com
Abstrak - Konsentrasi Vitamin C, juga dikenal sebagai asam L-askorbat, dalam dua puluh dua jenis sayuran segar
ditentukan dengan metode spektrofotometri dan Titrasi Back Redox. Efek dari beberapa kondisi seperti waktu, pemasakan
dan pembekuan pada kandungan Vitamin C dipelajari. Sampel dikumpulkan dari pasar yang berbeda di kota Benghazi dari
tempat yang berbeda. Setiap sampel atau sebagian ditimbang, diperas dalam mesin juicer dan disentrifugasi; volume dan
berat cairan supernatan diambil. Cairan supernatan dihomogenkan dengan larutan asam metafosfat 5%-10% asam asetat.
Asam askorbat dioksidasi menjadi asam dehidroaskorbat oleh air bromin dengan adanya asam asetat dan kelebihan
bromin dihilangkan dengan beberapa tetes tiourea 10%. Sebuah kopling dilakukan dengan 2,2JADI4. Kompleks warna
merah dihasilkan dan absorbansinya diukur secara spektrofotometri pada 521 nm. Hukum bir dipatuhi. Metode lain untuk
penentuan asam askorbat dilakukan dengan titrasi balik iodimetri di mana jumlah yodium yang terukur berlebih
dihasilkan dalam sampel dan kemudian yodium yang tidak bereaksi dititrasi dengan larutan standar natrium tiosulfat.
Pendugaan kandungan asam askorbat dilakukan untuk sampel segar, setelah 4 dan 7 hari, pemasakan dan pembekuan.
jumlahnya dan bukan merupakan sumber yang signifikan. 85% H2JADI4untuk menghasilkan kompleks warna merah dan
Sebagian besar pedoman diet berbasis makanan serupa karena absorbansi diukur secara spektrofotometri pada 521 nm. Prosedur
semuanya merekomendasikan konsumsi 5 porsi buah dan DNPH merupakan salah satu metode yang paling sederhana, akurat
sayuran setiap hari. Jika rekomendasi ini diikuti, asupan harian dan dapat diterapkan untuk penentuan total asam askorbat dalam
asam askorbat akan menjadi 210-280 mg, tergantung pada makanan segar, seperti buah-buahan dan sayuran.
faktor kandungan makanan [8]. Asam askorbat adalah vitamin
II. MATERI DANMETODE
yang paling tidak stabil dan mudah dihancurkan selama
pemrosesan dan penyimpanan. Paparan oksigen, pemanasan Reagen:
berkepanjangan dengan adanya oksigen, kontak dengan mineral
Semua reagen memiliki tingkat analitik:
(besi dan tembaga) dan paparan cahaya merusak kandungan
asam askorbat makanan. 1. Untuk Titrasi Kembali Redoks:
0,04 N KIO3, 10% KI, 0.2MH2JADI4, 0,03N Na2S2HAI3,
Banyak teknik analisis yang disebutkan dalam
tidak2BERSAMA3padat, 5% Pati
literatur untuk penentuan vitamin C dalam matriks
2. Untuk spektrofotometer UV-tampak:
yang berbeda, seperti: titrimetri [9], fluorimetri [10],
• 500 ppm larutan standar asam askorbat (larutkan
spektrofotometri [11], kromatografi cair kinerja tinggi
0,0500 g asam askorbat dalam 100 ml air suling),
[12], dan enzimatik [13] teknik.
• 3% Meta asam fosfat (larutkan 15 g asam meta
Dalam penelitian ini, vitamin C ditentukan dengan dua fosfat dalam air suling hangat, tambahkan 40 ml
metode: Titrasi Kembali Redoks dan Spektrofotometri UV-Visible. asam asetat glasial (BDH) kemudian pindahkan
1. Titrasi Kembali Redoks larutan ke labu ukur 500 ml dan encerkan larutan
Metode ini menentukan konsentrasi vitamin C dalam sampai tanda dengan air suling).
larutan dengan titrasi redoks dengan kalium iodat • Air brom (larutkan 55 ml air brom dalam 500
dengan adanya kalium iodida. ml air suling).
Ketika ion iodat (IO- 3) ditambahkan ke dalam larutan asam • 2,4-dinitrofenilhidrazin (larutkan 1,0 g 2,4-
mengandung ion iodida (I-), terjadi reaksi oksidasi- dinitrofenilhidrazin dalam 2 ml asam sulfat pekat
reduksi; - ion iodat direduksi menjadi iodium seperti setelah pendinginan, tambahkan 20 ml metanol).
yang diilustrasikan dalam dua persamaan berikut: • Thiourea (larutkan 50 g Thiourea dalam 500 ml
air suling).
