PROPOSAL PENELITIAN

UJI EFEKTIVITAS EKSTRAK ETANOL DAUN KETEPENG CINA

(Cassia alata L.) SEBAGAI ANTIINFLAMASI PADA TIKUS PUTIH
JANTAN YANG DIINDUKSI KARAGENAN

OLEH
CINDI CASIA HUTASOIT
NPM : 17.18.023

PROGRAM STUDI FARMASI PROGRAM SARJANA

FAKULTAS FARMASI
INSTITUT KESEHATAN DELI HUSADA DELI TUA
2021
 KATA PENGANTAR
Puji dan syukur penulis panjatkan kehadiran Tuhan Yang Maha Esa atas

berkat dan karunia-Nya sehingga penulis dapat menyusun penulisan proposal

penelitian ini degan judul “Uji Efektivitas Ekstrak Etanol Daun Ketepeng

Cina (Cassia alata L.) Sebagai Antiinflamasi Pada Tikus Putih Jantan Yang

Diinduksi Karagenan” dimana salah satu persyaratan kelulusan untuk

memperoleh gelar Sarjana Farmasi (S.Farm) di Institut Kesehatan Deli Husada

Deli Tua Fakultas Farmasi Program Studi Sarjana Farmasi.

Penulisan proposal ini dapat terlaksanakan dengan baik atas berkat

dukungan bimbimbingan, bantuan dan pengarahan dari berbagai pihak, untuk itu

pada kesempatan ini penulis banyak mengucapkan terimakasih sebesar-besarnya

kepada :

1. Tuhan Yang Maha Esa atas berkat dan rahmat-Nya karena telah memberi

saya kekuatan dan kelancaran dalam studi saya.

2. Kedua orang tua saya, yaitu bapak Darius Hutasoit dan Ibu Arta Arpita

Simatupang yang telah berjuan dan bekerja keras untuk proses perkuliahan

saya dan tidak pernah putus asa dalam mendidik, membimbing dan

mendukung baik secara moral maupun materi serta doa yang tidak

terhingga kepada saya.

3. Ibu Terulin S. Meliala, Amd.Keb.,SKM.,M.Kes. Selaku ketua Yayasan

Rumah Sakit Umum Sembiring Delitua.

4. Bapak Drs. Johannes Sembiring, M.Pd.,M.Kes. Selaku Rektor Institut

Kesehatan Deli Husada Delitua.

5. Bapak apt. Linta Meliala, S.Farm.,M.Si. Selaku Dekan Fakultas Farmasi

Institut Kesehatan Deli Husada Delitua.

i
6. Ibu apt. Delisma M. Simorangkir, S.Si., M.Si. Selaku Ketua Jurusan

Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Deli Husada Delitua.

7. Ibu apt. Delisma M. Simorangkir, S.Si., M.Si. Selaku dosen pembimbing

saya dengan tulus untuk membimbing dan mengarahkan saya dalam

pembuatan proposal ini

8. Ibu apt. Vera Estefania Kaban, S.Farm. Selaku Wali Tingkat IV angkatan

ke IV yang telah memberikan motivasi kepada kami farmasi IV

9. Ibu apt. Vera Estefania Kaban, S.Farm selaku Dosen Penanggung Jawab

Laboratorium Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Deli Husada Delitua.

10. Seluruh Staf Dosen dan Laboran Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Deli
Husada Delitua yang telah banyak membantu dan memberi ilmu kepada
saya selama menjalani proses pendidikan.
11. Terimakasih kepada kakak dan adik-adik tercinta saya karena telah

memberikan support untuk saya.

12. Terimakasih kepada sahabat dan teman teman saya yang telah memberikan

semangat dan pinjaman buku kepada saya.

Deli Tua, Januari 2021

Penulis

Cindi Casia Hutasoit

NPM: 17.18.023

ii
 DAFTAR ISI

Halaman
KATA PENGANTAR .............................................................................................i
DAFTAR ISI ............................................................................................................iii

BAB I PENDAHULUAN ........................................................................................1

1.1 Latar Belakang ...........................................................................................1
1.2 Rumusan Masalah ......................................................................................3
1.3 Tujuan penelitian .......................................................................................3
1.4 Manfaat penelitian .....................................................................................4

BAB II TINJAUAN PUSTAKA .............................................................................5

2.1 Inflamasi ....................................................................................................5
2.1.1 Defenisi Inflamasi ..............................................................................5
2.1.2 Tanda-tanda Inflamasi ........................................................................6
2.2 Mediator Inflamasi ....................................................................................7
2.3 Tumbuhan Daun Ketepeng Cina (Cassia alata L.) ...................................8
2.3.1 Sistematika Tumbuhan Daun Ketepeng Cina (Cassia alata L.) .......8
2.3.2 Nama Daerah ......................................................................................8
2.3.3 Morfologi Tumbuhan Daun Ketepeng Cina (Cassia alata L.)..........9
2.3.4 Kandungan Kimia Daun Ketepeng Cina (Cassia alata L.)................10
2.3.5 Manfaat Daun Ketepeng Cina (Cassia alata L.) ...............................10
2.4 Ekstraksi ....................................................................................................11
2.4.1 Ektraksi Secara Dingin ........................................................................12
2.4.2 Ekstraksi Secara Panas ........................................................................12
2.5 Ekstrak .......................................................................................................14
2.6 Etanol .........................................................................................................16
2.7 Obat Antiinflamasi .....................................................................................16
2.7.1 Obat Antiinflamasi Golongan Steroid ................................................17
2.7.1 Obat Antiinflamasi Golongan Non Steroid .........................................17
2.6 Natrium Diklofenak ...................................................................................17

iii
 2.9 Karagenan ..................................................................................................18
2.10 Tikus Putih (Ratus norvegicus).................................................................18
2.11 Kerangka Konsep .....................................................................................20
2.12 Hipotesis Penelitian ..................................................................................21

BAB III METODOLOGI PENELITIAN .............................................................22

3.1 Desain Penelitian .......................................................................................22
3.2 Lokasi dan Waktu Penelitian .....................................................................22
3.2.1 Lokasi Penelitian ..............................................................................22
3.2.2 Waktu Penelitian ..............................................................................22
3.3 Populasi dan Sampel ..................................................................................22
3.3.1 Populasi .............................................................................................22
3.2.2 Sampel ...............................................................................................23
3.4 Alat dan Bahan ...........................................................................................23
3.4.1 Alat ....................................................................................................23
3.4.2 Bahan ................................................................................................23
3.5 Prosedur Penelitian ....................................................................................23
3.5.1 Pengolahan Sampel ...........................................................................23
3.5.2 Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Ketepeng Cina (Cassia alata
L.) ......................................................................................................24
3.5.3 Skrining Fitokimia.............................................................................24
3.5.4 Karekterisasi Simplisia.......................................................................26
3.5.5 Pembuatan Sediaan Uji .....................................................................28
3.5.6 Penyiapan Hewan Uji ........................................................................28
3.5.7 Pengujian Efektivitas Penyembuhan Antiinflamasi .........................29
3.6 Orientasi Metode Induksi Antiinflamasi....................................................30
3.7 Perhitungan Persen Radang .......................................................................31
3.8 Analisis Data..............................................................................................31
DAFTAR PUSTAKA

iv
 BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Cedera merupakan kerusakan jaringan yang disebabkan adanya kesalahan

teknis, benturan atau aktivitas fisik yang melebihi batas beban dalam suatu cedera,

sehinga otot dan tulang tidak lagi dalam keadaan anatomis. Berbagai langkah

dapat dilaksanakan untuk memaksimalkan upaya yang dapat mencegah timbulnya

cedera yaitu harus ditangani dengan perawatan awal pada saat kecelakaan terjadi

sehingga dapat meminimalkan terjadinya kecacatan (Sari, 2019).

Inflamasi merupakan suatu reaksi kompleks terhadap agen atau bahan

yang merugikan, yang berupa respon vaskular, migrasi dan aktivitas leukosit,

serta reaksi sistemik. Fungsi respon inflamasi untuk menghancurkan,

mengencerkan atau membatasi agen yang merugikan dan memicu terjadinya

serangkaian proses yang mencoba untuk memulihkan dan mengganti jaringan

yang rusak. Pada dasarnya inflamasi merupakan suatu respon protektif untuk

menyingkirkan agen penyebab cedera dan konsekuensi dari cedera tersebut,

seperti sel dan jaringan nekrotik, untuk memunculkan reaksi inflamasi sebuah

jaringan harus hidup dan tentunya harus memiliki mikrosirkulasi fungsional

(Widianti, 2017).

