EFEKTIVITAS KOMBINASI EKSTRAK DAUN KATUK DAN DAUN

KELOR TERHADAP KADAR HEMATOKRIT :

Studi Eksperimental Tikus Betina Galur Wistar

Usulan Penelitian untuk Skripsi

Untuk memenuhi sebagian persyaratan
mencapai gelar Sarjana Kedokteran
HALAMAN JUDUL

Oleh :
Rahma Maharsi
30101407294

FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS ISLAM SULTAN AGUNG
SEMARANG
2017
 LEMBAR PENGESAHAN

EFEKTIVITAS KOMBINASI EKSTRAK DAUN KATUK DAN DAUN

KELOR TERHADAP KADAR HEMATOKRIT :
Studi Eksperimental Tikus Betina Galur Wistar

Diajukan oleh
Rahma Maharsi
30101407294

HALAMAN PENGESAHAN
Telah disetujui oleh :

Pembimbing I

Dr. Hj. Atina Hussaana, M.Si.Apt Tanggal : ................................

Pembimbing II

dr. Ulfah Dian Indrayani, M.Sc. Tanggal : ..................................

ii
 DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL................................................................................................ i

LEMBAR PENGESAHAN .................................................................................... ii

HALAMAN PENGESAHAN ................................................................................. ii

DAFTAR ISI .......................................................................................................... iii

DAFTAR GAMBAR ...............................................................................................v

DAFTAR TABEL .................................................................................................. vi

DAFTAR SINGKATAN ...................................................................................... vii

BAB I ....................................................................................................................1

PENDAHULUAN ...................................................................................................1

1. Latar Belakang ........................................................................................ 1

2. Rumusan Masalah ................................................................................... 4

3. Tujuan Penelitian .................................................................................... 4

1.3.1. Umum ............................................................................................. 4

1.3.2. Khusus............................................................................................ 4
4. Manfaat Penelitian .................................................................................. 4

BAB II ....................................................................................................................6

TINJAUAN PUSTAKA .........................................................................................6

2.1. Hematokrit ............................................................................................... 6

2.2. Daun Katuk dan Daun Kelor ............................................................... 21

2.2.1. Daun Katuk ................................................................................. 21

2.2.2. Daun Kelor .................................................................................. 24
2.3. Pengaruh Daun Katuk dan Daun Kelor terhadap Hematokrit ........ 26

2.4. Kerangka Teori ..................................................................................... 29

iii
 2.5. Kerangka Konsep .................................................................................. 30

2.6. Hipotesis ................................................................................................. 30

BAB III ..................................................................................................................31

METODOLOGI PENELITIAN .........................................................................31

3.1 Jenis Penelitian dan Rancangan Penelitian ........................................ 31

3.2 Variabel dan Definisi Operasional....................................................... 31

3.3 Definisi Operasional .............................................................................. 31

3.3.1 Ekstrak kombinasi daun katuk dan daun kelor....................... 31

3.3.2 Kadar hematokrit ....................................................................... 32
3.4 Subjek Uji .............................................................................................. 32

3.5 Alat dan Bahan Penelitian .................................................................... 32

3.6 Cara Penelitian ...................................................................................... 33

3.6.1. Pembuatan ekstrak ..................................................................... 33

3.6.2. Adaptasi tikus dan pengukuran kadar hematokrit sebelum
perlakuan ..................................................................................... 33
3.6.3. Pemberian pakan defisiensi Fe dan pretest .............................. 34
3.6.4. Pemberian perlakuan pada tikus............................................... 34
3.6.5. Pengukuran kadar hematokrit setelah perlakuan ................... 35
3.7 Alur Penelitian ....................................................................................... 36

3.8 Tempat dan Waktu ............................................................................... 37

3.9 Analisis Hasil ......................................................................................... 37

DAFTAR PUSTAKA ...........................................................................................38

iv
 DAFTAR GAMBAR

Gambar 2.1. Komposisi Darah (Betts et al., 2017) ................................................ 7

Gambar 2.2. Mekanisme eritropoietin merangsang eritropoiesis ......................... 15

Gambar 2.3. Eritropoesis dan perombakan Hb (Betts et al., 2017) ...................... 16

Gambar 2.4. Struktur hemoglobin ........................................................................ 18

Gambar 2.5. Mekanisme sintesis hemoglobin di dalam eritrosit yang sedang

berkembang (Hoffbrand & Moss, 2016).......................................... 20

Gambar 2.6. Tanaman katuk, bunga, dan buahnya (Bahar, 2011) ....................... 21

Gambar 2.7. Tanaman Kelor (Aminah, Ramdhan, & Yanis, 2015) ..................... 24

v
 DAFTAR TABEL

Tabel 2.1. Rentang kadar hematokrit normal pada berbagai usia, termasuk
wanita dan pria dewasa (Fischbach & Dunning, 2015) ........................8
Tabel 2.2. Kandungan lain dari tanaman kelor ......................................................26

vi
 DAFTAR SINGKATAN

Ht : Hematokrit
Hb : Hemoglobin

vii
 BAB I

PENDAHULUAN

1. Latar Belakang

Anemia pada ibu hamil (anemia gestasional) ialah anemia dengan kadar

Hb kurang dari sama dengan 11 g/dl pada Trimester I dan III, atau Hb kurang

dari sama dengan 10,5 g/dl (Rigby, 2016). Salah satu penatalaksanaan yang

diberikan saat ini pada anemia tersebut ialah pemberian tablet Fe (Hidayah &

Anasari, 2012). Namun, tablet Fe pada beberapa orang menyebabkan nyeri

epigastrium, kolik, mual, muntah, konstipasi, dan diare (Susiloningtyas, 2012).

Penyerapan Fe secara efektif dalam tubuh memerlukan protein dan vitamin C

(Mahan & Raymond, 2017). Peneliti mencoba salah satu suplementasi alami

kombinasi yang memiliki efek sinergis sebagai antianemia yaitu ekstrak

kombinasi daun katuk (Sauropus androgynus) dan daun kelor (Moringa

oleifera). Penelitian sebelumnya, ekstrak etanol daun katuk dengan dosis 297,5

mg/hari/ekor dapat mempertahankan kadar eritrosit dan hematokrit dalam level

normal pada tikus betina bunting (Bahar, 2011). Sedangkan ekstrak aqueous

daun kelor 400 mg/kg dapat meningkatkan kadar hematokrit tikus jantan secara

signifikan (Adedapo, Mogbojuri, & Emikpe, 2009). Diharapkan dengan lebih

lengkapnya kandungan gizi, adanya senyawa laktagogum yang lebih tinggi,

serta senyawa flavonoid pada daun kelor, ditambah dengan lebih tingginya

kadar vitamin C, adanya senyawa laktagogum dan flavonoid daun katuk dapat

meningkatkan efektivitas peran sebagai antianemia.

1
 2

Angka anemia gestasional di Indonesia juga cukup tinggi yaitu 37,1%

dengan jumlah di perkotaan berkisar 36,4% dan di pedesaan berkisar 37,8%

(Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan, 2013). Jika anemia

gestasional tidak ditangani dengan baik, dapat menyebabkan anak menjadi

keterbelakangan mental (Chang, Zeng, Brouwer, Kok, & Yan, 2013). Anemia

gestasional juga menyebabkan palpitasi, takikardi, napas pendek, cardiac

stress, preeklamsi, sepsis pada ibu hamil, sedangkan pada bayi dapat terjadi

kelahiran preterm, berat bayi baru lahir rendah, dan meningkatkan resiko

mortalitas (Sharma & Shankar, 2010).

Tanaman katuk yang dimanfaatkan saat ini ialah daunnya yang

dijadikan sediaan fitofarmaka yang berguna untuk melancarkan dan

meningkatkan jumlah produksi ASI (laktagogum) karena kandungan fitosterol

daun katuk sebanyak 466 mg/100 g (Subekti, 2007). Dugaan efek antianemia

dari daun katuk per 100 g diperankan oleh Fe 2,7 mg, protein 5,8 g, dan vitamin

C 239 mg (Magdalena, Yuwono, Wulan, & Dharmayanti, 2015). Daun katuk

juga mengandung kalori, protein, lemak, karbohidrat, kalsium, fosfor, vitamin

A, vitamin B1, vitamin C, air, fenol, quercetin, kaempferol, antosianin, asam

klorogenat, asam kafeat, asam ferulat dan senyawa antioksidan yaitu flavonoid,

tannin, dan saponin (Magdalena et al., 2015; Santoso, 2013).

