STERILISASI

Imron Wahyu Hidayat, M.Sc., Apt

 Definisi :
• Sterilisasi :
suatu proses dg metode ttt yg bertujuan mematikan semua
organisme hidup (vegetatif & non-vegetatif) –spora bakteri yg
> resisten thd desinfektan maupun panas
• Desinfeksi :
proses yang menggunakan suatu bahan (kimia)yg dpt
membunuh mikroorganisme patogen kecuali spora bakteri,
virus & beberapa strain bakteri resisten
persenyawaan kimia  desinfektan
desinfektan + sterilisasi  benda mati
• Antiseptik :
desinfektan non toksik, dipakai untuk kulit, mukosa atau
jaringan hidup lain
 DEFINISI
• -sid
akhiran untuk menunjukkan bahwa zat kimia
yang dipakai mempu membunuh.
bakterisid, sporosid.
• -statik
akhiran untuk menunjukkan bahwa zat kimia
yang dipakai mampu mencegah pertumbuhan
organisme tapi tidak membunuhnya.
bakteriostatik, fungistatik.
 Metode sterilisasi

mekanis fisis chemis

mikrofilter

pemanasan penyinaran

bahan kimia
 ANTISEPTIK KIMIA
• Golongan Alkohol & Fenol
• Golongan Halogen
• Golongan Peroksida
• Golongan Penurun tegangan permukaan
• Golongan zat warna
• Logam-logam berat
• Gas-gas lainnya
 Golongan Alkohol & Fenol
• Alkohol adalah zat yang paling efektif dan
dapat diandalkan untuk sterilisasi dan
desinfeksi.
• Alkohol dapat mendenaturasi protein dengan
jalan dehidrasi.
• Urutan kekuatan: isopropil-OH>EtOH>MetOH
• Konsentrasi 70% sangat baik
 Golongan Halogen
• Larutan klorin (atau biasanya hipoklorit, ClO-)
dipakai untuk desinfeksi dan menghilangkan bau.
• Halazol dan parasulfon dichloramidobenzoic acid
pada konsentrasi 4-8 mg/L dapat mendisinfeksi
air yang mengandung S. typhi dalam wakti 30
menit.
• Iodium bersifat sangat antiseptik, efektif juga
untuk protozoa (amuba penyebab disentri)
• Aman untuk kulit, tetapi pada konsentrasi tinggi
dapat menyebabkan alergi pada kulit.
 Golongan peroksida
• Antiseptik efektif dan nontoksik
2 H2O2  2 H2O + O2
• Konsentrasi:
– 0,3-6,0% : desinfeksi
– 6,0-25,0% : sterilisasi
– 0,1% dalam susu pada suhu 54oC dapat
mengurangi kuman sampai 99,99%
– 10% : dapat membunuh virus dan spora
– 3%: untuk mencuci luka pada kuman aerob.
 Detergen
• Merupakan senyawa penurun tegangan
permukaan.
• Karena memiliki struktur bipolar.
• Untuk deterjen ionik sangat desinfektan
daripana deterjen nonionik.
 Logam Berat
• Dapat mempresipitasikan (menggumpalkan)
enzim-enzim atau protein esensial lainnya.
• Biasanya: Hg, Ag, As, Zn, dan Cu.
• Karena sgt berbahaya tidak digunakan lagi
• HgCl2untuk luka-luka kecil
• AgNO3infeksi gonokokus
• As2O4sifilis, infeksi protozoa
• ZnOinfeksi kuman atau jamur
 STERILISASI GAS (cont.)
• Etilen Oksida (ETO)
zat pengalkil yang dapat membunuh sel.
Diperlukan pemaparan selama semalam pada
ETO 12%. Kadar maksimum yang
diperbolehkan 50 mg/L.
 STERILISASI GAS
• Uap Formaldehid
larutan formalin (formaldehid 37%) dipanaskan
maka akan tumbul uap formaldehid yang dapat
membunuh spora dan Mycobacterium
tuberculosis.
• Beta Propiolakton (BPL)
stabil pada suhu dibawah titik beku. Digunakan
untuk mensterilisasikan vaksin, jaringan dan sera.
BPL uap non toksik, BPL cair bersifat karsinogenik.
 STERILISASI SECARA FISIKA
• Sterilisasi panas
• Sterilisasi radiasi
 METODE FISIS
1. Pemanasan
a. Pemijaran (dengan api langsung):
membakar alat pada api secara langsung
contoh alat : jarum inokulum, pinset, batang L, dll.
b. Panas kering:
Oven (60-1800C).
untuk alat dari kaca : erlenmeyer, tabung reaksi dll.
c. Uap air panas:
Konsep mirip mengukus.
untuk Bahan yang mengandung air (tidak terjadi dehidrasi).
d. Uap air panas bertekanan :
Sterilisasi panas basah