Inflamasi biasanya diobati dengan menggunakan obat antiinflamasi

golongan steroid dan obat antiinflamasi golongan nonsteroid, obat antiinflamasi

dari bahan kimia sintesis banyak digunakan masyarakat karena mempunyai efek

yang cepat dalam menghilangkan inflamasi tetapi juga mempunyai resiko efek

samping yang berbahaya, antara lain menimbulkan gangguan pada saluran

pencernaan, sistem sirkulasi tubuh, saluran pernafasan, proses metabolik dan

1
hipersensitivitas. Oleh karena itu pemanfaatan tumbuhan obat dengan khasiat

antiinflamasi perlu dilakukan untuk menemukan alternatif pengobatan dengan

efek samping yang relatif lebih kecil (Pramitaningastuti, 2017).

Bahan obat tradisional yang berasal dari alam, yang berasal dari tumbuh-

tumbuhan, hewani dan mineral. Sumber daya hayati beraneka ragam dan banyak

menghasilkan berbagai senyawa kimia alami dalam pengobatan tradisional.

Pengobatan tradisonal menggunakan ramuan yang berasal dari sumber daya hayati

seperti akar, kulit batang, kayu, daun, bunga, buah dan biji (Surbakti, 2019).

Lebih dari seribu spesies tumbuhan dapat dimanfaatkan sebagai bahan

baku obat herbal. Salah satu tanaman yang dapat dijadikan sebagai tanaman obat

adalah tumbuhan ketepeng (Cassia alata L.) yang merupakan tanaman perdu dan

tumbuh secara liar di tempat yang lembab. Ketepeng cina dapat ditemukan

didaerah tropis maupun subtropis. Tumbuhan ketepeng juga berpotensi sebagai

obat tradisional untuk mengobati infeksi bakteri seperti sifilis, bronkitis, infeksi

jamur seperti panu, kurap, eksim dan infeksi parasitis seperti malaria. Tumbuhan

ketepeng mengandung alkaloid, saponin, tannin, steroid, antrakuinon, flavonoid

dan glikosida. Flavonoid pada tanaman memiliki efek antiinflamasi, antialergi,

antimikroba, antioksidan, dan efektif untuk beberapa golongan jamur (Egra, 2019)

Efek farmakologis yang dimiliki oleh ketepeng cina diantaranya sebagai

obat pencahar, obat cacing, penghilang gatal-gatal dan obat kelainan kulit yang

disebabkan oleh parasit. Daun ketepeng cina memiliki kandungan penting seperti

alkaloid, saponin, tannin, flavonoid dan antrakuinon. Cara pemakaian daun

ketepeng cina secara tradisional dengan menggosokkan atau menempelkan hasil

tumbukan pada kulit yang sakit. Daun ketepeng cina (Cassia alata L.)

2
mengandung flavonoid yang memiliki efek antiinflamasi, antialergi, antioksidan

dan antifungi (Sayuti, 2015).

3
 4

Umumnya masyarakat menggunakan daun ketepeng cina secara tradisional

yaitu dengan cara digosokkan pada kulit yang sakit atau ditumbuk lalu

ditempelkan pada kulit yang sakit. Dalam penggunaan sehari-hari masyarakat juga

menambahkan sedikit minyak tanah, air, atau kapur sirih. Menggunakan tanaman

obat tradisional terbukti relatif aman, asalkan cara penggunaannya dengan dosis

yang benar dan jika menimbulkan efek samping yang kemungkinan rendah. Akhir

ini bahan alam telah banyak di pergunakan sebagai pengobatan sehari-hari

kembali meningkat, dan dengan indikasi yang tepat jarang sekali menimbulkan

efek samping (Edo, 2017).

Berdasarkan uraian latar belakang tersebut, maka peneliti ingin

mengetahui penelitian tentang efektivitas penyembuhan inflamasi (peradangan)

yang menggunakan ekstrak etanol daun ketepeng cina pada tikus yang diinduksi

karangenan. Sehingga diharapkan tumbuhan ini dapat dimanfaatkan sebagai obat

antiinflamasi.

1.2 Rumusan Masalah

a. Apakah ekstrak etanol daun ketepeng cina (Cassia alata L.) dapat

menurunkan inflamasi pada tikus putih jantan?

b. Berapakah dosis paling efektif pada ekstrak etanol daun ketepeng cina

(Cassia alata L.) dapat menurunkan inflamasi tikus putih jantan?

c. Apakah ekstrak etanol daun ketepeng cina (Cassia alata L.) memberikan

efek yang setara dengan obat natrium diklofenak dalam penurunan

inflamasi?
 5

1.3 Tujuan Masalah

a. Untuk mengetahui ekstrak etanol daun ketepeng (Cassia alata L.) dapat

menurunkan inflamasi pada tikus putih jantan

b. Untuk menentukan dosis paling efektif pada ekstrak etanol daun ketepeng

(Cassia alata L.) dapat menurunkan inflamasi tikus putih jantan

c. Untuk mengetahui ekstrak etanol daun ketepeng (Cassia alata L.)

memberikan efek penurunan inflamasi yang lebih baik dibandingkan

dengan obat natriun diklofenak

1.4 Manfaat Penelitian

Berdasarkan uraian di atas maka manfaat penelitian ini adalah:

1. Agar dapat menambah pengetahuan dan wawasan bagi peneliti selanjutnya

2. Dapat menambah pengalaman dan pemahaman pada penelitian tentang

daun ketepeng cina (Cassia alata L.) sebagai anti inflamasi.

3. Sebagai sumber informasi dan sebagai refrensi dalam penemuan obat baru

untuk inflamasi atau peradangan

6
 BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Inflamasi

2.1.1 Defenisi Inflamasi

Inflamasi adalah respons terhadap cedera jaringan dan infeksi. Ketika

proses inflamasi berlangsung, terjadi reaksi vascular di mana cairan, elemen-

elemen darah, sel darah putih (leukosit), dan mediator kimia berkumpul pada

tempat cedera jaringan atau infeksi. Proses inflamasi merupakan suatu mekanisme

perlindungan dimana tubuh berusaha untuk menetralisir dan membasahi agen-

agen yang berbahaya pada tempat cedera dan untuk mempersiapkan keadaan

untuk perbaikan jaringan. Meskipun ada hubungan antara inflamasi dan infeksi

istilah-istilah ini tidak boleh dianggap sama. Infeksi disebabkan oleh

mikroorganisme dan menyebabkan antiinflamasi, tetapi tidak semua inflamasi

disebabkan oleh infeksi. Dua tahap inflamasi adlah tahap vascular yang terjadi 10-

15 menit setelah terjadinya cedera dan tahap lambat (Kee, 1996).

Proses inflamasi merupakan suatu mekanisme pertahanan dimana tubuh

berusaha untuk membasmi atu menetralisir agen-agen atau bakteri yang masuk,

sehingga dapat berbahaya pada tempat yang terkena luka atau cedera dan dalam

mempersiapkan keadaan perbaikan jaringan, ketika proses inflamasi berlangsung

terjadi reaksi vaskular dimana cairan, elemen-elemen darah, sel darah putih dan

mediator kimia berkumpul pada tempat terjadinya cedera jaringan atau infeksi

berbagai mediator kimia dilepaskan selama proses inflamasi. Dalam artinya

proses inflamasi ini untuk menghilangkan penyebab awal jejas sel serta

membuang sel dan jaringan yang diakibatkan rusaknya sel (Sari, 2019).

5
 8

Inflamasi merupakan suatu respon pertahanan tubuh yang digunakan untuk

melawan agen penyebab kerusakan sel pada suatu organisme yang ditandai

denagn adanya kemerahan pada bagian tubuh, terasa panas, adanya tumor, terasa

nyeri dan sakit. Inflamasi dapat diobati jika terdapat senyawa yang mampu

menghambat aktivasi dari enzim siklooksigenase dan lipooksigenase yang dikenal

sebagai senyawa antiinflamasi. Senyawa antiinflamasi dapat dibagi menjadi dua

golongan yaitu golongan steroid dan golongan non-steroid. Golongan steroid

(senyawa antiinflamasi yang sangat kuat karena mampu menghambat enzim

fosfolipase) dan golongan non-steroid (senyawa antiinflamasi yang lemah karena

menghambat enzim siklooksigenase (Puspawati, 2017).

