CROSSMATCHING /

UJI SILANG SERASI

JULIA SETYATI

DISAMPAIKAN PADA PELATIHAN TENAGA TEKNIS BANK DARAH

RUMAH SAKIT ANGKATAN ke-XV

SEMARANG , 10 NOPEMBER 2015

JSD 1
SEJARAH

JSD 2
BANK DARAH RUMAH SAKIT (BDRS)
 Unit di Rumah Sakit yang melaksanakan
pengelolaan stok dan distribusi darah /
komponen siap pakai untuk memenuhi
kebutuhan Rumah Sakit.
 Tujuan : memudahkan , menyederhanakan
, mendekatkan serta mempercepat
pelayanan permintaan darah / komponen
darah , sehingga pasien akan menerima
transfusi secepat mungkin dengan
jaminan kualitas yang baik
JSD 3
 YANG DIHARAPKAN PASIEN

Darah yang aman (Safe blood)

Darah tersedia & cepat didapat

JSD 4
PROSES MENDAPATKAN DARAH

UDD Bank Darah

 DIMANA TERJADI RISIKO?
RS
1.Permintaan darah
(klinisi)
6. Pencatatan & 2. Pengambilan
monitoring Sampel /melabel

5. Cek akhir disisi

tempat tidur Pasien
3. Laboratorium

Seleksi darah
4. Penyimpanan
darah Pengeluaran BANK DARAH
darah
JSD 6
RISIKO TRANSFUSI DARAH
 Reaksi transfusi
 Human error : salah label , salah pasien ,
salah golongan
 Alloimunisasi terhadap antigen asing
 IMLTD

JSD 7
PEMERIKSAAN YANG DILAKUKAN DI
BANK DARAH

 Golongan darah ABO/Rhesus

pasien dan donor
 Uji Silang Serasi
 DCT
LANGKAH LANGKAH PEMERIKSAAN
KOMPATIBILITAS DI BANK DARAH

Uji silang serasi

Cek ulang golongan darah
donor yang sesuai
Periksa golongan darah pasien
(ABO dan Rh )

Periksa fisik contoh darah pasien

Cocokkan identitas contoh darah pasien
dengan identitas di formulir permintaan

JSD 9
 1. Cocokkan identitas contoh darah pasien
dengan identitas pasien di formulir permintaan

 Bila identitas tidak cocok , harus

dikembalikan dan meminta contoh darah
baru.
 Jangan sekali-kali merubah sendiri apa
yang tertera pada label contoh darah
tersebut.

JSD 10
ALAMAT RUMAH SAKIT
TELP.RUMAH SAKIT

FORMULIR PERMINTAAN DARAH

Dokter yang meminta :……………………………. UPF / ruang………… Klas………

Nama orang sakit :……………………….. …….Umur …… …. L / P……….
No.Reg OS :………………..
Diagnosa sementara : ………………………… ….Indikasi transfusi :……………
Transfusi sebelumnya :…pernah / tidak
Bagi OS wanita : pernah hamil / tidak
Golongan darah :……………………… Jumlah: ………………..Kantong
Jenis darah yang diperlukan : *) Whole Blood / Packed Red Cell / WE / FFP /
PRP / Trombosit / Cryo
Tanggal diperlukan : ………………………

TELAH TERIMA
Jumlah : Kantong No kantong : 1
Gol : 2
Nama : 3
Alamat : 4
Tanggal : Semarang, ……………………………….
Jam :

Tanda tangan penerima : Dokter yang meminta

CATATAN : Mohon diisi lengkap

*) Coret yang tidak perlu Tanda tangan & nama
2. PERIKSA FISIK CONTOH DARAH PASIEN

 Penampilan contoh darah : lisis / tidak

 Volume contoh darah :
Dewasa : 7 ml
Anak:
5-12 th : 5 ml
1-5 th : 3 ml
< 1 th : 2 ml
 Darah beku / EDTA
 Tidak boleh > 48 jam
JSD 12
CONTOH PENULISAN SAMPEL
DARAH PASIEN

Ny. Tuti Hasan 50 th O Rhesus +

No reg. 5412345
16/11/06 Yeni Ruang V
JSD 14
PENYIMPANAN CONTOH DARAH
 ►Contoh darah pasien dan donor
 diletakkan bergabung diikat menjadi
 satu dan harus disimpan selama 7
 hari setelah darah dikeluarkan untuk
 transfusi.
 ►Contoh darah ini dapat dipakai
 sebagai bahan pemeriksaan kalau
 ada laporan reaksi transfusi

JSD 15
PENYIMPANAN CONTOH
DARAH

CONTOH 18-25°C 4°C -30°C

DARAH
EDTA whole S/d 48 jam S/d 7 hari -
blood

Plasma - S/d 7 hari 6 bulan

/serum

JSD 16
3. PERIKSA GOLDA PASIEN ABO
DAN RH ( tube test )
GOLONGAN DARAH ABO
►sel grouping (dengan anti-A dan anti-B ) dan serum
grouping ( dengan sel A ,sel B, sel O) , metoda tube test
SEL GROUPING SERUM GROUPING Kontrol GOLDA
ANTI - A ANTI- B SEL A 5% SEL B 5% SEL O 5% ANTI-Rh BA 6%

►Apabila ada kelainan dalam pemeriksaan maka harus

diselesaikan dahulu penyebab kelainan sampai
menemukan golongan darah yang sebenarnya.
GOLONGAN DARAH RH
 dengan anti-D dan kontrol ( BA 6 %).
JSD 17
4. CARI DARAH DONOR YANG SESUAI
DENGAN GOLONGAN DARAH PASIEN , DAN
CEK ULANG GOLONGAN DARAH DONOR
►Re-konfirmasi pemeriksaan golongan darah
ABO dan Rh darah donor dilakukan diatas kaca
obyek /plate/tabung

