PROPOSAL PENELITIAN TUGAS AKHIR

Uji Aktivitas Antijamur Ekstrak Etanol Kelopak

Bunga Rosella (Hibiscus sabdariffa)

Disusun oleh:
Anisah Azizah
3212212007

Jurusan Kimia
Fakultas Sains dan Informatika
Universitas Jenderal Achmad Yani
Cimahi, 2022
 HALAMAN PENGESAHAN
Proposal Penelitian

Uji Aktivitas Antijamur Ekstrak Etanol Kelopak Bunga Rosella (Hibiscus sabdariffa)

Diusulkan oleh
Anisah Azizah
3212212007

Menyetujui,

Dosen Pembimbing Utama Dosen Pembimbing Pendamping

Dr. Jasmansyah, Drs., M.Si. Dr. Arie Hardian, S.Si., M.Si.

NID. 412114964 NID. 412185787

Mengetahui,

Ketua Jurusan Kimia

Dr. Jasmansyah, Drs., M.Si.

NID. 412114964
 RINGKASAN

Jamur merupakan salah satu mikroorganisme yang menjadi penyebab paling sering
penyakit infeksi pada kulit. Prevalensi kejadian infeksi kulit yang diakibatkan oleh jamur
lebih sering dibandingkan oleh bakteri maupun virus. Malassezia furfur, Pityrosporum ovale,
dan Trichopython mentagrophytes merupakan contoh jamur atau ragi yang paling sering
menjadi penyebab penyakit infeksi pada kulit. Ragi M. furfur dan P. ovale menjadi penyebab
utama dermatitis seboroik dan ketombe, sedangkan jamur T. mentagrophytes menjadi
penyebab utama beberapa jenis tinea. Penggunaan tanaman obat menjadi alternatif dari obat
sintetis yang dapat mengakibatkan resistensi serta timbulnya efek samping. Salah satu
tanaman obat yang diyakini berpotensi sebagai obat antijamur ialah tanaman Rosella.
Tanaman ini mengandung senyawa flavonoid dan antosianin yang diyakini memiliki efek
antijamur. Penelitian ini dilakukan dengan tujuan mengetahui aktivitas antijamur pada
ekstrak etanol kelopak bunga Rosella. Hasil dari penelitian ini diharapkan ekstrak etanol
kelopak bunga Rosella dapat menghambat pertumbuhan jamur M. furfur, P. ovale, dan T.
mentagrophytes, sehingga dapat digunakan sebagai obat alternatif. Pengujian antijamur
dilakukan dengan menggunakan metode disk diffusion atau difusi cakram. Metode ini
dilakukan dengan cara menempatkan kertas cakram yang telah diresapi oleh ekstrak etanol
kelopak bunga Rosella dengan variasi konsentrasi di media agar yang terdapat jamur M.
furfur, P. ovale, dan T. mentagrophytes. Senyawa antijamur pada ekstrak akan berdifusi ke
media agar dan mengakibatkan jamur tidak dapat tumbuh disekitar kertas cakram.

Kata Kunci: antijamur, disk diffusion, ekstrak etanol, Hibiscus sabdariffa, Rosella

i
 DAFTAR ISI

RINGKASAN............................................................................................................................i
DAFTAR ISI.............................................................................................................................ii
DAFTAR GAMBAR...............................................................................................................iii
DAFTAR TABEL...................................................................................................................iv
BAB I PENDAHULUAN.........................................................................................................1
1.1 Latar Belakang.........................................................................................................1
1.2 Rumusan Masalah....................................................................................................2
1.3 Tujuan Penelitian.....................................................................................................2
1.4 Manfaat Penelitian...................................................................................................2
BAB II TINJAUAN PUSTAKA..............................................................................................3
2.1 Rosella (Hibiscus sabdariffa)..................................................................................3
2.2 Antijamur.................................................................................................................4
2.3 Malassezia furfur.....................................................................................................5
2.4 Pityrosporum ovale..................................................................................................5
2.5 Trichophyton mentagrophytes.................................................................................6
2.6 Disk Diffusion..........................................................................................................7
BAB III METODE PENELITIAN.........................................................................................8
3.1 Diagram Alir............................................................................................................8
3.2 Alat dan Bahan.........................................................................................................8
3.2.1 Alat...................................................................................................................8
3.2.2 Bahan................................................................................................................8
3.3 Prosedur Penelitian..................................................................................................9
3.3.1 Preparasi Tanaman Bunga Rosella...................................................................9
3.3.2 Ekstraksi Bunga Rosella...................................................................................9
3.3.3 Pengujian Aktivitas Antijamur.........................................................................9
BAB IV BIAYA DAN JADWAL PENELITIAN................................................................10
4.1 Biaya Penelitian.....................................................................................................10
4.2 Jadwal Penelitian...................................................................................................10
DAFTAR PUSTAKA.............................................................................................................10
LAMPIRAN............................................................................................................................13

ii
 DAFTAR GAMBAR

Gambar 2.1. Tanaman Rosella (Hibiscus sabdariffa)................................................................3

Gambar 2.2. Mikroskopis Ragi Malassezia furfur Dari Lesi Kulit............................................5
Gambar 2.3. Kultur Koloni Halus Pityrosporum ovale.............................................................5
Gambar 2.4. Makroskopik Isolat Kompleks Jamur Trichophyton mentagrophytes..................6
Gambar 2.5. Hasil Pengujian Metode Disk Diffusion Obat Antijamur A) (Flukonazol,
Posakonazol, Caspofungin, dan Amfoterisin) dan B) (Caspofungin dan Posakonazol) Dengan
Ukuran Tablet Lebih Besar........................................................................................................7
Gambar 2.6. Standar McFarland................................................................................................8
Gambar 3.1. Diagram Alir Penelitian........................................................................................8

iii
 DAFTAR TABEL

Tabel 2.1. Klasifikasi Tanaman Rosella (Hibiscus sabdariffa).................................................3

