SENTRIFUGASI

PEMISAHAN MEKANIS

Definisi
Sentrifugasi merupakan suatu metode yang
digunakan dalam pencapaian sedimentasi
dimana partikel-partikel yang ada di dalam
suatu bahan yang dipisahklan dari fluida oleh
gaya sentrifugal yang dikenakan pada
partikel
Sentrifugasi adalah metode yang umum
diterapkan untuk memisahkan sel, organel
dan senyawa biomolekul berdasarkan adanya
daya sedimentasi yang ditimbulkan oleh alat
sentrifuge
2

Dasar Teori
Apabila suatu partikel
bergerak melingkar
dengan radius (r) dan
kecepatan angular ()
tertentu, maka partikel
tersebut akan
mendapatkan gaya
sentrifugasi (Fc) yang
besarnya merupakan
hasil kali medan
sentrifugal
( 2r) dengan massa
efektif partikel tersebut

Prinsip Kerja
Dimana objek diputar secara
horizontal pd jarak radial dan titik
dimana titik tersebut dikenakan gaya.
Pada saat objek diputar, partikel2 yg
ada akan berpisah dan berpencar
sesuai berat jenis msg2 partikel.
Apabila objek berotasi didalam
tabung/silinder yg berisi campuran
cairan dan partikel,
4

 maka campuran tsb dapat bergerak

sesuai pusat rotasi namun hal tsb tdk
terjadi krn adanya gaya yg
berlawanan yg menuju kearah
dinding luar silinder atau tabung.
Gaya yg paling berperan adlh gaya
sentrifugal. Gaya inilah yg
menyebabkan partikel2 menuju
dinding tabung dan terakumulasi
membentuk endapan
5

 Penerapan Teknik Sentrifugasi

Teknik sentrifugasi sering dipergunakan untuk

pemisahan senyawa biomolekul
Berdasarkan berat molekul dan densitasnya:
Pemisahan sel, baik sel hewan, tumbuhan
maupun mikrobia (yeast, bakteri)
Pemisahan organel sel, misalnya: inti sel,
mitokondria, kloroplas dll
Pemisahan biomolekul, misalnya:antibodi, DNA,
plasmid dll, yang umumnya menggunakan teknik
tambahan, misalnya:
- tehnik gradien sentrifugasi isopicnic (gradien
sukrosa)
untuk pemisahan protein tertentu
- teknik gradien equilibrium (gradien
CsCl) untuk
6
pemisahan DNA, RNA dan plasmid

 Alat Sentrifuge

merupakan alat pemisah yang digunakan

untuk memisahkan campuran padat-cair
atau cair-cair yang tidak saling larut akibat
gaya sentrifugal dengan cara diputar
dengan kecepatan tinggi.

 Berdasarkan kecepatan putarannya:

a)Sentrifuge kecepatan sedang hingga
6000 rpm
b)Sentrifuge kecepatan tinggi hingga
20.000 rpm
c)Ultrasentrifuge kecepatan hingga
100.000 rpm (atau lebih)
Berdasarkan temperatur untuk pemisahan
d)Sentrifuge tanpa pengatur suhu (suhu
ruangan), biasanya untuk sentrifuge
kecepatan sedang
b) Sentrifuge dengan pengatur suhu
(refrigerated centrifuge)
8

Komponen penting alat

sentrifuge
a) Rotor tempat untuk
meletakkan tabung
sampel yang akan
dipisahkan.
Rotor tersebut
dihubungkan dengan
motor pemutar
b) Ruangan (chamber)
sentrifuge yang berisi
rotor dan motor
pemutar
c) Tombol pengatur
kecepatan, suhu dan
waktu (timer) dll

Aplikasi operasi sentrifugasi di

industri
Centrifugal Sifter operasi screening
Centrifugals Filter operasi filtrasi
Suspended batch sentrifuge
Automatic batch sentrifuge
Continuous filtering sentrifuge

Centrifugal decanters operasi

dekantasi
Tubular centrifuge
Disk centrifuge
Nozzle discharge centrifuge

10

11

12

13

14

Menurut hukum Stokes, apabila partikel bulat berada dalam

suatu cairan,
maka partikel tersebut akan bergerak kedasar dengan
kecepatan:

2 r2 (b-bm)a
V = ------------------------ ..(4)
9n
V = kecepatan mengendap
r = jari-jari partikel
b = berat benda

bm = berat jenis cairan

n = kekentalan
a = percepatan gaya tarik bumi
(gaya sentrifugal atau Fc)

Nilai r dan b dalam suatu eksperimen umumnya adalah

tetap, sedangkan nilai n
dan bm jarang berubah, sehingga supaya kecepatan
mengendapnya tinggi
dilakukan usaha untuk menaikkan nilai a
15

Untuk menaikkan nilai a dengan memberikan gaya yang besar bila

benda
tersebut ditempatkan dalam medan sentrifugal (a = 2r)
Kecepatan alat untuk menempatkan benda (rotor) berputar adalah
ekuivalen dengan 2 x radius, maka kecepatan sudut rotor dalam
berputar per menit adalah:

2.rad menit-1
= --------------------------60

.(5)

