KARBOHIDRAT

DEFINISI
Suatu polyhidroxyaldehide atau polyhidroxyketone yang menghasilkan suatu senyawa ketika dihidrolisis

FUNGSI
Struktural Cadangan dan transfer energi Komponen penyusun

KLASIFIKASI
Monosakarida: Karbohidrat yang tidak dapat dihidroksi lagi. Disakarida: Karbohidrat yang ketika dihidrolisis menghasilkan 2 monosakarida. Oligosakarida: Karbohidrat yang ketika dihidrolisis menghasilkan 3-10 monosakarida. Polysakarida: Karbohidrat yang ketika dihidrolisis menghasilkan lebih dari 10 monosakarida.

MONOSAKARIDA
CnH2nOn Atom C berjumlah 3-7 atom Klasifikasi berdasarkan mengikat gugus o Aldosa: Eritrosa, Ribosa, Glukosa o Heksosa: Fruktosa, Ribulosa, Eritrulosa Klasifikasi berdasarkan panjang kerangka karbon o Triosa: Contohnya Gliseraldehide Triose dibentuk dari pemecahan heksosa pada metabolisme otot. o Tetrosa: Contohnya Erythrose Sebagai intermediate untuk oksidasi glukosa o Pentosa: Contohnya Ribose Ribose pada RNA dan DNA, ATP, Koenzim NAD dan NADP. o Heksosa: Contohnya Glukosa, Galaktosa, Fruktosa. Glukosa berguna sebagai nutrisi utama sel, senyawa ini dapat diubah dalam bentuk lain seperti glikogen, pembentukan energi. Galaktosa dapat dijadikan glukosa melalui bantuan enzim epimerase. Fruktosa sebagai gula buah. o Heptosa: Contohnya Sedoheptulose. sebagai intermediate senyawa ketika metabolisme karbohidrat. Dalam air monosakarida yang memiliki lebih dari 3 atom karbon akan membentuk ikatan cincin. Penggambaran monosakarida o Proyeksi fischer: atom C no1 ditulis paling atas, atom H dan OH ditulis disamping kanan/kiri atom C. Penentuan dextro dan levo berdasarkan

yudaherdantoproduction

06/195395/KU/11829

posisi gugus OH yang ada pada atom C yang paling dekat dengan gugus alcohol primer. o Proyeksi Haworth: atom C no1 ditulis paling kanan, digambar dalam bentuk cincin, untuk H, OH, dll ditulis diatas atau bawah. Penentuan bila OH pada atom C anomer dibawah sedangkan sebaliknya. Penentuan D & L berdasar jika H pada atom C yang dekat dengan gugus alcohol primer, D untuk H dibawah, L untuk H diatas. o Struktur 3D: berbentuk kursi atau meja.

DISAKARIDA
2 monosakarida diikat oleh ikatan glikosidik Contoh: o Sukrosa: Glukosa + Fruktosa Gula konsumsi. Terikat pada 1,2-Glycosidic. Memproduksi osazone yang tak dapat difermentasikan. Selain itu juga bersirkulasi pada tumbuhan. o Lactosa: Glukosa + Galaktosa Gula susu. Terikat pada 1,4-Glycosidic. Membentuk osazone yang dapat difermentasi. o Maltosa: Glukosa + Glukosa Terikat pada 1,4-Glycosidic. Bahan pembuat bir. Membentuk osazone yang dapat difermentasikan.

OLIGOSAKARIDA
Rafinosa: Glukosa + Fruktosa + Galaktosa

POLYSAKARIDA
Memiliki masa yang besar, tidak larut dalam air, tidak berasa. Contoh: o Amylum: Disimpan dalam bentuk butir pati. Amylopectin memiliki ikatan rantai 1,4 sedangkan ikatan cabang 1,6. Dihidrolisis oleh asam menghasilkan glukosa. Dihidrolisis dengan amylase menghasilkan maltosa Urutan hidrolisis pati: Starch Amylodextrin Erythrodextrin Achroodextrin Maltosa Glukosa o Glycogen: Bentuk simpanan polisakarida pada hewan. Lebih banyak cabang daripada amilopectin. o Selulosa: Komponen structural dari tumbuhan. Tidak dapat dicerna karena tidak ada enzim untuk memecah ikatan -glikosida. o Dextran: Produksi dari bakteri. Berguna untuk mencegah turunnya volume darah dan tekanan darah. o Dextrins: Dihasilkan ketika hidrolisis amilum. o Inulin: Berguna untuk menentukan kecepatan filtrasi glomerolus. o Pentosan: Polimer pentosa. o Chitin: Struktural polisakarida hewan invertebrate. Mengandung Nacetyl-D-Glucosamine.

