CHEMILUMINESCENCE

Chemiluminescence
adalah emisi atau pancaran cahaya oleh produk yang distimulusoleh suatu reaksi kimia atau
suatu kompleks cahaya. Kompleks ikatan anti gen-antibodi yangterjadi akan menempel pada
streptavidin-coated
microparticle.
ECLIA menggunakanteknologi tinggi yang memberi banyak keuntungan dibandingkan
dengan metode lain. Padametode ini menggunakan prinsip sandwich dan kompetitif Pada.
metode ECLIA yangmenggunakan metode kompetitif dipakai untuk menganalisis substrat
yang mempunyai beratmolekul yang kecil seperti estradiol dan progesteron. Sedangkan
prinsip sandwich digunakanuntuk substrat dengan berat molekul yang besar seperti prolaktin,
LH, dan testosteron.Metode
Electrochemiluminescence Immunoassay
menggunakan ruthenium (II) tris(bipyridyl)[Ru(bpy)
3 2+
] sebagai labelnya dan bereaksi dengan tripropilamine (TPA) pada permukaanelektroda pada
panjang gelombang 620nin. Dengan menggunakan label Mi,
beberapa pemeriksaan dapat dilakukan pemeriksaan,flowcytometry dengan menggunakan but
iranmagnet pada fase padat. Butiran magnet akan tertangkap permukaan elektroda dan label
yangtidak terikat dibuang dengan cairan dasar. Reaksi
electrochemiluminescent
terjadi pada saatlabel telah terikat dan emisi cahaya akan dihitung melalul tabung
fotomultiplier.
PROSEDUR PERCOBAAN
Pemeriksaan dilakukan serentak setelah terkumpul sejumlah sampel. Dengan alatCobas
Elecsys 601 (Cobas e 601). Sampel yang beku dicairkan pada suhu ruangan.Reagensia,
kalibrator dan kontrol juga dibuat menjadi suhu ruangan (20
o
-25
o
C), dandisiapkan menjadi larutan kerja sesuai petunjuk pada
leaflet.
Reagensia diletakkan pada diskreagensia, kalibrator pada disk sampel. Lakukan kalibrasi
reagen. Letakkan kontrol dansampel pada disk sampel. Lakukan pemeriksaan
sampel.Tahapan pemeriksaan ECLIA adalah sebagai berikut:

Inkubasi pertama: antigen dari sampel (50L), antibodi biotinilasi poliklonal spesifik

CrossLaps dan antibodi monoklonal spesifik

-CrossLap yang telah dilabel dengankompleks
ruthenium
membentuk kompleks
sandwich.

Inkubasi kedua: setelah penambahan mikropartikel yang dilapisi oleh streptavadinterjadi

kompleks antigen antibodi melalui interaksi biotin dan streptavadin.

Gabungan reaksi ini diaspirasikan kedalam sel pengukur elektrokimia dimanasubstansi yang
tidak terikat dicuci dan kemudian dipindahkan oleh
buffrer procell.
Sedangkan kompleks imun yang terbentuk ditangkap secara magnetis. Aplikasi darivoltase
ke elektroda kemudian menginduksi emisi cahaya
chemiluminesence
yangdiukur dengan
photomultiper
.

Hasilnya ditentukan melalui kurva kalibrasi yang digenerasikan secara spesifikdengan

instrumen dengan cara kalibrasi 2 titik terhadap kurva master yang tersediamelalui barcode
reagensia

Jumlah cahaya yang dihasilkan berbanding lurus dengan kadar analit dalam sampel.
Immulite 2000

Tujuan : Pengukuran parameter-parameter imunologi

Metode : Chemiluminescens

Sampel : Serum

Alat Immulite 2000 digunakan untukpemeriksaan status hormon Tiroid (T3, T4,TSH dan
Free T4) dan penenda tumor (CEA,PSA Total dan AFP).
Prinsip

Instrumen ini menggunakan tes antibodi spesifik atau antigen dilapisi butiranpolystyrene sebagai fasa padat.