2.1.2 Tanda-tanda Inflamasi

a. Kemerahan (Rubor)

Jaringan yang mengalami radang akut tampak berwarna merah, seperti

pada kulit terkena sengatan matahari, selulitas karena infeksi bakteri atau

konjungtivitas akut (Setyarini, 2009).

b. Panas (Kalor)

Panas dapat disebabkan oleh bertambahnya pengumpulan darah. Mungkin

juga karena pirogen (substansi yang meninmbulkan demam) yang mengganggu

pusat pengaturan panas pada hipotalamus (Kee, 1996).

c. Pembengkakan (Tumor)

Pembengkakan sebagai hasil adanya edema merupakan suatu akumulasi

cairan dalam rongga ekstrak vaskular yang merembes ke dalam jaringan intestinal

pada tempat cedera (Setyarini, 2009).

 9

d. Rasa Sakit (dolor)

Pada radang, rasa sakit merupakan salah satu gambaran yang dikenal baik

oleh penderita rasa sakit sebagian disebabkan oleh jaringan yang membengkak

dan terutama karena adanya tekanan di dalam rongga abses (Setyarini, 2009).

e. Hilangnya Fungsi

Hilangnya fungsi yang diketahui merupakan konsekwensi dari suatu

proses radang. Gerakan yang terjadi pada daerah radang, baik dilakukan secara

langsung atupun reflek akan mengalami hambatan rasa sakit. Pembengkakan yang

hebat secara fisik mengakibatkan kurangnya gerakan jaringan (Setyarini, 2009).

2.2 Mediator Inflamasi

Berkurangnya inflamasi terjadi karena zat-zat mediator hanya diproduksi

dalam waktu sekejap dan memiliki waktu paruh yang pendek. Namun demikian

karena kemampuannya untuk menimbulkan kerusakan jaringan inflamasi,

inflamasi juga harus di regulasi secara aktif dan ketat. Kebanyakan mediator

bekerja dengan berikatan pada reseptor spesifik, dan sebagian memiliki aktivitas

enzimatik langsung (protease) dan sebagian lainnya memediasi kerusakan

oksidatif. Mediator dapat bekerja dalam rangkaian yang menguatkan atau yang

megatur untuk menstimulasi pelepasan faktor-faktor downstream lainnya sebagian

mediator hidup singkat diakibatkan penguraian yang cepat atau diinaktivasi oleh

enzim atau inhibisi (Mitchell, 2008).

Rangsangan fisik atau kimiawi pada inflamasi yang merusak

menyebabkan pelepasan mediator inflamasi seperti histamin, serotonin,

bradikinin, prostaglandin dan lain-lain yang menimbulkan reaksi radang seperti

rubor (kemerahan), kalor (panas), dolor (nyeri), dan turgor pembengkakan

(Wahyudi, 2020).
 10

2.3 Tumbuhan Daun Ketepeng Cina (Cassia alata L.)

2.3.1 Sistematika Tumbuhan Daun Ketepeng Cina (Cassia alata L.)
Menurut (Masitoh, 2019) sistematika daun ketepeng cina (Cassia alata L.)
adalah sebagai berikut antara lain:
Kingdom : Plantae
Divisi : Spermatophyta
Kelas : Dycotiledonae
Ordo : Rasales
Famili : Leguminosae
Genus : Cassia
Spesies : Cassia alata L.
Nama Lokal : Ketepeng Cina

Gambar 2.1 Daun Ketepeng Cina (Cassia alata L.)

2.3.2 Nama Daerah

Tanaman ketepeng cina ini memiliki nama daerah yang berbeda-beda di

setiap daerah yaitu, ketepeng kebo daerah jawa, ketepeng badak daerah sunda,

acon-acon daerah Madura, sajamera daerah Halmahera, kupang-kupang daerah

ternate, tabankun daerah tidore, kaskado daerah papua, daun kurap, galinggang

uru’kap daerah sumatera (Agromedia, 2008).

 11

Tumbuhan ini dalam bahasa asing dikenal dengan nama ringworm bush,

seven golden candlestick, candelabra bush, ringwormrub, dan empress candle

plant (Inggris), dartrier dan bois dartre (Perancis), cafe beirao, fedegogo

gigante, fedegoso grande, mangerioba-de-para, mangerioba-grande dan mata-

pasto (Portugis), bajagua dan mocote (Spanyol), raun suluk (Bahasa Brunei

Darussalam), andadasari dan palochina (Filipina), daun kurap, gelenggang,

ludanggan dan daun kupang (Malaysia), khi let ban (Laos), kheekhaak, chumhet,

thet dan chumhethyai (Thailand), duiyedou (Cina) (Fajri, 2018).

2.3.3 Morfologi Tumbuhan Daun Ketepeng Cina (Cassia alata L.)

Ketepeng cina (Cassia alata L.) merupakan salah satu jenis perdu yang

besar dan banyak tumbuh secara liar di tempat tempat yang lembab. Ketepeng

cina atau sering juga disebut juga dengan ketepeng kerbau mempunyai

percabangan banyak, daunnya besar-besar berupa daun majemuk meyirip genap,

bau langu, anak daunnya kaku berbentuk jorong sampai bundar telur sungsang

berpasangan 5-12 baris, panjang anak daun 3-15 cm, lebar 2,5-9 cm, ujung daun

tumpul, pangkal daun miring, tepi daun rata, tangkai anak daun 2 cm, bunga

tersusun dalam tandan bertangkai panjang, tegak, letaknya di ujung-ujung cabang.

Mahkota bunga berwarna kuning terang. Buah berupa polong yang gepeng,

bersayap pada kedua sisinya dengan panjang 10-20 cm dan lebar 12-15 mm.

Ketepeng cina tumbuh subur pada dataran rendah sampai ketinggian 1400 m

diatas permukaan laut. Selanjutnya tanaman ketepeng cina memerlukan banyak

air untuk melangsungkan pertumbuhannya (Masitoh, 2019).

Tumbuhan ketepeng cina merupakan tumbuhan dikotil yang mempunyai

sistem perakaran tunggang. Sistem perakaran tunggang ini umumnya berfungsi

untuk memperluas bidang penyerapan dan memperkuat tegaknya batang. Jika

 12

dilihat dari batangnya, tumbuhan ketepeng cina (Cassia alata L.) merupakan

tumbuhan berkayu dengan ketinggian ± 3 meter. Daun ketepeng cina merupakan

daun yang berpasang-pasangan sebanyak 5–12 baris, Pertulangan daunnya

menyirip dengan tangkai anak daun yang pendek dengan panjang ± 2 cm dan

berwarna hijau. Jika buah tersebut masak, maka pada kedua sisinya akan

membuka atau pecah sehingga biji yang terdapat di dalam polong akan terlempar

keluar. Biji yang dimiliki ketepeng cina berbentuk segitiga lancip dan berbentuk

pipih yang berjumlah 50–70 biji pada setiap polongnya (Fajri, 2018).

2.3.4 Kandungan Kimia Daun Ketepeng Cina (Cassia alata L.)

Kandungan kimia tanaman ketepeng cina (Cassia alata L.) antara lain

yang terkandung adalah flavanoid, saponin, tannin, alkaloid dan senyawa

antarkuinon (rein aloe-emodina-diantron, rein aloe-emodina, asam krisofanat

(dihidroksimetilantrakuinon)) (Nomleni, 2019).

Kandungan yang lain pada daun ketepeng cina adalah fenolik, flavonoid,

saponin, steroid dan alkaloid. Ekstrak daun ketepeng cina mengandung

antrakuinon, tannin dan terpen (Masitoh, 2019)

2.3.5 Manfaat Daun Ketepeng Cina (Cassia alata L.)

Manfaat dau ketepeng dapat digunakan untuk mengatasi berbagai penyakit

dan masalah kesehatan. Pemanfaatan daun ketepeng ini dapat digunakan sebagai

obat panu, kurap atau kadas, obat konstipasi, obat sariawan, obat diabetes militus,

obat antialergi, obat cacingan, obat tanaman seperti cabe, tomat, kentang dan

tembakau, obat sakit gigi (karies gigi) (Fatmawati, 2020).

Salah satu bahan alam yang memiliki potensi untuk diteliti adalah

ketepeng cina (Cassia alata L.). Selama ini ketepeng cina banyak dimanfaatkan

secara tradisional, antara lain adalah sebagai antiparasit, laksan, kurap, kudis,
 13

panu, eksem, malaria, sembelit, radang kulit bertukak, sifilis, herpes, influenza

dan bronchitis (Gama, 2011).

2.4 Ekstraksi

Ekstraksi merupakan proses pemisahan dari campurannya dengan

menggunakan pelarut yang sesuai. Proses ekstraksi di hentikan ketika tercapai

keseimbangan antara konsentrasi senyawa dalam pelarut dengan konsentrasi

dalam sel tanaman. Setelah proses ekstraksi pelarut dipisahkan dari sampel

dengan penyaringan. Ekstrak awal sulit dipisahkan melalui teknik pemisahan

tunggal untuk mengisolasi senyawa tunggal. Oleh karena itu ekstrak awal perlu

dipisahkan ke dalam fraksi yang memiliki polaritas dan ukuran molekul yang

sama (Mukhriani, 2014).

