DASAR – DASAR SPEKTROSKOPI

Oleh :
HERLINA RAHIM
PENDAHULUAN
 Analisa Kimia :
• Mencari informasi tentang komposisi suatu bahan
• Apa & berapa
 Teknik Instrumental :
• Berdasarkan sifat : fisika & kimia
 Teknik Spektroskopi :
• Berdasarkan sifat fisika - kimia akibat interaksi materi dengan
radiasi elektromagnetik
• Kemungkinan interaksi :
- absorpsi - hamburan
- emisi - refraksi
 Aplikasi Teknik Spektroskopi :
• Analisa kualitatif & kuantitatif
• Elusidasi struktur molekul
• Penentuan ukuran & bentuk molekul
METODA SPEKTROSKOPI

 Prinsip Dasar :
• Pengukuran sifat fisiko – kimia akibat interaksi antara
materi dengan radiasi elektromagnetik (cahaya)

 Kemungkinan Interaksi
• Absorpsi : UV/Vis, IR, AAS
• Emisi : Flame fotometri, spektrograf, ICP,
Spektrofluorosensi.
• Refraksi : Refraktometri
• Polarisasi : polarimeter
• Difraksi : Turbidimetri, X-ray, Nefelometri
RADIASI ELEKTROMAGNET
 Definisi : energi bergerak amat cepat dalam suatu ruang.
 Teori :
• Teori gelombang (klasik)
 parameter :
- panjang gelombang
- frekuensi
- Amplitudo
- kecepatan
 sulit menerangkan fenomena
- gerakan cahaya tanpa medium
- absorpsi dan emisi
• Teori partikel
 aliran partikel berenergi (foton) ~ frekuensi
 Sulit menerangkan : refraksi, difraksi
 Kedua teori :
• mempunyai keterbatasan
• daerah aplikasi
• komplementer
GELOMBANG ELEKTROMAGNET

 Karakteristik :

Medan listrik
- Panjang gelombang,  : cm. A A
- Frekuensi,  : s-1 (Hz)
- Angka gelombang,  : cm-1 Waktu / jarak

 Korelasi :
C C : 2,99792 x 1010 cm/s (vakum)
λ = : 3,00 x 1010 cm/s (udara)
υ
1 υ
υ= = (cm -1 )
λ C

 Satuan  :
UV/Vis : nm (10-9m = 10-3 m = 10 Å)
IR : m ;  = cm-1
X - ray : Å (10-10m = 10-8cm = 10-4 m)
 Energi Radiasi dan  :
E=hυ E = energi (erg)
h = tetapan Planck
C
= h. = 6,62 x 10-27 erg.s
λ
Semakin kecil , semakin besar energi

Contoh :
X – ray :  ~ 10-10m
Cahaya putih :  ~ 10-6m

Energi X – ray  10.000 x cahaya putih

Hati – hati instrumentasi dengan :

 UV
 X – ray
  – ray
  (cm)

3 x 10-11  - RAY

3 x 10-9  (nm)
X - RAY

Ultra 400
3x 10-7
Violet
UV
3 x 10-5 Violet 500
VISIBLE
Biru
INFRA
3 x 10-3
RED
Hijau 600

3 x 10-1 Kuning
MICRO
WAVE Orange
700
3 x 10 Merah

RADIO
3 x 103
WAVE
 Spektrum Teknik Mekanisme
 (cm)
3 x 10-11  - RAY Emisi

Spektrum Radiasi vs Teknik Spektroskopi

 - ray e-

Absorpsi,
3 x 10-9
X - RAY Emisi
X - ray
e-

3 x 10-7

UV Absorpsi
3 x 10-5 Emisi
VISIBLE UV/Vis

INFRA Absorpsi
3 x 10-3
RED IR

3 x 10-1
MICRO
Absorpsi
WAVE
Gelombang
Mikro ESR
3 x 10

RADIO
3 x 103 NMR
WAVE
ABSORPSI RADIASI
 Fenomena Warna

Cahaya Warna
Putih Kuning

Warna diserap : Biru

 Warna Komplementer
Radiasi terabsorpsi Warna tampak
nm Warna (komplemen)
380 - 450 Ungu Kuning - hijau
450 - 495 Biru Kuning
495 - 570 Hijau Ungu
570 - 590 Kuning Biru
590 - 620 Orange Hijau - biru
620 - 750 Merah Biru - hijau
 Mekanisme
E2 Level – level
E1 Tereksitasi
E=h E

