Isolasi Golongan Senyawa Flavonoid Dari Daun KELAPA SAWIT (Elaeis Guineensis Jacq.) Skripsi

ISOLASI GOLONGAN SENYAWA FLAVONOID DARI DAUN
KELAPA SAWIT (Elaeis guineensis Jacq.)
SKRIPSI
OLEH:
AMISINTIA SARI HARAHAP
NIM 151501085
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
2019

SKRIPSI
Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar

Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara
OLEH:
AMISINTIA SARI HARAHAP
NIM 151501085
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI

FAKULTAS FARMASI
2019

KATA PENGANTAR
Bismillahirrahmanirrahim,
Alhamdulillah, Puji dan syukur kehadirat Allah yang Maha Kuasa yang
telah melimpahkan rahmat, karunia dan ridhoNya, sehingga penulis dapat
menyelesaikan skripsi yang berjudul “Isolasi Golongan Senyawa Flavonoid Dari
Daun Kelapa Sawit (Elaeis guineensis Jacq.)”. Skripsi ini diajukan sebagai salah
satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara.
Pada kesempatan ini penulis menyampaikan terima kasih kepada Dekan
Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara, Prof. Dr. Masfria, M.S., Apt., yang
telah memberikan bantuan dan fasilitas selama masa pendidikan. Ucapan terima
kasih juga disampaikan kepada bapak Drs. Suryadi Achmad, M.Sc., Apt., selaku
pembimbing dan ibu Dr. Marline Nainggolan, MS., Apt., selaku ketua departemen
laboratorium biologi yang telah membimbing dengan penuh kesabaran, tulus dan
ikhlas selama penelitian dan penulisan skripsi ini berlangsung. Bapak Dr. M.
Pandapotan Nasution, MPS., Apt., dan ibu Dra. Herawaty Ginting, M.Si., Apt.,
selaku dosen penguji yang telah memberikan saran dan kritik kepada penulis
dalam menyelesaikan skripsi ini. Bapak dan ibu staf pengajar Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara yang telah mendidik dan memberikan ilmu kepada
penulis selama perkuliahan dan kepada bapak Prof. Dr. Urip Harahap, Apt.,
selaku penasehat akademik yang telah memberikan bimbingan dan motivasi
dalam melaksanakan kegiatan perkuliahan.
Penulis juga tidak lupa mengucapkan terima kasih dan penghargaan yang
tulus kepada kedua orang tua, Ayahanda Amirun Harahap dan Ibunda Maswarni
iv
v
vi
ABSTRAK
Latar Belakang : Kelapa sawit (Elaeis guineensis Jacq.) termasuk familia

Arecaceae. Seyawa flavonoid termasuk salah satu kandungan metabolit sekunder
dari daun kelapa sawit yang bermanfaat untuk pengobatan antara lain
antioksidan, anti aging, antiinflamasi, antivirus, antikanker, antidiabetes,
antibakteri.
Tujuan : Untuk mengisolasi golongan senyawa flavonoid dari daun kelapa
sawit.
Metode : Serbuk simplisia di skirining fitokimia, kemudian di bebas lemakkan
menggunakan pelarut n-heksan. Ampas (sisa) diangin-anginkan lalu direfluks
dengan HCl 2 N selama 5 jam dan disaring. Filtrat yang diperoleh diuapkan lalu
di partisi dengan pelarut etil asetat. Fraksi etil asetat dianalisis secara
kromatografi kertas (KKt) dengan berbagai fase gerak (HCl 1%, asam asetat 5%
dan 10% , BAW (4:1:5), penampak bercak uap ammonia, AlCl3 dan FeCl3.
Selanjutnya dilakukan dengan KKt preparatif, hasil isolat yang diperoleh diuji
kemurniannya secara KKt satu arah dan dua arah. Isolat yang diperoleh
dikarakterisasi secara spektrofotometri UV menggunakan pereaksi geser.
Hasil : Hasil karakterisasi diperoleh kadar air 6,64%, kadar sari larut air 13,44%,
kadar sari larut etanol 16,86%, kadar abu total 3,74%, kadar abu tidak larut asam
0,76%. Hasil skirining diperoleh senyawa glikosida dan flavonoid. Hasil
pemisahan KKt diperoleh fase gerak terbaik adalah asam asetat 10% dengan
penampak bercak uap ammonia. isolat diperoleh adalah senyawa golongan
flavonoid yaitu golongan flavon Rf 0,65 (biru muda). Hasil karakterisasi isolat
yang diperoleh dianalisis secara spektrofotometri UV menggunakan pereaksi
geser, memberikan absorbansi maksimum pada panjang gelombang (ƛ) 334,6
nm, diperoleh gugus hidroksil pada 4’ dan 7.
Kata kunci : Daun kelapa sawit, Kromatografi kertas (KKt), flavonoid,

Spektrofotometri UV.
vii
ISOLATION OF FLAVONOID COMPOUNDS FROM OIL
PALM LEAF (Elaeis guineensis Jacq.)
ABSTRACT
Background: Oil palm (Elaeis guineensis Jacq.) belongs to the family

Arecaceae. Flavonoid compounds are secondary metabolites of palm oil leaf
which are useful antioxidants, anti-aging, anti-inflammatory, antiviral,
anticancer, antidiabetic, antibacterial properties.
Objective: To isolate the flavonoid compounds from oil palm leaf.
Methods: Powdered simplex is subject to phytochemical screening, then fat free
using n-hexane as solvent. The marc is dried and then refluxed with 2 N HCl for
5 hours. The filtrate obtained was evaporated and then partitioned with ethyl
acetate solvent. Ethyl acetate fraction analyzed by paper chromatography (PC)
using several mobile phases (1% HCl, 5% and 10% acetic acid, BAW (4:1:5),
visualized by ammonia vapor, AlCl3 and FeCl3, then carried out with KKt
preparatively, the purity obtained from the isolates was tested in one direction
and two directions, and the isolates were characterized by UV spectrophotometry
using shift reagent.
Results: Characterization results obtained 6.64% water content, 13.44% water
soluble extract, 16.86% ethanol soluble extract, 3.74% total ash content, 0.76%
acid insoluble ash content. The screening results obtained glycoside compounds
and flavonoids. The best result of KKt separation obtained is the 10% acetic acid
with ammonia vapor spotting appearance. The isolates obtained were flavonoid
compounds group namely flavon group Rf 0.65 (light blue). The results of the
isolation characterization obtained were analyzed by UV spectrophotometry
using shift reagent, giving a maximum absorbance of wavelength (ƛ) 334.6 nm,
hydroxyl groups obtained at 4 'and 7.
Keywords: Oil palm leaf, Paper chromatography (KKt), flavonoids, UV

spectrophotometry.
viii
DAFTAR ISI
JUDUL ............................................................................................................ i
HALAMAN JUDUL .......................................................................................... ii
LEMBAR PENGESAHAN ................................................................................ iii
KATA PENGANTAR ....................................................................................... iv
SURAT PERNYATAAN ................................................................................... vi
ABSTRAK ..................................................................................................... vii
ABSTRACT ..................................................................................................... viii
DAFTAR ISI ..................................................................................................... ix
DAFTAR TABEL ............................................................................................... xi
DAFTAR GAMBAR .......................................................................................... xii
DAFTAR LAMPIRAN ....................................................................................... xiii
BAB I PENDAHULAN ...................................................................................... 1
1.1 Latar Belakang ............................................................................................. 1
1.2 Perumusan Masalah ..................................................................................... 2
1.3 Hipotesis ..................................................................................................... 3
1.4 Tujuan Penelitian ......................................................................................... 3
1.5 Manfaat Penelitian ....................................................................................... 3
1.6 Kerangka Pikir Penelitian ............................................................................ 4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ........................................................................ 5
2.1 Uraian Tumbuhan ......................................................................................... 5
2.1.1 Sistematika tumbuhan ............................................................................... 5
2.1.2 Nama daerah .............................................................................................. 5
2.1.3 Morfologi .................................................................................................. 5
2.1.4 Kandungan kimia ...................................................................................... 6
2.1.5 Khasiat tumbuhan ...................................................................................... 6
2.2 Senyawa flavonoid ....................................................................................... 6
2.2.1 Struktur dasar senyawa flavonoid ............................................................. 8
2.2.2 Klasifikasi senyawa flavonoid ................................................................... 9
2.3 Ekstraksi ..................................................................................................... 14
2.4 Fraksinasi ................................................................................................... 16
2.5 Isolasi .... ..................................................................................................... 16
2.6 Kromatografi ................................................................................................. 17
2.6.1 Kromatografi kertas .................................................................................. 18
2.7 Spektrofotometri .......................................................................................... 20
2.7.1 Spektrofotometri UV ........................................................................................... 20
2.7.2 Penggunaan pereaksi penggeser dalam spektrofotometri UV .................. 21
BAB III METODE PENELITIAN ..................................................................... 22
3.1 Lokasi penelitian .......................................................................................... 22
3.2 Metodologi penelitian ................................................................................. 22
3.3 Alat dan bahan .............................................................................................. 22
3.3.1 Alat .......................................................................................................... 22
3.3.2 Bahan ....................................................................................................... 23
3.4 Pembuatan Pereaksi ..................................................................................... 23
3.4.1 Pereaksi Molisch ....................................................................................... 23
3.4.2 Pereaksi Natrium Hidroksida 2 N ............................................................. 23
ix
3.4.3 Pereaksi asam klorida 2 N ......................................................................... 23
3.4.4 Pereaksi Asam Sulfat 2 N ......................................................................... 23
3.4.5 Pereaksi Besi (III) klorida 10% ................................................................. 24
3.4.4 Pereaksi Timbal (II) asetat 0,4 M .............................................................. 24
3.5 Pengumpulan dan pengolahan sampel ......................................................... 24
3.5.1 Pengumpulan sampel ................................................................................ 24
3.5.2 Identifikasi sampel .................................................................................... 24
3.6 Pengelolaan sampel ...................................................................................... 24
3.8 Skrining Fitokimia ....................................................................................... 25
3.8.1 Pemeriksaan glikosida ............................................................................... 25
3.8.2 Pemeriksaan flavonoid ............................................................................. 25
3.9 Pembuatan Ekstrak n-heksan daun kelapa sawit ......................................... 26
3.10 Fraksinasi cair-cair etilasetat senyawa flavonoid ...................................... 26
3.11 Analisis fraksi etilasetat dengan kromatografi kertas ............................... 27
3.12 Pemisahan senyawa flavonoid dari fraksi etilasetat dengan kromatografi
kertas preparatif ........................................................................................ 27
3.13 Uji kemurnian isolat .................................................................................. 28
3.14 Identifikasi senyawa Hasil Isolat .............................................................. 29
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN .......................................................... 30
4.1 Hasil identifikasi kelapa sawit .................................................................... 30
4.2 Hasil skirining fitokimia ............................................................................ 30
4.3 Hasil pembuatan ekstrak n-heksan daun kelapa sawit ................................. 31
4.4 Hasil fraksinasi etil asetat ............................................................................ 31
4.5 Hasil analisis fraksi etil asetat secara kromatografi kertas ........................... 31
4.6 Hasil isolasi senyawa flavonoid secara kromatografi kertas
preparatif ..................................................................................................... 33
4.7 Hasil uji kemurnian ...................................................................................... 33
4.7.1 Hasil uji kemurnian isolat secara kromatografi kertas satu arah ............... 33
4.7.2 Hasil uji kemurnian isolat secara kromatografi kertas dua arah ............... 34
4.8 Hasil karakterisasi isolat dengan spektrofometri UV
menggunakan pereaksi geser (Shift Reagent) .............................................. 34
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN .............................................................. 38
5.1 Kesimpulan ................................................................................................... 38
5.2 Saran ...................................................................................................... 38
DAFTAR PUSTAKA ......................................................................................... 39
LAMPIRAN ..................................................................................................... 42
x
DAFTAR TABEL
4.1 Hasil skirining fitokimia simplisia daun kelapa sawit ................................. 30

4.2 Data hasil analisis kromatografi fraksi etil asetat ........................................ 31
4.3 Hasil isolasi senyawa flavonoid secara kromatografi kertas
Preparatif ..................................................................................................... 33
4.4 Hasil uji kemurnian isolat secara kromatografi satu arah ............................ 34
4.5 Hasil uji kemurnian isolat secara kromatografi dua arah ............................. 34
xi
DAFTAR GAMBAR
1. Kerangka pikir penelitian ........................................................................... 4