Salah satu metode yang digunakan untuk penemuan obat tradisional

adalah metode ekstraksi. Proses ekstraksi khususnya untuk bahan yang berasal

dari tumbuhan adalah sebagai berikut :

1. Pengelompokan bagian tumbuhan (daun, bunga, dll), pengeringan dan

penggilingan bagian tumbuhan

2. Pemilihan pelarut

3. Pelarut polar: air, etanol, metanol, dan sebagainya.

4. Pelarut semipolar: etil asetat, diklorometan, dan sebagainya.

5. Pelarut nonpolar: n-heksan, petroleum eter, kloroform, dan sebagainya

(Mukhriani, 2014).

Ekstraksi dapat dilakukan dalam berbagai metode dan cara yang sesuai

dengan sifat dan tujuan ektraksi itu sendiri. Sampel yang akan diekstraksi dapat

berbentuk sampel segar ataupun sampel yang sudah di keringkan. Sampel yang

umum digunakan adalah sampel segar karena penetrasian pelarut akan

 14

berlangsung lebih cepat. Selain itu, penggunaan sampel segar dapat mengurangi

kemungkinan terbentuknya polimer resin atau artefak lain yang dapat terbentuk

selam proses pengeringan. Penggunaan sampel kering juga memiliki kelebihan

yaitu dapat mengurangi kadar air yang terdapat didalam sampel. Sehingga dapat

mencegah kemungkinan rusaknya senyawa akibatnya dapat merusak senyawa

antimikroba (Marjoni, 2016).

2.4.1 Ekstraksi secara Dingin

Metode ekstraksi cara dingin bertujuan untuk mengekstraksi senyawa-

senyawa yang terdapat dalam simplisia yang tidak tahan terhadap panas. Ekstraksi

cara dingin dapat dilakukan dengan beberapa cara berikut ini :

1. Maserasi

Maserasi merupakan metode seder-hana yang paling banyak digunakan.

Cara ini sesuai, baik untuk skala kecil maupun skala industri. Metode ini

dilakukan dengan memasukkan serbuk tanaman dan pelarut yang sesuai ke dalam

wadah inert yang tertutup rapat pada suhu kamar. Proses ekstraksi dihentikan

ketika tercapai kesetimbangan antara konsentrasi senyawa dalam pelarut dengan

konsentrasi dalam sel tanaman (Mukhriani, 2014).

2. Perkolasi

Pada metode perkolasi, serbuk sampel dibasahi secara perlahan dalam

sebuah perkolator (wadah silinder yang dilengkapi dengan kran pada bagian

bawahnya). Pelarut ditambahkan pada bagian atas serbuk sampel dan dibiarkan

menetes perlahan pada bagian bawah (Mukhriani, 2014).

2.4.2 Ekstraksi secara Panas

Metode panas digunakan apabila senyawa-senyawa yang terkandung dalam

simplisia sudah dipastikan tahan panas. Metode ekstraksi cara panas yaitu :
 15

a. Seduhan

Seduhan merupakan metode ekstraksi paling sederhana hanya dengan

merendam simplisia dengan air panas selama waktu tertentu biasanya 5-10 menit

(Marjoni, 2016).

b. Destilasi Uap

Ekstraksi secara destilasi uap dapat dipertimbangkan untuk menyari

serbuk simplisia yang mengandung komponen yang mempunyai titik didih tinggi

pada tekanan normal. Pada pemanasan biasa memungkinkan akan terjadi

kerusakan zat aktif. Untuk mencegah hal tersebut maka penyarian dilakukan

dengan destilasi uap air (Rusmiati, 2010)

c. Infudasi

Infudasi adalah proses penyarian yang umumnya digunakan untuk menyari

zat aktif yang larut dalam air dari bahan nabati, yang dilakukan dengan cara

membasahi dengan air. Biasanya dua kali bobot bahan, kemudian ditambah

dengan air secukupnya dan dipanaskan dalam tangas air selama 15 menit dengan

suhu 90 – 980 C, sambil sekali-kali diaduk (Rusmiati, 2010).

d. Digesti

Digesti adalah cara maserasi dengan menggunakan pemanasan lemah,

yaitu pada suhu 40°-50° C. Cara maserasi ini hanya dapat dilakukan untuk

simplisia yang zat aktifnya tahan terhada panas (Pratiwi, 2014).

e. Dekokta

Dekokta adalah sediaan cair yang dibuat dengan mengekstraksi simplisia

dengan air pada suhu 90°C selama 30 menit. Dekok dibuat dengan cara

mencampur simplisia dengan derajat halus yang sesuai dalam panci dengan air

secukupnya, panaskan di atas tangas air selama 30 menit terhitung mulai suhu
 16

mencapai 90°C sambil sekali-kali diaduk. Dekok diperuntukkan simplisia nabati

yang keras seperti kayu, batang, biji dan lain sebagainya. Seperti halnya infus, jika

tidak dinyatakan lain dan kecuali untuk simplisia yang tertera di bawah, dekok

yang mengandung bukan bahan berkhasiat keras, dibuat dengan menggunakan

10% simplisia (Aznam, 2012).

f. Refluks

Ekstraksi dengan metode refluks digunakan untuk simplisia dengan

kandungan zat aktif yang tahan terhadap pemanasan. Alat refluks ini terbuat dari

bahan gelas dimana bagian tengahnya dilengkapi dengan lingkaran gelas yang

berbentuk spiral atau bola (Rusmiati, 2010)

g. Soxhletasi

Proses soxhletasi merupakan proses ekstraaksi panas menggunakan alat

khusus berupa ekstraktor soxhletasi. Suhu yang digunakan lebih rendah dibanding

dengan suhu pada metode refluks. Pelarut yang sudah membasahi sampel akan

turun menuju labu pemanasan dan kembali menjadi uap dan membasahi sampel,

sehingga penggunaan pelarut lebih hemat karena adanya sirkulasi pelarut. Hasil

kondensasi tersebut berlangsung secara terus-menerus dengan jumlah pelarut

relatif konstan (Masito, 2019)

2.5 Ekstrak

Ekstrak adalah sediaan pekat yang diperoleh dengan mengekstraksi zat

aktif dari simplisia nabati atau simplisia hewani menggunakan pelarut yang
sesuai, kemudian semua atau hampir semua pelarut diuapkan dan massa atau
serbuk yang tersisa diperlakukan sedemikian hingga memenuhi baku yang telah
ditetapkan. Sebagian ekstrak dibuat dengan mengekstraksi bahan baku obat secara
perkolasi. Seluruh perkolat biasanya dipekatkan dengan cara destilasi dengan
pengurangan tekanan, agar bahan utama obat sesedikit mungkin terkena panas.
(Depkes RI, 2014).
 17

Berdasarkan konsistensinya, ekstrak dapat dikelompokkan menjadi ekstrak

cair, ekstrak encer, ekstrak kental, dan ekstrak kering sebagai berikut:

a. Ekstrak Cair

Ekstrak cair adalah sediaan cair simplisia nabati, yang mengandung etanol

sebagai pelarut atau sebagai pengawet atau sebagai pelarut dan pengawet. Jika

tidak dinyatakan lain pada masing-masing monografi, tiap ml ekstrak

mengandung bahan aktif dari 1 g simplisia yang memenuhi syarat. Ekstrak cair

yang cenderung membentuk endapan dapat didiamkan dan disaring atau bagian

yang bening dienaptuangkan (Aznam, 2012).

b. Ekstrak Encer

Ekstrak encer adalah ektrak cair yang dipekatkan hingga konsistensinya

seperti madu. Saat ini, ekstrak encer jarang digunakan dalam pengobatan karena

harus menggunakan alat laboratorium (Aznam, 2012).

c. Ekstrak Kering

Ekstrak kering adalah sediaan yang didapatkan dengan cara memekatkan

ekstrak cair dengan kondisi sedang. Ekstrak kering harus diencerkan dengan

bahan yang inert seperti laktosa atau dekstrin untuk mendapatkan kadar senyawa

aktif yang diinginkan (Aznam, 2012).

d. Ekstrak Kental

Ekstrak kental adalah sediaan cair yang kental pada suhu hangat, namun

tidak dapat dituang pada suhu kamar. Ektrak kental didapatkan dengan pemekatan

misela (miscellae) secara hati-hati sampai didapatkan masa plastis yang masih

mengandung sisa lengas (lembab air). Ekstrak kental dapat diencerkan dengan

bahan yang inert seperti laktosa atau dekstrin untuk mendapatkan kadar senyawa

aktif tertentu (Aznam, 2012).