EO = "ground state"

Hanya radiasi dengan energi (E) yang sesuai :

E = h
Kemungkinan tereksitasi :
10-6 - 10-9 det.
M ++ hh 
M M* M
M ++ ppaannaass
((R
Reellaakkssaassii))

M ++ ppaannaass ++ hh 11
M N
N ++ X
X
((F
Flluuoorreesseennssii)) ((F
Foottookkiim
miiaa))

M* : atom atau molekul tereksitasi

 Spektrum Absorpsi :
• Hubungan antara Absorpsi dengan 
• Karakteristik untuk senyawa atau atau : mengabsorpsi radiasi secara selektif.
• Jenis :
- Spektrum atomik
- Spektrum molekuler
 Spektrum Atomik :
- Penyerapan radiasi oleh atom berwujud gas
- Berupa garis - garis
Cahaya Sebagian
- Logam alkali : sederhana
Putih terapsopsi - Logam transisi : kompleks

Contoh :
Uap Na

A
330

285 590

200 400 600 nm

 Absorpsi cahaya monokromatis : Prinsip dasar AAS

Nyala
Detektor
Na

Na Terabsorpsi

Detektor

Na

330 nm 330 nm

Fraksi “ground state” Kalibrasi

Tereksitasi : Flame

Ground State : AAS

A

Konsentrasi
 Spektrum Absorpsi Molekuler :
 Absorpsi radiasi menyebabkan peningkatan energi molekul :
1. Energi rotasi :
• perputaran molekul pada beberapa sumbu  transisi level energi rotasi.
2. Energi vibrasi :
• vibrasi relatif dari atom atau kelompok atom  transisi vibrasi.
3. Energi elektronik  tingkat energi elektronik

V1
E1
VO

Level
energi
E elektro
nik

Level
V1 Level energi
energi vibrasi
EO
VO rotasi
IR VIS UV
 Karakteristik absorpsi radiasi :
 Spektrum IR :
 IR • transisi rotasi
%T • Vibrasi

Puncak tajam
 (cm-1)

Analisa Kualitatif
 Spektrum UV/Vis :
A
 V • Superimposed rotasi /
4I 7 vibrasi dengan elektronik
0S 0
0 0 yang dominan

A
Puncak lebar

 UV
Analisa Kuantitatif

200 350
EMISI RADIASI
 Prinsip
Zat cair Gas : - ion
& padat - atom
- molekul

 panas
TEREKSITASI
 AC-sparks

 M*tereksitasi Panjang
Gelombang

Emisi Kualitatif
radiasi
Intensitas
“Ground state” 
Kuantitatif

 Detektor :  Aplikasi :
- Film fotografi - Flame photometer, Spectrograph
- Pelipat gandaan - ICP (Inductively Couple Plasma)
- Mikrofotometer
 Spektrum Emisi vs Absorpsi

Emisi Absorpsi
Ca Na
442 589 Ca
Na Na Na
330 K 589 nm
330 nm K
440

Na
489
Jenis :
I MgO garis I
H pita
kontinyu
Na

MgO
H

325 400 600 nm

325 400 600 nm

Emisi Absorpsi
PENDAR CAHAYA
 Fluoresensi :
- Penyerapan cahaya (absorpsi) dan emisi ( lebih panjang)

 E1  E2
Absorpsi Fluoresensi
Emisi
 E1  E3
Posforesensi

 E2 <  E1

2 > 1

1 2

 Aplikasi : Spektrofluorometri I
 Analisa kuantitatif Intesitas

 Spesifik untuk :
- Zat berfluoresensi
- Dapat dibuat berfluoresensi Konsentrasi
PENGHAMBURAN CAHAYA
 Scattering :
- Interaksi cahaya dengan partikel terdispersi
- Penghamburan ke segala arah
- Turbidimetri & nephelometri kadar partikel