yudaherdantoproduction

06/195395/KU/11829

o Glycoprotein: Sebagai fraksi plasma globulin pada hormone, dan isoaglutinine pada eritrosit.

EKSPERIMEN KARBOHIDRAT
Uji molisch (positif: ada cincin ungu) o Adanya gugus karbohidrat o Positif terhadap semua karbohidrat o Alpha-naphtol berfungsi sebagai indicator warna. o Asam sulfat untuk hidrolisis monosakarida menjadi furfural / hydroksimethyl furfural. o Terbentuk cincin ungu karena kondensasi furfural / hydroksimethyl furfural dengan alfa naphtol. Ungu karena hidrolisis sebagian asam sulfat. Uji benedict (positif: larutan biru ada endapan merah) o Adanya gugus karbonil o CuSO4 sebagai donor Cu2+ untuk direduksi o NaSitrat untuk mencegah endapan CuCO3 o Na2CO3 membentuk suasana alkali o Pemanasan untuk mempercepat hidrolisis Uji selliwanof (positif: larutan merah) o Adanya gugus ketosa o Yang dapat bereaksi dengan HCl encer hanya gugus ketosa, sedangkan gugus aldosa tidak dapat (bisanya terhadap HCl pekat). o HCl untuk hidrolisis fruktosa menjadi hidroksimetil furfural. Uji tauber (positif: larutan merah anggur) o Adanya pentosa o CH3COOH untuk hidrolisis pentosa menjadi hidroksimetil furfural. o Benzidin: Indikator warna o Benzidin 4% hanya dapat bereaksi dengan furfural dari pentosa. o Benzidin 4% sangat mudah dioksidasi dalam suasana asam. Uji benedict pada Disakarida o Adanya gugus karbonil. o Sukrosa negative. Uji Selliwanof pada Disakarida o Sukrosa positif. o Tahap hidrolisis: Sukrosa Fruktosa Hidroksimetil furfural Hidrolisis sukrosa o HCl: Untuk hidrolisis o Na2CO3: Untuk menghentikan hidrolisis HCl o Ada perbedaan karena ada tidaknya pemanasan, karena pemanasan mempercepat hidrolisis. Sehingga hidrolisis yang dibantu pemanasan lebih sempurna daripada yang tidak dibantu. Hidrolisis amilum o HCl: Untuk hidrolisis o Iod: Indikator warna o Na2CO3: Menghentikan hidrolisis. 06/195395/KU/11829

yudaherdantoproduction

o Tahap hidrolisis: Amilum Erythrodextrin Glukosa/akrodextrin Hidrolisis gummi arabicum o NaOH: mencegah hidrolisis lebih lanjut o Proses hidrolisis: Gummi arabicum Arabinosa

LIPID
DEFINISI
Substansi yang larut dalam lemak atau pelarut non-polar tetapi tidak larut dalam air. Lipid disimpan dalam jaringan adipose Untuk didistribusikan lipid harus berikatan dengan senyawa lain. Contoh: Lipoprotein (Lipid + Protein), untuk transport lipid dalam darah.

FUNGSI
Pelarut vitamin A,D,E,K Komponen membrane sel Sintesis hormone steroid dan sex Sumber energi terbesar Melindungi organ Insulator panas (orang gemuk lebih hangat) Insulator listrik (lemak tidak bermuatan, lemak tidak menghantarkan listrik) Triasilgliserol (bentuk cadangan dalam jaringan adiposa) Fosfoasilgliserol (prekusor 2nd messenger, pelapis surfaktan) Sumber asam lemak esensial.

