Final Skripsi Indri PDF

UNIVERSITAS PANCASILA
FAKULTAS FARMASI
SKRIPSI
EFEK POLIHERBAL X TERHADAP PENURUNAN SEL

NEURON YANG RUSAK DAN FUNGSI MOTORIK
PADA TIKUS MODEL STROKE ISKEMIK
Oleh :
Indry Nufikha Fajrin
NPM 2018210227
Dibuat untuk memperoleh

gelar Sarjana Farmasi pada
Universitas Pancasila
JAKARTA
2022
PERNYATAAN SKRIPSI DAN SUMBER INFORMASI
Saya yang bertanda tangan di bawah ini menyatakan bahwa skripsi dengan judul
“EFEK POLIHERBAL X TERHADAP PENURUNAN SEL NEURON YANG
RUSAK DAN FUNGSI MOTORIK PADA TIKUS MODEL STROKE
ISKEMIK” adalah karya saya sendiri dan belum diajukan untuk publikasi dalam
bentuk apapun kepada pihak manapun. Informasi yang berasal atau dikutip dari karya
yang diterbitkan maupun yang tidak diterbitkan dari penulis lain telah dicantumkan
dalam daftar pustaka di bagian akhir skripsi ini.
Jakarta, Juli 2022

NPM : 2018210227
i
UNIVERSITAS PANCASILA
FAKULTAS FARMASI JAKARTA
PERSETUJUAN SKRIPSI
NAMA : INDRY NUFIKHA FAJRIN

NPM 2018210227
PEMINATAN : FARMASI KLINIK DAN KOMUNITAS (FKK)
JUDUL : EFEK POLIHERBAL X TERHADAP PENURUNAN SEL
NEURON YANG RUSAK DAN FUNGSI MOTORIK
PADA TIKUS MODEL STROKE ISKEMIK
Disetujui oleh:
Pembimbing
(Prof. Dr. apt. Syamsudin, M.Biomed) (Prof. Drh. Bambang Pontjo Priosoeryanto
M.S., PhD., APVet)
Tanggal: Tanggal :
ii
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur Puji ke hadirat Allah SWT atas rahmat dan ridho-Nya sehingga penulis
dapat menyelesaikan skripsi ini yang berjudul “Efek Poliherbal X Terhadap Sel
Neuron Yang Rusak Dan Fungsi Motorik Pada Tikus ModelStroke Iskemik”.
Penulisan skripsi ini dilakukan dalam rangka memenuhi salahsatu syarat untuk
mencapai gelar Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas Pancasila.
Selama penelitian dan penyusunan skripsi ini penulis mengucapkan terimakasih
kepada dosen pembimbing skripsi Prof. Dr. apt. Syamsudin M.Biomed dan Prof.
Drh. Bambang Pontjo Prioseryanto M.S., PhD., APVet, DACCM yang selalu
membimbing dan membantu dalam menyelesaikan skripsi ini. Banyak ilmudan
pengalaman yang penulis dapatkan dari beliau dan juga dari setiap proses yang penulis
lalui sangatlah berharga dalam pengerjaan skripsi ini. Penulis juga ingin mengucapkan
terima kasih kepada setiap pihak yang telah membantu baik dari masa perkuliahan 4
tahun dan pengerjaan skripsi ini, penulis mengucapkan terima kasih kepada:
1. Dekan Fakultas Farmasi Universitas Pancasila Jakarta Prof. Dr. apt. Syamsudin
M.Biomed.
2. apt. Andri Prasetiyo, S.Si., M.Farm selaku dosen pembimbing akademik yang telah
memberikan bimbingan serta masukan dan saran selama masa perkuliahan di
Fakultas Farmasi Universitas Pancasila.
3. Seluruh tenaga ahli Fakultas Kedokteran Hewan dan Biomedis Institut Pertanian
Bogor
4. Seluruh dosen Fakultas Farmasi Universitas Pancasila yang telah memberikan
bimbingan selama kuliah dan praktikum.
5. Seluruh civitas Fakultas Farmasi Universitas Pancasila yang telah berjasa dan
banyak membantu selama masakuliah dan praktikum.
6. Mamah, papah, kakak, adik serta keluarga besar saya yang selalu memberikan doa,
dukungan dan motivasi dalam masa perkuliahan saya sampai akhir skripsi ini.
iii
7. Sahabat-sahabat saya di FFUP serta teman-teman mahasiswa Fakultas Farmasi
Universitas Pancasila atas dukungan, semangat dan kebersamaannya selama 4
tahun saya menjalani perkuliahan di Fakultas Farmasi Universitas Pancasila.
Semoga setiap proses dan pengalaman berharga selama masa kuliah 4 tahun di
kampus ini dapat membentuk saya menjadi pribadi yang lebih baik. Saya berharap
semoga penelitian skripsi ini dapat bermanfaat bagi perkembangan ilmu pengetahuan
dalam bidang farmasi.
Jakarta, Juli 2022
iv
DAFTAR ISI
DAFTAR ISI ........................................................................................... v

DAFTAR TABEL ............................................................................................... viii
DAFTAR GAMBAR........................................................................................... iix
DAFTAR LAMPIRAN ....................................................................................... x
ABSTRAK ........................................................................................................... xi
ABSTRACT......................................................................................................... xii
BAB I PENDAHULUAN................................................................................ 1
A. Latar Belakang ............................................................................... 1
B. Rumusan Masalah .......................................................................... 3
C. Tujuan Penelitian............................................................................ 4
D. Manfaat Penelitian.......................................................................... 4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA...................................................................... 5
A. Kelor (Moringa oleifera L.) ........................................................... 5
1. Deskripsi/ Uraian Tanaman ...................................................... 5
2. Klasifikasi Tanaman ................................................................. 6
3. Nama Daerah Tanaman (12) .................................................... 7
4. Kandungan Kimia Daun Kelor ................................................. 7
5. Farmakologi Tanaman.............................................................. 8
B. Meniran (Phyllanthus niruri) ......................................................... 8
1. Deskripsi/Uraian Tanaman Meniran ........................................ 8
3. Nama Daerah Tanaman (18) .................................................... 10
4. Farmakologi Meniran ............................................................... 10
5. Kandungan Kimia..................................................................... 11
C. Jintan Hitam (Nigella sativa).......................................................... 11
1. Deskripsi/Uraian Tanaman Jintan Hitam ................................. 11
3. Nama Daerah Tanaman ............................................................ 12
4. Farmakologi Jintan Hitam ........................................................ 12
v
5. Kandungan Kimia .......................................................................... 13
D. Stroke Iskemik ..................................................................................... 13
1. Definisi Stroke Iskemik ................................................................. 13
2. Tanda dan Gejala Stroke Iskemik.................................................. 13
3. Diagnosis ....................................................................................... 14
4. Tatalaksana .................................................................................... 14
5. Patofisiologi Stroke Iskemik ......................................................... 15
E. Trimetiltin Klorida (TMT) .................................................................. 15
F. Sistem Saraf ......................................................................................... 16
1. Definisi Sistem Saraf ..................................................................... 16
2. Anatomi Otak ................................................................................ 17
3. Suplai Darah Arteri Otak ............................................................... 18
4. Histologi Otak ............................................................................... 18
5. Morfologi Kerusakan Neuron........................................................ 21
6. Mekanisme Perubahan Fungsi Motorik......................................... 22
G. Radikal Bebas ...................................................................................... 22
H. Stress Oksidatif Dan Reactive Oxygen Species (ROS) ....................... 25
I. Antioksidan ......................................................................................... 27
J. Landasan Teori .................................................................................... 28
K. Hipotesis Penelitian ............................................................................. 29
BAB III RANCANGAN PENELITIAN................................................................ 30
A. Prinsip Penelitian ................................................................................. 30
B. Tempat Dan Waktu Penelitian ............................................................ 30
1. Tempat Penelitian .......................................................................... 30
2. Waktu Penelitian ........................................................................... 31
C. Hewan Dan Bahan Uji ......................................................................... 31
1. Hewan Uji ...................................................................................... 31
2. Bahan Uji ....................................................................................... 31
D. Variabel Penelitian .............................................................................. 31
1. Variabel bebas ............................................................................... 31
2. Variabel terikat .............................................................................. 31
vi
E. Rancangan Penelitian ..................................................................... 32
F. Tahap Penelitian ............................................................................. 33
BAB IV BAHAN, ALAT DAN METODE PENELITIAN............................. 34
A. Bahan.............................................................................................. 34
B. Alat ................................................................................................. 34
C. Metode Penelitian........................................................................... 35
1. Pengajuan Protokol Kaji Etik (Ethical clearance) .................... 35
2. Penetapan Dosis ....................................................................... 35
3. Persiapan Hewan Coba (Tikus) ................................................ 36
4. Induksi Stroke Iskemik............................................................. 37
5. Uji Fungsi Motorik ................................................................... 37
6. Pembuatan Larutan Poliherbal ................................................. 38
7. Pengambilan Sampel ................................................................ 38
8. Pembuatan Preparat otak .......................................................... 39
9. Pengamatan Mikroskopis & Penghitungan Sel Neuron ........... 39
10. Analisis Data ............................................................................ 39
BAB V HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN ................................. 40
A. Kaji Etik ......................................................................................... 40
B. Hasil Penelitian............................................................................... 40
1. Hasil Pengukuran Fungsi Motorik............................................ 40
2. Hasil Olah Data Fungsi Motorik dengan Uji Statistik.............. 42
3. Pembahasan Fungsi Motorik .................................................... 42
4. Hasil Perhitungan Sel Neuron yang Rusak .............................. 46
5. Hasil Olah Data Sel Neuron yang Rusak ................................. 47
6. Pembahasan Sel Neuron yang Rusak ....................................... 47
BAB VI SIMPULAN DAN SARAN................................................................. 52
A. Simpulan......................................................................................... 52
B. Saran ............................................................................................... 52
DAFTAR PUSTAKA ............................................................................................... 53
LAMPIRAN .............................................................................................................. 57
vii
DAFTAR TABEL
Tabel II.1 Radikal Bebas Biologis (Endogen) ................................................ 23

Tabel II.2 Beberapa substitusi flavonoid dengan aktivitas antioksidan .......... 28
Tabel II.3 Antioksidan yang diizinkan digunakan dalam makanan ................ 28
Tabel IV.1 Pembagian Kelompok Perlakuan .................................................... 37
Tabel IV.2 Skoring ladder rung walking test .................................................... 38
Tabel V.1 Data Perhitungann Uji Fungsi Motorik ........................................... 41
Tabel V.2 Hasil Uji Statisik Pengukuran Uji Fungsi Motorik ......................... 42
Tabel V.3 Hasil Uji Statisik LSD Perbedaan Fungsi Motorik Antar
Kelompok ........................................................................................ 42
Tabel V.4 Hasil Uji Statistik LSD Perhitungan Sel Neuron Yang Rusak........ 46
Tabel V.5 Hasil Uji Statistik Sel Neuron Yang Rusak..................................... 47
viii
DAFTAR GAMBAR
Gambar II.1 Daun Kelor (Moringa oleifera) .................................................... 6

Gambar II.2 Struktur Flavonoid ........................................................................ 7
Gambar II.3 Meniran (Phyllanthus niruri) ............................................................. 10
Gambar II.4. Jintan hitam (Nigella sativa) .............................................................. 12
Gambar II.5 Patogenesis Trimetiltin ....................................................................... 16
Gambar II.6 Anatomi otak ...................................................................................... 17
Gambar II.7 Lapisan korteks otak ........................................................................... 19
Gambar II.8 Histopat sel neuron ............................................................................. 20
Gambar II.9 Klasifikasi radikal bebas..................................................................... 24
Gambar II.10 Sumber radikal eksogen ..................................................................... 24
Gambar II.11 Pengaruh ROS terhadap tubuh ........................................................... 26
Gambar II.12 Siklus yang Menghubungkan Jalur Metabolisme dan
Antioksidan ..................................................................................... 27
Gambar V.1 Rata-Rata Hasil Perhitungan Fungsi Motorik ................................. 41
Gambar V.2 Rata-Rata Sel NeuronYang Rusak .................................................. 47
Gambar V.3 Kelompok Normal dan Kelompok Induksi Trimethiltin ................. 48
Gambar V.4 Kelompok Masing-masing Perlakuan ............................................. 50
ix
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Etichal Approval Letter ..................................................................... 57

Lampiran 2. Surat Keterangan Galur Tikus Putih (Rattus norvegicus) ................. 58
Lampiran 3. Skema Kerja Penelitian secara Umum .............................................. 59
Lampiran 4. Data Perhitungan Fungsi Motorik ..................................................... 60
Lampiran 5. Data Perhitungan Kerusakan Sel Neuron .......................................... 62
Lampiran 6. Bahan- bahan yang Digunakan .......................................................... 64
Lampiran 7. Alat- alat yang Digunakan ................................................................. 66
Lampiran 8. Instrumen Laboratorium yang Digunakan ......................................... 69
Lampiran 9. Tikus Putih (Rattus norvegicus) Jantan galur Wistar beserta
Perlakuannya ...................................................................................... 70
Lampiran 10. Uji Fungsi Motorik Tikus .................................................................. 73
Lampiran 11 Histopat Masing-Masing Kelompok ................................................. 74
Lampiran 12. Hasil Perhitungan Sel Menggunakan Software Image-J ................... 75
Lampiran 13. Hasil Analisis Statistik Fungsi Motorik dengan SPSS ...................... 76
Lampiran 14. Hasil Analisis Statistik Kerusakan Sel Neuron dengan SPSS ........... 80
x
ABSTRAK
(A) INDRY NUFIKHA FAJRIN (2018210227)
(B) EFEK POLIHERBAL X TERHADAP PENURUNAN SEL NEURON YANG

RUSAK DAN FUNGSI MOTORIK PADA TIKUS MODEL STROKE
ISKEMIK
(C) xii + 84 halaman; 10 tabel; 16 gambar; 14 lampiran
(D) Kata kunci: Stroke iskemik, Trimetiltin klorida, Daun kelor, Jintan hitam,
Menirran, Sel neuron yang rusak, Fungsi motorik.
(E) Stroke iskemik merupakan penyakit yang terjadi karena tersumbatnya pembuluh
darah yang memasok darah ke otak sehingga menyebabkan kerusakan
neurologis. Kerusakan ini disebabkan oleh perubahan seluler yang menyebabkan
kerusakan neuron, dan penurunan fungsi motorik Trimetiltin klorida (TMT)
merupakan senyawa organotin yang neurotoksik. Paparan yang tinggi dengan
TMT dapat menyebabkan kerusakan otak. Ekstrak poliherbal x mengandung
daun kelor, jintan hitam, dan meniran memiliki kandungan flavonoid yang
bermanfaat sebagai antioksidan. Penelitian ini menggunakan 28ekor tikus wistar
dibagi dalam tujuh kelompok, yaitu kelompok normal, kelompok negatif dengan
induksi TMT, kelompok positif dengan pemberian piracetam, dan empat
perlakuan dosis 50 mg/KgBB, 100 mg/KgBB, 200 mg/KgBB, dan 400
mg/KgBB. Masing-masing kelompok diberikan ekstrak poliherbal selama 14
hari. Diuji fungsi motorik dengan Ladder Rung Walking Test, dan jumlah neuron
yang rusak. Hasil rerata fungsi motorik: kelompok normal sebesar 40; kelompok
negatif 75,41; kelompok positif 41,82; kelompok dosis 50 mg/KgBB 53,92;
kelompok dosis 100 mg./KgBB 50; kelompok dosis 200 mg/KgBB 45,1175;
kelompok 400 mg/KgBB 40. Hasil rerata sel neuron yang rusak kelompok
normal 55,75; kelompok negative 517,5; kelompok positif 314,25; kelompok
dosis 50 mg/KgBB 488,25; kelompok dosis 100mg/KgBB 437,5; kelompok 200
mg/KgBB 391,5; kelompok dosis 400 mg/KgBB 325,75. Kesimpulan penelitian
ini yaitu ekstrak poliherbal x dapat memperbaiki sel neuron yang rusak dan
fungsi motorik.
(F) Daftar rujukan : 48 buah (2009-2021)
(G) Prof. Dr. apt. Syamsudin, M.Biomed; Prof. Drh. Bambang Pontjo Priosoeryanto
M.S, PhD, APVet, DACCM
(H) 2022
xi
ABSTRACT
(A) INDRY NUFIKHA FAJRIN (2018210227)
(B) EFFECT OF POLYHERBAL X ON DECREASED DAMAGED NEURON