SEL GROUPING SERUM GROUPING Kontrol GOLDA

ANTI - A ANTI- B SEL A 10% SEL B 10% SEL O 10% Anti-Rh BA 6%

JSD 18
 5. UJI SILANG SERASI

 Mendeteksi ada tidaknya antibodi , baik

antibodi komplit (IgM) maupun antibodi
inkomplit (IgG) yang terdapat dalam
serum / plasma pasien maupun dalam
plasma donor yang mempunyai arti
klinis yang dapat menyebabkan
kerusakan pada sel darah merah
 Cek akhir uji kecocokan golongan darah
ABO
JSD 19
TUJUAN UJI SILANG SERASI
1. Mencegah terjadinya reaksi transfusi
dengan memastikan penderita tidak
mengandung antibodi yang reaktif terhadap
eritrosit donor ( antibodi golda ABO /golda
lain)
2. Memastikan bahwa darah yang diberikan
sesuai / kompatibel, dan tidak menimbulkan
reaksi serta bermanfaat bagi pasien
JSD 20
KOMPATIBEL

 Apabila sel darah merah yang

ditransfusi tidak dirusak oleh sistem
imun pasien  hidup normal dalam
tubuh pasien

JSD 21
INKOMPATIBEL

 Jika sel darah merah donor dirusak

sistem imun pasien
 Kerusakan mungkin segera atau
tertunda

JSD 22
AKIBAT INKOMPATIBILITAS

Kematian pasien

Hb tidak naik

JSD 23
 ANTIGEN SDM

 Setiap sel darah merah

mempunyai > 1 juta
antigen site
Contoh :
 Antigen A1 : 1 juta
antigen / s.d.m
 Antigen I : 500.000
antigen / s.d.m.
 Antigen D: 10.000 –
30.000 antigen / s.d.m
 Antigen K : 3.000 –
6.000 antigen / s.d.m

JSD 24
 14 nm
MACAM ANTIBODI ( IMUNOGLOBULIN )
DAN SUHU YANG MEMPENGARUHI 25 nm

AGLUTINASI

35 nm

Antibodi
dingin
( Antibodi Anti-A, Anti-B,
komplit)
Fase Anti- M, N, P1,
Saline I,H ,Lewis

Antibodi
hangat Anti-D, E, e, C, c
( Antibodi
inkomplit) Anti- Fy, Jk, K, S,
Fase AHG s, Lewis
ANTIBODI YANG MEMPUNYAI
ARTI KLINIS
Antibodi yang reaktif pada suhu 37°C dan / atau
pada fase antiglobulin yang berpotensi merusak
sel darah merah
 anti-D, -C,-E,-c, -e (Rh)
 anti-K (Kell)
 anti-Fya,-Fyb (Duffy)
 anti-Jka, -Jkb (Kidd)
 anti-S,-s ( MNSs)
 anti-M, anti-N, anti-P1, anti-Lea
( Bila reaktif pada 37°C )
JSD 26
METODA UJI SILANG SERASI
 KONVENSIONAL
 GEL TEST

JSD 27
JSD 28
 UJI COCOK SERASI
ANTI-A, ANTI-B, ANTI-D,
BOVINE,AHG, TEST SEL
CENTR, WTRBTH, STANDART ABO,
PIPET, INCUB, MICR, CCC,DLL
TBG GLS, DLL
LAB NYAMAN
FORMU-
LIR SAMPEL
PERMIN- SIAPKAN
DARAH
TAAN
DARAH PASIEN SAMPEL HASIL
DONOR
VOLUME SIAPKAN UJI
BENAR ALAT CCK
WADAH
SRS
BAIK SIAPKAN
REAGEN VALID

TIDAK LAKUKAN TER-

LISIS
TES CATAT
TIDAK HSL UJI
LIPEMIK CCK SRS TER-
DOK.
IDENT
BENAR
PKS PETUGAS
INST KERJA TERLATIH & BER
LBR KERJA PENGALAMAN
SUMBER
JSD : UTDP PMI 29
UJI SILANG SERASI
Ada 2 macam:
 MAYOR CROSSMATCH:
reaksi antara serum
pasien dengan sel darah
merah donor
 MINOR CROSSMATCH :
reaksi antara serum donor
dengan sel darah merah
pasien

JSD 30
PRINSIP DASAR UJI SILANG
SERASI METODA KONVENSIONAL
 REAKSI ANTIGEN ANTIBODI
 Harus dilakukan 3 fase baik pada mayor, minor
crossmatch (disertai autokontrol)
 Untuk permintaan lebih dari satu kantong, tidak boleh
dilakukan metoda pooling, baik pada uji cocok serasi
mayor maupun minor.
 Ada instruksi kerja / SOP , lembar kerja/lembar
pemeriksaan
 Hasil terdokumentasi dengan baik

JSD 31
MENGAPA DILAKUKAN PADA FASE /
MEDIUM YANG BERBEDA?
 Dilakukan pada fase dan medium yang
berbeda karena jenis-jenis antibodi golongan
darah mempunyai karakter yang berbeda
 Antibodi bereaksi pada suhu kamar ( 20-25ºC)
, dalam medium saline: anti-Lewis, I, M,N,P1
 Antibodi bereaksi pada suhu 37ºC , dalam
medium albumin : anti-Rhesus , anti-K, anti-S
dan anti-s
 Antibodi bereaksi dengan anti human globulin
(AHG) : anti -Rhesus, Kell, Duffy, Kidd
JSD 32
BAHAN PEMERIKSAAN UJI
SILANG SERASI
 CONTOH DARAH PASIEN : darah tanpa /
dengan antikoagulan yang berumur kurang
dari 48 jam
 SERUM PASIEN : jernih bebas dari sel darah
merah
 SUSPENSI SEL DARAH MERAH PASIEN 3-
5% dalam saline ( sel dicuci terlebih dulu)

JSD 33
  CONTOH DARAH DONOR :
darah dengan anticoagulan yang
diambil dari slang kantong darah
 PLASMA DONOR : jernih bebas
dari sel-sel darah
 SUSPENSI SEL DARAH MERAH
DONOR 3-5% dalam saline ( sel
dicuci terlebih dulu)

JSD 34
PERALATAN :
 Tabung gelas ukuran 12 X 75 mm
 Inkubator ( waterbath ) 37ºC
 Serofuge
 Objekglass
 Mikroskop

JSD 35
REAGENSIA
 Saline / NaCl 0,9 %
 Bovine Albumin 22 %
 Coomb’s serum

JSD 36
 TEKNIK UJI SILANG SERASI

JSD 37
FASE I ( FASE SUHU KAMAR )

-2 tts serum pasien - 2 tts plasma donor - 2 tts serum pasien

- 1 tts sel donor susp 3-5 % -1 tts sel pasien susp 3-5 % - 1 tts sel pasien susp 3-5 %

