 71,97, 108, lllt, 119t, 120t, S. coelicolor, 262t
179-194, 248t, 282 S erythreus, 260t
ATCC 6538, 290 S griseus, 260t
S. citreus, 97 S. lincolnensis, 260t
S epidermidis, 96, 108, 121, 179t, 194 S. mediterranei, 2611
S. saprophyticus, 96 S. nodosus, 260t
Staphylococcus streak technigue, 163 S. noursei, 260t
Sterilisasi, 56, 62, 249, 253 S. venezuelae, 2611
bertahap, 58 Struktur DNA, 74, 75
dengan udara panas, 58 Stmktur RNA, 74
Steroid, 263, 264t Struktur sel bakteri, 11, 12g, 68
Stigmasterol, 264t Suhu di bawah titik nol, 59
Streak plate method, 33 Suhu rendah, 59, 253
Streptococcus, 10, 49t, 108, 153-158, pembekuan, 33, 254
248t, 256t pendinginan, 22, 59, 253
S. agalactiae, 154t, 155 suhu di bawah titik nol, 59
S egui, 154t Sulfite polymyxin sulfadiazine agar, SPSA,
280
Sfaecalis, 154t, 155,235 Superantigen, 157, 184, 189
S. gordonii, 120t Superoksida dismutase, SOD, 26, 28t
S. hemolyticus alpha, 108 Suplemen makanan, 268t
S. mutans, 120t, 154t Susu, 23, 58, 108, 249, 252, 256t, 257
S. non-hemolyticus, 108
S. oralis, 120t T
S. pneumoniae, 108, 119t, 120t, 154t, Tabung Durham, 53, 102, 275g, 2779
159-160 Taxol, 266t
Spyogenes, lllt, 119t, 121, 154t, Tekanan osmotik, 23, 24g, 59, 60, 254
155-157, 199-201 Teknik aseptik, 3
S. sanguis, 120t Telur, 137, 248
S. viridans, 155,235 Teori generasi spontan, 2, 3
Streptodomase, 155, 156, 261 Teori Salton, 99
Streptokinase, 155, 156, 184, 201,261 Teori sel, 2 ,
Indeks 319
Termofil, 21, 23 Tuberkulin, 168, 169, 170