CELLS AND REPAIR OF MOTORIC FUNCTION IN MOUSE ISCHEMIC
STROKE MODEL
(C) xii + 84 pages; 10 tables; 16 pictures; 14 attachments
(D) Keywords : Ischemic stroke, Trimethyltin chloride, Moringa leaves, Black

cumin, Meniran, Damaged neuron cells, Motor function.
(E) Ischemic stroke is a disease that occurs due to blockage of blood vessels that
supply blood to the brain, causing neurological damage. This damage is caused
by cellular changes that cause neuronal damage, and decreased motor function.
Trimethyltin chloride (TMT) is a neurotoxic organotin compound. High
exposure to TMT can cause brain damage. Polyherbal x extract containing
Moringa leaves, black cumin, and meniran contains flavonoids which are useful
as antioxidants. This study used 28 wistar rats divided into seven groups,namely
the normal group, the negative group with TMT induction, the positive group
with piracetam administration, and four treatments with doses of 50 mg/KgBB,
100 mg/KgBB, 200 mg/KgBB, and 400 mg/KgBB. Each group was given a
polyherbal extract for 14 days. Motoric function was tested with Ladder Rung
Walking Test, and the number of damaged neurons. The average result of motor
function: the normal group was 40; negative group 75,41;positive group
41,82; dose group 50 mg/KgBB 53,2; dose group 100 mg./KgBB 50; dose group
200 mg/KgBB 45,1175; group 400 mg/KgBB 40. The average result of damaged
neuron cells in the normal group was 55,75; negative group 517,5; positive group
314,25; dose group 50 mg/KgBB 488,25; dose group 100 mg/KgBB 437,5;
group 200 mg/KgBW 391,5; the dose group was 400 mg/KgBB 325,75. The
conclusion of this study is that polyherbal x extract can repair damaged neuron
cells and motor function.
(F) References : 48 pieces (2009-2021)
(I) Prof. Dr. apt. Syamsudin, M.Biomed; Prof. Drh. Bambang Pontjo Priosoeryanto
M.S, PhD, APVet, DACCM
(G) 2022
xii
BAB I
PENDAHULUAN
A. LATAR BELAKANG
Menjaga tubuh agar tetap sehat merupakan hal yang sangat penting bagi setiap
orang. Stroke adalah sindroma klinis yang ditandai oleh disfungsi cerebral fokal
atau global yang berlangsung 24 jam atau lebih, yang dapat menyebabkan
disabilitas atau kematian yang disebabkan oleh perdarahan spontan atau suplai
darah yang tidak adekuat pada jaringan otak (1). Stroke merupakan penyakit
penyebab kematian terbanyak kedua dan penyebab disabilitas terbanyak ketiga.
Kematian terkait stroke secara global sebanyak 70%-87% terjadi pada negara
berkembang. Negara Asia kejadian stroke iskemik 70% berbeda dengan negara
maju stroke iskemik sekitar 90%. Data Riset Kesehatan Dasar (Riskesdas)
pravelensi stroke tahun 2018 di Indonesia berdasarkan diagnosis dokter pada
penduduk umum per 1.000 penduduk Indonesia mengalami stroke per 2018. Di
Amerika Serikat, kelompok populasi kulit hitam memiliki resiko mengalamistroke
1,49 kali daripada populasi kulit putih (1).
Otak merupakan organ yang sangat bergantung dengan oksigen dan glukosa.
Peristiwa ini menyebabkan mekanisme eksitotoksisitas dengan berkurangnya
adenosine triphosphate (ATP), akibatnya terjadi edema sitotoksik. Hal ini juga
mengakibatkan peningkatan pelepasan glutamat dengan meningkatnya Ca2+ dan
kemudian meningkatkan kerusakan mitokondrial, membran sel, sitoskeleton,
fragmentasi DNA, dan produksi radikal bebas sehingga menyebabkan kematian sel
neuron. Meningkatnya radikal bebas juga mengakibatkan kerusakan sel endotel
sawar darah otak (2).
Radikal bebas merupakan molekul yang memiliki satu atau lebih elektron
tidak berpasangan dan bersifat tidak stabil, berumur pendek serta sangat reaktif
untuk menarik elektron molekul lain di dalam tubuh yang menyebabkan kerusakan
biomolekul dengan merusak integritas lipid, protein dan DNA yang mengarah pada
peningkatan stres oksidatif seperti penyakit neurodegeneratif,
1
2
penyakit- penyakit kardiovaskular, penuaan dini, juga kanker (3). Radikal bebas
memiliki reaktivitas tinggi yang mengakibatkan terbentuknya senyawa radikal
baru. Jika senyawa radikal baru yang terbentuk tersebut kemudian bertemu dengan
senyawa lain, maka akan terbentuk lagi senyawa radikal yang baru (4). Bila
senyawa yang diikat oleh radikal bebas bersifat kovalen (biomakromolekul seperti
lipid, protein, DNA) maka dampaknya berbahaya, yaitu terjadi kerusakan struktur
dan fungsi sel hingga menyebabkan gangguan sistem kerja organ tubuh (5).
Radikal bebas di dalam tubuh akan memicu peningkatan stres oksidatif. Stres
oksidatif adalah suatu kondisi akibat adanya ketidakseimbangan antaraproduksi
radikal bebas dengan sistem pertahanan (antioksidan) di dalam tubuh. Ketika tubuh
mengalami stres oksidatif, maka terjadi peningkatan level Reactive Oxygen Species
(ROS). Reactive Oxygen Species (ROS) dalam jumlah normal memiliki peran pada
proses fisiologis seperti biosintesis hormon, sistem pertahanan, fertilisasi dan
sinyal seluler. Apabila tubuh mengalami stres oksidatif, maka terjadi produksi
ROS yang berlebihan yang dapat menghancurkan keseimbangan redoks internal
sehingga menyebabkan kerusakan jaringan dalam tubuh (6).
Antioksidan merupakan senyawa yang dapat menetralkan radikal bebas
sehingga mampu mencegah kerusakan sel dan meningkatkan imunitas tubuh.
Antioksidan memberi perlindungan endogen dan eksogen dengan menangkap
radikal bebas serta mampu menghambat oksidasi molekul lain. Antioksidan dapat
memberi perlindungan dari ROS, juga mencegah berbagai penyakit degeneratif
seperti diabetes, kanker. Imunitas tubuh yang baik sangat dibutuhkan untuk
mempertahankan kesehatan, seperti saat tubuh mengalami stres oksidatif (7).
Trimetiltin klorida (TMT) merupakan zat yang terdapat pada polivinil iii
klorida (PVC) dan produk silikon seperti peralatan dapur, kemasan makanan, dan
fungisida. Toksisitas trimetiltin dapat menyebabkan kerusakan pada korteks
serebral dan batang otak serta paparan trimetiltin dalam jangka panjang
menyebabkan trimetiltin terakumulasi dalam tubuh. Trimetiltin yang masuk ke
dalam tubuh memberikan efek toksik terutama pada sel saraf menyebabkan
3
kondisi neurotoksisitas. Trimetiltin menyebabkan kerusakan sel, sel neuron yang

terpapar oleh trimetiltin dapat menyebabkan terjadinya stress oksidatif sehingga
mempengaruhi jumlah dan kerusakan pada sel serta fungsi motorik (8).
Moringa oleifera atau daun kelor adalah familia Moringaceae. Leone dkk
(2015) dalam penelitiannya mengemukakan bahwa daun kelor merupakan sumber
senyawa polifenol yaitu flavonoid, flavonoid utama yang ditemukan pada daun
kelor adalah kuersetin. Kandungan ini memiliki efek antioksidan yang memberi
perlindungan endogen dan eksogen dengan menangkap radikal bebas (9).
Phyllanthus niruri atau meniran memiliki banyak manfaat. Ekstrak metahol
dan meniran dapat meningkatkan aktivitas antioksidan pada hati, ginjal, dan otak
tikus. Dapat diduga dapat menghambat peroksidasi lipid dan mencegah sintesis
superoksida. Kandungan utama dari meniran adalah filantin yang dapat berkhasiat
sebagai antioksidan. Selain sebagai antioksidan meniran juga berkhasiat sebagai
analgetik, anti radang (10).
Nigella sativa atau jintan hitam mempunyai potensi antioksidan dengan
mempunyai radical scavenging yang efektif pada peroksidasi lipid nonenzimatis
dan degradasi deoxyribose. Mekanisme jintan hitam dalam menetralkan Reactive
Oxygen Species (ROS) dengan meningkatkan kerja enzim-enzim antioksidan
dalam tubuh serta menekan peroksidasi lipid (11).
Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui perbaikan sel neuron serta fungsi
motorik dari poliherbal x pada tikus model stroke iskemik.
B. RUMUSAN MASALAH
Berdasarkan latar belakang yang telah dipaparkan di atas, penulis merumuskan
masalah penelitian sebagai berikut :
1. Apakah ada pengaruh pemberian poliherbal x terhadap penurunan sel neuron
pada tikus model stroke iskemik ?
2. Apakah ada pengaruh pemberian poliherbal x terhadap perbaikan fungsi
motorik pada tikus model stroke iskemik ?
4
C. TUJUAN PENELITIAN
1. Mengetahui pengaruh pemberian poliherbal x terhadap penurunan sel neuron
pada tikus model stroke iskemik.
2. Mengetahui pengaruh pemberian poliherbal x terhadap perbaikan fungsi
motorik pada tikus model stroke iskemik.
D. MANFAAT PENELITIAN
1. Memberikan data informasi ilmiah bagi pengembangan poliherbal x mengenai
efek terhadap sel neuron dan fungsi motorik pada tikus model stroke iskemik.
2. Memberikan informasi guna pengembangan bahan alam sebagai sumber bahan
baku obat dalam penelitian.
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
A. KELOR (Moringa oleifera L.)

1. Deskripsi/ Uraian Tanaman
Kelor tumbuh di daerah tropis, berasal dari India bagian barat dan tersebar di
wilayah Pakistan, Bangladesh, dan Afghanistan hingga meluas ke Indonesia.
Kelor tumbuh subur mulai dari dataran rendah sampai ketinggian 700 meter
diatas permukaan laut dengan metode penyemaian langsung maupun metode
stek batang. Kelor dapat tumbuh pada semua jenis tanah dan tahan terhadap
musim kering dengan toleransi terhadap kekeringan sampai 6 bulan. Kelor
dibudidayakan sebagai tanaman sayuran (12).
a. Akar
Akar tanaman kelor berupa akar tunggang dan berwarna putih.
b. Batang
Kelor memiliki jenis batang berkayu sehingga batang keras dan kuat.
Bentuk batang bulat dan permukaannya kasar. Arah tumbuh batang lurus
ke atas atau tegak lurus. Percabangan pada batangnya berupa simpodial
yaitu batang pokok sulit ditentukan karena dalam perkembangannya batang
pokok menghentikan pertumbuhannya atau mungkin pertumbuhannya
kalah besar dan kalah cepat dibandingkan cabangnya.
c. Daun
Daun kelor berbentuk bulat telur tetapi dengan tepi daun rata, panjang 1-2
cm, lebar 1-2 cm, bersusun majemuk menyirip gasal rangkap tiga tidak
sempurna dalam satu tangkai, bertangkai panjang. Susunan tulang daun
menyirip dan memiliki satu ibu tulang tersusun dari pangkal ke ujung,
dan merupakan terusan tangkai daun. Tepi daun rata, permukaannya licin,
dan berselaput lilin.
d. Bunga
Bunga kelor ada yang berwarna putih, putih kekuning-kuningan.
5
6
Umumnya di Indonesia bunga kelor berwarna putih kekuning-kuningan.

Tudung pelapah Bunga berwarna hijau dan mengeluarkan aroma bau
semerbak. Bunga muncul pada ketiak daun dan bertangkai panjang. Bunga
terkumpul dalam pucuk lembaga dibagian ketiak dan tudung pelepah.
e. Buah atau Polong Kelor
Buah kelor berbentuk panjang dan segitiga dengan panjang sekitar 20-60
cm, berwarna hijau ketika masih muda dan berubah menjadi coklat ketika
tua. Ketika kering polong membuka menjadi 3 bagian. Dalam setiap polong
rata-rata berisi antara 12-35 biji.
f. Biji
Biji kelor berbentuk bulat dan terdapat dalam buah kelor. Biji kelor
berwarna hijau terang saat masih muda (12).
2. Klasifikasi Tanaman
Gambar II. 1 Daun Kelor (Moringa oleifera) (12)

Kelor (Moringa oleifera) adalah tanaman yang berasal dari genus Moringa
dan termasuk dalam suku Moringaceae dengan klasifikasi sebagai berikut
(12) :
Kingdom : Plantae
Division : Magnoliophyta
Class : Magnoliopsida
Ordo : Brassicales
Family : Moringaceae
Genus : Moringa
Species : Moringa oleifera Lam
7
3. Nama Daerah Tanaman (12)

Jawa : Kelor
Bali : Kelor
Nusa Tenggara : Parongge (Bima), Kawona (Sumba)
Maluku : Kirol (Buru), Kelo (Ternate,Tidore)
Sumatera : Murong (Aceh), Munggai (Sumatera Barat)
4. Kandungan Kimia Daun Kelor
Kandungan kimia daun kelor diantaranya adalah kadar air sebesar 94,01%,
protein 22,7%, lemak 4,65% karbohidrat 51,66% serat 7,92% dan kalsium 350-
550 mg. Daun kelor juga mengandung metabolit sekunder yaitu alkaloid,
flavonoid, steroid, tanin, triterpenoid, dan saponin (13). Kuersetin merupakan
senyawa aktif utama pada daun kelor. Kuersetin disebut juga penta hidroksil
flavonol (14). Aktivitas antioksidan dari daun kelor adanya kandungan
flavonoid dan triterpenoid.
a. Flavonoid
Flavonoid umumnya terdapat di dalam tumbuhan yang berikatan dengan
gula sebagai glikosida dan aglikon. Flavonoid memiliki efek biologisdalam
sel tubuh yang berperan dalam kesehatan manusia. Beberapa flavonoid,
terutama kuersetin, merupakan antioksidan yang kuat. Kuersetin adalah
golongan flavonol yang paling banyak terdapat dalam tanaman, sifatnya
paling aktif dibanding senyawa flavonol lainnya. Kuersetin dapat
mengurangi risiko kanker, penyakit jantung dan stroke. Kuersetin telah
diteliti dan terbukti memiliki aktivitas anti peradangan (antiinflamasi),
karena langsung menghambat penyebab utama dari proses peradangan
tersebut (15).
Gambar II. 2 Struktur Flavonoid (15).

8
b. Triterpenoid
Triterpenoid adalah senyawa tidak berwarna, berbentuk kristal, memiliki
titik leleh yang tinggi dan bersifat optic aktif, mempunyai kerangka karbon
yang berasal dari 6 satuan isoprene dan secara biosintesis ditununkan dari
hidrokarbon C30 asiklik, yang diklasifikasikan menjadi 4 golongan yaitu
triterpene, steroid, saponin, dan glikosida jantung (16).
5. Farmakologi Tanaman
a. Antioksidan
Hasil penelitian Leone dkk menunjukkan bahwa daun kelor segar
mengandung senyawa fenol sebesar 3,4%. Hasil ekstraksi menggunakan
etanol dan methanol diperoleh kandungan antioksidan sebesar 65,1% dan
66,8% sedangkan ekstraksi aqua dengan etanol dan aqua denganmethanol
diperoleh kandungan antioksidan sebesar 89,7% hingga 92,0%. Adanya
senyawa saponin juga dapat menungkatkan antioksidan dan melawan
radikal bebas (17).
b. Antiinflamasi
Daun kelor telah terbukti memiliki banyak senyawa antiinflamasi. Daun
kelor dapat menghambat pembentukan nitrat oksida (NO) meskipun dapat
berbeda antarindividu satu dengan yang lainnya. Adanya senyawa
quercetin dapat menghambat aktivitas NF-Kb. Senyawa isothiosianat yang
diisolasi dari daun kelor secara signifikan dapat menurunkan ekspresi gen
serta menghambat pembentukan nitrat oksida, interleukin, dan TNF (17).
B. MENIRAN (Phyllanthus niruri)

1. Deskripsi/Uraian Tanaman Meniran
Meniran merupakan tumbuhan yang tersebar luas banyak di belahan dunia.
Meniran biasa hidup berdampingan dengan tanamana budidaya seperti padi,
gandum sehingga biasa dianggap sebagai gulma. Tanaman ini merupakan
herba yang tumbuh secara liar. Berbentuk bulat-bulat, cabang kecil, dan
simetris berbentuk seperti daun yang menyerupai bulu. Setiap daun kecil
9
membawa sebuah bunga dibawahnya, tegak dengan ukuran 30 hingga 60 cm.

Buahnya seperti kapsul, agak rata dan sangat kecil, dengan diameter 2-3 mm.
Akar tunggang panjang dengan sedikit cabang (18).
a. Batang
Tanaman meniran memiliki batang yang tumbuh tegak. Maka dari itu,jika
dilihat sekilas batangnya terlihat kokoh padahal agak lemah dan mudah
patah. Selain itu, batang tanaman ini tidak memiliki getah dan bentuk
batangnya bulat sempurna. Semakin tinggi akan dipenuhi dengan cabang
yang berwarna hijau.
b. Daun
Daun meniran memiliki ciri bersirip. Hampir semua jenis tanaman ini
pasti memiliki bentuk daun yang sama. Sedangkan jumlahnya selalu genap
dan di setiap tangkai terdapat daun majemuk yang bentuknya bulat telur
(oval). Daun meniran memiliki ukuran panjang berkisar 3-5 mm.
Sedangkan untuk ukuran lebar mencapai 3 mm. Apapun bentuk ukuran
daun, pasti di setiap bagiannya terdapat bintik samar berwarna merah.
c. Bunga
Tanaman meniran memiliki bunga ganda yaitu, bunga jantan dan bunga
betina. Sejatinya, kedua bunga ini memiliki warna yang sama yaitu putih.
Cuma perbedaannya adalah terletak pada tempat tumbuhnya. Jika bunga
jantan biasanya tumbuh di bagian bawah ketiak daun. Sedangkan bunga
betina tumbuh di atas ketiak daun. Sekalipun memiliki bunga ganda,untuk
pembiakan tanaman tetap menggunakan biji.
d. Buah dan Biji
Tanaman meniran juga memiliki buah yang berbentuk bulat pipih. Ukuran
diameternya tidak terlalu besar hanya 2-3 cm saja. Morfologiyang
berikutnya adalah tekstur buah licin berwarna kuning. Biasanyabuah ini
menempel pada tangkai daun dan agak sedikit ke bagian sela- sela.
Sedangkan untuk biji tanaman meniran teksturnya keras dan bentuknya
seperti ginjal manusia (18).
10
Gambar II. 3 Meniran (Phyllanthus niruri) (19).