Tabel 2.2. Klasifikasi Ragi Malassezia furfur...........................................................................5
Tabel 2.3. Klasifikasi Jamur Trichophyton mentagrophytes.....................................................6
Tabel 4.1. Komponen Biaya Penelitian....................................................................................10
Tabel 4.2. Jadwal Pelaksanaan Penelitian................................................................................10

iv
 1

BAB I
PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Jamur merupakan salah satu mikroorganisme penyebab penyakit infeksi pada kulit.
Prevalensi kejadian infeksi yang diakibatkan oleh jamur lebih sering dibandingkan oleh
virus ataupun bakteri (Graceciela, 2021). Iklim tropis di Indonesia sangat mendukung
pertumbuhan dan perkembangan jamur, karena jamur dapat tumbuh dengan baik pada
kondisi lingkungan yang memiliki kelembaban cukup tinggi (Arwati, 2020; Minarni
dkk., 2020). Kesadaran akan kebersihan diri serta lingkungan pada masyarakat yang
masih rendah juga menjadi salah satu faktor penyebab pertumbuhan jamur (Puteri, 2017)
Pada tahun 2016, penyakit kulit dan jaringan subkutan di Indonesia ada pada posisi
ketiga dari 10 penyakit dengan pasien rawat jalan di rumah sakit terbanyak (Sugiester
dkk., 2021). Contoh penyakit infeksi pada kulit akibat jamur yang paling banyak ditemui
ialah dermatofitosis dermatitis seboroik, dan ketombe.
Dermatofitosis merupakan penyakit infeksi kulit superfisial yang diakibatkan oleh
kelompok jamur dermatofita. Prevalensi kejadian dermatofitosis sekitar (20-25)% dari
populasi dunia dan jumlahnya terus mengalami peningkatan (Nawaliya dkk., 2021).
Penyakit ini tidak akan menyebabkan kematian, namun rasa gatal yang ditimbulkan akan
mengganggu aktivitas sehingga dapat memengaruhi kualitas hidup penderitanya (Sari,
2010). Kelompok jamur dermatofita dikelompokkan menjadi tiga genus yang bersifat
patogen terhadap manusia, yaitu Trichophyton, Microsporum, dan Epidermophyton.
Salah satu genus yang menjadi penyebab dermatofitosis paling umum ialah
Trichophyton. Genus jamur ini dapat menyebabkan penyakit tinea (Segal & Frenkel,
2015).
Trichophyton mentagrophytes merupakan salah satu spesies jamur dari genus
Trichophyton yang dapat menyebabkan beberapa jenis tinea, seperti tinea kapitis, tinea
korporis, serta tinea genitalis (Klinger dkk., 2021). Jamur ini merupakan penyebab
umum dari penyakit infeksi kulit menular (García dkk., 2006). T.mentagrophytes
termasuk spesies kedua terbanyak yang menjadi penyebab umum tinea setelah T.rubrum.
Prevalensi kejadian yang diakibatkan oleh T.mentagrophytes sekitar (2-42,86)% dari
total kejadian sekitar (30-96,4)% (Arwati, 2020).
Dermatitis seboroik dan ketombe merupakan masalah kulit yang umum terjadi dan
memengaruhi area seboroik pada tubuh. Keduanya tampak serupa, yang membedakan
hanyalah tingkat keparahan serta lokasinya. Ketombe hanya terbatas di area kulit kepala
dan mengakibatkan kulit gatal dan mengelupas tanpa adanya peradangan (Borda &
Wikramanayake, 2015). Dermatitis seboroik merupakan kondisi dimana kulit mengalami
peradangan kronis, seperti ruam kemerahan, bersisik, dan gatal (Okokon dkk., 2015).
Prevalensi kejadian penyakit ini sekitar (1-3)% orang dewasa yang imunokompeten,
sedangkan orang dengan kelainan imun prevalensi kejadiannya jauh lebih besar, sekitar
(30-82)% (Gupta dkk., 2004). Kedua penyakit ini diakibatkan oleh ragi Malassezia
furfur dan Pityrosporum ovale yang merupakan flora normal pada tubuh manusia.
Namun, dapat menjadi patogen jika dipengaruhi oleh beberapa faktor, salah satunya ialah
kelainan imun (Ljubojević dkk., 2002).
Selama ini, pengobatan yang dilakukan untuk mengobati penyakit infeksi kulit
akibat jamur dengan menggunakan obat sintetis. Beberapa obat sintetis yang sering
digunakan seperti flukonazol, ketokonazol, itakonazol, terbinafin, mikonazol, serta
griseofulvin (Khurana dkk., 2019). Penggunaan obat sintetis secara terus dapat
mengakibatkan resistensi serta toksisitas obat terhadap antibiotik (García dkk., 2006).
 2

Resistensi ini mengakibatkan terjadinya kekambuhan. Terdapat beberapa faktor yang