Penelitian mengenai daun katuk ialah 15 tikus betina bunting yang

dibagi menjadi 5 kelompok yaitu kelompok kontrol, kelompok perlakuan fraksi

hexan, ekstrak etanol, fraksi etil asetat, dan fraksi air yang diinduksi selama 21

hari. Hasil yang didapatkan tidak ada perbedaan kadar eritrosit dan hematokrit
 3

pada semua kelompok. Namun terjadi penurunan kadar hemoglobin yang

signifikan pada kelompok fraksi hexan (11,87±0,12 g%) dan fraksi etil asetat

(10,86±1,2 g%) yang masih pada level normal (Bahar, 2011).

Tanaman kelor juga cukup banyak dimanfaatkan sebagai laktagogum

karena senyawa turunan fitosterol yaitu sitosterol 1,15 g dan stigmasterol 1,52

g per 100 g (Syahid & Kristina, 2014). Dugaan efek antianemia daun kelor per

100 g ialah Fe 7 mg dan vitamin C 220 mg (Hadju & Bahar, 2014). Daun kelor

mengandung kalori, protein, lemak, karbohidrat, kalsium, fosfor, magnesium,

seng, vitamin A, vitamin B1, vitamin B2, vitamin B3, vitamin C, dan air (Hadju

& Bahar, 2014). Daun kelor juga mengandung senyawa polifenol atau

flavonoid yaitu asam klorogenat, kaempferol glycosides, quercetin-3-

glycoside, rutin (Hardiyanti, 2015; Ndong, Uehara, & Katsumata, S I, Suzuki,

2007).

Penelitian mengenai daun kelor, 54 tikus jantan dibagi menjadi 4

kelompok yaitu kelompok kontrol air terdestilasi dan tiga kelompok perlakuan

ekstrak aqueous daun kelor secara peroral selama 21 hari. Pada kelompok 400

mg/kg terjadi peningkatan hematokrit yang signifikan (45,3±1,6%), namun

tidak terjadi perubahan signifikan hemoglobin (14,0±1,7 g%) dan jumlah

eritrosit (7,4±0,1 juta/mm3). Kelompok 800 mg/kg mengalami penurunan

hematokrit, hemoglobin, dan hitung eritrosit yang signifikan. Sedangkan pada

dosis 1600 mg/kg, hematokrit menurun signifikan tapi diikuti dengan

perubahan hemoglobin dan jumlah eritrosit yang tidak signifikan (Adedapo,

Mogbojuri, & Emikpe, 2009).

 4

Efektivitas daun katuk, daun kelor, atau kombinasi keduanya terhadap

peningkatan hematokrit diharapkan dapat memberi efek sinergis yang lebih

baik untuk meningkatkan kadar hematokrit.

2. Rumusan Masalah

Apakah pemberian kombinasi ekstrak daun katuk dan daun kelor efektif

meningkatkan kadar hematokrit tikus betina galur wistar?

3. Tujuan Penelitian

1.3.1. Umum

Mengetahui efektivitas pemberian kombinasi ekstrak daun katuk dan

daun kelor terhadap kadar hematokrit tikus betina galur wistar.

1.3.2. Khusus

1.3.2.1. Mengetahui kadar hematokrit pada kelompok yang diberikan

ekstrak daun katuk, ekstrak daun kelor, dan kombinasi ekstrak

daun katuk dan daun kelor.

1.3.2.2. Mengetahui perbedaan kadar hematokrit pada kelompok yang

tidak diberikan kombinasi ekstrak dengan kelompok yang

diberikan ekstrak kombinasi.

4. Manfaat Penelitian

1.4.1. Manfaat Teoritis

Penelitian ini dapat digunakan sebagai acuan penelitian

mengenai efektivitas penggunaan kombinasi ekstrak daun katuk dan

daun kelor terhadap peningkatan kadar hematokrit.

1.4.2. Manfaat Praktis

 5

Penelitian ini dapat memberikan pengetahuan masyarakat

mengenai kegunaan kombinasi ekstrak daun katuk dan daun kelor

sebagai salah satu alternatif terapi antianemia.

 BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1. Hematokrit

2.1.1. Definisi

Hematokrit (Ht/ Packed Cell Volume = PCV) ialah persentase

eritrosit terhadap volume total darah (100 ml) (Kemenkes, 2011). Kadar

hematokrit normal pada laki-laki ialah 40-50%, sedangkan pada

perempuan normalnya 35-45%. Komponen penyusun darah secara

keseluruhan terdiri atas plasma darah 46-63% dan sel darah 37-54%.

Plasma darah terdiri dari air sebanyak 92%, protein plasma sebanyak

7%, bahan terlarut lainnya 1%, dan protein pembentuk hormon dan

enzim kurang dari 1%. Sedangkan sel darah mencakup eritrosit 99%,

sedangkan leukosit dan platelet masing-masing berkisar kurang dari 1%

dari total sel darah. Jika dilakukan pemerikasaan hematokrit, tampak 3

bagian yang berbeda warna dan porsi, yaitu bagian hematokrit yang

berwarna merah sebanyak 37-47% (rerata 41%) pada perempuan, 42-

52% (rerata 47%) pada laki-laki, buffy coat yang berisi leukosit dan

trombosit dengan warna pucat, dan plasma darah sebesar 59% pada

perempuan, 53% pada laki-laki (Betts et al., 2017).

6
 7

Plasma : air, protein,

nutrien, hormon, dll
Buffy coat : leukosit,
trombosit
Hematokrit : eritrosit

Darah normal Anemia : Polisitemia :

wanita 37-47% Hematokrit Hematokrit
pria 42-52% rendah tinggi

Gambar 2.1. Komposisi Darah (Betts et al., 2017)

2.1.2. Faktor yang Mempengaruhi Kadar Hematokrit

Hematokrit menentukan kekentalan (viskositas) darah.

Hematokrit yang menurun berarti kekentalan darah pun menurun,

begitu pula sebaliknya. Tinggi rendahnya hematokrit ditentukan oleh

faktor klinis dan penyakit khusus.

Faktor klinis yang mempengaruhi hasil kadar hematokrit terdiri

atas 8 hal. Pertama, usia dan jenis kelamin yang berbeda maka kadar

hematokrit normalnya pun akan berbeda. Pada bayi baru lahir

didominasi oleh eritrosit makrositer sehingga kadar hematokritnya

tinggi. Sedangkan pada usia lebih dari 60 tahun, hematokrit laki-laki

dan perempuan sama-sama lebih rendah dari usia sebelumnya. Berikut

kadar hematokrit normal berdasarkan usia dan jenis kelamin (Fischbach

& Dunning, 2015).

 8

Tabel 2.1. Rentang kadar hematokrit normal pada berbagai usia, termasuk
wanita dan pria dewasa (Fischbach & Dunning, 2015)
Usia Kadar hematokrit normal

0-2 minggu 44-64%

2-8 minggu 39-59%

2-6 bulan 35-49%

6 bulan – 1 tahun 29-43%

1-6 tahun 30-40%

6-16 tahun 32-42%

16-18 tahun 34-44%

Dewasa wanita 36-48%

Dewasa pria 42-52%

Kedua, fisiologis kehamilan menyebabkan sedikit turunnya

hematokrit karena hemodilusi kronis (Pagana & Pagana, 2014). Ketiga,

ukuran eritrosit semakin besar ukuran eritrosit, makin banyak pula

volume darah yang diisi oleh eritrosit sehingga hematokrit meningkat

(Pagana & Pagana, 2014). Keempat, bentuk eritrosit yang bermacam-

macam (poikilositosis) juga menyebabkan plasma terjebak (trapped

plasma) yang berdampak pada tingginya hematokrit (Greer et al.,

2014). Kelima, pada pasien dehidrasi total volume darah menyusut dan

eritrosit menempati proporsi yang lebih besar sehingga kadar

hematokrit meningkat. Begitu pula sebaliknya pada keadaan

overhidrasi, maka hematokritnya menurun. Keenam, jika seseorang

 9

tinggal atau berada di ketinggian menyebabkan tingginya kadar

hematokrit karena ketersediaan oksigen di luar tubuh semakin sedikit

sehingga tubuh berupaya mengoptimalkan oksigen yang sedikit

tersebut. Ketujuh, obat-obatan seperti kloramfenikol dan penisilin dapat

menurunkan kadar hematokrit. Kedelapan, signifikan tingginya kadar

leukosit sehingga hematokrit terkesan menurun (Pagana & Pagana,

2014).

