IDENTIFIKASI

ALKALOID

Marybet Tri Retno H, M.Farm

 1. Reaksi Pengendapan
2. Reaksi Warna
3. Reaksi pembentukan kristal
4. KLT
Identifikasi 5. Spektrum UV
Alkaloid 6. Spektrum IR
7. MS
 Reagen Kandungan Hasil
Dragendorff K[BiI4] oranye
Mayer K2[HgI4] Kuning-putih
• Peraksi pengendap
Garam Reinecke (NH4Cr[CNS]4(NH3)2) Pink,
mengambang
• Larutan Alkaloid netral atau asam dpt Scheiblers Wolframat-asam fosfat Kuning, amorph
diendapkan dg pereaksi yg berisi logam berat Sonnenschein Molibdat-asam fosfat Kuning, lalu biru
spt Hg, Bi. hijau
• 1ml lart alkaloid dlm tb reaksi + 1ml HCl + Larutan tanin 5% dalam air Kecoklatan
reagent → hasil Hager Asam pikrat jenuh Kuning
Wagner I/KI Merah coklat
 ➢ Alkaloid dg pereaksi H2SO4 and HNO3
akan memberikan warna spesifik
➢ 1ml larutan alkaloid dlm cawan
porselen + pereaksi waran.
• Pereaksi Marquis : camp. 2 tetes lart
formaldehid & 1 ml H2SO4
2. Reaksi • Pereaksi Frohde : camp. Lart 1%
ammonium molibdat & H2SO4
warna • Pereaksi Mandelin: camp 0,5%
ammonium vanadat dlm H2SO4
• Pereaksi Vitali : 1 tetes larutan uji
dibiarkan menguap residu + HNO3
pekat → panaskan di ta, amati warna
dibasahi dgn uap NH3 → warna
tertentu.
 Alkaloida Warna yang terbentuk dgn pereaksi
Frohde Mandelin Marquis
Morfin Violet-biru Biru-coklat Violet
Kodein Biru hijau-coklat biru violet

hidromorfin biru - Kuning-violet

Tabel. Reaksi Tebain biru Hijau-kuning Kuning-violet

warna alkaloid atropin

Skopolamin
-
Kuning-biru
-
-
merah
-
kinin Kuning- Hijau kuning kuning
kehitaman
papaverin Biru hijau Biru hijau Merah
anggur
3. Reaksi • Alkaloida + lart garam logam berat (emas
klorida, platina klorida, merkuri klorida), asam
Kristal pikrat atau asam pikrolonat → endapan kristal
→ KLT → Kolom
 4. Kromatografi Lapis Tipis

• penggunaan KLT untuk identifikasi alkaloida dan senyawa lain telah berkembang dan
mrpk alat analisis yang cukup peka, cepat dan terpercaya.
• Fase diam : silica gel G atau silica gel GF 254
• Fase gerak: senyawa yang bersifat basa.
• Campuran methanol & ammonia ( 100 :1,5)
• Campuran benzen, aseton, eter & amoniak 25% (40:60:10:3)
• Campuran methanol, aseton, trietanolamin (30:30:1)
• Campuran kloroform, aseton & dietilamin (50:40:10)
 KLT

• Silika gel, aluminium oksida, kieselgur, selulosa

• Pada basa kuat, silikagel yang bersifat asam lemah dapat mengikat alkaloid (pada fase
gerak netral)
• TLC: UV, Dragendorff (+NaNO2)
• Alkaloid dengan amina primer dan sekunder negatif palsu
• Kumarin, hidroksiflavon, triterpen dan kardenolida ttt positif palsu
• Alkaloid purin: mureksid (Kalium perklorat + setetes HCl, diuapkan, ditambah amoniak =
ungu)
• Alkaloid morphin: reagen Marquis (H2SO4 + setetes formaldehida = ungu)
 Sinar UV 254

• Pemadaman kuat pd alkaloid indol, quinolin, isoquinolin,

Deteksi Bercak purin.
• Pemadaman lemah : alkaloid tropan

Alkaloid (KLT) Sinar UV 366

Wagner, 1996 • Berfluoresensi biru, biru-hijau, violet: akar rauvolfia, kulit kina,
akar ipekak.
• Fluoresensi kuning: colchicine, sanguinarin, berberine

Pereaksi Semprot: Dragendorff, iodoplatinat dll

Identifying the Spots

Same TLC plate held under a UV

Commercial TLC plate after lamp -
development Note the appearance of
in normal lighting additional spots
 Interpreting the Data

The Rf value for each spot should be

calculated. Rf stands for "ratio of
fronts" and is characteristic for any
given compound on the same
stationary phase using the same
mobile phase for development of the
plates. Hence, known Rf values can
be compared to those of unknown
substances to aid in their
identifications.
 5. Spektrum UV dan IR

• Spektrum UV : Memberi petunjuk jenis gugus atau ikatan kimia yang ada dalam molekul.
• Spektrum IR: jenis gugus dan ikatan kimia
 • Untuk isolasi alkaloid skala besar
• Prinsipnya: penempatan campuran
alkaloid (lar) di atas kolom yg berisi
serbuk penyerap (selulose, silika,
Kromatografi poliamida), lalu dielusi bertahap dg
pelarut yg sesuai.
Kolom • Ukuran garis tengah:panjang kolom →
1:10 hingga1:30
• Sampel:fase diam → 1:50 hingga 1:500
• Ukuran fase diam 100-300 mesh
Kolom kromatografi