mengakibatkan terjadinya kekambuhan penyakit dermatofitosis, yaitu dari jamur itu
sendiri, host atau inang, obat, serta presentasi klinis (Khurana dkk., 2019). Contoh
resistensi obat sintetis yang telah ditemukan, yaitu C. krusei, C. glabrata, dan
Aspergillus sp. yang resisten secara alami terhadap flukonazol. Resistensi ini merupakan
konsekuensi dari penggunaan terapi jangka panjang, profilaksis yang luas, serta
penggunaan antijamur pada bidang pertanian. Selain permasalahan resistensi,
penggunaan obat sintetis ini juga dapat mengakibatkan beberapa efek samping, seperti
hepatoksisitas, nefrotoksisitas, dan mielotoksisitas (Houšť dkk., 2020).
Dua hal di atas menjadi latar belakang utama peneliti melakukan penelitian terhadap
tanaman obat untuk mengganti penggunaan obat sintetis. Beberapa penelitian telah
membuktikan bahwa tanaman obat dapat memberikan efek farmakologi yang
menyerupai obat sintetis dan memiliki efek samping yang rendah. Salah satu tanaman
obat yang diyakini berpotensi sebagai antijamur ialah tanaman Rosella (Hibiscus
sabdariffa). Tanaman Rosella merupakan salah satu tanaman obat yang sering
digunakan, hal ini dikarenakan mudah ditemukan dan memiliki beberapa efek
farmakologi, seperti antikanker, antihipertensi, antikolesterol, antidiabet, antioksidan,
antimikroba, mengobati sakit usus, diuretik, dan demam (García dkk., 2006;
Kusumanegara dkk., 2017). Tanaman Rosella mengandung senyawa flavonoid dan
antosianin yang diyakini bahwa kedua senyawa tersebut yang berperan sebagai agen
antijamur (Kusumanegara dkk., 2017).
1.2 Rumusan Masalah
Berdasarkan latar belakang yang telah diuraikan, maka permasalahan pada penelitian
ini dapat dirumuskan sebagai berikut:
 Bagaimana aktivitas antjamur ekstrak etanol kelopak bunga Rosella (Hibiscus
sabdariffa) terhadap jamur Malassezia furfur, Pityrosporum ovale, dan Trichophyton
mentagrophytes?
 Apakah ekstrak etanol kelopak bunga Rosella (Hibiscus sabdariffa) berpotensi
sebagai alternatif obat antijamur?
1.3 Tujuan Penelitian
Berdasarkan rumusan masalah di atas, diperoleh tujuan dari penelitian ini yaitu
sebagai berikut:
 Mengetahui aktivitas antijamur dari ekstrak etanol kelopak bunga Rosella (Hibiscus
sabdariffa) terhadap jamur Malassezia furfur, Pityrosporum ovale, dan Trichophyton
mentagrophytes.
 Mengetahui potensi ekstrak etanol kelopak bunga Rosella (Hibiscus sabdariffa)
sebagai antijamur.
1.4 Manfaat Penelitian
Berdasarkan tujuan penelitian di atas, maka penelitian ini memiliki manfaat sebagai
berikut:
 Menambah ilmu pengetahuan tentang aktivitas antijamur dari ekstrak etanol kelopak
bunga Rosella (Hibiscus sabdariffa) terhadap jamur Malassezia furfur, Pityrosporum
ovale, dan Trichophyton mentagrophytes.
 Dapat digunakan sebagai obat alternatif penyakit infeksi kulit akibat jamur.
 3

BAB II
TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Rosella (Hibiscus sabdariffa)

Gambar 2.1. Tanaman Rosella (Hibiscus sabdariffa)

(Haidar, 2016)
Rosella merupakan tanaman yang berasal dari benua Afrika. Namun, tanaman ini
sekarang banyak dibudidayakan hampir di seluruh dunia dikarenakan dapat hidup di
mana saja dengan kondisi lahan, cuaca, serta suhu apapun. Tanaman ini juga termasuk
tanaman semusim, yaitu hanya mengalami satu kali masa produktif (Haidar, 2016).
Adapun klasifikasi dari tanaman Rosella dapat dilihat pada Tabel 2.1 berikut:
Tabel 2.1. Klasifikasi Tanaman Rosella (Hibiscus sabdariffa)
(Haidar, 2016)
Kingdom Plantae
Sub Kingdom Tracheobionta
Divisi Spermatophyta
Sub Divisi Angiospermae
Kelas Dicotyledoneae
Ordo Malvaceales
Famili Malvaceae
Genus Hibiscus
Spesies Hibiscus sabdariffa
Tanaman Rosella memiliki ciri fisik berupa berbatang bulat, tegak, berkayu, serta
berwarna merah. Daun berbentuk tunggal, bulat telur, pertulangan menjari, serta letaknya
berseling dengan pinggiran daun bergerigi. Panjang dari daunnya mencapai 6-15 cm
dengan lebar 5-8 cm. Bunganya sendiri berwarna agak gelap, dilengkapi dengan benang
sari serta putik, dan memiliki 8-11 helai kelopak yang berbulu dengan panjang satu cm.
Terdapat biji di dalam cangkang yang dilindungi oleh kelopak bunga ini. Bagian bunga
dan biji inilah yang banyak dimanfaatkan oleh manusia karena diketahui memiliki
banyak khasiat dan manfaat (Haidar, 2016). Kualitas dari tanaman ini sangat dipengaruhi
oleh benih, kondisi pertumbuhan, waktu panen, penanganan pasca panen, serta tahap
pengeringan (Da-Costa-Rocha dkk., 2014).
Berdasarkan penelitian yang dilakukan oleh (Okereke dkk., 2015) ekstrak metanol
kelopak bunga Rosella mengandung senyawa metabolit sekunder golongan glikosida,
alkaloid, flavonoid, dan fenol. Penelitian (Obouayeba dkk., 2015) menunjukkan hasil
 4

