PERBANDINGAN HASIL PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS BTA NEGATIF

DENGAN TES CEPAT MOLEKULER

1
Isti Sofia Insani, 2Arihta Br Karo, 3Neneng Tuti Sulistiawati
1, 2, 3
Sekolah Tinggi Analis Bakti Asih, Jalan Padasuka Atas No. 233 Bandung, Indonesia

Email : istisofiainsani@gmail.com

ABSTRAK

Penyakit Tuberkulosis Paru (TB Paru) merupakan masalah kesehatan masyarakat yang Penting di dunia.
Pada tahun 1992 World Health Organization (WHO) telah mencanangkan tuberkulosis sebagai Global
Emergency. Sebuah penelitian di San Fransisco menyatakan bahwa 17 % penderita TB paru memiliki hasil
sputum BTA (-). Oleh karena itu, apabila diagnosis TB paru ditegakkan hanya semata-mata berdasarkan
pemeriksaan sputum BTA (+), akan banyak penderita TB paru yang tidak terdiagnosis dan menambah
jumlah TB paru yang menular, karena TB paru dengan sputum BTA yang negatif bisa juga menjadi
sumber penularan, apalagi jika disertai gejala klinis batuk dan kavitas pada foto toraks. Penelitian ini
dilakukan dengan menggunakan metode deskriptif, dan sampel yang digunakan pada penelitian ini adalah
sampel sputum dari pasien terduga penderita TB dengan hasil BTA mikroskopis negatif, dari hasil
pemeriksaan 45 sampel dengan metode RT PCR GeneXpert, didapatkan positif sebanyak 2 orang, 1
ditemukan positif Resistantce Rifamfisin, serta negatif sebanyak 43 orang. Sedangkan pada hasil
pemeriksaan miroskopis dari 45 sampel sputum, tidak ditemukan sputum BTA positif. Berdasarkan
Penelitian yang dilakukan dapat disimpulkan bahwa ada perbedaan hasil pada Pemeriksaan BTA dari sampel
sputum Negatif menggunakan uji Mikroskopis dan Tes Cepat Molekuler.

Kata kunci : TB Paru, BTA Negatif, Tes Cepat Molekuler

ABSTRACT
Lung Tuberculosis (Pulmonary TB) is an important public health problem in the world. In 1992 the World
Health Organization (WHO) launched tuberculosis as a Global Emergency. A San Francisco study stated
that 17% of pulmonary TB patients had BTA sputum results (-). Therefore, if the diagnosis of pulmonary TB
is enforced solely based on BTA (+) sputum examination, many pulmonary TB patients will not be diagnosed
and increase the number of infectious pulmonary TB, because pulmonary TB with negative BTA sputum can
also be a source of transmission , especially if accompanied by clinical symptoms of cough and cavity on
chest X-ray. This study was conducted using descriptive methods, and the sample used in this study was
sputum samples from unexpected patients with TB with negative microscopic smear results, from the results
of 45 samples examined by GeneXpert RT PCR method, obtained as positive as 2 people, 1 found positive
Resistantce Rifamfisin, and negative as many as 43 people. While the results of myroscopic examination of
45 sputum samples, no positive smear sputum was found. Based on the research conducted it can be
concluded that there are differences in the results of BTA Examination from Negative sputum samples using
Microscopic and Molecular Rapid Tests.