I ( MAYOR ) II ( MINOR ) III AUTO KONTROL

KOCOK-KOCOK
CENTRIFUGASI 3000 rpm/15” atau 1000 rpm/ 1 menit
BACA REAKSI ---Hemolisis / agglutinasi . Bila tidak ada reaksi
lanjut fase II

JSD 38
FASE II ( FASE INKUBASI 37ºC)

 BOVINE ALBUMIN 22 %

Zeta Potential

JSD 39
 FASE II ( FASE INKUBASI 37ºC)

♦Tambahkan masing-masing 2 tetes BOVINE ALBUMIN 22 %

I (MAYOR) II (MINOR) III AK

 KOCOK-KOCOK
 INKUBASI 37 ° C SELAMA 15 MENIT
♦ CENTRIFUGASI 3000 rpm / 15” atau 1000 rpm / 1 menit
♦ BACA REAKSI ------Bila tidak ada reaksi ----lanjut fase III
JSD 40
FASE III ( FASE ANTI HUMAN GLOBULIN )

♦ CUCI DENGAN SALINE 3 X

♦ Tambahkan masing-masing 2 tetes COOMB’S SERUM

I (MAYOR) II (MINOR) III AK

♦ KOCOK KOCOK
♦ CENTRIFUGASI 3000 rpm/15 “ atau 1000 rpm/ 1 menit
Bila tidak ada reaksi , hasil kompatibel

JSD 41
UNTUK MENGECEK APAKAH
PEMERIKSAAN CM BENAR
 Pada Crossmatch hasil negatip
tambahkan masing-masing 1 tetes CCC
 hasil positip

JSD 42
COOMB’S CONTROL CELLS
( CCC)
 Sel eritrosit normal yang dibuat coated
dengan suatu antibodi inkomplit
 CCC umumnya dibuat dari sel normal
golongan O Rh positip, dengan anti D
inkomplit.

JSD 43
CARA MEMBUAT CCC
 10 tetes WRC Rh positip + 5-6 tetes anti-D
 Inkubasi 37°C , 15 menit
 Cuci 4 X
 Buat suspensi sel 3-5% (CCC)
 Cek 1 tetes CCC + 2 tetes AHG  HASIL
1-2+

JSD 44
 INTERPRETASI HASIL UJI
SILANG SERASI
 Bila Mayor dan Minor fase 1 sampai fase 3
tidak menunjukkan reaksi aglutinasi dan
atau hemolisis , hasil diinterpretasikan
kompatibel (cocok)  darah dapat
keluar
 Bila Mayor dan Minor fase 1 sampai fase 3
menunjukkan adanya reaksi aglutinasi dan
atau hemolisis , hasil diinterpretasikan
inkompatibel (tidak cocok)  darah tidak
dapat keluar
JSD 45
+CCC

AGLUTINASI
JSD 47
JSD 48
 Mixed Field

JSD 49
UNIT TRANSFUSI DARAH
Check list & Lembar kerja Pemeriksaan Uji Cocok Serasi
Pemeriksaan Golongan Darah ABO & Rhesus
Sel Serum Typing AK Rhesus Jam
Identitas Grouping faktor
Pasien./
Donor 1 tts 1 tts 2 tts 2 tts 2 tts 2 tts 1 tts 1 tts
sel sel serum serum serum serum sel sel 5%
5% 5% 5%

1 tts. 1 tts 1tts 1tts 1 tts 1 1 1 tetes

AntiA AntiB test test test tetes tetes B. Alb
sel A sel B sel O sel Anti- 6%
5% 5% 5% 5% D

Pasien
Kocok-kocok hingga tercampur rata, putar 3000 rpm 15-20 detik  baca reaksi
Donor

Kocok-kocok hingga tercampur rata, putar 3000 rpm 15-20 detik 

baca reaksi
Pemeriksaan Uji Cocok Serasi > 1 ( 3,4)

Mayor I Mayor II Mayor Minor I Minor Minor Auto Auto Inter

III II III Kontrol pool (I.II) Pool

Phase 2 tts 2 tts 2 tts 2 tts 2 tts 2 tts 2 tts 2 tts pool 2 tts pool
I serum serum serum plasma plasma plasma serum plasma I+II pl dn
Os Os Os donor donor donor Os donor
I II III
1 tts sel 1 tts sel 1 tts sel 1 tts sel 1 tts 1 tts sel 1 tts sel 1 tts pool 1 tts pool
dn I 5% dn.II 5% dn III Os 5% sel Os Os 5% Os 5% sel dn5% I+II sel dn
5% 5% 5%
Kocok—kocok hingga tercampur rata
Putar 3000 rpm selama 15 – 20 detik  baca reaksi
Phase 2 tts 2 tts 2 tts 2 tts 2 tts 2 tts 2 tts 2 tts 2 tts
II B. Alb B. Alb B. Alb B. Alb B. Alb B. Alb B. Alb B. Alb 22% B. Alb 22%
22% 22% 22% 22% 22% 22% 22%

Kocok-kocok hingga tercampur rata, inkubasi 37 °C selama 15 menit

Putar 3000 rpm selama 15 – 20 detik  baca reaksi
Cuci dengan saline sebanyak 3 x
Phase 2 tts 2 tts 2 tts 2 tts 2 tts 2 tts 2 tts 2 tts AHG 2 tts AHG
III AHG AHG AHG AHG AHG AHG AHG

Kocok-kocok hingga tercampur rata

Putar 3000 rpm selama 15 – 20 detik  baca reaksi
Bila Hasil Negatip  Tambahkan 1tetes CCC, kocok-2 Putar 3000 rpm 15-20 detik 
Baca reaksi
 Pemeriksaan
Golongan Nama Blood Serum Grouping Rhesus
Darah Os/ No. Grouping Faktor
Kantong Anti A Anti B Sel A Sel B Sel O AK Anti D K
Pasien
No ktg
Pemeriksaan
Uji Cocok
Serasi

Donor : No ktg…………. Donor : ……………... Donor :……………..