PELARUT LIPID
Ether Chloroform Benzene Boiling alcohol

KLASIFIKASI
Lipid sederhana (ester asam lemak + alkohol) o Lemak (asam lemak + gliserol) Dalam suhu kamar berbentuk padat. o Minyak Sama seperti lemak namun dalam suhu kamar berbentuk cair. o Lilin (asam lemak + alcohol alifatik / siklik rantai panjang) Lipid majemuk (ester asam lemak + alcohol yang mengikat senyawa lipid) o Fosfolipid (asam lemak + alcohol + asam fosfat)

yudaherdantoproduction

06/195395/KU/11829

o Gliserofosfolipid (asam lemak + gliserol + asam fosfat) o Sphingolipid (asam lemak + Sphingosine) o Glikolipid (asam lemak + karbohidrat) o Selain itu: Lipoprotein, Sulfolipid, Aminolipid. Lipid derivate (hidrolisis dari lipid sederhana atau majemuk) o Asam lemak o Alkohol Alifatik alcohol (setil, mirisil, staril) Sterol Alkohol yang mengandung cincin -lonone (vitamin A) o Hidrokarbon (tidak mengandung gugus karboksil dan alcohol. Tidak dapat mengalami proses penyabunan) Alifatik hidrokarbon Carotenoid Squalene o Vitamin D o Vitamin E o Vitamin K o Gugus keton Lipid netral (lipid tanpa muatan) o Asilgliserol o Gliserida o Kolestrol o Ester kolestril

JENIS LIPID
Asam lemak esensial: prekusor pada sintesa prostaglandin. Asilgliserol: ester asam lemak + gliserol Fosfogliserida: o Komponen utama membrane sel. o Membentuk bilayer, bagian kepala (hidrofilik) polar sedangkan bagian ekor (hidrofobik) non-polar Plasmalogen: Sama seperti fosfogliserida hanya saja memiliki satu rantai asam lemak. Sfingolipida: Sfingosin + asam lemak + kepala polar Komponen utama sel tanaman dan hewan. Pada jaringan otak dan syaraf. Sfingomyelin: Seramida dengan kepala polar. Glikosfingolipida netral: terikat pada permukaan eritrosit. Sebagai komponen permukaan sel hewan. Glikosfingolipida asam: - Untuk penerusan impuls syaraf melalui synopsis. - Ikut serta dalam pembentukan spesifitas golongan darah, golongan jaringan, dan organ. - Imunitas jaringan, pertumbuhan dan struktur jaringan. - Akumulasi menyebabkan penyakit Tay-Sache yang bersifat genetic. 06/195395/KU/11829

yudaherdantoproduction

Lilin: komponen utamanya asam palmitate dan alcohol. : Sebagai lapisan pelindung kulit, sayap, buah dan daun. Terpena: pada tanaman yang memiliki cita rasa khas. : sebagai transport electron pada fosforilasi oksidatif. Steroida: strukturnya memiliki 4 cincin. o Kolestrol: komponen pada membrane sel hewan. o Estradiol:hormone sex wanita, diproduksi ovarium o Testosteron: hormone sex pria, diproduksi testis o Vitamin D: Untuk metabolisme kalsium. Prostaglandin: Menunjukkan aktivitas hormonal atau regulator. Mampu menurunkan tekanan darah dan memacu kontraksi jaringan tertentu.

ASAM LEMAK
JENUH (CnH2nOn atau CnH2n+1COOH) o Sistem penamaan: Nomor hidrokarbon + anoic/anoat. o Tidak memiliki ikatan rangkap. o Bentuknya padat dalam suhu ruang. o Diet yang dapat menyebabkan penyakit jantung. o Contoh: lemak babi, mentega. TAK JENUH (CnH2n-2xO2) o Sistem penamaan: Nomor hidrokarbon + enoic/enoat. o Memiliki ikatan rangkap (semakin banyak, semakin tak jenuh) o Bentuknya cair dalam suhu ruang o Diet sehat lemak. o Contoh: minyak nabati.

