Efektivitas Antibakterial Ekstrak Air dan Etanol dari Daun Mali-mali (Leea

indica) terhadap Pseudomonas aeruginosa ATCC 10145 In Vitro

Satria Putra Wicaksana1, MT. Kamaluddin2, Theodorus2
1. Program Studi Pendidikan Dokter, Fakultas Kedokteran, Universitas Sriwijaya, Sumatera Selatan, Indonesia
2. Bagian Farmakologi, Fakultas Kedokteran, Universitas Sriwijaya, Sumatera Selatan, Indonesia

E-mail: satriaputrawicaksana3@gmail.com

Abstrak

Penggunaan antibiotik yang sangat luas dan sering dilakukan secara tidak tepat di berbagai rumah sakit, serta tidak
berdasarkan indikasi menyebabkan terbentuknya banyak bakteri yang resisten terhadap antibiotik, terutama bakteri gram
negatif Pseudomonas aeruginosa yang memiliki kompleksitas mekanisme resistensi yang sudah meluas di Asia, Amerika,
dan Eropa. Saat ini, penelitian yang bertujuan untuk mencari antibiotik lain khususnya antibakteri alami telah banyak
dilakukan. Ekstrak air dan etanol daun Mali-mali (Leea indica) memiliki kandungan senyawa flavonoid, terpenoid, tannin,
alkaloid, dan saponin yang dapat menghambat bahkan membunuh bakteri. Penelitian ini bertujuan untuk melihat
perbedaan efektivitas ekstrak air dan etanolnya yang dibandingkan dengan Siprofloksasin sebagai drugs of choice
terhadap Pseudomonas aeruginosa. Penelitian eksperimental dengan metode Post-test Only Control Group Designed
dilakukan dengan empat kali pengulangan dan menggunakan Siprofloksasin sebagai kontrol positif dan aquades sebagai
kontrol negatif, serta ekstrak air dan etanol yang dibagi ke dalam lima gradien konsentrasi yang berbeda, yaitu 0,125
gr/ml, 0,250 gr/ml, 0,500 gr/ml, 0,750 gr/ml dan 1,000 gr/ml. Hasil Uji difusi Kirby-Bauer menunjukkan bahwa ekstrak
air mempunyai daya hambat bakteri pada semua konsentrasinya, sedangkan ekstrak etanolnya hanya menunjukkan daya
antibakteri pada sebagian pengulangan dan pada konsentrasi 0,750 gr/ml dan diatasnya dengan diameter zona hambat
sebesar 13 mm. Selain itu pada uji kesetaraan menunjukkan ekstrak air 0,125 gr/ml dengan rata-rata diameter zona hambat
17,417 0,6860 mm setara dengan 1,19 x 10-18 gr/ml Siprofloksasin dengan rasio 1:0,952 x 10-17. Hasil ini menunjukkan
bahwa Ekstrak air memiliki perbedaan aktivitas antibakterial yang signifikan dengan nilai p<5% dibandingkan dengan
ekstrak etanol dan Siprofloksasin (0,5 mg/ml), namun tidak lebih efektif bila dibandingkan dengan Siprofloksasin dalam
menghambat pertumbuhan bakteri Pseudomonas aeruginosa.
Kata kunci: ekstrak, Mali-mali, Pseudomonas aeruginosa, in vitro.