Mayor Minor Auto Mayor Minor Auto Mayor Minor Auto
Kontrol Kontrol Kontrol
Phase - - -
I

Kocok-2 ,putar 3000 rpm 15 “ kemudian baca hasil : Lisis & aglutinasi

Phase - - -
II Kocok-2, inkubasi 37°C 15’ ,putar 3000 rpm 15” baca : Lisis & aglutinasi

Phase Cuci 3 x dengan saline

III - - -
Kocok-2 ,Putar 3000 rpm 15 “ kemudian baca hasil : Lisis & aglutinasi
AUTO POOL DONOR
CARA MEMBUAT POOL PLASMA / POOL SEL
PLASMA DONOR SEL DARAH MERAH DONOR 5%
I II III I II III

masing-masing 3 tetes
masing-masing 3 tetes

Pool plasma Pool sel

1 tetes sel
2 tetes plasma

JSD
Auto pool donor 53
 UJI SILANG
SERASI
METODA GEL

JSD 54
METODA GEL
 Ditemukan oleh Dr Yves Lapierre dari Perancis tahun
1985
3 tahun R+D di DiaMed, Switzerland
Pertama kali digunakan untuk pemeriksaan rutin
pada tahun 1988 di Eropa
 Sederhana, mudah dan cepat
 Hasil reaksi stabil dapat disimpan / foto
copy
 “No-washing step”
 Sampel yang diperlukan sedikit
 Pembacaan reaksi makroskopis
 Mengurangi limbah
JSD 55
ALAT-ALAT
 ID Dispensor
 Autopipette 10, 25, 50 ul
 Pipette tips
 Test tubes
 Working table
 Incubator 37ºC
 ID-centrifuge
 Pen marker

JSD 56
Reagensia
 LISS/Coombs card

 ID Diluent 2
(modified LISS)

JSD 57
Prinsip Teknologi Gel Test
 Materialgel dengan “Sephadex”
 Aglutinasi yang berukuran besar akan
berada pada permukaan gel
 Aglutinasi yang lebih kecil ukurannya
dapat lewat pori-pori gel, tergantung
ukurannya
 Sel yang tidak beraglutinasi akan langsung
mengendap di dasar
JSD 58
PRINSIP GEL TEST

JSD 59
 PEMBUATAN SUSPENSI SEL
PASIEN & DONOR 1%

Ambil ID Pipet 5ul PRC /10 ul WB

Diluent 2 kedalam tabung yang Campur sel donor 1%
:0,5ml / 1ml berisi 0,5ml/1 ml ID dan ambil 50 ul masukkan
Diluent 2 kedalam microtube

JSD 60
TEKNIK PEMIPETAN GEL TEST

JSD 61
 UJI SILANG SERASI

Mi AK
Ma

50 μl suspensi sel 1% 25 μl serum/plasma

JSD 62
 Inkubasi 37ºC
selama 15 menit

Sentrifus selama
10 menit

JSD 63
HASIL REAKSI METODA GEL

JSD 64
 A 4+
B 3+
C 2+
D 1+
E Negatip

JSD 65
 A B
A = permintaan 1 kantong darah
B = permintaan 2 kantong darah
AK = Autokontrol
AP = Autopool
JSD 66
 Permintaan 4 kantong darah

JSD 67
Pemeriksaan Uji Cocok Serasi Metoda gel

Auto Auto
Mayor I Mayor II Minor I Minor II kontrol Pool
Sus sel Sus sel 50 Sus sel Sus Sel Sus sel Sus sel
50 ul ul Donor II 50 ul 50 ul 50 ul Pool 50
donor I Pasien Pasien pasien ul Donor
Plasma Plasma 25 Plasma Plasma Plasma Plasma
25 ul ul Pasien 25 ul 25 ul 25 ul Pool 25
Pasien Donor Donor Pasien ul Donor

Inkubasi 37º C- 15 menit

Putar 910 rpm – 10 menit
Baca hasil
 PENANGANAN DARAH
INKOMPATIBEL

JSD 69
DARAH INKOMPATIBEL

GOLDA • DISCREPANCY
TIDAK GOLDA
COCOK

CROSS • CROSSMATCH
MATCH INKOMPATIBEL
POSITIP

JSD 70
PENYEBAB DISCREPANCY
 Kesalahan teknis :
- Kesalahan penulisan
- Reagensia/ alat kurang berfungsi
- Kesalahan prosedur
 Proses penyakit ( penting informasi
umur ,diagnosis, riwayat transfusi /
kehamilan, obat )

JSD 71
GOLONGAN DARAH ABO

SEL SERUM
GROUPING GROUPING GOLDA
Anti-A Anti-B SEL A SEL B Sel O
1 4+ 0 0 4+ 0 A
2 0 4+ 4+ 0 0 B
3 4+ 4+ 0 0 0 AB
4 0 0 4+ 4+ 0 O

JSD 72
KETIDAK COCOKAN GOLONGAN
DARAH ABO (DISCREPANCY)
 Discrepancy golongan darah ABO : sel dan
serum / plasma grouping tidak sesuai reaksinya
 Reaksi yang kuat ( tidak selalu ) menunjukkan
golongan darah yang sebenarnya
 Discrepancy pada serum / plasma lebih sering
terjadi dibandingkan discrepancy pada sel
 Penting mengetahui riwayat transfusi dan
diagnosis

JSD 73
SECARA GARIS BESAR ADA 4
KATEGORI DISCREPANCY
SEL
1. Reaksi antigen lemah atau hilang GROUPING

2. Reaksi antigen yang tidak diharapkan

3. Reaksi antibodi lemah atau hilang SERUM
GROUPING
4. Reaksi antibodi yang tidak diharapkan

JSD 74
DISCREPANCY PADA SEL
GROUPING
 Weak / Mising antigen ( subgrup,
leukemia )
 Mixed field aglutinasi ( transfusi beda
golongan darah )
 Unexpected antigen
(Polyagglutinable cell, DCT positip,
Acquired B Phenotype, aglutinasi spontan
pada cold autoantibodi)

JSD 75
DISCREPANCY SEL GROUPING
 Weak / missing antigen : Leukemia, carcinoma pada
lambung / pancreas
ANTI - A ANTI B SEL A SEL B SEL O AK

Sel tdk 0 0 4+ 0 0 0
dicuci
Sel dicuci 0 3+ 4+ 0 0 0
 Forward typing tidak ada reaksi, back typing terbaca
golongan B
 Cek diagnosis dan riwayat transfusi , kemungkinan :
ada penurunan ekspresi antigen  leukemia akut , atau
adanya substansi golongan darah spesifik yang
berlebihan  Carcinoma lambung / pancreas