PENOMORAN
Nomor 1 gugus karboksil (COO-) Atom C yang terdekat bernomor 2 (), 3 (), dan selanjutnya. Indikasi letak ikatan rangkap: o 9: ikatan rangkap ada pada atom C 9 dihitung dari atom C terakhir. o 9: ikatan rangkap pada antara atom C 9 dan C 10. Konvensi: o 18:1:9 = ada 18 atom C 1 ikatan rangkap terletak pada atom C 9 o 9, C18:1 = ada 18 atom C 1 ikatan rangkap pada atom C9 dihitung dari atom C terakhir o 9, 18:1 = ada 18 atom C 1 ikatan rangkap antara atom C9 & C10 Penggunaan Cis: ikatan rangkap membentuk sudut 120o Trans: ikatan rangkap lurus

TITIK LELEH
Semakin panjang ikatan karbon, semakin tinggi titik leleh. Semakin banyak ikatan rangkap, semakin rendah titik leleh.

yudaherdantoproduction

06/195395/KU/11829

RANCID
Ketika lemak dibiarkan melakukan kontak dengan udara dan kelembapan, selain itu juga karena pengaruh panas dan cahaya, akan terjadi perubahan yang menjadikannya tengik (rancid). Lemak tengik tidak enak mengandung racun yang dapat merusak zat makanan seperti carotene vitamin A1 dan vitamin E.

EMULSI
Bentuk dari dispersi air dengan lemak. Membentuk misel (garam empedu, lesitin, kolestrol). Agen emulsi: Garam empedu, protein, sabun.

SAPONIFIKASI
Tripalmitin/Triasilgliserol + NaOH/KOH Gliserol + Sabun NaOH & KOH berguna untuk pembentuk suasana basa. Garam yang terbentuk akan larut dalam air. Jumlah NaOH yang dibutuhkan disebut sebagai angka penyabunan.

PEMBENTUKAN AKROLEIN
Gliserol Akrolein + 2 H2O Gliserol akan mengalami dehidrasi membentuk akrolein.

EKSPERIMEN LIPID
Kelarutan lemak o Lipid akan larut pada pelarut lipid o Lipid tidak larut dalam air o Penambahan Na2CO3 menyebabkan saponifikasi o Akan terjadi emulsi ketika penambahan cairan empedu. Sifat tak jenuh o Kloroform: pelarut lemak o HgCl2 (Hubl Iodine Reagen): Katalisator o Iod (Hubl Iodine Reagen): Untuk mengikat ikatan rangkap dan indicator warna. o Semakin banyak ikatan rangkap semakin mudah berubah warna (semakin sedikit tetes iod yang dibutuhkan). o Satu ikatan rangkap dapat mengikat 2 molekul I-. Pembentukan akrolein o Gliserol + KHSO4 Akrolein o Cir khas baunya menyengat. o Fungsi KHSO4: Oksidator, Katalisator, Dehidrator. Grease spot test o Eter: penguap o Kertas setelah diusapkan menjadi transparan karena kertas merupakan selulosa.

yudaherdantoproduction

06/195395/KU/11829

o Adhesi lipid dengan selulosa lebih besar daripada kohesi lipid dengan lipid. Sehingga menyebabkan pori-pori kertas selulosa merenggang. Kristal kolestrol o Alkohol sebagai pelarut o Bentuk kristal kolestrol seperti tangga. Reaksi warna lipid o Uji salkowski Membentuk 3 lapisan warna: Ungu Hijau Fluorescence Kuning Kloroform + Kolestrol Kolestadiena (Ungu) Kolestadiena + H2SO4 Asam Sulfonat (Hijau Fluorescence) Sisa H2SO4 berwarna kuning. o Libermann Burchard Berwarna hijau Reaksi dari: Asam asetat glacial + Anhidrida cuka + H2SO4

PROTEIN
DEFINISI
Protein adalah susunan dari 100 atau lebih asam amino yang saling mengikat pada ikatan peptide (ikatan antara gugus karboksil suatu asam amino dengan gugus amin suatu asam amino lainnya). Terdiri dari atom C, H, O, N. terkadang ada P dan S.

KERANGKA
Atom C pada protein mengikat: 1. Hidrogen 2. Rantai cabang 3. Amino (-NH2) 4. Karboksil (-COOH)

SIFAT
Amfoter: Dapat mengikat H+ pada amino dan dapat melepas H+ pada karboksil.