Abstract
Antibacterial Effectiveness of Water and Ethanol Extracts from Mali-mali Leaves (Leea indica) against Pseudomonas
aeruginosa ATCC 10145 In Vitro. The usage of Antibiotics widely and unappropriate in many hospitals, and also not
based on indication cause a lot of resistant bacterial againt antibiotics, especially gram-negative bacterium Pseudomonas
aeruginosa that have resistant-mechanism complexity which is widely in Asia, Amerika, and Europe. Nowadays, a lot of
researchs which have purpose in founding other antibiotics especially natural antibacterial have been reported. Water and
ethanol extracts from Mali-mali leaves (Leea indica) which have flavonoid, terpenoid, tannin, alkaloid and saponin in its
contens can cause impeded even death of bacterial growth. The aimed of this research is finding out about the difference
of effectiveness between water and ethanol extracts against Ciprofloxacine as drugs of choice in inhibit growth of
Pseudomonas aeruginosa. Experimental research with Post-test Only Control Group Designed method have been done
by four times repeating and using Ciprofloxacine as Positive control, aquades as Negative control, also water and ethanol
extracts that divided into five difference concentrations (0,125 gr/ml, 0,250 gr/ml, 0,500 gr/ml, 0,750 gr/ml dan 1,000
gr/ml). The Results of Kirby-Bauer diffusion method indicated that water extract showed antibacterial activity in each of
concentrations, meanwhile antibacterial activity of ethanol extracts just showed on concentrations 0,750 gr/ml above with
diameter of inhibitory zone 13 mm. In otherside, equality test of doses showed that 0,125 mg/ml water extracts with mean
of diameter of inhibitory zone 17,417 0,6860 mm equal with 1,19 x 10-18 gr/ml Ciprofloxacine and its ratio is 1:0,952
x 10-17. This results indicated that water extract has significantly difference of antibaterial activity with p<5% just than
ethanol extract and Ciprofloxacine (0,5 mg/ml), but its not more effective than Ciprofloxacine in inhibit the growth of
Pseudomonas aeruginosa.
Keywords: extract, Mali-mali, Pseudomonas aeruginosa, in vitro.
1. Pendahuluan
Infeksi masih merupakan masalah kesehatan
masyarakat yang penting untuk dihadapi saat
ini. Infeksi merupakan penyebab utama
kematian dan semakin buruknya kondisi
kehidupan jutaan orang di seluruh dunia1.
Sampai saat ini, Pengendalian infeksi masih
menjadi prioritas tersendiri dalam rencana
strategis Kementerian Kesehatan tahun 2015-
2019 di Indonesia2.
Antibiotik sebagai obat antibkteri bekerja
dengan mekanisme dan tempat yang berbeda-
beda3. Antibiotik merupakan bahan kimiawi
yang dihasilkan oleh organisme tertentu seperti
bakteri dan jamur yang dapat mengganggu
organisme lain dan bekerja dengan cara
membunuh bakteri (bakterisidal) dan
menghambat pertumbuhan bakteri
(Bakteriostatik) atau mikroorganisme lainnya4.
Penelitian menunjukan sekitar 40-62%
antibiotik digunakan secara tidak tepat untuk
mengatasi penyakit yang sebenarnya tidak
membutuhkan antibiotik. Pada penelitian di
berbagai rumah sakit ditemukan 30-80%
adanya penggunaan antibiotik yang tidak
berdasarkan indikasi3. Selain itu, penerapan
antibiotik sampai saat ini tidak hanya ditujukan
kepada pengobatan manusia, namun juga
ditemukan pada bidang lain seperti peternakan
yang ditujukan pada profilaksis infeksi
terhadap hewan atau penggunaan pada
tanaman. Akibat proses tersebut, terjadi
pemaparan antibiotik yang terus-menerus dan
berlebihan pada flora tubuh manusia dan hewan
sehingga terjadi proses seleksi bakteri yang
resisten terhadap antibiotik5. Antibiotik telah
terbukti sangat bermanfaat bagi manusia sejak
ditemukannya sampai sekarang. Akan tetapi,
penggunaan antibiotik terus-menerus ternyata
memilik masalah tersendiri bagi kemajuan
pengobatan. Masalah yang terpenting adalah
timbulnya galur bakteri resisten terhadap jenis
antibiotik sehingga dapat menyebabkan
pengobatan penyakit infeksi dengan antibiotik
tidak lagi efisien dan mungkin menjadi lebih
mahal6.
Pada bakteri Pseudomonas aeruginosa,
diperoleh data penelitian bahwa telah terjadi
penurunan sensitifitas yang mulai meluas baik
di Asia, Eropa, Amerika Serikat, Timur
Tengah, dan Indonesia resistensi terhadap
banyak antibiotik diantaranya amoksisilin,
sefadroksil, klindamisin, eritromisin,
kanamisin, tetrasiklin, dan metronidazol7.
Mekanisme resistensi ini disebabkan karena
terdapatnya kompleksitas mekanisme resistensi
yang terjadi ketika pengkodean kromosom
yang membuat Pseudomonas aeruginosa
menjadi salah satu tantangan terapi terbesar kita
saat ini3,8.
Sampai saat ini, telah banyak dilakukan
penelitian untuk menemukan antibiotik lain
khusunya antibakteri alami seperti yang berasal
dari kunyit, jahe, dan jagung dalam
menghambat pertumbuhan bakteri, karena
penggunaan antibiotik sintetik ternyata
memiliki efek samping yang lain yang dapat
membahayakan kesehatan manusia akibat