bahwa pada kelopak bunga Rosella terkandung senyawa alkaloid, polifenol, flavonoid,
antosianin, tanin, dan saponin. Senyawa antosianin termasuk salah satu senyawa dengan
jumlah paling banyak di kelopak bunga Rosella, yaitu sebesar 53,19%. Senyawa ini
memiliki efek fungistatik dan fungisida. Efek fungisida yaitu dapat membunuh koloni
jamur sedangkan efek fungistatik yaitu dapat menghambat pertumbuhan koloni jamur.
Antosianin bekerja dengan cara mendenaturasi protein, sehingga dapat menyebabkan
gangguan pada saat pembentukan protein bahkan menyebabkan sel mati (Kusumanegara
dkk., 2017).
Bunga Rosella banyak dimanfaatkan dalam pengobatan tradisional. Hal ini
dikarenakan dalam ekstraknya memiliki beberapa macam bioaktivitas seperti sebagai
antibakteri, antijamur, antioksidan, antikolesterol, antidiabetes, serta antihipertensi (Da-
Costa-Rocha dkk., 2014). Ekstrak etanol:air (1:1) daun bunga Rosella pada konsentrasi
250,0 mg/mL menunjukkan hasil aktif terhadap beberapa mikroba, seperti A. fumigatus,
A. niger, B. cinerea, P. digitatum, R. nigricans, dan T. mentagrophytes (Ross, 2003).
Berdasarkan penelitian yang dilakukan oleh (García dkk., 2006) ekstrak air kelopak
bunga Rosella aktif terhadap jamur T. mentagrophytes dengan nilai MIC sebesar 4,0
mg/mL. Penelitian yang dilakukan oleh (Kusumanegara dkk., 2017) menunjukkan hasil
ekstrak air kelopak bunga Rosella aktif terhadap jamur C. albicans dengan rerata besar
zona inhibisi pada konsentrasi 5% (18,53 mm), 10% (22,40 mm), 20% (26,20 mm), dan
40% (29,47 mm). Kelopak bunga Rosella ini juga sering dikonsumsi dalam bentuk teh,
yang mana teh Rosella ini diyakini memiliki khasiat mengobati batuk, asam urat,
mengurangi panas dalam, menetralkan racun (detoksifikasi), serta menetralisir asupan
makanan yang berlemak. Selain dimanfaatkan sebagai obat tradisional, kelopak bunga
Rosella juga banyak dimanfaatkan sebagai bahan makanan, seperti dalam pembuatan
selai, sirup, es krim, serta sebagai perisa (Haidar, 2016).
2.2 Antijamur
Aktivitas antijamur seharusnya memiliki sifat toksisitas yang selektif, yaitu obat
tersebut hanya berbahaya bagi mikroba dan tidak membahayakan inangnya. Terdapat
beberapa mekanisme kerja penghambatan dari antijamur, yaitu:
1. Mengganggu komponen penyusun sel. Struktur pada dinding sel dapat dirusak
dengan cara menghambat pembentukannya atau merubahnya setelah terbentuk.
2. Bereaksi dengan membran sel sehingga mengakibatkan terjadinya perubahan
permeabilitas serta kehilangan komponen penyusun sel.
3. Menghambat sintesis protein dan asam nukleat sehingga mengakibatkan kerusakan
pada sel (Hakim, Arif, 2009).
Salah satu senyawa yang dapat berfungsi sebagai antijamur, yaitu antosianin.
Senyawa antosianin pada tumbuhan berfungsi sebagai pertahanan dari infeksi dan
kerusakan yang diakibatkan oleh jamur, serta menjadi kamuflase terhadap hama. Selain
pada tumbuhan, antosianin juga digunakan sebagai bahan pengganti natrium nitrit dalam
fermentasi produk daging. Kualitas dari karakteristiknya yang hampir menyerupai
natrium nitrit ini membuat antosianin tidak akan menimbulkan kerusakan pada bahan
maupun kemasan, karena memiliki aktivitas salah satunya sebagai antijamur (Priska
dkk., 2018).
Selain antosianin, terdapat beberapa senyawa lain yang diyakini memiliki aktivitas
sebagai antijamur, yaitu alkaloid, saponin, tanin, polifenol, flavonoid, dan terpenoid.
Keberadaan senyawa fenol yang tinggi efektif untuk mengikat protein mikrotubulus
dalam sel serta menggangu fungsi mitosis, hal ini akan mengakibatkan pertumbuhan
jamur terhambat. Senyawa terpenoid pada tumbuhan dapat menghambat pertumbuhan
jamur, spora, dan miselium. Terpenoid bekerja dengan cara mengganggu permeabilitas
 5

membran sitoplasma, menghambat kerja enzim tertentu sehingga mengakibatkan

metabolisme sel jamur akan terganggu. Sel jamur yang terganggu ini akan menghambat
proses pemanjangan dan fragmentasi hifa sehingga sel jamur tidak dapat berkembang
biak (Kusumanegara dkk., 2017).
2.3 Malassezia furfur

Gambar 2.2. Mikroskopis Ragi Malassezia furfur Dari Lesi Kulit

(Ljubojević dkk., 2002)
Malassezia furfur merupakan ragi lipofilik polimorfik dengan dinding sel yang tebal
serta berlapis. Koloni dari ragi ini berukuran kecil-kecil dan berwarna cokelat
kekuningan. M. furfur terdapat pada 90% orang dewasa dan merupakan flora normal
pada kulit manusia di mana ragi ini terdapat hampir di seluruh area tubuh, terutama pada
daerah wajah dan kulit kepala. Umumnya ragi ini ditemukan di stratum korneum, di
mana asam lemak bebas serta trigliserida dari sebum menjadi sumber nutrisi lipid bagi
ragi ini (Ljubojević dkk., 2002). Adapun klasifikasi M.furfur menurut (Schoch dkk.,
2020) dapat dilihat pada Tabel 2.2 berikut:
Tabel 2.2. Klasifikasi Ragi Malassezia furfur
(Schoch dkk., 2020)
Kingdom Fungi
Filum Basidiomycota
Kelas Malasseziomycetes
Ordo Malasseziales
Famili Malasseziaceae
Genus Malassezia
Spesies Malassezia furfur
M. furfur termasuk patogen oportunitis dan dapat menyebabkan infeksi sistemik.
Ragi ini dapat bersifat patogen yang diakibatkan oleh beberapa faktor, seperti suhu
tinggi, kelembaban relatif, kulit berminyak, berkeringat, keturunan, pengobatan
imunosupresif, serta orang dengan kelainan imun (Ingham & Cunningham, 1993;
Ljubojević dkk., 2002; Pedrosa dkk., 2018). M. furfur yang telah menjadi patogen
terhadap manusia mengakibatkan beberapa penyakit, seperti dermatitis seboroik,
ketombe, folikulitis Malassezia (Ingham & Cunningham, 1993).
2.4 Pityrosporum ovale
 6

Gambar 2.3. Kultur Koloni Halus Pityrosporum ovale

(Midgley, 1989)
Pityrosporum ovale merupakan ragi dari genus Pityrosporum atau Malassezia dan
famili Cryptococcaceae. Ragi ini memiliki ciri fisik berupa koloni halus, mengkilat, sel
berbentuk oval dengan panjang (2-6) µm (Midgley, 1989). P. ovale termasuk ragi
lipofilik dan mikroflora normal pada kulit orang dewasa. Ragi ini tumbuh dengan baik di
kulit kepala, wajah, leher, dan dada. Ragi ini dapat mengakibatkan penyakit dermatitis
seboroik (Kieffer dkk., 1990).
Beberapa peneliti mengatakan bahwa ragi ini merupakan sinonim dari M. furfur. P.
ovale merupakan fase ragi dan M. furfur merupakan fase miselium. Perbedaan keduanya
tergantung kepada mikromorfologinya (Ingham & Cunningham, 1993). Sama halnya
dengan M. furfur, P. ovale yang merupakan flora normal pada tubuh manusia juga dapat
bersifat patogen apabila dipengaruhi oleh beberapa faktor, seperti kulit berminyak,
keturunan, serta orang dengan kelainan imun (Ljubojević dkk., 2002).
2.5 Trichophyton mentagrophytes

