ISOLASI DAN IDENTIFIKASI

BAKTERI SHIGELLA
Herlina, SKM, M.Kes

Prodi DIV Analis Kesehatan

Universitas Prof. Dr. Hamka
Jakarta
 Pendahuluan
Shigella sp adalah kuman patogen usus yang telah
lama dikenal sebagai agen penyebab penyakit disentri
basiller
Berada dalam tribe Escherichiae karena sifat genetic
yang saling berhubungan, tetapi dimasukkan dalam
genus tersendiri yaitu genus shigellla karena gejala
kinik yang disebabkannya bersifat khas.
Sampai saat ini terdapat 4 spesies Shigella yaitu:
Shigella dysenteriae, shigella flexneri, shigella boydii,
dan shigella sonnei.
 Morfologi
Ciri-ciri Khas Organisme
Shigella adalah kuman batang gram negatif ramping;
bentuk kokobasil dan ditemukan pada biakan muda

Biakan
Shigela bersifat fakultatif anaerob tetapi paling baik
tumbuh secara aerobik. Koloninya konveks, bulat,
transparan dengan pinggiran utuh yang mencapai
diameter kira-kira 2 mm dalam 24 jam.
 Morfologi
Sifat-sifat Pertumbuhan :

Semua Shigella meragikan glukosa. Bakteri ini tidak meragi

laktosa, kecuali Shigella sonnei
Ketidakmampuannya untuk meragikan laktosa membedakan
bakteri Shigella pada perbenihan diferensial
Shigella membentuk asam dari karbohidrat, tetapi jarang
menghasilkan gas
Shigella juga dapat dibagi menjadi bakteri yang meragikan
manitol dan yang tidak.
 Klasifikasi

Kingdom : : Bakteria
Filum : Proteobakteria
Kelas : Gamma Proteobakteria
Ordo : Enterobakteriales
Famili : Enterobakteriaceae
Genus : Shigella
Spesies : S. boydii ; S. dysenteriae ;
S. flexneri ; S. sonnei
 Klasifikasi

Spesies shigella diklasifikasi menjadi empat

serogroup:
Serogroup A: S. dysenteriae (12 serotypes)
Serogroup B: S. flexneri (6 serotypes)
Serogroup C: S. boydii (23 serotypes)
Serogroup D: S. sonnei (1 serotype).
 Fisiologi
Sifat pertumbuhan adalah aerob dan fakultatif anaerob
pH perrtumbuhan 6,4 7,8
suhu pertumbuhan optimum 370C kecuali S. sonnei dapat tumbuh
pada suhu 450C.
sifat biokimia yang khas adalah negative pada reaksi adonitol
tidak membentuk gas pada fermentasi glukosa,
tidak membentuk H2S kecuali S.flexneri,
negative terhadap sitrat, DNase, lisin, fenilalanin, sukrosa, urease,
VP, manitol, laktosa secara lambat, manitol, xylosa dan negative
pada test motilitas.
Sifat koloni kuman adalah sebagai berikut : kecil, halus, tidak
berwarna, bila ditanam pada media agar SS, EMB, Endo, Mac
Conkey.
 Daya Tahan
Shigella sp yang kurang tahan terhadap agen fisik dan kimia
dibandingkan Salmonella.
Tahan dalam % fenol selama 5 jam dan dalam 1% fenol
dalam jam.
Tahan dalam es selama 2 bulan.
Di dalam laut tahan selama 2-5 bulan.
Toleran terhadap suhu rendah dengan kelembaban yang
cukup.
Garam empedu konsentrasi yang tinggi menghambat
pertumbuhan strain tertentu.
Kuman akan mati pada suhu 550C.
 Struktur Antigen
Shigella mempunyai susunan antigen yang
kompleks. Terdapat banyak tumpang tindih dalam
sifat serologi pelbagai spesies, dan sebagian besar
kuman ini mempunyai antigen O yang juga dimiliki
oleh kuman enteric lainnya.
Antigen somatik O shigella adalah
lipopolisakharida. Kekhususan serologinya
tergantung pada polisakarida. Terdapat lebih dari 40
serotipe. Klasifikasi shigella didasarkan pada sifat-
sifat biokimia dan antigenik
 Patogenesis dan Patologi
Infeksi Shigella hampir selalu terbatas pada saluran pencernaan
sedangkan invasi ke aliran darah sangat jarang karena habitat
alamiah Shigella terbatas pada saluran pencernaan manusia dan
primata lainnya.
Shigella sangat menular dan membutuhkan dosis kurang dari 103
organisme untuk menimbulkan infeksi.
Proses patologik yang penting adalah invasi epitel mukosa,
mikroabses pada dinding usus besar dan ileum terminal yang
menyebabkan nekrosis selaput mukosa, ulserasi superfisial,
perdarahan dan pembentukan pseudomembran pada daerah
ulkus.
Pseudomembran ini terdiri atas fibrin, leukosit, sisa sel, selaput
mukosa yang nekrotik dan bakteri. Bila proses mulai membaik,
jaringan granulasi mengisi ulkus dan terbentuk jaringan parut.
 Toksin
1. Endotoksin
Pada waktu terjadi autolisis, semua Shigella mengeluarkan
lipopolisakaridanya yang toksik. Endotoksin ini mungkin
menambah iritasi pada dinding usus.