residu kimia yang tersisa di dalam tubuh9.
Penelitian sebelumnya menunjukkan bahwa
ekstrak air dan etanol pada daun anggur (Vitis
vinifera L) mempunyai aktivitas antibakteri
terhadap Staphylococcus aureus dan
Pseudomonas aeruginosa melalui kandungan
dimilikinya seperti flavonoid, terpenoid, tannin,
serta adanya saponin dan alkaloid yang
berperan dalam mengganggu integritas
membran sel dan merusak membran sitoplasma
sehingga memberikan efek bakterisidal, serta
mampu mendenaturasi protein yang dapat
menyebabkan terhambatnya pertumbuhan
bakteri bahkan menyebabkan kematian10,11.
Daun Mali-mali sebagai antimikroba
diketahui mengandung flavonoid, saponin,
tannin, alkaloid dan saponin pada analisis
fitokimianya12. Selain itu, penelitian tentang
senyawa fenolik pada daun Mali-mali
menjelaskan bahwa ekstrak airnya ternyata
memiliki kandungan senyawa fenolik yang
lebih tinggi dibandingkan etanol, hexana, dan
etil-asetat. Senyawa fenolik tersebut pada
konsentrasi rendah mampu merusak membran
sitoplasma dan dapat menyebabkan kebocoran
pada inti sel, sedangkan pada konsentrasi tinggi
dapat menyebabkan koagulasi terhadap protein senyawa fitokimia pada daun Mali-mali masih
seluler, sehingga secara langsung senyawa terbatas13.
fenolik dapat berperan sebagai antibakteri
melalui prosesnya13,14. 2. Metode Penelitian
Tabel 1. Unsur Kimia pada Leea indica
Penelitian ini adalah penelitian eksperimental
Fitokonstituen
Formula
Ekstrak
Bagian dalam bentuk in vitro menggunakan rancangan
molekul tumbuhan eksperimental sederhana (Post-test Only
-Sitoserol C29H50O Etanol Akar, daun Control Group Designed) dengan metode
Lupeol C30H50O Etanol Akar, daun pengambilan sampel berupa purposive
Di-n-octyl C24H38O4 Etanol sampling. Sampel pada penelitian ini adalah
Akar
phthalate bakteri Pseudomonas aeruginosa ATCC 10145
-Amyrin C30H50O Etanol Akar yang diperoleh dari RSUP dr. Mohammmad
Gallic acid C7H6O5 Etanol Akar, daun Hoesin Palembang.
Quercitrin C21H20O11 Etanol Akar Penelitian ini dilaksanakan di
Dibutyl C16H22O4 Etanol Akar Laboratorium Biologi Molekuler dan
phthalate Laboratorium Mikrobiologi Fakultas
-Tocopherol C29H50O2 Etanol Akar Kedokteran Universitas Sriwijaya dengan
Di-iso buthyl C16H22O4 Minyak Siprofloksasin sebagai kontrol positif, aquades
Bunga
phthalate esensial
sebagai kontrol negatif, serta ekstrak air dan
Di-n-buthyl C16H22O4 Minyak Bunga
phthalate esensial etanol dari daun Mali-mali yang terbagi dalam
N-buthyl iso C16H22O4 Bunga lima gradien konsentrasi, yaitu 0,125 gr/ml,
Minyak
buthyl
esensial
0,250 gr/ml, 0,500 gr/ml, 0,750 gr/ml, dan
phthalate 1,000 gr/ml. Setiap kelompok perlakuan
Mollic acid C35H56O8 Seluruh
Etil asetat diulang sebanyak empat kali dan diuji dengan
arabinoside bagian
Mollic acid C35H56O8 Seluruh metode difusi agar Kirby-Bauer untuk melihat
Etil asetat aktivitas antibakteri melalui diameter zona
xyloside bagian
Phthalic acid
C8H6O4 Petroleum
Daun
hambat pertumbuhan yang terbentuk.
eter Daun Mali-mali (Leea indica) yang
C16H32O2 Petroleum Daun
Palmitic acid berasal dari desa Sumanik, kabupaten Tanah
eter
C20H42O Petroleum Daun Datar, Padang, diekstraksi dengan
Eicosanol menggunakan metode maserasi menggunakan
eter
Solanesol
C45H74O Petroleum Daun Rotary vacuum evaporator hingga dihasilkan
eter ekstrak yang kental yang digunakan sebagai
C15H26O Petroleum Daun
Farnesol bahan uji terhadap pertumbuhan bakteri
eter
C30H48O3 Petroleum Daun Pseudomonas aeruginosa. Masing-masing
Ursolic acid kelompok perlakuan diujikan kepada bakteri
eter
N-buthyl C11H14O5 Petroleum Daun Pseudomonas aeruginosa yang dibiakkan pada
gallate eter media Muller Hinton agar dan hasilnya diolah
Sumber: Mishra, 201415. menggunakan program Statistical Package for
Daun Mali-mali (Leea indica) dikenal the Social Science (SPSS) versi 22.
sebagai tanaman yang memiliki banyak khasiat 3. Hasil
seperti antioksidan, antimikroba, dan
antisitotoksik di banyak negara seperti Penelitian ini dilakukan di Fakultas Kedokteran
Thailand, Malaysia, India, dan Cina. Akan Universitas Sriwijaya pada tanggal 15
tetapi, saat ini laporan penelitian tentang November sampai 7 Desember 2016.
Aktivitas Antibakteri Ekstrak Air dan
Etanol daun Mali-mali
Ekstrak air daun Mali-mali dalam lima gradien
konsentrasi yang diteteskan kepada
Pseudomonas aeruginosa setelah 24 jam
pengamatan memberikan efek daya hambat
terhadap pertumbuhan bakteri (Gambar 1),
sedangkan pemberian ekstrak etanolnya hanya
memberikan efek daya hambat pertumbuhan
bakteri pada sebagian konsentrasi dan dua
pengulangan pertama (Gambar 2).
Pseudomonas aeruginosa. Daya hambat
pertumbuhan hanya terlihat pada konsentrasi
1,000 gr/ml, 0,800 gr/ml, dan 0,750 gr/ml pada
pengulangan pertama masing-masing 15 mm,
15 mm, dan 13 mm.
Tabel 2. Distribusi rata-rata daya hambat ekstrak
air daun Mali-mali terhadap bakteri Pseudomonas
aeruginosa dalam berbagai konsentrasi
Konsentrasi N Mean SD p value
(gr/ml) (mm)