KLASIFIKASI
Menurut jenis o Simple: dihidrolisis hasilnya asam-asam amino. o Conjugated: dihidrolisis hasilnya asam amino dan senyawa lain. o Derived: penggabungan dari 2 kelas protein (reaksi kimia, fisis, enzimatis) Protein Primer: Simple & Conjugated yang terdenaturasi (protean). Protein sekunder: Protease primer & sekunder, peptone, peptide. Menurut kelarutan o Albumin o Globulin o Albuminoid o Histon

yudaherdantoproduction

06/195395/KU/11829

Menurut komposisi o Nucleoprotein (kromosom) o Glikoprotein (musin pada saliva) o Fosfoprotein (kasein) o Kromoprotein (Hb & Hemosianin) o Falvoprotein (Sitokrom) o Lipoprotein (fibrin) o Metaloprotein (Cu, Fe) o Glikoporin (membrane plasma) o Heparin (kolagen) Menurut struktur o Primer: asam amino asam amino. o Sekuder: Ada ikatan hydrogen. Rantai berlekuk-lekuk. (alpha-helix dan beta-sheet) o Tersier: Gabungan struktur sekunder dengan ikatan hydrogen, disulfide, hidrofobik, dan jembatan garam. o Quartener: gabungan dari polypeptide-polypeptide. Menurut fungsi o Gerak (actin, myosin) o Struktur (kolagen, keratin) o Simpanan (ferritin) o Pengangkut (Hb) o Hormon (insulin) o Enzim (pepsin) o Proteksi (fibrinogen) o Toksin (venom) Menurut bentuk o Globular: Bulat, larut dalam air. (albumin, globulin, insulin, Hb). o Fibrous: Tidak larut dalam air. (keratin, myosin, kolagen, fibrin).

DENATURASI PROTEIN
Ringan (protein bisa kembali ke bentuk semula/reversible) Berat (irreversible)

FAKTOR DENATURASI PROTEIN

Alkohol Garam logam berat Pemanasan Reagen alkaloid Radiasi UV & X-Ray pH Oksidator & reduktor Penggaraman

yudaherdantoproduction

06/195395/KU/11829

TITIK ISOELEKTRIK
Definisi: Titik dimana protein berada dalam medan magnet. pH: 7,4 Perbedaan TIE menyebabkan pemisahan asam amino. Pada TIEnya, asam amino akan mengendap. Titik diatas TIE menyebabkan suasana basa dan bermuatan negative. Titik dibawah TIE menyebabkan suasana asam dan muatan positive.

HIDROLISIS PROTEIN
Protein Protean Metaprotein Proteosa Pepton Perbedaan Proteosa dan Pepton: o Protease diendapkan dengan ammonium sulfat o Pepton diendapkan dengan asam fosfotungstat Peptide AA

ASAM AMINO
Esensial: Tidak dapat disintesis tubuh. o Valin o Treonin o Lisin o Metionin o Leusin o Triptofan o Isoleusin o Fenilalanin Semi-Esensial: Dapat disintesis tubuh namun persediaan tidak cukup. o Arginin o Histidin Non-Esensial: Dapat disintesis dan persediaan banyak. o Glisin o Asam glutamic o Alanin o Cysteine o Serine o Asparagine o Tirosin o Proline o Asam aspartic o Hydroxyproline

KOMPOSISI ASAM AMINO (kepolaran)

Polar (gugus R-nya OH, NH2, COOH) Non polar (gugus R non-polar)

GUGUS FUNGSIONAL ASAM AMINO

Gugus basa Gugus asam

MACAM-MACAM ASAM AMINO PENYUSUN PROTEIN

Rantai samping alifatik (lurus): glisin, alanin, valin, leusin, isoleusin. Rantai samping gugus hidroksil: serin, treonin Rantai samping ato sulfur: sistein, metionin Rantai asam gugus amida: aspartat, asparagin, asam glutamate, glutamine Rantai samping gugus basa: arginin, hidroksi lisin, lisin, histidin)

yudaherdantoproduction

06/195395/KU/11829

Cincin aromatis: fenilalanin, tirosin, triptofan Asam imino: prolin.