Butiran disalurkan ke dalam tabung reaksi yang dirancang khusus, yang berfungsisebagai wadah untuk
mencuci, inkubasi dan proses sinyal pembangunan.

Setelah sampel diinkubasi dengan alkali phospatase, campuran reaksi dipisahkandari butiran dengan memutar
tabung reaksi dengan kecepatan tinggi sepanjangsumbu vertikal. cairan tersebut dipindahkan ke ruang bah
koaksial, yangmerupakan bagian integral dari stasiun tabung cuci. Tempat mencuci dan menilaiterjadi dalam
hitungan detik, yang memungkinkan tabung reaksi untuk diprosessecara berurutan dengan waktu yang
seragam. Butiran tetap dalam tabung reaksitanpa label terikat yang sisa.

Label terikat kemudian diukur dengan menggunakan substrat dioxetane untukmenghasilkan cahaya. cahaya
dipancarkan saat substrat chemiluminescentbereaksi dengan phospatase alkali terikat butiran jumlah

cahaya yang dipancarkansebanding dengan jumlah analit dalam sampel. Emisi cahaya
ini terdeteksi olehtabung photomultiplier ( PMT) dan hasilnya dihitung untuk setiap sampel.
https://html1-f.scribdassets.com/58pme1its01wfj1m/images/10-5882d01c75.jpg
Prinsip Reaksi
Prinsip immunoassay chemiluminescence identik dengan immunoassay yang lain dengan
senyawa chemiluminescent sebagai penambah untuk enzymesubstrate yang sistem deteksi.
Sebuah kimia dengan sifat bercahaya, seperti luminol, teroksidasi oleh reaksi enzim
dan tereksitasi. Reaksi eksitasi ini meluruh ke daerah ground state oleh emisi cahaya. Reaksi
foton kemudian diukur dalam sebuah luminometer, yang merupakan jenis photomultiplier.
Gangguan
Gangguan dengan reaksi dapat terjadi karena rendah afinitas antibodi terhadap CA 153 digunakan dalam sistem reaksi dan dari pencucian tidak memadai antara langkah-langkah
dari
prosedur. Interaksi nonspesifik juga dapat terjadi, memberikan hitungan latar belakang
tinggi, dan harus diblokir dengan protein seperti bovine serum albumin bubuk, susu,
atau Serum 1% kurang ligan yang sedang diuji.
Spesimen
200 mikroliter serum atau plasma dibutuhkan. Antikoagulan diperbolehkan mencakup
natrium heparin dan EDTA.
The IMMULITE 2000 sistem immunoassay telah dirancang khusus untuk efisiensi optimal
dan konsolidasi di laboratorium menengah dan volume tinggi.
The Immulite 2000 software intuitif, dan antarmuka pengguna grafis, menawarkan
manajemen informasi yang efisien, dari uji jarak jauh pemesanan untuk analisis canggih
hasil.
Melalui menempatkan hingga 200 tes / jam
User-didefinisikan pengenceran otomatis protokol
Lima jam berjalan kaki saat digunakan
Tes generasi ketiga untuk sensitivitas yang sangat baik
Menu yang komprehensif lebih dari 100 tes *
Mudah otomatis melalui VersaCell atau Sistem Otomasi ADVIA lainnya
The Immulite 2000 sistem xpi adalah akses acak immunoassay analyzer terus menerus
dengan maksimal melalui put dari 200 tes per jam. Desain ini meningkatkan alur kerja dan
meningkatkan produktivitas untuk menengah ke volume tinggi immunoassay laboratorium
dengan menggabungkan khusus dan tes alergi ke dalam satu platform.
The Immulite 2000 sistem xpi memiliki keandalan yang diharapkan dari keluarga Immulite
produk.