0,125 4 17,417 0,6860 0,000

0,250 4 19,332 0,8179

0,500 4 21,250 0,9574

0,750 4 23,167 0,9994

1,000 4 25,500 1,2910

Kontrol 4 20,585 1,4752

Positif

Pada konsentrasi 0,125 gr/ml dan 0,250

Gambar 1. Pembentukan zona hambat ekstrak air
dalam lima gradien konsentrasi
gr/ml memberikan efek daya hambat
pertumbuhan kuat yang berada pada rentang
10-20 mm. pada konsentrasi 0,500 gr/ml, 0,750
gr/ml, dan 1,000 gr/ml menunjukkan bahwa
ekstrak airnya memiliki efek daya hambat
pertumbuhan sangat kuat seperti kontrol positif
(siprofloksasin 0,5 mg/ml) terhadap bakteri
dengan diameter >20 mm (Tabel 2).

Analisis Data

Dari hasil perhitungan rerata dan standar

Gambar 2. Pembentukan zona hambat ekstrak
etanol dalam lima gradien konsentrasi
Berdasarkan gambar 2. terlihat bahwa
tidak semua perlakuan ekstrak etanol daun
Mali-mali mampu memberikan efek daya
hambat pertumbuhan terhadap bakteri
deviasi diameter zona hambat pada tabel 2,
selanjutnya dilakukan uji normalitas dan uji
homogenitas varians sebagai persyaratan untuk
memperoleh hasil uji one-way ANOVA yang
valid yang diteruskan dengan uji Post-Hoc
Bonferroni untuk mengetahui setiap kelompok
yang memilki perbedaan signifikan.
 Tabel 3. Distribusi kelompok data Tabel 3 dan Tabel 4 memperlihatkan
bahwa hasil pengukuran diameter zona hambat
Shapiro-Wilk pada setiap konsentrasi ekstrak air dan kontrol
Kelompok Perlakuan
Statistik Df Sig. positif yaitu siprofloksasin 0,5 mg/ml
berdistrbusi normal dan memiliki variansi data
0,125 gr/ml 0.827 4 0.160 yang homogen. Selanjutnya sebelum dilakukan
0,250 gr/ml 0.861 4 0.262 uji one-way ANOVA, perlu dilakukan uji T
Ekstrak air Independent untuk melihat Perbandingan
daun Mali- 0,500 gr/ml 0.863 4 0.272 efektivitas antara kontrol positif dan ekstrak air
mali dalam lima gradien konsentrasi. Dari hasil uji
0,750 gr/ml 0.85 4 0.225
Independent T Test didapatkan nilai
1,000 gr/ml 0.993 4 0.972 probabilitas kelompok kontrol positif
Kontrol (siprofloksasin 0,5 mg/ml) dengan semua
0.878 4 0.331 kelompok kecuali ekstrak air 0,125 gr/ml, 0,750
Positif
gr/ml, dan 1,000 gr/ml >0,05 (Tabel 11).
Shapiro-Wilk test, p=0,05 Berdasarkan nilai tersebut dapat disimpulkan
bahwa tidak terdapat perbedaan rerata besar
Tabel 4. Variansi kelompok data
diameter zona hambat antara kelompok kontrol
Levene Statistik df1 df2 Sig. positif dengan semua kelompok kecuali ekstrak
air 0,125 gr/ml, 0,750 gr/ml, dan 1,000 gr/ml.
1,878 5 18 0,148