JSD 76
 Substansi golongan
darah spesifik yang
berlebihan
 Menghambat reaksi
antisera-A atau
antisera-B
 Mengatasinya
dengan mencuci sel

JSD 77
 Mixed Field aglutinasi : Nampak adanya sel
yang aglutinasi dan sel yang tidak aglutinasi
disebabkan karena adanya 2 populasi sel
darah merah berbeda pada 1 individu
,Contoh : pasien golongan A mendapat
transfusi golongan darah O

ANTI - A ANTI B SEL A1 SEL B SEL O AK

MF 0 0 4+ 0 0

JSD 78
 Mixed Field

JSD 79
 Unexpected antigen : B acquired ( Forward grouping
AB, Reverse grouping A)
ANTI A ANTI B SEL A1 SEL B SEL O AK

4+ 2+ 0 4+ 0 0

 Pasien : forward typing golongan AB, Reaksi anti-B <

Reaksi anti-A sedangkan back typing golongan A ,
 Cek diagnosis. Pasien mungkin mempunyai Acquired B
antigen akibat penyakit di colon (Ca colon) atau infeksi
gram negatip
 Enzym bakteri akan mengubah Antigen A antigen B
(deasetilisasi)
 Membedakan dengan golda B normal dengan anti-B
lectin. Pada Acquired B tidak terjadi aglutinasi ,
sedangkan pada golda B normal terjadi aglutinasi
dengan anti-B lectin
JSD 80
GOLDA A GOLDA B
 Polyagglutinable cell
 N-Acetyl neuraminic acid (NANA) diambil enzym bakteri
ANTI A ANTI B SEL A SEL B SEL O AK
Antisera 1+ 1+ 4+ 4+ 0 0
polyclonal
Antisera 0 0 4+ 4+ 0 0
monoclonal

JSD 82
 Rouleaux : kenaikan serum protein
multiple myeloma, Infus dextran,
kontaminasi Wharton jelly

ANTI A ANTI B SEL A SEL B SEL O AK

Sel pasien 4+ 2+ 2+ 4+ 2+ 2+
tidak dicuci
Sel pasien 4+ 0 2+ 4+ 2+ 2+
dicuci
2 tetes saline 0 4+ 0 0

JSD 83
DISCREPANCY PADA SERUM
GROUPING
 Weak/ missing antibody
 Unexpected antibody ( alloantibodi ,
autoantibodi, subgrup A2 )

JSD 84
DISCREPANCY SERUM
GROUPING
 Weak/ missing antibody
ANTI A ANTI B SEL A1 SEL B SEL O AK

0 0 1+ 0 0 0

 Cek usia : pada bayi baru lahir dan orang tua

dapat terjadi hasil seperti tersebut diatas. ( Bayi
< 6 bulan , orang tua > 65 tahun )
 Cek diagnosa : Imune defisiensi , chemoterapi,
terapi radiasi, transplantasi sumsum tulang
JSD 85
DISCREPANCY SERUM
GROUPING
 Unexpected antibody

ANTI A ANTI B SEL A1 SEL B SEL O AK

4+ 0 2+ 4+ 0 0

 Bila pasien mempunyai Anti-A1 , periksa dengan

anti-A1 lectin
- apabila hasil negatip berarti pasien mempunyai
subgroup A2 dengan anti-A1

JSD 86
 Cold auto anti-I
ANTI A ANTI B SEL A SEL B SEL O AK

0 4+ 4+ 3+ 3+ 2+
Dihangatkan 0 4+ 4+ 0 0 0

JSD 87
O BOMBAY
GOL Sel grouping Serum grouping AK
Anti- Anti- Anti- A B O
A B H
Oh - - - 3+ 3+ 3+ -

Para- -/w - - - 4+ w -
Bombay
(Ah)
O - - 3+ 3+ 3+ - -

O >A2 > B >A2B > A1>A1B > Oh

JSD 88
JSD 89
FORWARD & BACK TYPING
NEGATIP
 Inkubasi pada 4ºC, 15-30 menit , termasuk
autokontrol
 Centrifuge dan baca, jika ada aglutinasi maka
pasien mempunyai imunoglobulin rendah
(hypogammaglobulin)
 Cek umur (bayi, tua)
ANTI A ANTI B SEL A1 SEL B SEL O AK

0 0 0 0 0 0

JSD 90
 Grouping

Forward Reverse

Missing/Weak Extra Mixed Field Missing/Weak Extra

Young Cold
A/B Subgroup Acquired B O Transfusion Elderly
Immunocompromised Autoantibody

Disease Bone Marrow Cold

B(A) Phenotype
(cancer) Transplant Alloantibody

Rouleaux Rouleaux

Anti-A1

JSD 91
MENGATASI DISCREPANCY
GOLONGAN DARAH ABO
1. UMUM : - Salah penulisan?
- Sampel ? ( hemolisis,
aglutinasi spontan, berlemak)
- Reagensia : masih berfungsi? /
kontaminasi?
- Catatan sebelumnya
(Riwayat transfusi, obat, umur,
riwayat kehamilan)

JSD 92
.2. Penanganan awal :
- Ulangi pemeriksaan : sel dan serum
sampel baru
reagen baru

JSD 93
3. Tindakan lanjut :
 sel donor /pasien :
- cuci dan ulangi pemeriksaan
 serum donor / pasien
- inkubasi lebih lama ( 15-30 menit )
pada RT/ 4°C
 periksa ulang dg anti -A ,anti-B,
anti-A1, anti-H

JSD 94
 Pada aglutinasi spontan lakukan
dengan teknik prewarm bila ada antibodi
dingin maka kemungkinan unexpected
reaction akan menjadi negatip
 Bila rouleaux :
-Tetesi dengan 2 tetes saline maka sel
akan terpisah

JSD 95
 CONTOH
Sel Grouping Serum Grouping
NO Auto GOLONGAN
Anti-A Anti-B Sel-A Sel-B Sel-O kontrol

1 3+ - - 3+ - - A
2. - 3+ 3+ - - - B
3 - - 3+ 3+ - - O
4 3+ 3+ - - - - AB
5 2+ - + 2+ - - Subgrup A (A2)