Gambar 2.4. Makroskopik Isolat Kompleks Jamur Trichophyton mentagrophytes

(Frías-De-león dkk., 2020)
Trichophyton mentagrophytes merupakan salah satu spesies jamur dari genus
Trichophyton. Jamur ini lebih sering ditemukan di negara-negara dengan iklim tropis
(Segal & Frenkel, 2015). Telah ditemukan sebanyak 21 genotip dari spesies jamur ini
dengan delapan genotip diantaranya dilaporkan terdapat lebih dari 10 kasus yang tersebar
di seluruh dunia (Klinger dkk., 2021). T. mentagrophytes dapat mengakibatkan beberapa
jenis penyakit tinea, seperti tinea kapitis, tinea korporis, tinea genitalis, tinea unguium,
tinea pedis, serta tinea barbae (Frías-De-león dkk., 2020). T. mentagrophytes memiliki
ciri fisik berwarna putih kekuningan dengan bagian tengah koloni berwarna putih krem,
berbentuk bubuk hingga butir, serta membentuk lipatan ditengah dengan tekstur
menyerupai kapas. Struktur makrokonidia dari jamur ini berupa dinding tipis dan halus
dengan panjang (17,66±3,29) µm dan lebar (5,85±2,54) µm, serta berbentuk menyerupai
cerutu (Rufaidah dkk., 2020). Adapun klasifikasi dari jamur Trichophyton
mentagrophytes dapat dilihat pada Tabel 2.3 berikut:
Tabel 2.3. Klasifikasi Jamur Trichophyton mentagrophytes
(Schoch dkk., 2020)
Kingdom Fungi
Filum Ascomycota
Kelas Eurotiomycetes
Ordo Onygenales
Famili Arthrodermataceae
Genus Trichophyton
Spesies Trichophyton mentagrophytes
 7

T. mentagrophytes merupakan spesies terbanyak kedua setelah T. rubrum yang

menjadi penyebab tinea dengan prevalensi kejadian sekitar (2-42,86)% dari total
kejadian (30-96,4)% (Arwati, 2020; Frías-De-león dkk., 2020). Penyebaran dari jamur
ini dapat secara antropofilik, zoofilik, maupun geofilik. Antropofilik yaitu penyebaran
dari manusia ke manusia, zoofilik merupakan penyebaran dari hewan ke manusia, dan
geofilik merupakan penyebaran dari tanah/lingkungan ke manusia (Segal & Frenkel,
2015). Contoh penyebaran secara antropofilik yaitu melalui hubungan seksual,
sedangkan penyebaran secara zoofilik dapat melalui hewan peliharaan, seperti kucing,
anjing, kelinci (Nenoff dkk., 2014; Segal & Frenkel, 2015). Jamur T. mentagrophytes
memiliki enzim keratinase, oleh karena itu infeksi yang diakibatkan oleh jamur ini dapat
terjadi pada kulit, rambut, serta kuku, baik pada manusia maupun pada hewan (Frías-De-
león dkk., 2020).
2.6 Disk Diffusion
Disk diffusion atau difusi cakram merupakan salah satu metode yang digunakan
untuk mengetahui aktivitas antimikroba suatu senyawa antimikroba terhadap
mikroorganisme patogen. Metode ini dapat digunakan baik ke bakteri maupun ke jamur.
Metode difusi cakram memberikan hasil pengujian yang bersifat kuantitatif berupa
terdapat zona hambat disekitar kertas cakram dengan interpretasi yang bersifat kualitatif,
seperti rentan atau tidak rentan. Metode ini merupakan metode alternatif yang sederhana,
fleksibel, serta hemat biaya (Espinel-Ingroff, 2007).
Metode difusi cakram, atau yang lebih dikenal dengan nama metode Kirby-Bauer
dilakukan dengan tujuan menentukan sensitivitas atau resistensi bakteri aerob patogen
dan anaerob fakultatif terhadap berbagai senyawa antimikroba dengan harapan dapat
membantu dunia kedokteran dalam memilih obat yang tepat. Metode ini dilakukan
dengan cara menumbuhkan mikroorganisme patogen pada media agar dan kemudian
diletakkan kertas cakram yang telah diresapi oleh senyawa antimikroba. Ada atau
tidaknya pertumbuhan mikroorganisme di sekitar kertas cakram menunjukkan
kemampuan senyawa antimikroba tersebut secara tidak langsung (Hudzicki, 2009).
Contoh zona hambat pertumbuhan mikroorganisme hasil pengujian metode Disk
Diffusion dapat dilihat pada Gambar 2.5.

Gambar 2.5. Hasil Pengujian Metode Disk Diffusion Obat Antijamur A) (Flukonazol,
Posakonazol, Caspofungin, dan Amfoterisin) dan B) (Caspofungin dan Posakonazol)
Dengan Ukuran Tablet Lebih Besar
(Espinel-Ingroff, 2007)
Adapun titik kritis yang perlu diperhatikan pada pengujian metode ini, yaitu
konsentrasi dari mikroorganisme patogen yang terdapat pada media agar. Oleh karena itu
sebelum dilakukan pengujian, suspensi mikroorganisme distandardisasi menggunakan
standar McFarland. Standar ini merupakan suspensi barium sulfat atau partikel lateks
yang dapat memungkinkan perbandingan visual kepadatan bakteri. Terdapat beberapa
 8

standar McFarland, yaitu 0,5; 1,0; 2,0; dan 3,0. Namun, standar McFarland yang paling
sering digunakan ialah 0,5 McFarland yang setara antara 1x108 CFU/mL sampai 2x108
CFU/mL E. coli (Hudzicki, 2009). Kekeruhan berbagai jenis standar McFarland dapat
dilihat pada Gambar 2.6.

Gambar 2.6. Standar McFarland

(Hudzicki, 2009)

BAB III
METODE PENELITIAN

3.1 Diagram Alir

Berikut adalah diagram alir yang digunakan pada penelitian ini.