Levenes test, p=0,05

Tabel 5. Perbandingan efektivitas antara ekstrak air dan siprofloksasin

Mean diameter zona Mean diameter

Kelompok Kelompok p value
hambat zona hambat
Kontrol Positif 20,585 1,4752 Ekstrak air 0,125 gr/ml 17,417 0,6860 0,008
Ekstrak air 0,250 gr/ml 19,332 0,8179 0,188
Ekstrak air 0,500 gr/ml 21,250 0,9574 0,478
Ekstrak air 0,750 gr/ml 23,167 0,9994 0,027
Ekstrak air 1,000 gr/ml 25,500 1,2910 0,002
Ekstrak air 0,125 gr/ml 17,417 0,6860 Ekstrak air 0,250 gr/ml 19,332 0,8179 0,012
Ekstrak air 0,500 gr/ml 21,250 0,9574 0,001
Ekstrak air 0,750 gr/ml 23,167 0,9994 0,000
Ekstrak air 1,000 gr/ml 25,500 1,2910 0,000
Ekstrak air 0,250 gr/ml 19,332 0,8179 Ekstrak air 0,500 gr/ml 21,250 0,9574 0,023
Ekstrak air 0,750 gr/ml 23,167 0,9994 0,001
Ekstrak air 1,000 gr/ml 25,500 1,2910 0,000
Ekstrak air 0,500 gr/ml 21,250 0,9574 Ekstrak air 0,750 gr/ml 23,167 0,9994 0,032
Ekstrak air 1,000 gr/ml 25,500 1,2910 0,002
Ekstrak air 0,750 gr/ml 23,167 0,9994 Ekstrak air 1,000 gr/ml 25,500 1,2910 0,029
Independent T-test, p=0,05
 Tabel 6. Perbedaan efektivitas ekstrak air dalam berbagai konsentrasi

Sum of Squares Mean Square

Df Fh p
(SS) (MS)

Between Groups 162,145 5 32,429 28,207 0,000

Within Groups 20,694 18 1,150

Total 182,839 23

Uji one-way ANOVA

Keterangan:
SS : Jumlah Kuadrat df : Derajat Kebebasan
MS : Kuadrat Rerata Fh : Nilai F Hitung
p : Probabilitas (p=0,05)

Pada uji one-way ANOVA, diperoleh nilai
Fh yaitu 28,207. Pada p=0,05 dengan nilai df1
dan df2 berturut-turut adalah 5 dan 18, maka
diperoleh nilai Ftabel yaitu 2,77. Perbedaan nilai
dimana Fh>Ftabel menyatakan bahwa terdapat
perbedaan yang signifikan dari efektivitas
ekstrak air daun Mali-mali pada berbagai
konsentrasi dalam menghambat pertumbuhan
bakteri Pseudomonas aeruginosa, maka dengan
demikian H0 ditolak.
Gambar 3. Tampilan grafik nilai diameter zona
hambat pertumbuhan Pseudomonas aeruginosa
Berdasarkan uji homogenitas varians
pada tabel 4 yang menyatakan bahwa data pada
kelompok perlakuan bersifat homogen, maka
perlu dilakukan uji Post-Hoc Bonferroni untuk
mengetahui setiap kelompok yang memiliki
perbedaan signifikan.
Hasil uji statistik menggunakan Post-Hoc
Bonferroni menunjukkan adanya perbedaan
efek daya hambat pertumbuhan pada ekstrak air
0,125 gr/ml terhadap ekstrak air 0,500 gr/ml,
0,750 gr/ml, dan 1,000 gr/ml, serta terhadap
kontrol positif dengan nilai p<0,05. Pada
ekstrak air dengan konsentrasi 0,125 gr/ml dan
0,250 gr/ml, 0,250 gr/ml dan 0,500 gr/ml, 0,500
gr/ml dan 0,750 gr/ml, serta 0,750 gr/ml dan
1,000 gr/ml tidak terdapat adanya perbedaan
efek daya hambat pertumbuhan bakteri dengan
nilai p>0,05. Grafik nilai diameter zona hambat
dan uji statistik menggunakan Post-Hoc
Bonferroni juga menunjukkan bahwa ekstrak
air dengan konsentrasi 0,250 gr/ml dan 0,500
gr/ml tidak memiliki perbedaan efek daya
hambat pertumbuhan bakteri terhadap kontrol
positif yaitu siprofloksasin 0,5 mg/ml, hal ini
menunjukkan bahwa ekstrak air dengan
konsentrasi 0,250 gr/ml dan 0,500 gr/ml
memiliki efek yang sama dengan siprofloksasin
0,5 mg/ml dalam menghambat pertumbuhan
bakteri Pseudomonas aeruginosa.
 Tabel 7. Uji kesesuaian ekstrak air terhadap kontrol positif

Kelompok Ekstrak air Ekstrak air Ekstrak air Ekstrak air Ekstrak air
Kontrol +
Perlakuan 0,125 gr/ml 0,250 gr/ml 0,500 gr/ml 0,750 gr/ml 1,000 gr/ml

