ISOLASI DAN

IDENTIFIKASI
MIKROORGANISME
BAKTERI

04/20/2020 Yuli Nurullaili E., M.Farm., Apt 1

Definisi
• Isolasi bakteri merupakan proses pengambilan bakteri dari medium
atau lingkungan asalnya, dan menumbuhkan pada medium buatan
sehingga diperoleh biakan atau kultur murni hasil isolasi tersebut.

• Note: harus menggunakan prosedur aseptik

04/20/2020 Yuli Nurullaili E., M.Farm., Apt 2

 TEKNIK ISOLASI BAKTERI
1. Isolasi pada medium padat
Prinsip pada metode isolasi pada agar cawan adalah mengecerkan mikroorganisme sehingga
diperoleh individu spesies yang dapat dipisahkan dari organisme lainnya.

2. Isolasi pada medium cair

Metode isolasi pada medium cair dilakukan bila mikroorganisme tidak dapat tumbuh pada agar
cawan (medium padat), tetapi hanya dapat tumbuh pada kultur cair.

3. Isolasi sel tunggal

Metode isolasi sel tunggal dilakukan untuk mengisolasi sel mikroorganisme
berukuran besar yang tidak dapat diisolasi dengan metode agar cawan/medium cair.
sel dipisahkan dengan pipet halus atau mikromanipulator.

04/20/2020 Yuli Nurullaili E., M.Farm., Apt 3

 Gambar 1. isolasi pada medium padat

04/20/2020 Yuli Nurullaili E., M.Farm., Apt 4

 Lihat kekeruhannya

sample

Gambar 2. Isolasi pada medium cair

04/20/2020 Yuli Nurullaili E., M.Farm., Apt 5

 Gambar 3. Mikromanipulator
04/20/2020 Yuli Nurullaili E., M.Farm., Apt 6
 TEKNIK BIAKAN MURNI BAKTERI
1. Cara penuangan (pour plate method)  untuk menghitung jumlah
bakteri
2. Cara penyebaran (spread plate method)
3. Cara penggoresan (streak plate method)  untuk membuat garis
sebanyak mungkin

04/20/2020 Yuli Nurullaili E., M.Farm., Apt 7

 Gambar 4. Spread plate method & pour plate method
04/20/2020 Yuli Nurullaili E., M.Farm., Apt 8
 Gambar 5. Streak plate method

04/20/2020 Yuli Nurullaili E., M.Farm., Apt 9

 TEKNIK IDENTIFIKASI BAKTERI
1. Mengamati karakteristik makroskopis
2. Mengamati karakteristik mikroskopis
3. Uji biokimia :
a. Uji produksi indol
b. Uji fermentasi karbohidrat
c. Uji penggunaan sitrat
d. Uji methyl red
e. Uji voges proskauer
f. Uji urease
g. Uji katalase
h. Uji H2S

04/20/2020 Yuli Nurullaili E., M.Farm., Apt 10

 Gambar 6. Karakteristik makroskopis bakteri
04/20/2020 Yuli Nurullaili E., M.Farm., Apt 11
 • Karakteristik mikroskopis :

• Bentuk
• Ukuran  mikrometer
• Pewarnaan  Pewarnaan
Gram/ endospora

04/20/2020 Yuli Nurullaili E., M.Farm., Apt 12

• Uji biokimia
dilakukan untuk mengetahui karakteristik dan spesifikasi bakteri
berdasarkan aktivitas enzimatiknya, serta memperkuat data-data yang
diperoleh sehingga mudah diidentifikasi.

04/20/2020 Yuli Nurullaili E., M.Farm., Apt 13