ASAM AMINO YANG BUKAN PENYUSUN PROTEIN

(penting untuk metabolisme) Homeosistein Asam sistein Sulfinat Sitrulin Dopa

EKSPERIMEN
1. 2. 4. 5. 6. UJI BIURET Adanya ikatan peptide. Prinsip: kondensasi 2 molekul air yang dipanaskan. Positif: Protein, Hidrolisat protein, Histidin, Gelatin. Warna ungu (karena kompleks senyawa antara ik.peptide dengan O dari air) CuSO4: Donor Cu2+, menghasilkan warna ungu. NaOH: Katalisator, memberi suasana basa, mencegah endapan Cu(OH)2. Semakin panjang ikatan peptide warna semakin ungu. REAKSI MILLON NASSE Adanya gugus hidroksifenil Prinsip: Pengikatan hidroksifenil dengan Hg. Positif untuk tirosin, terbentuk endapan merah HgSO4: Donor Hg2+. (reagen millon nasse) H2SO4: Pemberi suasana asam. (reagen millon nasse) NaNO2: Reduktor Hg2+ Hg+. REAKSI HOPKINS COLE Prinsip: kondensasi 2 inti indol dari triptofan dengan aldehid. Positif untuk triptofan, terbentuk cincin ungu. REAKSI XANTHOPROTEIN Prinsip: Kondensasi 2 inti benzene Positif untuk asam amino yang mengandung inti benzene (triptofan & tirosin). Warna: Kuning (+HNO3 & dipanaskan) -- Orange (setelah ditambah alkali). UJI SULFUR Prinsip: mengubah S organic menjadi S an-organic. Positif: protein dan asam amino Sistein, metionin. (warnanya hitam dari PbS) NaOH: mengubah S organic menjadi S an-organic. REAKSI NINHIDRIN (triketohidrindene hidrat)

3.

yudaherdantoproduction

06/195395/KU/11829

Adanya asam amino Positif : (warna biru-ungu) Ninhidrin: Oksidator. Hasil oksidasi dari asam amino menghasilkan CO2, NH3, aldehid. Kemudian tereduksi menjadi ninhidrin tereduksi yang akan mengikat NH3 membentuk warna biru. GARAM METALIK Prinsip: Penetralan muatan. Penetralan protein bermuatan dengan ion + dari logam berat. REAGEN ALKALOID Prinsip: penetralan muatan. Penetralan protein bermuatan + dengan ion dari logam berat. GARAM-ALKOHOL PEKAT Prinsip: penarikan air oleh garam ammonium sulfat dan alcohol pekat. Sifat alcohol dan garam sulfat yang menarik air sehingga protein tidak mengikat air lagi dan kemudian terbentuk endapan. ALBUMIN GLOBULIN Prinsip: Denaturasi protein. Penyebab denaturasi: o Penambahan HNO3 o penambahan CH3COOH + pemanasan EFEK ASAM KUAT Prinsip: Pengendapan protein karena denaturasi. Denaturasi menyebabkan kelarutan protein mengecil, sehingga mengendap. EFEK FORMALDEHIDE Warna pink menunjukkan basa, warna bening menunjukkan asam Bila kedua tabung dicampur maka warna menjadi bening, ini karena asam amino kehilangan sifat basanya dan terbentuk derivate asam amino dimetilol. TIMBULNYA GAS N2 Adanya gugus amina Natrium hipobromid mengakibatkan pelepasan gugus amin dari asam amino menjadi NH2.

1. 2. 3. 4.

5. 6. 7.

DETERMINATION OF SERUM IRON

DEFINISI
Fe merupakan mikromineral yang disimpan dalam Hb 70%, dan 30% pada hati, limpa kecil, sumsum tulang belakang.