Kontrol + - 0,008* 1,000 1,000 0,047* 0,000*

Ekstrak air
0,008* - 0,317 0,001* 0,000* 0,000*
0,125 gr/ml

Ekstrak air
1,000 0,317 - 0,315 0,001* 0,000*
0,250 gr/ml

Ekstrak air
1,000 0,001* 0,315 - 0,315 0,000*
0,500 gr/ml

Ekstrak air
0,047* 0,000* 0,001* 0,315 - 0,098
0,750 gr/ml

Ekstrak air
0,000* 0,000* 0,000* 0,000* 0,098 -
1,000 gr/ml

Uji Post-Hoc Bonferroni, p=0,05

Uji Kesetaraan Ekstrak
Uji kesetaraan perlu dilakukan untuk
mengetahui berapa besar konsentrasi ekstrak
dan konsentrasi antibiotik sipofloksasin yang
diperlukan untuk menghasilkan diameter zona
hambat yang sama. Untuk menentukan
kesetaraan dosis dilakukan uji Regresi linier
dengan membandingkan diameter zona hambat
Konsentrasi Hambat Minimum ekstrak air
terhadap diameter zona hambat antibiotik
siprofloksasin.
Pengaruh ekstrak air dan antibiotik
siproflosasin terhadap diameter zona hambat
dianalisis dengan uji Regresi linier, didapatkan
persamaan:
Y = a + bX
Y = 18,336 + 0,066 (X)
Tabel 8. Hasil uji kesetaraan ekstrak air daun Mali-
mali dengan antibiotik siprofloksasin terhadap
pertumbuhan bakteri Pseudomonas aeruginosa
Konsentrasi Konsentrasi Antibiotik
Ekstrak Air Siprofloksasin
0,125 gr/ml 1,19 x 10-18 gr/ml
Uji Regresi Linier
Pada Tabel 8, hasil uji kesetaraan
menunjukkan bahwa 0,125 gr/ml ekstrak air
daun Mali-mali setara dengan 1,19 x 10-18 gr/ml
antibiotik siprofloksasin terhadap pertumbuhan
bakteri Pseudomonas aeruginosa untuk
menghasilkan diameter zona hambat yang
sama. Hal ini cukup membuktikan bahwa
antibiotik siprofloksasin msih lebih efektif
dibandingkan ekstrak air dalam menghambat
pertumbuhan bakteri Pseudomonas
aeruginosa.

