MODUL 8

PENETAPAN KADAR RIFAMPISIN DALAM SEDIAAN KAPSUL DENGAN

METODE SPEKTROFOTOMETRI SINAR TAMPAK

1. Tujuan
a. Kompetensi yang Dicapai :
Mahasiswa mampu melakukan penetapan kadar rifampisin dalam sediaan kapsul
menggunakan metode spektrofotometri sinar tampak
b. Tujuan Praktikum :
Menetapkan kandungan rifampisin dalam sediaan kapsul dan menginterpertasikan
hasilnya sesuai dengan kandungan yang tertera di etiket.

2. Prinsip
Prinsip spektrofotometri sinar tampak adalah...

3. Dasar Teori
3.1 Rifampisin (sifat fisikokimia)

3.2 Kapsul rifampisin

3.3 Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT)
Alat dan komponen, prinsip pemisahan, fase normal, fase balik
3.4 Analisis kadar metode multipoint method (kurva kalibrasi)
4. Alat dan Bahan
Alat :
Alat-alat yang digunakan dalam praktikum ini adalah spektrofotometr UV-Vis, kuvet
platik, kertas saring, timbangan analitik, dan alat-alat gelas yang umum digunakan di
laoratorium.

Bahan :
Bahan yang digunakan adalah baku pembanding rifampisin, kapsul rifampisin, metanol
p.a.

5. Prosedur Kerja
a) Larutan induk rifampisin 1000 µg/mL
Rifampisin baku pembanding ditimbang sejumlah 50 mg, kemudian dimasukkan ke
dalam labu ukur 50 ml dan dilarutkan dengan metanol p.a.
b) Larutan baku kerja
Dibuat enam seri konsentrasi larutan baku kerja dibuat pada konsentrasi 8, 10, 12,
14, 16 dan 18 µg/mL. Larutan baku tersebut diencerkan dari larutan induk
rifampisin.
c) Penentuan panjang gelombang serapan maksimum
Salah satu konsentrasi larutan baku kerja discanning pada alat spektrofotometer UV-
Vis di rentang 200-800 nm. Panjang gelombang maksimum dipilih dari spektrum
yang memberikan nilai absorbansi yang paling tinggi.
d) Pembuatan larutan uji (sampel)
Sebanyak 10 kapsul rifampisin dibuka dan digerus. Timbang seksama sejumlah isi
kapsul setara dengan lebih kurang 50 mg rifampisin, dimasukkan ke dalam labu
tentukur 50 mL dan tambahkan metanol sampai tanda. Larutan tersebut dipipet
sebanyak 1,0 mL dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 mL dan diencerkan dengan
metanol sampai tanda batas. Dilakukan sebanyak dua kali.
e) Analisis kualtitatif rifampisin
Larutan uji dimasukkan ke dalam kuvet, kemudian dilakukan scanning pada rentang
200-800 nm. Hasil spektrum yang diperoleh diamati panjang gelombang
maksimumnya. Atau gambar spektrum yang diperoleh dapat dioverlay terhadap
 spektrum larutan baku. Kedua panjang gelombang maksimum yang diperoleh
dibandingkan hasilnya.
f) Kurva kalibrasi
Masing-masing larutan baku kerja dimasukkan ke dalam kuvet, kemudian
dianalisis pada panjang gelombang serapan maksimum yang diperoleh dari poin
d). Serapannya dicatat kemudian dibuat kurva kalibrasi dengan persamaan y=bx+a.
Uji linieritas dilakukan dengan menghitung nilai koefisien regresi linier (r)
mendekati 1 dan Vx(0) <2%
g) Penetapan kadar rifampisin kapsul
Larutan uji dimasukkan ke dalam kuvet, kemudian dianalisis pada panjang
gelombang serapan maksimum rifampisin. Konsentrasi rifampisin dalam kapsul
diperoleh dengan cara memplotkan hasil absorbansi larutan uji ke persamaan
linieritas. Hasil konsentrasi yang diperoleh dihitung kadarnya dengan rumus:

massa rifampisin (mg)= Cs (mg/L) x Fp x vol (L)