 Peralatan :  Metode lain :

- Light Scattering
Spectroscopy
- Photon Correlation
Detektor Spectroscopy

Detektor
Nephelometer
Amplifier
 AAS
NMR

JENIS TEKNIK SPEKTROSKOPI

ESR
UV
IR
Vis
Turbid. Flame
PCS ICP
Nephelo. x-ray
spekg
. Fluo
X - ray Fluoro

Refrak Polarimeter
.
Circ. Dichr.
Dispeksi
KESIMPULAN
 Analisa Kuantitatif dalam Spektroskopi :
Signal hasil
interaksi materi vs Konsentrasi
vs cahaya

 UV/Vis
 AAS
 Turbidimetri / Nefelometri Kurva kalibrasi : sumber utama ketidakpastian
 Flamephotometri & ICP
Persamaan :
y = ax
Koefisien korelasi  1
r = 0.90 – 0.95 : fair
Signal r = 0.95 – 0.99 : good
r > 0.99 : exelent
SPEKTROSKOPI UV/VIS DAN
PERALATAN

Oleh :
Herlina Rahim
 SPEKTROFOTOMETER UV/Vis
PRINSIP DASAR, PERALATAN DAN KALIBRASI

SPEKTROMETRI : ILMU YANG MEMPELAJARI

INTERAKSI SINAR DENGAN MATERI

Absorpsi

h
Transmisi

Bias

Interaksi sinar - materi

 SINAR = RADIASI ELEKTROMAGNETIK


A

GELOMBANG

Waktu/jarak
SINAR
A = amplitudo
 = panj. Gelombang
 = frekuensi
H = cycle/detik

MATERI E = h = hc/
 SPEKTRUM ELEKTROMAGNETIK


sin 

sin x 100 nm 400 nm

102 nm
UV
500 nm
Vis
IR 10-4 cm
600 nm
Gelb
Mikro 10-1 cm 700 nm
NMR

102 m
SPEKTRUM ABSORPSI DAN STRUKTUR MOLEKUL
ABSORPSI TERJADI ELEKTRON TEREKSITASI

CH3
 •
CONTOH C O•
• n

CH3 

ANTI BONDING

ANTI BONDING

E NON BONDING

BONDING

BONDING

Zat yang mengabsorpsi sinar kromofor

PEMILIHAN FILTER DALAM FOTOMETER

470 nm
Orange

BIru
 ASPEK ABSORPSI

A = - log T
P0 P
(%T) A = log (1/T)
(A)
A = log P0/ P

Hukum Lambert-Beer: A = abc

A = b c
 SPEKTRUM ABSORPSI

A. ASPEK KUALITATIF

1,0
480

Absorban

0,5 -

400 440 480 520 560 600 640

Panjang gelombang (nm)

Panjang gelombang maks. = 480 nm

B. ASPEK KUANTITATIF

A = bc

Untuk contoh A c =  c b cc

Cara perhitungan
Untuk standar A s =  s b cs

Bila kedua zat tsb. sama, maka pengamatan pada  yang sama

konsentrasi contoh dapat ditentukan sbb ;

A c =  c b cc Ac
Cc = Cs
As = s b cs As
 CARA KURVA KALIBRASI STANDAR

NO C (mol/L) A

1 50 0,30

2 100 0,60
1,0

3 150 0,90
A
4 contoh X 0,75
0,5
Cc

50 100 150 200 250 ppm

Cc = 125 ppm C
 BATASAN-BATASAN BERLAKUNYA HKM BEER

1. BATASAN SEJATI (REAL LIMITATIONS)

Pada C > 0,01 M, jarak rata-rata antar komponen yang mengabsorpsi
berkurang sehingga setiap partikel muatan terdistribusi ke sekeliling