Meniran (Phyllanthus niruri) sebagai gulma tanaman padi yang keberadaannya
tidak dikehendaki, walaupun sebagian masyarakat sudah mengenal dan
menggunakan meniran sebagai salah satau tanaman berkhasiat obat. Klasifikasi
tanaman :
Kingdom : Plantae
Divisi : Magnoliophyta (Spermatophyta)
Sub Divisi : Magnoliophytina (Angiospermae)
Class : Magnoliatae (Dicotyledoneae)
Ordo : Euphorbiales
Genus : Phyllanthus
Species : Phyllanthus niruri L. (18).
3. Nama Daerah Tanaman (18)
Meniran juga dikenal dengan nama-nama daerah lain.
Sumatera : Sidukung anak
Jawa : Meniran, Memeniran
Sulawesi : Bolobungo
Maluku : Balalang babiji
4. Farmakologi Meniran
Meniran memiliki banyak manfaat dalam bidang kesehatan yaitu sebagai
antioksidan, antibiotik, hepatoprotektor, antipiretik, antitusif, antiplatelet,
antiinflamasi, antivirus, diuretik, dan immunostimulant. Mekanisme flavonoid
dengan cara menangkap radikal bebas, memutus rantai radikal bebas, mengikat
logam, menghambat enzim oksidase. (20).
11
5. Kandungan Kimia
Meniran mengandung berbagai unsur kimia yaitu lignan, terpen, flavonoid,
lipid, benzonoid, steroid. Komponen lainnya berupa tanin, vitamin C, vitamin
K. Serta banyak mengandung mineral terutama kalium, damar, dan zat
penyamak. Kandungan flavonoid pada meniran yaitu kuersetin, rutinin
kuersitrin. Sedangkan kandungan lignin yaitu phyllanthin, hypophyllanthin,
niranthin (21).
C. JINTAN HITAM (Nigella sativa)

1. Deskripsi/Uraian Tanaman Jintan Hitam
Jintan hitam dikenal baik di Timur Tengah maupun Asia Tengah di Indonesia
kita menganal habbattussauda dengan nama jintan hitam dalam Bahasa Inggris
disebut black seed. Jintan hitam merupakan tanaman yang tumbuh di seluruh
bagian dunia terutama di Timur Tengah, Arab Saudi, dan Turki.
a. Batang
Tanaman jintan sendiri memiliki tinggi yang dapat mencapai sekitar 20 –
50 cm. Batang dari tanaman ini tegak, berkayu dan memiliki bentuk yang
bulat menusuk.
b. Bunga
Bunga yang terdapat dalam tanaman jintan hitam memiliki bentuk yang
beraturan dengan warna bunganya antara lain biru pucat bahkan hampir
terlihat putih, merah muda, ungu muda, dan kuning.
c. Daun
Bentuknya runcing, bercabang dan bergaris. Panjang daun bisa mencapai
2,5 – 5,0 cm. Daun jintan ini bisa terkadang merupakan daun tunggal
ataupun daun majemuk dengan posisinya bisa tersebar maupun saling
berhadapan. Di permukaan daun jintan juga terdapat bulu yang halus.
d. Buah
Buah yang berbentuk bumbung atau buah kurung dan memiliki bentuk
bulat panjang. Buah jintan ini memiliki tekstur yang keras seperti buah
buni, bentuknya agak besar, menggembung dan berisi sekitar 3 – 7 unit
12
folikel yang mana masing-masingnya berisi banyak sekali biji dan benih.
e. Biji
Biji jintan hitam berada didalam buah. Bila telah matang, maka buah akan
terbuka dan bijinya akan terkena udara sehingga akan berubah warna
menjadi hitam. Biji ini berukuran kecil, bentuknya lonjong dan bersudut
dengan panjang 2 – 3,5 mm, dan mempunya lebar berkisar 1 – 2 mm (22).
Gambar II. 4. Jintan hitam (Nigella sativa) (23).

Kingdom : Plantae
Divisi : Magnoliophytina (Spermatophyta)
Kelas : Magnoliatae (Dicotyledoneae)
Ordo : Ranunculales
Famili : Ranunculaceae
Genus : Nigella
Spesies : Nigella sativa (22).
3. Nama Daerah Tanaman
Nama atau sebutan jintan hitam ini berbeda-beda setiap wilayah Negara
misalnya di Kawasan Negara Barat tanaman ini sering disebut black carraway,
black seeds, sedangkan di negara Perisa dinamakan Zhonais dalam Bahasa
Hindi kalonji. Negara Malaysia dan Indonesia tanaman ini mempunyai nama
jintan hitam (22).
4. Farmakologi Jintan Hitam
Kegunaan dari jintan hitam yaitu sebagai analgetik, antiradang, antihistamin,
antikanker, antioksidan, antialergi, antivirus, antiparasit, merangsang imun
(24).
13
5. Kandungan Kimia
Kandungan kimia dalam jintan hitam adalah air, protein, lemak, kalsium,
vitamin A, vitamin B2, asam askorbat, niasin, dan asam amino seperti alanin,
arginin, isoleusin, lisin, triptofan, tirosin, asparagin, glisin, asam glutamat.
Kandungan utama jintan hitam adalah Thymoquinone (TQ), Dithymoquinone
(DTQ), Thymohidroquinone (THQ), dan Thymol (THY) yang berperan
sebagai antioksidan. Zat aktif dalam jintan hitam adalah Thymoquinone (25).
D. STROKE ISKEMIK
1. Definisi Stroke Iskemik
Stroke adalah sindroma klinis yang ditandai oleh disfungsi cerebral fokal atau
global yang berlangsung 24 jam atau lebih, yang dapat menyebabkan
disabilitas atau kematian yang disebabkan oleh perdarahan spontan atau suplai
darah yang tidak adekuat pada jaringan otak. Sementara itu, stroke iskemik
merupakan disfungsi neurologis yang disebabkan oleh infark fokal serebral,
spinal maupun retinal. Stroke iskemik ditandai dengan hilangnya sirkulasi
darah secara tiba-tiba pada suatu area otak, dan secara klinis menyebabkan
hilangnya fungsi neurologis dari area tersebut. Stroke iskemik akut disebabkan
oleh thrombosis atau emboli pada arteri cerebral (1).
2. Tanda dan Gejala Stroke Iskemik
Mempertimbangkan stroke pada beberapa pasien dengan defisit neurologis
atau penurunan kesadaran. Tanda gejala umum stroke meliputi (26):
a. Penurunan kesadaran
b. Kelemahan otot wajah
c. Vertigo
d. Defisit lapang pandang
Stroke iskemik akut pada pasien tertentu dokter harus melakukan
pemeriksaan neurologis pada pasien stroke iskemik akut meliputi :
a. Mengkonfirmasi adanya gejala stroke
b. Melakukan observasi peningkatan ataupun penurunan kondisi umum
pasien
14
c. Menetapkan derajat keparahan stroke menggunakan skor dan pemeriksaan

neurologis terstruktur.
Untuk pemeriksaan neurologis harus difokuskan pada kondisi pasien
stroke iskemik akut. Komponen penting pemeriksaan neurologis pasien dengan
sindroma stroke meliputi :
a. Pemeriksaan saraf cranial
b. Fungsi motorik
c. Fungsi sensorik
d. Fungsi cerebellum
e. Refleks tendon
3. Diagnosis
Pencitraan radiologi adalah hal darurat dan esensial uuntuk evaluasi stroke
iskemik akut. Computed Tomogrfaphy (CT) scan non-kontras merupakan
modalitas pencitraan yang sering digunakan karena ssangat efektif pada
kondisi akut dan kedaruratan pasien yang dicurigai mengalami stroke iskemik
akut. Beberapa teknik pencitraan neurologis otak yang digunakan dalan kondisi
darurat stroke (26) :
a. CT angiography dan CT perfusion scanning
b. Magnetic resonance imaging (MRI) modalitas Difufusion Weighted
Imaging (DWI)
c. Carotid subtraction angiography
Pemeriksaan laboratorium untuk diagnosis dan evaluasi stroke iskemik
akut meliputi :
a. Hitung darah lengkap
b. Pemeriksaan biokimia
c. Studi koagulasi
d. Biomarker jantung
e. Skrining toksikologi
4. Tatalaksana
Tujuan tatalaksana darurrat pasien stroke iskemik akut dalam 60 menit pertama
sejak tiba di fasilitas kesehatan atau instalasi gawat darurat adalah melakukan
Tindakan sebagai berikut (26):
15
a. Menilai Airway, Breathing, dan Circulation

b. Melakukan hingga tuntas penilaian dan evaluasi awal
Terapi stroke iskemik meliputi terapi fibrinolitik, obat-obatan
antiplatelet. Tatalaksana kondisi komorbid meliputi :
a. Menurunkan demam
b. Koreksi hipotensi
c. Koreksi hipoksia
d. Koreksi hipoglikemia
e. Tatalaksana aritmia jantung
5. Patofisiologi Stroke Iskemik
Berkurangnya aliran darah ke otak menyebabkan hipoksemia disebagian otak
yang selanjutnya akan menimbulkan reaksi berantai dan dapat menyebabkan
kematian neuron. Secara umum daerah iskemik otak terdiri dari bagian core
dan penumbra. Iskemik otak meyebabkan berbagai perubahan sel neuronyang
terjadi dalam 4 tahapan yaitu (27):
a. Tahap pertama
Tahap satu terdiri dari penurunan aliran darah, pengurangan O2, kegagalan
energi.
b. Tahap kedua
Tahap kedua terdiri dari eksitotoksitas.
c. Tahap ketiga
Tahap ketiga adalah inflamasi.
d. Tahap keempat
Tahap keempat yaitu apoptosis.
E. TRIMETILTIN KLORIDA (TMT)

Trimetiltin Klorida adalah salah satu senyawa organotin dengan rumus kimia
(CH3)3Sn yang paling banyak digunakan dalam bidang industri dan pertanian.
Trimetiltin tersebar luas di tanah, sistem perairan, bahan makanan dan barang-
barang rumah tangga. Trimetiltin memiliki fungsi sebagai penstabil panas plastik
yang baik dan fungisida dalam pertanian (28). Trimetiltin dalam tubuh manusia
16
dapat menyebabkan degenerasi saraf khususnya hippocampus. Intoksikasi TMT

dapat menimbulkan defisit perilaku dan kognitif yang berat pada manusia dan
hewan coba, seperti kecacatan memori, kebingunan, kejang, insomnia, dan depresi
(29).
Paparan TMT didalam tubuh meningkatkan level Reactive Oxygen Species
(ROS) dan nitric oxide (NO) menyebabkan proses apoptosis sel. Trimetiltin
menginduksi kerusakan sel melalui mekanisme peningkatan stress oksidatif,
peningkatan kalsium intrasel, dan kerusakan mitokondria. Stress oksidatif
meningkatkan produksi Reactive Oxygen Species (ROS). Kerusakan mitokondria
yang diakibatkan oleh paparan TMT ke protein stanin menyebabkan peningkatan
pelepasan sitokrom-c dan aktivasi capcase. Paparan TMT pada retikulum
endoplasma menyebabkan terjadinya peningkatan kadar kalsium yang
menstimulasi peningkatan calpain dan cathepsin D sehingga menginduksi
terjadinya apoptosis sel (30).
Gambar II.5 Patogenesis Trimetiltin (29)
F. SISTEM SARAF
1. Definisi Sistem Saraf
Sistem saraf manusia berperan dalam mengontrol seluruh aktivitas manusia.
Sistem saraf terbagi menjadi sistem saraf pusat dan sistem saraf perifer.Sistem
saraf pusat menerima dan memberikan perintah dari dan kepada
17
sistem saraf perifer untuk menjalankan seluruh kegiatan yang hendak

dilakukan. Sistem saraf pusat terdiri dari serebrum, serebelum, batang otak, dan
korda spinalis. Sistem saraf perifer terdiri dari 12 pasang nervus kranialis dan
31 pasang nervus spinalis. Sistem saraf secara keseluruhan memilikisuatu unit
fungsional yang disebut neuron. Neuron berfungsi sebagai penerima dan
pemberi respon terhadap berbagai perubahan yang terjadi pada lingkungan
(31).
2. Anatomi Otak
Serebrum atau otak besar dibagi menjadi dua hemisfer oleh fisura
longitudinalis serebri. Setiap hemisfer terbagi menjadi 4 lobus, yaitu lobus
frontalis, parietalis, oksipitalis, dan temporalis.
Gambar II. 6 Anatomi otak (31).

Pembagian area korteks otak didasarkan pada peta sitoarsitektural
korteks serebri Brodmann, seperti pada gambar II.6. Area korteks primer dibagi
menjadi 2. Pertama, area korteks somatosensorik primer terletak di girus
postsentralis lobus parietalis, berfungsi untuk persepsi terhadap rasa nyeri,
suhu, dan sensasi somatik. Kedua, area korteks motorik primer, terletakdi girus
presentralis lobus frontalis dinsing anterior sulkus sentralis berfungsi sebagai
tempat asal gerakan volunter (32).
18
Gambar II.7. Pembagian korteks otak (32).

3. Suplai Darah Arteri Otak
Otak besar atau serebrum mendapatkan suplai darah dari arteri vertebralis dan
arteri karotis interna. Cabang-cabang kedua arteri tersebut yang memberikan
suplai darah ke otak. Arteri karotis interna berasal dari arateri karotis komunis
yang merupakan cabang aorta. Arteri ini memberikan suplai ke tiga per lima
bagian serebrum. Arteri karotis interna masuk ke dalam otak melalui sinus
kavernosus dan bercabang menjadi arteri komunikans posterior, arteri serebri
anterior. Seluruh pembuluh darah yang memberikan suplai darah ke otak
memiliki banyak sistem kolateral. Sistem kolateral bertujuan agar otak tetap
mendapatkan suplai oksigen dan nutrisi apabila salah satu pembuluh darah
mengalami gangguan (33).
4. Histologi Otak
Korteks pada hemisfer otak memiliki 6 lapisan otak beserta komponennya
meliputi (34):
a. Lapisan pertama ialah lamina molekularis yang dilapisi jaringan ikat otak
yang halus. Bagian tepi lamina molekularis terdiri dari sel neuron yang
tersusun horizontal.
b. Lapisan kedua adalah lamina granularis eksterna yang terdiri dari berbagai
jenis sel neuroglia dan sel piramid kecil.
c. Lapisan ketiga yaitu lamina piramidalis eksterna dimana sel piramid yang
berukuran sedang mendominasi dilapisan ini.
19
d. Lapisan keempat lamina granularis interna yang merupakan suatu lapisan

tipis dan terdiri dari granular kecil, beberapa sel piramid, dan berbagai
neuroglia yang membentuk hubungan yang kompleks dengan sel piramid.
e. Lapisan kelima ialah lamina piramidalis interna, lapisan ini terdiri banyak
sel neuroglia dan sel piramid terbesar.
f. Lapisan terdalam yaitu lamina multiformis, lamina ini terdiri dari
campuran sel dalam berbagai bentuk dan ukuran, sel granula.
Gambar II.8 Lapisan korteks otak (34).