 18

2.6 Etanol

Etanol telah banyak diteliti sebagai pelarut pada proses ekstraksi.

Penggunaan etanol sebagai pelarut ekstraksi dapat menghindari masalah toksisitas

makanan untuk bahan pakan ternak dan telah dikenal sebagai pelarut yang baik

untuk ekstraksi polifenol dan aman untuk dikonsumsi manusia (Widianti, 2017).

Polaritas pelarut menentukan perbedaan jenis, komposisi, dan aktivitas

antioksidan. Etanol sangat efektif untuk mengekstrak sterol, flavanoid, fenolik,

dan alkaloid. Etanol juga dapat melarutkan senyawa polar, seperti gula, asam

amino, senyawa glikosida, senyawa fenolik rendah, menengah dan polaritas

sedang, aglycon flavanoid, antosianin, terpenoid, saponin, tanin, xantoxilin,

totarol, quacinoid, lakton, flavon, fenol, dan polifenol (Widianti, 2017).

2.7 Obat Antiinflamasi

Obat-obat antiinflamasi adalah golongan obat yang memiliki aktivitas

menekan atau mengurangi peradangan. Berdasarkan mekanisme kerjanya, obat-

obatan antiinflamasi terbagi dalam golongan steroid yang terutama bekerja dengan

cara menghambat pelepasan prostaglandin dari sel-sel sumbernya dan golongan

non steroid yang bekerja melalui mekanisme lain seperti inhibisi siklooksigenase

yang berperan pada biosintesis prostaglandin (Setyarini, 2009).

Terapi penderita dengan peradangan mencakup dua sasaran utama, yaitu

meredakan nyeri yang merupakan gejala yang membuat pasien berobat dan

keluhan utama yang berkelanjutan. Berdasarkan terapeutiknya maka obat

antiinflamasi dibagi menjadi dua golongan yaitu golongan steroid dan golongan

non steroid (Sari, 2019).

 19

2.7.1 Obat Antiinflamasi Golongan Steroid

Obat antiinflamasi golongan steroid ini merupakan kelompok utama agrn

yang dikenal memiliki sifat linfolisis. Glukortikoid menghambat [roduksi

mediator inflamasi termasuk leukotrin, prostaglandin, histamine, bradikinin.

Secara in vitro obat kortikosteroid menghambat pengeluaran prostaglandin

bedanya dengan obat golongan steroid menghambat enzim fosfolipase A2

sehingga pembentukan asam arakhidonat yang merupakan substrat bagi enzim

COX dan lipooksigenase menjadi terhambat dengan demikian pelepasan mediator

inflamasi juga terhambat (Sari, 2019)

2.7.2 Obat Antiinflamasi Non Steroid

Obat antiinflamasi non steroid merupakan suatu obat yang secara kimiawi

tidak sama yang berbeda aktifitas antipiretik, analgesic dan antiinflamasinya.

Golongan obat ini bekerja dengan jalan menghambat enzim cyclooksigenase tetapi

tidak bekerja pada enzim lipooksigenase. Mekanisme kerjanya terjadi karena

penghambatan sintesis prostaglandin di pusat pengatur panas dalam hipotalamus

dan perifer di daerah target, dengan menurunkan sintesis prostaglandin maka

dapat mencegah sensitasi reseptor rasa sakit terhadap rangsangan mekanik dan

kimiawi (Sari, 2019)

2.8 Natrium Diklofenak

Diklofenak adalah derivat sederhana dari phenylacetic acid (asam fenil

asetat) yang menyerupai flurbiprofen dan meclofenamate. Obat ini adalah

penghambat siklooksigenase yang relatif non selektif dan kuat, juga mengurangi

bioavailabilitas asam arakidonat. Obat ini mempunyai sifat antiinflamasi,

analgesik, dan antipiretik. Absorbsi obat ini melalui saluran cerna berlangsung
 20

cepat dan lengkap. Obat ini terikat 99% pada protein plasma dan mengalami efek

lintas awal (first pass effect) sebesar 40 – 50% (Setyarini, 2009).

Walaupun waktu paroh singkat yakni 1 – 3 jam, diklofenak diakumulasi di

cairan sinovia yang menjelaskan efek terapi di sendi jauh lebih panjang dari waktu

paruh obat tersebut. Efek samping yang lazim ialah mual, gastritis, eritema kulit,

dan sakit kepala sama seperti semua obat AINS. Pemakaian obat ini harus

berhati-hati pada penderita tukak lambung (Setyarini, 2009).

2. 9 Karagenan

Karagenan merupakan salah satu bahan iritan yang dapat digunakan untuk

meginduksi proses inflamasi. Karagenan diperoleh dengan cara ekstraksi dengan

air atau air basa dari beberapa spesies kelas Rhodophyceaea (rumput laut merah).

Karagenan juga sebagai polimer linear yang tersusun dari sekitar 25.000 turunan

galaktosa yang strukturnya tergantung pada sumber dan kondisi ektraksi

(Widianti, 2017).

2.10 Tikus Putih (Rattus norvegicus)

Tikus putih (Rattus norvegicus) atau disebut juga tikus norwegia adalah

salah satu hewan yang umum digunakan dalam eksperimental laboratorium. Lebih

dari 90 % dari semua hewan uji yang digunakan di dalam berbagai penelitian

sebagai pengerat terutama mencit (Mus musculus L.) dan tikus (Rattus

norvegicus). Hal ini di sebabkan karena secara genetik, manusia dan kedua uji

hewan tersebut mempunyai banyak sekali kemiripan. Jenis mencit dan tikus yang

paling umum digunakan adalah jenis albino galur wistar. Kedua jenis hewan

tersebt sering digunakan sebagai hewan uji dalam penelitian (Sari, 2019).
 21

Tikus galur ini bukan merupakan jenis tikus liar, terdapat perbedaan antara

tikus liar dan laboratorium, diantaranya yaitu tikus laboratorium memiliki kelenjar

adrenal dan kelanjar preputial yang lebih kecil, kematangan seksual lebih awal

tidak, tidak ada siklus reproduksi baik dan umur yang lebih pendek daripada tikus

liar (Widianti, 2017).

Menurut (Sari, 2019) taksonomi tikus putih (Rattus norvegicus) adalah :

Kingdom : Animalia

Divisi : Chordata

Kelas : Mammalia

Ordo : Rodentia

Family : Muridae

Genus : Ratus

Spesies : Rattus norvegicus

Gambar 2.2 Tikus Putih Jantan (Rattus norvegicus L.)

Tikus putih memiliki beberapa sifat yang menguntungkan sebagai hewan

uji penelitian diantaranya perkembangbiakan yang cepat, memilki ukuran yang

lebih besar daripada mencit. Tikus putih juga memiliki ciri-ciri morfologis seperti

albino, kepala kecil dan ekor yang lebih panjang dibandigkan badannya,

pertumbuhannya cepat dan cukup tahan terhadap perlakuan (Sari, 2019).

 22

2.11 Kerangka Konsep

Variabel Independen Variabel Dependen Parameter

Daun Ketepeng Skrining fitokimia:

cina - Alkaloid
(Cassia alata L.) - Flavanoid
- Tanin
- Saponin
- Glikosida
- Steroid/Triterpenoid
Serbuk Simplisia
Daun Ketepeng cina
(Cassia alata L.) Karakterisasi simplisia:
- Penetapan kadar air
- Penetapan kadar sari
larut dalam air
- Penetapan kadar sari
larut dalam etanol
Ekstrak Daun - Penetapan kadar abu
Ketepeng cina total
(Cassia alata L.) - Penetapan kadar abu
tidak larut dalam
asam
Ekstrak Daun Ketepeng
cina (Cassia alata L.)
dengan Dosis :
- 200 mg/kg BB
- 500 mg/kg BB
- 750 mg/kg BB
(kelompok perlakuan)
% Radang

Uji
Efektivitas
Natrium Diklofenak Anti
Dosis 2,25 mg/kg BB Inflamasi
(kontrol positif)
% Inhibisi
Radang

CMC Na
(kontrol negatif)

Gambar 2.3 Kerangka Konsep

 23

2.12 Hipotesis Penelitian

Berdasarkan landasan teori dan berhubungan dengan rumusan masalah,

maka dapat dirumuskan dengan :

a. Ekstrak etanol daun ketepeng (Cassia alata L.) dapat menurunkan

inflamasi pada tikus putih jantan

b. Dosis paling efektif pada ekstrak etanol daun ketepeng (Cassia alata L.)

dapat menurunkan inflamasi tikus putih jantan

c. Ekstrak etanol daun ketepeng cina (Cassia alata L.) memberikan efek

yang setara dengan obat natrium diklofenak dalam penurunan inflamasi

 BAB III

METODE PENELITIAN

3.1 Desain Penelitian

Jenis penelitian yang digunakan dalam penelitian ini adalah penelitian

eksperimental, dimana penelitian ini melakukan hewan percobaan terhadap

kelompok perlakuan dan akan dibandingkan dengan kelompok kontrol. Dalam

mengekstrak kandungan kimia dari daun ketepeng cina dilakukan dengan metode

maserasi dimana pelarut yang digunakan adalah etanol 96 %. Pada penelitian ini

terdapat kelompok kontrol positif, kelompok kontrol negatif, dan kelompok

perlakuan. Dimana kelompok perlakuan ini diberikan ekstrak daun ketepeng cina

(Cassia alata L.), sedangkan kelompok kontrol positif diberikan Natrium

diklofenak dan untuk kelompok kontrol negatif diberikan CMC Na.