Gambar 3.1. Diagram Alir Penelitian

3.2 Alat dan Bahan

3.2.1 Alat
Alat yang digunakan pada penelitian ini ialah alumunium foil, autoclave, beaker
glass 1 L, cawan petri, cotton swab, evaporator, inkubator, jangka sorong, jerigen
20 L, kain kassa, kapas, kawat ose, kertas cakram, McFarland densitometer, mesin
giling, mikro tip, neraca, pinset, pipet mikro (2-20) µL, plastik wrap, spiritus,
tabung reaksi, tali rafia, vial, dan vortex mixer.
 9

3.2.2 Bahan
Bahan yang digunakan pada penelitian ini ialah aseton, etanol 70%, jamur
Malassezia furfur, jamur Pityrosporum ovale, jamur Trichophyton mentagrophytes,
kelopak bunga Rosella (Hibiscus sabdariffa), media agar Potato Dextrose Agar
(PDA), media cair Potato Dextrose Broth (PDB), dan standar 0,5 McFarland.
3.3 Prosedur Penelitian
3.3.1 Preparasi Tanaman Bunga Rosella
Kelopak bunga Rosella diperoleh dari salah satu daerah di desa Balongan,
Kuningan. Sebanyak lima kg kelopak bunga Rosella dipotong kecil-kecil dan
dipisahkan dari bijinya. Kelopak bunga Rosella selanjutnya dikeringkan di bawah
sinar matahari. Setelah itu kelopak bunga Rosella yang sudah kering digiling
hingga menjadi serbuk.
3.3.2 Ekstraksi Bunga Rosella
Serbuk kelopak bunga Rosella dimaserasi menggunakan etanol 70% sebanyak
2,5 L dan dilakukan pengocokan. Proses maserasi dilakukan selama 3x24 jam
dengan penggantian pelarut yang dilakukan setiap 1x24 jam. Filtrat yang diperoleh
dari proses maserasi dipekatkan menggunakan evaporator, sehingga diperoleh
ekstrak pekat.
3.3.3 Pengujian Aktivitas Antijamur
Pengujian aktivitas antijamur dilakukan dengan menggunakan metode Kirby-
Bauer yang telah dimodifikasi (Kusumanegara et al., 2017). Adapun tahapan yang
dilakukan sebagai berikut:
 Sterilisasi Alat dan Bahan
Alat dan bahan yang akan digunakan disterilisasi terlebih dahulu
menggunakan autoclave pada suhu 121°C selama 15 menit.
 Penyediaan Jamur Uji
Jamur uji, yaitu Malassezia furfur, Pityrosporum ovale dan Trichophyton
mentagrophytes ditanam di atas permukaan media agar PDA menggunakan
kawat ose steril. Media selanjutnya diinkubasi pada suhu 30°C selama 18-24
jam.
 Persiapan dan Standardisasi Suspensi Jamur
Jamur yang telah tumbuh di media agar PDA disuspensikan ke media cair
PDB dan diinkubasi selama 18-24 jam pada suhu 30°C. Kekeruhan suspensi
jamur distandardisasi menggunakan standar 0,5 McFarland.
 Uji Antijamur
Cawan petri yang berisi media agar PDA disiapkan pada suhu kamar selama
10-15 menit. Suspensi jamur divortex agar homogen. Suspensi jamur yang telah
homogen dioleskan secara merata pada lapisan media agar PDA menggunakan
cotton swab dan didiamkan selama lima menit agar bakteri terdapat pada media.
Diteteskan sebanyak 15 µL ekstrak etanol kelopak bunga Rosella pada kertas
cakram steril dan selanjutnya kertas cakram diletakkan di permukaan media
agar PDA yang telah dioles suspensi jamur. Selanjutnya media agar PDA
diinkubasi selama 18-24 jam pada suhu 30°C dan kemudian dilakukan
pengamatan serta diukur zona inhibisi yang terbentuk. Pengukuran dilakukan
dengan cara mengukur diameter atau jari-jari zona inhibisi yang terbentuk
menggunakan jangka sorong.
 10

BAB IV
BIAYA DAN JADWAL PENELITIAN

4.1 Biaya Penelitian

Biaya penelitian yang digunakan dapat dilihat pada Tabel 4.1. Rincian dari biaya
penelitian ini dapat dilihat pada Lampiran 1.
Tabel 4.1. Komponen Biaya Penelitian
No Komponen Biaya Penelitian Jumlah Biaya (Rp)
1 Biaya habis pakai 2.434.500
2 Peralatan penunjang 266.000
3 Biaya perjalanan 525.000
Biaya lain-lain (administrasi, publikasi,
4 1.790.000
seminar, laporan, ATK, dll.)
Total 5.015.500
4.2 Jadwal Penelitian
Penelitian akan dilakukan dari Bulan Agustus 2022 hingga Januari 2023. Adapun
jadwal pelaksanaan penelitian yang akan dilakukan dapat dilihat pada Tabel 4.2.
Tabel 4.2. Jadwal Pelaksanaan Penelitian
Bulan ke-
No Jenis Kegiatan
1 2 3 4 5 6
1 Mencari literatur
2 Pengumpulan kelopak bunga Rosella
3 Preparasi kelopak bunga Rosella
4 Ekstraksi kelopak bunga Rosella
5 Pengujian aktivitas antijamur
6 Penyusunan draft hasil penelitian
7 Laporan hasil penelitian

DAFTAR PUSTAKA

Arwati, T. (2020). Studi Literatur Identifikasi Dermatofita Pada Penderita Tine Pedis
[Skripsi. Politeknik Kemenkes Bandung]. http://repo.poltekkesbandung.ac.id/1293/
Borda, L. J., & Wikramanayake, T. C. (2015). Seborrheic Dermatitis and Dandruff: A
Comprehensive Review. Journal of Clinical & Investigative Dermatology, 3(2).
https://doi.org/doi.org/10.13188%2F2373-1044.1000019
Da-Costa-Rocha, I., Bonnlaender, B., Sievers, H., Pischel, I., & Heinrich, M. (2014).
Hibiscus sabdariffa L. - A phytochemical and pharmacological review. Food Chemistry,
165, 424–443. https://doi.org/10.1016/J.FOODCHEM.2014.05.002
Espinel-Ingroff, A. (2007). Standardized Disk Diffusion Method for Yeasts. Clinical
 11