Keywords: Pulmonary TB, BTA Negative, Molecular Rapid Test

JAB – STABA | VOL.03 NO.01 | Januari 2019 1

1. PENDAHULUAN
Penyakit Tuberkulosis Paru (TB Paru) merupakan
masalah kesehatan masyarakat yang Penting di dunia.
Pada tahun 1992 World Health Organization (WHO)
telah mencanangkan tuberkulosis sebagai Global
Emergency, Berdasarkan laporan WHO 2017
diperkirakan ada 1.020.000 kasus di Indonesia, namun
baru terlaporkan ke Kementerian Kesehatan sebanyak
420.000 kasus. (Kemenkes RI, 2018), Mereka yang
belum diperiksa dan diobati akan menjadi sumber
penularan bagi orang di sekitarnya. Hal ini yang
menyebabkan seakan-akan masalah TBC tak kunjung
selesai. Dunia ingin mencapai eliminasi TBC pada
tahun 2030 dan Indonesia turut berkomitmen
mencapainya. Indonesia menempati urutan kedua di
dunia untuk jumlah kasus TB setelah India. (Kemenkes
RI, 2018). Diagnosis TB ditegakkan atas dasar
anamnesis, pemeriksaan fisik dan pemeriksaan
penunjang, yaitu pemeriksaan bakteriologis dan
pemeriksaan radiologis. Untuk menemukan TB pada
pemeriksaan bakteriologis adalah dengan cara
pemeriksaan dahak pada sediaan langsung. Pemeriksaan
dilakukan dengan metode pengecatan Ziehl Neelsen.
Pengecatan ini disebut pengecatan tahan asam, karena
sekali dapat terwarnai tidak mudah untuk dilunturkan
meskipun dengan menggunakan zat peluntur
(decolorizing agent) asam. Untuk dapat melakukan
pemeriksaan sputum BTA dibawah mikroskop,
dibutuhkan bakteri baru yang jumlahnya paling sedikit
5000 kuman dalam satu mililiter dahak, (Kemenkes RI,
2015), sedangkan pada pemeriksaan Tes Cepat
Molekuler GeneXpert minimal 131 bakteri/ml sputum.
(Wulandari Y, 2011) Sebuah penelitian di San Fransisco
menyatakan bahwa 17 % penderita TB paru memiliki
hasil sputum BTA (-). Oleh karena itu, apabila diagnosis
TB paru ditegakkan hanya semata-mata berdasarkan
pemeriksaan sputum BTA (+), akan banyak penderita
TB paru yang tidak terdiagnosis dan menambah jumlah
TB paru yang menular, karena TB paru dengan
sputum BTA yang negatif bisa juga menjadi sumber
penularan, apalagi jika disertai gejala klinis batuk dan
kavitas pada foto toraks. (Icksan A, 2008)
Maka dari itu saat ini untuk membantu mendiagnosis
TB melalui pemeriksaan sputum telah hadir Teknologi
pemeriksaan molekuler yang memiliki hasil lebih akurat
dan sensitif. Yaitu pemeriksaan Tes Cepat Molekuler,
pemeriksaan ini mampu mendeteksi DNA MTB
kompleks secara kualitatif dari spesimen langsung, baik
dari dahak maupun non dahak. Pemeriksaan GeneXpert
MTB/Rif dapat mendiagnosa TB dan resistensi
terhadap rifampisin secara cepat dan akurat, keakuratan
alat tersebut mencapai 99%, namun tidak dapat
dilakukan terhadap pemeriksaan lanjutan (monitoring)
pada pasien yang mendapat terapi. (Kemenkes RI,
2015)
2 JAB – STABA | VOL.03 NO.01 | Januari 2019
Berdasarkan uraian diatas tentang resiko penularan yang
dapat terjadi melalui hasil BTA negatif mikroskopis,
maka dari itu peneliti bertujuan untuk melakukan