Beberapa penyakit yang memiliki manifestasi pada

meningkatnya kadar hematokrit ialah eritrositosis, kelainan kongenital

jantung, polisitemia vera, dehidrasi berat (pada diare berat, luka bakar),

dan penyakit paru obstruktif kronis (PPOK) berat. Eritrositosis ialah

meningkatnya jumlah eritrosit akibat kondisi penyesuaian fisiologis

tubuh terhadap lingkungan sekitar atau akibat suatu penyakit. Kelainan

kongenital jantung yang dimaksud ialah penyakit jantung sianotik

menyebabkan rendahnya tekanan oksigen rendah kronis. Oleh karena

itu tubuh mengupayakan peningkatan eritrosit untuk memenuhi

kebutuhan oksigen tubuh, sehingga hematokrit meningkat. Polisitemia

vera merupakan akibat kelainan sumsum tulang yang memproduksi

eritrosit sangat berlebih sehingga hematokrit meningkat. Dehidrasi

berat pada diare berat dan luka bakar biasanya disertai dengan

hilangnya cairan ekstraselular, menurunnya volume total darah, namun

jumlah eritrosit tetap sama sehingga persentase eritrosit terhadap

volume total darah meningkat, dampaknya hematokrit meningkat.

 10

PPOK berat menyebabkan status hipoksia kronis pada seseorang,

sehingga menjadi suatu stimulus untuk memperbanyak eritrosit sebagai

pengangkut oksigen, dampakanya hematokrit meningkat (Pagana &

Pagana, 2014).

Beberapa penyakit yang memiliki manifestasi pada menurunnya

kadar hematokrit ialah anemia, hemoglobinopati, sirosis, anemia

hemolitik, perdarahan, defisiensi nutrisi, kegagalan sumsum tulang,

katup prostetik, gangguan ginjal, rheumatoid, limfoma, multiple

myeloma, leukemia, dan penyakit Hodgkin. Anemia pada umunya ialah

keadaan menurunnya jumlah eritrosit, karena hematokrit merupakan

refleksi jumlah eritrosit secara tidak langsung, maka hematokrit pun

menurun. Hemoglobinopati ialah pasien dengan kelainan hemoglobin

atau diskrasia darah akan memiliki jumlah eritrosit eritrosit yang rendah

untuk bertahan, sehingga hematokrit pun menurun. Sirosis ialah

kelebihan cairan kronis yang menyebabkan eritrosit mengalami dilusi

(dilemahkan), sehingga persentase eritrosit terhadap total volume darah

menurun, hematokrit pun rendah. Anemia hemolitik, contohnya pada

kasus eritroblastosis fetalis, hemoglobinopati, dan anemia hemolitik

yang diinduksi obat, hemoglobinuria nokturnal paroksismal terjadi

penurunan jumlah eritrosit yang bertahan pada anemia hemolitik,

sehingga menyebabkan hematokrit menurun. Perdarahan, terutama

pada perdarahan aktif jumlah eritrosit makin berkurang sehingga

hematokrit menurun. Penurunan hematokrit ini berlangsung beberapa

 11

jam. Defisiensi nutrisi yang dimaksud ialah jika kekurangan vitamin

dan mineral contohnya zat besi, yang menyebabkan jumlah dan ukuran

eritrosit berkurang, sehingga kadar hematokrit menurun. Disfungsi

sumsum tulang yang disertai oleh penurunan produksi eritrosit sehingga

kadar hematokrit turun. Katup prostetik menyebabkan trauma mekanik

terhadap eritrosit mengakibatkan jumlah eritrosit berkurang sehingga

kadar hematokrit rendah. Gangguan ginjal yang disertai dengan

penurunan eritropoietin menyebabkan rangsangan untuk memproduksi

eritrosit berkurang, menyebabkan jumlah eritrosit berkurang dan

hematokrit pun menurun. Kehamilan, normalnya terjadi peningkatan

volume darah karena overhidrasi kronik. Jika disertai malnutrisi

relative, jumlah eritrosit dan hematokrit menurun. Rheumatoid /

gangguan vascular-kolagen contohnya rheumatoid arthtritis dan lupus

merupakan penyakit kronik terkait menurunnya produksi eritrosit

sehingga hematokrit pun rendah. Penyakit Hodgkin ialah kanker darah

yang sering bersamaan dengan disfungsi sumsum tulang dalam

pembentukan eritrosit. Hal tersebut menyebabkan jumlah eritrosit

menurun dan hematokrit pun menurun (Pagana & Pagana, 2014).

Jika pengambilan darah hingga pembacaan hematokrit sudah

benar, berarti hematokrit yang lebih rendah atau lebih tinggi dari normal

memiliki masalah pada volume plasma dan jumlah eritrosit (Betts et al.,

2017). Volume plasma normal pada laki-laki ialah 5-6 liter, sedangkan

pada perempuan ialah 4-5 liter. Plasma darah normal mengandung air;
 12

protein plasma berupa albumin 54-60%, globulin 35-38%, dan

fibrinogen 4-7%; protein pembentuk enzim dan hormone; serta bahan

terlarut lainnya. Albumin yang dihasilkan oleh hepar berfungsi sebagai

transporter asam lemak dan hormone steroid dan berperan signifikan

dalam menjaga tekanan osmotic darah agar air dapat bertahan di

pembuluh darah. Globulin terbagi menjadi 3 yaitu globulin α, β, dan γ.

Globulin α dan β sama-sama dihasilkan di hepar dan berfungsi sebagai

alat pengangkut besi, lipid, dan vitamin larut lipid (vitamin A, D, E, dan

K), serta menjaga tekanan osmotic darah. Sedangkan globulin γ yang

sering disebut immunoglobulin berfungsi sebagai suatu kekebalan

tubuh yang dihasilkan oleh salah satu jenis leukosit yaitu sel plasma.

Fibrinogen dihasilkan oleh hepar yang berfungsi sebagai pembekuan

darah sehingga hemostasis tetap terjaga. Bahan terlarut lainnya

mencakup ion natrium, kalium, dan kalsium; oksigen, karbondioksida,

dan nitrogen terlarut; dan senyawa organic seperti vitamin, glukosa,

lipid, dan asam amino; serta sisa metabolit (Betts et al., 2017). Semakin

tinggi volume plasma, semakin cair sifat plasma tersebut, sehingga

dapat menurunkan nilai hematokrit, begitu pula sebaliknya.

Faktor yang juga mempengaruhi hematokrit ialah jumlah

eritrosit. Jumlah eritrosit normal pada laki-laki dewasa ialah 4,4-5,6 x

106 sel/mm3, sedangkan pada wanita dewasa ialah 3,8-5,0 x 106

sel/mm3. Eritrosit atau sel darah merah ialah sel dengan bentuk cakram

bikonkaf gepeng dengan diameter 7-8 µm (Betts et al., 2017). Bentuk

 13

bikonkaf eritrosit memungkinkan eritrosit untuk berubah bentuk saat

melalui kapiler yang diameternya kecil. Permukaan eritrosit yang luas

menyebabkan semakin banyak oksigen yang terikat oleh hemoglobin

yang berada di dalam eritrosit (Kemenkes, 2011). Oleh karena itu,

fungsi eritrosit selama beredar di pembuluh darah ialah mengangkut

oksigen di paru-paru yang masuk saat inhalasi menuju jaringan tubuh

dan mengangkut sekitar 24% CO2 yang dihasilkan oleh jaringan

kembali ke paru-paru untuk dikeluarkan atau exhalasi (Betts et al.,

2017). Jika ditemukan eritrosit di luar pembuluh darah menandakan

adanya gangguan pada pembuluh darah (Betts et al., 2017; Kemenkes,

2011). Eritrosit tidak memiliki inti sel dan organel, serta berwarna

merah pucat (Betts et al., 2017). Masa hidup eritrosit selama 120 hari.