2. Kerangka dasar senyawa flavonoid ........................................................... 8
2.1 Sistem penomoran Flavonoid ..................................................................... 9
2.2 Struktur flavonol ........................................................................................ 9
2.3 Struktur flavon ........................................................................................... 10
2.4 Struktur isoflavon ....................................................................................... 10
2.5 Struktur flavanon ........................................................................................ 11
2.6 Struktur flavanonol ..................................................................................... 11
2.7 Struktur katekin .......................................................................................... 11
2.8 Struktur leukoantosianidin ......................................................................... 12
2.9 Struktur antosianin ..................................................................................... 12
2.10 Struktur khalkon ......................................................................................... 13
2.11 Struktur auron ............................................................................................ 13
xii
DAFTAR LAMPIRAN
1 Identifikasi tumbuhan ................................................................................. 42

2 Gambar tanaman, daun, serbuk simplisia daun kelapa sawit ....................... 43
3 Bagan kerja penelitian ................................................................................. 44
4 Bagan fraksinasi cair-cair flavonoid dari ampas sisa
maserasi ........................................................................................................ 46
5 Bagan isolasi senyawa flavonoid secara preparatif ..................................... 47
6 Kromatogram hasil KKt satu arah fraksi etil asetat .................................... 48
7 Bagan uji kemurnian hasil dari isolasi fraksi etil asetat .............................. 52
8 Kromatogram hasil KKt preparatif ............................................................. 53
9 Kromatogram hasil KKt satu arah .............................................................. 54
10 Kromatogram hasil KKt dua arah ............................................................... 55
11 Spektrum UV isolat dalam metanol ............................................................ 56
12 Spektrum UV isolat dalam metanol setelah penambahan
NaOH .......................................................................................................... 57
NaOH setelah 5 menit ................................................................................. 58
AlCl3 ............................................................................................................ 59
AlCl3/HCl .................................................................................................... 60
natrium asetat .............................................................................................. 61
natrium asetat 5 menit ................................................................................. 62
natrium asetat/asam borat ........................................................................... 63
19 Alat spektrofotomer UV dan Alat flourosensi ............................................ 64
xiii
BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Indonesia merupakan negara dengan kekayaan alam yang melimpah,
hampir segala jenis tumbuhan dapat tumbuh di wilayah negara ini. Salah satu
tumbuhan yang digunakan oleh masyarakat adalah daun kelapa sawit (Elaeis
guineenis Jacq.). Hampir seluruh bagian tanamannya memiliki manfaat yang
dapat digunakan untuk pengobatan. Dalam berbagai kalangan masyarakat, salah
satunya di Afrika Selatan daun kelapa sawit digunakan untuk pengobatan infeksi
kulit. Tanaman kelapa sawit merupakan tumbuhan tropis golongan plasma yang
termasuk tanaman tahunan (Masykur, 2013). Sekitar 90% perkebunan kelapa
sawit di Indonesia berada di pulau Sumatera dan Kalimantan.
Daun kelapa sawit mengandung senyawa-senyawa terpenoid, steroid,
alkaloid, flavonoid, glikosida, tanin dan saponin (Sashidaran dkk., 2010;
Nainggolan dkk., 2014). Hasil penelitian sebelumnya menyebutkan bahwa daun
kelapa sawit mempunyai khasiat penyembuhan luka sayat (Syahmi, 2010 ;
Hasibuan dkk., 2014), antidiabetes (Rosalina dkk., 2011), antihipertensi (Jaffri
dkk., 2010), antiinflamasi (Anyanji dkk., 2013), antimikroba (Chong dkk., 2008),
antioksidan (Nainggolan dkk., 2014) dan efek kardiovaskuler (Juliana dkk., 2011 ;
Jaffri dkk., 2010).
Flavonoid merupakan salah satu golongan metabolit sekunder yang
dihasilkan oleh tanaman dan termasuk dalam kelompok polifenol (Banjarnahor
dkk., 2014). Flavonoid merupakan kandungan khas tumbuhan hijau dan
merupakan salah satu senyawa aktif yang menjadi bahan obat. Senyawa
1
flavonoid memiliki aktivitas sebagai antioksidan, anti aging (Vanessa dkk., 2014 ;
Zuraida dkk., 2017), antiinflamasi, antivirus (Qinghu wang dkk., 2016),
antikanker, antidiabetes (Arifin dkk., 2018 ; Marzounk dkk., 2016), antibakteri
(Sriningsih dkk., 2008 ; Arifin dkk., 2018), mencengah keropos tulang dan
sebagai antibiotik (Waji dan Sugrani, 2009).
Senyawa flavonoid umumnya diisolasi dengan metode ekstraksi yakni
dengan cara maserasi menggunakan pelarut yang dapat melarutkan flavonoid,
umumnya larut dalam pelarut polar (Monache, 1996). Flavonoid merupakan
senyawa polar maka flavonoid akan larut dalam pelarut polar seperti etanol,
metanol, butanol, dimetilformamida (Arifin dkk., 2018).
Pada penelitian ini terlebih dahulu dilakukan pembebasan lemak dan
senyawa yang bersifat polar dengan menggunakan pelarut n-heksan yang juga
bersifat polar. Senyawa polar di fraksinasi menggunakan etil asetat karena etil
asetat dapat menarik senyawa yang bersifat polar dan flavonoid bersifat polar.
Penelitian sebelumnya diperoleh hasil skirining fitokimia senyawa
flavonoid, alkaloid, glikosida, tanin, triterpenoid/steroid, saponin. Hasil
karakterisasi diperoleh kadar air 6,64%, kadar sari larut dalam air 13,44%, kadar
sari larut dalam etanol 16,86%, kadar abu total 3,74%, kadar abu tidak larut asam
0,76% (Abdy, 2012). Berdasarkan uraian di atas, maka dilakukan isolasi flavonoid
dari fraksi etil asetat daun kelapa sawit, dengan cara kromatografi kertas
preparatif (KKt) kemudian hasil isolat dikarakterisasi secara spektrofotometri UV
menggunakan pereaksi geser.
1.2 Perumusan Masalah
Berdasarkan uraian di atas, maka perumusan masalah penelitian adalah :
2
a) Apakah golongan senyawa flavonoid dari fraksi etil asetat daun kelapa sawit
dapat dipisahkan dengan cara kromatografi kertas (KKt) preparatif ?
b) Apakah golongan senyawa flavonoid hasil isolasi dapat dikarakterisasi secara
spektrofotometri UV menggunakan pereaksi geser?
1.3 Hipotesis
Berdasarkan perumusan masalah di atas, maka hipotesis dari penelitian ini

adalah sebagai berikut:
1. Golongan senyawa flavonoid dari fraksi etil asetat daun kelapa sawit dapat
dipisahkan dengan cara kromatografi kertas (KKt) preparatif.
2. Hasil isolat golongan senyawa flavonoid dapat dikarakterisasi secara
spektrofotometri UV menggunakan pereaksi geser.
1.4 Tujuan Penelitian
Tujuan penelitian ini adalah sebagai berikut :

a) Untuk memisahkan golongan senyawa flavonoid yang terkandung dalam daun
kelapa sawit.
b) Untuk mengidentifikasi golongan senyawa flavonoid hasil isolat secara
spektrofotometri UV menggunakan pereaksi geser.
1.5 Manfaat Penelitian
Manfaat penelitian ini adalah sebagai berikut :
Penelitian ini diharapkan dapat manambah informasi dan wawasan masyarakat
terhadap pengetahuan kandungan dan manfaat daun kelapa sawit.
3
1.6 Kerangka Pikir Penelitian
Adapun kerangka pikir penelitian ini dapat dilihat pada Gambar 1.
Simplisia daun Golongan Skirining fitokimia