3 -+ 5 aku-+ 6 H+→3 aku2+ 3 H2O (1)
saya
Instrumen
Iodium yang dibentuk oleh reaksi ini mengoksidasi asam
askorbat menjadi asam dehidroaskorbat karena iodin Spektrofotometer sinar UV-Visible ganda (Model
direduksi menjadi ion iodida. GESEYS 10uv) dengan sel 1 cm digunakan.
C6H8HAI6(aq)+ aku2→2 aku-+ C6H6HAI6(aq). (2) Dua puluh dua jenis sayuran dipelajari secara individual.
Sayur-sayurannya adalah Labu, Wortel, Tomat, Paprika, Cabe
Karena reaksi ini yodium yang terbentuk segera Merah, Cabai Hijau, Mentimun, Lobak, Bawang, Brokoli,
direduksi menjadi iodida selama ada asam askorbat. Kubis, Labu,Kentang, Peterseli, Kembang Kol dan Ketumbar.
Setelah semua asam askorbat dioksidasi, kelebihan Juga beberapa sayuran berdaun adalah Ketumbar, Dill,
yodium bebas bereaksi dengan indikator pati, Peterseli, Bayam, Seledri, Mint, Arugula dan Bawang Hijau.
membentuk kompleks pati-iodin berwarna biru-hitam. Ini Mereka dikumpulkan dari pasar yang berbeda di kota
adalah titik akhir titrasi. Metode ini cocok untuk Benghazi. Analisis dilakukan pada hari yang sama dengan
digunakan dengan tablet Vitamin C, jus buah segar atau pembelian kecuali untuk mempelajari pengaruh waktu,
kemasan, serta buah dan sayuran padat pemasakan dan pembekuan sayuran.
2. Spektrofotometer UV-Visible.
Kami menggunakan penentuan spektrofotometri total asam Prosedur:
askorbat (asam askorbat dan asam dehidroaskorbat)
1. Persiapan Sampel:
berdasarkan oksidasi asam askorbat menjadi asam
dehidroaskorbat oleh air Brom dengan adanya asam asetat. Setiap sampel sayuran atau sebagian ditimbang, diperas
Setelah digabungkan dengan 2,4-dinitrofenil hidrazin pada dalam mesin juicer dan disentrifugasi. Kemudian
37°suhu C selama tiga jam, larutan diperlakukan dengan diambil volume dan berat cairan supernatannya.
2. Analisis Sampel dengan Metode Titrasi: 4. Setelah inkubasi, labu didinginkan dalam penangas es
selama setengah jam dan kemudian diberi 5 ml H2O 85%
saya. Standarisasi Larutan Natrium Tiosulfat:
dingin.2JADI4dengan pengadukan konstan. Kemudian
Standarisasi ini dilakukan dengan memipet 5,00 volumenya diisi sampai tanda batas dengan air suling.
ml KIO3larutan + 10 ml larutan KI 10% + 10 ml
H . encer2JADI4ke dalam labu berbentuk kerucut. 5. Pemindaian spektrum dilakukan untuk menentukanmaksimal
Aku yang dibebaskan2dititrasi dengan Ns2S2HAI3 untuk kompleks yang terbentuk. Dan kurva kalibrasi
larutan dari buret sampai diperoleh warna digambar pada panjang gelombang yang tepat.
kuning pucat. Kemudian ditambahkan 10 tetes
larutan kanji dan titrasi dilanjutkan sampai
ii. Analisis sampel sayuran:
warna biru kehitaman kompleks pati-triiodida
hilang. Titrasi diulangi sampai diperoleh hasil 5 ml dari sampel sayuran diambil dalam labu ukur
yang sesuai. Normalitas larutan natrium 25 ml dan volume diisi sampai tanda batas dengan
tiosulfat dihitung. larutan asam metafosfat 5% asam asetat 10%. Dalam
labu ukur 25 ml yang lain, diambil 5 ml dari larutan di
ii. Titrasi Larutan Standar Asam Askorbat:
atas dan langkah 3 dan 4 diulangi seperti larutan
5,00 ml larutan sampel dipipet dan langkah- standar. Akhirnya, konsentrasi asam askorbat dalam
langkah untuk standarisasi larutan natrium sampel sayuran ditentukan dari kurva kalibrasi dan
tiosulfat diulangi. Konsentrasi asam askorbat kemudian dihitung dalam sampel asli.
dihitung dari hubungan:
3. 1 ml asam asetat glasial dan kemudian 1 ml larutan 2,4- Asam askorbat ditentukan dalam berbagai jenis
DNPH ditambahkan ke semua standar dan kosong. sayuran dengan metode titrasi seperti yang dijelaskan
Untuk penyelesaian reaksi, semua labu disimpan pada di bagian eksperimental dan efek menjaganya pada 10
°C selama 4 hari dan 7 hari dipelajari dan juga jumlah
suhu 37°suhu C selama 3 jam dalam penangas air
(termostatik). vitamin diukur setelah sayuran dimasak dan
dibekukan.