Keterangan:
Y : diameter zona hambat
X : Log konsentrasi antibiotik siprofloksasin
4. Pembahasan
Proses Ekstraksi
Pembuatan ekstrak air dan etanol dari daun
Mali-mali pada penelitian ini menggunakan
metode maserasi yang bertujuan untuk menarik
senyawa antibakteri yang terkandung dalam
daun Mali-mali. Metode ini merupakan salah
satu metode ekstraksi senyawa organik yang
umum dan bekerja karena adanya perbedaan
tekanan di dalam dan di luar sel akibat
perendaman terhadap pelarut yang digunakan.
Air dan etanol merupakan pelarut polar yang
mampu melarutkan senyawa-senyawa organik
yang terkandung dalam daun Mali-mali sesuai
dengan tingkat kepolarannya. Pelarut dapat
menarik senyawa pada tingkat kepolaran yang
sama, namun senyawa dengan tingkat
kepolaran yang lebih rendah dapat ditarik oleh
pelarut dengan kepolaran yang lebih tinggi. Hal
ini tidak berlaku sebaliknya. Kuatnya peranan
suatu ekstrak dalam menghambat pertumbuhan
bakteri tergantung pada besarnya jumlah
senyawa antibakteri yang dapat ditarik oleh
pelarutnya16.
Aktivitas Antibakteri
Pada penelitian ini diperoleh hasil bahwa
pemberian ekstrak air dan etanol terhadap
bakteri Pseudomonas aeruginosa mampu
memberikan efek daya hambat bakteri yang
terlihat melalui besarnya diameter zona hambat
yang terbentuk. Pada ekstrak air, semua gradien
konsentrasi menunjukkan adanya aktivitas
bakteri yang semakin besar dimulai dari
konsentrasi 0,125 gr/ml, 0,250 gr/ml, 0,500
gr/ml, 0,750 gr/ml, dan 1,000 gr/ml yang
menunjukkan bahwa kandungan senyawa
antibakteri pada esktrak air cukup kuat dan
terus meningkat sesuai dengan besarnya
konsentrasi hasil ekstraksi. Namun hal yang
berbeda terlihat pada kelompok perlakuan
ekstrak etanol, dimana aktivitas antibakteri
hanya terlihat pada konsentrasi 1,000 gr/ml,
0,800 gr/ml, dan 0,750 gr/ml dan tidak terjadi
pada setiap pengulangan. Besarnya perbedaan
efek daya hambat pertumbuhan bakteri yang
ditimbulkan oleh ekstrak air dan ekstrak etanol
dapat disebabkan karena pelarut air memiliki
kemampuan lebih banyak menarik senyawa
polar dan semi-polar antibakteri dibandingkan
dengan pelarut etanol seperti flavonoid, tannin,
alkaloid, dan fenol, sehingga pada prosesnya
aktivitas antibakteri pada ekstrak etanol hanya
terlihat pada konsentrasi tertentu dan pada
pengulangan pertama. Selain itu hasil ini juga
sesuai dengan penelitian sebelumnya yang
menyebutkan bahwa konsentrasi senyawa
fenolik sebagai antibakteri 2 kali lebih banyak
ditemukan pada ekstrak air dibandingkan
ekstrak etanol13. Flavonoid bekerja dengan
merusak permeabilitas dinding sel. Flavonoid
juga mampu menghambat motilitas bakteri dan
bersifat bakteriostatik dengan menginaktivasi
sistem enzim bakteri. Senyawa alkaloid dan
tannin juga berperan seperti flavonoid dengan
merusak integritas membran sel sehingga dapat
mengganggu proses kehidupan bakteri10,17,18.
Selain itu saponin juga dapat menyebabkan
rusaknya membran sitoplasma sehingga sifat
permeabilitas membrane sel menjadi berkurang
dan menyebabkan transport zat ke dalam dan ke
luar sel menjadi tidak terkontrol10.
Uji Kesetaraan Ekstrak Air terhadap
Antibiotik Siproflokasin
Berdasarkan uji regresi linier dengan
persamaan kesetaraan (Y = 18,336 + 0,066 (X))
didapatkan bahwa Konsentrsi Hambat
Minimum didapatkan pada konsentrasi 0,125
gr/ml dengan respon hambat pertumbuhan kuat
(17,417 mm) dan setara dengan 1,19 x 10-18
gr/ml antibiotik siprofloksasin. Hal ini
menunjukkan bahwa antibiotik siprofloksasin
masih lebih efektif dibandingkan dengan
ekstrak air daun Mali-mali. Menurut penelitian
sebelumnya tentang Pola Kepekaan
Pseudomonas aeruginosa terhadap Antibiotik,
tingkat kepekaan yang tinggi hanya dimiliki
beberapa antibiotik seperti imipenem,
amikasin, norfloksasin, sefoperazon dan
siprofloksasin, sedangkan resistensi terlihat
pada antibiotik ampisilin, amoksisilin
klavulanat, seftizoksim, meropenem,
seftriakson, levofloksasin, sefotaksim,
gentamisin dan sefepim8,16. Hal ini
menunjukkan bahwa saat ini cukup sulit
menemukan antibakteri yang peka terhadap
bakteri Pseudomonas aeruginosa karena
adanya hambatan permeabilitas oleh membran
luar lipopolisakarida secara alami dan adanya
faktor resistensi (R-factors dan RTF) dalam
plasmid yang dapat ditransfer secara transduksi
dan konjugasi. Selain itu penelitian lain juga
menyatakan bahwa saat ini resistensi terhadap
Pseudomonas aeruginosa sudah mulai meluas
di Indonesia akibat pemakaian antibiotik yang
meluas dan adanya penggunaan yang tidak