Microbial Newsletter, 29(3), 97–100.

https://doi.org/doi.org/10.1016/j.clinmicnews.2007.06.001
Frías-De-león, M. G., Martínez-Herrera, E., Atoche-Diéguez, C. E., González-Cespón, J. L.,
Uribe, B., Arenas, R., & Rodríguez-Cerdeira, C. (2020). Molecular identification of
isolates of the Trichophyton mentagrophytes complex. International Journal of Medical
Sciences, 17(1), 45–52. https://doi.org/10.7150/ijms.35173
García, V. M. N., Rojas, G., Zepeda, L. G., Aviles, M., Fuentes, M., Herrera, A., & Jiménez,
E. (2006). Antifungal and Antibacterial Activity of Four Selected Mexican Medicinal
Plants. Pharmaceutical Biology, 44(4), 297–300.
https://doi.org/10.1080/13880200600715837
Graceciela, Y. E. (2021). Hubungan Diabetes Melitus Tipe 2 Dengan Kejadian
Dermatofitosis. Jurnal Kesehatan Masyarakat, 01(02), 22–26.
https://www.jurnalkesmas.com/index.php/jmk/article/view/3/8
Gupta, A. K., Madzia, S. E., & Batra, R. (2004). Etiology and Management of Seborrheic
Dermatitis. Dermatology, 208(2), 89–93. https://doi.org/10.1159/000076478
Haidar, Z. (2016). Si Cantik Rosella: Bunga Cantik Kaya Manfaat (M. Faisal (ed.)).
Edumania. https://books.google.co.id/books?
id=JdcqDAAAQBAJ&dq=khasiat+kelopak+rosella&lr=&hl=id&source=gbs_navlinks_
s
Hakim, Arif, R. (2009). Uji Potensi Antifungi Ekstrak Etanol Rimpang Kecombrang
(Nicolaia speciosa Horan) Terhadap Trichophyton mentagrophytes dan Trichophyton
rubrum. [Skripsi]. Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah.
Houšť, J., Spížek, J., & Havlíček, V. (2020). Antifungal drugs. Metabolites, 10(3).
https://doi.org/10.3390/metabo10030106
Hudzicki, J. (2009). Kirby-Bauer Disk Diffusion Susceptibility Test Protocol. www.atcc.org
Ingham, E., & Cunningham, A. C. (1993). Malassezia furfur. Journal of Medical and
Veterinary Mycology, 31(4), 265–288. https://doi.org/10.1080/02681219380000341
Khurana, A., Sardana, K., & Chowdhary, A. (2019). Antifungal resistance in dermatophytes:
Recent trends and therapeutic implications. Fungal Genetics and Biology, 132.
https://doi.org/10.1016/j.fgb.2019.103255
Kieffer, M., Bergbrant, I.-M., Faergemann, J., Jemec, G. B. E., Ottevanger, V., Skov, P. S., &
Svejgaard, E. (1990). Immune reactions to Pityrosporum ovale in adult patients with
atopic and seborrheic dermatitis. Journal of the American Academy of Dermatology,
22(5), 739–742. https://doi.org/10.1016/0190-9622(90)70100-V
Klinger, M., Theiler, M., & Bosshard, P. P. (2021). Epidemiological and Clinical Aspects of
Trichophyton mentagrophytes/Trichophyton interdigitale Infections in The Zurich Area:
a Retrospective Study Using Genotyping. Journal of the European Academy of
Dermatology and Venereology, 35(4), 1017–1025. https://doi.org/10.1111/jdv.17106
Kusumanegara, K. S., Setiawan, A. S., & Rachmawati, E. (2017). The Difference of
Inhibitory Zone Between Katuk (Sauropus androgynous L. Merr.) Leaf Infusion and
Roselle (Hibiscus sabdariffa L.) Petals Towards Oral Candida albicans. Padjadjaran
Journal of Dentistry, 29(2), 118–122. https://doi.org/10.24198/pjd.vol29no2.13647
 12

Ljubojević, S., Skerlev, M., Lipozenčić, J., & Basta-juzbašić, A. (2002). The Role of
Malassezia furfur in Dermatology. Clinics in Dermatology, 20(2), 179–182.
https://doi.org/10.1016/S0738-081X(01)00240-1
Midgley, G. (1989). The diversity of Pityrosporum (Malassezia) yeasts in vivo and in vitro.
Mycopathologia, 106(3), 143–153. https://doi.org/10.1007/BF00443055
Minarni, A., Widarti, & Rahman. (2020). Uji Daya Hambat Beberapa Jenis Obat Antijamur
pada Jamur yang di Isolasi dari Kuku Kaki. Jurnal Media Analis Kesehatan, 11(2), 119–
126. https://doi.org/10.32382/mak.v11i2.1784
Nawaliya, A., Sinuhaji, B., & Triana, D. (2021). Kejadian Infeksi Trichophyton
mentagrophytes Terkait Personal Hygiene Antara Nelayan Dengan Pengolah Ikan
Rumahan di Wilayah Pesisir Kota Bengkulu. Jurnal Kesehatan Kusuma Husada, 12(1),
74–81. https://doi.org/10.34035/jk.v12i1.582
Nenoff, P., Krüger, C., Ginter-Hanselmayer, G., & Tietz, H.-J. (2014). Mycology-an update.
Part 1: Dermatomycoses: Causative agents, epidemiology and pathogenesis. Journal of
The German Society of Dermatology, 12(3), 188–210. https://doi.org/10.1111/ddg.12245
Obouayeba, A. P., Diarrassouba, M., Soumahin, E. F., & Kouakou, T. H. (2015).
Phytochemical Analysis, Purification and Identification of Hibiscus Anthocyanins.
Journal of Pharmaceutical, Chemical and Biological Sciences, 3(2), 156–168.
http://www.jpcbs.info
Okereke, C. N., Iroka, F. C., & Chukwuma, M. O. (2015). Phytochemical analysis and
medicinal uses of Hibiscus sabdariffa. International Journal of Herbal Medicine, 2(6),
16–19. https://www.researchgate.net/publication/304157698
Okokon, E. O., Verbeek, J. H., Ruotsalainen, J. H., Ojo, O. A., & Bakhoya, V. N. (2015).
Topical antifungals for seborrhoeic dermatitis. Cochrane Database of Systematic
Reviews, 5. https://doi.org/10.1002/14651858.CD008138.PUB3
Pedrosa, A. F., Lisboa, C., & Rodrigues, A. G. (2018). Malassezia infections with systemic
involvement: Figures and facts. Journal of Dermatology, 45(11), 1278–1282.
https://doi.org/10.1111/1346-8138.14653
Priska, M., Peni, N., Carvallo, L., & Ngapa, Y. D. (2018). REVIEW: ANTOSIANIN DAN
PEMANFAATANNYA. Cakra Kimia (Indonesian E-Journal of Applied Chemistry),
6(2), 79–97.
Puteri, I. (2017). Prevalensi Dermatofitosis di Poliklinik Kulit Dan Kelamin RSUD Dr. H.
Chasan Boesorie Ternate Periode Januari 2015 - Desember 2016. [Skripsi]. Universitas
Hasanuddin.
Ross, I. A. (2003). Hibiscus sabdariffa. In K. Hoather-Potter (Ed.), Medicinal Plants of the
World (2 ed., Vol. 1, hal. 267–275). Humana Press. https://doi.org/10.1007/978-1-
59259-365-1
Rufaidah, A., Pribadi, E. S., & Adnyane, I. K. M. (2020). Teknik Memanen Makrokonidia
Dermatofita Microsporum gypseum dan Trichophyton mentagrophytes. Jurnal Mikologi
Indonesia, 4(2), 182–192. https://doi.org/10.46638/jmi.v4i2.87
Sari, S. A. (2010). Efek Antifungi Ekstrak Kelopak Bunga Rosella (Hibiscus sabdariffa)
Terhadap Pertumbuhan Trichophyton rubrum in vitro. [Skripsi]. Universitas Sebelas
Maret.
 13