2. PENYIMPANGAN KIMIA
- Asosiasi
- Disosiasi
- Reaksi kimiA
Dari spesies yang mengabsorpsi dengan pelarutnya

3. PENYIMPANGAN INSTRUMENTAL KARENA SINAR POLIKROMATIS

4. PENYIMPANGAN INSTRUMENTAL OLEH SINAR SESATAN

KESALAHAN PADA ANALISIS SPEKTROMETRI

25

Usahakan Penyediaan
larutan di perkirakan
20

%T = 80 - 10
15

A = 0,2 - 0,8
10

Kesalahan minimal, bila:

5

20 40 60 80 100 %T Topt = 0,368 atau

 0,8 0,5 0,3 0,2 0,1 0 A
A = 0,434
 PERALATAN SPEKTROFOTOMETER

Sumber Monokro Contoh Detektor Pencatat

sinar mator

DIAGRAM BLOK SPEKTROFOTOMETER

JENIS-JENIS SUMBER SINAR PADA SPEKTROFOTOMETER UV/VIS

VIS WOLFRAM/TUNGSTEN 350 - 780 nm

SUMBER SINAR
UV DEUTERIUM 180 - 350 nm
2. M O N O K R O M A T O R
KEUNTUNGAN SINAR MONOKROMATIS
- PEMISAHAN  YANG BERDEKATAN
- DAPAT DITENTUKAN  MAKS KEPEKAAN TINGGI
- MEMENUHI HUKUM LAMBERT-BEER

SKEMA ALAT MONOKROMATOR

PRISMA

Grating
 EFEK PENGATURAN
SLIT (CELAH) TERHADAP RESOLUSI

LEBAR PITA
EFEKTIF

LEBAR PITA
3. WADAH SAMPEL (KUVET / SEL)
 Sampel dalam pengukuran ini umumnya berbentuk larutan

 Bahan kuvet harus transparan:

 Gelas : 350 nm - 3,0 m Vis

 Kuarsa : 210 nm - 3,0 m UV/Vis

 Leburan silikat : 165 nm - 200 nm UV jauh

 Posisi kuvet terhadap sinar datang harus tegak lurus

- Sinar tegak lurus terhadap dinding kuvet

 Kuvet untuk blanko dan kuvet untuk sampel harus

“matched”
 KUVET SPEKTROFOTOMETER UV/Vis

Kuvet untuk
Spectronic 20

Untuk gas
Sampling
PELARUT / SOLVENT
 Harus dapat melarutkan sampel dengan sempurna
 Harus tidak boleh meyerap (mengabsorpsi) sinar yang dipakai
 Batas tembus larutan harus lebih kecil dari panjang
gelombang maksimum analit yang dianalisis

Tabel: Batas tembus sinar terendah untuk pelarut dalam UV/Vis

No Jenis Pelarut Batas tembus sinar

1 AIr 190 nm
2 Alkohol 210 -,,-
3 n-Heksana 220 -,,-
4 Sikloheksana 210 -,,-
5 Benzena 280 -,,-
6 Ether (Diethylether) 210 -,,-
7 Aseton 330 -,,-
8 Dioksan 220 -,,-
4. D E T E K T O R
Mengubah energi foton (sinar) menjadi energi listrik atau
isyarat listrik.
Syarat-syarat yang harus dipenuhi oleh detektor :
 Mampu menangkap dan memberi respon terhadap energi
sinar pada daerah panjang gelombang yang cukup lebar
 Mempunyai kepekaan tinggi dengan noise rendah
 Mempunyai waktu respon yang cepat
 Mempunyai kestabilan yang cukup lama
 Mempunyai isyarat elektronik yang mudah diperbesar
 Isyarat elektronik harus sebanding dengan intensitas sinar
 JENIS - JENIS DETEKTOR

DETEKTOR PHOTOTUBE

Anoda

Katoda
h (foton)

Elektron

Ampli

- +
 DETEKTOR PHOTOVOLTAIC
h
Kaca Film perak

Selenium Wadah
plastik
Besi

Energi radiasi dapat menghasilkan arus listrik setelah mengenai inteface

suatu lapisan semikonduktor dan suatu lapisan logam
Detektor ini digunakan terutama untuk daerah panjang gelombang visibel