Tabel 3.1. : Jumlah vitamin C dari beberapa sayuran dan efek waktu pada mereka
Segar 12 hari
Jenis sayuran 4 hari mg/100g 7 hari mg/100g
mg/100g mg/100g
Kubis 64.25±0.25
Wortel 28,93±0,05
Timun 27.90±0.41
Bayam 25,64±0,05
140
Segar 4 hari 7 hari 12 hari
120
100
Vitamin C mg/100g
80
60
40
20
0
Jenis sayuran
Gambar 3.1. : Jumlah vitamin C dari beberapa sayuran dan efek waktu pada mereka
Tabel 3.2. : Jumlah vitamin C dari beberapa sayuran berdaun dan efek waktu pada mereka
Tabel 3.2. dan gambar 3.2. tunjukkan jumlah vitamin C dalam hancur dengan waktu dan sekitar 50% dari itu hancur setelah
beberapa sayuran berdaun dan efek meninggalkannya di lemari 7 hari.
es selama 4 dan 7 hari . Jelas bahwa vitamin C adalah
60
Segar 4 hari 7 hari
50
40
Vitamin C mg/100g
30
20
10
0
BAYAM SELEDRI DAUN MINT ARGULA HIJAU
BAWANG
Jenis sayuran
Gambar 3.2. : Jumlah vitamin C dari beberapa sayuran dan efek waktu pada mereka
Tabel 3.3: Pengaruh pemasakan sayuran selama 15 menit pada suhu 100 °C terhadap jumlah vitamin C
50
40
30
20 Segar
10 4 hari
0
7 hari
jenis sayuran
Gambar 3.3: Pengaruh memasak sayuran selama 15 menit pada suhu 100 °C terhadap jumlah vitamin C
Dari tabel 3.3 dan gambar 3.3 terlihat jelas bahwa pemasakan 3.2. Penentuan Jumlah Asam Askorbat yang
merusak vitamin c bahkan pemasakan dalam waktu singkat. Diperoleh dari Metode Spektrofotometri
Misalnya brokoli kehilangan sekitar 50% dari vit-nya. Konten C dan 3..2.1 Estimasiλ.maksimaldan konstruksi Kurva
kehilangan ini meningkat seiring waktu. Standar
Pemindaian kompleks dalam rentang panjang gelombang dari 350 untuk kompleks berwarna) diambil untuk membangun kurva kalibrasi
nm hingga 650 nm menunjukkan absorbansi maksimum (λmaksimal) pada dengan memplot konsentrasi versus absorbansi yang sesuai pada 521 nm
521 nm dan kemudian absorbansi semua standar (dikonversi seperti yang ditunjukkan pada gambar 3.3.
0,6
0,5
0,4
Penyerapan
0,3
SEBUAH
0,2
0,1 Linier (A)
0
0 10 20 30 40
Konsentrasi ppm
Jelas dari gambar di atas bahwa hukum Beer 3.2.2. Pengaruh Waktu
dipatuhi dalam kisaran konsentrasi dalam
Tabel 3.5 menunjukkan jumlah vitamin C beberapa
pembelajaran
sayuran , sumbernya dan efek penyimpanannya di lemari
Total vitamin C dalam sayuran dan efek yang berbeda di es selama 4, 7 dan 12 hari.