Sistem saraf pusat terdiri dari sel saraf yaitu neuron dan sel penunjang
atau disebut sel glia. Neuron berfungsi untuk menjalankan impuls saraf,
sedangkan sel glia berfungsi untuk memberikan dukungan dan melindungi
neuron. Neuron terdiri dari badan sel (perikarion) dan beberapa prosesus.
Prosesus pendek dan banyak yang berfungsi menerima impuls saraf adalah
dendrit. Satu prosesus panjang yang berfungsi untuk melanjutkan impulssaraf
ke neuron yang lain disebut akson (35).
Neuron memiliki kemampuan untuk merespon stimuli yang berupa
impuls listrik. Sinyal dapat ditransmisikan melewati jalur yang sangat panjang
antara sistem saraf pusat dengan organ lain ditubuh. Apabila diamati secara
makroskopis dan mikroskopis, saraf pusat terdiri dari substansia alba dan
grisea. Substansia alba terdiri dari akson yang bermielin, sedangkansubstansia
grisea terletak dibagian luar lapisan serebrum.
20
Secara mikroskopis dengan pengecatan Hematoksilin & Eosin neuron

motorik normal (sel piramid) memiliki perikarion yang merupakan bagian yang
terdiri dari nukleus dan sitoplasma. Nukleus neuron berukuran besar ditengah,
bulat atau lonjong, dan berwarna terang. Warna terang pada nucleus terjadi
karena persebaran kromatin yang merata. Sitoplasma mengandung organela,
dan unsur filamen (36).
Gambar II 9 Histopat sel neuron (36)

Aktifitas metabolisme yang tinggi dari neuron ditandai dengan
banyaknya mitokondria pada sitoplasma. Selain itu, didalam perikarion juga
mengandung ribosom, retikulum endoplasma untuk sintesis protein, badan
golgi yang berfungsi memodifikasi protein dan dikeluarka ke membran sel.
Untuk menyalurkan impuls saraf, satu neuron dengan neuron yang lainnya
dihubungkan oleh area kontak khsuus yang disebut sinaps. Terdapat duamacam
sinaps, yaitu sinaps listrik dan sinaps kimia. Sinaps kimia lebih banyak dan
lebih umum dibandingkan sinaps listrik.
Sel glia menempati lebih dari setengah bagian otak. Sel glia otak terdiri
dari oligodendrosit, astrosit, sel ependim, mikroglia. Oligodendrosit memiliki
peran dalam memproduksi selubung myelin untuk insulator listrik. Astrosit
adalah sel glia terbanyak dan berbentuk bintang terdiri dari 2 tipe, yaitu fibrosa
dan protoplasma. Astrosit berfungsi untuk meyangga struktur neuron,
membantu proses pemulihan setelah kerusakan. Sel ependim merupakan sel
epitel pipih selapis yang melapisi ventrikel otak dan berfungsi untuk
21
menghasilakan cairan serebrospinal. Mikroglia adalah sel kecil dengan cabang

pendek yang bersifat fagositik, berperan dalam reaksi peradangan, dan
perbaikan pada sistem saraf pusat (37).
Pada pengecatan Hematoksilin & Eosin yang perlu diperhatikan untuk
mengidentifikasi neuron yang sehat adalah neuron motorik normal memiliki
inti besar ditengah, jelas dan tercat terang. Dendrit memiliki nukelolus yang
gelap, padat, dan sejumlah cabang sel. Akson akan tampak lebih panjang dan
tipis dan muncul dari ruang kosong, dendrit lebih pendek dan tebal. Sitoplasma
tampak memiliki granula kasar (33).
5. Morfologi Kerusakan Neuron
Seluruh mekanisme keruskan yang terjadi akibat stroke iskemik meliputi
eksitotoksisitas, produksi radikal bebas, disfungsi mitokondria, inflamasi,
apoptosis dalam kerusakan sel neuron. Pada pengecatan Hematoksilin & Eosin
sel saraf yang mengalami kerusakan akibat iskemik akan memperlihatkan
gambaran berupa eosinophilic neurons dan red read neuorons. Karakteristik
dan gambaran klasik ditandai dengan perikarion yangmengalami pengkerutan,
nukleus yang mengalami piknosis dan berwarna gelap, dan eosinophil
cytoplasm yaitu sitoplasma menjadi berwarna merah dalam pengecatan.
Perubuhan dengan adanya vakuolisasi jaringan akibat kerusakan neuron.
Gambaran ini sangan berbeda dengan gambaran sel neuron sehat yang
memperlihatkan gambaran sel saraf berupa bintang dengan nukleus yangbesar,
terletak ditengah jelas, dan tercat terang karena kromatin merata serta
nukleolus yang gelap, padat, dan jelas. Morfologi kerusakan neuron ini
merupakan hasil dari apoptosis yang terjadi karena mekanisme kerusakan
akibat stroke iskemik. Pada awal apoptosis, sel akan mengalami pengkerutan
sehingga ukurannya akan nampak lebih kecil dari ukuran normalnya.
Mengecilnya ukuran neuron ini menyebabkan terbentuknya jarak antara
neuron yang mengalami apoptosis dengan jaringan ikat disekitarnya, sehingga
tampak daerah berwarna putih yang disebut vakuolisasi. Perubahan pada
neuron yang rusak berupa mengecilnya ukuran neuron, adanya daerah
22
putih disekitar neuron, sitoplasma yang tampak berwarna gelap, dan nukleus
berwarna keunguan serta sangat padat (38).
6. Mekanisme Perubahan Fungsi Motorik
Pada keadaan fisiologis, impuls motorik untuk gerakan dicetuskan terutama
di girus presentralis lobus frontalis dan area kortikal disekitarnya. Impuls ini
berjalan pada serabut yang panjang melewati batang otak, dan turun ke medula
spinalis. Kemudian impuls ini akan berjalan melewati radiks anterior, pleksus
saraf, kemudian ke saraf perifer dan selanjutnya ke otot-otot rangka. Area yang
bertanggung jawab untuk mengatur fungsi motorik ini disuplai darah oleh arteri
serebri anterior yang merupakan percabangan dari arteri karotis interna.
Apabila terjadi stroke iskemik akan terjadi kelemahan pada kaki
kontralateral. Kelemahan yang terjadi tidak hanya terbatas pada kaki saja dapat
juga mengenai ke lengan dan wajah. Kelemahan pada lengan dapat merupakan
hasil dari infark pada sepertiga anterior dari posterior kapsula interna. Hal ini
disebabkan oleh oklusi arteri kecil yang timbul dari arteri serebri anterior atau
arteri karotis interna. Fungsi motorik juga memilikihubungan yang erat dengan
neuron. Dengan terjadi perbaikan pada neuron sebagai penghantar impuls saraf
maka kualitas fungsi motorik juga meningkat(39).
G. RADIKAL BEBAS
Radikal bebas adalah molekul yang memiliki satu atau lebih elektron tidak
berpasangan yang sifatnya tidak stabil dan sangat reaktif untuk menarik elektron
molekul lain di dalam tubuh dengan merusak integritas lipid, protein dan DNA
sehingga menyebabkan kerusakan biomolekul yang mengarah pada peningkatan
stres oksidatif seperti penyakit neurodegeneratif, Diabetes Mellitus (DM),
penyakit- penyakit kardiovaskular, penuaan dini, juga kanker (3).
Radikal bebas menimbulkan kerusakan sel dengan cara berikut:
1. Mutasi DNA hingga terjadi kerusakan sel.
2. Peroksidasi lipid dari sitosol akan menyebabkan reduksi asam lemak yang
23
disebut sebagai autokatalisis, mengakibatkan kerusakan membran dan organel

sel.
3. Modifikasi protein teroksidasi lewat mediator sulfidril dari beberapa asam
amino labil seperti sistein, metionin, lisin dan histidine, hal ini disebabkan
karena cross linking protein (40).
Radikal bebas sangat berbahaya, sebab radikal bebas memiliki reaktivitas
tinggi yang mengakibatkan terbentuknya senyawa radikal baru. Jika senyawa
radikal baru yang terbentuk tersebut bertemu dengan senyawa lain, maka akan
terbentuk lagi senyawa radikal yang baru, begitu saja seterusnya hingga terjadi
reaksi berantai. Bila senyawa yang diikat oleh radikal bebas bersifat ionik,
dampaknya tidak begitu berbahaya. Namun, apabila senyawa yang diikat oleh
radikal bebas bersifat kovalen (biomakromolekul seperti lipid, protein, DNA)
maka dampaknya semakin parah, akan terjadi kerusakan struktur dan fungsi sel
hingga menyebabkan gangguan sistem kerja organ tubuh (41).
Sumber radikal bebas ada 2, bisa berasal dari proses metabolisme dalam
tubuh (endogen) dan dari luar tubuh (eksogen).
1. Secara endogen, sebagai respon normal dari reaksi biokimia dalam tubuh,
radikal bebas yang terbentuk akan mempengaruhi ekstrasel dan intrasel.
Radikal endogen terbentuk sebagai sisa dari reaksi metabolisme di dalam tubuh
yang meliputi metabolisme protein, karbohidrat dan lemak pada mitokondria,
proses inflamasi, fagosit, xantin oksidase, peroksisom maupun kondisi iskemia
(42).
Tabel II.1 Radikal Bebas Biologis (Endogen) (41)
Kelompok Oksigen Reaktif
O2* Radikal superoksida
OH* Radikal hidroksil
ROO* Radikal peroksil
H2O2 Hidrogen peroksida
1O *
2 Oksigen singlet
NO* Nitrit oksida
HOCl Asam hipoklor
24
Gambar II. 10 Klasifikasi radikal bebas (41)

a. Radikal eksogen antara lain berasal dari asap rokok, polusi, radiasi, sinar
UV, obat, pestisida, limbah industri dan ozon (40).
Gambar II.11 Sumber radikal eksogen (41)

Reaksi pembentukan radikal bebas melalui 3 tahapan yakni inisiasi,
propagasi dan terminasi.
25
1) Tahap inisiasi
Proses ekstrusi dan tekanan pada pemotongan polimer yang akan
menimbulkan radikal alkil yang terjadi pada suhu tinggi. Setelah
oksidasi dimulai, konsentrasi hidroperoksida meningkat. Kemudian
dekomposisi hidroperoksida menjadi sumber utama inisiator radikal.
Penyerapan sinar UV menimbulkan radikal yang disebabkan oleh
hidroperoksida dan senyawa karbonil.
RH → radikal bebas R, ROO, RO, HO
ROOH → RO• + OH•
2ROOH → RO• + ROO• + H2O
ROOR → 2RO•
2) Tahap propagasi
Pada tahap propagasi ini merupakan awal dari pemanjangan rantai

radikal atau perpanjangan reaksi dimana akan terjadi perubahan radikal
bebas menjadi radikal bebas lain.
R• + 3O2 → ROO•
ROO• + RH → ROOH + R•
3) Tahap terminasi
Senyawa radikal akan bereaksi dengan radikal lain sehingga potensi
propagasinya rendah. Akhir dari reaksi propagasi yaitu konversi radikal
peroksi dan alkil ke non radikal sehingga mengurangi perpanjangan
rantai kinetik.
R• + R’ • → RR
R• + ROO• → ROOR
ROO• + ROO• → ROOR + O2 (21).
H. STRESS OKSIDATIF DAN REACTIVE OXYGEN SPECIES (ROS)

Radikal bebas di dalam tubuh akan memicu peningkatan stres oksidatif. Suatu
kondisi karena adanya ketidakseimbangan antara produksi radikal bebas dengan
sistem pertahanan (antioksidan) di dalam tubuh dinamakan stres oksidatif. Ketika
tubuh mengalami stres oksidatif, maka terjadi peningkatan level Reactive Oxygen
Species (ROS). Jumlah ROS yang normal dalam tubuh memiliki peran pada proses
fisiologis seperti biosintesis hormon, sistem pertahanan, fertilisasi dan
26
sinyal seluler. Namun, pada kondisi stres oksidatif akan terjadi produksi ROS yang
berlebihan. Kelebihan ROS di dalam tubuh akan menghancurkan keseimbangan
redoks internal sehingga menyebabkan kerusakan jaringan dalam tubuh (6).
Reactive Oxygen Species (ROS) dibagi menjadi 2 kelas yakni Oxygen
centered non radicals dan Oxygen centered radicals. Oxygen centered radicals
meliputi beberapajenis yakni anion superoksida (O2•), radikal hidroksil (OH•),
radikal alkoksil(RO•) dan radikal peroksil (ROO•). Oxygen centered non radicals
meliputi hidrogen peroksida (H2O2) dan oksigen singlet (1O2•) (41). Radikal bebas
juga ROS dapat dibentuk oleh sistem enzim prooksidatif, oksidasilipid, iradiasi,
inflamasi, merokok serta polusi udara (42).
Gambar II.12 Pengaruh ROS terhadap tubuh (43)

Efek dari ROS:
1. DNA
ROS memodifikasi DNA dengan melibatkannya pada degradasi basa, rantai
DNA diputus, mutasi, delesi atau translokasi serta cross-linking dengan
protein. DNA yang termodifikasi bisa menyebabkan terjadinyacarcinogenesis,
penuaan, penyakit neurodegeneratif, kardiovaskular dan gangguan autoimun.
2. Lipid
Reactive Oxygen Species (ROS) menginduksi peroksidasi lipid, mengganggu
susunan membran lipid bilayer sehingga terjadi inaktivasi reseptor ikatan
membran, enzim dan meningkatkan permeabilitas jaringan.
27
3. Protein
ROS mengakibatkan pemutusan rantai protein.
4. Sinyal transduksi Respon inflamasi (43).
I. ANTIOKSIDAN
Antioksidan merupakan senyawa yang dapat menetralkan radikal bebas sehingga
mampu mencegah kerusakan sel dan meningkatkan imunitas tubuh. Antioksidan
dapat menangkap radikal bebas serta mampu menghambat oksidasi molekul lain
sehingga bisa memberi perlindungan endogen dan tekanan oksidatif eksogen.
Antioksidan dapat memberi perlindungan dari ROS, juga mencegah berbagai
penyakit degeneratif seperti diabetes, infark miokard, kanker, mengurangi
progresifitas serta memperbaiki komplikasi kronik yang diakibatkan penyakit
tersebut. Imunitas tubuh yang sangat baik sangat dibutuhkan untuk
mempertahankan kesehatan, seperti saat tubuh mengalami stres oksidatif.
Antioksidan akan melindungi sel-sel dari kerusakan akibat molekul yang tidak
stabil atau radikal bebas. Antioksidan akan mendonorkan elektronnya kepada
molekul radikal bebas sehingga radikal bebas akan menjadi stabil dan reaksi
berantai akan berhenti (44).
Gambar II.13 Siklus yang Menghubungkan Jalur Metabolisme dan Antioksidan (45)
28
Jenis- jenis antioksidan:

1. Antioksidan alami
Antioksidan alami bisa ditemukan pada beberapa jenis buah segar, sayuran
dan rempah- rempah. Misalnya pada daun Pohpohan terkandung flavonoid,
−tokoferol serta β-karoten yang memiliki manfaat sebagai antioksidan.
Tabel II. 2 Beberapa substitusi flavonoid dengan aktivitas antioksidan (44)
Senyawa R3 R5 R7 R8 R2’ R3’ R4’ R5’ C1=C3
Quercetin OH OH OH H H OH OH H +
Miricetin OH OH OH H H OH OH OH +
Kaempferol OH OH OH H H H OH H +
Luteolin H OH OH H H OH OH H +
Apigenin H OH OH H H H OH H +
2. Antioksidan sintetik
Antioksidan sintetik antara lain Propyl gallate (PG), Tertiary butyl
hydroquinone (TBHQ), Nordihydro guaretic acid (NDGA), Butylated
Hydroxyl Anisole (BHA), Butylated Hydroxyrotoluene (BHT).
Tabel II.3 Antioksidan yang diizinkan digunakan dalam makanan (44)
Antioksidan Sinergis
Gum guacic Asam phosphoric
Propil galat Asam tiodipropionat dan diodesil, dilauril, dioctadesil ester
BHA Asam askorbat dan askorbil
BHT Palmitat
TBHP Asam tartarat
TBHQ Lecithin
Ga
J. LANDASAN TEORI
Berdasarkan penelitian yang dilakukan oleh Leone dkk (2015) daun kelor
mengandung senyawa utama yaitu flavonoid. Flavonoid yang utama adalah
kuersetin. Aktivitas antioksidan pada daun kelor yaitu kuersetin memiliki gugus
hidroksil yang dapat mendonorkan atom hidrogen kepada senyawa radikal bebas
dan menstabilkan senyawa oksigen reaktif (ROS). Moringa oleifera juga memiliki
kandungan senyawa fenolik yang menunjukkan efek antioksidan yang lebih kuat
dari vitamin E dan dapat memecah rantai radikal. (14).
Berdasarkan penelitian Woronan dkk (2013) mengenai efek serebroprotektif
dari Moringa oleifera terhadap stroke iskemik bahwa, Moringa oleifera adalah
tanaman yang memiliki aktivitas antioksidan kuat terlindung dari kerusakan otak
dan stress oksidatif pada hewan model stroke (45).
29
Nigella sativa atau jintan hitam mempunyai potensi antioksidan Mekanisme

jintan hitam dalam menetralkan Reactive Oxygen Species (ROS) dengan
meningkatkan kerja enzim-enzim antioksidan dalam tubuh serta menekan
peroksidasi lipid (11).
K. HIPOTESIS PENELITIAN
1. Kapsul poliherbal x yang mengandung Moringa oleifera, Phyllanthus niruri,
dan Nigella sativa memiliki aktivitas antioksidan yang dapat dapat
menetralkan radikal bebas sehingga mampu mencegah kerusakan sel dan
memberi perlindungan dari ROS
dan Nigella sativayang memiliki aktivitas sebagai antioksidan yang mampu
memperbaiki sel neuron yang rusak serta fungsi motorik pada tikus yang
diinduksi stroke iskemik.
BAB III
RANCANGAN PENELITIAN
A. PRINSIP PENELITIAN
Penelitian ini bersifat eksperimental untuk mengetahui adanya perbaikan jumlah
sel neuron otak serta fungsi motorik pada hewan yang diinduksi stroke iskemik.
Kapsul poliherbal onoake yang mengandung Moringa oleifera, Phyllanthus niruri,
dan Nigela sativa diproduksi oleh Nucleus Farma. Hewan uji berupa tikus putih
(Rattus norvegicus) galur Wistar dan dibagi secara random menjadi 7kelompok.
Tikus diaklimatisasi selama seminggu dengan tujuan untuk bisa beradaptasi
dengan lingkungan yang baru, semua kelompok akan diberikan pakan standar.
Selanjutnya setelah selesai dilakukan aklimatisasi, tikus di induksi menggunakan
trimetiltin klorida (TMT), kemudian tikus yang telah diinduksi dilakukan uji fungsi
motorik menggunakan alat Ladder Rung Walking Test. Setelah dilakukan uji fungsi
motorik tikus masing-masing diberi perlakuan. Kelompok normal dan kontrol
negatif tetap diberi pakan standar dan poliherbal x yang sudah dilarutkan dengan
aquadestilata. Kelompok positif diberikan piracetam, dan kelompok perlakukan
lainnya diberikan poliherbal x dengan variasi dosis. Pemberian larutan poliherbal
x dengan cara sonde (oral) dengan variasi dosis 50 mg/KgBB, 100 mg/KgBB, 200
mg/KgBB dan 400 mg/KgBB. Pemberian ekstrak poliherbal x selama 14 hari,
selanjutnya akan dilakukan uji fungsi motorik. Setelah dilakukan uji fungsi
motorik, tikus dieuthanasia danproses pembedahan untuk pengambilan organ otak.
Sampel otak tersebut dibuat preparat untuk diamati jumlah sel neuron otak dibawah
mikroskop.
B. TEMPAT DAN WAKTU PENELITIAN