2. Penyinaran
dengan UV
contoh :
membunuh mikroba pada permukaan interior Safety Cabinet
sterilisasi ruangan
 Sterilisasi Panas
• Membunuh kuman dengancara panas adalahh
sangat mudah, dipercaya dan relatif tidak
mahal.
• Ada dua macam cara pemanasan yaitu panas
basah dan panas kering.
• Panas basah membunuh kuma dengan cara
mendenaturasi protein.
• Panas kering membunuh kuman dengan cara
mengoksidasi.
 Batasan Sterilisasi Panas
• Thermal dead point
suhu dimana suatu suspensi organisme telah
disterilkan setelah pemaparan selama 10 menit.
• Thermal dead time
waktu yang diperlukan bagi suhu tertentu untuk
mensterilkan suatu suspensi organisme.
• D value
waktu yang diperlukan untuk membunuh 90%
dari organisme dalam suatu suspensi oada suatu
suhu tertentu. D100oC
 Batasan Sterilisasi Panas
• Z value
jumlah derajad kenaikan suhu yang diperlukan
untuk menurunkan D value sampai mencapai
sepersepuluh nilai semula.
 Pemanasan Basah
• Otoklaf
Tekanan 1,5 atm; suhu 121oC; waktu 15 menit.
• Merebus
suhu 100oC; waktu rebus selama 15 menit.
 Pemanasan Kering
• Pembakaran
sterilisasi yang 100% efektif. Tetapi cara ini
sangat terbatas pada penggunaannya (hanya
pada alat besi atau kaca bagian luar)
• Sterilisasi udara panas
alat-alat ditempatkan dalam oven bersuhu
160-180oC selama 1-2 jam. Sterilisasi ini baik
untuk alat-alat laboratorium; kaca petri, pipet,
pinset, tabung, labu, dll..
 Sterilisasi Radiasi
• Mikroorganisme dapat dibunuh dengan
penyinaran ultra ungu (lamda 220-290 nm).
Radiasi yang paling efektif adalah 253,7 nm.
• Mekanisme kerjanya adalah membuat fibrasi
pada DNA sehingga membentuk dimer timin
dan mutasi lainnya.
• Karena daya penetrasi rendah  alat harus
diletakkan dekat dengan sumber sinar.
• Jauhkan dari mata  sangat peka  rusak
permanen
 STERILISASI secara MEKANIK

- Filtrasi, microfilter : 2,5 - 3μ / 0,22 - 0,45 μ

- Prinsip : Cairan lewat saringan berpori (ditekan dengan gaya sentrifugasi
atau pompa vakum). Bakteri tertahan pada saringan
- Virus tidak tersaring.
- Bahan tidak tahan panas atau mudah menguap:
vitamin
antibiotik
enzim
- Langkah :
 Sterilkan tempat yang digunakan sebagai wadah
 Media disaring menggunakan mikrofilter (2,5 - 3μ) dan langsung
ditempatkan pada wadah steril
 Ditutup rapat dengan aluminium foil
 Dilakukan dalam laminar flow
 Sterilisasi Penyaringan
• Dengan cara mengalirkan cairan atau gas
melalui suatu bahan penyaring yang memiliki
pori cukup kecil untuk menahan
mikroorganisme.
• Saringan tidak dapat menahan virus karena
ukurannya yang sangat kecil.
• Dilakukan untuk menyaring substansi yang
peka terhadap suhu.
 Sterilisasi Penyaringan Cairan
• Menggunakan filter
• Saringan Seitz  filter yang dilengkapi
asbestos
• Saringan Berkefeld  terbuat dari tanah
diatome
• Saringan Chamberland  terbuat dari porslen
• Fritted glass filter  terbuat dari serbuk gelas
 Sterilisasi Penyaringan Gas
• Untuk menyaring udari dari cemaran mikroba
biasanya digunakan kapas kering.
• Kapas basah dapat ditembus mikroba.
• Laminar flow bench  untuk mencegah
pemcemaran kuman pada waktu menuang
perbenihan.