Pendahuluan
† Uji toksisitas umumnya bertujuan untuk menilai
Metode Pengujian
Toksisitas
I M A Gelgel Wirasuta
Pendahuluan
† Uji toksisitas adalah suatu uji untuk
menentukan:
„ potensial suatu senyawa sebagai racun,
„ mengenali kondisi biologis/lingkungan
munculnya efek toksik
„ dan mengkarakterisasi aksi/efek
Perkembangan kategori uji
toksisitas
† Miningkatnya penelitian sumber bahan
baru untuk makanan tambahan, obat,
pestisida, dll → memerlukan
pengujian toksisitas yang efektif
† Faktor lain: prosfektif nilai ekonomi dari
bahan uji.
resiko yang mungkin ditimbulkan dari suatu zat
kimia „toksikan“
† uji toksisitas pada dasarnya bertujuan untuk
menekan resiko bahaya yang ditimbulkan bagi
manusia,
„ Sehingga umumnya uji toksisitas dilakukan pada
binatang, hewan bersel tunggal, atau sel kultur,
„ Hambatan etik, tidak memungkinkan langsung
melakukan uji toksisitas pada manusia
„ Perkembangan ilmu „QSAR: quantitative structure
activity relationships“ tidak cukup untuk
memprediksi potensi resiko bahaya suatu zat kimia
Asas uji biologi bagi toksisitas
† Zat kimia harus kontak dengan target
sel/jaringan biologi untuk menimbulkan efek
† Terdapat kisaran daerah antara „NOEL no
observed effect level “ dgn konsentrasi scr
signifikan memberi efek atas segala sistem
biologi
† Sel-sel biologi dlm berbagai macam spesies
memiliki fungsi serupa dan juga jalur metabolik
yg serupa, pada umumnya dgn cara serupa
akan dipengaruhi oleh zat kimia
† Perubahan kecil yg terjadi pada struktur suatu
zat kimia mungkin sangat mempengaruhi aksi
biologi yang ditimbulkan
Summary of tests for Toxicity
1. Sifat kimia fisika
„ Pertanyaan tentang substansi: sintesis, semisintesis, atau
limbah kimia pada proses produksi
2. Exposure dan „enviromental fate“
„ Telaah degradasi?
„ Degradasi di dalam tanah?
„ Mobilitas dan disposisinya di tanah, air, dan udara
Akumulasi di tanaman, biota aquatik, dll
„
3. Uji invivo
Toksisitas Akut (LD50 /LC50, Iritasi mata-kulit, sensitivitas pada
†
kulit
† Subkronik (Chronic feeding, teratogen, reproduksi)
† Tes spesial (neurotoxicity, potensiasi, metabolisme,
farmakodinamik, sikap-tingkah-laku)
4. Uji invitro
† Mutagenesis „prokariot & eukaryot“
† Penyimpangan kromosom
5. Efek terhadap hewan liar
† Binatang uji yang terseleksi (uji akut, subkronik, akkumulasi,
reproduksi)
1
Rute administrasi Sifat kimia fisika
Informasi yang diperoleh dpt digunakan untuk
† Oral
† Perbandingan struktur akvifitas terhadap
† Dermal senyawa toksikan dengan inti-struktur yang
† Inhalasi sama
† Sebagai target dlm mengidentifikasi gejala
† Injeksi
keracunan yang akan timbul
† Dalam menetapkan stabilitas zat aktif
† Dalam penetapan sifat fisiko kimia „konstanta
distribusi oktanol-air

Uji invivo Uji invivo

† Toksisitas akut: menyangkut
pemberian zat kimia uji secara tunggal
„ Penentuan LD50 (uji 24 jam) yang masih
hidup diikuti selama 7 hari
‡ Dua spesies (biasanya pada mincit dan tikus)
‡ Dua jalur pemberian
„ Efek topikal pada kulit kelinci atau irritasi
mata (bila jalur penggunaan dimaksud
topikal; dieveluasi selama 24 jam dan pada
7 hari)
† Uji Toksisitas Subkronik: pemberian zat kimia uji
secara berganda (dosis harian) → „NOEL“
„ Durasi 3 bulan Dua spesies uji (biasa tikus dan anjing)
„ Jalur pemberian menurut jalur pemberian dimaksud
„ Evaluasi:
‡ Seluruh hewan ditimbang seminggu sekali
‡ Pemeriksaan badan lengkap seminggu sekali
‡ Uji kimia darah, analisis air kencing, uji hematologi, dan
uji fungsi dikerjakan atas seluruh hewan yang sakit
„ Seluruh hewan dapat mengalami bedah mayat lengkap
yang menyangkut histologi seluruh organ

Uji invivo
† Uji toksisitas kronis: zat uji diberikan selama
Uji invivo
sebagian besar masa hidup hewan uji:
„ Durasi 2 - 7 th bergantung pada spesies
„ Spesies dipilih dari hasil uji subkronis sebelumnya, studi † Uji toksisitas kronik:
farmakodinamik atas beberapa spesies hewan, mungkin
dapat juga pada manusia dengan dosis tunggal yang „ Uji karsinogenitas
memungkinkan sebagai uji coba, jika tidak digunakan
dua spesies „ Toksisitas reproduksi: menentukan efek
„ Minimum dua peringkat dosis
„ Jalur pemberian jalur penggunaan dimaksud
atas kemampuan reproduksi hewan uji
„ Evaluasi: „ dan teratogen „uji toksisitas untuk
‡ Seluruh hewan ditimbang seminggu sekali
‡ Pemeriksaan badan lengkap seminggu sekali
menentukan efek atas janin (fetus) pada
‡ Uji kimia darah, analisis air kencins, pemeriksaan hewan bunting
hematologi dan uji fungsi atas seluruh hewan pada
interval 3 sampai 6 bulan dan atas seluruh hewan yang
sakit atau abnormal
„ Seluruh hewan dapat mengalami bedah mayat lengkap
yang menyangkut histologi dari seluruh organ

2
 Lima pedoman uji toksisitas (Weil, 1972)
Uji toksisitas khusus † Bila dianggap praktis dan mungkin sedapat mungkin
menggunakan satu atau lebih spesies yg secara biologis
† Uji potensi menentukan potensiasi zat uji memperlakukan suatu bahan yg secara kualitatif semirip
mungkin dengan manusia
bila dicampur dengan zat lain † Bila mudah dikerjakan, gunakan beberapa tingkatan
dosis, dengan alasan „aksi/efek pada manusia & hewan
† Uji teratogenik berkaitan dengan dosis
Efek yg ditimbulkan pada tingkat dosis yang lebih tinggi
† Uji reproduksi †
bermanfaat untuk melukiskan kerja mekanisme aksi,
tetapi untuk suatu bahan dan efek berbahaya, ada tingkat
† Uji mutagenik dosis untuk manusia atau hewan di bawah dimana efek
berbahaya ini tidak akan muncul
† Uji tumorgenisitas & karsinogenisitas † Uji statistika untk signifikansi itu sahih hanya pada satuan
eksperimental yang secara matematika telah dirambang
† Uji irritasi/sensitivitas pada kulit & mata di antara dosis dan kelompok kontrol bersangkutan
† Uji prilaku † Efek yg diperoleh melalui suati jalur pemberian kepada
hewan uji tidak „a preori“ dapat diterapkan pada efek
melalui jalur pemberian lain pada manusia. Jalur yg
dipilih pada mana eksposisi akan terjadi