REVIEW JURNAL

Penulis John Hendri

Tahun 2008
Judul TEKNIK DEPROTEINASI KULIT RAJUNGAN (Portunus
pelagious) SECARA
ENZIMATIK DENGAN MENGGUNAKAN BAKTERI
Pseudomonas aeruginosa
UNTUK PEMBUTAN POLIMER KITIN DAN
DEASETILASINYA DI MAKBON
Halaman 13

Landasan Teori Jurnal ini menjelaskan suatu teknik deproteinasi

pada kulit rajungan secara enzimatik dengan
menggunakan bakteri Pseudomonas aeruginosa untuk
membuat polimer kitin dan deasetilasinya. Pada jurnal
ini penulis memaparkan secara jelas tentang isolasi kitin
secara enzimatik, demineralisasi, depigmentasi,
penentuan kondisi optimum fermentasi, hingga
penentuan kadar nitrogen.
Penulis sangat cermat dalam mengamati kondisi di
daerahnya yang melimpah akan hasil laut berupa udang
dan kepiting sehingga menghasilkan banyak sekali
limbah sisPenggunaan kitin dibatasi oleh sifat-sifat yang
tidak larut dan sulit dipisahkan dengan bahan lain yang
terikat terutama protein, sehingga untuk pemanfaatannya
kitin perlu diubah terlebih dahulu menjadi kitosan.
Kitin merupakan salah satu polisakarida yang
 melimpah dialam selain selulosa dan pati. Kitin adalah
polimer dari N-asetilglukosamin yang terikat secara 1,4 β
dengan tingkat terasetilasi yang lebih tinggi. Sedangkan
turunannya yang memiliki tingkat terasetilasi lebih
rendah disebut kitosan.
Penulis mengamati bahwa limbah hasil laut di
daerahnya dapat dimanfaatkan secara optimal karena
kulit kepiting mengandung senyawa kitin yang cukup
tinggi. Penulis kemudian menyadari dan mencoba
memanfaatkan limbah itu dengan optimal.
Kitin dan kitosan dinegara maju telah diproduksi
secara komersial mengingat manfaatnya di berbagai
industri, seperti bidang farmasi, biokimia, bioteknologi,
kosmetika, biomedika, industri kertas, industri pangan,
industri tekstil, dan lain-lain. Pemanfaatan tersebut
didasarkan atas sifat-sifatnya yang dapat digunakan
sebagai pengemulsi, koagulasi, pengkelat, dan
penebalemulsi (Muzarelli, 1984).
Oleh karena itu, maka penulis melakukan
penelitian dan percobaan untuk menghasilkan kitin dan
kitosan dari kulit kepiting rajungan..
Metode dan Subjek Dalam jurnal ini penulis menjelaskan bahwa,
isolasi kitin dari kulit kepiting dilakukan dengan dua
metode, yaitu metode kimia dan metode enzimatik. Pada
metode kimia dilakukan tiga tahap yang meliputi tahap
pemisahan protein dengan menggunakan larutan NaOH
encer, pemisahan mineral dengan larutan asam klorida
encer, dan tahap pemutihan hasil dengan aseton. Ketiga
tahap ini merupakan faktor yang menentukan kualitas
kitin.
Produksi kitin secara kimia ini dapat menimbulkan
masalah pembuangan limbah yang sangat berpengaruh
pada lingkungan dan menyebabkan kitin
terdepolimerisasi sehingga rantainya menjadi lebih
pendek. Wang (1997) melaporkan bahwa pembuatan
kitin secara enzimatik dapat dilakukan dengan
menggunakan bakteri Pseudomonas aeruginosa K-187
yang merupakan penghasil enzim kitinase atau
lisozim.Dengan proses fermentasi, telah ditemukan
bahwa bakteri ini juga memiliki aktivitas protease.
Pada percobaannya penulis melakukan deproteinasi
kitin dari kulit kepiting secara enzimatik menggunakan
isolat Pseudomonas aeruginosa dalam medium
cair nutrient broth (NB) pada suhu ruang dengan
konsentrasi substrat 5%, variasi waktu panen, dan pH
diperoleh waktu optimum 2 hari serta pH optimum 8.
Untuk proses demineralisasi menghasilkan rendemen
sebesar 20,08% dan depigmentasi sebesar19,52%.
Sedangkan untuk pembuatan kitosan dilakukan
deasetilasi kitin secara kimia menggunakan larutan
NaOH pekat 50% (1:15, w/v) pada suhu 100°C selama 6
jam (Muzarelli, 1977). Kitin dan kitosan yang
diperoleh diuji kelarutannya dan dianalisis menggunakan
spektrofotometer infra merah dengan kitin dan kitosan
 standar sebagai perbandingan .
Di dalam penelitiannya penulis melakukan
beberapa prosedur penelitian yaitu pengambilan sampel,
isolasi kitin secara enzimatik, pembuatan media substrat
(Demineralisasi dan Depigmentasi), penyiapan medium
fermentasi, pembuatan starter, penentuan kondisi
optimum fermentasi ( penentuan panen optimum dan
penentuan pH optimum ), dan pembuatan kitosan secara
kimia. Adapun yang perlu diperhatikan adalah
karakterisasi kitin dan kitosan yang meliputi analisis
kadar air secara gravimetri, analisis kadar abu secara
gravimetri, pengukuran spektroskopi IR, derajat
deasetilasi, dan penentuan kadar nitrogen. Subjek yang
dipilih penulis dalam penelitian ini adalah kulit kering
dari kepiting rajungan ( Portunus pelagious ).