3.2 Lokasi dan Waktu Penelitian

3.2.1 Lokasi Penelitian

Pembuatan Ekstrak Daun Ketepeng Cina (Cassia alata L.) di lakukan di

Laboratorium Kimia Kualitatif, dan Pengujian Efektivitas Antiinflamasi di

lakukan di Laboratorium Farmakologi Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Deli

Husada Deli Tua.

3.2.2 Waktu Penelitian

Penelitian ini akan dilakukan pada bulan Februari 2021 sampai selesai

3.3 Populasi dan Sampel

3.3.1 Populasi

Daun yang digunakan pada penelitian ini adalah daun ketepeng cina

(Cassia alata L.) yang diambil dari Desa Kampung Baru, Kecamatan Bandar

Masilam, Kabupaten Simalungun, Provinsi Sumatera Utara.

22
 25

3.3.2 Sampel

Sampel yang diambil dari penelitian ini adalah ekstrak daun ketepeng cina

(Cassia alata L.)

3.4 Alat dan Bahan

3.4.1 Alat

Alat yang digunakan pada penelitian ini adalah beaker glass 250 ml,

beaker glass 100 ml, batang pengaduk, cawan penguap, corong, erlenmeyer 250

ml, erlenmeyer 100 ml, kertas saring, kandang hewan, timbangan hewan,

penangas air, aluminium foil, blender, spatula, neraca kasar, anak timbangan

gram/miligram, gelas ukur 1000 ml, gelas ukur 100 ml, gelas ukur 10 ml,

timbangan analitik, rotary evoporator, oral sonde, spuit 1ml, spuit 3 ml, pipet

tetes, pletismometer dan stopwatch.

3.4.2 Bahan

Bahan yang digunakan pada penelitian ini adalah aquadest, ekstrak daun

ketepeng cina (Cassia alata L.), karagenan 1 %, etanol 96 %, CMC Na, NaCl

0,9%, tablet Natrium diklofenak, HCl, eter, etilasetat, serbuk magnesium, FeCl3,

n-heksan, asam asetat anhidrat, kloroform, timbal (II) asetat.

3.5 Prosedur Penelitian

3.5.1 Pengolahan Sampel

Helaian daun ketepeng cina dibersihkan dari pengotoran dan tulang

daunnya dibuang, kemudian ditimbang, dicuci dengan air bersih yang mengalir

yang kemudian ditiriskan. Selanjutnya dikeringkan dengan menjemur dibawah

lampu selama 6 hari. Daun ketepeng cina dianggap kering bila dapat diremas

rapuh dan hancur. Sampel yang telah dikeringkan dijadikan serbuk dengan cara di

blender, kemudian di ayak dengan ayakan yang haus dan disimpan dalam wadah

kering tertutup rapat.

 26

3.5.2 Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Ketepeng Cina (Cassia alata L.)

Daun ketepeng cina (Cassia alata L.) dibersihkan dengan air bersih yang

mengalir, dikeringkan dan di angin-angin kan kemudian dijadikan serbuk. Serbuk

simplisia daun ketepeng cina dimasukkan kedalam erlenmeyer yang di tutupi

dengan kain, kemudian ditambahkan etanol 96 % hingga membasahi semua

permukaan sampel, ditutup, biarkan selama 3-5 hari terlindung dari cahaya sambil

sesekali diaduk. Setelah 5 hari, diperas kemudian dimasukkan ke dalam bejana

dan ditutup, dibiarkan ditempat sejuk yang terlindung dari cahaya selama 2-3 hari,

kemudian disaring. Hasil yang diperoleh dipekatkan dengan alat rotary

evaporator sampai sebagian pelarutnya menguap dan dilanjutkan proses

penguapan diatas penangas sampai diperoleh ekstrak kental hingga berupa ekstrak

etanol kental (Kambey, 2018)

3.5.3 Skirining Fitokimia

Skiring fitokimia serbuk simplisia daun ketepeng cina (Cassia alata L.)

Meliputi pemeriksaan senyawa golongan flavanoid, alkaloid, saponin, tanin,

glikosida, dan steroid/triterpenoid.

a. Alkaloid

Serbuk simplisia ditimbang sebanyak 0,5 g kemudian ditambahkan 1 ml

asam klorida 2 N dan 9 ml air suling, dipanaskan diatas penangas ait selama 2

menit didinginkan lalu disaring. Filtrat dipakai untuk percobaan berikut :

a. Diambil 3 tetes filtrat, lalu ditambahkan 2 tetes pereaksi mayer

menghasilkan endapan putih/kuning.

b. Diambil 3 tetes filtrat, ditambahkan 2 tetes pereaksi bouchart

menghasilkan endapan coklat hitam.

 27

c. Diambil 3 tetes filtrat, lalu ditambahkan 2 tetes pereaksi dragendrof

menghasilkan endapan merah bata (Lumbanraja, 2009).

b. Flavonoid

Ditimbang 0,5 g bahan tumbuhan yang telah dihaluskan, ditambahkan 10

ml metanol direfluks dengan menggunakan dengan menggunakan pendingin balik

selama 10 menit .disaring panas melalui kertas saring berlipat ,diencerkan filtrat

dengan 10 ml aquadest .setelah dingin ditambahkan 5 ml eter minyak tanah.

dikocok hati-hati kemudian didiamkan .diambil lapisan metanol diuapkan pada

suhu 400 C dibawah tekanan.kemudian sisa dilarutkan dalam 5 ml etilasetat.

Diuapkan hingga kering 1 ml larutan percobaan, sisa dilarutkan dalam 1 ml etanol

96 % ditambahkan 0,1 gr serbuk magnesium dalam 10 ml HCL pekat, jika warna

merah jingga sampai warna merah ungu menunjukkan adanya flavonoid, jika

warna kuning jingga, adanya flavon dan kalkon (Depkes RI, 1978).

c. Tanin

Sebanyak 0,5g sampel di ekstrak menggunakan 10 ml aquadest. Hasil

ekstraksi disaring kemudian filtrat yang diperoleh diencerkan dengan aquadest

sampai tidak berwarna.hasil pengenceran ini diambil sebanyak 2 ml. Kemudian

dirambahkan dengan 1-2 tetes besi (III) klorida. Terjadi warna biru atau hijau

kehitaman menunjukkan adanya tanin (Lumbanraja, 2009).

d. Saponin

Sebanyak 0,5 g sampel dimasukkan kedalam tabung reaksi dan

ditambahkan 10 ml air suling panas, didinginkan kemudian dikocok kuat-kuat

selama 10 detik. Terbentuk buih atau busa tidak kurang dari 10 menit setinggi 1-

10 cm. Pada penambahan 1 tetes larutan asam klorida 2 N, apabila buik tudak

hilang menunjukan adanya sapomim (Lumbanraja, 2009).

 28

e. Glikosida

Serbuk simplisia ditimbang sebanyak 2g, lalu disari dengan 20 ml

campuran etanol 96 % dan 10 ml asam klorida 2N, direfluks selama 2 jam,

didinginkan dan disaring. Diambil 20 ml filtrat ditambahkan 25 ml air suling dan

25 ml timbal (II) asetat 0,4 M, dikocok, didiamkan 5 menit lalu disaring. Filtrat

disari dengan 20 ml campuran isopropanol dan kloroform (2:2), dilakukan

berulang kali sebanyak 2 kali. Sari air dikumpulkan dan diuapkan pada temperatur

tidak lebih dari 500C. Sisanya dilarutkan dalam 2 ml metanol. Larutan sisa

digunakan untuk percobaan berikut : 0,1 ml larutan percobaan dimasukkan dalam

tabung reaksi dan diuapkan di atas penangas air. Pada sisa ditambahkan 2 ml air

dan 5 tetes pereaksi molisch. Kemudian secara perlahan-lahan ditambahkan 2 ml

asam sulfat pekat melalui dinding tabung, terbentuknya cincin berwarna ungu

pada batas kedua cairan menunjukkan glikosida (Lumbanraja, 2009).

f. Steroid/Triterpenoid

Sebanyak 1 g serbuk simplisia dimaserasi dengan 20 ml n-heksan selama 2

jam, lalu disaring. Filtrat diuapkan dalam cawan penguap. Pada sisa ditambahkan

2 tetes asam asetat anhidrat dan 1 tetes sulfat pekat. Timbul warna ungu atau

merah kemudian berubah menjadi hijau biru, menunjukan adanya steroid

triterpenoida (Lumbanraja, 2009).