kelapa sawit metabolit 1. Glikosida
sekunder 2. Flavonoid
Dibebas lemakkan Ampas Direfluks
Filtrat hasil
refluks
Fraksinasi
cair-cair
Identifikasi
flavonoid
Uji kemurnian
isolat
Gambar 1. Kerangka pikir penelitian
4
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Uraian Tanaman Kelapa Sawit
2.1.1 Sistematika tanaman
Sistematika tanaman kelapa sawit menurut Herbarium Medanense (2019)
adalah sebagai berikut :
Kingdom : Plantae
Divisi : Spermatophyta
Subdivisio : Angiospermae
Kelas : Monocotyledoneae
Ordo : Arecales
Famili : Arecaceae
Genus : Elaeis
Spesies : Elaeis guineensis Jacq.
Nama Lokal : Kelapa sawit
2.1.2 Nama daerah
Kelapa sawit memiliki nama daerah seperti American Oil Palm (Brazil),
oelpalame (Jerman), oil palm (Inggris), kelapa bali (Melayu), salak minyak
(Sunda) dan kelapa sawit (Jawa) (Heyne, 1987).
2.1.3 Morfologi tanaman
Kelapa sawit merupakan tanaman monokotil, yaitu batangnya tidak
mempunyai kambium dan umumnya tidak bercabang. Batang berfungsi sebagai
penyangga tajuk serta menyimpan dan mengangkut bahan makanan. Pertumbuhan
batang, yaitu sekitar 5-10 cm/tahun. Batang cenderung tidak bertambah tinggi
5
setelah tanaman mencapai usia 15 tahun. Tanaman kelapa sawit berakar serabut.
Akarnya sangat kuat karena tumbuh ke bawah dan ke samping. Akar tanaman
kelapa sawit berfungsi sebagai penyerap unsur hara dalam tanah dan respirasi
tanaman. Daun kelapa sawit mirip kelapa yaitu membentuk susunan daun
majemuk, bersirip genap dan bertulang sejajar. Daun-daun membentuk suatu
pelepah dengan jumlah anak daun di setiap pelepah berkisar antara 250-400 helai.
Daun kelapa sawit yang sehat dan segar berwarna hijau tua (Sambanthamurthi,
2000).
2.1.4 Kandungan kimia
Daun kelapa sawit mengandung senyawa tanin, alkaloid, glikosida,
steroid, saponin, triterpenoid dan flavonoid (Bete’e, 2013).
2.1.5 Khasiat tanaman
Daun kelapa sawit mempunyai khasiat penyembuhan luka sayat (Syahmi,
2010 ; Hasibuan dkk., 2014), antidiabetes (Rosalina dkk., 2011), antihipertensi
(Jaffri dkk., 2010), antiinflamasi (Anyanji dkk., 2013), antimikroba (Chong dkk.,
2008), antioksidan (Nainggolan dkk., 2014) dan efek kardiovaskuler (Juliana dkk.,
2011 ; Jaffri dkk., 2010).
2.2 Senyawa Flavonoid
Flavonoid adalah suatu kelompok senyawa fenol terbesar yang ditemukan
di alam dan yang memiliki potensial sebagai antioksidan serta bioaktifitas sebagai
obat. Senyawa flavonoid sebenarnya terdapat pada semua bagian tumbuhan
termasuk daun, akar, kayu, kulit, tepung sari, bunga, buah, dan biji. Kebanyakan
flavonoid ini berada di dalam tumbuh-tumbuhan, kecuali alga. Namun ada juga
yang terdapat pada hewan, misalnya dalam kelenjar berang-berang dan sekresi
6
lebah, dalam sayap kupu - kupu dengan anggapan bahwa flavonoid berasal dari
tumbuh-tumbuhan yang menjadi makanan hewan tersebut dan tidak dibiosintesis
di dalam tubuh mereka. Penyebaran jenis flavonoid pada golongan tumbuhan
yang tersebar yaitu angiospermae, chlorophyta, fungi, bryophyte (Markham,
1988).
Senyawa flavonoid terdapat dalam semua tumbuhan hijau sehingga dapat
ditemukan pada setiap ekstrak tumbuhan. Flavonoid adalah kelas senyawa yang
tersebar secara luas di alam. Hingga saat ini, lebih dari 9000 senyawa flavonoid
telah dilaporkan, dan jumlah kebutuhan flavonoid bervariasi antara 20 mg dan 500
mg, terutama terdapat dalam suplemen makanan termasuk teh, anggur merah,
apel, bawang dan tomat. Flavonoid ditemukan pada tanaman, yang berkontribusi
memproduksi pigmen berwarna kuning, merah, orange, biru, dan warna ungu dari
buah, bunga, dan daun (Hui Cao dkk., 2015).
Sebagian besar flavonoid yang terdapat pada tumbuhan terikat pada
molekul gula sebagai glikosida dan dalam bentuk campuran, jarang sekali
dijumpai berupa senyawa flavonoid tunggal. Disamping itu sering ditemukan
campuran yang terdiri dari flavonoid yang berbeda kelas. Misalnya antosianin
dalam mahkota bunga yang berwarna merah, ungu dan biru. Pigmen ini juga
terdapat di berbagai bagian tumbuhan lain, misalnya buah tertentu, batang, daun,
dan bahkan akar. Sering flavonoid terikat di sel epidermis. Flavonoid dalam
tumbuhan mempunyai fungsi sebagai pigmen warna. Fungsi senyawa flavonoid
dalam tubuh manusia sebagai antioksidan, antibakteri, dan anti inflamasi sehingga
baik untuk pencegahan kanker. Manfaat lain dari flavonoida ini adalah untuk
meningkatkan efektivitas vitamin C, antiinflamasi, antibakteri, antidiabetes,
diuretik dan sebagai antibiotik (Markham, 1988).
7
Flavonoid dalam bentuk terglikosilasi atau metilasi pada tanaman,
struktur-strukturnya lebih stabil, mudah didapatkan serta mudah dalam
bioaktivitasnya. Flavonoid terglikosilasi telah didapatkan dengan peralatan
biologi, glycosyltransferase, di mana enzim mengkatalisis untuk menempelkan
molekul gula ke dalam aglycon yang menghasilkan glikosida (Gantt dkk., 2011;
Thuan dkk., 2013).
Flavonoid merupakan senyawa polar karena memiliki sejumlah gugus
hidroksil yang tidak tersubstitusi. Pelarut polar seperti etanol, metanol, etil asetat,
atau campuran dari pelarut tersebut dapat digunakan untuk mengekstraksi
flavonoid dari jaringan tumbuhan (Rijke, 2005).
2.2.1 Struktur Dasar Senyawa Flavonoid
Flavonoid adalah senyawa polifenol yang mempunyai 15 atom karbon
pada struktur dasarnya yang tersusun dalam konfigurasi C6-C3-C6, artinya
kerangka karbonnya terdiri atas dua gugus C6 (cincin benzena tersubstitusi)
disambungkan oleh rantai alifatik tiga karbon (Tiang-Yang dkk., 2018).
Gambar 2. Kerangka dasar flavonoid
Flavonoid sering terdapat sebagai glikosida. Golongan terbesar flavonoid
mempunyai cincin piran yang menghubungkan rantai tiga karbon dengan cincin
benzen (Robinson, 1995). Setiap cincin diberi tanda: A, B dan C; atom karbon
dinomori dengan angka biasa pada cincin A dan C, serta angka beraksen untuk
cincin B (Markham, 1988). Sistem penomoran untuk turunan flavonoid adalah
sebagai berikut :
8
Gambar 2.1. Sistem penomoran flavonoid
2.2.2 Klasifikasi Senyawa Flavonoid
Menurut Robinson (1995), flavonoid dapat dikelompokkan berdasarkan
keragaman pada rantai C3 yaitu:
1. Flavonol
Flavonol paling sering terdapat sebagai glikosida, biasanya 3-glikosida,
dan aglikon flavonol yang umum yaitu kamferol, kuersetin, dan mirisetin yang
berkhasiat sebagai antioksidan dan anti inflamasi. Flavonol lain yang terdapat
di alam bebas kebanyakan merupakan variasi struktur sederhana dari flavonol.
Larutan flavonol dalam suasana basa dioksidasi oleh udara tetapi tidak begitu
cepat sehingga penggunaan basa pada pengerjaannya masih dapat dilakukan
(Robinson, 1995).
Gambar 2.2 Struktur flavonol
2. Flavon
Flavon berbeda dengan flavonol dimana pada flavon tidak terdapat
gugusan 3-hidroksi. Hal ini mempengaruhi serapan UV-nya, gerakan
kromatografi, serta reaksi warnanya. Flavon yang paling umum dijumpai
adalah apigenin dan luteolin. Luteolin merupakan zat warna yang pertama kali
9
dipakai di Eropa. Jenis yang paling umum adalah 7-glukosida dan terdapat juga
flavon yang terikat pada gula melalui ikatan karbon-karbon. Contohnya luteolin
8-C-glikosida. Flavon dianggap sebagai induk dalam nomenklatur kelompok
senyawa flavonoida (Robinson, 1995).
Gambar 2.3 Struktur flavon
3. Isoflavon
Isoflavon merupakan isomer flavon, tetapi jumlahnya sangat sedikit dan
sebagai fitoaleksin yaitu senyawa pelindung yang terbentuk dalam tumbuhan
sebagai pertahanan terhadap serangan penyakit. Isoflavon sukar dicirikan
karena reaksinya tidak khas dengan pereaksi warna manapun tetapi kebanyakan
tampak sebagai bercak lembayung yang pudar dengan amonia berubah menjadi
coklat (Robinson, 1995).
Gambar 2.4 Struktur isoflavon
4. Flavanon
Flavanon terdistribusi luas di alam. Flavanon terdapat di dalam kayu,
daun dan bunga. Flavanon glikosida merupakan konstituen utama dari tanaman
genus prenus dan buah jeruk, dua glikosida yang paling lazim neringenin dan
hesperitin, terdapat dalam buah anggur dan jeruk (Robinson, 1995).
10
Gambar 2.5 Struktur flavanon
5. Flavanonol
Senyawa ini berkhasiat sebagai antioksidan dan hanya terdapat sedikit
sekali jika dibandingkan dengan flavonoida lain. Flavanonol merupakan
flavonoid yang kurang dikenal dan tidak diketahui terdapat sebagai glikosida .
Sebagian besar senyawa ini diabaikan karena konsentrasinya rendah dan tidak
berwarna (Robinson, 1995).
Gambar 2.6 Struktur flavanonol
6. Katekin
Katekin terdapat pada seluruh dunia tumbuhan, terutama pada
tumbuhan berkayu. Senyawa ini mudah diperoleh dalam jumlah besar dari
ekstrak kental Uncaria gambir dan daun teh kering yang mengandung kira-kira
51% senyawa ini. Katekin berkhasiat sebagai antioksidan (Robinson, 1995).
Gambar 2.7 Struktur katekin
11
7. Leukoantosianidin
Leukoantosianidin merupakan senyawa tan warna, terutama terdapat
pada tumbuhan berkayu. Senyawa ini jarang terdapat sebagai glikosida,
contohnya melaksidin, apiferol (Robinson, 1995).
Gambar 2.8 Struktur leukoantosianidin
8. Antosianin
Antosianin merupakan zat pigmen yang paling penting di alam dan
tersebar luas dalam tumbuhan. Pigmen yang berwarna terang dan larut dalam
air ini memberi warna merah jambu, merah marak, ungu, dan biru dalam daun,
bunga, dan buah pada tumbuhan tinggi. Secara kimia semua antosianin
merupakan turunan suatu struktur aromatik tunggal yaitu sianidin, dan
semuanya terbentuk dari pigmen sianidin ini dengan penambahan atau
pengurangan gugus hidroksil atau dengan metilasi atau glikosilasi (Robinson,
1995).
Gambar 2.9 Struktur antosianin
9. Khalkon
Khalkon adalah pigmen fenol kuning yang berwarna coklat kuat dengan
sinar UV bila dikromatografi kertas. Aglikon khalkon dapat dibedakan dari
12
glikosidanya, karena hanya pigmen dalam bentuk glikosida yang dapat
bergerak pada kromatografi kertas dalam pengembang air (Robinson, 1995).
Gambar 2.10 Struktur khalkon
10. Auron
Auron berupa pigmen kuning emas yang terdapat dalam bunga tertentu
dan briofita. Dalam larutan basa senyawa ini berwarna merah ros dan tampak
pada kromatografi kertas berupa bercak kuning, dengan sinar ultraviolet warna
kuning kuat berubah menjadi merah jingga bila diberi uap amonia (Robinson,
1995).
Gambar 2.11 Struktur auron
Flavonoid umumnya terdapat dalam tumbuhan, terikat pada gula
sebagai glikosida. Aglikon flavonoid mungkin saja terdapat dalam beberapa
bentuk kombinasi glikosida dalam satu tumbuhan, sehingga dalam
menganalisis flavonoid biasanya lebih baik bila kita memeriksa aglikon yang
terdapat dalam ekstrak tumbuhan yang telah dihidrolisis daripada mengamati
bentuk glikosidanya yang rumit (Harborne, 1987). Flavonoid merupakan
golongan terbesar senyawa fenol alam dan merupakan senyawa polar karena
13
mempunyai sejumlah gugus hidroksil yang tak tersulih atau suatu gula,
sehingga akan larut dalam pelarut polar seperti etanol, metanol, butanol, aseton,
dimetilsulfoksida, dimetilformamida, dan air. Adanya gula yang terikat pada
flavonoid cenderung menyebabkan flavonoid lebih mudah larut dalam air dan
dengan demikian campuran pelarut di atas dengan air merupakan pelarut yang
lebih baik untuk glikosida. Sebaliknya, aglikon yang kurang polar seperti
isoflavon, flavanon, dan flavon serta flavonol yang termetoksilasi cenderung
lebih mudah larut dalam pelarut seperti eter dan kloroform (Markham, 1988).
Analisa flavonoid lebih baik dengan memeriksa aglikon yang terdapat dalam
ekstrak tumbuhan yang telah dihidrolisis sebelum memperhatikan kerumitan
glikosida yang ada dalam ekstrak asal (Harborne, 1987).
2.3 Ekstraksi
Ekstraksi adalah pemisahan bagian-bagian jaringan tanaman dan hewan
yang aktif menggunakan pelarut yang sesuai. Teknik ekstraksi ini digunakan
untuk memisahkan kandungan kimia yang terdapat dalam tanaman. Ekstraksi
istilah yang digunakan secara farmasi, melibatkan pemisahan bagian aktif
tumbuhan atau jaringan hewan dari komponen aktif dengan menggunakan pelarut
sesuai dalam standar prosedur ekstraksi. Pada proses ekstraksi dilakukan
pengeringan bahan-bahan terlebih dahulu kemudian dihaluskan pada derajat
kehalusan tertentu (Handa dkk., 2018).
Ekstraksi adalah kegiatan penarikan kandungan kimia yang dapat larut