1. Tempat Penelitian
Penelitian dilaksanakan di Fakultas Kedokteran Hewan Institut Pertanian
Bogor, mellibatkan 2 laboratorium yaitu:
a. Unit Pengelola Hewan Laboratorium untuk pengujian menggunakan
tikus.
30
31
b. Laboratorium Ressang & LC untuk pengamatan sel neuron secara

mikroskopik.
2. Waktu Penelitian
Penelitian ini akan dilakukan mulai bulan Februari-Mei 2022.
C. HEWAN DAN BAHAN UJI

1. Hewan Uji
Hewan yang digunakan pada penelitian ini adalah tikus putih (Rattus
norvegicus) galur Wistar yang diperoleh dari Tikus Rat Klaten dengan kriteria
sebagai berikut.
a. Kriteria Inklusi
1) Tikus jenis Rattus norvegicus wistar berjenis kelamin jantan
2) Umur tikus 2-3 bulan
3) Berat badan tikus 150-200 gram
4) Tikus berwarna putih, sehat, aktif, dan tidak ada kelainan anatomik.
Dipakai 28 ekor tikus putih (Rattus norvegicus) galur Wistar yang
memenuhi kriteria untuk diberi kontrol dan perlakuan, kemudian diambilorgan
otak untuk diuji.
2. Bahan Uji
Poliherbal X yang mengandung Daun kelor (Moringa oleifera), Meniran
(Phyllanthus niruri), Jintan hitam (Nigella sativa).
D. VARIABEL PENELITIAN
1. Variabel bebas
Pemberian Poliherbal X yang mengandung Daun kelor (Moringa oleifera),
Meniran (Phyllanthus niruri), Jintan hitam (Nigella sativa).
2. Variabel terikat
Jumlah sel neuron secara mikroskopis , uji fungsi motorik menggunakan
32
Ladder Rung Walking Test
E. RANCANGAN PENELITIAN
Sejumlah 28 ekor tikus putih (Rattus norvegicus) galur Wistar yang memenuhi
kriteria dibagi secara acak menjadi 7 kelompok. Selama 7 hari diadaptasi di
laboratorium, ditempatkan di kandang yang layak, diberi makan dan minumsesuai
standar. Kemudian pada hari ke-9 diberi perlakuan berbeda pada masing- masing
kelompok. Hari ke-8, tikus diinduksi menggunakan trimetlin dihasilkan model
tikus stroke iskemik. Kontrol positif diberikan Piracetam, kemudian 4 kelompok
diberi ekstrak poliherbal x dengan menggunakan sonde (oral) yang berfungsi
sebagai perlakuan. Setelah diberi eskstrak selama 14 hari tikus dilakukan uji fungsi
motorik menggunakan Ladder Rung Walking Test. Selesai dilakukan uji fungsi
motorik, tikus dieuthanasia dan dilakukan pembedahan organ otak untuk dijadikan
sampel preparat untuk mengamati sel neuron otak.
Kelompok 1 : Kelompok normal yang TIDAK diberi perlakuan 22
Kelompok 2 : Kelompok kontrol negatif TIDAK diberi perlakuan
Kelompok 3 : Kelompok kontrol positif yang diberi piracetam
Kelompok 4 : Kelompok perlakuan diberi Poliherbal-X secara oral dengan
dosis 50 mg/KgBB.
dosis 100 mg/KgBB.
dosis 200 mg/KgBB.
dosis 400 mg/KgBB.
Jadi, dilakukan pengambilan sampel otak pada masing-masing kelompok.
Organ otak diambil pada daerah hipocampus, lalu dibuat preparat dan diperiksa
jumlah sel neuron dengan menggunakan mikroskop.
33
F. Tahap Penelitian
1. Pengajuan protokol kaji etik (Ethical clearance).
2. Penetapan dosis.
3. Persiapan hewan coba (tikus).
4. Induksi stroke iskemik menggunakan trimetlin (TMT).
5. Uji fungsi motorik.
6. Pembuatan larutan poliherbal-x.
7. Pengambilan sampel.
8. Pembuatan preparat otak.
9. Pengamatan mikroskopis & penghitungan sel neuron.
10. Analisis data.
BAB IV
BAHAN, ALAT DAN METODE PENELITIAN
A. BAHAN
1. Bahan uji yang digunakan dalam penelitian adalah Poliherbal ONOAKE yang
mengandung Daun Kelor (Moringa oleifera), Meniran (Phyllanthus niruri),
Jintan Hitam (Nigella sativa) diproduksi oleh Nucleus Farma.
2. Paraformaldehid 4%
3. Pewarnaan Hematoksilin & Eosin
4. Sirup Piracetam
5. Trimetlin Klorida
6. Aquadest.
7. NaCl 0,9%.
8. Ketamin
9. Xylazin
10. Pakan standar
11. Serbuk kayu
B. ALAT
Alat- alat:
1. Pipet Tetes.
2. Beaker Glass.
3. Batang Pengaduk.
4. Lumpang Alu.
5. Spuit 1 mL.
6. Sendok tanduk.
7. Sonde Tikus.
8. Timbangan Tikus.
9. Kandang Kawat.
10. Kulkas Penyimpan Poliherbal-X.
34
35
11. Botol minum tikus.

12. Pot obat.
13. Object glass.
14. Cover glass.
15. Mikroskop.
16. Smart TV.
17. Container box.
18. Cover slide preparate.
19. Set alat bedah.
20. Ladder Rung Walking Test
21. Timbangan Analitik
C. METODE PENELITIAN
1. Pengajuan Protokol Kaji Etik (Ethical clearance)
Protokol etik penelitian ini didaftarkan ke Komisi Etik Institut Pertanian
Bogor.
2. Penetapan Dosis Poliherbal Onoake
Dosis rujukan : 50 mg/KgBB, 100 mg/KgBB, 200 mg/KgBB,
400 mg/KgBB
Asumsi BB tikus : 200 g = 0,2 Kg
Larutan stok polyherbal-x : 2 g/100 mL = 2000 mg/100 mL = 20 mg/mL
a. Dosis 1
50 mg/KgBB
50 mg/KgBB x 0,2 Kg = 10 mg
Volume pemberian = 10 𝑚𝑔 𝑥 1 ml = 0,5 ml
20 𝑚𝑔
b. Dosis 2
100 mg/KgBB
100 mg/KgBB x 0,2 Kg = 20 mg
Volume pemberian = 20 𝑚𝑔 𝑥 1 ml = 1 ml
20 𝑚𝑔
36
c. Dosis 3
200 mg/KgBB
200 mg/KgBB x 0,2 Kg = 40 mg
20 𝑚𝑔
d. Dosis 4
400 mg/KgBB
400 mg/KgBB x 0,2 Kg = 80 mg
20 𝑚𝑔
3. Persiapan Hewan Coba (Tikus)

Hewan yang digunakan dalam penelitian ini adalah tikus putih jantan galur
Wistar dengan kelamin jantan sebanyak 28 ekor yang berumur 2-3 bulan
dengan berat badan 150-200 gram yang diperoleh dari Tikus Rat Klaten. Tikus
dibagi ke dalam 7 kelompok, dimana pengelompokkan tikus dilakukan
randomisasi dengan jumlah minimal per kelompok mengikuti rumus Federer,
yaitu:
(n – 1)(t – 1) ≥ 15
Keterangan:
n = Jumlah replikasi
t = Jumlah perlakuan
Maka : (n – 1)(7 – 1) ≥ 15(n – 1)(5) ≥ 15
(n – 1) ≥ 3,5
n≥4
Sehingga jumlah minimal tikus yang digunakan dalam tiap kelompok
adalah 4 ekor. Tikus diaklimatisasi terlebih dahulu selama tujuh hari untuk
beradaptasi dengan lingkungan baru. Setiap tikus diberi makan dan minum
serta ditimbang berat badannya. Tikus diamati keadaan umumnya. Tikus yang
digunakan dalam penelitian harus sehat dengan tanda-tanda bersih, mata jernih,
tingkah laku normal, dan aktif.
37
Tabel IV.1 Pembagian Kelompok Perlakuan

Kelompok Perlakuan Jumlah Tikus
Kelompok normal Tidak diberi perlakuan 4
Kelompok negatif Induksi stroke Trimetiltin Klorida (TMT) 4
Kelompok positif Piracetam 4
Induksi stroke + poliherbal x 50
Kelompok 1 4
mg/KgBB
Kelompok 2 4
mg/KgBB
Kelompok 3 4
mg/KgBB
Kelompok 4 4
mg/KgBB
4. Induksi Stroke Iskemik

Metode yang digunakan untuk menginduksi stroke iskemik dengan
menggunakan trimetlin. Mekanisme penginduksian stroke iskemik dari
trimetiltin yaitu dengan cara menginduksi kerusakan sel melalui mekanisme
peningkatan stress oksidatif, peningkatan kalsium intrasel, dan kerusakan
mitokondria. Stress oksidatif meningkatkan produksi Reactive Oxygen Species
(ROS). Kerusakan mitokondria yang diakibatkan oleh paparan TMT ke protein
stanin menyebabkan peningkatan pelepasan sitokrom-c dan aktivasi capcase.
Paparan TMT pada retikulum endoplasma menyebabkan terjadinya
peningkatan kadar kalsium sehingga menyebabkan terjadinya apoptosis sel.
Pembuatan larutan Trimetiltin Klorida (TMT) dibuat dengan cara
ditimbang trimetiltin dan dilarutkan dalam NaCl 0,9%. Satu ekor tikus
diberikan Trimetiltin dosis 0,5 mg/KgBB yang dilarutkan dengan 20 ml NaCl
0,9%. Dosis yang diberikan sebesar 0,5 mg/KgBB setelah dilakukan potimasi
pada penelitian. Pemberian dilakukan dengan cara injeksi melalui
intraperitoneal.
5. Uji Fungsi Motorik

Uji fungsi motorik berfungsi untuk menilai fungsi motorik dengan
menggunakan alat Ladder Rung Walking Test. Pada uji ini, tikus berjalan
pada sisi besi berbentuk silinder yang disusun secara teratur dengan jarak
tertentu sepanjang 1 meter. Tikus berjalan diatasnya dan diamati gerakan kaki
kiri, kanan dan langkah tikus. Apabila terpeleset maka merupakan tanda- tanda
kelemahan motorik tikus. Uji fungsi motorik ini dilakukan setelah
38
penginduksian stroke dan setelah diberi ekstrak selama 14 hari. Kemudian

dihitung skor untuk mengetahui fungsi motorik.
Penempatan tungkai dinilai dalam hal penempatan tungkai pada anak
tangga dan penonjolan tungkai diantara anak tangga ketika terjadi kesalahan.
Tabel IV.2 Skoring ladder rung walking test (Metz and Whishaw,2009).
Nilai Jenis Keterangan
Tikus tidak menyentuh anak tangga sehingga
0 Kehilangan total
keseimbangan terganggu dan terjatuh
Tungkai tikus menyentuh besi tetapi tidak dapat
1 Tergelincir dalam menahan beban sehingga terlepas dari besi dan tikus
terjatuh.
Tungkai tikus menyentuh besi lalu terpeleset tetapi
2 Sedikit tergelincir
keseimbangan terjaga sehingga tidak terjatuh
Tungkai diletakkan pada besi tetapi diangkat dengan
3 Penggantian cepat dan dipindahkan ke besi yang lain sebelum
digunakan untuk menahan beban.
Tungkai akan berpijak pada besi tetapi kemudian
ditempatkan pada besi yang lain tanpa menyentuh besi
4 Koreksi pertama. Atau ketika tungkai ditempatkan pada besi
kemudian dengan cepat direposisi sementara pada besi
yang sama.
5 Penempatan sebagian Sebagian tungkai berpijak pada besi (benar sebagian).
Penempatan yang Tengah telapak kaki berpijak tepat pada besi dengan
6
benar berat penuh.
6. Pembuatan Larutan Poliherbal

Pembuatan larutan poliherbal onoake dengan membuka cangkang kapsul.
Kemudian serbuk ditimbang sesuai dengan yang dibutuhkan. Serbuk yang
sudah ditimbang dimasukkan ke dalam lumpang kemudian digerus supaya
homogen. Selanjutnya, ditambahkan aquadest untuk melarutkan serbuk.
Setelah homogen dimasukkan kedalam botol obat.
7. Pengambilan Sampel
Setelah pemberian ekstrak poliherbal selama 14 hari tikus dieuthanasia
dengan menggunakan ketamin dan xylazin. Setelah itu, dilakukan pembedahan
untuk diambil organ tak. Otak kemudian dibilas menggunakan NaCl 0,9%
selanjutnya dimasukkan ke dalam larutan paraformaldehid dengan konsentrasi
4% untuk selanjutnya dilakukan pembuatan preparat otak.
39
8. Pembuatan Preparat Otak

Pemotongan jaringan dilakukan secara koronal, jaringan otak dipotong
menggunakan setebal 5 μm. Pengecatan yang digunakan adalah metode
pengecatan H&E. Pembuatan preparat sampel dilakukan oleh Bagian Patologi
FKH-IPB.
9. Pengamatan Mikroskopis & Penghitungan Sel Neuron
Evaluasi dilakukan dengan menghitung jumlah sel neuron yang rusak.
Sel neuron yang rusak ditandai dengan adanya perikarion yang mengkerut,
nukleus piknosis, dan vakuolisasi. Penghitungan secara kuantitatif dilakukan
dengan menjumlahkan sel neuron yang rusak dalam 5 lapangan pandang dari
preparat yang didapatkan. Dalam melakukan pengamatan digunakan
mikroskop cahaya kamera Olympus dengan pembesaran 50 kali yang
dihubungkan dengan smart tv. Setelah itu penghitungan dilakukan secara
manual dengan menggunakan software countcell. Kemudian sel neuron rusak
yang ditemukan dari 5 lapangan pandang dijumlahkan, lalu dirata-rata dengan
kelompok perlakuan.
10. Analisis Data
Hasil dari penelitian ini akan mendapatkan data jumlah sel neuron dan
fungsi motorik. Data yang diperoleh dari masing-masing kelompok perlakuan
diolah dengan analisis statistik menggunakan Statistical Package For theSocial
Sciences (SPSS). Data yang diperoleh diuji kenormalannya (uji Kolmogrov-
Sminorv) untuk melihat sebaran distribusi data dan diuji homogenitasnya (uji
Levene). Kemudian dilakukan analisis statistic dengan menggunakan uji One
Way Analysis of Variance (ANOVA) dan dilanjutkan analisis post hoc LSD
untuk melihat adanya perbedaan pada tiap kelompok perlakuan. Nilai derajat
kemaknaan adalah p<0,05 pada interval kepercayaan 95%.
BAB V
HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN
A. KAJI ETIK
Pendaftaran kaji etik dilakukan untuk melindungi kesejahteraan hewan coba dan
sebagai sarana untuk memperlakukan hewan coba secara manusiawi yang
diperlukan untuk melindungi hewan-hewan tersebut dari rasa ketidaknyamanan.
Penelitian ini sudah mendapatkan persetujuan kaji etik oleh Komisi Etik Penelitian
Institut Pertanian Bogor dengan Nomor 016/KEH/SKE/VII/2022. (Lampiran 01).
B. HASIL PENELITIAN
1. Hasil Pengukuran Fungsi Motorik
Setelah dilakukan pemeliharaan dan perlakuan selama seminggu, dilakukan uji
tes fungsi motorik berupa ladder rung walking test dengan tujuan untuk
mengamati perubahan dan perbaikan fungsi motorik pada hewan coba.
Pengamatan dilakukan dengan hewan coba melewati anak tangga dari ujung ke
ujung sepanjang satu meter. Setelah didapatkan hasil dengan penempatan
tungkai pada anak tangga dan penonjolan tungkai diantara anak tangga ketika
terjadi kesalahan. Jenis penempatan kaki pada anak tangga dinilai
menggunakan skor penilaian.
Skor kesalahan = 𝑆𝑘𝑜𝑟 𝑇𝑜𝑡𝑎𝑙
x 100%
𝑆𝑘𝑜𝑟 𝑇𝑜𝑡𝑎𝑙 𝐿𝑎𝑛𝑔𝑘𝑎ℎ
40
41
Tabel V.1 Data Hasil Perhitungan Uji Fungsi Motorik
Kelompok Rata-rata ± SD
Normal 40 ± 0
Negatif 75,41 ± 7,4987
Positif 41,82 ± 1,2528
Dosis 50 mg/KgBB 53,92 ± 1,9226
Dosis 100 mg/KgBB 50 ± 0
Dosis 200 mg/KgBB 45,1175 ± 7,2187
Dosis 400 mg/KgBB 40 ± 0
Rata-Rata Fungsi Motorik