dalamnya juga dipelajari secara spektrofotometri
Tabel 3.4: Jumlah vitamin C beberapa sayuran dan pengaruh waktu terhadapnya
200
150
100
Segar
Vitamin C mg / 100g
50
4 hari
0 7 hari
12 hari
Jenis sayuran
Gambar 3.5: Jumlah vitamin C dari beberapa sayuran dan pengaruh waktu terhadapnya
Jelas dari Tabel 3.4 dan Gambar 3.5 bahwa vitamin C Tabel 3.5 menunjukkan jumlah vitamin C dalam sayuran
dihancurkan seiring waktu. berdaun segar dan setelah 4 dan 7 hari dalam mg/100g
Tabel 3.5: Jumlah vitamin C pada sayur mayur berdaun pasir pengaruh waktu terhadapnya
160
140
120
Vitamin C mg/100g
100
80
60 Segar
40 4 hari
20
7 hari
0
jenis sayuran
Jelas dari tabel 3.5 dan gambar 3.6 bahwa jumlah vitamin C menurun tajam seiring waktu terutama pada ketumbar
90
80
70
60
50
Segar
40
Vitamin C mg/100g
4 hari
30
7 hari
20
12 hari
10
0
Jenis sayuran
30
25
20
15
Vitamin C mg/100g
10 Segar
5 4 hari
7 hari
0
Jenis sayuran
Jelas bahwa vitamin C dihancurkan dengan memasak dipelajari. Tomat sebagai contoh digunakan untuk mengukur jumlah
terutama paprika, brokoli, dan daun bawang vitamin C dalam banyak kasus seperti yang diilustrasikan pada tabel 3.8
dan gambar 3.9
3.2.4. Efek Beku
Efek sayuran beku pada -5°C selama satu, dua, dan tiga minggu
dan memasaknya pada suhu 100HaiC selama 15 menit. adalah
Tabel 3.8: Pengaruh tomat yang dimasak dan dibekukan terhadap jumlah vitamin C
18
16
14
Vitamin C mg/100g
12 Segar
10 Setelah 4 hari
8 Setelah 7 hari
6
Untuk 1 minggu
4
Untuk 2 minggu
2
Selama 3 minggu
0
TIDAK DIMASAK & MATANG BEKU BEKU &
TIDAK BEKU MATANG
Keadaan Tomat
Gambar 3.9: Pengaruh tomat yang dimasak dan dibekukan terhadap jumlah vitamin C
Dari tabel 3.7 dan gambar 3.8, terlihat jelas bahwa jumlah REFERENSI
vitamin C tertinggi terdapat dalam keadaan segar (16,46 mg/100g)
[1] Li Y, Schellhorn HE. Perkembangan baru dan perspektif
dan paling sedikit (atau hampir tidak ada) pada keadaan beku dan
terapi baru untuk vitamin C. J Nutr
dimasak setelah 3 minggu ( 0,95mg/100g). Juga jelas bahwa vitamin
2007;137:2171-84Carr AC, Frei B. Menuju tunjangan diet
C dihancurkan dengan memasak lebih dari yang dibekukan tetapi
baru yang direkomendasikan untuk vitamin C
seperti yang kita ketahui bahwa tomat beku harus dimasak sebelum
berdasarkan efek antioksidan dan kesehatan pada
dimakan, jadi hampir tidak ada vitamin C dalam kasus seperti itu.
manusia. Am J Clin Nutr 1999;69:1086-107.
[2] Frei B, Inggris L, Ames BN. Askorbat adalah antioksidan
IV. CKESIMPULAN yang luar biasa dalam plasma darah manusia. Proc Natl
Acad Sci USA 1989;86:6377-81. Jacob RA, Sotoudeh G.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa jumlah vitamin C yang
Fungsi dan status vitamin C pada penyakit kronis.
ditentukan dengan Titrasi Redoks selalu lebih sedikit dibandingkan
Perawatan Klinik Nutr 2002;5:66-74.
dengan metode spektrofotometri (misalnya pada brokoli dengan titrasi
[3] Gershoff SN. Vitamin C (asam askorbat): peran baru,
hasilnya adalah 121mg/100g sedangkan secara spektrofotometri adalah
persyaratan baru? Nutr Rev 1993;51:313-
154,11 mg/100g). Hal ini karena dengan titrasi hanya asam laskorbat yang
26Weinstein M, Babyn P, Zlotkin S. Jeruk sehari
ditentukan tetapi dengan spektrofotometer total L-askorbat dan, L-
menjauhkan dokter: penyakit kudis pada tahun
dehidroaskorbat ditentukan.
2000. Pediatrics 2001;108:E55
Pada sayuran, hasil penelitian menunjukkan bahwa [4] Tee ES, Mohd Ismail N, Mohd Nasir A &Kahtijah I
konsentrasi vitamin C tertinggi terdapat pada brokoli (154,11 (1997). Komposisi nutrisi makanan Malaysia, Edisi
mg/100g) dan konsentrasi vitamin C terendah pada tomat ke-4, Program Database Komposisi Makanan
(16,46 mg/g). Malaysia, Institut Penelitian Medis, Kuala Lumpur;
310 hal.
Pada tumbuhan, konsentrasi vitamin C tertinggi ada pada
[5] Levine M, Rumsey SC, Dhariwal KR, Park J & Wang Y
ketumbar (159,39 mg/100g) dan konsentrasi terendah pada daun
(1999) Kriteria dan rekomendasi untuk asupan asam
bawang (25,38 mg/100g) dan konsentrasi vitamin C menurun seiring
askorbat. J Amer Med Assoc 281: 1415-1423.
waktu, hilang dengan merebus dan membekukan juga. kehilangan
[6] Verma, KK, Jain, A., Sahasrabuddhey, B., Gupta, K., Mishra, S.
sebagian besar karena dibekukan. lalu memasak
(1996). Pembersihan ekstraksi fase padat untuk menentukan
asam askorbat dan asam dehidroaskorbat dengan