Jurnal reading

Clinical Application of T-SPOT.TB Using

Pleural Effusion as a Diagnostic Method for
Tuberculosis Infection

Oleh: Said Muhammad Alfian

Pembimbing:
dr. Nurrahmah Yusuf, M, Ked (Paru) Sp.P

FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS

SYIAH KUALA
BAGIAN PULMONOLOGI DAN
ILMU KEDOKTERAN RESPIRASI
 Abstrak

 Pendahuluan  Metode : dengan mengukur

 Tujuan dari penelitian ini Adenosin deaminase (ADA) di
adalah perbandingan hasil T- dalam (PE), Quantiferon TB-Gold
SPOT.TB menggunakan efusi di Tube (QFT), dan T-SPOT TB
pleura (PE) dengan menggunakan (PB), dan T-SPOT
menggunakan tes IGRA TB menggunakan (PE)
menggunakan darah perifer  Kelompok yang mengalami
(PB) atau metode diagnostik pleuritis TB 12 pasien, dan
lain untuk mendiagnosis TB kelokpok penyakit lainnya 33
pleuritis pasien
Hasil : sensitivitas untuk QFT menggunakan PB adalah 83 % dan spesifisitas 85%, sensitivitas untuk
T-SPOT.TB menggunakan PB adalah 92 % dan spesifisitas 82%, sedangkan sensitivitas untuk ADA
pada PE adalah 83% dan spesifisitas 76%. Ketika di adopsi tingkat pemisahan dari respon positif
untuk T-SPOT.TB sebagai PB menggunakan PE, sensitivitas untuk T-SPOT.TB menggunakan PE
adalah 100 % dan spesifisitas 82%, tentu saja tidak ada perbedaan signifikan dari 4 metode
diagnostik. Sensitivitas untuk T-SPOT TB menggunakan PE memberikan diagnosis yang paling
akurat dari TB-pasti dibandingkan dengan ADA pada PE atau QFT menggunakan PB.

Kesimpulan : Jika kita melakukan T-SPOT TB menggunakan

spesimen lokal dari lokasi infeksi, kita bisa mendapatkan
sensitivitas yang lebih tinggi dari tes IGRA menggunakan
PB atau ADA pada PE dan jumlah dari ESAT-6 dan CFP-10
positif 3-5 kali lipat lebih tinggi di PEMCs daripada di PBMC,
T-SPOT TB meggunakan PE mungkin menjadi metode
diagnostik yang berguna untuk TB pleuritis
 Pendahuluan
TB merupakan penyebab utama
morbiditas dan mortalitas di seluruh
dunia. TB pleuritis adalah urutan
kedua yang sering ditemukan dari
manifestasi TB ekstra paru
METODE
1. Pasien
Dievaluasi secara prospektif pada 45 pasien
dengan limfosit-dominan efusi pleura eksudatif.
Spesimen klinis dikumpulkan dari Rumah Sakit
Kawasaki Medical School (Kurashiki, Jepang) dan
lima rumah sakit yang berafiliasi dan diagnosis
akhir diputuskan antara Januari 2009 dan
September 2013
 METODE
 2. Definisi Pasien dalam kelompok TB-Pasti dan Kelompok
Penyakit Lain
 Pertama diputuskan pasien TB kelompok pasti jika MTB dikultur
dari PE atau spesimen biopsi pleura. Kedua, diputuskan pasien
kelompok penyakit lain jika diagnosis klinis lain terdiri oleh
deteksi dari sel-sel ganas atau memenuhi kriteria diagnostik
penyakit lainnya. Dikecualikan pasien dengan TB paru yang
sudah sembuh dari pasien kelompok penyakit lain untuk
menghindari pengaruh pada hasil T-SPOT.TB ketika spesifisitas
dihitung dalam penelitian ini.
METODE
3. ADA (Adenosine Deaminase) di PE (Pleural
Efusion)
 Aktifitas ADA di PE diukur oleh analyzer otomatis
menggunakan kit yang tersedia secara komersial
(Nittobo Medis, Tokyo, Jepang). Tingkat
pemisahan aktivitas ADA di PE itu dinilai sebagai
hasil positif di lebih dari 36 U/ml
METODE

4. Uji QFT (QuantiFERON TB-Gold)

QFT dilakukan sesuai dengan petunjuk dari
produsen (Cellestis Ltd). Keputusan diambil sesuai
dengan pedoman yang diusulkan oleh Pusat
Pengendalian dan Pencegahan Penyakit (CDC)
 METODE
 5. T-SPOT.TB (Screening Performed in One Visit)
 MTB-spesifik tes ELISPOT dibuat menggunakan uji T-SPOT.TB. PBMCs dan
PEMCs disiapkan dari darah perifer (PB) dan PE yang diperoleh sebelum
memulai pengobatan antituberkulosis. Di singkat, 2,5 × 105 PBMC dan 2,5 ×
105 PEMCs ditempatkan semalam di 96 plate yang telah pra-dilapisi dengan
antibodi IFN-γ dalam 100ul volume culture. Sel-sel yang tersisa tidak
distimulasi (Kontrol negatif), atau dirangsang dengan 50 ml
phytohaemagglutinin (kontrol positif) atau 50 ml dari ESAT-6 dan CFP-10
peptida dalam wadah terpisah. Kultur dari wadah, dicuci, di visualisasi dan
analisis tempat dilakukan sesuai dengan instruksi produsen. Respon stimulasi
kultur dianggap positif ketika tes terdapat enam spot atau lebih dan memiliki
dua kali jumlah spot yang di kontrol dengan baik. Jumlah latar belakang spot
pada wadah kontrol negatif di bawah 10 spot per wadah di kedua PBMC dan
PEMCs dari semua pasien.
 METODE