Rata-Rata Fungsi Motorik n=4
80 75,41
70
60 53,92
50,00
50 Gambar V.1 Rata-Rata Fungsi Motorik 45,1175
40,00 41,82 40,00
40
30
20
10
0
Normal Negatif Positif Dosis 50 Dosis 100 Dosis 200 Dosis 400
mg/KgBB mg/KgBB mg/KgBB mg/KgBB
Gambar V.1 Rata-Rata Fungsi Motorik

42
Tabel V. 2 Hasil Uji Statistik Fungsi Motorik
Kelompok Rata- Normal Negatif Positif Dosis 50 Dosis 100 Dosis 200 Dosis 400
Rata mg/KgBB mg/KgBB mg/KgBB mg/KgBB
Normal 40,00
Negatif 75,41 *
Positif 41,82 *
Dosis 50 53,92 * * *
mg/KgBB
Dosis 100 50,00 * *
mg/KgBB
Dosis 200 45,11 * *
mg/KgBB
Dosis 400 40,00 * *
mg/KgBB
2. Hasil Olah Data Fungsi Motorik dengan Uji Statistik

Setelah mendapat data hasil pengukuran data diolah dengan uji statistik
menggunakan program Statistical Program Service Solution (SPSS) untuk
mengetahui pengaruh pemberian ekstrak poliherbal x terhadap fungsi motorik
tikus wistar jantan setelah diinduksi trimetiltin. Berdasarkan uji statistik
kenormalan (Kolmogrov-Sminorv) tabel nilai Sig (0.694) > 0,05maka artinya
data terdistribusi normal, sedangkan pada uji homogenitas menggunakan
Levene test didapat signifikansi 0,214 maka artinya data homogen.
Tabel V.3 Hasil Uji Statisik Pengukuran Uji Fungsi Motorik

Pengujian Metode Hasil sig p Nilai α
Normalitas
Kolmogrov-Sminorv 0,694 0,05
Homogenitas
Levene 0,214 0,05
43
Tabel V.4 Hasil Uji Statisik LSD Perbedaan Fungsi Motorik Antar Kelompok
Kelompok Rata-Rata ± SD
Normal 40,00 ± 0 b,c,d,e
Negatif 75,41 ± 7,4987
Positif 41,82 ± 1,2528 a
Dosis 50 mg/KgBB 53,92 ± 1,9226
Dosis 100 mg/KgBB 50,00 ± 0 a,b
Dosis 200 mg/KgBB 45,11 ± 7,2187 a,b,c
Dosis 400 mg/KgBB 40,00 ± 0 a,b,c,d
Keterangan :
a. Tidak terdapat perbedaan bermakna dengan kelompok kontrol normal
b. Tidak terdapat perbedaan bermakna dengan kelompok kontrol positif
c. Tidak terdapat perbedaan bermakna dengan kelompok dosis 100mg/KgBB
d. Tidak terdapat perbedaan bermakna dengan kelompok dosis 200mg/KgBB
e. Tidak terdapat perbedaan bermakna dengan kelompok dosis 400mg/KgBB

44
3. Pembahasan Fungsi Motorik

Pada penelitian ini, induksi trimetiltin diberikan pada tikus putih jantan galur
Wistar dengan maksud mengetahui fungsi motorik tikus, dimana trimetiltin
memiliki mekanisme penyebab stress oksidatif pada otak. Sehingga diamati
fungsi motorik pada tikus pasca induksi trimetiltin dan pasca pemberian
poliherbal selama 14 hari.
Stroke merupakan suatu keadaan dimana terjadi penurunan aliran darah
ke otak yang mengakibatkan kerusakan sel neuron otak, dan perubahan fungsi.
Kerusakan neuron dapat mengakibatkan perubahan pada fungsi tubuh meliputi
gangguan fungsi fokal yang meliputi gejala motorik,berbicara, dan bahasa,
serta gejala global seperti kelumpuhan. Salah satu kerusakan yang terjadi
adalah fungsi motorik, dalam mempertahankan fungsi motorik yang normal
dibutuhkan keutuhan neuron sebagai penyalur impuls saraf. Penurunan fungsi
motorik terjadi akibat kerusakan sel neuron yang terjadi pada daerah girus
presentralis lobus frontalis (korteks motorik primer) yang mengakibatkan
gangguan fungsi motorik (49). Keutuhan sel neuron sangat diperlukan untuk
menyalurkan impuls dari otak sampai ke saraf perifer yang mengatur motorik.
Kerusakan pada neuron yang mengakibatkan menurunnya fungsi motorik.
Penelitian ini untuk mengetahui apakah ekstrak poliherbal x yang
mengandung kuersetin dalam daun kelor, filantin dalam meniran serta
kandungan antioksidan dalam jintan hitam dapat memperbaiki fungsi motorik
pada hewan coba. Penelitian ini menggunakan 28 tikus dengan perlakuan yang
dilakukan yaitu memberikan ekstrak poliherbal selama 14 hari. Setelah
14 hari hewan coba diukur fungsi motoriknya dengan menggunakan uji fungsi
motorik. Uji fungsi motorik dilakukan untuk mengamati kecacatanpada
hewan coba yang mengidap stroke, yaitu ladder rung walking test. Uji ini
dilakukan dengan mengamati terpelesetnya kaki belakang pada tikus akibat
adanya gangguan fungsi motorik.
45
Penelitian ini mengamati perbedaan perlakuan pada dosis poliherbal

yaitu 50 mg/KgBB, 100 mg/KgBB, 200 mg/KgBB, dan 400 mg/KgBB serta
kelompok positif dengan pemberian piracetam. Dengan menghitung skor uji
ladder rung walking test setelah pemberian poliherbal x, sehingga dapatmelihat
perbaikan fungsi motorik pada hewan coba setelah diberikan ekstrak
poliherbal.
Hasil penelitian ini dapat dilihat dalam Tabel. V.1. Dari hasil tersebut
ditemukan bahwa kontrol positif dengan skor kesalahan motorik mendekati
dengan kontrol normal setelah pemberian poliherbal selama 14 hari.Kelompok
kontrol negatif memiliki skor kesalahan fungsi yang lebih tinggi dibandingkan
kelompok lain. Keempat kelompok perlakuan mendapatkan fungsi motorik
yang berbeda, dosis 50 mg/KgBB memiliki skor kesalahan fungsi yang lebih
tinggi dibandingkan kelompok 100 mg/KgBB, 200 mg/KgBB, serta 400
mg/KgBB.
Tabel V.2 hasil uji statistik memperlihatkan ada atau tidaknyaperbedaan
dari masing-masing kelompok perlakuan terhadap fungsi motorik yang diuji
secara statistik menggunakan uji LSD. Hasil yang didapat yaitu kelompok
negatif memiliki perbedaan bermakna dengan kelompok kontrol normal
sehingga dapat diartikan bahwa trimetiltin mampu menyebabkan efek samping
berupa kerusakan pada fungsi motorik ditandai dengan peningkatan kerusakan
gangguan fungsi motorik. Kerusakan motorik yang tinggi disebabkan karena
pemberian trimetiltin pada hewan coba. Mekanisme tersebut dengan adanya
radikal bebas. Radikal bebas akan membentuk ROS sehingga terjadi
neurotoksisitas yang menyebabkan gangguan pada sistem saraf. Akibatnya
fungsi motorik terganggu.
Pada Tabel V.3 didapat hasil pada kelompok dosis 50 mg/KgBB
memiliki perbedaan bermakna dengan 100 mg/KgBB, 200 mg/KgBB, dan
400 mg/KgBB memiliki perbedaan bermakna dengan kelompok negatif.
Kelompok dosis 400 mg/KgBB memiliki perbedaan bermakna dengan
kelompok negatif, tetapi tidak memiliki perbedaan terhadap kelompok normal.
Artinya kelompok dosis 400 mg/KgBB mampu memperbaiki fungsi
46
motorik mendekati kondisi normal. Pada analisis data one-way anova hasil
analisis data 7 kelompok ditemukan signifikan sehingga bisa disimpulkan
bahwa hipotesis (H1) diterima dan H0 ditolak. Dari data tersebut juga
dikatakan bahwa perlakuan pemberian ekstrak poliherbal pada hewan coba
memberikan efek terapeutik dan memperbaki fungsi motorik pada hewancoba.
Fungsi motorik yang diukur melalui uji ladder rung walking test dapat
memberikan hasil yang representatif karena uji tersebut adalah salah satu dari
beberapa uji fungsi motorik yang spesifik untuk melihat dampak dari penyakit
stroke. Perbaikan fungsi motorik dapat diartikan sebagai perbaikan neuron atau
regenerasi telah terjadi. Proses axonal sprouting juga terjadi padaneuron yang
rusak sehingga impuls pada neuron untuk melakukan pergerakan dapat
tersampaikan dengan baik. Jalur restrukturisasi neuronal memiliki peran yang
besar dalam perbaikan neuron dan fungsi motorik.
Jalur restrukturisasi terhadap sitokleton neuronal memiliki peran yang
besar dalam memperbaiki akson yang rusak. Akson memiliki peran sebagai
pembawa impuls saraf terhadap badan sel yang akan memproses pesan impuls
listrik untuk fungsi motorik (46). Perbaikan pada jalur ini memiliki 2
komponen utama yang harus terpenuhi yaitu mikrotubul dan filament aktin.
(47). Kedua komponen utama dalam proses ini juga dapat mengarahkan akson
untuk mengarah pada ujung saraf yang benar.
Pada Tabel V.3 hasil uji statistik LSD rata- rata perhitungan fungsi
motorik pada kelompok kontrol negatif dengan kelompok kontrol positif,
kelompok perlakuan dosis 50 mg/KgBB, 100 mg/KgBB, 200 mg/KgBB, 400
mg/KgBB menunjukkan adanya perbedaan bermakna. Hal tersebut karena pada
kelompok negatif tidak diberikan ekstrak poliherbal. Sehingga skor kesalahan
fungsi motorik menunjukkan hasil yang paling tinggi. Kelompok tingkatan
dosis 50 mg/KgBB tidak memiliki perbedaan bermakna dengan kelompok
normal, negatif, dosis 100 mg/KgBB, 200 mg/KgBB, dan 400 mg/KgBB
menunjukkan bahwa kelompok dosis 50 mg/KgBB sudah dapat memperbaiki
fungsi motorik walaupun tidak mencapai keadaan kelompok
47
normal. Kelompok tingkatan dosis 100 mg/KgBB tidak memiliki perbedaan

bermakna terhadap kelompok normal, positif, menunjukkan bahwa dosis 100
mg/KgBB sudah mampu memperbaiki fungsi motorik karena hasil yang
dadaptkan mendekati keadaan kelompok normal dan positif. Kelompok dosis
200 mg/KgBB dan dosis 400 mg/KgBB didapatkan hasil tidak mempunyai
perbedaan bermakna dibandingkan dengan kelompok normal, positif, dosis 100
mg/KgBB dapat diartikan bahwa dosis 200 mg/KgBB dan 400 mg/KgBB dapat
memperbaiki fungsi motorik hingga mendekati keadaan kelompok kontrol
normal. Perbaikan pada fungsi motorik pada kelompok percobaan dengan
pemberian tingkatan dosis poliherbal X terjadi karena komposisi poliherbal X
yang mengandung ekstrak daun kelor, meniran, dan jintan hitam.
4. Hasil Perhitungan Sel Neuron Yang Rusak

Tabel V.5 Hasil Uji Statistik LSD Perhitungan Sel Neuron Yang Rusak
Kelompok Jumlah Sel Neuron Rusak
Normal 55,75 ± 4,3493
Negatif 517,5 ± 6,4549
Positif 314,25 ± 9,9456 b,c

Dosis 50 mg/KgBB 488,25 ± 6,23832
Dosis 100 mg/KgBB 437,5 ± 11,35782
Dosis 200 mg/KgBB 391,5 ± 3,41565 a,c

Dosis 400 mg/KgBB 325,75 ± 17,6706 a,b
Keterangan :
a. Tidak terdapat perbedaan bermakna dengan kelompok kontrol positif
b. Tidak terdapat perbedaan bermakna dengan kelompok dosis 200 mg/KgBB
c. Tidak terdapat perbedaan bermakna dengan kelompok dosis 400 mg/KgBB
48
Rata-Rata Sel Neuron Yang Rusak

Rata-Rata Sel Neuron N=4
600 517,50
488,25
500 437,50
400 325,75
314,25 302,50
300
200 Gambar V.1 Diagram Rata-Rata Sel NeuronYang Rusak
100 55,75
0
Normal Negatif Positif Dosis 50 Dosis 100 Dosis 200 Dosis 400
mg/KgBB mg/KgBB mg/KgBB mg/KgBB
Gambar V.2 Rata-Rata Sel Neuron Yang Rusak
Tabel V. 6 Hasil Uji Statistik Sel Neuron Yang Rusak
Kelompok Rata- Normal Negatif Positif Dosis 50 Dosis 100 Dosis 200 Dosis 400
Rata mg/KgBB mg/KgBB mg/KgBB mg/KgBB
Normal 55,75
Negatif 517,50 *
Positif 314,25 * *
Dosis 50 488,25 * * *
mg/KgBB
Dosis 100 437,50 * * * *
mg/KgBB
Dosis 200 325,75 * * * *
mg/KgBB
Dosis 400 302,50 * * * *
mg/KgBB
49
5. Hasil Olah Data Sel Neuron Yang Rusak

Setelah mendapat data hasil pengukuran sel neuron yang rusak, data diolah
dengan uji statistik menggunakan program Statistical Program Service
Solution (SPSS) untuk mengetahui pengaruh pemberian ekstrak poliherbal
x terhadap sel neuron yang rusak pada tikus Wistar jantan setelah diinduksi
menggunakan trimetiltin. Berdasarkan uji statistik kenormalan (Komogrov-
Snmnorv) tabel nilai Sig (0.856) > 0,05, maka artinya dataterdistribusi normal,
sedangkan pada uji homogenitas menggunakan Levene test didapat signifikansi
2.406 dengan nilai Sig (0.063) > 0,05, hasil tersebut menunjukkan bahwa
adanya kesamaan variansi atau homogen. Pengujian dilanjutkan dengan one
way ANOVA didapatkan nilai p (0,000) < α (0,05), selanjutnya dilanjutkan
dengan uji LSD untuk melihat adanya perbedaan pada tiap-tiap kelompok
percobaan.
Tabel V. 7 Hasil Uji Statistik Sel Neuron Yang Rusak
Pengujian Metode Hasil sig p Nilai α
Normalitas Kolmogrov-Sminorv 0,856 0,05
Homogenitas Levene 0,063 0,05

50
6. Pembahasan Sel Neuron Yang Rusak

Kurangnya aliran darah mengakibatkan ATP berkurang dan kemudian
mengakibatkan Na+/K+ tidak dapat bekerja sehingga memgakibatkan
masuknya Na+ dan Ca2+ ke intraseluler dan keluarnya K+ ke ekstraseluler
sehingga terjadinya membrane depolarisasi neuron. Kemudian terjadinya
depolarisasi mengakibatkan glutamate banyak dikeluarkan ke esktraseluler.
Akibat dari peningkatan Ca2+ dapat menyebabkan kerusakan mitokondria,
selain itu Ca2+ juga menginduksi Ras-GTP, dan memicu axonal sprouting.
Keruskan mitokondria mengakibatkan peningkatan ROS dan menyebabkan
apoptosis sehingga mengakibatkan kerusakan pada neuron (2).
Apoptosis mengakibatkan kematian sel yang menyebabkan perubahan
morfologi. Perubahan morfologi dari sel yang di induksi trimethiltin, dan tanpa
diberi perlakuan dapat dilihat pada gambar V.3.
Gambar V. 2 Kelompok Normal dan Kelompok Induksi Trimethiltin