Schoch, C. L., Ciufo, S., Domrachev, M., Hotton, C. L., Kannan, S., Khovanskaya, R., Liepe,
D., Mcveigh, R., O’Neill, K., Robbertse, B., Sharma, S., Soussov, V., Sullivan, J. P.,
Sun, L., Turner, S., & Karsch-Mizrachi, I. (2020). NCBI Taxonomy: a comprehensive
update on curation, resources and tools. Database (Oxford), 2020.
https://doi.org/10.1093/database/baaa062
Segal, E., & Frenkel, M. (2015). Dermatophyte infections in environmental contexts.
Research in Microbiology, 166(7), 564–569.
https://doi.org/10.1016/j.resmic.2014.12.007
Sugiester, F., Joko, T., & Nurjazuli. (2021). Literature Review: Kualitas Sumur Gali Dan
Personal Hygien Berhubungan Dengan Gangguan Kesehatan Kulit di Indonesia. An-
Nadaa: Jurnal Kesehatan Masyarakat, 8(1), 63–72.
https://ojs.uniska-bjm.ac.id/index.php/ANN/article/view/4772/3092

LAMPIRAN

Lampiran 1. Justifikasi Anggaran Penelitian

1. Bahan Habis Pakai
Justifikasi Harga Satuan Harga Bahan
Material Kuantitas
Pemakaian (Rp) Habis Pakai (Rp)
Bunga Rosella Bahan baku 5 kg 150.000 750.000
74.000/500
Aseton Pembersih 75 mL 74.000
mL
Etanol 70% Pelarut 25 L 60.000/L 1.500.000
Plastik wrap Penutup 1 kotak 29.000 29.000
Kapas Alat bantu saring 1 bungkus 45.000 45.000
Kain kassa Alat bantu saring 1 bungkus 10.000 10.000
Tali rafia Pengikat 1 roll 8.000 8.000
Alumunium foil Penutup 1 kotak 18.500 18.500
Sub Total (Rp) 2.434.500

2. Peralatan Penunjang
Justifikasi Harga Satuan Harga Peralatan
Peralatan Kuantitas
Pemakaian (Rp) Penunjang (Rp)
Beaker Glass 1 L Wadah filtrat 2 111.000 222.000
Jerigen 20 L Wadah ekstraksi 1 44.000 44.000
Sub Total (Rp) 266.000

3. Perjalanan
Justifikasi Harga Satuan Harga
Perjalanan Kuantitas
Pemakaian (Rp) Perjalanan (Rp)
Perjalanan ke
Analisa 15 35.000 525.000
kampus
Sub Total (Rp) 525.000

4. Lain-Lain
Lain-Lain Justifikasi Kuantitas Harga Satuan Biaya (Rp)
 14

Pemakaian (Rp)
Uji Antijamur Pengujian 3 jamur 230.000 690.000
ATK Alat tulis 1 100.000 100.000
Laporan Tugas Print, fotokopi, cetak
1 1.000.000 1.000.000
Akhir laporan
Sub Total (Rp) 1.790.000

Total Anggaran Penelitian Tugas Akhir yang Diperlukan (Rp) 5.015.500

Lampiran 2. Biodata Diri Mahasiswa

Nama Lengkap (disertai gelar) : Anisah Azizah Amd. Si.
NIM : 3212212007
E-mail : miss.anisahazizah@gmail.com
No. Telp HP : 082174764547
Alamat Tinggal : Muka Kuning Indah 1 Blok T No. 10 Kelurahan Batu
Aji, Kecamatan Buliang Kota Batam, Provinsi
Kepulauan Riau
No. Telp Rumah :-
Pendidikan : TK Kartini 1 Batam Tahun Lulus 2004
SD Kartini 1 Batam Tahun Lulus 2010
SMPN 11 Batam Tahun Lulus 2013
SMAN 5 Batam Tahun Lulus 2016
Politeknik AKA Bogor Tahun Lulus 2019
Prestasi yang Pernah Diraih :-
Pengalaman Kerja : Inspektor QA IPC & Deviation Handling PT Kalbe
Farma Tbk (23 Des 2019 – 22 Jun 2021)
Motto Hidup : Jangan pernah lupa untuk selalu bersyukur disetiap
keadaan