 6. Analisis statistik
 Semua analisa statistik dilakukan dengan menggunakan Stat View software
Versi 6 (Artec Institute, Osaka, Jepang). ADA, IF-γ, dan level tempat
membentuk sel (SFC) dalam dua kelompok pasien dinyatakan sebagai tingkat
median. tes Mann-Whitney digunakan untuk membandingkan perbedaan
antara dua kelompok. Sensitivitas dihitung dengan membagi jumlah hasil
positif diuji dalam jumlah pasien dalam kelompok TB-pasti untuk semua
prektek klinis. Spesifisitas dihitung dengan membagi jumlah hasil negatif diuji
dalam jumlah pasien dalam kelompok penyakit lainnya, termasuk pasien
dengan TB sembuh, untuk semua praktek klinis. Sebuah probabilitas nilai
kurang dari 0,05 dianggap signifikan.
 HASIL
 Kelompok TB-pasti untuk pleuritis TB terdiri dari 12 pasien dan
kelompok penyakit lain terdiri dari 33 pasien (Kanker paru-paru pada
24 pasien, penyakit pleura yang berhubungan dengan asbes terdapat
5, kolagen penyakit pembuluh darah terdapat 3, ganas limfoma
terdapat 1). Temuan klinis kasus ini menunjukkan limfosit-dominan PE
eksudatif diperlihatkan Tabel 1. Mengenai latar belakang dari kedua
kelompok pasien, frekuensi penyakit pernapasan yang mendasari
penyakit secara signifikan lebih tinggi dibandingkan kelompok penyakit
lainnya. Tidak ada perbedaan yang signifikan antara dua kelompok
pasien dalam data laboratorium. Tingkat rata-rata ADA di PE dan
tingkat tanggapan positif secara signifikan lebih tinggi dalam TB-pasti
kelompok (tingkat positif respon: 83%, tingkat rata-rata: 66,6 IU / l)
dibandingkan kelompok penyakit lainnya (tingkat respon positif: 21%:
Tingkat rata-rata: 20,9
 HASIL

Mengenai hasil QFT menggunakan PB, tingkat respon positif

adalah 83% pada kelompok TB-pasti, itu secara signifikan lebih
rendah pada kelompok penyakit lainnya (9%). Di sisi lain, hasil
tak tentu menyumbang 8% pada kelompok TB-pasti dan 6%
pada kelompok penyakit lainnya (Tabel 2). Hasil tak tentu dari
kedua kelompok disebabkan oleh respon yang rendah dari
mitogen (kontrol positif) pada semua pasien. Sensitivitas QFT
adalah 83% dan spesifisitas adalah 85%.
 HASIL

Angka median dari SFCs dalam dua kelompok secara signifikan

lebih tinggi pada pasien pada kelompok TB-yang pasti (PBMC:
tingkat median 18 FACS dibandingkan PEMC: median tingkat 83
SFCs) dibandingkan kelompok penyakit lainnya (PBMC: median
level 2 SFCs dibandingkan PEMC: median tingkat 3 SFCs) untuk
hasil T-SPOT.TB menggunakan PBMC dan PEMC (Gambar 2 dan
Gambar 3). Terutama, angka median dari SFCs dari T-SPOT.TB
menggunakan PEMC secara signifikan lebih tinggi daripada T-
SPOT.TB menggunakan PBMC pada kelompok TB-pasti.
 KESIMPULAN
Diagnosis pleuritis TB sulit dalam praktek klinis menggunakan
metode diagnostik standar. Khususnya, MTB-NAT di PE atau PCE
Kultur memiliki sensitivitas diagnostik yang rendah. Oleh karena
itu, metode untuk menegakkan pasti diagnosis yang diinginkan.
Untuk beberapa kasus, ketika thoracosintesis secara teknis
dapat digunakan, meskipun tidak ada penilaian kriteria untuk
ELISPOT assay untuk MTB menggunakan PE, alat tes ELISPOT
sangat positif untuk MTB menggunakan PE (SFCs sangat tinggi
terhadap PEMCs dibandingkan dengan PBMC yang diakui dalam
penelitian ini) mungkin rapid test sebelum memulai pengobatan
antituberkulosis. Penelitian skala besar lebih lanjut diperlukan
untuk menilai sensitivitas yang lebih baik
TERIMAKASIH