Hari ke 120, eritrosit tua akan keluar dari vaskular dan mengalami

fagositosis pada lien, hepar, sumsum tulang (Kemenkes, 2011).

Mekanisme pembentukan eritrosit (eritropoiesis) diatur oleh

hormone eritropoietin. Hormon tersebut berasal dari polipeptida yang

terglikosilasi yang sekitar 90% dihasilkan oleh sel peritubular

interstitisial ginjal, sedangkan 10% dihasilkan oleh hepar. Pengeluaran

eritropoietin dirangsang oleh hipoksia yaitu kurangnya oksigen dalam

jaringan yang terjadi pada keadaan anemia akibat rendahnya kadar

oksigen di atmosfer, kerusakan fungsi jantung dan paru-paru, dan

gangguan sirkulasi pada ginjal. Hipoksia merangsang hypoxia

inducible factors (HIF-1α dan β) yang kemudian merangsang produksi

 14

eritropoietin, neovaskularisasi, pembentukan reseptor transferrin,

rendahnya sintesis hepcidin, dan tingginya absorbsi besi. Eritropoietin

mengaktivasi factor transkripsi GATA 2 yang berfungsi menginisiasi

diferensiasi sel pluripotent menjadi eritroid melalui stimulasi reseptor

eritropoietin. Faktor transkripsi tersebut merangsang factor transkripsi

GATA 1 dan FOG 1, yang berfungsi mengekspresikan gen spesifik

eritroid yaitu globin, hem bio-sintetik, dan protein membrane eritrosit,

mengekspresikan reseptor transferrin (CD71), serta mengekspresikan

gen antiapoptosis. Sel pluripotent dapat merangsang proliferasi,

diferensiasi dari BFUE akhir (Burst Forming Unit Erythroid) dan CFUE

(Colony Forming Unit Erythroid) yang memiliki reseptor eritropoietin,

sehingga dapat terbentuk hemoglobin. CFUE membentuk

pronormoblast. Sel pronormoblast memiliki ciri-ciri ukuran sel besar,

sitoplasma berwarna biru tua, nucleus dan nucleoli terletak di sentral,

dan kromatin menumpuk. Sel pronormoblast berlanjut menjadi sel

normoblast dengan ciri-ciri ukuran sel semakin kecil sejalan dengan

pembelahan yang terjadi, terdapat Hb sehingga sitoplasma sebagian

terpucat merah muda, masih terdapat RNA dan protein sintetik yang

mulai berkurang sehingga ada bagian sitoplasma yang terpucat biru

muda, masih memiliki nucleus DNA, dan kromatin lebih padat. Sel

pluripotent hingga sel normoblast normalnya berada pada sumsum

tulang. Sel normoblast berganti menjadi sel retikulosit selama di

sumsum tulang hingga mengalir di pembuluh darah selama 1 sampai 2

 15

hari. Sel retikulosit memiliki ciri-ciri masih adanya RNA ribosom di

sitoplasma namun tidak memiliki nucleus DNA. Retikulosit akan

menjadi sel eritrosit matur dengan ciri-ciri tidak adanya nucleus DNA

dan RNA sitoplasma sehingga sitoplasma berwarna merah muda

(Hoffbrand & Moss, 2016)

Sumsum tulang

Sel Punca; BFU-E awal; BFU-E akhir; CFU-E;

(Pro)normoblast

Retikulosit

Eritropoietin Eritrosit
bersirkulasi

Sel Peritubular
interstitisial dari
korteks luar
Pengiriman O2

Sensor O2
(HIFα dan β)
O2 atmosfer; Kurva disosiasi O2;
Fungsi Kardiopulmonal; Konsentrasi
Ginjal Hb; Sirkulasi Ginjal

Gambar 2.2. Mekanisme eritropoietin merangsang eritropoiesis

(Hoffbrand & Moss, 2016)
 16

6. Grup hem yang tidak dipakai, diolah

kembali untuk hemopoiesis, atau dikonversi 1.Hemopoiesis eritrosit;
menjadi bilirubin, lalu membentuk empedu di dimulai dari sumsum tulang.
hepar. Ion besi dapat juga ditransfer ke Lokasi hemopoietik.
ferritin sebagai cadangan di hepar.

Hepar

Bilirubin Ferritin
Sel Punca

Ion Fe + Eritroblas
BIliverdin
transferrin

5. Bagian hem Retikulosit

dipecah menjadi
Asam
biliverdin, beredar di
amino
darah. Ion besi globin dan
Grup Ion
berikatan dengan Besi komponen
hem sel
transferrin darah, 2. Retikulosit ke vascular,
beredar di darah. matang menjadi eritrosit,
beredar 120 hari.

Hb  3. Eritrosit tua dan rusak

asam difagosit makrofag di
amino sumsum tulang, hepar,
lien.

Lisosom

4. Bagian globin (protein) dari

hemoglobin dimetabolisme menjadi
asam amino, untuk resintesis protein.

Gambar 2.3. Eritropoesis dan perombakan Hb (Betts et al., 2017)

Mekanisme eritropoesis pada sumsum tulang terjadi selama 7

hari berdasarkan tahapan yang dilaluinya dibedakan menjadi 6 fase

yang berurutan yaitu, pertama hemocytoblast (precursor semua macam

sel darah), kedua terjadi sintesa Hb (fase prorubrisit), kemudian

 17

memasuki fase ketiga yaitu sintesa Hb meningkat dan inti sel menyusut

(fase rubrisit), lalu masuk ke fase keempat yaitu terjadi peningkatan

sintesa Hb dan disintegrasi inti sel (fase metarubrisit), dimana sintesa

Hb selama eritroblast sebanyak 65%, fase kelima yaitu masih terjadi

sintesa Hb sebanyak 35%, inti sel diabsorbsi namun masih memiliki

sisa organel (retikulosit), selanjutnya fase terakhir yaitu sudah tidak

terjadi sintesa Hb, sel sudah dalam bentuk dewasa, dan tidak memiliki

inti (eritrosit). Jika kebutuhan eritrosit meningkat, maka sel eritrosit

muda (retikulosit) akan dilepaskan ke vaskular, sehingga hitung

retikulosit pada vascular dapat menunjukkan laju kasar produksi

eritrosit. Jumlah retikulosit melebihi 2% menunjukkan kebutuhan

eritrosit yang meningkat atau tubuh menalami kekurangan eritrosit. Jika

terjadi gangguan eritropoesis maka pembentukan Hb juga terganggu,

maka penurunan kadar Hb menandakan penurunan eritrosit (Hoffbrand

& Moss, 2016; Kemenkes, 2011). Eritrosit normal memiliki volume 80-

96 fL (1 fL = 10-15 L) dan besarnya sama dengan inti limfosit kecil.

Factor yang mempengaruhi eritropoesis

Pada permukaan eritrosit dipenuhi oleh molekul hemoglobin.