6 2+ - - 0/+ - - A neonatus, orang tua

7 4+ - 0/4+ 4+ +/4+ - A dg alloantibodi

8 4+ - - - - - A dengan
hipogammaglobulinemia

9 - - 3+ 3+ 3+ - O Bombay

10 - - - - - - O neonatus

11 - 3+ 3+ 3+ +/3+ +/3+ B dengan Auto

antibodi
SISTEM RH
 Merupakan sistem golda yang sangat kompleks
diantara sistem golongan darah yang ada ,
 Gen yang mengatur sistem Rhesus terletak
pada lengan pendek kromosom 1 , Lokus Rh
terdapat pada kromosom no 1
 Ada 2 gen (Gen RHCE dan Gen RHD ) yang
berdekatan yang mengontrol seluruh
penampilan antigen Rhesus  codominant
allele
Ada 3 pasang alel rhesus, C-c, D-d dan E-e.
JSD 97
 RHD RHCE
“Rh positive” ce, Ce, cE, or CE
antigen D antigen CcEe

“Rh negative” X ------------- ce

Eropa 15-17%

JSD 98
JSD 99
ANTIGEN Rh (D)
 Apabila seorang individu tidak memiliki
antigen D pada eritrositnya tanpa
memandang adanya antigen C atau E
maka pada umumnya dinyatakan sebagai
Rh negatip
 Apabila antigen D cukup jumlahnya ,
maka dinyatakan sebagai Rh positip

JSD 100
 FENOTIP
ANTIGEN RH GENOTIP (Golongan
darah)

D DD Rh positip

D Dd Rh positip

- dd Rh negatip

JSD 101
ANTIBODI RH
 Pembentukan antibodi hampir selalu
disebabkan karena paparan antigen
(transfusi / kehamilan) , Timbul sesudah 2-
6 bulan
 Dalam klinik , antibodi Rh sangat penting
karena dapat menyebabkan reaksi
transfusi dan HDN  memperpendek
daya hidup sel darah merah (mempunyai
arti klinis )
 Jenis antibodi kebanyakan IgG (bereaksi
optimal pada 37ºC dan fase AHG) 102
JSD
 Dapat melewati placenta  HDN
 Merupakan antibodi inkomplit , dapat
menyebabkan hemolisis ekstravaskuler

JSD 103
Anti-D (imun )
Pasien D− yang ditransfusi D+  80%
- Reaksi transfusi hemolitik
Wanita hamil D− dengan fetus D+ ~
15%  Hemolytic Disease of the Fetus
and Newborn (HDFN)
(tanpa profilaksis Anti-D)

JSD 104
RH NEGATIP

Dd Dd

DD Dd Dd dd
Rh -

JSD 105
FREKWENSI GOLDA RH
 Rh positip : ± 85% orang kulit putih ;
90-95% orang kulit hitam;
99% orang Asia
 Sisanya merupakan Rh negatip

JSD 106
WEAK D
 Rh D positip akan bereaksi secara
makroskopis dengan reagensia anti-D
( hasil reaksi 1+ sampai 3+ ). Pada Weak
D reaksi < 2 +

JSD 107
PENENTUAN WEAK-D :
Resipien / Pasien
 Pada pemeriksaan Rh D pada pasien
apabila ditemukan Rh D negatip / < 2 +
 maka pasien dianggap Rh negatip
sehingga harus ditransfusi dengan darah
Rh negatip

JSD 108
JSD 109
TRANSFUSI
 Seseorang dengan partial D tidak boleh
mendapatkan transfusi darah Rhesus
positip ataupun golongan Weak D.
Contoh seseorang dengan partial D13
mendapat transfusi Rh positip ( D123)
dapat membentuk anti-D (anti-D2)

JSD 110
PEMERIKSAAN GOLDA RH
Anti-D Kontrol Hasil
++ - Rhesus positip (D+)
- - D negatip
(Pada donor sebelum dilabel
lanjutkan pemeriksaan Weak
D)
++ ++ Non spesifik . Ulangi
pemeriksaan
AHG

JSD 111
Kontrol Rhesus hasil positip dapat terjadi
pada:
 DCT positip
 Polyagglutinasi
 Sel tidak dicuci

JSD 112
PERTIMBANGAN HASIL UJI
SILANG SERASI
 KOMPATIBEL : Mayor , Minor
Darah keluar

 INKOMPATIBEL
Mayor Darah tidak boleh keluar
Minor Darah dapat keluar
(DCT > Minor)
JSD 113
 BAGAN CM INKOMPATIBEL
-Fase I, pengurangan reaksi pada fase II 
Antibodi Dingin spesifik
- Fase I , peningkatan reaksi pada fase II 
AK Neg Antibodi hangat spesifik
- Fase II & Fase III  Antibodi hangat Spesifik
- Fase III  antibodi terhadap
antigen frekwensi tinggi
CM MAYOR
INKOMPATIBEL
-Fase I , pengurangan reaksi pada fase II 
antibodi dingin nonspesifik
-Fase I , peningkatan reaksipada Fase II 
AK Pos
antibodi hangat nonspesifik
-Fase II &III  AIHA
-Fase III  AIHA
CM MINOR Sel pasien DCT positip
INKOMPATIBEL
Serum donor mengandung antibodi
JSD 114
KEMUNGKINAN PENYEBAB
MAYOR CM POSITIP
1. Golongan darah ABO pasien atau
donor tidak benar
2. Adanya allo antibodi dalam serum
pasien yang bereaksi dengan antigen
yang ada pada sel darah merah donor.
Hasil auto kontrol negatip, kecuali pada
pasien yang baru ditransfusi dengan
sel yang inkompatibel.
JSD 115
3. Adanya autoantibodi dalam serum pasien
yang juga bereaksi dengan sel darah
merah donor.
4. Penyelubungan sel darah donor oleh
protein, biasanya DCT positip