Perbandingan Pemeriksaan BTA Negatif
Mikroskopis Dengan Tes Cepat Molekuler.
2. METODE PENELITIAN
Penelitian ini merupakan penelitian deskriptif dengan
pendekatan cross sectional. dimana pengamatan atau
pengukuran dilakukan secara bersamaan, yaitu
pengukuran dilakukan dengan 1 kali pengamatan., Unit
Eksperimen untuk penelitian ditentukan menggunakan
rumus untuk menaksir proporsi populasi dengan
menetapkan taraf kepercayaan 95% dan presisi 15%.
Jumlah sampel yang dibutuhkan pada penelitian ini
minimal sebanyak 45 sampel.
2.1 Mikroskopis
- Di siapkan kaca sediaan.
- Diambil pot dahak dan kaca sediaan yang
beridentitas sama dengan pot dahak.
- Kemudian ambil dahak oleskan merata pada
permukaan kaca sediaan dengan lidi buat
lingkaran kecil-kecil dengan menggunakan lidi
lancip.
- Kemudian di keringkan setelah kering,lalu di
fiksasi di atas lampu bunsen
- Sediaan yang sudah difiksasi diletakan pada
rak pewarnaan dengan apusan sputum
menghadap keatas
- Diteteskan larutan carbol fuchsin 0,3% pada
hapusaan dahak sampai menutupi seluruh
permukaan sediaan
- Dipanaskan dengan api spiritus sampai keluar
uap selama 3-5 menit
- Dibilas dengan air mengalir sampai zat
pewarna terbuang
- Diteteskan dengan asam alkohol (HCl - alkohol
3%) sampai warna merah fuchsin menghilang
- Dibilas dengan air mengalir
- Diteteskan larutan methilen blue 0,3% pada
sediaan sampai menutupi seluruh permukaan
dan didiamkan 10-20 detik.
- Dibilas dengan air mengalir pelan kemudian
keringkan sediaan diatas rakpengering.
- Kemudian baca di bawah mikrskop lensa10 x
dan 100x di tetesi emersi oil
- Interpretasi hasil :
Negatif (-) : tidak didapatkan adanya BTA
Positif (+) : di dapatkan 1-9 BTA/100 LP
Positif (+1) : didapatkan 10-90 BTA/100 LP
Positif (+2) : ditemukan 1-10 BTA/LP
Positif (+3) : ditemukan lebih dari 10 BTA/LP
 2.2 Tes Cepat Molekuler - Apabila pengujian selesai lampu hijau
akan padam.
Penyiapan Contoh Uji : - Tunggu sampai sistem membuka pintu
pada akhir pengujian, kemudian buka
pintu modul dan keluarkan catridge.
- Lakukan tindakan disinfektan pada area (Cepheid GeneXpert Rev. D, 2011)
kerja.
- Tandai catridge dengan identitas contoh
uji Jangan menempelkan label 3. HASIL PENELITIAN DAN
padapenutup catridge. PEMBAHASAN
- Tuliskan dentitas atau tempelkan label
pada dinding catridge. Masukkan contoh Hasil Penelitian mengenai Perbandingan Pemeriksaan
uji kedalam wadah sputum yang tidak BTA Negatif Mikroskopis Dengan Tes Cepat
bocor. Molekuler dari 45 sampel yang diperiksa didapatkan
- Bukalah penutup wadah sputum, hasil pada tabel 4.1 dibawah ini :
tambahkan reagen dengan perbandingan 1
bagian volume sampeldan 2 bagian
volume reagen. No.
Kode Hasil Hasil
- Kocok sampai homogen. Pasien BTA (-) Tes Cepat Molekuler
- Biarkan selama 5 menit pada suhu kamar.
- Kocok kembali. Biarkan sealama 10 menit MTB
1. 1.600 NEGATIF
Detected Very Low
pada suhu kamar.
MTB
2. 1.653 NEGATIF
Penyiapan Catridge Not Detected