sehingga terpisah dari bahan yang tidak dapat larut dengan menggunakan suatu
pelarut cair. Senyawa aktif yang terdapat dalam berbagai simplisia dapat
digolongkan kedalam golongan minyak atsiri, alkaloid, flavonoid, dan lain-lain.
14
Senyawa aktif yang dikandung simplisia akan mempermudah dalam pemilihan
pelarut dengan cara ekstraksi yang tepat. Tujuan utama ekstraksi ini adalah untuk
mendapatkan atau memisahkan sebanyak mungkin zat-zat yang memiliki khasiat
pengobatan (Depkes, 2000).
Beberapa metode ekstraksi dengan menggunakan pelarut (Depkes, 2000)
yaitu:
A. Cara dingin
1. Maserasi
Maserasi istilah aslinya adalah macerare (bahasa Latin, artinya merendam)
: adalah sediaan cair yang dibuat dengan cara mengekstraksi bahan nabati yaitu
direndam menggunakan pelarut bukan air (pelarut nonpolar) atau setengah air,
misalnya etanol encer, selama periode waktu tertentu sesuai dengan aturan dalam
buku resmi kefarmasian (Depkes, 1995). Maserasi adalah proses penyarian
simplisia dengan cara perendaman menggunakan pelarut dengan sesekali
pengadukan pada temperatur kamar. Maserasi yang dilakukan pengadukan secara
terus menerus disebut maserasi kinetik sedangkan yang dilakukan pengulangan
penambahan pelarut setelah dilakukan penyaringan terhadap maserat pertama dan
seterusnya disebut remaserasi (Depkes, 2000).
2. Perkolasi
Perkolasi adalah proses penyarian simplisia dengan pelarut yang selalu
baru sampai terjadi penyarian sempurna yang umumnya dilakukan pada
temperatur kamar. Proses perkolasi terdiri dari tahap pelembaban bahan, tahap
perendaman antara, tahap perkolasi sebenarnya (penetesan/penampungan ekstrak)
terus menerus sampai diperoleh perkolat yang jumlahnya 1-5 kali jumlah bahan
yang diekstraksi (Depkes, 2000).
15
B. Cara panas
1. Refluks adalah proses penyarian simplisia dengan menggunakan alat pada
temperatur titik didihnya, selama waktu tertentu dan jumlah pelarut terbatas yang
relatif konstan dengan adanya pendingin balik (Depkes, 2000).
2. Digesti adalah proses penyarian dengan pengadukan kontinu pada temperatur
lebih tinggi dari temperatur ruangan, yaitu secara umum dilakukan pada
temperatur 40-50oC (Depkes, 2000).
3. Sokletasi adalah proses penyarian dengan menggunakan pelarut yang selalu
baru, dilakukan menggunakan alat soklet sehingga terjadi ekstraksi kontinu
dengan pelarut relatif konstan dengan adanya pendingin balik (Depkes, 2000).
4. Infundasi adalah proses penyarian dengan menggunakan pelarut air pada
tempratur 90oC (Depkes, 2000).
5. Dekoktasi adalah proses penyarian dengan menggunakan pelarut air pada
temperatur 900 C selama 30 menit (Depkes, 2000).
2.4 Fraksinasi
Fraksinasi merupakan proses pemisahan suatu prosedur untuk
memisahkan golongan senyawa kimia berdasarkan perbedaan tingkat
kepolarannya. Apabila pelarut bersifat polar maka senyawa yang terekstraksi akan
bersifat polar. Jika digunakan pelarut non polar misalnya n-heksana maka
senyawa yang terekstraksi bersifat non polar (Ibrahim, 2018).
2.5 Isolasi
Isolasi adalah suatu usaha bagaimana caranya memisahkan suatu senyawa
yang bercampur sehingga kita dapat memisahkan senyawa tunggal murni.
16
Tumbuhan mengandung ribuan senyawa metabolit primer dan senyawa metabolit
sekunder. Biasanya proses isolasi senyawa dari bahan alami digunakan untuk
mengisolasi senyawa metabolit sekunder, karena hasil isolasi dapat memberikan
manfaat bagi kehidupan manusia dan dapat digunakan sebagai bahan obat
(Harborne, 1987).
2.6 Kromatografi
Kromatografi adalah suatu metode pemisahan berdasarkan perbedaan
perpindahaan dari komponen-komponen senyawa diantara 2 fase yaitu fase diam
(dapat berupa zat cair atau zat padat) dan fase gerak (dapat berupa gas atau zat
cair). Jika fase tetap berubah zat padat maka cara tersebut dikenal sebagai
kromatografi serapan, jika zat cair dikenal sebagai kromatografi partisi,
dikarenakan rasa bergerak dapat berupa zat cair atau gas (sastrohamidjojo, 2007).
Kromatografi dapat dibedakan atas berbagai macam tergantung pada
pengelompokannya. Berdasarkan pada alat yang digunakan, kromatografi dapat
dibagi atas : kromatografi kertas (KKt), kromatografi lapis tipis (KLT),
kromatografi cair kinerja tinggi (KCKT) dan kromatografi gas (Gandjar, 2007).
Kromatrografi adalah metode pemeriksaan berdasarkan proses migrasi
dari komponen-komponen senyawa diantara dua fase yaitu fase diam dan fase
gerak. Fase gerak membawa zat terlarut melalui media sehingga terpisah dari zat
terlarut lainnya yang terelusi lebih awal atau lebih akhir. Umumnya zat terlarut
dibawa melalui media pemisah oleh aliran suatu pelarut berbentuk cairan atau gas.
Fase diam dapat bertindak sebagai penyerap, seperti alumina dan slika gel atau
dapat bertindak melarutkan zat terlarut sehingga terjadi partisi antara fase diam
dan fase gerak (Ditjen POM, 1995).
17
2.6.1 Kromatografi kertas
Kromatografi kertas merupakan salah satu kromatografi partisi dalam
bentuk planar yang konvensional. Teknik ini umumnya digunakan untuk
menjelaskan teknik kromatografi secara mudah, karena sistem kromatografinya
yang sangat sederhana. Pada prinsipnya kromatografi kertas mendasarkan proses
pemisahan senyawa-senyawa menurut interaksi partisi atau distribusi senyawa
pada fase diam (Rubiyanto, 2017).
Kromatografi kertas pada hakekatnya adalah KKt pada lapis tipis selulosa
atau kertas . Keuntungan utama KKt ialah kemudahan dan kesederhanaan pada
pelaksanaan pemisahan,yaitu hanya pada lembar kertas saring yang berlaku
sebagai medium pemisahan. Senyawa pada KKt biasanya dideteksi sebagai bercak
berwarna atau bercak berfluoresensi UV setelah direaksikan dengan penampak
bercak (Harborne, 1987). Keuntungan lain adalah jumlah flavonoid yang
diperlukan untuk analisis sangat sedikit (biasanya sekitar 0,1 mg) (Markham,
1988).
Kromatografi kertas merupakan kromatografi partisi dimana fase geraknya
adalah cair yang disokong oleh molekul-molekul selulosa dari kertas. Kertas yang
digunakan adalah kertas Whatman No.1 dan kertas yang lebih tebal Whatman No.
3 biasanya untuk pemisahan campuran dalam jumlah yang lebih besar karena
dapat menampung lebih banyak cuplikan (Sastrohamidjojo, 1991).
Hal-hal yang perlu diperhatikan pada saat melakukan pemisahan secara
KKt ( Sastrohamidjojo, 1985) :
1. Metode pemisahan (penarikan, penurunan atau mendatar).
2. Macam dari kertas.
3. Pemisahan dan pembuatan pelarut (fase gerak).
18
4. Kesetimbangan dalam bejana yang dipilih.
5. Pembuatan cuplikan.
6. Waktu pengembangan.
7. Metode deteksi dan identifikasi.
Fase diam pada KKt digunakan sehelai kertas dengan susunan serabut dan
tebal yang sesuai. Pemisahan dapat dilakukan menggunakan pelarut tunggal atau
menggunakan 2 pelarut yang tidak dapat bercampur, fase gerak merambat
perlahan-lahan melalui fase diam yang membungkus serabut kertas.
Fase gerak biasanya merupakan campuran yang terdiri atas 1 komponen
organik yang utama air dan berbagai tambahan seperti asam-asam, basa dengan
tujuan untuk memperbesar kelarutan dari beberapa senyawa atau untuk
mengurangi kelarutan (Sastrohamidjojo, 1985).
Menurut Gritter dkk (1991), Metode identifikasi yang paling mudah
berdasarkan pada kedudukan noda terhadap pelarut. Gerakan noda suatu senyawa
dalam pengembangan tertentu disebut bilangan Rf senyawa itu dalam
pengembangan tersebut. Bilangan Rf didefenisikan sebagai jarak yang ditempuh
oleh komponen dibagi dengan jarak yang ditempuh oleh fase gerak, kerena itu
bilangan Rf selalu lebih kecil dari 1,0. Identifikasi komponen senyawa terpisah
atau noda dinyatakan dengan harga Rf (Retardation factor). Harga Rf sangat
karakterisasi untuk senyawa tertentu pada eluen tertentu.
Faktor-faktor yang mempengaruhi harga Rf adalah struktur kimia senyawa
yang dipisahkan, suhu, kesetimbangan, sifat dari penyerapan, tebal dan kerataan
lapis penyerap, pelarut, kertas, sifat dari campuran, derajat kejenuhan dari bejana
pengembangan, teknik percobaan dan jumlah cuplikan yang digunakan
(Sastrohamidjojo, 1985).
19
2.7 Spektrofotometri
Spektrofotometri adalah ilmu yang mempelajari tentang penggunaan
spektrofotometer. Spektrofotometri merupakan pengukuran suatu interaksi antara
radiasi elektromagnetik dan molekul atau atom dari suatu zat kimia.
Spektrofotometer adalah alat yang digunakan untuk mengukur energi secara
relatif jika energi tersebut ditransmisikan, direfleksikan atau diemisikan sebagai
fungsi dari panjang gelombang (Sastrohamidjojo, 1985).
2.7.1 Spektrofotometri UV
Spektrum UV adalah suatu gambaran yang menyatakan hubungan antara
panjang gelombang atau frekuensi serapan terhadap intensitas serapan
(transmitansi atau adsorbansi). Sinar UV mempunyai panjang gelombang antara
200-400 nm. Serapan cahaya oleh molekul dalam daerah spektrum UV tergantung
pada struktur elektronik dari molekul yang bersangkutan. Spektrum UV dan sinar
tampak dari senyawa-senyawa organik berkaitan erat dengan transisi-transisi
antara dua tingkat energi elektronik molekul tersebut (Sastrohamidjojo, 1985).
Prinsip spektrofotometri UV adalah interaksi terjadi antara energi yang
berupa sinar monokromatis dari sumber sinar dengan materi yang berupa molekul.
Prinsip kerja spektrofotometri UV berdasarkan hukum LambertBeer, bila
cahaya/sinar monokromatis melalui suatu media (larutan), maka sebagian cahaya
tersebut diserap, sebagian dipantulkan dan sebagian lagi dipancarkan
(Dachriyanus, 2004).
Penyerapan radiasi UV terjadi melalui eksitasi elektron dalam suatu
molekul ke level energi yang lebih tinggi. Transisi ini terjadi dari keadaan
vibrasional bawah dalam keadaan elektronik dasar suatu molekul ke salah satu
level vibrasional apapun dalam keadaan elektronik tereksitasi. Transisi dari energi
20
keadaan dasar tunggal ke salah satu dari sejumlah keadaan tereksitasi memberikan
spektrum UV yang lebar (Gandjar dan Rohman, 2012).
Pelarut yang banyak digunakan untuk spektrofotometri sinar UV adalah
etanol 95% karena kebanyakan golongan senyawa larut dalam pelarut tersebut.
Alkohol absolut komersial harus dihindari karena mengandung benzena yang
dapat menyerap di daerah sinar UV pendek. Pelarut yang sering digunakan ialah
air, etanol, metanol, n-heksana, eter minyak bumi dan eter (Harborne, 1987).
2.7.2 Penggunaan pereaksi geser (shift reagent) dalam spektrofotometri UV
Spektrofotometri UV adalah cara yang paling berguna untuk
menganalisis struktur flavonoida, biasanya ditentukan dalam larutan dengan
pelarut metanol atau etanol. Spektrum senyawa flavonoida terdiri atas dua pita
absorbsi maksimum, yaitu pita I pada rentang 300-550 nm dan pita II pada 240-
285 nm. Pita I menunjukkan absorbsi sistem benzoil pada cincin A dan pita II
menunjukkan sistem sinamol pada pita B (Markham, 1988).
Kedudukan gugus hidroksi fenol bebas pada inti flavonoida dapat
ditentukan dengan menambahkan pereaksi geser ke dalam larutan cuplikan dan
mengamati puncak serapan yang terjadi (Markham, 1988). Langkah pertama
yang dilakukan dalam menafsirkan spektrum yaitu menentukan jenis
flavonoida dengan memperhatikan:
1. Bentuk umum spektrum dalam metanol
2. Panjang gelombang pita serapan
3. Data kromatografi kertas
Langkah kedua adalah memperhatikan arti perubahan spektrum yang
disebabkan oleh penembahan berbagai pereaksi geser (Markham, 1988).
21
BAB III
METODE PENELITIAN
3.1 Lokasi Penelitian
Penelitian dilakukan di Laboratorium Fitokimia dan Laboratorium
Penelitian Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara, Jl. Tri Dharma No. 5
Pintu 4 Kampus USU.
3.2 Metode Penelitian
Metode penelitian yang dilakukan adalah penelitian deskriptif
(eksplolatory riset). Penelitian meliputi pengumpulan dan penyiapan bahan
tumbuhan, pengolahan sampel, skirining fitokimia, simplisia dibebas lemakkan,
refluks ampas (sisa) daun kelapa sawit, pembuatan fraksi etil asetat, pemisahan
senyawa flavonoid dengan bantuan kromatografi kertas (KKt) preparatif, Isolat
yang diperoleh dikarakterisasi secara spektrofotometri UV menggunakan pereaksi
geser.
3.3 Alat dan Bahan
3.3.1 Alat
Alat yang digunakan dalam penelitian ini meliputi alat-alat gelas (Iwaki
Pyrex), bejana, blender (Philips), hair dryer (Maspion), lemari pengering, neraca