Hasil Dalam penelitian ini penulis mencoba melakuakan

proses pembuatan kitin dari kulit kepiting rajungan
(Portunus pelagious) dengan menggunakan metode
kombinasi No (1989) dan Wang (1998) yang meliputi
tahap demineralisasi, depigmentasi, dan deproteinasi
secara enzimatik. Untuk mengetahui adanya kitin dalam
kulit kepiting rajungan (Portunus pelagious) dilakukan
uji kualitatif. Sampel ditambahkan dengan I2 dalam KI
menimbulkan warna coklat, kemudian bila ditambahkan
dengan H2SO4 pekat akan menimbulkan perubahan
warna dari coklat menjadi violet. Hal ini
 mengindikasikan bahwa dalam kulit kepiting rajungan
(Portunus pelagious) mengandung senyawa kitin.
Dari proses demineralisasi diperoleh rendemen
30,13 g dari berat sampel awal 150g (20,08 %). Hal ini
menunjukkan bahwa mineral yang dapat dipisahkan dari
sampel adalah 79,91 %. Dari proses depigmentasi
didapatkan data, Dari 150 g sampel awal diperoleh kitin
seberat 29,20 g (19,52%). Proses deasetilasi dengan
NaOH menghasilkan data bahwa dari 1 g kitin diperoleh
kitosan seberat 0,72 g. Dari hasil penelitian menunjukkan
kadar abu kitin 1,12 % kitin yang dihasilkan digunakan
untuk diubah menjadi kitosan, karena aktivitas proses
pembentukan kitosan ini dipengaruhi oleh adanya
mineral yang dapat menganggu proses deasetilasi.
Kesimpulan Setelah melakukan serangkain prosedur percobaan
maka penulis menyimpulkan bahwa Dari penelitian ini
dapat disimpulkan bahwa :
1. Kombinasi antara metode No (1989) dan Wang
(1998) dapat digunakan untuk deproteinasi polimer
kitin dari kulit rajungan (Portunus pelagious)dengan
menggunakan bakteri Pseudomonas aeruginosa.
2. N,N-dimetilasetamida dan LiCl 10% merupakan
pelarut efektif untuk melarutkan kitin, hal ini terbukti
dengan diperolehnya waktu panen optimum 2 hari
dan pH optimum 8 yang menghasilkan produk
terbanyak.
3. Deproteinasi kitin dari kulit rajungan (Portunus
 pelagious) menghasilkan rendemen sebesar 93,33%
dengan persen protein yang hilang 6,67%, derajat
deasetilasi 38,8%, kadar air 2,84%, kadar abu 1,12%,
dan kadar nitrogen 1,17%.
4. Deasetilasi kitin menjadi kitosan menggunakan
NaOH 50% memberikan rendemen sebesar 72% dari
berat awal 1 g dengan derajat deasetilasi 62,8%.