bakteri, 23, 29 Tuberkulosis, 119t, 120t, 165-169
ekstrem, 7 primer, 166
Tetanospasmin, llOt, 227 sekunder, 166
Tetanus, 26, llOt, 122, 227 Tujuan pengendalian mikroorganisme,
Tetrasiklin, 69, 177, 245,261t 56
Tetrathionate brilliant green agar
(TBGB), 280 Tumor necrosis factor (TNF), 266t
Thiamine assay medium, 303t U
Thiosulphate citrate bile sah sucrose, Uap bertekanan, 57, 253
TCBS, 284, 285 Uji aglutinasi, 136, 229
Tifus endemik, 239 cepat, 136
Tiamin, 25, 303t Uji amplifikasi asam nukleat, 198
Tifus epidemik, 239 Uji angka coliform, 268t, 275-277
L-Tirosin, 263t Uji angka kapang-khamir (AKK), 268t,
Toksigenisitas, 110 271-272
Toksin bakteri, 110 Uji angka lempeng total (ALT), 268t,
Toksin botulisme, 57, 110 269-271
Toksin pirogenik, 111, 155, 157 Uji antibodi treponema, 215
Toksin Shiga, 111 Uji bakteri patogen, 268t, 273
Toksin termolabil, 126 Uji dekarboksilasi lisin, 281, 285
Toksin termostabil, 126 Uji efektivitas bahan pengawet, 70
Toksin tetanus, 227 Uji fermentasi karbohidrat, 284, 286
Toksin difteri, 110 Uji fertilitas media, 290
Toksin eritrogenik, 111, 201 Ujiflokulasi, 215
Topoisomerase, 78 Uji fluoresensi antibodi treponema, 216
Toxic shock syndrome, 185, 234 Uji hemaglutinasi pasif, 216
Toxic shock syndrome toxin (TSST-1), Uji imobilisasi, 212, 216
184 UjilMVIC,273
Trakoma, 119t, 195, 198 Uji indol, 274,281
Transduksi, 82, 88, 192 UjiKahn,215
Transformasi, 82, 89, 91g, 192 Uji katalase, 283
Transkripsi, 69, 79 Uji kepekaan bakteri, 140, 201
Translasi, 69, 79-81,83 Uji koagulase, 187, 193,282
Transpor elektron, 16, 49, 52 Uji koefisien fenol, 71, 72, 181, 268
L-Treonin, 263t Uji konfirmasi, 148, 275, 277, 280, 282,
Treponema pallidum, 119t, 120t, 123, 283, 284, 285
211-216 Uji Mantoux, 170
Treponema pallidum immobilization test, Uji metil merah, 274
212 Uji mikroba patogen, 268t, 273-287
L-Triptofan, 263t Uji motilitas, 280, 285, 286
Tributirinase, 182 Uji MycoDot, 170
/RNA, llt, 80 Uji oksidase, 283, 286
Tryptone broth, 274, 283 Uji pencairan gelatin, 283
Uji pengikatan komplemen, 176,215,216 oral polio, 265
Uji peroksidase antiperoksidase, 170 pertusis, 175
Uji pertumbuhan, 283, 285 tifoid, 138
Uji pewarnaan Gram, 14, 98, 99, 99t, Vaksinasi, 142, 163, 175,240
283, 285, 286 L-Valin, 263t
Uji pigmen, 283 Vankomisin, 68, 193,260t
Uji potensi antibiotik, 295-301 Vektor kloning, 87
Uji potensi vitamin, 301-303 Vibrio, 10, 123
Uji reagin, 215 Vibrio biotipe El Tor, 141
Uji reduksi nitrat, 280, 284 V. cholerae, 108, lllt, 118t, 120t, 123,
UjiRPR,215 141-142,285
Uji sensitivitas antibiotik, 193 V. parahaemolyticus, 143-144,248t, 284
Uji serologi, 96, 136, 158, 176, 215, 226, V. vulnificus, 144-146
242,282 Vibrionaceae, 144
Uji sifat biokimia, 101, 102g, 140, 150, Virulensi, 109, 110, 126, 132, 145, 155,
226 185,236
Uji sifat halofilik, 285 Virus, 8
Uji sitrat, 274 Virus bakteri, 82
Uji sterilitas, 268, 287-295 Vitamin, 27, 262, 268t,301
Uji tuberkulin, 168, 169, 170 B,, 257, 303t
Uji urease, 150 B,, 303t
UjiVDRL,215 B,2, 16, 257, 262, 302t
Uji voges proskauer, 274, 281, 284 Vitamin B,^ assay medium, 302t
Uji widal, 136 Voges Proskauer, 131, 274, 281, 284
Uji WR, 215 Volutin, 18
Ultra-High Temperature, 252
Unsur kelumit, 24 W
UPEC, 129 Wahana kloning, 87, 88, 889
Urea agar, 281 Waktu generasi, 33, 35, 143, 165, 243
Urea breath test, UBT, 150 Waktu kematian termal, 57, 58, 252
Urease, 149 Waktu pengurangan desimal, 57
Weil-Felix, 240
V Wilson-Blair agar, 131
Vaginosis bakterial, 218,220
Vaksin, 264 X
antraks, 243 Xylose lysine desoxycholate agar, XLDA,
BCG, 173,232, 265 280
campak, 265
DPT, 164, 175,227, 265 Y
DT, 228 Yersinia,
hepatitis Brekombinan, 265 enterocolitica, 125, 248, 249
Leptospira, 218 pestis, 118t, 235-237
mono\a\en Salmonella typhi, 136, 137
SEKILAS TENTANG
PENYUSUN
M a ksum R a dji lahir di Bangkalan Madura pada tanggal 12

Desember 1950. Setelah mendapat gelar Sarjana Farmasi
dan Apoteker dari Departemen Farmasi Universitas Indo-
nesia, penulis mengikuti programS2di Program Pascasarjana
Ilmu Biomedik, kekhususan Mikrobiologi, Fakultas Kedok-
teran Universitas Indonesia. Dalam program S2 tersebut,
penulis mendapatkan gelar Master dalam bidang Ilmu
Biomedik. Penulis kemudian menempuh program Doktor
(S3) di Nara Institute of Science and Technology Jepang dan
memperoleh gelar PhD dalam bidang biosciences and bio-
technology.
Sejak menjadi staf pengajar di Departemen Farmasi
Universitas Indonesia pada tahun 1982, penulis mengasuh beberapa mata kuliah,
antara lain Mikrobiologi Farmasi, Imunologi, Virologi, Bioteknologi Farmasi, dan
Farmakologi Molekuler. Selain mengajar, sebagai dosen senior, penulis telah banyak
membimbing penelitian mahasiswa, baik pada Program Sarjana maupun Program
Pascasarjana Ilmu Kefarmasian Universitas Indonesia. Berbagai hasil penelitian
penulis yang terkait dengan bidang mikrobiologi danbioteknologi telah dipublikasikan
di berbagai jurnal ilmiah, baikjurnal nasional maupun jurnal internasional.
Beberapa penghargaan telah diraih oleh penulis, antara lain Satyalancana Karya
Sapta 20 tahun dari Pemerintah RI, penghargaan sebagai Peneliti Terbaik Universitas
Indonesia, penghargaan sebagai Penulis Makalah Internasional, dan penghargaan
sebagai Penulis Buku dari Universitas Indonesia.
321

Buku Ajar Mikrobiologi Panduan Mahasiswa Farmasi Kedokteran Reaksi Reaksi Trigliserida

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Buku Ajar Mikrobiologi Panduan Mahasiswa Farmasi Kedokteran Reaksi Reaksi Trigliserida

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

cu Ajar

PEMBAJAKAN BUKU ADALAH KRIMINAL!