analitik (Vibra AJ), neraca kasar (Homeline), oven listrik (Memmert), Penangas
Air (Yenaco), rotary evaporator (Buchi 461), seperangkat alat kromatografi kertas
(KKt), seperangkat alat refluks (Pyrex), alat flourosensi (Camag),
spektrofotometer ultraviolet (shimadzu).
22
3.3.2 Bahan
Sampel yang digunakan adalah daun kelapa sawit (Elaeis guineensis Jacq.)
bahan yang digunakan kecuali dinyatakan lain adalah bahan yang berkualitas pro
analisa yaitu: air suling bebas CO2 aluminium (III) klorida, amil alkohol,
ammonium, asam nitrat, asam asetat glacial, asam klorida pekat, asam sulfat
pekat, aquades, besi (III) klorida 10%, besi (III) klorida 5%, etil asetat, etanol,
kertas Whatman No. 1, kertas saring, kloroform, isopropanol, metanol, natrium
hidroksida, n-heksan, natrium hidroksida, serbuk magnesium, serbuk natrium
asetat, serbuk asam borat dan timbal (II) asetat, α-naftol.
3.4 Pembuatan Pereaksi
Pembuatan pereaksi di bawah ini menurut Dirjen POM RI, 1995.
3.4.1 Pereaksi Molish
Sebanyak 3 g α-naftol dilarutkan dalam asam nitrat 0,5 N secukupnya
hingga diperoleh larutan 100 ml (Depkes RI, 1995).
3.4.2 Pereaksi Natrium Hidroksida 2 N
Sebanyak 8 g natrium hidroksida dilarutkan dalam air suling hingga
diperoleh 100 ml larutan (Depkes RI, 1995).
3.4.3 Pereaksi Asam Klorida 2 N
Sebanyak 17 ml asam klorida pekat diencerkan dengan air suling hingga
3.4.4 Pereaksi Asam Sulfat 2 N
Sebanyak 5,5 ml asam sulfat pekat diencerkan dengan air suling hingga
23
3.4.5 Pereaksi Besi (III) Klorida 10%
Sebanyak 10 g besi (III) klorida dilarutkan dalam air suling hingga
diperoleh 100 ml larutan kemudian disaring (Depkes RI, 1995).
3.4.6 Pereaksi Timbal (II) Asetat 0,4 M
Sebanyak 15,17 g timbal (II) asetat dilarutkan dengan air suling bebas
CO2 hingga diperoleh 100 ml larutan (Depkes RI, 1995).
3.5 Pengumpulan dan Pengolahan Sampel
3.5.1 Pengumpulan sampel
Pengambilan bahan tanaman dilakukan secara purposif yaitu tanpa
membandingkan dengan tanaman yang sama dari daerah lain. Bahan tanaman
yang digunakan adalah daun kelapa sawit (Elaeis guineensis Jacq.) daun diambil
dari perkebunan Pusat Penelitian Kelapa Sawit (PPKS) di Sei pancur Tanjung
Morawa, Medan, Sumatera Utara.
3.5.2 Identifikasi sampel
Determinasi bahan tanaman daun kelapa sawit (Elaeis guineensis Jacq.)
dilakukan di Herbarium Medanense (MEDA) Fakultas Matematika dan Ilmu
Pengetahuan Alam (FMIPA) Universitas Sumatera Utara, Jalan Bioteknologi
No.1 Kampus USU.
3.6 Pengolahan Sampel
Daun kelapa sawit di kumpulkan kemudian dibuang yang tidak perlu,
kemudian dibersihkan, dicuci pada air bersih atau mengalir, dirajang dan
ditimbang. Setelah itu dikeringkan dengan diangin anginkan pada suhu kamar dan
kembali dilemari pengering selama 5 hari. Sampel dinyatakan kering bila diremas
24
akan rapuh, kemudian sampel dihaluskan atau diserbukkan menggunakan blender
dan ditimbang, selanjutnya disimpan dalam wadah plastik yang bersih dan
tertutup rapat.
3.7 Skrining Fitokimia Simplisia Daun Kelapa Sawit
Skrining fitokimia yang dilakukan terhadap serbuk simplisia daun kelapa
sawit meliputi pemeriksaan senyawa glikosida dan flavonoid.
3.7.1 Pemeriksaan glikosida
Serbuk simplisia ditimbang sebanyak 3 g kemudian disari 30 ml campuran
7 bagian volume etanol 96% dan 3 bagian volume air suling ditambahkan dengan
10 ml asam klorida 2 N. Direfluks selama 30 menit, didinginkan dan disaring.
Diambil 20 ml filtrat, ditambahkan 25 ml air suling dan 25 ml timbal (II) asetat
0,4 M lalu dikocok selama 5 menit dan disaring. Filtrat disari dengan 20 ml
campuran 3 bagian kloroform dan 2 isopropanol dilakukan berulang sebanyak 3
kali.
Kumpulan sari air diuapkan pada temperatur tidak lebih dari 500C. Sisanya
dilarutkan dalam 2 ml metanol. Larutan sisa digunakan untuk percobaan berikut,
yaitu 0,1 ml larutan percobaan dimasukkan ke dalam tabung reaksi, diuapkan di
penangas air. Sisa filtrat dilarutkan dalam 2 ml air suling dan 5 tetes pereaksi
Molisch kemudian secara perlahan ditambahkan 2 ml asam sulfat pekat. Glikosida
pada tumbuhan dikatakan positif jika terbentuk cincin ungu (Depkes, RI., 1995).
3.7.2 Pemeriksaan flavonoid
Sebanyak 10 g serbuk simplisia kemudian ditambahkan 10 ml air panas,
didihkan selama 5 menit dan disaring dalam keadaan panas, filtrat yang diperoleh
kemudian diambil 5 ml lalu ditambahkan 0,1 gram serbuk Mg dan 1 ml asam
25
klorida pekat dan 2 ml amil alkohol, dikocok dan dibiarkan memisah. Flavonoid
positif jika terjadi warna merah, kuning, jingga pada lapisan amil alkohol
(Farnsworth, 1966).
3.8 Proses Pembebasan Lemak (Deffating) Simplisia Daun Kelapa Sawit
Proses Pembebasan Lemak (Deffating) dengan menggunakan pelarut n-
heksan. Sebanyak 500 g serbuk simplisia daun kelapa sawit dimasukkan kedalam
wadah gelas gelap, ditambahkan pelarut n-heksan sampai serbuk terendam
sempurna, ditutup dan biarkan selama 2 hari terlindung dari cahaya sambil sering
diaduk, disaring sehingga diperoleh maserat I dan ampas. Ampas dimaserasi
kembali dengan n-heksan sampai terendam sempurna dan dibiarkan selama 2 hari.
Disaring dan diperoleh maserat II. Ampas dimaserasi kembali dengan n-heksan
sampai terendam sempurna dan biarkan selama 2 hari. Disaring dan diperoleh
maserat III. Seluruh maserat di gabung dan diuapkan di atas penangas air sampai
diperoleh ekstrak kental (Mabry, 1970).
3.9 Fraksinasi Cair-Cair Etil Asetat Senyawa Flavonoid
Ampas (sisa) hasil maserasi di angin-anginkan, kemudian direflkus
dengan HCl 2 N selama 5 jam. Selanjutnya disaring, diambil filtratnya
didinginkan dan dipekatkan. Kemudian filtrat di partisi dengan etil asetat dan
didiamkan sampai terbentuk dua lapisan yang sempurna, terbentuk fraksi etil
asetat dan fraksi sisa. Diambil fraksi etil asetat lalu dipekatkan diatas penangas air
sehingga diperoleh fraksi etil asetat.
26
3.10 Analisis Fraksi Etil Asetat Dengan Cara Kromatografi Kertas (KKt)
Fraksi etil asetat dilakukan KKt menggunakan 4 sistem fase gerak yaitu
BAW (4:1:5), asam asetat 5 %, asam asetat 10 %, HCl 1 % sebagai fase diam
adalah kertas Whatman No. 1 yang berukuran 2 x 20 cm.
Cara kerja :
Disiapkan kertas Whatman No. 1 diukur dan dipotong dengan ukuran 2 x
20 cm dan di sesuaikan dengan chamber yang digunakan. Chamber digunakan
dengan pelarut pengembang BAW (4:1:5), asam asetat 5 %, asam asetat 10 % dan
HCl 1%, kemudian fraksi etil asetat ditotolkan pada kertas Whatman No. 1,
kemudian dimasukkan ke dalam bejana kromatografi yang masing-masing telah
jenuh dengan uap fase gerak lalu dikembangkan sampai garis batas. Selanjutnya
kertas dikeluarkan dan dikeringkan. Hasilnya dilihat dibawah sinar lampu
ultraviolet panjang gelombang 366 nm (UV 366 nm) lalu disemprot dengan
penampak bercak uap ammonia (NH3)/ UV 366 nm, aluminium klorida (AlCl3)
5 %/ UV 366 nm, FeCl3/ UV 366 nm dan hitung harga Rf.
3.11 Pemisahan Senyawa Flavonoid Dari Fraksi Etil Asetat Dengan Cara
Kromatografi Kertas (KKt) Preparatif
Pemisahan senyawa flavonoid dari fraksi etil asetat dilakukan dengan
cara KKt preparatif menggunakan fase diam kertas Whatman No. 1 dan fase gerak
asam asetat 10 %.
Cara Kerja :
Fraksi etil asetat ditotolkan pada kertas Whatman No. 1 berupa pita,
kemudian dimasukkan ke dalam bejana kromatografi yang telah jenuh dengan
fase uap gerak, lalu dikembangkan sampai garis batas. Kertas diangkat dan
27
dikeringkan, kemudian diamati di bawah sinar lampu ultraviolet 366 nm. Bercak
yang sesuai diberi tanda dan digunting berupa potongan-potongan kecil, lalu
direndam dalam metanol selama 24 jam sambil sesekali dikocok kemudian
disaring. Proses perendaman diulangi hingga 3 kali sampai senyawa flavonoid
pada kertas Whatman No. 1 tersari sempurna, selanjutnya sari dikumpulkan dan
dipekatkan di udara terbuka.
3.12 Uji Kemurnian Isolat
Uji kemurnian terhadap isolat hasil isolasi dilakukan dengan cara :
1. Kromatografi kertas menggunakan berbagai fase gerak, yaitu : asam klorida
1%, asam asetat 5 %, asam asetat 15 % dan BAW (4:1:5) dan penampak bercak
uap ammonia dan sinar lampu UV 366 nm.
Cara kerja :
Isolat ditotolkan pada kertas Whatman No. 1, kemudian dimasukkan ke
dalam bejana kromatografi yang telah jenuh dengan uap fase gerak lalu
dikembangkan sampai garis batas. Selanjutnya kertas dikeluarkan dan
dikeringkan. Hasilnya dilihat dibawah sinar lampu UV 366 nm dan dideteksi
dengan penampak bercak uap ammonia / UV 366 nm.
2. Kromatografi kertas dua arah dengan memakai dua sistem fase gerak, fase
gerak 1 adalah HCl 1 % dan fase gerak II adalah asam asetat 10%.
Cara kerja :
Isolat ditotolkan pada kertas Whatman No.1, kemudian di masukkan ke
dalam bejana kromatografi yang telah jenuh dengan uap fase gerak pertama, alu
dikembangkan sampai garis batas. Kertas dikeluarkan dan dikeringkan
selanjutnya dikembangkan kembali dengan bejana kromatografi yang telah jenuh
28
dengan fase gerak kedua, kemudian kertas dikeluarkan dan dikeringkan. Hasilnya
dilihat dibawah sinar UV 366 nm dan dideteksi dengan uap ammonia/ UV 366
nm, warna bercak yang terjadi diamati dan di hitung harga Rf-nya.
3.13 Identifikasi Senyawa Hasil Isolat
Identifikasi senyawa hasil isolasi daun kelapa sawit (Elaeis guineensis
Jacq.) dilakukan dengan cara spektrofotometri ultraviolet menggunakan pereaksi
geser (shift reagent) (Markham, 1998).
Cara kerja :
1. Isolat dilarutkan dalam metanol lalu diukur spektrumnya, kemudian ditambah
tiga tetes natrium hidroksida 2 N, dicampur, lalu diukur spektrumnya.
Pengukuran spektrum diulang kembali setelah 5 menit.
2. Enam tetes pereaksi AlCl3 5 % ditambahkan kedalam larutan isolat, dicampur,
lalu diukur spektrumnya. Selanjutnya ditambahkan tiga tetes HCl 6 N,
dicampur dan diukur spektrumnya.
3. Larutan isolat ditambahkan serbuk natrium asetat lalu diukur spektrumnya.
Spektrumnya serbuk natrium asetat diukur kembali setelah 5 menit. Serbuk
asam asetat borat ditambahkan kedalam kuvet, dicampur, kemudian diukur
spektrumnya.
29
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Hasil Identifikasi Kelapa Sawit
Hasil identifikasi tumbuhan yang dilakukan oleh Herbarium Medanense
Universitas Sumatera Utara, Jalan Bioteknologi No.1 Kampus USU, disebutkan
bahwa tumbuhan yang digunakan adalah kelapa sawit Elaeis guineensis Jacq.,
suku Arecaceae. Hasil identifikasi dapat dilihat pada Lampiran 1, halaman 42.
4.2 Hasil Skirining Fitokimia
Tabel 4.1 Hasil skirining fitokimia serbuk simplisia daun kelapa sawit
Hasil
No Pemeriksaan
pemeriksaan
1 Glikosida +
2 Flavonoid +
Keterangan :
+ = mengandung golongan senyawa
- = tidak mengandung golongan senyawa
Berdasarkan tabel diatas dapat dilihat bahwa hasil skirining fitokimia
terhadap daun kelapa sawit diperoleh senyawa golongan glikosida, flavonoid.
Penambahan pereaksi molish dan asam sulfat pekat membentuk cincin berwarna
ungu yang menunjukkan adanya senyawa glikosida (Depkes, 1995). Penambahan
serbuk Mg dan asam klorida pekat menghasilkan larutan warna merah jingga dan
dengan penambahan amil alkohol, warna merah jingga tertarik pada lapisan amil
alkohol yang menunjukkan adanya flavonoid (Farnsworth, 1966).
30
4.3 Hasil Pembuatan Ekstrak n-Heksan Daun Kelapa Sawit
Hasil maserasi dari 500 g serbuk simplisia daun kelapa sawit
menggunakan pelarut n-heksan sebanyak 7500 militer diperoleh ekstrak n-heksan
sebanyak 4 gram.
4.4 Hasil Fraksinasi Etil asetat
Ampas sisa maserasi n-heksan direfluks dengan asam klorida 2 N.
Selanjutnya di partisi dengan etil asetat sampai etil asetat negatif dengan
penambahan FeCl3, diperoleh fraksi etil asetat.
4.5 Hasil Analisis Fraksi Etil Asetat Daun Kelapa Sawit Secara Kromatografi
Kertas (KKt)
Hasil analisis fraksi etil asetat dengan kromatografi kertas menggunakan
fase diam kertas Whatman No. 1 dan berbagai macam fase gerak yaitu HCl 1%,
diperoleh 5 noda, asam asetat 5% diperoleh 5 noda, asam asetat 10% diperoleh 14
noda dan BAW (4:1:5) diperoleh 11 noda dengan uap ammonia, FeCl3 dan AlCl3.
Hasil dapat dilihat pada Tabel 4.2 dan pola kromatogram dapat dilihat pada
Lampiran 6 halaman 48.
Tabel 4.2 Data hasil kromatogram fraksi etil asetat dari daun kelapa sawit.
No Fase Sebelum Setelah penyemprotan