Meningkatkan alur kerja Laboratorium

90 hari pada stabilitas dewan reagen meminimalkan limbah
Maksimal melalui put dari 200 tes per jam
Tidak ada sampel jeda pemuatan untuk meningkatkan perputaran waktu
Re-run, pengenceran dan refleks kemampuan untuk meminimalkan waktu teknolog
Fungsi AutoStart, termasuk pemeliharaan harian otomatis dan penjadwalan kontrol kualitas,
mengurangi tangan-operasi

Meningkatkan efisiensi melalui intuitif dan mudah untuk menggunakan Perangkat Lunak
19 inch monitor layar sentuh untuk navigasi yang mudah
Kode warna tingkat konsumsi selalu tersedia sekilas
Pengguna pengenceran dikonfigurasi dan pengujian refleks untuk memenuhi kebutuhan
laboratorium

Memberikan solusi yang fleksibel

Biaya otomatisasi efektif tersedia melalui konektivitas melalui solusi VersaCell
Konektivitas scalable untuk solusi otomatisasi lagu berdasarkan Siemens

Pemeriksaan yg dapat dilakukan

Allergy
AlaTOP Allergy Screen1
Allergen-Specific IgE 3gAllergy
Allergen-Specific IgG1
Allergen-Specific IgG41
ECP1
IgE, Total

Anemia
EPO1
Ferritin
Folate
RBC Folate
Vitamin B12

Autoimmune
Anti-CCP

Bone Metabolism
Osteocalcin1
PYRILINKS-D
Cardiac
CKMB1
D-Dimer1
High-sensitivity CRP
Myoglobin
NT-proBNP1
Troponin I
Diabetes
C-Peptide
Insulin
Microalbumin
Growth
Growth Hormone (hGH)
IGF-I
IGFBP-3
Hepatitis
Anti-HBs
Anti-HBs Quantitative
Anti-HBc IgM
Anti-HBc Total
HBsAg
HBsAg Confirmatory

Inflammation
IL-2R1
IL-61
LBP1

Metabolic
ACTH
Cortisol
Homocysteine
Oncology
AFP
CA 125 (OM-MA)
CA 15-3 (BR-MA)
CA 19-91 (GI-MA)
Calcitonin
CEA
Free PSA
PAP
PSA
Other
2-Microglobulin
Gastrin
Nicotine Metabolites1
Reproductive Endocrinology
Androstenedione
DHEAS
Estradiol
Free Beta HCG1
FSH
hCG
LH
PAPP-A1
Progesterone
Prolactin
SHBG
Testosterone
Unconjugated Estriol
Special ID
EBV-EBNA IgG1
EBV-VCA IgG1
EBV-VCA IgM1
H. pylori IgG
Syphilis
Therapeutic Drug Monitoring (TDM)
Carbamazepine
Digitoxin
Digoxin
Phenobarbital
Phenytoin
Theophylline

Valproic Acid
Thyroid
Anti-TG
Anti-TPO
Free T3
Free T4
Intact PTH
T Uptake
TBG
Thyroglobulin
Total T3
Total T4
TSH
TSH, 3rd Generation
TSI3

ToRCH
CMV IgG
CMV IgM
Herpes 1 & 2 IgG
Rubella IgG
Rubella IgM
Toxoplasma IgG
Toxoplasma IgM

Veterinary
Canine TLI
Canine Total T4
Canine TSH
Canine Free T4

The IMMULITE 2000 sistem xpi yang sangat handal mudah digunakan dan memiliki salah
satu yang terbesar menu immunoassay otomatis tersedia. Menengah ke laboratorium volume
tinggi dapat menggabungkan khusus dan tes alergi menjadi beban kerja rutin untuk
meningkatkan produktivitas dan efisiensi.
Disesuaikan otomatis start up untuk perawatan rutin harian dan penjadwalan kontrol kualitas
Reagen pada stabilitas dewan 90 hari
Cangkir sampel tabung-top untuk penanganan mikro-sampel
Rumah layar dengan di-a-sekilas statusnya pada 19 inch monitor layar sentuh
Pilihan yang tersedia untuk pakan air langsung dan massal parasut limbah padat