KLASIFIKASI
Besi Heme Besi yang terikat oleh heme. Bentuk besi ini adalah Fe2+.

yudaherdantoproduction

06/195395/KU/11829

o Enzim sitokrom o Enzim peroksidase o Enzim katalase o Mioglobin o Hemoglobin Besi Non-Heme Besi yang tidak terikat heme. Bentuk besi ini adalah Fe3+. o Ferritin o Hemosiderin o Transferrin

AKG
Pria: 13 mg Wanita: 26 mg

KADAR FE DARAH
Pria: 65-175 mg/dL Wanita: 60-170 mg/dL

TES KADAR FE
TIBC Tes Ferritin Tes Saturasi Transferrin

FUNGSI
Transpor O2 (Hb) Transpor electron Komponen enzim (metaloenzim) Kofaktor dari enzim (sitokrom oksidase, peroksidase, katalase)

SUMBER FE
Hewani (hati, daging, telur) Lebih mudah diserap karena besi dalam bentuk Fe2+. Nabati (Bayam, buah) Lebih lama diserap karena besi dalam bentuk Fe3+.

EXCESSIVE
Hemosiderosis Meningkatnya cadangan besi jaringan tanpa kerusakan jaringan. Hemokromatosis Meningkatnya cadangan besi jaringan disertai kerusakan jaringan. Anemia sideroblastik

yudaherdantoproduction

06/195395/KU/11829

Eritrosit imatur kekurangan enzim ALA sintase yang berfungsi mengambil Fe untuk dikirim ke Hb. Karena Fe tidak terpakai maka akan menumpuk di mitokondria.

DEFISIENSI
Anemia defisinsi besi Pucat, lemah, letih, lesu. Konsentrasi menurun

ABSORBSI FE
Fe hanya dapat diserap dalam bentuk Fe2+. Untuk Fe3+ harus direduksi dulu oleh vitamin C / asam askorbat / asam lambung. Fe diserap di usus halus (duodenum & jejunum proximal). Mekanisme: Besi masuk kedalam sel epitel ditangkap ferritin diedarkan dalam darah dalam bentuk transferrin. Yang mengganggu absorbsi besi: o Fosfat o Fitat

FERRITIN-HEMOSIDERIN
Ferritin o Larut dalam air o Kandungan Fe lebih besar o Bentuk utama penyimpanan Fe. Hemosiderin o Tidak larut dalam air o Kandungan Fe kecil o Setelah Ferritin penuh maka Hemosiderin adalah tempat penyimpanannya.

EKSPERIMEN
HCl: Melepas Fe3+ dari transferrin. TCA: Mendeproteinasi transferrin. Hidroquinon: Reduktor Fe3+ Fe2+. Orthophenantrolin: bersama Fe2+ membentuk kompleks yang dideteksi dengan memberikan warna merah muda. Kalium Asetat: Buffer larutan agar pH stabil. Sentrifugasi: Memisahkan Fe3+ dengan endapan -1 globulin. Vorteks: menghomogenasi campuran. Spektrofotometer 500 nm: untuk mengetahui nilai absorbansi.

yudaherdantoproduction

06/195395/KU/11829

ISOLASI DNA
DEFINISI DNA
DNA adalah bahan penyusun gen. DNA adalah unit penurunan sifat yang meneruskan informasi dari parental keturunan.

PENYUSUN DNA
Tersusun atas 2 rantai polinukleotida berbentuk spiral. 2 rantai itu diikat oleh ikatan hydrogen.

PENYUSUN NUKLEOTIDA
Fosfat Gula Basa

FUNGSI DNA
Tempat penyimpanan info genetic Mengontrol sintesis protein

PERBEDAAN DNA-RNA
DNA Sitosin & timin. Nukleus & mitokondria Deoxyribose Rantai ganda Penyimpanan info genetic Mengontrol sintesis protein PERBEDAAN BASA PIRIMIDIN PENYIMPANAN SENYAWA GULA STRUKTUR FUNGSI RNA Sitosin & urasil Ribosom & sitoplasma Ribose Rantai tunggal Sintesis protein

KANDUNGAN KROMOSOM
DNA Protein histon: untuk konservasi Protein non-histon: untuk ekspresi gen

KROMATIN
DNA Protein histon

FUNGSI ISOLASI DNA

Identifikasi struktur DNA o Dengan metode sequencing dapat menentukan urutan basa nitrogen. o Dengan metode kristalografi sinar X, didapat struktur double helix DNA.

yudaherdantoproduction

06/195395/KU/11829

Pengobatan genetic o Menanamkan gen normal pada sel target yang memiliki sequence penyakit Rekayasa genetic o Pada produksi insulin: menyisipkan gen pengkode insulin ke plasma bakteri, sehingga bakteri tersebut dapat menghasilkan insulin. Box finger printing DNA o Alat untuk identifikasi struktur DNA.