gerak penyemprotan Harga Rf Harga Rf Harga Rf
Uap NH3/UV AlCl3/UV FeCl3/UV
1 HCl 0,15 0,61 -

1% Hijau Hijau -
kekuningan kekuningan
0,49
Hijau
Biru
0,73 Coklat
31
No Fase Harga Rf Setelah penyemprotan
gerak
Harga Rf Harga Rf Harga Rf
1 Asam 0,77 0,1 Merah jingga - -
asetat kuning 0,34 Biru -
5% kecoklatan 0,54 Hijau -
0,64 Hijau
0,79 Biru
No Fase Sebelum Setelah penyemprotan

gerak penyemprotan
1 Asam 0,67 kuning 0,1 Merah 0,23 Merah jingga 0,10 Merah
asetat kecoklatan jingga kecoklatan
10% 0,51 Biru
0,36 Hijau 0,33 Biru
kekuningan Hijau-0,63 biru
0,50 Hijau
0,57Hijau 0,78 coklat kekuningan
0,74 Hijau 0,58 Biru keunguan
0,85 Biru 0,67 Coklat

kekuningan
No Fase Sebelum
gerak penyemprotan Setelah penyemprotan
1 BAW 0,79 kuning 0,37 Ungu 0,40 Merah 0,18 Coklat

(4:1:5) kecoklatan 0,52 Biru kekuningan kekuningan
0,67 Hijau 0,60 Biru 0,36 Biru
0,72 Hijau keunguan 0,58 Hijau
0,88 Biru 0,70 Hijau
kekuningan
Keterangan : Fase diam = Kertas Whatman No. 1
Berdasarkan tabel di atas hasil analisis tabel fraksi Etil asetat secara
kromatografi kertas (KKt) satu arah dengan berbagai fase gerak yaitu HCl 1%,
asam asetat 5%, asam asetat 10% dan BAW (4:1:5) dengan penampak bercak uap
32
ammonia, AlCl3, dan FeCl3 menunjukkan bahwa fase gerak dan penampak bercak
terbaik yang memberikan pemisahan noda yang baik adalah Asam asetat 10% dan
uap ammonia. Pola kromatogram dapat dilihat pada Lampiran 6, halaman 48.
4.6 Hasil Isolasi Senyawa Flavonoid Secara Kromatografi Kertas Preparatif
Tabel 4.3 Hasil isolasi senyawa flavonoid secara kromatografi kertas preparatif
Fase gerak asam asetat 10%
Isolat Harga Rf Sinar UV
1 0,56 Merah jingga
2 0,68 Biru
3 0,93 Hijau kekuning
Keterangan : fase diam = kertas Whatman No.1.
Pemisahan dilakukan terhadap senyawa flavonoid dengan kromatografi
kertas (KKt) preparatif, untuk mendapatkan flavonoid dalam jumlah yang lebih
banyak menggunakan fase gerak asam asetat 10%, fase diam kertas Whatman
No.1 dan sebagai penampak bercak uap ammonia. Berdasarkan tabel diatas
menyatakan bahwa hasil KKt preparatif diperoleh 3 pita. Harga Rf dapat dilihat
pada Tabel 4.3 dan pola kromatogram dapat dilihat pada Lampiran 8, halaman 53.
4.7 Hasil Uji Kemurnian Isolat
4.7.1 Uji Kemurnian Isolat Secara Kromatografi Kertas Satu Arah
Isolat yang diperoleh selanjutnya dilakukan uji kemurnian isolat dengan
kromatografi kertas satu arah menggunakan fase diam kertas Whatman No. 1 dan
33
fase gerak HCl 1%, asam asetat 5%, asam asetat 10% dan BAW (4:1:5) hasilnya
menunjukkan satu bercak noda yang dianggap tunggal. Harga Rf dapat dilihat
pada Tabel 4.4 dan pola kromatogram dapat dilihat pada Lampiran 9 halaman 54.
Tabel 4.4 Data Hasil KKt satu arah isolat flavonoid
Fase gerak Fase gerak Fase gerak BAW

HCl 1% Asam asetat Asam asetat (4:1:5)
N
Isolat 5% 10%
o
Harga warna Harga warna Harga warna Harga warna
Rf Rf Rf Rf
1 2 0,55 Biru 0,47 Biru 0,61 Biru - -
muda muda muda
Keterangan : fase diam : kertas Whatman No.1
Penampak bercak : uap ammonia
4.7.2 Uji Kemurnian Isolat Secara Kromatografi Kertas Dua Arah
Isolat yang diperoleh selanjutnya dilakukan uji kemurnian isolat dengan
kromatografi kertas dua arah menggunakan fase diam kertas Whatman No. 1 dan
fase gerak I HCl 1% dan fase gerak II asam asetat 10%, hasilnya menunjukkan
satu bercak noda yang dianggap tunggal. Harga Rf dapat dilihat pada Tabel 4.5
dan pola kromatogram dapat dilihat pada Lampiran 10 halaman 55
Tabel 4.5 Data hasil KKt dua arah isolat flavonoid
Fase gerak I Fase gerak II

Isolat
HCl 1% Asam asetat 10%
2 0,59 biru muda 0,65 biru muda
keterangan : fase diam : kertas Whatman No.1
penampak bercak : uap ammonia
4.8 Karakterisasi Isolat Dengan Spektrofotometri UV Menggunakan