Hemoglobin merupakan komponen pengangkut O2 dan CO2, yang juga

menentukan kadar Ht, karena sintesis Hb tergantung oleh

perkembangan eritrosit, dan semakin banyak eritrosit dapat

meningkatkan hematokrit. Hemoglobin normal pada orang yang

berumur lebih dari 3-6 bulan didominasi sekitar 96-98% oleh

 18

hemoglobin A (HbA), diikuti oleh HbF sebanyak 0,5-0,8% dan HbA2

sekitar 1,5-3,2%. Hb terdiri atas protein globin dan hem. Protein globin

memiliki 4 rantai polipeptida. Protein globin milik HbA mencakup

α2β2, protein globin dari HbF mengandung α2γ2, sedangkan protein

globin HbA2 memiliki α2δ2. Molekul hem terdiri dari ion Fe2+ dan

porfirin (pigmen merah). Setiap ion Fe2+ inilah yang dapat mengikat 1

molekul oksigen, sehingga 1 molekul hemoglobin dapat mengikat 4

molekul oksigen. Setiap eritrosit mengandung sekitar 300 juta molekul

hemoglobin, sehingga terdapat kurang lebih 1,2 milyar oksigen yang

dapat terikat oleh 1 eritrosit (Betts et al., 2017; Hoffbrand & Moss,

2016; Kemenkes, 2011). Atau dengan kata lain, 1,34 ml O2 diangkut

oleh 1 gram Hb, jadi kapasitas pengangkutan oksigen tergantung dari

jumlah Hb, bukan eritrosit.

Rantai 1 β Rantai 2 β

Rantai 1 α Rantai 2 α

Gambar 2.4. Struktur hemoglobin

(Betts et al., 2017; Hoffbrand & Moss, 2016)
 19

Hb yang mengangkut darah dengan kandungan oksigen tinggi

beredar di arteri dan berwarna merah terang yang disebut

oksihemoglobin, saat Hb sudah melepaskan oksigen membentuk

deoksihemoglobin, sedangkan saat Hb mengikat tinggi CO2 di vena

yang membentuk karboksihemoglobin, akan berwarna merah gelap

(Betts et al., 2017; Kemenkes, 2011). Sintesis Hb dilakukan pada

eritrosit yang sedang mengalami eritropoesis di 2 tempat yang berbeda,

yaitu pembentukan hem di mitokondria, dan pembentukan globin di

ribosom. Pembentukan hem diawali dengan reaksi glisin dan suksinil

KoA dengan bantuan enzim δ- amino laevulinic acid (ALA) sintase

yang juga dibarengi dengan proses eritropoesis dimana eritopoetin

merangsang vitamin B6 sebagai koenzimnya. Molekul akhir yang

dihasilkan ialah protoporfirin yang kemudian berikatan dengan Fe

membentuk Hem. Reaksi tersebut berjalan selama 4 kali untuk

membentuk 4 molekul hem, dimana tiap-tiap molekul tersebut

berikatan dengan 4 rantai polipeptida globin yang terbentuk pada

ribosom. Tetramer globin dengan masing-masing hem terbentuk di

dalam kantong sehingga molekul hemoglobin pun terbentuk

(Hoffbrand & Moss, 2016).

 20

Asam amino
Siklus transferin

Rantai α, β
Mitokondria

Gambar 2.5. Mekanisme sintesis hemoglobin di dalam eritrosit yang sedang

berkembang (Hoffbrand & Moss, 2016)

Kadar Hb normal pada laki-laki ialah 13-18 g/dl, sedangkan

pada perempuan ialah 12-16 g/dl. Jika kadar Hb kurang dari normal,

berarti menunjukkan proses fisiologis karena asupan cairan yang

meningkat ataupun anemia fisiologis kehamilan, atau mungkin proses

patologis pada hipertiroidisme, sirosis, dan perdarahan. Kesemua hal

tersebut akan bermanifestasi menjadi anemia. Namun seseorang akan

merasakan gejala anemia pada kadar Hb yang berbeda-beda karena

masing-masing tubuh memiliki kemampuan penyesuaian tubuh yang

berbeda-beda akibat perbedaan ketinggian tempat tinggal, kelaianan

pada paru-paru, dan kebiasaan olahraga. Namun jika Hb kurang dari 5

g/dl, hal ini dapat berdampak pada gagal jantung dan kematian.
 21

Penentuan anemia berdasarkan kadar Hb lebih baik dibanding dengan

jumlah eritrosit. Sedangkan peningkatan kadar Hb menunjukkan

adanya proses fisiologis yaitu penyesuaian tubuh terhadap rendahnya

kadar oksigen yang rendah di dataran tinggi, maupun reaksi patologis

yaitu hemokonsentrasi pada kasus polisitemia, penyakit gagal jantung

kongestif, dan penyakit paru kronis (Kemenkes, 2011).

2.2. Daun Katuk dan Daun Kelor

2.2.1. Daun Katuk

Katuk ialah salah satu tanaman yang selama ini telah

dimanfaatkan daunnya sebagai pelancar ASI. Katuk memiliki

taksonomi sebagai berikut (Santoso, 2013).

Kingdom : Plantae
Divisi : Spermatophyta
Kelas : Dicotyledoneae
Ordo : Graniales
Famili : Euphorbiaceae
Genus : Sauropus
Spesies : Sauropus androgynous L. Merr

Gambar 2.6. Tanaman katuk, bunga, dan buahnya (Bahar, 2011)

 22

Tanaman katuk dapat berkembang di daerah yang memiliki

cukup air dan teduh, pada dataran rendah hingga pegunungan. Tanaman

katuk sudah menyebar di Pulau Jawa, Sumatera, Kalimantan,

Kepulauan Sumba, dan Moluccas. Karakteristik tanaman katuk ialah

berbentuk semak setinggi 3 meter, warna batang muda ialah hijau dan

batang tua berwarna coklat. Pada batangnya terdapat alur dengan

permukaan cukup licin. Daun katuk tersusun selang-seling di tiap

tangkainya, sehingga daun tampak majemuk, sebenarnya katuk

merupakan daun tunggal berbentuk lonjong hingga bulat, berjumlah 11-

21 helai tiap cabangnya, dimana tiap helainya berukuran panjang 2,5

cm dengan lebar 1,25-3 cm, tangkainya pendek 2-4 mm. Daun yang

masih di pangkal cabang berbentuk bulat telur berukuran 2,5-4,5 cm x

1,5-2,5 cm. Sedangkan daun yang sudah berada di tengah dan ujung

tangkai berbentuk jorong dengan ukuran 4,3-8,5 cm x 2,2-3,1 cm.

Tanaman ini memiliki bunga berjumlah 1 atau 3 yang tumbuh diantara

dua daun. Bunga ini bersifat bunga sempurna dengan helai kelopak

bundar berjumlah 6, berwarna merah tua atau warna merah bintik

kuning, berukuran lebar 3-3,5 mm. Putiknya berukuran lebar dan tinggi

1,75 mm dan 0,75 mm, serta memiliki cabang dan tangkai dengan

warna merah. Tangkai bunga itu sendiri tingginya 6-7,5 mm. Ciri-ciri

dari bunga jantan dan betina hampir sama, persamaannya adalah

bentuknya seperti giwang dengan kelopak dan mahkota yang sama,

 23

warnanya merah kecoklatan, dan berjumlah 3 bunga pada tiap bagian.

Perbedaannya terletak pada beberapa hal sebagai berikut, pada bunga

jantan jarak antar bunganya dalam satu kelompok terletak berdekatan,

tebal, dan memiliki daging berwarna hijau kemerahan, jumlah benang

sari 6, warna serbuk sari putih kekuningan. Sedangkan bunga betina

memiliki helaian kelopak yang tipis dan tidak berdekatan, tidak mudah

lepas dari buah tempat menempelnya. Tanaman katuk berbunga setiap

tahun.

Kandungan daun katuk ialah Kandungan fitosterol daun katuk

sebanyak 466 mg/100 g yang berfungsi laktagogum (Subekti, 2007).

Daun katuk per 100 g terbukti mengandung kalori 59 kal, protein 5,8 g,

lemak 1 g, karbohidrat 11 g, kalsium 204 g, fosfor 83 g, besi 2,7 mg,

vitamin A 10370 µg, vitamin B1 0,1 mg, vitamin C 239 mg, air 81%,

fenol 138,01 mg, quercetin 4,5 mg, kaempferol 138,14 mg, antosianin

1,52 mg, asam klorogenat 3,38 mg, asam kafeat 1,13 mg, asam ferulat

1,1 mg (Magdalena et al., 2015). Daun katuk juga mengandung

senyawa antioksidan yaitu flavonoid, tannin, saponin, juga vitamin A

dan C (Santoso, 2013; Suparmi et al., 2016). Daun katuk juga

mengandung klorofil sekitar 1509,1 mg/kg yang berfungsi sebagai

(Nurdin, Kusharto, & Tanziha, 2009). Namun daun katuk yang sudah

tua mengandung papaverin yang berdampak pada gangguan pernapasan

(Santoso, 2013; Wu et al., 1997).