3.5.4 Karakterisasi Simplisia

1. Penetapan Kadar Air

Sebanyak 5 gram sampel di masukkan ke dalam alat penetapan kadar air

(moisturizer analizer) kemudian dilakukan pengamatan dengan menekan tombol

start dan menunggu sampai alat selesai melakukan pengukuran ditandai dengan

lampu yang sudah mati. Kadar air dihitung dalam persen (Febriyenti, 2018).
 29

2. Penetapan Kadar Sari Larut Dalam air

Sebanyak 5 g serbuk simplisia dimaserasi selama 24 jam dalam 100 ml

air-kloroform (2,5 ml kloroform dalam aquadest sampai 1 liter) dengan

menggunakan botol bersumbat sambil sesekali dikocok selama 6 jam pertama,

kemudian dibiarkan dan disaring cepat. Sebanyak 20 ml filtrat diuapkan hingga

kering dalam cawan berdasar rata yang telah dipanaskan dan ditara. Residu

dipanaskan dalam oven pada suhu 105o C sampai diperoleh bobot tetap. Kadar sari

yang larut dalam air dihitung terhadap dalam persen bahan yang telah dikeringkan

di udara (Mayasari, 2018).

3. Penetapan Kadar Sari Larut Dalam Etanol

Sebanyak 5 g serbuk simplisa dimaserasi dengan 100 ml etanol selama

24 jam seperti tertera pada monografi, menggunakan labu bersumbat sambil

sekali-sekali dikocok selama 6 jam pertama, kemudian didiamkan. Disaring cepat,

20 ml filtrat diuapkan dalam cawan dangkal (Mayasari, 2018).

4. Penetapan kadar Abu Total

Sebanyak 3 g serbuk simplisia yang telah digerus dan ditimbang

seksama, dimasukkan ke dalam krus porselin yang telah dipijarkan dan ditara,

kemudian diratakan. Krus porselin bersama isinya dipijarkan perlahan hingga

arang habis. Pijaran dilakukan pada suhu 600º C selama 3 jam kemudian

didinginkan dan ditimbang sampai diperoleh bobot tetap (Mayasari, 2018).

5. Penetapan Kadar Abu yang tidak Larut dalam Asam

Abu yang diperoleh pada penetapan kadar abu, didihkan dengan 25 ml

asam klorida encer selama 5 menit, kumpulkan bagian yang tidak larut dalam

asam, saring melalui krus kaca masir atau kertas saring bebas abu yang telah
 30

diketahui beratnya, lalu sisa dipanaskan, kemudian didinginkan dan ditimbang

sampai bobot tetap (Mayasari, 2018).

3.5.5 Pembuatan Sediaan Uji

1. Pembuatan Suspesi Na CMC 0,5%

Sebanyak 500 mg Na CMC ditaburkan merata kedalam lumpang berisi air

suling panas sebanyak 35 ml, ditutup dan didiamkan selama 15 menit hingga

diperoleh masa yang transparan, digerus hingga terbentuk gel lalu diencerkan

dengan sedikit air, dimasukkan ke dalam labu tentukur 100 ml, lalu ditambahkan

air suling sampai garis tanda (Lumbanraja, 2009).

2. Pembuatan Suspensi Natrium Diklofenak

Diambil 20 tablet natrium diklofenak, digerus kemudian ditimbang berat

totalnya. Timbang tablet dengan 2,25 mg/kg, lalu dimasukkan kedalam lumpang

dan ditambahkan suspensi Na-CMC ad 10 ml aquadest hangat sambil digerus

sampai homogen, volume dicukupkan hingga 10 ml (Sari, 2019).

3. Pembuatan Suspensi λ-karagenan 1 %

Ditimbang sebanyak 50 mg λ-karagenan, lalu digerus sampai homogen

dengan larutan NaCl 0,9% kemudian dimasukkan kedalam labu tentukur 5 ml,

dicukupkan dengan larutan NaCl 0,9% sampai garis tanda. Diinkubasi pada suhu

370 C selama 24 jam (Lumbanraja, 2009).

3.5.6 Penyiapan Hewan Uji

Hewan uji yang digunakan pada penelitian adalah tikus putih jantan

(Rattus norvegicus L.) berusia 2-3 bulan, dengan berat badan 150-200 gram.

Dirawat tikus dalam 2 minggu dengan baik dan pada kandang tikus harus selalu

bersih dan diberi ventilasi, agar dapat menyesuaikan lingkungannya. Kemudian

dibagi dalam 5 kelompok yang masing-masing terdiri dari 3 ekor tikus.

 31

3.5.7 Pengujian Efektivitas Penyembuhan Antiinflamasi

Sebelum pengujian tikus dipuasakan selama 18 jam (tidak makan tetapi

masih tetap diberikan minum). Hewan dikelompokkan kedalam 5 kelompok

terdiri dari 3 ekor tikus, yaitu kelompok kontrol positif (suspensi Natrium

Diklofenak), kelompok kontrol negatif Na CMC 0,5%, kelompok bahan uji

ekstrak etanol daun ketepeng cina dosis 200 mg/kgBB, 500 mg/kgBB dan 750

mg/kgBB.

Tabel 3.1. Kelompok Perlakuan pada Tikus Putih Jantan

No Kelompok Penguji
1 Kontrol positif (+) Suspensi Natrium Diklofenak 2,25 mg/kg BB
2 Kontrol negatif (-) Suspensi Na CMC 0,5%
3 Perlakuan 1 Kelompok uji suspensi daun ketepeng cina (Cassia

alata L.) dosis 200 mg/kg BB

4 Perlakuan 2 Kelompok uji suspensi daun ketepeng cina (Cassia

alata L.) dosis 500 mg/kg BB

5 Perlakuan 3 Kelompok uji suspensi daun ketepeng cina (Cassia

alata L.) dosis 750 mg/kg BB

Pada hari pengujian masing-masing tikus diberi tanda pada bagian ekor

dan kaki kanan tikus lalu hewan ditimbang beratnya. Kemudian kaki kanan tikus

dimasukkan ke dalam sel yang berisi khusus yang ada pada alat pletismometer

sampai cairan naik pada garis batas atas, kemudian pedal ditahan, dicatat angka

ada monitor sebagai volume awal (V0) yaitu volume kaki sebelum diberi obat dan

diinduksi larutan λ-karagenan. Setelah itu masing-masing tikus diberi suspensi

bahan uji secara oral sesuai dengan kelompoknya. Satu jam kemudian masing-

masing telapak kaki tikus disuntik secara subplantar dengan 0,05 ml larutan λ-
 32

karagenan 1%. Setelah 30 menit, dilakukan pengukuran dengan cara mencelupkan

kaki tikus pada sel pletismometer yang berisi cairan khusus sampai larutan

mencapai garis batas atas, dan pedal ditahan, dicatat angka pada monitor.

Perubahan volume cairan yang terjadi dicatat sebagai volume telapak kaki tikus

(Vt). Pengukuran dilakukan sampai 30 menit selama 180 menit. Dan tiap kali

pengukuran larutan sel tetap dicukupkan sampai garis tanda atau garis merah

bagian atas sel dan pada menu utama ditekan tombol nol, dan juga kaki tikus

dikeringkan sebelumnya (Wahyudi, 2020).

Volume radang adalah selisih volume kaki tikus setelah dan sebelum

disuntikan λ-karagenan. Pada waktu pengukuran, volume cairan pada sel

pletismometer sama setiap kali pengukuran dan tanda batas pada kaki tikus harus

jelas, kaki tikus harus tercelup sampai batas yang dibuat (Lumbanraja, 2009).