2. Eksotoksin (Shigella dysentriae)

S. Dysentriae tipe 1 (basil Shiga) memproduksi eksotoksin
tidak tahan panas yang dapat mempengaruhi saluran
pencernaan dan sistem saraf pusat.
Eksotoksin merupakan protein yang bersifat antigenik
(merangsang produksi antitoksin) dan mematikan hewan
percobaan.
Sebagai enterotoksin, zat ini dpat menimbulkan diare,
sebagaimana halnya enterotoksin
 Gambaran Klinik
Setelah masa inkubasi yang pendek (1-3 hari)
secara mendadak timbul nyari perut, deman dan
tinja encer.
Tinja encer tersebut berhubungan dengan kerja
eksotoksin dalam usus halus.
Sehari atau beberapa hari kemudian, karena
infeksi meliputi ileum dan kolon, maka jumlah tinja
meningkat; tinja kurang encer tetapi sering
mengandung lendir dan darah.
 Gambaran Klinik
Tiap gerakan usus disertai dengan mengendan dan
tenesmus (spasmus rektum), yang menyebabkan nyeri
perut bagian bawah.
Demam dan diare sembuh secara spontan dalam 2-5
hari pada lebih dari setengah kasus dewasa. Namun,
pada anak-anak dan orang tua, kehilangan air dan
elektrolit dapat menyebabkan dehidrasi, asidosis, dan
bahkan kematian.
Penyakit yang disebabkan oleh S.dysenteriae dapat
sangat berat.
 Gambaran Klinik
Kebanyakan orang pada penyembuhan,
mengeluarkan kuman disentri untuk waktu yang
singkat, tetapi beberapa diantaranya tetap menjadi
pembawa kuman usus menahun dan dapat
mengalami serangan penyakit berulang-ulang.
Pada penyembuhan infeksi, kebanyakan orang
membentuk antibody terhadap shigella dalam
darahnya, tetapi antibody ini tidak melindungi
terhadap reinfeksi.
 Tes Diagnosis Laboratorium
Bahan terdiri dari tinja segar, lendir, dan usapan
rectum untuk pembiakan.
Sejumlah besar lekosit dan darah fekal sering
terlihat secara mikroskopis.
Bahan serum, bila diinginkan harus diambil 10 hari
jaraknya untuk menunjukkan kenaikkan titer
antibody aglutinasi.
 Pengobatan dan Pencegahan
Penggunaan antibiotika mengurangi beratnya penyakit
maupun angka kematian, walaupun banyak penderita
yang tidak merasa perlu untuk pergi ke dokter karena
penyakit ini dapat sembuh spontan.

Antibiotika ampisilin, tertasiklin dan trimethoprim-

sulfametoksasol banyak digunakan dalam pengobatan
disentri basiler, tetapi dengan semakin banyaknya
ditemukan strain kuman yang resisten terhadap
bermacam-macam antibiotika maka sebaiknya
dilakukan terlebih dahulu tes kepekaan kuman
terhadap antibiotika sebelum memulai pengobatan
 Pengobatan dan Pencegahan
Pada pencegahan penyakit disentri basiler
kebersihan lingkungan, pencarian dan pengobatan
carrier serta khlorinasi air minum memegang
peranan penting. Carrier tidak diperbolehkan
bekerja sebagai food handler.
 Epidemiologi
Disentri basiler adalah penyakit yang endemis di
Indonesia, hal ini antara lain disebabkan sanitasi
lingkungan yang belum memadai.
Penyebaran kuman Shigella adalah dari manusia ke
manusia yang lain, dimana carrier merupakan reservoir
kuman.
Dari carrier ini, Shigella disebabkan oleh lalat, juga
melalui tangan yang kotor, makanan yang
terkontaminasi, tinja serta barang-barang lain yang
terkontaminasi ke orang lain yang sehat.
Juga harus diperhatikan kebersihan air minum, untuk
hal ini perlu dilakukan pengawasan dan khlorinasi
sumber air minum.
 Identifikasi

Spesiemen
Spesimen pada identifikasi Shigella mencakup
feses segar, usapan rectum, makanan dan
minuman.
 Identifikasi
Media Isolasi
MC (MacConkey)
EMB(Eosin Methilen Blue)
SSA (Salmonella Shigella Agar)

Media Identifikasi
TSIA(Triple Sugar Iron Agar)
SIM (Sulfur Indol Motil)
SCA (Simmon Citrate Agar)
Glukosa OF
MRVP (Methyl Red Voges Proskauer)
Nitrate Broth
Malonate Broth
Gula-Gula (Glukosa ; laktosa ; Manitol ; Maltosa ; Sakrosa)
 Pengambilan, Penangan, dan
Penyimpanan Spesimen
Waktu Pengambilan:
Sebelum penderita mendapatkan pengobatan dengan antibiotika
atau obat-obat kimia.