Persentase kadar dihitung dengan rumus:
𝑚𝑔 𝑟𝑖𝑓𝑎𝑚𝑝𝑖𝑠𝑖𝑛 ℎ𝑎𝑠𝑖𝑙 𝑝𝑒𝑟𝑐𝑜𝑏𝑎𝑎𝑛
( ) 𝑥 100%
𝑚𝑔 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 𝑦𝑎𝑛𝑔 𝑑𝑖𝑡𝑖𝑚𝑏𝑎𝑛𝑔

h) Persyaratan

Persyaratan Rifampisin dalam sediaan kapsul menurut Farmakope Indonesia edisi

VI tahun 2020 memenuhi persyaratan jika kadar tablet Rifampisin mengandung
tidak kurang dari 90,0% dan tidak lebih dari 110,0% dari yang tertera pada etiket.

Bagan Kerja :
6. Hasil Praktikum
Prosedur Perhitungan & Hasil Percobaan
Pembuatan larutan induk C larutan induk = …… mg/ … mL
W Rifam baku = 50 mg = …… mg/mL
V labu = 50 mL
= …… µg/mL

Pembuatan larutan baku kerja a. 8 µg/mL

Perhitungan pengenceran untuk 6

seri konsentrasi. b. 10 µg/mL

Pengenceran dari larutan induk:

(VxC) lar baku = (VxC) lar induk
c. 12 µg/mL

d. dst
Penentuan PG serapan maks Gambar spektrum:

Panjang gelombang serapan maksimum

rifampisin dalam metanol adalah …….. nm
Nama sampel: ….
(gambar sampel) Kekuatan sediaan: ….. mg/kap

Hasil analisis kualitatif PG maks larutan baku = ….nm

PG maks larutan uji = … nm

(Gambar)
 Kurva kalibrasi rifampisin
C (ug/ml) Abs
8
10
12
14
16
18

Pers. Regresi linier =

…….
r=
Vx(0) =

Pembuatan larutan uji Jumlah serbuk dari 10 kapsul = …… mg

Sampel ditimbang setara dengan 50 mg

rifampisin yaitu ….. mg.
Dimasukkan ke dalam labu 50 mL, maka
kandungan rifampisin pada larutan 1 adalah:
- C rifampisin = 50 mg/50 mL

= ……. bpj

Larutan 1 diambil sebanyak 1,0 dilarutkan

dalam 50,0 mL metanol (larutan 2)
V1 x C1 = V2 x C2

C rifampisin = ….. bpj

Analisis kadar
Pers. Regresi linier =
Y = bx +a

……

Hasil Abs larutan sampel (uji)

Pengulangan Absorbansi Cs rifamp
1
2

massa rifampisin (mg) =

Cs (mg/L) x Fp x vol (L)

Persen kadar analit dalam sampel =

𝑚𝑔 𝑎𝑛𝑎𝑙𝑖𝑡
𝑥 100%
𝑚𝑔 𝑑𝑖𝑡𝑖𝑚𝑏𝑎𝑛𝑔

Memenuhi/Tidak memenuhi syarat

farmakope Indonesia*)
 7. Data Pengamatan (Dokumentasi)

8. Diskusi dan pembahasan

........................................................................................................................
........................................................................................................................
........................................................................................................................
........................................................................................................................
........................................................................................................................
........................................................................................................................
........................................................................................................................
........................................................................................................................
........................................................................................................................
........................................................................................................................
........................................................................................................................
........................................................................................................................
........................................................................................................................
........................................................................................................................
........................................................................................................................
........................................................................................................................
........................................................................................................................
 9. Kesimpulan
........................................................................................................................
........................................................................................................................
........................................................................................................................
........................................................................................................................
........................................................................................................................

10. Pustaka
Direktorat Jenderal Kefarmasian dan Alat Kesehatan. 2020. Farmakope Indonesia. Edisi VI.
Kementerian Kesehatan RI. Jakarta. 1481-1484
B. Ravi Shankar, R. Rajesh, K. Ramya, 2016, METHOD DEVELOPMENT AND
VALIDATION OF RIFAMPICIN BULK AND MARKETED CAPSULE BY SIMPLE
UV SPECTROPHOTOMETRIC ANALYSIS, Asian Journal of Pharmaceutical Analysis
and Medicinal Chemistry. 4(1), 2016, 8 - 13.
UV and IR Spectra handbook