MTB
3. 1.654 NEGATIF
Not Detected
- Hisap contoh uji dengan menggunakan
pipet steril sampai meniscus diatas tanda MTB
4. 1.662 NEGATIF
minumum (2ml). Not Detected
- Buka penutup catridge.
MTB
- Pindahkan contoh uji kedalam 5. 1.663 NEGATIF
Not Detected
ruang catridge Xpert MTB/RIF. (Cepheid
GeneXpert 6252 Rev. D, 2011). MTB
6. 1.665 NEGATIF
Uji dengan alat GeneXpert Not Detected

- Lihat tampilan GeneXpert Dx System, klik 7. 1.669 NEGATIF

MTB
“CREATE TEST”. Not Detected
- Pindai barcode pada catridge Xpret MTB
MTB/RIF. 8. 1.671 NEGATIF
Not Detected
- Akan tampil Create Test Window.
- Menggunakan informasi barcode, mesin 9. 1.672 NEGATIF
MTB
secara otomatis akan mengisi kotak-kotak Not Detected
pada: Select Assay, Reagent Lot ID, MTB
Catridge SN, and Expiration Date. 10. 1.674 NEGATIF
Not Detected
- Pindai atau ketik identitas contoh uji.
Pastikan identitas benar. Identitas contoh MTB
11. 1611 NEGATIF
Not Detected
uji berhubungan dengan hasil uji dan akan
ditampilkan “View Result” window dan 12. 1.675 NEGATIF
MTB
semua laporan. Not Detected
- Klik “Start Test”. MTB
- Ketik kata sandi. 13. 1.676 NEGATIF
Not Detected
- Bila lampu hijau berkedip, buka pintu
MTB
14. 1.677 NEGATIF
modul dan masukkan catridge. Not Detected

- Tutup pintu. MTB

15. 1.684 NEGATIF
Not Detected
- Selama pengujian lampu hijau tetap
MTB
16. 1.685 NEGATIF
menyala tanpa berkedip. Not Detected

JAB – STABA | VOL.03 NO.01 | Januari 2019 3

 MTB MTB
17. 1.686 NEGATIF 41. 1.760 NEGATIF
Not Detected Not Detected

MTB MTB
18. 1.688 NEGATIF 42. 1.762 NEGATIF
Not Detected Not Detected

MTB MTB
19. 1.690 NEGATIF Detected Very Low 43. 1.770 NEGATIF
Not Detected
RR
MTB
MTB 44. 1.771 NEGATIF
20. 1.691 NEGATIF Not Detected
Not Detected
MTB
MTB 45. 1.772 NEGATIF
21. 1.693 NEGATIF Not Detected
Not Detected