JSD 116
 5. Kelainan dalam serum pasien, pasien
mendapat transfusi plasma ekspander
(dextran ) dengan berat molekul yang
tinggi , multiple myeloma sehingga
menyebabkan terjadinya false positip
(rouleaux formasi). Semua test termasuk
auto kontrol akan menunjukkan hasil
positip.
6. Kontaminasi pada pemeriksaan ,
misalnya tabung yang kotor, kontaminasi
sampel dan reagen oleh bakteri.
JSD 117
KEMUNGKINAN PENYEBAB MINOR
CM POSITIP
 ABO grouping pasien / donor tidak benar
 Adanya antibodi spesifik dalam plasma
donor, yang bereaksi dengan antigen
yang sesuai pada SDM pasien.
Penanganan : ganti donor
 Penyelubungan SDM pasien oleh protein,
sehingga hasil pemeriksaan DCT positip
 Kontaminasi
JSD 118
 MAYOR CM INKOMPATIBEL ,
AUTO KONTROL NEGATIP
PADA SUHU KAMAR
MAYOR KEMUNGKINAN PEMECAHAN
CROSSMATCH PENYEBAB
Inkompatibel - AlloantibodiIg M - Ulangi pemeriksaan
( golongan darah golongan ABO
ABO tidak cocok )
- Antibodi dingin spesifik - Cari antibodi yang
bereaksi pada suhu
dingin :anti-Lea, anti Leb,
anti-P1, anti-M, anti-N
Semua / Beberapa -Anti A1 dalam - Periksa golda pasien
unit donor serum pasien A2 dengan anti A1 lectin
inkompatibel -Donor salah golongan - Darah dikarantina

JSD 119
MAYOR CM INKOMPATIBEL,
AUTO KONTROL POSITIP
PADA SUHU KAMAR

MAYOR KEMUNGKINAN PEMECAHAN

CROSSMATCH PENYEBAB
Inkompatibel - Autoantibodi dingin -Prewarm
nonspesifik teknik
- ( AIHA tipe dingin)

JSD 120
MAYOR CM INKOMPATIBEL ,
AUTO KONTROL NEGATIP
Pada 37 °C / AHG
MAYOR KEMUNGKINAN PEMECAHAN
CROSSMATCH PENYEBAB
Inkompatibel - Alloantibodi IgG -Identifikasiantibodi ,
cari antibodi yang
bereaksi pada 37°C
/ AHG
Inkompatibel semua Antibodi terhadap Cari donor
unit antigen frekwensi keluarga(saudara)
tinggi
Satu atau beberapa Donor dengan DCT Unit Darah dikarantina
Unit positip

JSD 121
MAYOR CM INKOMPATIBEL,
AUTO KONTROL POSITIP
Pada 37 °C /AHG
MAYOR KEMUNGKINAN PEMECAHAN
CROSSMATCH PENYEBAB
Inkompatibel - Rouleaux disebabkan - Tambahkan 2 tetes
protein abnormal dalam NaCl
serum penderita
( multiple myeloma ),
penderita mendapat
plasma expander
Inkompatibel - HDN Ulangi pemeriksaan ,
- AIHA tipe hangat Periksa DCT, skrining
- Reaksi transfusi / identifikasi antibodi
- Drug induced 122
JSD
MINOR CM INKOMPATIBEL
 Bila hanya minor crossmatch yang inkompatibel :
 Darah salah golongan ?
 Lakukan Direct Coomb’s Test ( DCT) ,bila hasilnya :
 Positip, berarti s.d.m. pasien diselubungi ( Coated )
oleh suatu antibodi dalam tubuhnya ( in vivo)
,Contoh :
pada AIHA, HDN
 Negatip, berarti disebabkan oleh suatu
antibodi dalam plasma donor
 Darah dapat keluar : diberikan PRC ( ketentuan
:DCT > Minor, nilai maksimal DCT =2 )

JSD 123
PENANGANAN CM INKOMPATIBEL

LANGKAH I :
 Umur, jenis kelamin pasien
 Riwayat sebelumnya :
- Riwayat transfusi : apakah pernah
mendapat transfusi 3 bulan sebelumnya
- Riwayat kehamilan , jumlah kehamilan,
lahir mati, abortus, bayi dengan HDN
- Riwayat pemakaian obat jangka lama
JSD 124
LANGKAH II :
 Pemeriksaan Ulang CM
 Contoh darah pasien yang baru
 Cuci s.d.m. pasien 4 X, ulangi
pemeriksaan golongan darah ABO
 Lakukan DCT

JSD 125
LANGKAH III :
 Skrining / Identifikasi antibodi
 Adanya antibodi tipe panas ( IgG) atau
antibodi tipe dingin (IgM)
(IgM bereaksi bagus pada suhu kamar,
IgG bereaksi bagus pada 37 °C dan AHG)

JSD 126
RINGKASAN

1. Inkompatibel pada Mayor .

Darah donor tidak boleh diberikan pada
pasien. Lakukan pemeriksaan lanjutan
Skirining & Identifikasi Antibodi terhadap
darah pasien . Bila didapatkan irregular
allo-antibodi yang spesifik pada serum
pasien, maka dapat dicarikan darah
donor yang cocok dengan darah pasien
JSD 127
2. Inkompatibel pada Minor.
Dalam keadaan darurat pasien dapat
diberikan darah donor berupa Packed Red
Cells (sel darah merah pekat).

JSD 128
3.Pada pasien dengan auto immune Hemolytic
Anemia (AIHA) type hangat, hasil Uji Silang
Serasi selalu inkompatibel.
Dalam keadaan mendesak dapat diberikan
darah donor yang hasil reaksi Uji Silang
Serasi inkompatibel pada Mayor & Minor
yang hasil reaksinya paling lemah dibanding
pada reaksi sel darah merah penderita ( auto
kontrol ). Dalam pemberian transfusi harus
berhati-hati, karena reaksi alloantibodi tidak
terdeteksi dalam pemeriksaan Skrining &
Identifikasi Antibodi. Pemberian transfusi
harus dibawah pengawasan dokter.
JSD 129
4.Pada pasien penderita Auto Immune
Hemolytic Anemia (AIHA) type dingin, hasil
Uji Silang Serasi selalu inkompatibel.
Transfusi umumnya tidak diperlukan. Dalam
keadaan mendesak transfusi dapat
diberikan dengan yaitu dengan cara darah
dihangatkan dulu sebelum ditransfusi, agar
sel darah merah donor tidak disensitasasi
atau dirusak oleh auto antibodi penderita.
Pemberian transfusi harus dibawah
pengawasan dokter.
JSD 130
5.Pada pasien dalam keadaan darurat
dengan reaksi inkompatibel, dapat
diberikan Packed Red Cell /PRC (sel
darah merah pekat) golongan darah O
Rhesus Negatip.