DR. Maksum Radji, M.Biomed

PENERBIT BUKU KEDOKTERAN

Desain kulit muka: Teddy Kurniawan, S.Sn

Hak cipta dilindungi Undang-Undang

Perpustakaan Nasional: Katalog Dalam Terbitan (KDT)

Isi di luar ta nggung ja wa b percetakan

BAB 4 M E T ABO LI S M E BAKT E R I

Vibrio parahaemolyticus 143

Tabel 2.1. Makromolekul Penyusun Materi Sel Bakteri 11

Tabel 16.3. Beberapa Produk Fermentasi Berbagai Jenis Bahan Baku

Gambar 2.1 Struktur sel bakteri Gram-negatif 12

Gambar 6.1 Struktur paralel DNA untai ganda 75

PENGERTIAN DAN PERANAN MIKROORGANISME

tersebut. Sebagai contoh, Staphyiococcus aureus, bakteri yang umumnya ditemukan

S T R U K T U R UTAMA MAKROMOLEKUL BAKTERI

Penyusun Materi Sel Bakteri

Polisakarida Karbohidrat Kapsul bakteri, badan inklusi,

Fosfolipida Asa m lemak Membran sel

G a mba r 2.1 Struktur sel bakteri Gram-negatif.

G a mba r 2.2 Struktur sel bakteri Gram-positif.

habitatnya untuk mempertahankan hidup. Selain itu, glikokaliks dapat mempertahan-

G a mba r 2.3 Struktur dasar flagel bakteri Gram-negatif.

G a mba r 2.4 Dinding sel bakteri Gram-positif.

?\ > • > } > > > >

Membran luar -<

G a mba r 2.5 Dinding sel bakteri Gram-negatif.

Dinding sel bakteri Gram-negatif 'WKB

Ba gia n sel F ungsi M a kromole kul

Flagel Pergerakan bakteri Protein

Pili seks Mating, transfer DNA secara Protein

Fimbria Alat menempel pada permu- Protein

Inklusi Tempat penyimpanan nutrisi Karbohidrat, lemak, protein,

-10 O 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110

G a mba r 3.1 Grafik pertumbuhan beberapa jenis bakteri.

G a mba r 3.2 Pengaruh tekanan osmotik terhadap sel bakteri.

Anaerob aerotoleran tidak menggunakan oksigen untuk pertumbuhan, tetapi dapat

F a ktor p e r t u m b u h a n orga nik

M a be l 3 . 1 . Pengaruh O ksige n Terhadap P e rtumbuha n Berbagai Tipe Bakteri

Pola pertum- Pertum- Pertum- Pertum- Pertum- Pertumbuhan

SOD = superoksida dismutase

Media perbenihan harus memenuhi persyaratan sebagai berikut.

Gambar 3.3 Be j a n a a n a e r o b u n t u k m e n g i n k u b a si b ak t er i a n a e r o b d a l a m c a w a n pet r i .

Sel memanjang dan

Dinding sel dan

Terbentuk dinding sel

G a mba r 3.4 Pembelahan biner pada bakteri.

G a mba r 3.5 Siklus pertumbuhan sel bakteri.

n u h n y a benar karena kadang-kadang sebuah k o l o n i tidak berasal dari satu bakteri,

Cara filtrasi atau penyaringan

IVIetode penghitungan Nilai Duga Terdekat

Penghitungan langsung secara mikroskopik

Tabel 3.2. Daftar Nilai Duga Terdekat ( M o s t P r o b a b l e N u m b e r , MPN)

karena itu, cara i n i biasanya digunakan apabila w a k t u m e r u p a k a n pertimbangan

Perkiraan jumlah bakteri dengan metode tidak langsung

gugus fosfat ( P i ) . A p a b i l a satu gugus fosfat ( P i ) t e r m i n a l terlepas dari A T P , s e n y a w a

Peran A T P dalam keseimbangan reaksi anabolik d a n katabolik sangat penting

JALUR METABOLISME PRODUKSI ENERGI

Molekul tunggal 'T

NAD" N A D H " + H"^

terkendali dalam serangkaian reaksi oksidasi-reduksi. Serangkaian proses reaksi

Glukosa merupakan jenis karbohidrat yang paling sering dimanfaatkan oleh m i -