MTB
22. 1.694 NEGATIF
Not Detected Pembahasan

23. 1.695 NEGATIF

MTB Sampel yang digunakan pada penelitian ini adalah
Not Detected sampel sputum dari pasien terduga penderita TB dengan
MTB hasil BTA mikroskopis negatif, dari hasil pemeriksaan
24. 1.697 NEGATIF
Not Detected 45 sampel dengan metode RT PCR GeneXpert,
didapatkan positif sebanyak 2 orang, 1 ditemukan
MTB
25 1.698 NEGATIF positif Resistantce Rifamfisin, serta negatif sebanyak 43
Not Detected
orang. Sedangkan pada hasil pemeriksaan miroskopis
MTB dari 45 sampel sputum, tidak ditemukan sputum BTA
26. 1.702 NEGATIF
Not Detected
positif. Hal itu dikarenakan pada metode Tes Cepat
MTB Molekuler jumlah minimal bakteri yang dibutuhkan
27. 1.710 NEGATIF
Not Detected lebih sedikit yaitu 131 bakteri/mililiter, (Wulandari Y,
2011) sedangkan pada pemeriksaan mikroskopis
MTB
28. 1.709 NEGATIF dibutuhkan bakteri baru yang jumlahnya lebih banyak
Not Detected
yaitu paling sedikit 5000 bakteri dalam satu milliliter
MTB sputum.
29. 1.687 NEGATIF
Not Detected
Pada penelitian lain yang dilakukan di Rumah
MTB Sakit Umum dr. M. Djamil Padang didapatkan hasil uji
30. 1.708 NEGATIF
Not Detected diagnosis dengan mesin GeneXpert untuk mendiagnosis
TB paru dengan BTA negatif didapatkan sensitivitas
MTB
31. 1.749 NEGATIF 92,86%, spesifisitas 95,75%. Kelebihan lain yang
Not Detected
terdapat dalam Pemeriksaan Xpert MTB/RIF yaitu alat
MTB ini juga dapat mendeteksi MTB kompleks dan resistensi
32. 1.750 NEGATIF
Not Detected terhadap rifampisin secara simultan dengan
mengamplifikasi sekuen spesifik gen rpoB dari MTB
MTB
33. 1.754 NEGATIF
Not Detected
kompleks menggunakan lima probe molecular beacons
(probe A – E) untuk mendeteksi mutasi pada daerah gen
MTB rpoB.
34. 1.752 NEGATIF
Hasil ini sesuai dengan yang diharapkan,
Not Detected
dimana adanya perbedaan dari hasil pemeriksaan BTA
MTB negatif mikroskopis dengan Tes Cepat Molekuler. yaitu
35. 1.753 NEGATIF
Not Detected
pada alat uji diagnostik yang terutama di pergunakan
MTB untuk menyingkirkan ada atau tidakadanya suatu
36. 1.755 NEGATIF
Not Detected penyakit, maka diharapkan mempunyai nilaisensitivitas,
spesifisitas, akurasi dan uji kappa yangtinggi sehingga
MTB akan lebih memastikan diagnosis pasien. Pemeriksaan
37. 1.756 NEGATIF
Not Detected
dengan metode RT-PCR GeneXpert ini memiliki nilai
MTB
sensitivitas yang tinggi, Sehingga dapat digunakan
38. 1.757 NEGATIF sebagai alat skrining untuk menjaring pasien yang
Not Detected
menderita TB paru, sedangkan nilai spesifisitas yang
MTB tinggi dapat menentukan seorang pasien betul-betul
39. 1.758 NEGATIF
Not Detected
menderita TB paru atau tidak menderita TB paru
MTB sehingga pemberian terapi dapat segera diberikan.
40. 1.759 NEGATIF
Not Detected