Kelompok N adalah kelompok normal tanpa perlakuan dan kelompok K
adalah kelompok yang diinduksi menggunakan trimethiltin. Kelompok N
menunjukkan nukleus berupa bintang atau pyramid dengan nukleus yang
berwarna terang, terletak ditengah, jelas, eukromatin dan tercat terang karena
sebaran kromatin merta, nucleolus prominen berwarna gelap, dan padat (panah
berwarna kuning) (36). Kelompok K didapatkan gambaran neuron rusak yang
khas yang terdiri dari 4 ciri yaitu eoshinophiilic cytoplasm, piknosis nukleus,
vakuolisasi, perikarion mengkerut (46).
Setelah diinduksi stroke iskemik, tikus diberi ekstrak poliherbal dalam
berbagai dosis selama 14 hari. Gambaran sel neuron setelah pemberian ekstrak
dapat dilihat pada gambar V.4
51
.
52
Gambar V.3 Kelompok Masing-masing Perlakuan

Keterangan :
K1 = Kelompok tikus normal

K2 = Kelompok tikus negatif yang diinduksi dengan trimethiltin
K3 = Kelompok positif dengan pemberian piracetam
K4 = Kelompok tikus yang diberi ekstrak poliherbal x dengan dosis 50
mg/KgBB
mg/KgBB
mg/KgBB
mg/KgBB
Pada percobaan ini tampak jumlah sel neuron rusak semakin menurun seiring
dengan peningkatan dosis. Hal ini dapat terjadi karerna ekstrak poliherbal yang
mengandung kuersetin pada Moringa oleifera yang memiliki efek
neuroprotektif sehingga dapat memperbaiki sel neuron, filantin pada
Phyllanthus niruri, dan antioksidan. Reactive Oxygen Species (ROS) dapat
menyebakan kerusakan neuron, kandungan dalam ekstrak poliherbal yang
berfungsi sebagai antioksidan memiliki aktivitas dalam perbaikan pada sel
neuron. Proses terjadinya kerusakan neuron yaitu dengan jalur mekanisme
eksitotoksisitas. Efek dari eksitotoksisitas mengakibatkan akumulasi air yaitu
53
edema sitotoksisitas dan juga mengakibatkan peningkatan ekspresi NMDA,

Ca2+ yang kemudian terjadinya apoptosis dan kerusakan neuron. (46). Yenari
Han
Hasil dari pengukuran sel neuron yang rusak pada kelompok kontrol
positif menunjukkan terjadinya kerusakan sel neuron paling rendah
dibandingkan dengan kontrol negatif dan perlakuan dosis. Hal tersebut
disebabkan karena adanya pemberian piracetam. Piracetam merupakan obat
yang bekerja pada otak dan sistem saraf dan diduga dapat melindungi otak
terhadap kekurangan oksigen (iskemia). Piracetam merupakan turunan siklik
dari neurotransmitter sebuah asam aminobutirat (GABA) dengan mekanisme
kerja sebagai neuroprotektif yang dapat mengurangi kerusakan pada sel (48).
Pada kelompok kontrol positif memiliki rata-rata kerusakan sel yang

paling rendah (Gambar V.2). Pada kelompok pemberian ekstrak poliherbal
dengan dosis 100 mg/KgBB, 200 mg/KgBB, 400 mg/KgBB, dapat dilihat rata-
rata kerusakan sel yang dihasilkan. Kelompok dengan dosis 200 mg/KgBB dan
400 mg/KgBB memberikan rata-rata kerusakan sel yang lebih rendah daripada
kelompok dosis lainnya, yaitu kelompok dosis 50 mg/KgBB, 100 mg/KgBB,
200 mg/KgBB.
Pada tabel V.4 memperlihatkan ada atau tidaknya perbedaan antara
masing- masing kelompok terhadap jumlah sel neuron yang rusak yang telah
diuji secara statistik. Rata-rata sel neuron yang rusak kelompok normal
dibandingkan dengan kelompok lainnya dan menunjukkan adanya perbedaan
yang bermakna terhadap kelompok kontrol negatif dan kelompok kontrol
positif, hal ini dapat terjadi karena hewan coba pada kelompok kontrol normal
tidak diberikan perlakuan induksi menggunakan trimetiltin. Hasil pada
kelompok kontrol negatif menunjukkan banyak kerusakan pada sel neuron
karena di induksi menggunakan trimetiltin dan tidak berikan ekstrak poliherbal.
Hasil yang didapat yaitu pada kelompok negatif memiliki perbedaan bermakna
dengan kelompok kontrol normal sehingga dapat diartikan bahwa trimethiltin
mampu menyebabkan efek samping berupa
54
kerusakan pada sel neuron otak ditandai dengan peningkatan kerusakan sel
neuron.
Hasil pengukuran dari sel neuron yang rusak pada kelompok kontrol
negatif menghasilkan kerusakan sel neuron yang tinggi dibandingkan dengan
kelompok lain. Kerusakan sel neuron yang tinggi disebabkan dari pemberian
trimethiltin pada hewan coba. Trimetiltin klorida merupakan senyawa
organotin yang bersifat neurotoksik dan dapat menyebabkan kematian daraf
pada hewan. Sehingga dengan pemberian trimetiltin menyebabkan terjadinya
banyak keruskan pada sel neuron. Peningkatan kerusakan sel neuron
menunjukan bahwa pemberian trimetiltin dapat meningkatkan kadar radikal
bebas pada sel neuron, hal ini terjadi karena keadaan yang tidak seimbang
antara jumlah radikal bebas dengan jumlah senyawa antioksidan dalam tubuh
(29).
Kelompok dosis 50 mg/KgBB, 100 mg/KgBB memiliki perbedaan
bermakna dengan kelompok normal, positif, dan negatif. Sehingga dapat
diartikan bahwa dosis 50 mg/KgBB, dan 100 mg/KgBB sudah mampu
memperbaiki kerusakan sel neuron walaupun belum mencapai keadaan
kelompok positif. Sedangkan kelompok dosis 200 mg/KgBB dan 400
mg/KgBB tidak mempunyai perbedaan bermakna dengan kelompok kontrol
negative dan kelompok normal dan tidak mempunyai perbedaan bermakna
dengan kelompok kontrol positif.
Artinya bahwa dosis 200 mg/KgBB dan 400mg/KgBB dapat
memperbaiki kerusakan sel neuron hingga mendekati keadaan kelompok
kontrol positif. Data kelompok kontrol positif dibandingkan terhadap
pemberian ekstrak poliherbal dengan dosis yang berbeda menunjukkan hasil
yang berbeda. Hasil menunjukkan bahwa terdapat perbedaan bermakna antara
data kelompok kontrol positif dengan kelompok pemberian dosis 50mg/KgBB
dan 100 mg/KgBB, tetapi tidak ada perbedaan yang bermakna antara kelompok
positif dengan kelompok pemberian dosis 200 mg/KgBB dan 400 mg/KgBB.
BAB VI
SIMPULAN DAN SARAN
A. SIMPULAN
dan Nigella sativa memiliki aktivitas antioksidan yang mampu memberikan
perbaikan fungsi motorik pada dosis 100 mg/KgBB, 200 mg/KgBB, dan 400
mg/KgBB.

dan Nigella sativa memiliki aktivitas antioksidan yang mampu memperbaiki
kerusakan sel neuron pada dosis 200 mg/kg BB dan 400 mg/kgBB.
B. SARAN
1. Penelitian lebih lanjut mengenai pengaruh kerusakan fungsi motorik dan
perbaikan sel neuron dengan waktu yang lebih lama.
2. Perlu dilakukan penelitian lanjut untuk pemeriksaan uji lainnya.
55
DAFTAR PUSTAKA
1. Pepi B, Diah KM, Hanindya RP, Stefanus EP, Faizal M, Muhammad H. Stroke
iskemik akut dasar dan klinis. Surakarta: Research Gate; 2021 h. 1-6.
2. Breton RR, Rodriguez CG. 2012. Excitotoxicity and oxidative stress in acute
ischemic stroke. Intech. 2015. h. 29-58.
3. Yuslianti ER. Pengantar radikal bebas dan antioksidan. Yogyakarta: Deepublish.
2018.
4. Werdhasari A. Peran antioksidan bagi kesehatan. Jurnal Biotek Medisiana
Indonesia. 2014; vol. 3, no. 2, h. 59-68.
5. Winarsi H. Antioksidan alami dan radikal bebas. Yogyakarta: Kanisius (Anggota
IKAPI). 2011.
6. Ikrima K, Amalia R, Mutakin, Levita J. Peran spesies oksigen reaktif serta
antioksidan sebagai fitoterapi. Farmaka. 2018; 16, 213–221.
7. Birben E, Sahiner U, Sackesen C, Erzurum S, Kalayci O. Oxidative stress and
antioxidant defense mechanism in. Science. 2012; 22(96), 161–168
https://waojournal.biomedcentral.com/track/pdf/10.1097/WOX.0b013e3182
439613
8. Kim J, Kim C, Kim u, Lee , Jung C, Park J, Ryu B.2019. Trimethyltin chloride
induces reactive oxygen species mediated apoptosis in retinal cell during zebrafish
eye development . Science of the Total Environment. 653, 36-44.
9. Leone, Alessandro, Giovanni Fiorillo, Franca Criscuoli, Stefano R, Laura S, et al.
cultivitation, genetic, etnopharmacology, phytochemistry and pharmacology of
moringa oleifera leaves.2015 ;16(12):12791-835.
10. Lee, Nathanael Y., dkk. 2016. The pharmacological potential of phyllanthusniruri.
Royal Pharmaceutical Society, Journal Of Pharmacy and Pharmacology, 68
(2016), pp.953-969.
11. Burist M, Antioxidant activity of nigella sativa essential oil. 2016;14(5):323-328
12. Aminah S, Ramdhan T, Yanis M. Kandungan nutrisi dan sifat fungsional tanaman
kelor (Moringa oleifera). Bul Pertan Perkota.2015;5(30):35-44
56
57
13. Dwipayana, I Nyoman, Vida E, Tutik. 2018. Identifikasi dan Perbandingan

aktivitas antioksidan ekstrak daun kelor pada variasi pelarut dengan metode DPPH.
Vol. 1(2):8.
14. Khan, Fazlullah, Kamal, Faheem, Maqbol, Fatima, et al. Molcular target
underlaying anticancer effects of quercetin. 2016;8(9): 529
15. Struktur flavonoid. Diambil : https://id.search.yahoo.com//struktur
flavonoid.Diakses pada 20 Mei 2022
16. Kusumawardhani LR, Mursyanti E, Purwijantiningsih. Flavonoid and alkaloid
analysis of moringa oleifera induced by Kinetin. Atmajaya University. 2017.
17. Handayani. Telaah senyawa antikoksidan Daun Kelor. Jurnal Ilmiah Farmako
Bahari. 2013;vol. 4(2).
18. Dalimartha S. Atlas tumbuhan obat Indonesia jilid 5. Jakarta: Trubus Agriwidya.
2015. H. 71-74; 135-139
19. Meniran. Diambil https://id.search.yahoo.com//meniran.Diakses pada 20 Mei
2022
20. Nathanael Y, William, Mohammad A, Tanes P, Anne R, Kamalan.
2016;68(8):953-969. https://doi: 10.1111/jphp.12565.
21. Narendra, Swathi, Sowjanya, Krishna S. Phyllanthus niruri its ethnobotanical,
phytochemical and pharmacological profile.2012;5(9):4681-4691.
22. Asif HM, Akhtar N, Iqbal A, et al. Nigella Sativa: Monograph. J Pharmacogn
Phytochem. 2015;4(44): p. 103-106.
23. Jintan hitam. Diambil https://id.search.yahoo.com//jintan hitam .Diakses pada 20
Mei 2022
24. Junaedi E, Kuncari E, Suty S, Yulianti S. Kedahsyatan HabbatussaudaMengobati
Berbagai Macam Penyakit. Jakarta: PT AgroMedia Pustaka. 2011;hal.8-13.
25. Mujahidatul M, Rifki M, Noor W. Pengaruh Minyak Nigella Sativa terhadap
Kualitas Spermatozoa Tikus Wistar yang Terpapar Asap Rokok. J Indon Med
Assoc. 2012; p. 178-82.
26. Pepi B, Diah KM, Hanindya RP, Stefanus EP, Faizal M, Muhammad H. Stroke
iskemik akut dasar dan klinis. Surakarta: Research Gate; 2021 h. 1-6
57
27. Sjahrir, H. Stroke Iskemik. 2012: Yandira Agung,Medan, p. 1-3.

28. Geloso, M. C., Corvono, V., Michetti, F. 2011. Trimethyltin-induced hippocampal
degeneration as a tool investigate neurodegenerative process, Neurochemistry
International. 58(7). 729-238.
https://dpi.org/10.1016/j.neuint.2011.03009.
29. Silva, I. F., Freitas Lima L., Graveli, J.B Rodrigues, L.C. 2018. Organotins in
neuronal damage, brain function and behavior: A short review, Frontiers in
Endocrinology. 6-11. https://doi.org/10.3389/fendo.2017.00366.
30. Khuruna, I.Textbook of human physiology for dental student. New Delhi. Elsevier;
2016. p. 602.
31. Anatomi otak. Diambil https://id.search.yahoo.com//anatomiotak.Diakses pada20
Mei 2022
32. Bradac, G. B. Cerebral Angiography: Normal Anatomy and Vascular Pathology.
Berlin. 2015 p. 5-13; 57; 69-73.
33. Eroschenko V.P, 2012. Atlas histologi dengan korelasi fungsional. Jakarta: Buku
kedokteran.hal 150.
34. Lapisan korteks otak. Diambil
https://id.search.yahoo.com//lapisankorteksotak.Diakses pada 23 Mei 2022
35. Brodal P. The central nervous system structure and function ed. 4. New York:
Oxford University Press; 2017. p.19.
36. Seidman R.J, Normal gross brain and microscopy. 2015;vol.3,h.60-65.
37. Junqueira LC, Carneiro. Histologi dasar teks&atlas ed. 10. Jakarta.2012; hal. 161-
163.
38. Elmore S, Apoptosis programmed cell death toxicol pathol. 2007; 35(4): 495-516
39. Liu et all 2011.
40. Widayati E. Oksidasi biologi, radikal bebas dan antioksidan. FK Unissula
Semarang: Jurnal Ilmiah Sultan Agung. 2021.
41. Khaira K. Menangkal radikal bebas dengan antioksidan. STAIN Batusangkar.
2010.
42. Mardiansyah K. Toksisitas akut ekstrak daun kelor. IIB: Universitas Padjajaran.
2009.
57
43. Yannick JHJ, Taverne JJC, Bogers, Dirk J, Duncker, Daphane. Reactive oxygen
species and the cardiovascular system. Biology and Human Health. 2017; 287-
303.
44. Irianti, Sugiyanto, Nuranto S, Kuswandi. Antioksidan. Yogyakarta: Universitas
Gadjah Mada. 2017.
45. Méndez I, Vázquezcuevas F. Redox - Principles and advanced applications.
redox: principles and advanced applications. 2017.
https://doi.org/10.5772/66005
46. Schaefer, A.W., Schoonderwoef, V.T.G., Medertos., Danuser, Cytoskeletal
Dynamics Unerlaying Neurite Outgrowth. National Institute of Health.
2010:15(1):146-162.
47. Ng J.M.J., Chen., Leung, Manikan, Vickers, Jeung., Chung. Transcriptional
Insight on the Regenerative Mechanics of Axotomized Neurons iIn Vitro. Journal
of Cellular and Molecullar Medicine. 2016. Vol. 16:789-811.
48. Paliwal Pankaj., Debabrata D., Sairan K. 2017. Pharmacokinetic Study Of
Piracetam in Focal Cerebral Ischemic Rats. https://doi.org/10.1007/sl13318- 0435-
9.
49. Gofir, A. 2009. Manajemen Stroke. Pustaka Cendekia Press. Yogyakarta.
Indonesia, hal. 19-42.
LAMPIRAN
Lampiran 1. Etichal Approval Letter
60
80
Lampiran 2. Surat Keterangan Galur Tikus Putih (Rattus norvegicus)

80
Lampiran 3. Skema Kerja Penelitian secara Umum
28 ekor tikus putih jantan galur Wistar di aklimatisasi

di laboratorium
Selama aklimatisasi, hanya diberi
makan dan minum ad libitum, serta
dibersihkan kandangnya setiap hari.
Tikus di randomisasi
Kelompok Kelompok Kelompok Kelompok Kelompok Kelompok Kelompok

1 II III IV V V V
Kontrol Kontrol Kontrol Perlakuan Perlakuan Perlakuan Perlakuan
Normal Negatif Positif Poliherbal x Poliherbal x Poliherbal x Poliherbal x
Pekan Pekan Pekan 50 mg/KgBB 100 200 400
standar standar standar mg/KgBB mg/KgBB mg/KgBB
+ + +
Air minum Air minum Air minum +
Piracetam
Induksi menggunakan trimetiltin secara i.p
Uji fungsi motorik pasca penginduksian trimetiltin
Uji fungsi motorik setelah 14 hari pemberian poliherbal x
Euthanasia dan pembedahan otak tikus
Pengamatan kerusakan sel neuron secara mikroskopik
Analisis Data
80
Lampiran 4. Data Perhitungan Fungsi Motorik
Kelompok Perlakuan Tikus ke- Skor kesalahan

