ISOLASI MIKROBA METODE SPREAD

Dasar Teori
Metode spread plate (cawan sebar) adalah suatu teknik di dalam menumbuhkan
mikroorganisme di dalam media agar dengan cara pat menuangkan stok kultur bakteri di atas
media yang telah padat.Metode cawan sebar ini cukup sulit terutama saat meratakan suspensi
dengan batang bengkok, untuk menumbuhkan koloni secara merata, biakan justru
terkontaminasi metode cawan sebar dapat digunakan untuk memperkirakan jumlah bakteri
dalam satuan sel

Prinsip
Teknik spread plate merupakan teknik isolasi mikroba dengan cara menginokulasi
kultur mikroba secara pulasan/sebaran di permukaan media agar yang telah memadat

Alat dan Bahan

a.Media NA
b.Makanan
c.NaCl FIS
d.triangle
e.Mikropipet

Cara kerja :
a. Pindahkan 0,1 mL suspensi berisi bakteri secara aseptis ke permukaan media yang telah
memadat dalam cawan petri menggunakan pipet.
b. Sterilisasi spreader/batang bengkok/triangle dengan cara dicelupkan dalam alkohol 70%
kemudian dibakar dengan dilewatkan diatas api, biarkan spreader dingin.
c. Tebarkan/sebarkan kultur bakteri dengan spreader secara merata dan biarkan sampai
permukaan agar mengering.
d. Setelah permukaan agar mengering, selanjutnya inkubasikan secara terbalik selama 24 jam
pada suhu kamar ataupun inkubator dan amati pertumbuhannya.

Interpretasi Hasil
Akan timbul koloni bakteri pada media pertumbuhan,kemudian setiap media memiliki jumlah
koloni yang berbeda tergantung dengan pengenceran suspensi yang sudah dilakukan
HASIL
 ISOLASI MIKROBA METODE POUR
Dasar teori
Pemeriksaan angka kuman dengan metode tuang)adalah suatu teknik untuk
menumbuhkan mikroorganisme di dalam media agar dengan cara mencampurkan media yang
masih cair dengan stok kultur bakteri, sehingga sel-sel tersebut tersebar merata dan diam
dengan baik di permukaan agar atau di dalam agar. Dalam metode ini diperlukan
pengenceran sebelum ditumbuhkan pada medium agar di dalam cawan petri. Setelah
diinkubasi akan terbentuk koloni pada cawan tersebut dalam jumlah yang dapat dihitung

Prinsip
Prinsip teknik ini adalah menyebarkan sel-sel bakteri tidak hanya pada permukaan
medium agar saja melainkan sel terendam dalam medium (di dalam agar) sehingga terdapat
sel yang tumbuh dipermukaan agar yang kaya O2 dan ada yang tumbuh di dalam agar dengan
kandungan oksigen sedikit. Teknik ini memerlukan agar yang belum padat (>45oC) untuk
dituang bersama suspensi bakteri ke dalam cawan petri lalu kemudian dihomogenkan dan
dibiarkan memadat

Alat dan Bahan

a.media NA
b.Makanan
c.NaCl Fis

Cara Kerja
a. Teteskan 1 ml suspensi sel kedalam cawan petri kosong yang telah steril secara aseptis
b. Tuangkan media agar yang hangat (suhu 45 – 50 oC) ke cawan yang telah berisi suspensi
bakteri tersebut dan tutup
c. Homogenkan campuran media dan suspensi dengan cara goyangkan atau putar cawan petri
secara perlahan membentuk angka delapan (8) di atas meja yang rata dalam kondisi aseptis
d. Setelah agar memadat cawan petri diinkubasi dengan posisi terbalik pada suhu kamar
ataupun inkubator selama 24 jam. Amati pertumbuhannya

Interpretasi Hasil
Akan timbul koloni bakteri yang kemudian koloni tersebut akan berbeda jumlahnya sesuai
dengan jumlah suspensi yang dituangkan kedalamnya
HASIL