berdsarkan indikasi7.
5. Kesimpulan
Ekstrak air memiliki aktivitas antibakteri yang
lebih baik dibandingkan ekstrak etanol karena
pelarutnya merupakan pelarut yang paling
efektif dalam menarik senyawa antibakteri
polar maupun semi-polar dibandingkan dengan
pelarut etanol, namun tidak lebih efektif bila
dibandingkan dengan Siprofloksasin dalam
menghambat pertumbuhan bakteri
Pseudomonas aeruginosa dengan rasio 1:0,952
x 10-17.
Ucapan Terima Kasih
Penulis mengucapkan terima kasih kepada
semua pihak yang telah membantu dalam
proses penelitian hingga terbitnya artikel ini,
terutama kepada dosen pembimbing Prof. Dr.
dr. HMT. Kamaluddin, M.Sc., SpFK, dr.
Theodorus, M.Med.Sc, dr. Ella Amalia, M.Kes,
dr. Rachmat Hidayat, M.Sc, dan Dra. Lusia
Hayati, M.Sc serta kepada setiap pihak yang
telah berperan selama proses penelitian
berlangsung.
Daftar Acuan
1. Isselbacher, J. K., Eugene, B., Jean, D. W.,
Joseph, B. M., Anthony, S. F., Kasper, L.
D. 2000. Harrison: Prinsip-prinsip Ilmu
Penyakit Dalam, Edisi 13, Vol. 4.
TerjemahanOleh: Hartono, Andry. EGC,
Jakarta, hal. 2000 2001.
2. Keputusan Menteri Kesehatan Republik
Indonesia Nomor 52 Tahun 2015 tentang
Rencana Strategis Kementerian Kesehatan
Tahun 2015-2019. Kementerian Kesehatan
RI, Jakarta, Hal. 13-14.
3. Nurmala., I. G. N. Virgiandhy., Andriani.,
Delima, F. L. 2015. Resistensi dan
Sensitivitas Bakteri terhadap Antibiotik di
RSU dr. Soedarso Pontianak Tahun 2011-
2013. eJKI. 3 (1).
4. Benzoen, A., Van, H. W., Hanekamp, J. C.
2001. Antibiotics: Use and Resistance
Mechanisms. Human Health and Antibiotic
Growth Promoters (AGPs), Geidelberg
Appeal Nederland.
5. Parker M. T. 1982. Antibiotic Resistance in
Phatogenic Bacteria. WHO Chronicle. 36
(5): 191-196.
6. Soedarmono, P. 1986. Kebijakan
Pemakaian Antibiotik dalam kaitannya
dengan terjadinya Resistensi Kuman.
Simposium Perkembangan Antibiotik pada
Penanggulangan Infeksi dan Resistensi
Kuman, Jakarta.
7. Mardiastuti, H. W., Anis, K., Ariyani, K.,
Ikaningsih., Retno, K. 2007. Emerging
Resistance Phatogen: Situasi Terkini di
Asia, Eropa, Amerika Serikat, Timur
Tengah dan Indonesia. Maj Kedokt Indon.
37 (79).
8. Lister, D. P., Daniel, J. W., Nancy, D. H.
2009. Antibacterial-resistant Pseudomonas
aeruginosa: Clinical Impact and Complex
Regulation of Chromosomally Encoded
Resistance Mechanisms. Clincal
Microbiology Reviews. 22 (4): 582-610.
9. Widodo, E., Muhammad, H. N.,
Muharlien., P. 2009. Inovasi Produksi dan
Pemanfaatan Antibiotik Alami
Terenkapsulasi sebagai Appetizer dan
Antimikroba dalam Pakan Unggas.
Departemen Pendidikan Nasional
Universitas Brawijaya, hal. 1.
10. Retnowati, Y., Nurhayati, B., Nona, W. P.
2011. Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus
aureus pada Media yang Diekspos dengan
 Infus Daun Sambiloto (Andrographis
paniculata). Universitas Negeri Gorontalo.
6 (2).
11. Yaqin, A. 2014. Potensi Antibakteri
Ekstrak Etanol, Fraksi Etanol-Air dan
Fraksi N-Heksana Ekstrak Etanol Daun
Anggur (Vitis vinifera L.) terhadap
Staphylococcus aureus dan Pseudomonas
aeruginosa Multiresisten. Fakultas
Farmasi UMS Surakarta.
12. Ramesh, D., Dhanya, R., Prashith, K. T. R.,
Onkarappa, R., Vinayaka, K. S.,
Raghavendra, H. L. 2015. Antifungal and
Radical Scavenging Activity of Leaf and
Bark of Leea indica (Burm. f.) Merr.
Journal of Chemical and Pharmaceutical
Research. 7 (1): 105-110.
13. Reddy, S. N., Suerialoasan, N., Saravana,
K. S., Norhanom, A. W., Kae, S. S. 2012.
Phenolic Content, Antioxidant Effect and
Cytotoxic Activity of Leea indica Leaves.
BMC Complementary and Alternative
Medicine. 12 (128).
14. Volk, W. A., Wheller, M. F. 1993.
Mikrobiologi Dasar. TerjemahanOleh:
Soenarto Adisoemarto. Erlangga, Jakarta,
hal. 137-138.
15. Mishra, G., Ratan, L. K., Pradeep, S.,
Mohd, A. T. 2016. Ethnobotany and
Phytofarmacology of Leea indica: an
Overview. Journal of Coastal Life
Medicine. 4 (1): 69-72.
16. Hilda. 2014. Pola Kepekaan Pseudomonas
aeruginosa terhadap Antibiotik di
Laboratorium Mikrobiologi Klinik RS dr.
Moh. Hoesin Palembang Juli 2012-Juni
2013. Skripsi Sarjana Kedokteran Fakultas
Kedokteran Universitas Sriwijaya yang
tidak dipublikasikan.
17. Mirzoeva, O. K., Grishanin, R. N., Calder,
P. C. 1997. Microbiol Res: Antimicrobial
Action of Propolis and some of Its
Components: the Effect on Growth,
Membrane Potential, and Motility of
Bacteria. 152:239-46.
18. Sabir, A. 2008. In Vitro Antibacterial
Activity of Flavonoids Trigona Sp Propolis
Againts Streptococcus.