KARIORHEXIS
Pengkerutan sel hingga pecah akibat lingkungan yang hipertonis.

KARIOLISIS
Masuknya cairan ekstraseluler yang mengakibatkan pembengkakan sel hingga akhirnya lisis.

EKSPERIMEN: MENGAPA DIPILIH LIMPA (Jaringan limfoid: thimus)?

Limpa mengandung banyak DNA. Aktivitas enzim Deoxyribonuklease lemah.

BAGAIMANA AKSI ENZIM DEOXYRIBONUKLEASE TERHADAP DNA?

DNA akan terpotong menjadi fragmen.

MENGAPA LIMPA HARUS DIHALUSKAN?

Memudahkan homogenasi Agar hasil yang diperoleh bukan kumpulan sel melainkan sel per sel.

BAGAIMANA CARA MENGHALUSKAN?

Digunting. Tidak boleh ditumbuk karena akan merusak sel. Dengan menggunting limpa akan memutuskan jaringan ikat antar sel.

MENGAPA DITAMBAH NaCl YANG DIBUFFER DENGAN Na-SITRAT pH 7,4?

NaCl: Memberi suasana seperti pada tubuh agar sel tidak rusak. pH 7,4: Menyamakan suasana dalam tubuh (pH: 7,35 7,45) Na-Sitrat: Menghambat aktivitas deoxyribonuclease. (mengikat ion Mg dan Ca)

MENGAPA PROSEDUR EKSTRASI HARUS DALAM KEADAAN DINGIN?

Menghambat aktivitas enzim Deoxyribonuklease. Meminimalisir residu dari enzim Deoxyribonuklease. Bahan kering akan mendenaturasi susunan protein DNA.

yudaherdantoproduction

06/195395/KU/11829

MENGAPA HARUS MEMAKAI ALAT DARI PLASTIK ATAU GELAS?

Agar DNA tidak rusak.

UNTUK APA SUSPENSI DIHOMOGENASI?

Meratakan campuran untuk memperluas permukaan yang berkontak dengan NaCl

UNTUK APA DISENTRIFUGASI I (7500rpm-15menit)?

Memisahkan komponen yang memiliki berat molekul berbeda.

APA HASIL DARI SENTRIFUGASI I?

Sel mengendap. Zat ekstrasel (protein-karbohidrat) pada supernatant.

MENGAPA DIHOMOGENASI (NaCl dibuffer Na-Sitrat) DAN DISENTRIFUGASI II?

Melisiskan sel (organel-organel keluar). Inti sel yang mengandung DNA mengendap.

MENGAPA KEMUDIAN ENDAPAN DITAMBAH NaCl 2M (larutan hipertonis)?

Pada lingkungan hipertonis, cairan dalam inti sel akan keluar, sehingga membrane inti mengkerut dan lisis. DNA akan keluar dari inti sel. NaCl: Dapat melarutkan DNA, untuk memisahkan DNA dengan protein lain.

MENGAPA SUSPENSI HARUS DIDINGINKAN SELAMA 24 JAM?

Agar pelisisan inti lebih sempurna Pelisisan ini disebut juga kariorhexis.

MENGAPA DISENTRIFUGASI III (14.900rpm)?

DNA akan melarut pada supernatant, karena memiliki berat molekul lebih rendah. Protein (histon & non-histon) lain akan mengendap.

MENGAPA SUPERNATAN KEMUDIAN DITAMBAH ETANOL ABSOLUT?

Mengendapkan DNA karena sifat Etanol yang higroskopis (menarik air).

APA STEP AKHIR DARI ISOLASI INI?

Serat-serat putih hasil dari pengadukan kemudian dicuci dengan etanol 75%.

BAGAIMANA PENYIMPANAN DNA?

DNA disimpan dalam keadaan beku. DNA kuat disimpan selama 3 bulan.

yudaherdantoproduction

06/195395/KU/11829