 24

2.2.2. Daun Kelor

Tanaman kelor memiliki taksonomi sebagai berikut.

Kingdom : Plantae
Divisi : Spermatophyta
Kelas : Dicotyledoneae
Ordo : Rhoeadales (Brassicales)
Famili : Moringaceae
Genus : Moringa
Spesies : Moringa oleifera

Gambar 2.7. Tanaman Kelor (Aminah, Ramdhan, & Yanis, 2015)

Kelor yang memiliki nama lain Limaran atau Kelintang

memiliki ciri-ciri batang kayu setinggi 10 meter, bercabang lurus

memanjang dengan model simpodial, permukaan batang kasar,

berwarna putih kotor, berkulit tipis, dan tegak. Daun kelor bersifat

majemuk, beranak daun gasal (imparipinnatus), terususun salang-

seling, dan warna helai daun saat muda ialah hijau muda. Bentuk buah

panjang sekitar 20-30 cm, segitiga, dengan warna hijau muda saat
 25

muda, yang berganti coklat saat tua, berbuah setelah 12-18 bulan, dan

bijinya coklat kehitaman, bulat. Akar kelor tunggang, putih, dan

besarnya seperti lobak.

Daun kelor memiliki kandungan senyawa alkaloid, flavonoid,

glikosida, gula tereduksi, karbohidrat, saponin, sterol, tannin, dan

terpenoid. Flavonoid merupakan kandungan terbanyak diantara

senyawa yang lain, sedangkan karbohidrat, gula tereduksi, dan alkaloid

memiliki jumlah sedang. Glikosida, saponin, tannin, dan terpenoid

merupakan senyawa dengan kandungan paling sedikit (Syahid &

Kristina, 2014).

Daun kelor per 100 g mengandung Vitamin A 6,8 mg, vitamin

B1 0,21 mg, vitamin B2 0,05 mg, vitamin B3 0,8 mg, vitamin C 220

mg, Ca 440 mg, Fe 7 mg, Fosfor 70 mg, Mg 24 mg, Seng 137 mg (Hadju

& Bahar, 2014). Daun kelor juga mengandung senyawa polifenol yaitu

asam klorogenat (134.5 μmol/100 g bk), kaempferol glycosides (394.4

μmol/100 g bk), quercetin-3-glycoside (Q-3-G: 1494.2 μmol/100 g

berat kering (bk)), rutin (1446.6 μmol/100 g bk) (Ndong, Uehara, &

Katsumata, S I, Suzuki, 2007). Daun kelor juga mengandung senyawa

turunan fitosterol yaitu sitosterol 1,15 gr/100 g dan stigmasterol 1,52

g/100 g (Syahid & Kristina, 2014). Kandungan sterol dan alkaloid

inilah yang membuat daun kelor berperan dalam meningkatkan

produksi ASI (Aulianova et al., 2016). Ditambah lagi, daun kelor juga

mengandung beberapa nutrisi berikut.

 26

Tabel 2.2. Kandungan lain dari tanaman kelor

2.3. Pengaruh Daun Katuk dan Daun Kelor terhadap Hematokrit

Penelitian sebelumnya mengenai daun katuk ialah, 15 tikus betina

bunting hari pertama yang dibagi menjadi 5 kelompok yaitu kelompok kontrol,

kelompok perlakuan fraksi hexan 57,5 mg/hari/ekor, ekstrak etanol 297,5

mg/hari/ekor, fraksi etil asetat 40 mg/hari/ekor, dan fraksi air 209 mg/hari/ekor

yang diinduksi selama 21 hari. Pengambilan sampel darah dilakukan pada hari

ke 10 laktasi tikus. Hasil yang didapatkan ialah eritrosit dan hematokrit tidak

meningkat maupun menurun secara signifikan pada semua kelompok. Hal ini

disebabkan kemungkinan pada hari ke 10 laktasi tikus sudah berada dalam

keadaan homeostasis pembentukan darah. Sedangkan hemoglobin menurun

signifikan pada kelompok fraksi hexan (11,87±0,12 g%) dan fraksi etil asetat

(10,86±1,2 g%) yang masih berada pada level normal. Keadaan hemoglobin

menurun yang tidak diikuti penurunan eritrosit disebabkan oleh gangguan

pencernaan protein dan Fe oleh daun katuk sehingga bahan pembentuk

hemoglobin tidak ada, sedangkan pembentukan eritrosit tidak tergantung oleh

hemoglobin (Bahar, 2011).

 27

Penelitian lain mengenai daun kelor, 54 tikus jantan dibagi menjadi 4

kelompok yaitu kelompok kontrol 3 ml/kg air terdestilasi dan kelompok

perlakuan ekstrak aqueous daun kelor 400 mg/kg, 800 mg/kg, dan 1600 mg/kg

secara peroral selama 21 hari. Pada kelompok 400 mg/kg terjadi peningkatan

hematokrit yang signifikan (45,3±1,6%), namun tidak terjadi perubahan

signifikan hemoglobin (14,0±1,7 g%) dan jumlah eritrosit (7,4±0,1 juta/mm3).

Kelompok 800 mg/kg mengalami penurunan hematokrit, hemoglobin, dan

hitung eritrosit yang signifikan. Sedangkan pada dosis 1600 mg/kg, hematokrit

menurun signifikan tapi diikuti dengan perubahan hemoglobin dan jumlah

eritrosit yang tidak signifikan (Adedapo, Mogbojuri, & Emikpe, 2009).

Peningkatan kadar hematokrit tidak terlepas dari jumlah eritrosit yang

meningkat. Jumlah eritrosit semakin meningkat jika jumlah Hb meningkat.

Pembentukan Hb itu sendiri membutuhkan Fe dan dilakukan dilakukan pada

eritrosit yang sedang mengalami eritropoesis di 2 tempat yang berbeda, yaitu

pembentukan hem di mitokondria, dan pembentukan globin di ribosom

eritrosit. Penyerapan Fe dalam tubuh memerlukan protein sebagai transporter

Fe dalam tubuh dan vitamin C berperan sebagai reduktor Fe sehingga senyawa

ferri menjadi ferro dan membantu penyerapan Fe non hem pada daun kelor 4

kali lipat (Mahan & Raymond, 2017). Kandungan gizi yang lebih lengkap,

senyawa laktagogum yang lebih tinggi, serta adanya senyawa flavonoid pada

daun kelor, ditambah lagi dengan lebih tingginya kadar vitamin C, adanya

senyawa laktagogum dan flavonoid daun katuk dapat meningkatkan efektivitas

 28

peran sebagai antianemia. Oleh karena itu, jika kadar Hb meningkat, berarti

akan berada di banyak eritrosit, sehingga hematokrit pun meningkat.

Pertimbangan lain untuk melakukan kombinasi pada penelitian ini

karena komponen gizi daun kelor lebih banyak dibanding daun katuk. Berikut

perbandingan komponen gizi daun katuk dan daun kelor per 100 mg pada

Tabel 2.3.

Komponen Gizi Daun Katuk Daun Kelor

Besi 2,7 mg 7 mg

Kalori 59 kal 82 kal

Protein 4,8 g 6,7 g

Lemak 1g 1,7 g

Karbohidrat 11 g 14,3 g

Kalsium 204 mg 440 mg

Fosfor 83 mg 70 mg

Vitamin A 10,37 mg 6,8 mg

Vitamin B1 6,1 mg 6,21 mg

Vitamin C 239 mg 220 mg

Air 81 g 75 g

Flavonoid merupakan salah satu senyawa metabolit sekunder yang termasuk

dalam golongan polifenol dengan 15 atom karbon. Flavonoid dapat

meningkatkan jumlah eritrosit dengan cara melindungi membrane lipid dari

radikal hidroksil, superoksida, dan hydrogen peroksida.