Sehingga percepatan dalam gaya sentrifugal adalah:

42 (rad. menit-1)2 r
a = ---------------------------------3600

.(6)

16

Pemisahan partikel selama sentrifugasi

17

Gaya sentrifugal bila ditulis dalam satuan gravitasi atau RCF

(relative centrifuge field) dengan konstanta gravitasi 980 cm
det-1 adalah:

42 (rad. menit-1)2 r
RCF = --------------------------------- (7)
3600 x 980
Atau diringkas menjadi:
RCF = 1,11 . 10-5 . N2 . r

(8)

Keterangan:
RCF dalam satuan g (gravitasi)
N = gaya dalam rpm
r = jarak rotor ke pusat putaran
18

Untuk mengkonversikan satuan rpm kedalam g

dapat dilakukan dengan
menggunakan skala yang sangat ditentukan oleh
jarak rotor ke pusat
putaran (dalam cm) dapat dilihat pada skala di
Gambar berikut:

19

Konversi kecepatan putar dari RCF (g) ke RPM (rpm) berdasarkan diameter rotor (cm)

20

21

Koefisien Sedimentasi
Kecepatan sedimentasi berbanding lurus dengan gaya
sentrifugal
Fc = vf
Sehingga koefisien sedimentasi (S) dapat diuraikan sebagai
berikut:
Fc
S = ----------- = 1
vf
= Fc = v f

_
m(1 v)
-------------f

v
= --------2 r

.. (9)
22

Satuan untuk S adalah unit Svedburg (S)

1 S = 10-13 detik
Contoh soal:
Apabila suatu protein antibodi dengan berat molekul
(BM) 150 kD, diputar dengan
Ultrasentrifuge yang radius rotornya 8 cm, dengan
kecepatan 75.000 rpm. Pada
kondisi tsb medan sentrifugasinya adalah 4,9 x 108 cm
dt-2, dan kecepatan
Sedimentasi pada gaya tsb 3,4 x 10-4 cm dt-1.
Berapakah koefisien sedimentasi?

23

Diketahui:
2 r = 4,9 x 108 cm dt-2
V

= 3,4 x 10-4 cm/dt

Jawab:
S

v
= ---------2 r

3,4 x 10-4 cm/dt

-----------------------------4,9 x 108 cm/dt-2

= 0,7 x 10 -12 dt = 7 x 10-13 dt = 7S

24

Ukuran sel,
partikel,
organel
berdasar
koefisien
sedimentasi
(S)

25

Satuan yang dipergunakan dalam sentrifugasi

adalah:
rpm

= revolution per minute (putaran per

menit)
g
S

= gravitasi
= unit Svedberg (koefisien sedimentasi)

26

Ultrasentrifugasi untuk pemisahan komponen sel

27

28

Contoh alat
ultrasentrifuge

29

Rotor tempat meletakkan tabung sentrifuge

30

Pengoperasioan alat sentrifugasi

1) Pilihlah alat sentrifugasi sesuai dengan kebutuhan, misal:
- besarnya rotor tempat sampel
- sentrifuge dengan pengatur suhu atau tidak
- berapa kecepatan yang dipergunakan (RPM atau RCF)
2) Letakkan tabung sentrifuge didalam rotor secara seimbang (lihat pada
Gambar berikut)

3) Volume larutan sampel dalam tabung kurang dari volume tabung

4) Apabila larutan sampel mudah menguap maka tabung ditutup rapat
5) Sebelum dilakukan pemutaran (start), tutuplah penutup sentrifuge
secara rapat
31

Aturlah suhu sesuai yang diperlukan sebelum mulai pengoperasian

alat sentrifuge
Putarlah sentrifuge dengan kecepatan sesuai dengan prosedur yang diikuti,
pertama dimulai dengan kecepatan rendah, apabila suara atau gerakan
putaran normal maka kecepatan dapat dinaikkan sesuai dengan keperluan.
Apabila suara atau gerakan dari rotor terdengar kasar, maka kecepatan
dikembalikan ke nol atau dihentikan (stop) dan periksa posisi sampel
di dalam rotor.
Perhatikan waktu putar yang diperlukan (sesuai dengan prosedur)
Setelah selesai, tunggu sampai kecepatan putaran berhenti (menunjukkan
angka nol)

0) Ambil tabung sampel secara hati-hati, jangan sampai terguncang dan lekas
dipisahkan antara pelet (endapan.partikel yang tersedimentasi pada
bagian bawah tabung) dan supernatan (cairan bagian atas) secara hati-hati

1) Bersihkan rotor dan ruangan bagian dalam sentrifuge maupun pada bagian
rotor tempat untuk meletakkan sampel, dan tutuplah alat sentrifuge
32

33

34

35

36

37

38

Tugas

Buatlah kelompok 1 kelas = 2 kelompok

Kelompok 1 Centrifugals Filter
Kelompok 2 Centrifugal decanters
Tugas berupa paper, tentang :
Macam-macam alat
Prinsip kerja alat
Gambar dll
Tugas bisa diambil dari terjemahan buku Unit
Operation of Chemical Engineering
Tugas dipresentasikan
39