Solusi Siemens Otomasi tersedia melalui VersaCell Sistem

Overview
System Description
Random access immunoassay system
Throughput
Up to 200 tests per hour in batch or random access mode
Time To First Result
35 minutes
Assays On Board
24
Samples and Sample Handling
Sample Tubes
12-16 mm diameter
75-100 mm heights
10 x 50 microtubes with tube-top racks
Sample Carriers
15 position sample racks; 90 samples fully loaded; Continuous
loading
Walk Away Time
Up to 5 hours
Sample Types
Serum, plasma, urine assay dependent
Sample Integrity Control Pressure-transducer technology with clot detection, clot
flagging, and short sample detection
Automatic Sample
Reflex, re-run, and dilutions
Processing
Barcodes
Formats Supported
Code 39, Code 128, Codabar, UPC,and I-2 of 5 (Interleaved)
Reagents and Reagent Handling
Reagent Positions
24
Reagent Cooling
2 - 8 C
Reagent Preparation
None required
Reagent On Board
90 days
Sability
Reagent Barcodes
Allows system to identify lot number, and determine when
calibrator adjustment needed, and the tests remaining in the
reagent wedge
User Interface
Operating System
Microsoft Windows XP
Monitor
19 inch touch sensitive screen
Maintenance
Daily
Automated daily maintenance cycle completed according to
time programmed by the laboratory
Weekly
20 minutes
Monthly
45 minutes
Environmental
Operating Temperature 18 32 C
Electrical
200 - 240 v, 6 AMP
50/60 Hz
Dimensions
Height
65 in / 165 cm
Width
93 in / 236cm
Depth
45 in / 114 cm
Weight
800 lbs / 363 kg

I. Metode : Chemiliuninescent Immunoassay

II. Sampel :

Jenis : Serum 0,5 mL

Stabilitas : 2 8oC selama 3 hari, -20 oC selama 6 bulan

III. Alat :
Immulite 2000
IV. Nilai Rujukan : Sesuai nilai pada masing-masing pemeriksaan
V. Prinsip Kerja :
Immulite 2000 Allergen-Specific IgE merupakan solid-phase, two step.
Chemiluminescent immunoassay yang menggunnakan kinetik fase cair dalam bentuk
bead. Ini merupakan kelebihan dibandingkan metode konvensional yang berdasarkan
pada allergen yang menopang pada fase padat seperti paper disk.
Allergen-allergen secara kovalen terkait pada matriks polymer/copolymer asam amino
memperkuat jumlah allergen yang bias ditopang matriks.
Pemisahan serum/plasma dengan cara :

Diamkan sampel selama 30 menit pada suhu ruang.

Sentrifuge sampel dengan kecepatan 3000 rpm selama 15 menit.

Segera pisahkan serum (tabung merah) dengan mikropipet, masukkan ke dalam

tabung/cup fisher @ min 0.5 cc.

Beri identitas pada masing-masing tabung/cup fisher : nomor pasien, nama pasien,

tanggal pengambilan sampel, dan tulis keterangan serum.

Segera disimpan pada suhu -20 oC.

VI. Langkah kerja :

1.

Kalibrasi alat

2.

Melakukan kontrol

3.

Pemeriksaan sampel

Dilakukan setelah hasil kalibrasi dan kontrol memenuhi syarat

Cara pemeriksaan

Pipet 250 ul sampel kedalam cup

Letakkan pada disk alat immulite
Masukkan ID sampel dan nomor posisi sampel pada alat immulite
Kerjakan sesuai dengan program pengerjaan sampel alat

Setelah sampel terkumpul, sampel dikirim ke Prodia Jakarta untuk pemeriksaan

serologi.