 29

2.4. Kerangka Teori

Ekstrak kombinasi daun
katuk dan daun kelor

Daun katuk Daun kelor

Flavonoid, Fe, vit C >, Fe >, vit C, Flavonoid, Kuantitas

Laktagogum protein protein > Laktagogum komposisi
> gizi lebih
banyak

Kadar Fe

Faktor yang mempengaruhi Ht Kadar Hb

:
1. Usia dan jenis kelamin
2. Fisiologis kehamilan
3. Ukuran, bentuk, dan Kadar Ht
jumlah eritrosit
4. Hidrasi tubuh
5. Tinggal di dataran
tinggi
6. Obat
7. Jumlah leukosit tinggi
8. Penyakit
kardiovaskular, ginjal,
sumsum tulang
 30

2.5. Kerangka Konsep

Ekstrak kombinasi daun Kadar Ht

katuk dan daun kelor

2.6. Hipotesis

Ada perbedaan efektivitas kombinasi ekstrak daun katuk dan daun

kelor terhadap kadar hematokrit tikus betina galur wistar.

 BAB III

METODOLOGI PENELITIAN

3.1 Jenis Penelitian dan Rancangan Penelitian

Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental dengan rancangan

pretest-posttest control group design.

3.2 Variabel dan Definisi Operasional

3.2.1 Variabel Penelitian

3.2.1.1 Variabel Bebas

Ekstrak kombinasi daun katuk dan daun kelor.

3.2.1.2 Variabel Terikat

Kadar hematokrit tikus betina galur wistar.

3.3 Definisi Operasional

3.3.1 Ekstrak kombinasi daun katuk dan daun kelor

Ekstrak daun katuk dan daun kelor dalam penelitian ini dibuat

dengan maserasi daun kering dengan pelarut etanol 70%. Maserat

kemudian diuapkan dengan rotatory evaporator sampai menjadi ekstrak

kental. Ekstrak daun katuk diberikan pada tikus dengan dosis 300

mg/ekor, ekstrak daun kelor diberikan dengan dosis 80 mg/ekor, dan

ekstrak kombinasi diberikan dengan dosis 150 mg ekstrak daun katuk

dan 40 mg ekstrak daun kelor. Semua perlakuan diberikan 1 kali sehari

selama 21 hari peroral.

31
 32

Satuan : mg

Skala : nominal.

3.3.2 Kadar Hematokrit

Persentase volume eritrosit per 100 ml darah tikus betina galur

wistar yang didapatkan melalui pemeriksaan mikrohematokrit

menggunakan tabung kapiler dan alat sentrifugasi 10.000-16.000 rpm.

Satuan : persen (%)

Skala : rasio.

3.4 Subjek Uji

Hewan coba yang digunakan dalam penelitian ini adalah 30 tikus putih

galur wistar betina, usia 2-3 bulan, berat 150–200 gram, dan aktif bergerak.

3.5 Alat dan Bahan Penelitian

Alat yang digunakan pada penelitian ini yaitu timbangan, kapas alkohol

70% kandang tikus, tempat pakan, tempat minum, peralatan maserasi,

homogenizer, kertas saring, kain flannel, rotatory evaporator, vial, tabung

kapiler, alat penyumbat tabung kapiler (vitrex), alat sentrifugasi kecepatan

10.000 – 16.000 rpm, microhematocrit reader, dan stopwatch. Bahan yang

digunakan adalah daun katuk, pelarut etanol, aquabidest, tikus putih betina,

pakan tikus (terdiri atas AIN-93M dan AIN-93G-MX defisiensi Fe, dan eter.
 33

3.6 Cara Penelitian

3.6.1. Pembuatan ekstrak

Daun katuk dan daun kelor diproses masing-masing. Daun yang

masih segar dicuci dengan air bersih, lalu ditiriskan. Pengeringan

dilanjutkan menggunakan oven dengan suhu 400C. Selanjutnya proses

pembuatan ekstraksi melalui metode maserasi yaitu pencampuran

dengan etanol. Daun katuk sebanyak 2 kg yang sudah dikeringkan

dengan oven, dilarutkan dalam pelarut etanol dengan perbandingan

daun dan etanol ialah 1:10, lalu diaduk secara manual selama 30 menit,

kemudian didiamkan selama 24 jam. Setelah maserasi, dilakukan

penyaringan menggunakan kain flannel dan kertas saring. Filtrat hasil

penyaringan ini dievaporasikan menggunakan rotatory evaporator

pada suhu 400C. Hasil ekstraksi diperoleh ekstrak etanol daun katuk dan

daun kelor.

3.6.2. Adaptasi tikus dan pengukuran kadar hematokrit sebelum

perlakuan

Hewan coba yang digunakan dalam penelitian ini ialah tikus

betina putih (Rattus norvegicus) galur wistar sebanyak 30 ekor. Tikus

tersebut masing-masing dikandangkan dalam kandang individu dengan

ukuran 15x20x25 cm3 dan memiliki tempat minum pada bagian atas

kandang dan tempat pakan di bagian dalam kandang. Kandang tikus

dibersihkan 1 hari sekali untuk menjaga kebersihan dan kesehatan.

Tikus diberi minum aquabidest secara ad libitum dan diberi makan

 34

sesuai kebutuhan nutrisi tikus yaitu dengan pemberian AIN-93-M.

Adaptasi tikus tersebut berlangsung selama 7 hari.

3.6.3. Pemberian pakan defisiensi Fe dan pretest

Tikus dibuat anemi dengan pemberian pakan AIN-93G-MX

dengan defisiensi Fe selama 7 hari. Kemudian kadar hematokrit tikus

diukur sebelum perlakuan guna menjadi pembanding terhadap kadar

hematokrit setelah diberi perlakuan. Sinus orbita tikus ditusuk

menggunakan tabung kapiler dengan posisi hampir horizontal dengan

kemudian dibiarkan mengalir hingga ¾ bagian dari tabung kapiler dan

menyisakan ruang kosong 1 cm pada ujung tabung dekat sinus orbita

tikus. Jika sudah mencapai ¾ tabung, tutup ujung lainnya dengan jari

telunjuk. Bagian ujung tabung yang kosong 1 cm disumbat dengan

penyumbat atau vitrex. Tabung kapiler tersebut kemudian diletakkan

pada alat sentrifugasi dengan posisi ujung tabung yang tak tersumbat

diarahkan ke pusat sentrifugasi. Sentrifugasi dilakukan selama 4-5

menit kecepatan 10.000 rpm. Kadar hematokrit dapat dibaca dengan

alat pembaca hematokrit.

3.6.4. Pemberian perlakuan pada tikus

Sejumlah 30 ekor tikus putih betina galur wistar dibagi menjadi

5 kelompok yang masing-masing diberikan perlakuan yang berbeda.

Kelompok pertama diberikan perlakuan ekstrak daun katuk, kelompok

kedua diberikan ekstrak daun kelor, kelompok ketiga diberikan ekstrak

kombinasi daun katuk dan kelor, kelompok keempat sebagai kontrol

 35

anemia, dan kelompok kelima sebagai kelompok normal. Tikus diberi

minum aquabidest secara ad libitum dan diberi makan sesuai kebutuhan

nutrisi tikus yaitu dengan pemberian AIN-93-M.

3.6.5. Pengukuran kadar hematokrit setelah perlakuan

Pengukuran kadar hematokrit kembali setelah perlakuan dengan

cara yang sama seperti pemeriksaan hematokrit sebelumnya.