1 37.5
2 40
3 40
Kelompok Normal
4 42.85
Rata-Rata 40
SD 0
1 85
2 75
3 76
Kelompok Positif
4 75
Rata-Rata 75,41
SD 7,4987
1 42.23
2 42.23
3 42.85
Kelompok Negatif
4 40
Rata-Rata 41,82
SD 1,2528
1 50
2 52.50
3 51
Kelompok 50 mg/KgBB
4 50.5
Rata-Rata 53,92
SD 1,9226
1 50
2 50
3 35.06
Kelompok 100 mg/KgBB
4 45.83
Rata-Rata 50
SD 0
1 54.54
2 37.25
3 45.83
4 42.85
Rata-Rata 45,1175
SD 7,2187
80
Kelompok Perlakuan Tikus ke- Skor kesalahan

1 40
2 40
3 39.73
4 35.2
Rata-Rata 40
SD 0
80
Lampiran 5. Data Perhitungan Kerusakan Sel Neuron
Kelompok Perlakuan Tikus ke- Skor

1 50
2 55
3 58
Kelompok Normal
4 60
Rata-Rata 55,75
SD 4,349329
1 510
2 520
3 525
Kelompok Negatif
4 515
Rata-Rata 517,5
SD 6,454972
1 300
2 315
3 320
Kelompok Positif
4 322
Rata-Rata 314,25
SD 9,945686
1 480
2 490
3 488
Kelompok 50 mg/KgBB
4 495
Rata-Rata 488,25
SD 6,238322
1 430
2 444
3 450
4 426
Rata-Rata 437,5
SD 11,35782
1 333
2 330
3 340
4 300
Rata-Rata 325,75
SD 17,6706
80
Kelompok Perlakuan Tikus ke- Skor

1 302
2 302.8
3 300.8
4 304.4
Rata-Rata 302,5
SD 1,509967
80
Lampiran 6. Bahan- bahan yang Digunakan
Bahan 01. Poliherbal X Onoake Bahan 02. Larutan NaCl 0,9%
Bahan 03. Trimetiltin klorida (TMT) Bahan 04. Aquadest
Bahan 07. Pakan Standar Bahan 08. Serbuk Kayu Untuk

Alas Kandang
80
Bahan 10. Xylazin
Bahan 11. Piracetam

80
Lampiran 7. Alat- alat yang Digunakan
Alat 01. Uji Ladder Rung Walking Test Alat 02. Timbangan Analitik
Milik: Pribadi Milik: Laboratorium Skripsi FFUP
Alat 03. Cover glass + object glass Alat 04. Cover slide
Milik: Pribadi Milik: Pribadi
Alat 05. Spuit 1 mL + Sonde Tikus Alat 06. Set Alat Bedah
80
Alat 08. a) Kandang Tikus, b)

Alat 07. Timbangan Tikus Alas, untukpembedahan tikus.
Milik: Rumah Sakit Hewan Pendidikan Milik: Pribadi
Alat 14. Botol Minum Tikus Alat 10. Botol Kaca

Alat 09. Pot Obat Alat 12. a) Batang Pengaduk b) Sendok

Milik: Pribadi Tanduk c) Beaker glass d) Lumpang Alu.
80
Alat 11. Kulkas Penyimpan Larutan

Alat 13. Container box Poliherbal x
Milik: Pribadi Milik: Laboratorium FKH - IPB
80
Lampiran 8. Instrumen Laboratorium yang Digunakan
Instrumen 01. Mikroskop Olympus 018

Milik: Laboratorium Ressang & LC FKH Instrumen 02. Timbangan Analitik
IPB Milik: Laboratorium Skripsi FFUP
80
Lampiran 9. Tikus Putih (Rattus norvegicus) Jantan galur Wistar beserta

Perlakuannya
Tikus putih (Rattus norvegicus) jantan galur Wistar dengan BB ± 200 g.

Pemberian poliherbal x dengan cara sonde
Kandang tikus dengan ventilasi baik dari kawat galvanis, kandang juga ditaburi serbuk
kayu yangdibersihkan dan diganti setiap hari agar terjamin kebersihannya, tidak lupa
dipasang botol minum.
Ruangan untuk menaruh kandang tikus di Laboratorium Farmakologi FFUP.
80
Tikus diinduksi menggunakan trimetiltin (TMT) secara iv

Pengujian fungsi motorik menggunakan Ladder Rung Walking Test.
Euthanasia tikus menggunakan ketamin dan xylazine

Pembedahan organ otak
Sampel organ otak
80
Preparat sampel otak

Pembilasan organ otak menggunakan NaCl 0,9%
Otak dimasukkan ke dalam pot obat berisi paraformaldehid 4%
Pemotongan sampel otak

Otak dimasukkan ke dalam pot obat berisi paraformaldehid 4%
80
Lampiran 10. Uji Fungsi Motorik Tikus

80
Lampiran 11 Histopat Masing-Masing Kelompok

80
Lampiran 12. Hasil Perhitungan Sel Menggunakan Software Image-J

80
Lampiran 13. Hasil Analisis Statistik Fungsi Motorik dengan SPSS
A. Analisis Uji Fungsi Motorik

1. Uji Normalitas
Uji normalitas dilakukan untuk mengetahui distribusi data pada seluruh
kelompok perlakuan sebagai sarat uiji analisis varian (ANOVA) Hipotesis : H0
= Data terdistribusi normal
H1 = Data terdistriusi tidak normal
Nilai α = 0.05
Kriteria pengujian ;
a. Jika pada kolom Sig p > α, maka H0 diterima (H1 ditolak)
b. Jika pada klom Sig p < α, maka H1 diterima (H0 ditolak)
Hasil uji Kolmogrov-Sminorv
Dari hasil uji diperoleh :

Pada kelompok uji fungsi motorik diperoleh nilai P (0,694) > α (0,05)
sehingga H0 diterima yaitu data terdistriusi normal.
2. Uji Homogenitas
Uji homogenitas dilakukan untuk mengetahui nilai data pada seluruh
kelompok perlakukan, sebagai syarat uji analisis varian (ANOVA)
Hipotesis :
H0 = Data Homogen
80
H1 = Data tidak homogeny

Nilai α = 0.05
Kriteria pengujian :
a. Jika pada kolom Sig p > α maka H0 diterima (H1 ditolak)
b. Jika pada kolom Sig p < α maka H1 diterima (H0 ditolak)
Hasil uji Levene

Pada uji fungsi motorik diperoleh nilai p (0.214) > α (0.05) sehingga H0
diterima yaitu data bervariasi homogen.
Dari hasil uji normalitas dan homogenitas uji fungsi motorik yang didapat
terdistribusi normal dan data homogen, sehingga pengujian akan dilanjutkan
dengan uji ANOVA dilanjutkan uji Least Square Difference (LSD)
3. Hasil Statistik Uji ANOVA One-way dan Uji LSD Fungsi Motorik
Uji homogenitas dilakukan untuk mengetahui adakah perbedaan
bermakna dari data uji fungsi motorik yang didapat dari masing-masing
kelompok perlakuan
Hipotesis :
H0 = Data Homogen
H1 = Data tidak homogen
Nilai α = 0.05
80

Hasil analisis dengan ANOVA menunjukkan p (0,000) < α (0.05) sehingga
H1 diterima yaitu terdapat perbedaan bermakna diantara kelompok uji.
80
80
Lampiran 14 Hasil Analisis Statistik Kerusakan Sel Neuron dengan SPSS
A. Analisis Uji Fungsi Motorik

1. Uji Normalitas
Uji normalitas dilakukan untuk mengetahui distribusi data pada seluruh
kelompokperlakuan sebagai sarat uiji analisis varian (ANOVA)
Hipotesis :
H0 = Data terdistribusi normal
H1 = Data terdistriusi tidak normal
Nilai α = 0.05
Kriteria pengujian ;
a. Jika pada kolom Sig p > α, maka H0 diterima (H1 ditolak)
b. Jika pada klom Sig p < α, maka H1 diterima (H0 ditolak)
Hasil uji Kolmogrov-Sminorv

Pada kerusakan sel neuron diperoleh nilai P (0,856) > α (0,05) sehingga
H0 diterima yaitu data terdistriusi normal.
80
2. Uji Homogenitas
Uji homogenitas dilakukan untuk mengetahui nilai data pada seluruh
kelompok perlakukan, sebagai syarat uji analisis varian (ANOVA)
Hipotesis :
H0 = Data Homogen
Nilai α = 0.05
Hasil uji Levene

Pada kerusakan sel neuron diperoleh nilai p (0.063) > α (0.05) sehingga H0
diterima yaitu data bervariasi homogen.
Dari hasil uji normalitas dan homogenitas uji fungsi motorik yang
didapat terdistribusi normal dan data homogen, sehingga pengujian akan
dilanjutkan dengan uji ANOVA dilanjutkan uji Least Square Difference (LSD)
3. Hasil Statistik Uji ANOVA One-way dan Uji LSD Fungsi Motorik
Uji homogenitas dilakukan untuk mengetahui adakah perbedaan
bermakna dari data uji fungsi motorik yang didapat dari masing-masing
kelompok perlakuan
Hipotesis :
H0 = Data Homogen
Nilai α = 0.05
80

Hasil analisis dengan ANOVA menunjukkan p (0,000) < α (0.05) sehingga
H1 diterima yaitu terdapat perbedaan bermakna diantara kelompok uji.
80
Multiple Comparisons
Dependent Variable: Sel Neuron Rusak
LSD
(I) Kelompok (J) Kelompok Mean Std. Error Sig. 95% Confidence Interval
Difference (I-J) Lower Bound Upper Bound
Negatif -461.75000* 6.77151 .000 -475.8321 -447.6679
Positif -258.50000* 6.77151 .000 -272.5821 -244.4179

*
Dosis 50 mg/KgBB -432.50000 6.77151 .000 -446.5821 -418.4179
Normal
Dosis 100 mg/KgBB -381.75000* 6.77151 .000 -395.8321 -367.6679
Dosis 200 mg/KgBB -270.00000* 6.77151 .000 -284.0821 -255.9179

*
Dosis 400 mg/KgBB -246.75000 6.77151 .000 -260.8321 -232.6679
Normal 461.75000* 6.77151 .000 447.6679 475.8321

*
Positif 203.25000 6.77151 .000 189.1679 217.3321
Dosis 50 mg/KgBB 29.25000* 6.77151 .000 15.1679 43.3321

Negatif
Dosis 100 mg/KgBB 80.00000* 6.77151 .000 65.9179 94.0821
*
Dosis 200 mg/KgBB 191.75000 6.77151 .000 177.6679 205.8321
Dosis 400 mg/KgBB 215.00000* 6.77151 .000 200.9179 229.0821
Normal 258.50000* 6.77151 .000 244.4179 272.5821

*
Negatif -203.25000 6.77151 .000 -217.3321 -189.1679
Dosis 50 mg/KgBB -174.00000* 6.77151 .000 -188.0821 -159.9179

Positif
*
Dosis 100 mg/KgBB -123.25000 6.77151 .000 -137.3321 -109.1679
Dosis 200 mg/KgBB 11.50000 6.77151 .104 -25.5821 2.5821
Dosis 400 mg/KgBB 11.75000 6.77151 .097 -2.3321 25.8321

*
Normal 432.50000 6.77151 .000 418.4179 446.5821
Negatif -29.25000* 6.77151 .000 -43.3321 -15.1679

*
Positif 174.00000 6.77151 .000 159.9179 188.0821
Dosis 50 mg/KgBB
Dosis 100 mg/KgBB 50.75000* 6.77151 .000 36.6679 64.8321
Dosis 200 mg/KgBB 162.50000* 6.77151 .000 148.4179 176.5821
Dosis 400 mg/KgBB 185.75000* 6.77151 .000 171.6679 199.8321
Normal 381.75000* 6.77151 .000 367.6679 395.8321
Negatif -80.00000* 6.77151 .000 -94.0821 -65.9179
Positif 123.25000* 6.77151 .000 109.1679 137.3321

Dosis 100 mg/KgBB
*
Dosis 50 mg/KgBB -50.75000 6.77151 .000 -64.8321 -36.6679
Dosis 200 mg/KgBB 111.75000* 6.77151 .000 97.6679 125.8321

*
Dosis 400 mg/KgBB 135.00000 6.77151 .000 120.9179 149.0821
80
Normal 270.00000* 6.77151 .000 255.9179 284.0821
Negatif -191.75000* 6.77151 .000 -205.8321 -177.6679
Positif 11.50000 6.77151 .104 -2.5821 25.5821

Dosis 200 mg/KgBB
*
Dosis 50 mg/KgBB -162.50000 6.77151 .000 -176.5821 -148.4179
Dosis 100 mg/KgBB -111.75000* 6.77151 .000 -125.8321 -97.6679
Dosis 400 mg/KgBB 23.25000 6.77151 .102 9.1679 37.3321
Normal 246.75000* 6.77151 .000 232.6679 260.8321
Negatif -215.00000* 6.77151 .000 -229.0821 -200.9179
Positif -11.75000 6.77151 .097 -25.8321 2.3321

Dosis 400 mg/KgBB
Dosis 50 mg/KgBB -185.75000* 6.77151 .000 -199.8321 -171.6679
*
Dosis 100 mg/KgBB -135.00000 6.77151 .000 -149.0821 -120.9179
Dosis 200 mg/KgBB 23.25000 6.77151 .102 -37.3321 -9.1679

Final Skripsi Indri PDF

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Deskripsi Asli:

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Final Skripsi Indri PDF

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

UNIVERSITAS PANCASILA

EFEK POLIHERBAL X TERHADAP PENURUNAN SEL

Dibuat untuk memperoleh

Jakarta, Juli 2022

Indry Nufikha Fajrin

NAMA : INDRY NUFIKHA FAJRIN

Jakarta, Juli 2022

Indry Nufikha Fajrin

DAFTAR ISI ........................................................................................... v

Tabel II.1 Radikal Bebas Biologis (Endogen) ................................................ 23

Gambar II.1 Daun Kelor (Moringa oleifera) .................................................... 6

Lampiran 1. Etichal Approval Letter ..................................................................... 57

(A) INDRY NUFIKHA FAJRIN (2018210227)

(B) EFEK POLIHERBAL X TERHADAP PENURUNAN SEL NEURON YANG

(C) xii + 84 halaman; 10 tabel; 16 gambar; 14 lampiran

(F) Daftar rujukan : 48 buah (2009-2021)

(A) INDRY NUFIKHA FAJRIN (2018210227)

(B) EFFECT OF POLYHERBAL X ON DECREASED DAMAGED NEURON

(C) xii + 84 pages; 10 tables; 16 pictures; 14 attachments

(D) Keywords : Ischemic stroke, Trimethyltin chloride, Moringa leaves, Black

(F) References : 48 pieces (2009-2021)

kondisi neurotoksisitas. Trimetiltin menyebabkan kerusakan sel, sel neuron yang

A. KELOR (Moringa oleifera L.)

Umumnya di Indonesia bunga kelor berwarna putih kekuning-kuningan.

Gambar II. 1 Daun Kelor (Moringa oleifera) (12)

3. Nama Daerah Tanaman (12)

Gambar II. 2 Struktur Flavonoid (15).

B. MENIRAN (Phyllanthus niruri)

membawa sebuah bunga dibawahnya, tegak dengan ukuran 30 hingga 60 cm.

Gambar II. 3 Meniran (Phyllanthus niruri) (19).

C. JINTAN HITAM (Nigella sativa)

Gambar II. 4. Jintan hitam (Nigella sativa) (23).

c. Menetapkan derajat keparahan stroke menggunakan skor dan pemeriksaan

a. Menilai Airway, Breathing, dan Circulation

E. TRIMETILTIN KLORIDA (TMT)

dapat menyebabkan degenerasi saraf khususnya hippocampus. Intoksikasi TMT

Gambar II.5 Patogenesis Trimetiltin (29)

sistem saraf perifer untuk menjalankan seluruh kegiatan yang hendak

Gambar II. 6 Anatomi otak (31).

Gambar II.7. Pembagian korteks otak (32).

d. Lapisan keempat lamina granularis interna yang merupakan suatu lapisan

Gambar II.8 Lapisan korteks otak (34).

Secara mikroskopis dengan pengecatan Hematoksilin & Eosin neuron

Gambar II 9 Histopat sel neuron (36)

menghasilakan cairan serebrospinal. Mikroglia adalah sel kecil dengan cabang

disebut sebagai autokatalisis, mengakibatkan kerusakan membran dan organel

Gambar II. 10 Klasifikasi radikal bebas (41)

Gambar II.11 Sumber radikal eksogen (41)

Pada tahap propagasi ini merupakan awal dari pemanjangan rantai

H. STRESS OKSIDATIF DAN REACTIVE OXYGEN SPECIES (ROS)

Gambar II.12 Pengaruh ROS terhadap tubuh (43)

Jenis- jenis antioksidan:

Nigella sativa atau jintan hitam mempunyai potensi antioksidan Mekanisme

B. TEMPAT DAN WAKTU PENELITIAN

b. Laboratorium Ressang & LC untuk pengamatan sel neuron secara

C. HEWAN DAN BAHAN UJI

Ladder Rung Walking Test

11. Botol minum tikus.

3. Persiapan Hewan Coba (Tikus)

Tabel IV.1 Pembagian Kelompok Perlakuan

4. Induksi Stroke Iskemik

5. Uji Fungsi Motorik