4 JAB – STABA | VOL.03 NO.01 | Januari 2019

4. KESIMPULAN DAN SARAN
Kesimpulan Berdasarkan Penelitian yang dilakukan
dapat disimpulkan bahwa ada perbedaan hasil pada
Pemeriksaan BTA dari sampel sputum Negatif
menggunakan uji Mikroskopis dan Tes Cepat
Molekuler.
5. DAFTAR PUSTAKA
1. Aditama TY, Tuberkulosis, Masalah dan
Perkembangannya.. Semi jurnal Farmasi
dan Kedokteran Ethical Digest. Jakarta,
2008.
2. Algoritma Tuberkulosis Pada Dewasa. Semi
jurnal Farmasi dan Kedokteran Ethical
Digest. Jakarta, 2011.
3. Alsagaff H, Mukty A, Dasar-dasar Ilmu
Penyakit Paru. Surabaya : Airlangga
University Press, 2010.
4. Amin Zulkifli, Bahar A.Tuberkulosis Paru.
dalam: Sudoyo Aru W, Setiyohadi B,
Buku Ajar Ilmu Penyakit Dalam. Jakarta
: Interna Publishing, 2009.
5. Brooks GF, Butel JS, Morse SA.
Mikobakteria. Dalam : Mudihardi E,
Kuntaman, Wasito EB, et al eds.
Mikrobiologi Kedokteran. Jakarta : Salemba
Medika, 2005.
6. Centers for Disease Control and Prevention
Division of Tuberculosis Elimination
Laboratory Branch. Laboratory User Guide
for U.S. Public Health Laboratories:
Molecular Detection of Drug Resistance
(MDDR) in Mycobacterium tuberculosis
Complex by DNA Sequencing (Version 2.0) .
[Online] Juni 2012. Diakses 9 April 2017
dari:
https://www.cdc.gov/tb/topic/laboratory/md
drusersguide.pdf.
7. Crofton J, Horne N, Miller F. Tuberkulosis
Klinis. 2nd ed. Jakarta: Widya Medika,
2002.
8. Ford, Christopher B. Use of whole genome
sequencing to estimate the mutation rate of
Mycobacterium tuberculosis during latent
infection. 2011.
9. Gomes M. Pulmonary Tuberculosis:
Relationship Between Sputum
Bacilloscopy and Radiological Lesions. Rev.
inst. Med. Trop. Sao Paulo: 2003.
10. GBCHealth. drug-resistant tb: why it
matters. s.l. : GBCHealth, 2011.
11. Icksan A, Luhur R. Radiologi Toraks
TuberkulosisParu. Jakarta: Sagung Seto,
2008.
JAB – STABA | VOL.03 NO.01 | Januari 2019
12. Irianto K. Pengecatan Bakteri. Dalam:
Nurhayati N, Mikrobiologi Menguak Dunia
Mikroorganisme.. Bandung: Yrama Widya,
2006.
13. Kementerian Kesehatan Republik
Indonesia : Direktorat Jenderal Bina Upaya
Kesehatan Petunjuk Teknis Pemeriksaan
Tuberkulosis MengunakanAlat GeneXpert,
Jakarta, 2015.
14. Kementerian Kesehatan Republik
Indonesia : Direktorat Jenderal
Pengendalian Penyakit dan Penyehatan
Lingkungan. Pedoman Nasional
Pengendalian Tuberkulosis. Jakarta. 2011
15. Kementerian Kesehatan Republik
Indonesia: Peduli TBC, Indonesia Sehat.
Jakarta. 2018. dari :
http://www.depkes.go.id/article/view/180321
00002/peduli-tbc-indonesia-sehat.html
16. Kumala W. Diagnosis Laboratorium
Mikrobiologi Klinik.. Jakarta: Universitas
Trisakti, 2006.
17. Masdalena. Pengaruh Faktor Higiene dan
Sanitasi Lingkungan Terhadap Kejadian
Penyakit Tuberkulosis Paru Pada Warga
Binaan Pemasyarakatan di Blok D Rumah
Tahanan Negara Klas I Medan, Skripsi
Fakultas Kesehatan Masyarakat Universitas
Sumatera Utara. Medan. 2012
18. Misnadiarly. Pemeriksaan Laboratorium
Tuberkulosis dan Mikobakterium Atipik.
Jakarta: Dian Rakyat, 2006.
19. PDPI. Pedoman diagnosis Dan
Penatalaksanaan Tuberkulosis Di Indonesia.
Diakses 9 Maret 2017
dari:http://www.klikpdpi.com/konsensus/tb/t
b.html
20. Perhimpunan Dokter Paru Indonesia.
Tuberkulosis Pedoman Diagnosis dan
Penatalaksaan di Indonesia. Jakarta: Indah
Offset Citra Grafika, 2006.
21. Piatek, Amy S. Science and Practice.
GeneXpert for TB diagnosis: planned and
purposeful implementation. Global Health,
2013.
22. Radji M. Mycobacterium Tuberculosis.
Dalam: Manurung J. Buku Ajar
Mikrobiologi: Panduan Mahasiswa Farmasi
dan Kedokteran. Jakarta: EGC, 2010.
23. Sharma, Surendra Kl. Evaluating the
Diagnostic Accuracy of Xpert MTB/RIF
Assay in Pulmonary Tuberculosis. Jakarta
2015.
24. Wulandari Y, Wiqoyah N, Mertaniasih NM.
Nucleicacid amplification of the RPOB
region ofMycobacterium tuberculosis in
pulmonary uberculosis diagnosis. Folia
Medica Indonesiana 2011.
5
 25. Zumla, Alimuddin I dan Lawn, Stephen D.
Diagnosis of extra pulmonary tuberculosis
using the Xpert® MTB/RIF assay. 2012.

6 JAB – STABA | VOL.03 NO.01 | Januari 2019