Pereaksi Geser (Shift Reagent).
Penafsiran spektrum UV dilakukan terhadap isolat dengan merujuk pada
Mabry, et al (1970) dan Markham (1988).
Penafsiran spektrum UV isolat adalah sebagai berikut:
34
1. Hasil spektrum isolat dalam metanol memberikan 1 pita dengan absorpsi
maksimum panjang gelombang yaitu 334,6 nm (pita I), ini menunjukkan
adanya absorbansi cincin B, tetapi pita II tidak muncul (Lampiran 11 halaman
56). Isolat 2 ini diduga senyawa golongan flavon yang memiliki panjang
gelombang maksimum yaitu 310-350 nm (pita I) dan 250-280 nm (pita II).
2. Hasil spektrum isolat dalam metanol dengan penambahan natrium hidroksida 2
N menunjukkan adanya absorpsi maksimum pada panjang gelombang 339,6
nm (pita I) dan 278,0 nm (pita II), ini menunjukkan adanya absorpsi pada
cincin B.
Spektrum diukur kembali setelah 5 menit, hasil menunjukkan tidak adanya
penguraian (Lampiran 13 halaman 58) adanya pergeseran batokromik pada pita
I 365,2 nm dengan pergeseran sebesar 30,6 nm yang menunjukkan di jumpai
adanya gugus 4’-OH.
3. Hasil spektrum isolat dalam metanol dengan penambahan aluminium klorida
5% b/v menunjukkan adanya absorpsi panjang gelombang pada pita I yaitu
338,8 nm bila dibandingkan dengan spektrum isolat dalam metanol terjadi
pergeseran batokromik sebesar 4,2 nm pada pita I (Lampiran 14 halaman 59).
Ini menunjukkan tidak ditemui adanya gugus 5-OH, dimana seharusnya terjadi
pergeseran sebesar 35-55 nm pada pita I.
Spektrum diukur dalam metanol setelah penambahan aluminium klorida 5%
b/v / HCl 6 N terjadi pergeseran batokromik sebesar 4,8 nm pada pita I bila
dibandingkan dengan spektrum isolat dalam metanol (Lampiran 15 halaman
60). Ini menunjukkan tidak ditemui adanya gugus orto-di OH pada cincin B,
dimana seharusnya terjadi pergeseran sebesar 30-40 nm pada pita I.
35
4. Hasil spektrum isolat dalam metanol dengan penambahan natrium asetat
menunjukkan adanya absorpsi panjang gelombang yaitu 334,8 pada pita I bila
dibandingkan dengan spektrum isolat dalam metanol terjadi pergeseran
batokromik sebesar 0,2 pada pita I (Lampiran 16 halaman 61). Ini
menunjukkan di temui adanya gugus 7-OH.
Spektrum diukur setelah 5 menit, hasil menunjukkan adanya tidak terjadi
penguraian pergeseran batokromik sebesar 4,6 nm pada pita I bila
dibandingkan dengan spektrum isolat dalam metanol. Ini menunjukkan ditemui
adanya gugus 7-OH.
5. Hasil spektrum isolat 2 dalam metanol dengan penambahan natrium asetat
/asam borat menunjukkan adanya absorpsi maksimum panjang gelombang
yaitu 339,2 nm pada pita I bila dibandingkan dengan spektrum isolat dalam
metanol terjadi pergeseran batokromik sebesar 4,6 nm (Lampiran 18 halaman
63). Ini menunjukkan tidak ditemui adanya gugus orto-diOH pada cincin B,
dimana seharusnya terjadi pergeseran sebesar 12-36 nm pada pita I.
Hasil spektrum diatas menunjukkan bahwa senyawa tersebut adalah golongan
flavon yang mempunyai gugus OH pada posisi 4’,7 dan berdasarkan liratur
yang ada bahwa golongan flavon memiliki gugus OH pada posisi 4’, 5 dan 7
tetapi pada penelitian ini gugus 5 OH tidak diperoleh karena gugus OH pada
posisi 5 bersifat tidak stabil.
Menurut markham (1988), flavonoid golongan flavon memiliki
panjang gelombang 310-350 nm pada pita I dan 250-280 nm pada pita II.
Berdasarkan hasil spektrum yang diperoleh diduga bahwa isolat yang
dikarakterisasi adalah flavonoid golongan flavon yang mempunyai panjang
gelombang maksimum 350 nm pada pita I dan 255 nm pada pita II.
36
Kesimpulan ini didukung dari tabel harga Rf beberapa golongan flavon
menurut Harborne (1987) dan markham (1988), salah satunya yaitu luteolin
yang mempunyai harga Rf = 0,66 dalam pengembang asam asetat dan
mempunyai panjang gelombang maksimum 350 nm pada pita I dan 255 nm
pada pita II.
Berikut adalah struktur kimia dari hasil yang diperoleh sebagai berikut :
Flavon 4’-7 OH
37
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
5.1 Kesimpulan
Berdasarkan hasil diperoleh dapat disimpulkan bahwa :
1. Fraksi etil asetat dari daun kelapa sawit dapat dipisahkan menggunakan
kromatografi kertas yang memberikan hasil terbaik adalah fase gerak asam
asetat 10% menghasilkan 1 isolat.
2. Hasil karakterisasi isolat secara spektrofotometri UV dengan menggunakan
pereaksi geser (shift reagent) diperoleh isolat diduga adalah senyawa golongan
flavon diperoleh gugus hidroksil pada posisi 4’ dan 7.
5.2 Saran
Disarankan kepada peneliti selanjutnya untuk melakukan penentuan
struktur kimia dari senyawa flavonoid hasil isolasi daun kelapa sawit.
38
DAFTAR PUSTAKA
Abdi, evy. 2012. Karakterisasi dan isolasi senyawa triterpenoid/ steroid daun
kelapa sawit (Elaeis guineensis Jacq.). Skiripsi. Medan : Fakultas Farmasi
USU. Halaman 30.
Ansel, H.C. 1989. Pengantar Bentuk Sediaan Farmasi. Diterjemahkan oleh
Farida Ibrahim, Asmanizar, Iis Aisyah, Edisi keempat. Jakarta: Universitas
Indonesia Press. Halaman 617.
Anonim. 1989. Materia Medika Indonesia Edisi IV. Direktorat Jendral
Pengawasan Obat Dan Makanan. Jakarta.
Anyanji,V.U., Mohamed, S., Zokti, J.A., dan Ado, M.A. 2013. Anti Inflammatory
Properties Of Oil Palm Leaf (Elaeis guineensis Jacq.) Extract in Aged
Rats. International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences. 5:
135-137.
Arifin Bustal., Sanusi Ibrahim. 2018. Struktur Bioaktivitas Dan Antioksidan
Flavonoid. Jurnah Zarah, Vol 6 No. 1. Universitas Andalas : Padang.
Halaman 21-29.
Banjarnahor, S., Artanti, N. 2014. Antioxidant Propertiest Of Flavonoid. Medical
Journal Of Indonesia, 23(4). Halaman 239-244.
Bate’e, E. 2013. Karakterisasi dan Isolasi Senyawa Triterpenoid/Steroid Daun
Kelapa Sawit (Elaeis guineensis Jacq.). Skripsi. Medan: Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara.
Chong, K.H., Zuraini, Z., Sasidharan, S., Kalnisha, Devi, P.V., Yoga, L., and
Ramanathan, S. 2008. Antimicrobial Activity of Elaeis guineensis Leaf.
Journal of Pharmacologyonline 3; 379-386.
Darnoko, D.D., Siahaan, E., Nuryanto, J., Elisabeth, L., Erningpraja, P.L., Tobing,
P.M., Naibaho dan Haryati, T. 2000. Teknologi Pengolahan Kelapa
Sawit dan Produk Turunannya. Seminar Nasional Sains dan
Teknologi. Pusat Penelitian Kelapa sawit. Medan.
Depkes RI. 1995. Materia Medika Indonesia. Jilid VI. Jakarta: Departemen
Kesehatan RI. Halaman 323-3.
Ditjen POM RI. 2000. Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat.
Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman1-11.
Duke, J.A., 2008. Medicinal Plants Of Latin America. New York: CRC press.
Halaman 289.
Farnsworth, N.R. 1966. Biological and Phytochemical Scrinning of Plants.
Journal of Pharmaceutical Science. 55(3). Halaman 262-264, 326.
Gandjar, I. G., dan Rohman, A. 2012. Kimia Farmasi Analisis. Cetakan Kedua.
Yogyakarta : Pustaka Pelajar. Halaman 323-324.
Gantt, R.W., Peltier-Pain, P., Thorson, J.S. 2011. Enzymatic Methods For Glyco
(Diversification/Randomization) Of Drugs And Small Molecules. Natural
Product Reports. 28, 1811–1853.
Gritter, R.J., Bobbitt, J .M., dan Schwarting, A.E. (1985). Introduction To
Chromatography. Penerjemah: Padmawinata, K. (19937. 1).Pengantar
Kromatografi. Edisi II.Bandung: Penerbit ITB. Halaman 107-146.
Gritter, R. J., J.M Bobbit dan A.E Schwarting, 1991. Pengantar Kromatografi.
Edisi Kedua. Terjemahan Padmawinata K. Penerbit ITB : Bandung.
Harborne, J. B. 1987. Metode Fitokimia. Jilid II. Penerbit ITB : Bandung.
39
Hasibuan, C. S. 2014. Skrining Fitokimia Dan Uji Efektivitas Sediaan Gel Ekstrak
Etanol Daun Kelapa Sawit (Elaeis guineensis Jacq.) Terhadap
Penyembuhan Luka sayat. Skripsi. Fakultas Farmasi. Universitas
Sumatera Utara.
Handa S.S., Khanuja S.P.S., Longo G., Rakesh D.D. 2008. Extraction
Technologies for Medicine and Aromatic Plants. ICS UNIDO.
Trieste.pp.21-22.
Hui Cao, Xiaoqing Chen, Amir, R. J., Jianbo, Xiao. 2015. Microbial
biotransformation of bioactive flavonoids. 33, (1), 214-223.
Heyne, K. 1987. Tumbuhan Berguna Indonesia. Jilid I. Jakarta : Yayasan Sarana
Wana Jaya. Halaman 465.
Ibrahim A.H. 2018. Fractination. Journal Of Pharmaceutical Sciences. Arab
University For science and technology. Vol 10, 3-14.
Jaffri, J. M., Suhaila, M., Rohimi, N., Intan, N., Ahmad, M., Musthapa, N., dan
Yazid, A. M. 2010. Antihypertensive and Cardiovascular Effects of
Catechin-Rich Oil Palm (Elaeis guineensis) Leaf Extract in Nitric Oxide
Deficient Rats. Journal Of Medicinal Food. 14(8): 775-783.
Juliana, M. 2011. Antihypertensi and Cardivascular Effect of Catechin-Rich Oil
Palm (Elaeis guineensis Jacq.) Leaf Extract in Nitric Oxide-Deficient
Rats. Journal of Medicinal Food., 14(7): 775-783
Mabry, T.J., Markham, K.R., dan Thomas, M.B. 1970. The Systematic
Identification of Flavonoid. 3-56, 165-171, Spinger-Verlag, New York,
Heidelberg, Berlin.
Markham, K.R. 1988. Cara mengidentifikasi flavonoida. Terjemahan Kokasih
Padmawinata. ITB Press : Bandung.
Marzouk, M.M. 2016. Flavonoids Constituens And Cytotoxic Of Eucaria
Hispanica (L) Druce Growing Wild in Egypt. Arabian Jurnal Chemistry,
9, 415.
Masykur. 2013. Pengembangan Industri Kelapa Sawit Sebagai Penghasil Energi
Bahan Bakar Alternatif Dan Mengurangi Pemanasan Global (Studi Di
Riau Sebagai Penghasil Kelapa Sawit Terbesar Di Indonesia). Malang :
Universitas Kanjuruan. Jurnal Revormasi Vol. 3 No.2.
Nainggolan, M. 2014. Prosiding Seminar Nasional Kimia. Halaman 206-209.
Qinghu, W., Jinmei, J., Nayintai, D., Narenchaoketu, H., Jingjing, H.,
Baiyinmuqier, B. (2016). Anti-In?ammatory Effects, Nuclear Magnetic
Resonance Identi?cation And High-Performance Liquid Chromatography
Isolation Of The Total ?avonoids From Artemisia Frigida, Journal Of
Food And Drug Analysis, 24, 385-391.
Rijke E. 2005. Trace-level Determination of Flavonoids and Their Conjugates
Application ti Plants of The Leguminosae Family [disetasi]. Amst erdam:
Universitas Amsterdam.
Robinson, T. 1955. Kandungan Organik Tumbuhan Obat Tinggi. Diterjemahkan
oleh Kosasih Padmawinata. Penerbit ITB : Bandung. Halaman 192.
Rohman, A. 2007. Kromatografi untuk Analisis Obat. Yogyakarta : Graha Ilmu.
Halaman 12, 45.
Sambanthamurthi R, Sundram K, Tan YA. 2000. Chemistry and biochemistry of
palm oil. Progress in Lipid Research. 39:507-558.
Sashidaran, S., Sharmini R., Vijayarathna S., Yogha Latha L., Vijenthi R., Amala
R., Amutha S. 2009. Antioxidant and Hepatoprotective Activity of
40
Methanolic Extract of Elaeis guineensis Jacq Leaf. Pharmacolgyonline
(3): 84-90.
Sasidharan, S., Nilawatyi, R., Xavier, R., Latha, L.Y., dan Amala, R. 2010.
Wound Healing Potential of Elaeis guineensis Jacq Leaves in an Infected
Albino Rat Model. Molecules. 15(5) : 3186-3199.
Sastrohamidjojo, H. 2007. Dasar-Dasar Spektrosfotokopi. Edisi kedua, cetakan
kedua. Penerbit Liberty : Jogjakarta.
Sastrohamidjojo, H. 1996. Sintesis Bahan Alam. Gadjah Mada University Press,
Yogyakarta.
Sastrohamidjojo, H. 1985. Kromatografi. Edisi I. Cetakan I Yogyakarta:
Penerbit Liberty. Halaman 29-31.
Sastrohamidjojo, H. 1991. Kromatografi. Edisi II. Liberty Press. Yogyakarta.
Sriningsih, Hapsoro Wisnu, Wahono Sumaryono, Agung Eru Wibowo, Caidir,
Firdayani, Susi Kusumaningrum, Pertamawati Kartakusuma. 2008.
Analisa Senyawa Golongan Flavonoid Herba Tempuyung. Fakultas
Farmasi Universitas Pancasila.
Silverstein, R. M., Bassler, G.C., dan Morrill, T. C. 1981. Spectrometric
Identification Of Organic Compounds. Fourth Edition. Penerjemah:
Hartomo A. J.,dan Purba, A. V. 1984. Penyidikan Spektrometrik
Senyawa Organik. Edisi keempat. Jakarta: Penerbit Erlangga. Halaman 67-
87.
Stahl, E. 1985. Analisis Obat Secara Kromatografi dan Makroskopi.
Diterjemahkan oleh Kokasih Padmawinata dan Iwang Soediro. Penerbit
ITB : Bandung.
Sjahid, R. Landyyun. 2008. Isolasi dan Identifikasi Flavonoid dari Daun
Dewandaru (Eugenia uniflora L.). Skripsi. Universitas Muhammadiyah.
Surakarta.
Syahmi, A.R.M., Vijayarantha S., Sashidaran S., Mansor, S.M. 2010.
Standardization of Elaeis guineensis With Respect to Authenticity,
Assay and Brine Shrimp Lethality of Elaeis guineensis Jacq., (oil palm
leaf) methanol extract. Molecules. Vol. 15.No.8118121.
Tian-yang., Wang., Qing Li., Kai-shun Bi. 2018. Bioactive flavonoids In
Medicinal Plants: Structure, Activity And Biological Fateasian. Journal Of
Pharmaceutical Sciences, 13, 12–23.
Thuan, N.H., Pandey, R.P., Thuy,T.T., Park, J.W., Sohng, J.K. 2013.
Improvement Of Regiospecific.
Vaness M., Munhoza, Renata L., Jose R.P.S., Zequic J., Eneri VS Lite Mellod,
Gisely C.L. 2014. Extraction Of Flavonoid From Tagetes Patula : Process
Optimization And Screening For Biological Activity. Rey Bras
Farmacogn, 24, 576-583.
Waji, R.A., Sugrani, A. 2009. Makalah Kimia Organik Bahan Alam Flavonoid
(Quarcetin). Makassar : Universitas Hasanuddin.
Zuraida, sulistiani, Sajuthi. D, Herawati. I. 2017. Penol, Flavonoid, dan
Aktivitas Antioksidan Pada Ekstrak Kulit Batang Pulai (Alstonia scholaris
R. Br). Bogor : Institut Pertanian Bogor. Jurnal Penelitian Hasil Hutan
Vol.35,211-219.
41
Lampiran 1. Hasil identifikasi tanaman kelapa sawit
42
Lampiran 2. Gambar tanaman, daun dan serbuk simplisia daun kelapa sawit
(Elaeis quineensis Jacq.)
Gambar tanaman kelapa sawit
Gambar daun kelapa sawit Gambar serbuk simplisia