 36

3.7 Alur Penelitian

Pemilihan subjek uji

Adaptasi subjek uji

Randomisasi

K1 K2 K3 K4 K5

Pemberian pakan AIN-93G-MX

Pretest
defisiensi Fe ad libitum selama 7 hari
berturut-turut

Pretest

Perlakuan

K1 = K2 = K3 = Kelompok
Kelompok Kelompok perlakuan K5 =
K4 =
perlakuan perlakuan ekstrak Kelompok
Kelompo
ekstrak ekstrak kombinasi Kontrol
k Kontrol
daun katuk daun kelor katuk 150 mg tanpa
anemia
300 80 mg/ekor, dan kelor 40 mg selama 21 perlakuan
mg/ekor, 1x 1x sehari, per ekor, 1x1, hari
sehari, 21 21 hari PO 21 hari PO
hari PO

Posttest Posttest
 37

3.8 Tempat dan Waktu

Penelitian ini dilakukan selama satu bulan dimulai dari bulan November

2017 di laboratorium PSPG UGM.

3.9 Analisis Hasil

Hasil penelitian yang diperoleh berupa data kadar hematokrit tikus

betina galur wistar dari semua sampel, kemudian dilakukan uji deskriptif untuk

mendapatkan nilai mean dan standar deviasi. Data diuji normalitas

menggunakan Shapiro-wilk, sedangkan uji homogenitas dengan menggunakan

uji varian (Levene test). Jika distribusi data normal dan varian data homogen

maka data dianalisis menggunakan uji parametrik yaitu uji Anova, dilanjutkan

uji post hoc. Jika data tidak terdistribusi normal dan / atau homogen maka data

dianalisis dengan uji Kruskal Wallis, dilanjutkan uji Mann Whitney.

 DAFTAR PUSTAKA

Adedapo, A. A., Mogbojuri, O. M., & Emikpe, B. O. (2009). Safety evaluations

of the aqueous extract of the leaves of Moringa oleifera in rats. Journal of
Medicine Plants Research, 3(8), 586–591.
Aminah, S., Ramdhan, T., & Yanis, M. (2015). Kandungan Nutrisi dan Sifat
Fungsional Tanaman Kelor (Moringa oleifera). 35 Buletin Pertanian
Perkotaan, 5(2), 35–44. Retrieved from
http://jakarta.litbang.pertanian.go.id/ind/artikel bptp/buletin nutrisi kelor
volume 5 o 2 2015.pdf
Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan. (2013). Riset Kesehatan Dasar
(RISKESDAS) 2013. Laporan Nasional 2013, 1–384. https://doi.org/1
Desember 2013
Bahar, N. W. (2011). Pengaruh Pemberian Ekstrak dan Fraksi Daun Katuk
(Sauropus androgynus (L.) Merr) terhadap Gambaran Hematologi pada Tikus
Putih Laktasi.
Betts, J. G., Desaix, P., Johnson, J. E., Korol, O., Kruse, D., Poe, B., … Young, K.
A. (2017). Anatomy and Physiology. OpenStax.
Chang, S., Zeng, L., Brouwer, I. D., Kok, F. J., & Yan, H. (2013). Effect of iron
deficiency anemia in pregnancy on child mental development in rural China.
Pediatrics, 131(3), e755-63. https://doi.org/10.1542/peds.2011-3513
Fischbach, F. T., & Dunning, M. B. (2015). A Manual of Laboratory and
Diagnostic Test (Vol. 40). https://doi.org/10.1002/1521-
3773(20010316)40:6<9823::AID-ANIE9823>3.3.CO;2-C
Hadju, V., & Bahar, B. (2014). Ekstarak Daun Kelor terhadap Peningkatan
Asupan dan Berat Badan Ibu Hamil Pekerja Sektor Informal, 5(November),
192–201.
Hardiyanti, F. (2015). Pemanfaatan Aktivitas Antioksidan Ekstrak Daun Kelor
(Moringa oleifera) dalam Sediaan Hand and Body Cream, 1, 1–136.
Hidayah, W., & Anasari, T. (2012). Hubungan Kepatuhan Ibu Hamil
Mengkonsumsi Tablet Fe dengan Kejadian Anemia di Desa Pageraji
Kecamatan Cilongok Kabupaten Banyumas. Jurnal Ilmiah Kebidanan, 3(2),
41–53. Retrieved from
http://download.portalgaruda.org/article.php?article=200736&val=6633&titl
e=HUBUNGAN KEPATUHAN IBU HAMIL MENGKONSUMSI
TABLET Fe DENGAN KEJADIAN ANEMIA DI DESA PAGERAJI
KECAMATAN CILONGOK KABUPATEN BANYUMAS
Hoffbrand, A. V., & Moss, P. A. H. (2016). Hoffbrand’s Essential Haematology,
7th Edition. Wiley-Blackwell. https://doi.org/978-1-118-40867-4

38
 39

Kemenkes. (2011). Pedoman Interpretasi Data Klinik.

Magdalena, S., Yuwono, B., Wulan, A., & Dharmayanti, S. (2015). terhadap
Waktu Perdarahan ( Bleeding Time ) pada Tikus Wistar Jantan sebagai
Alternatif Obat Antitrombotik ( The Effect of Star Gosseberry ( Sauropus
androgynus ( L .) Merr .) to bleeding time of Male Wistar Rats as an
Alternative Antithrombotic Drug ), 3(2), 212–216.
Mahan, L. K., & Raymond, J. L. (2017). Krause’s Food & The Nutrition Care
Process. Food and Nutrition Board, Institute of Medicine, National
Academies (14th editi). Elsevier. https://doi.org/10.1111/j.1753-
4887.2004.tb00011.x
Ndong, M., Uehara, M., & Katsumata, S I, Suzuki, K. (2007). Effects of Oral
Administration of Moringa oleifera Lam on Glucose Tolerance in Goto-
Kakizaki and Wistar Rats. Journal of Clinical Biochemistry and Nutrition,
40(3), 229–233. https://doi.org/10.3164/jcbn.40.229
Nurdin, Kusharto, C. M., & Tanziha, I. (2009). Kandungan Klorofil Berbagai
Jenis Daun Tanaman dan Cu-Turunan Klorofil serta Karakteristik Fisiko-
Kimianya, 4(1), 13–19.
Pagana, K. D., & Pagana, T. J. (2014). Mosby â€TM s Manual of Diagnostic and
Laboratory Tests Kathleen Deska Pagana , PhD , RN ,.
Rigby, F. B. (2016). Anemia. Retrieved January 1, 2017, from
http://emedicine.medscape.com/article/261586-overview
Santoso, U. (2013). Katuk, Tumbuhan Multi Khasiat. Bengkulu: Badan Penerbit
Fakultas Pertanian ( BPFP ) Unib. Retrieved from
https://www.researchgate.net/profile/Urip_Santoso2/publication/303994522_
Katuk_Tumbuhan_Multi_Khasiat/links/576221a208aeeada5bc50639/Katuk-
Tumbuhan-Multi-Khasiat.pdf
Sharma, J. B., & Shankar, M. (2010). Anemia in Pregnancy . Indian Journal of
Medical Research, 23(4), 253–260. https://doi.org/10.5005/jp-journals-
10006-1177
Subekti, S. (2007). Komponen Sterol Dalam Ekstrak Daun Katuk (Sauropus
androgynus L.Merr) dan Hubungannya dengan Sistem Reproduksi Puyuh.
Suparmi, S., Sampurna, S., C.S, N. A., Ednisari, A. M., Urfani, G. D., Laila, I., &
Saintika, H. R. (2016). Anti-anemia Effect of Chlorophyll from Katuk
(Sauropus androgynus) Leaves on Female Mice Induced Sodium Nitrite.
Pharmacognosy Journal, 8, 375–379. https://doi.org/10.5530/pj.2016.4.10
Susiloningtyas, I. (2012). Pemberian Zat Besi (Fe) dalam Kehamilan. Majalah
Ilmiah Sultan Agung, 50, 128.
Syahid, S. F., & Kristina, N. N. (2014). Tanaman-Kelor-utk-ASI.pdf. Warta
Penelitian dan Pengembangan Tanaman Industri.
 40

Wu, C. L., Hsu, W. H., Chiang, C. D., Kao, C. H., Hung, D. Z., King, S. L., &
Deng, J. F. (1997). Lung injury related to consuming Sauropus androgynus
vegetable. Journal of Toxicology. Clinical Toxicology, 35(3), 241–8.
Retrieved from http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/9140317