3.6 Orientasi Metode Induksi Antiinflamasi

Metode yang digunakan pada penelitian ini yaitu metode pembentukan

edema buatan, dimana pengujian dilakukan dengan cara mengukur volume edema

sebelum dan sesudah pemberian zat uji. Setiap kelompok tikus ditimbang dan

telapak kaki kanan belakang diberi tanda diatas mata kaki. Semua tikus putih

diukur volume kaki awalnya pada pletismometer (V0) sampai batas tanda yang

telah ditentukan. Pengukuran volume edema dilakukan setiap 30 menit

menggunakan plestismometer (Lumbanraja, 2009)

3.7 Perhitungan Persen Radang

Persen radang dapat di hitung dengan rumus :

Vt−VO
%R= x 100 %
VO
 33

Keterangan:
%R : persen radang
Vt : volume kaki tikus setelah diradangkan karagenan 1% pada waktu t
Vo : volume awal kaki tikus sebelum diradangkan dengan karagenan 1%

Persen inhibisi radang dapat di hitung dengan rumus :

a−b
Persen inhibisi radang (%)= x 100 %
a

Keterangan:
a : persen radang rata-rata kelompok perlakuan kontrol
b : persentase radang rata-rata kelompok bahan uji atau obat pembanding

3.8 Analisis Data

Data hasil penelitian dianalisis menggunakan SPSS 20. Data diuji dengan

distribusi uji normalitas menggunakan Test Of Normality dan uji homogenitas

dengan Test Homogenity of Variace, selanjutnya data diuji dengan One Way

ANOVA, dengan tingkat kepercayaan 95% (α = 0,05).

DAFTAR PUSTAKA
 34

Agromedia, Redaksi. (2008). Buku Pintar Tanaman Obat. Jakarta: PT. Agromedia
Pustaka. Hal:145.

Aznam, Nurfina, dkk. (2012). Kimia Farmasi. Tangerang Selatan: Universitas

Terbuka

Depkes RI. (1978). Materia Medika Indonesia Jilid II. Departemen Kesehatan
Republik Indonesia.

Depkes RI. (2014). Farmakope Indonesia Jilid V. Jakarta: Departemen Kesehatan

Republik Indonesia.

Edo, Taufiza, Erina dan Fakhrurrazi. (2017). Uji Daya Hambat Ekstrak Etanol
Daun Ketepeng Cina (Casiia alata L.) Terhadap Pertumbuhan Jamur
Trichophyton sp. Secara In Vitro. Banda Aceh: Universitas Syiah Kuala.

Egra, Saat, dkk. (2019). Uji Potensi Ekstrak Daun Tanaman Ketepeng (Cassia
alata L.) Dalam Menghambat Pertumbuhan Bakteri Ralstonia
solanacearum dan Streptococcus sobrinus. Samarinda: Universitas
Borneo Tarakan.

Fajri, Mathlail. (2018). Aktivitas Antifungi Daun Ketepeng Cina (Cassi alata L.)
Fraksi Etanol, N-Heksan, dan Klorofrom Terhadap Jamur Microsporam
Canis. Universitas Darussalam Gontor.

Fatmawati, Sri, dkk. (2020). Chenical Constituents, Usage and Pharmacological

Activity of Cassia alata. Surabaya: Institut Teknologi Sepuluh
November.

Febriyenti, dkk. (2018). Karakterisasi dan Studi Aktivitas Antioksidan Dari

Ekstrak Etanol Secang (Caesalpinia sappan L.).Padang. Universitas
Andalas.

Gama, Meryend Putri. (2011). Perbandingan Ekstrak Daun Ketepeng Cina

(Cassia alata Linn) Dengan Ketokonazol 2 % Dalam Menghambat
Pertumbuhan Malassezia Furfur Pada Pityriasisi Versicolor Secara In
Vitro. Karya Tulis Ilmiah. Universitas Diponogoro.

Kambey, Imelda Naomi, dkk. (2018). Identification of Compounds Contained In

Methanol Extension of Dried Such as Banana Leaves of Halmahera
(Moses paradisiaca L.). College Of Health Sciences.

Kee, Joyce L Dan Evelyn R. Hayes. (1996). Farmakologi Pendekatan Proses

Keperawatan. Jakarta: EGC. Hal: 305-307.

Lumbanraja, L.B .(2009). Skiring Fitokimia dan Uji Efek Antiinflamasi Ekstrak
Etanol Daun Tempuyung (Sonchus arvensis L.) Terhadap Radang Pada
Tikus. Skiripsi. Fakultas Farmasi. Universitas Sumatera Utara. Medan.
 35

Marjoni, M. R. (2016). Dasar Dasar Fitokimia untuk Diploma III Farmas Jakarta:
Penerbit buku Trans Info Media. Hal: 15, 16.

Masitoh, Dewi. (2019). Pengaruh Ekstrak Etanol Daun Ketepeng Cina (Cassia
alata. L) Terhadap Jumlah Leukosit dan Bobot Limpa Relative Ayam
Broiler yang Diinfeksi Salmonella Typhimurium. Skripsi. Malang:
Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim.

Mayasari, Ulfayani dan Melfin Teokarsa Laoli. (2018). Karakterisasi Simplisia

dan Skrining Fitokimia Daun Jeruk Lemon (Citrus limon (L.) Burm.F.)
Universitas Islam Negeri Sumatera Utara.

Mitchell, dkk.(2008). Buku Saku Dasar Patologis Penyakit. Jakarta: EGC. Hal:38.

Mukhriani. (2014). Ekstraksi, Pemisahan Senyawa, dan Identifikasi Senyawa

Aktif. Makasar: Program Studi Farmasi Fakultas Ilmu Kesehatan UIN
Alauddin.

Nomleni, Fransina, dkk. (2019). Buku Ajar Etnobotani Masyarakat Lokal Desa
Kakaniuk. Jawa: Lakeisha. Hal: 29-30.

Pramitaningastuti, Anastasia Setyopuspiyo dan Ebta Narasukma Anggraeny.

(2017). Uji Efektivitas Antiinflamasi Ekstrak Etanol Daun Srikaya
(Annona sqamosa L.) Terhadap Udem Kaki Tikus Putih Jantan Galur
Wistar. Semarang: Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi.

Pratiwi. (2014). Skrining Uji Efek Antimitosis Ekstrak Daun Botto-botto

(Choromolaena odorata L.) Menggunakan Sel Telur Bulubabi
(Tripneustus gratilla L.). Unversitas Islam Negri Allaudin Makasar

Puspawati, Ni Made, dkk. (2017). Uji Aktivitas Antiinflamasi Fraksi N-Heksa

Daun Cendana (Santalum album Linn.) Terhadap Oedem Tikus Putih
Jantan Galur Wistar yang Diinduksi Karagenan. Bali: Universitas
Udayana.

Rusmiati. (2010). Pengaruh Metode Ekstraksi Terhadap Aktivitas Antimikroba

Ekstrak Methanol Daun Mimba (Azadirachta indica Juss). Unversitas
Islam Negri Allaudin Makasar

Sari, Karina Wulan. (2019). Uji Efetivitas Antiinflamasi Kombinasi Ekstrak

Herba
Seledri (Apium graveolens L.) dan Daun Binahong (Anredera cordifolia
(Ten.) Steenis) Pada Tikus Putih. Skripsi. Stikes Bhakti Husada Mulia
Madiun

Sayuti, Nutrisia Aquariushinta. (2015). Formulasi dan Uji Stabilitas Fisik

Sediaan Gel Ekstrak Daun Ketepeng Cina (Cassia alata L.). Surakarta:
Poltekes Kemenkes Surakarta.
 36

Setyarini, Holida. (2009). Uji Daya Antiinflamasi Gel Ekstrak Etanol Jahe 10 %
(Zingiber officinale Roscoe) yang Diberikan Topical Terhadap Udem
Kaki Tikus yang Diinduksi Karagenin. Skripsi. Fakultas Farmasi.
Universitas Muhammadiyah Surakarta. Surakarta.

Surbakti, Cristica Ilsanna dan Nadiya. (2019). Uji Mutu Ekstrak Daun Sirsak
(Annona muricata Linn.) Yang Di Ekstraksi Secara Maserasi Dengan
Pelarut Etanol 70%. Institut Kesehatan Deli Husada Deli Tua

Wahyudi, dkk. (2020). Uji Efek Antiinflamasi Kombinasi Ekstrak Daun

Gymnanthemum amygdalinum Del dan Elaeis guineensis Jacq. Deli Tua.
Institut Kesehatan Deli Husada Deli Tua.

Widianti, Z. (2017). Efek Anti Inflamasi Ekstrak Etanol Daun Zaitun (Olea
europaea L) Pada Edema Telapak Kaki Calur Spragua Dawley Jantan
yang di Induksi Karagenan. Jakarta: Program Studi Kedokteran dan
Propesi Dokter.