daun kelapa sawit
43
Lampiran 3. Bagan kerja penelitian
Daun kelapa
sawit
Dicuci, di tiriskan,di rajang dan

ditimbang sebagai berat basah
Dikeringkan dalam lemari pengering
Simplisia
Ditimbang berat kering
Dihaluskan
Serbuk simplisia
Defatting
dibebaskan dengan n-Heksan
Maserat
Diuapkan dengan cara rotary

evaporator
Ekstrak kental
n-heksan
44
Lampiran 3. (lanjutan)
Daun kelapa sawit
Dibersihkan dari kotoran dan

dibuang tulang daunnya (lidi)
Dicuci dengan air bersih
Dikeringkan didalam lemari
pengering suhu ± 40 0C
Ditimbang
simplisia
Diserbukkan/ dihaluskan
Ditimbang
Serbuk Simplisia
Skirining fitokimia untuk

pemeriksaan :
A. Flavonoid
B. Glikosida
45
Lampiran 4. Bagan fraksinasi cair-cair senyawa flavonoid dari ampas (sisa)
Ampas (sisa)
Di hidrolisis dengan HCl 2 N

selama 5 jam
Filtrat Ampas
Dipekatkan
Di fraksinasi dengan etil asetat
Fraksi sisa Fraksi etil

asetat
dipekatkan
Fraksi etil
asetat kental
Di KKT :
F.G : HCl 1%
Asam asetat 5%
Asam asetat 10%
BAW (4:1:5)
F.D : Kertas Whatman No. 1
P.B : Uap ammonia
AlCl3
FeCl3
kromatogram
46
Lampiran 5. Bagan isolasi senyawa flavonoid secara KKt preparatif
Fraksi etil asetat
Di identifikasi secara KKt

preparatif dengan bentuk pita
menggunakan kertas
Whatmann No.1 20x20 cm
Dikembangkan dengan fase

gerak asam asetat 10%
kromatogram
47
Lampiran 6. Kromatogram hasil KKt satu arah fraksi etil asetat
1. Fase gerak HCl 1%
Sinar Uap AlCl3/ FeCl3/

tampak ammonia/ UV UV
UV
1,0
0,5
0,0
48
Lampiran 6. (lanjutan) Kromatogram hasil KKt satu arah fraksi etil asetat
2. Fase gerak Asam asetat 5%

UV 1,0
0,5
0,0
49
3. Fase gerak asam asetat 10%
Sinar Uap AlCl3/ UV FeCl3/ UV

tampak ammonia/
UV 1,0
0,5
0,0
50
4. Fase gerak BAW (4:1:5)

UV
1,0
0
0,5
0,0
51
Lampiran 7. Bagan uji kemurnian isolat hasil dari isolasi dari Fraksi Etil asetat
Kromatogram
Isolat 1 Isolat 2 Isolat 3
Di kkt satu arah :

F.D : Kertas Whatman No.1
F.G : HCl 1%, asam asetat 5%,
Di kkt dua arah : asam asetat 10%, BAW
F.D : Kertas Whatman No.1 (4:1:5)
F.G : asam asetat 10% P.B : uap ammonia
P.B : uap ammonia
Isolat murni
Diidentifikasi secara
spektrofotometri UV
menggunakan pereaksi geser
(shift reagent)
spektrum
52
Lampiran 8. Kromatogram hasil KKt preparatif
1,0 bp
Pita 3
0,5 Pita 2
Pita 1
0,0 tp
Keterangan : Bawah sinar UV 366 nm

Fase diam : kertas Whatman No. 1
Fase gerak : asam asetat 10%
Penampak bercak : uap ammonia
Tp : titik penotolan
Bp : batas pengembangan
Jarak Rambat : 16 cm
53
Lampiran 9. Kromatogram hasil KKt satu arah dibawah sinar UV 366 nm
HCl 1% Asam asetat Asam asetat BAW (4:1:5)

5% 10%
1,0 Bp
0,5
0,0 Tp
0
Keterangan : Fase diam : kertas Whatman no.1
Penampak bercak : ammonia
Rf : 0,55 ; 0,47 ; 0,61
Jarak rambat : 18 cm
54
Lampiran 10. Kromatogram hasil KKt dua arah
1,0 Bp I
0,5
Tp
0,0
BP II
Keterangan : Fase diam : kertas Whatman No. 1

Fase gerak I : HCl 1%
Fase gerak II : asam asetat 10%
Sinar UV : Biru
Bp I : batas pengembang I
Bp II : batas pengembang II
Jarak rambat : 16 cm
Harga Rf1 : 0,59
Harga Rf2 : 0,65
55
Lampiran 11. Spektrum UV isolat dalam metanol
Keterangan : : metanol
Panjang gelombang ƛ (nm) Absorbansi
334,6 0,0178
56
Lampiran 12. Spektrum UV isolat dalam metanol dan setelah penambahan
NaOH
: metanol + NaOH
Isolat dalam metanol Isolat dalam metanol setelah

penambahan NaOH
Panjang gelombang Absorbansi Panjang gelombang ƛ Absorbansi
ƛ (nm) (nm)
334,6 0,0178 339,6 0,0281
278,0 0,0916
57
Lampiran 13. Spekrum UV isolat dalam metanol dengan penambahan NaOH dan
spektrum yang diukur setelah 5 menit
: metanol + NaOH setelah 5 menit
Isolat dalam metanol Isolat dalam metanol setelah penambahan

NaOH setelah 5 menit
Panjang Absorbansi Panjang gelombang Absorbansi
gelombang ƛ ƛ (nm)
(nm)
334,6 0,0178 365,2 0,0346
276,2 0,1039
58
Lampiran 14. Spektrum UV isolat dalam metanol dengan penambahan AlCl3
: metanol + AlCl3

penambahan AlCl3
gelombang ƛ (nm) ƛ (nm)
334,6 0,0178 338,8 0,0828
269,6 0,1505
59
Lampiran 15. Spektrum UV isolat dalam metanol dengan penambahan AlCl3 dan
setelah penambahan HCl
: metanol + AlCl3 + HCl
Isolat dalam metanol Isolat dalam metanol penambahan AlCl3

dan setelah penambahan HCl
334,6 0,0178 339,4 0,0934
261,6 0,1622
60
Lampiran 16. Spektrum UV isolat dalam metanol dengan penambahan Natrium
asetat
: metanol + Natrium asetat
Isolat dalam metanol Isolat dalam metanol penambahan AlCl3

dan setelah penambahan HCl
334,6 0,0178 334,8 0,0101
225,0 0,2136
61
Lampiran 17. Spektrum UV isolat dalam metanol dengan penambahan natrium
asetat setelah 5 menit
Keterangan: : metanol
: metanol + natrium asetat setelah 5 menit
Isolat dalam metanol Isolat dalam metanol dengan

penambahan natrium asetat setelah 5
menit
Panjang absorbansi Panjang gelombang Absorbansi
334,6 0,0178 339,2 0,0042
226,2 0,1152
62
Lampiran 18. Spektrum UV isolat dalam metanol dengan penambahan natrium
asetat dan asam borat
: metanol + natrium asetat/Asam borat

penambahan asam borat
gelombang ƛ ƛ (nm)
(nm)
334,6 0,0178 339,2 0,0042
226,2 0,1152
63
Lampiran 19. Alat spektrofotometer UV dan alat flourosensi
Gambar alat spektrofotometer UV
Gambar alat flourosensi
64
vii

Isolasi Golongan Senyawa Flavonoid Dari Daun KELAPA SAWIT (Elaeis Guineensis Jacq.) Skripsi

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Isolasi Golongan Senyawa Flavonoid Dari Daun KELAPA SAWIT (Elaeis Guineensis Jacq.) Skripsi

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

ISOLASI GOLONGAN SENYAWA FLAVONOID DARI DAUN

KELAPA SAWIT (Elaeis guineensis Jacq.)

PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI

UNIVERSITAS SUMATERA UTARA

Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar

PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI

UNIVERSITAS SUMATERA UTARA

telah melimpahkan rahmat, karunia dan ridhoNya, sehingga penulis dapat

menyelesaikan skripsi yang berjudul “Isolasi Golongan Senyawa Flavonoid Dari

Universitas Sumatera Utara.

Pada kesempatan ini penulis menyampaikan terima kasih kepada Dekan

selaku penasehat akademik yang telah memberikan bimbingan dan motivasi

dalam melaksanakan kegiatan perkuliahan.

Latar Belakang : Kelapa sawit (Elaeis guineensis Jacq.) termasuk familia

Kata kunci : Daun kelapa sawit, Kromatografi kertas (KKt), flavonoid,

Background: Oil palm (Elaeis guineensis Jacq.) belongs to the family

Keywords: Oil palm leaf, Paper chromatography (KKt), flavonoids, UV

4.1 Hasil skirining fitokimia simplisia daun kelapa sawit ................................. 30

1. Kerangka pikir penelitian ........................................................................... 4

1 Identifikasi tumbuhan ................................................................................. 42

1.1 Latar Belakang

Indonesia merupakan negara dengan kekayaan alam yang melimpah,

guineenis Jacq.). Hampir seluruh bagian tanamannya memiliki manfaat yang

dapat digunakan untuk pengobatan. Dalam berbagai kalangan masyarakat, salah

termasuk tanaman tahunan (Masykur, 2013). Sekitar 90% perkebunan kelapa

sawit di Indonesia berada di pulau Sumatera dan Kalimantan.

Daun kelapa sawit mengandung senyawa-senyawa terpenoid, steroid,

alkaloid, flavonoid, glikosida, tanin dan saponin (Sashidaran dkk., 2010;

Nainggolan dkk., 2014). Hasil penelitian sebelumnya menyebutkan bahwa daun

kelapa sawit mempunyai khasiat penyembuhan luka sayat (Syahmi, 2010 ;

Hasibuan dkk., 2014), antidiabetes (Rosalina dkk., 2011), antihipertensi (Jaffri

Jaffri dkk., 2010).

Flavonoid merupakan salah satu golongan metabolit sekunder yang

dihasilkan oleh tanaman dan termasuk dalam kelompok polifenol (Banjarnahor

dkk., 2014). Flavonoid merupakan kandungan khas tumbuhan hijau dan

Zuraida dkk., 2017), antiinflamasi, antivirus (Qinghu wang dkk., 2016),

antikanker, antidiabetes (Arifin dkk., 2018 ; Marzounk dkk., 2016), antibakteri

sebagai antibiotik (Waji dan Sugrani, 2009).

Senyawa flavonoid umumnya diisolasi dengan metode ekstraksi yakni

dengan cara maserasi menggunakan pelarut yang dapat melarutkan flavonoid,

umumnya larut dalam pelarut polar (Monache, 1996). Flavonoid merupakan

metanol, butanol, dimetilformamida (Arifin dkk., 2018).

Pada penelitian ini terlebih dahulu dilakukan pembebasan lemak dan

Penelitian sebelumnya diperoleh hasil skirining fitokimia senyawa

flavonoid, alkaloid, glikosida, tanin, triterpenoid/steroid, saponin. Hasil

preparatif (KKt) kemudian hasil isolat dikarakterisasi secara spektrofotometri UV

menggunakan pereaksi geser.

1.2 Perumusan Masalah

Berdasarkan uraian di atas, maka perumusan masalah penelitian adalah :

dapat dipisahkan dengan cara kromatografi kertas (KKt) preparatif ?

b) Apakah golongan senyawa flavonoid hasil isolasi dapat dikarakterisasi secara

spektrofotometri UV menggunakan pereaksi geser?

Berdasarkan perumusan masalah di atas, maka hipotesis dari penelitian ini

dipisahkan dengan cara kromatografi kertas (KKt) preparatif.

2. Hasil isolat golongan senyawa flavonoid dapat dikarakterisasi secara

spektrofotometri UV menggunakan pereaksi geser.

1.4 Tujuan Penelitian

Tujuan penelitian ini adalah sebagai berikut :

b) Untuk mengidentifikasi golongan senyawa flavonoid hasil isolat secara

spektrofotometri UV menggunakan pereaksi geser.

1.5 Manfaat Penelitian

Manfaat penelitian ini adalah sebagai berikut :

Penelitian ini diharapkan dapat manambah informasi dan wawasan masyarakat