JSD 131
KASUS 1
 Ditemukan hasil pemeriksaan golongan darah sebagai berikut :

Anti - Anti-B Sel A Sel B SEL AK Anti- BA

A O D 6%
- - - 3+ - - 3+ -

 Dari hasil diatas Forward Typing :

 Backward Typing :
 Tanya ?
 Tindakan selanjutnya ?
 Apa kesimpulan sementara ?

JSD 132
 Forward typing : O dan backward typing A
 Tanya : ada riwayat leukemia ? Ada
 Tindakan lanjut :
- cuci sel pasien
- Inkubasi suhu kamar (20-25°C)15-30 menit
- Inkubasi 4°C , 15-30 menit
Anti -A Anti-B Sel A Sel B SEL O AK

2+ - - 3+ - -

 Kesimpulan A Rhesus positip

JSD 133
 KASUS 2
 Ditemukan hasil pemeriksaan Golongan darah pasien
dewasa:

Anti-A Anti-B Sel A Sel B SEL AK Anti-D BA 6%

O
- 4+ - - - - 3+ -

 Tanya ?
 Apa kesimpulan sementara ?
 Mengapa terjadi reaksi demikian ?
 Apa tindakan yang harus dilakukan ?

JSD 134
 Umur pasien? 75 tahun .
 Penurunan titer antibodi
 Tindakan :
- Inkubasi serum pasien pada suhu
ruang 15-30 menit
- Bila tidak ada reaksi  inkubasi pada
4ºC
- Reaksi pada inkubasi 4ºC :

Anti-A Anti-B Sel A Sel B SEL O AK

- 4+ 2+ - - -

• Kesimpulan B Rhesus positip

JSD 135
KASUS 3
 Golda bayi?
Anti-A Anti-B Sel A Sel B SEL O AK Rh BA
6%
3+ - - - - - 3+ -

 Hasil crossmatch dengan golda A Rh + :

Ma : 2+ , Mi: 2+ , AK : 2+, DCT 4+
 Hasil crossmatch dengan golda O Rh -:
Ma : neg , Mi: 4+, AK : 2+
 Kesimpulan : A Rhesus positip dengan anti-D

JSD 136
 KASUS 4

ANTI A ANTI B SEL A SEL B SEL O AK

0 4+ 4+ 3+ 3+ 2+
Dihangatkan 0 4+ 4+ 0 0 0

JSD 137
 Ma Mi AK DCT APA YANG DILAKUKAN ?
1 - - - Darah keluar (Darah kompatibel)
Ada irregular antibodi dalam plasma donor .
2 - + - - Ganti darah donor sampai mendapat hasil
Minor neg
3 - + + -
Ganti darah donor

4
- + + +
 Bila Minor sama atau < DCT ( DCT maks 2 )
--> darah keluar (PRC)
Bila Minor > DCT --> darah tidak boleh keluar
 Ganti darah donor sampai mendapat hasil
Minor sama /< DCT
5 Ganti darah donor (Bila Mayor 1 pos ) , sampai
+ - -
mendapat Mayor neg
Bila tetap tidak ditemukan hasil kompatibel -->
Skrining / identifikasi antibodi ( alloantibodi ? )

JSD 138
SKRINING / IDENTIFIKASI
ANTIBODI
DiaMed-ID Antigen - Table Set I-II 4515. 45 .01 Exp.date : 31.05.99
Rh-hr Kell Duffy Kidd Lewis P MNS Luth.Xg Special ag Results
D C E c e Cw K k Kpa Kpb Jsa Jsb Fya Fyb Jka Jkb Lea Leb P1 M N S s Lua Lub Xga AHG ENZ
1 + + 0 0 + 0 0 + 0 + 0 + + 0 0 + + 0 + + + + + 0 + + - N/T
2 + 0 + + 0 0 + + 0 + 0 + + + + 0 0 + 0 + 0 + 0 0 + 0 2+ N/T

DiaMed-ID Antigen - Table Set ID-DiaPanel 451 7-63 -01 Exp.date : 31.05.99

Rh-hr Kell Duffy Kidd Lewis P MNS Luth.Xg Special ag Results

D C E c e Cw K k Kpa Kpb Jsa Jsb Fya Fyb Jka Jkb Lea Leb P1 M N S s Lua Lub Xga AHG ENZ
1 + + 0 0 + + + + 0 + 0 + + 0 0 + 0 + + + + + + 0 + + -
2 + + 0 0 + 0 0 + + + 0 + + + + 0 + 0 0 + + 0 + 0 + 0 2+s
3 + 0 + + 0 0 0 + 0 + 0 + 0 + 0 + 0 + + + 0 + 0 0 + + -
4 0 + 0 + + 0 + + 0 + 0 + + + + 0 0 0 + + + 0 + + + + 2+
5 0 0 + + + 0 0 + 0 + 0 + + 0 + + 0 + + + 0 + + 0 + 0 2+
6 0 0 0 + + 0 + + 0 + 0 + + 0 + + 0 + 0 0 + + + 0 + + 2+
7 0 0 0 + + 0 0 + 0 + 0 + 0 + 0 + + 0 0 0 + 0 + + + + -
8 + 0 0 + + 0 0 + 0 + + 0 0 0 + + 0 + + + + 0 + 0 + + 2+s
9 0 0 0 + + 0 0 + 0 + 0 + + + + + 0 + + + 0 + 0 0 + + 2+s
10 + + + 0 + 0 0 + 0 + 0 + 0 + + + + 0 0 0 + 0 + 0 + + 2+
11 + + + 0 0 0 0 + 0 + 0 + + + + + + 0 + + + 0 + 0 + + 2+
12 Autocontrol 0

JSD 139
 MIXED FIELD AGGLUTINATION
 Teteskan 2 tetes serum anti-A kedalam tabung
12X75 mm
 Teteskan 2 tetes sel golongan A dan 2 tetes sel
golongan B kedalam tabung tersebut
 Campur dan sentrifus 15 detik
 Baca makros dan mikroskopis

JSD 140
 ROULLEAUX
 Teteskan 2 tetes dextran 20% pada slide
 Tambahkan 1 tetes golongan darah O
 Campur dengan memakai lidi
 Periksa aglutinasi makros dan
mikroskopis

JSD 141
 “Pleasure in the job puts
perfection in the work."

-- Aristotle

JSD 142