Cara Pengambilan
Feses dapat diambil dari tempat penampungan atau dari rectum.

a. Dari tempat penampungan:

Yang perlu diperhatikan yaitu bahwa tempat penampungan tidak
boleh desinfectansia.
Feses diambil dengan mencelupkan 2-3 batang lidi kapas steril
kedalamnya. Boleh juga diambil dengan pipet Pasteur steril 1-2 ml
feses.
 Pengambilan, Penangan, dan
Penyimpanan Spesimen
b. Dari rectum:
Pasien tidur telungkup atau miring, kaki diangkat dan ditekuk pada
lutut. Dalam keadaan terpaksa pasien boleh berdiri sambil
menungging.
Lebarkan anus dengan tangan kiri dengan tangan kanan
masukkan lidi kapas steril kedalam anus atau rectum perlahan-
lahan sambil diputar searah jarum jam sampai diperoleh feses,
kemudian ditarik sambil diputar pula. Sebelum dipakai sebaiknya
lidi kapas dibasahi dulu dengan air garam steril atau dengan
transport media yang akan dipakai. Feses yang sudah diambil
dengan lidi kapas ini disebut rectal swab.
Untuk menghindari kontaminasi/ infeksi sebaiknya menggunakan
sarung tangan.
 Pengambilan, Penangan, dan
Penyimpanan Spesimen

c. Jumlah yang diambil dan penanganannya:

Apabilamenggunakan lidi kapas ambil 2-3 batang
lidi kapas dimasukkan ke dalam 1-2 botol Carry &
Blair sampai dasarnya.
Kalau feses cair, ambil 1-2 ml feses dimasukkan
kedalam Carry & Blair dengan ditusuk-tusukkan.
 Pengambilan, Penangan, dan
Penyimpanan Spesimen
Penyimpanan:
Feses yang sudah dimasukkan kedalam Carry &
Blair boleh disimpan di dalam suhu kamar selama 3
hari atau di dalam lemari es selama 15 hari.
 Identifikasi pada Media
No Media yang Digunakan Morfologi Koloni

1 Mac Conkey Agar (MCA) koloni tidak memfermentasi laktosa, kecil-

sedang, tidak berwarna, keeping dan smooth
2 Eosin Metilen Blue (EMB) : koloni sedang, bulat, tidak berwarna, keping
dan smooth

3 Salmonella Shigella Agar koloni kecil-kecil sekali, tidak berwarna, jernih,

(SSA) keeping dan smooth
4 Endo Agar (EA) koloni kecil-sedang, bulat, merah muda, jernih,
keeping dan smooth
5 HE Agar koloni kecil-sedang, hijau, jernih, keeping dan
smooth

6 XLD Agar koloni kecil-sedang, merah, jernih, keping dan

smooth
26
 Non-lactose
fermenting
non- motile
organisms

Mannitol Mannitol
negative positive

Shigella Non lactose Lactose

dysenteria fermenter fermenter

Indole negative Indole positive Shigella sonnei

Shigella boydii Shigella flexneri

27
28
 Points of identifications between Salmonella and Shigella :

Feature Salmonella Shigella

Disease Typhoid fever Bacillary dysentery
Motility Motile Non motile
H2S Positive Negative

TSIA reaction K/A+ K/A

Nature of infection Systemic GIT

Immunity Lasting Short period

Metabolite Potent Endotoxin Endo and exotoxin

29
 Shigella
Media Reagen
dysenteriae flexneri boydii Sonnei
Gula-gula
Glukosa + + + +
Laktosa - - - -
Manitol - + + +
Maltosa - + + +
Sukrosa - - - -
Malonate Broth Negative (-)
MR Methyl red Positif (+)
VP KOH 40% + naftol Negatif (-)
Nitrat Broth Nitrit 1 + nitrit 2 Positif (+)
Sulfur Negatif (-)
SIM

Indol Kovac - + + -
Motil Negatif (-)
SCA Negative (-)
lereng / Merah/ = alkali /
dasar kuning asam
TSIA
H2 S Negative (-)
Gas - - + -
Glukosa OF Fermentative
Catalase test - + + +
Terima Kasih