TESIS

AKSELERASI APOPTOSIS MELALUI JALUR EKSTRINSIK DENGAN

SENSITIVASI SEKROTOM DAN CSF-2 PADA PERIPHERAL BLOOD
MONONUCLEARS (PBMCS) TERHADAP MESENCHYMAL STEM SELL
OSTEOSARCOMA (OS-MSCS)

FACHRIZAL ARFANI PRAWIRAGARA

PROGRAM STUDI ILMU KEDOKTERAN KLINIK JENJANG MAGISTER

FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS AIRLANGGA
SURABAYA
2019
 AKSELERASI APOPTOSIS MELALUI JALUR EKSTRINSIK DENGAN
SENSITIVASI SEKROTOM DAN CSF-2 PADA PERIPHERAL BLOOD
MONONUCLEARS (PBMCS) TERHADAP MESENCHYMAL STEM SELL
OSTEOSARCOMA (OS-MSCS)

TESIS
Untuk Memperoleh Gelar Magister Kedokteran Klinik
Dalam Program Studi Ilmu Kedokteran Klinik Jenjang Magister
Fakultas Kedokteran Universitas Airlangga

Oleh:

FACHRIZAL ARFANI PRAWIRAGARA

01618126305

PROGRAM STUDI ILMU KEDOKTERAN KLINIK JENJANG MAGISTER

FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS AIRLANGGA
SURABAYA
2019

ii
 PERNYATAAN ORISINALITAS

Yang bertanda tangan di bawah ini :

Nama : Fachrizal Arfani Prawiragara

NIM : 01618126305

Prodi Bidang Minat : Ilmu Orthopaedi dan Traumatologi

Angkatan : Juni 2016

Jenjang : Magister

Menyatakan bahwa bagian atau keseluruhan isi Tesis saya yang berjudul :

AKSELERASI APOPTOSIS MELALUI JALUR EKSTRINSIK DENGAN

SENSITIVASI SEKROTOM DAN CSF-2 PADA PERIPHERAL BLOOD
MONONUCLEARS (PBMCS) TERHADAP MESENCHYMAL STEM SELL
OSTEOSARCOMA (OS-MSCS)

Adalah hasil karya saya sendiri dan semua sumber baik yang dikutip maupun yang dirujuk

telah saya nyatakan dengan benar. Apabila ditemukan bukti pernyataan saya tidak benar,

maka saya bersedia menerima sanksi yang telah ditetapkan. Demikian pernyataan ini saya

buat dengan sebenar-benarnya.

Surabaya, 07 Februari 2019

Fachrizal Arfani Prawiragara

iii
 HALAMAN PERSETUJUAN

PROPOSAL TESIS INI TELAH DISETUJUI

TANGGAL 07 FEBRUARI 2019

Oleh :

Pembimbing I

Dr. Ferdiansyah, dr., Sp.OT(K)

NIP. 19640212 198911 1 001

Pembimbing II

Prof. Dr. Fedik Abdul Rantam, drh

NIP. 19591003 198701 1 001

Pembimbing III

Mouli Edward, dr., M.Kes., Sp.OT(K)

NIP. 19710509 200904 1 001

Mengetahui,
Ketua Program Studi Ilmu Kedokteran Klinik Jenjang Magister

Dr. Aditiawarman, dr., Sp.OG(K)

NIP. 19581101 198610 1 002

iv
 HALAMAN PENGESAHAN

Tesis ini diajukan oleh:

Nama : Fachrizal Arfani Prawiragara

NIM : 01618126305

Prodi Bidang Minat : Ilmu Orthopaedi dan Traumatologi

Judul : AKSELERASI APOPTOSIS MELALUI JALUR

EKSTRINSIK DENGAN SENSITIVASI SEKROTOM DAN
CSF-2 PADA PERIPHERAL BLOOD MONONUCLEARS
(PBMCS) TERHADAP MESENCHYMAL STEM SELL
OSTEOSARCOMA (OS-MSCS)

Proposal tesis ini diuji dan dinilai oleh panitia penguji Program Studi Ilmu Kedokteran

Klinik Jenjang Magister Fakultas Kedokteran Universitas Airlangga

Pada tanggal 12 Februari 2019

Panitia penguji,

1. Pembimbing I : Dr. Ferdiansyah., dr., Sp.OT(K)

2. Pembimbing II : Prof. Dr. Fedik Abdul Rantam, drh

3. Ketua Tim Penguji : Dr. Heri Suroto., dr., Sp.OT(K)

4. Anggota Penguji : Budiono, dr., M.Kes

5. Anggota Penguji : Dr. Dwikora N.Utomo., dr., Sp.OT(K)

v
 DAFTAR ISI

Halaman Depan ............................................................................................................ i

Judul Proposal Penelitian ............................................................................................. ii
Pernyataan Orisinalitas ................................................................................................ iii
Halaman Persetujuan .................................................................................................... iv
Halaman Pengesahan ................................................................................................... v
Daftar Isi ...................................................................................................................... vi
Daftar Gambar .............................................................................................................. viii
Daftar Singkatan .......................................................................................................... ix
BAB 1 PENDAHULUAN ............................................................................................ 1
1.1 Latar Belakang ............................................................................................... 1
1.2 Rumusan Masalah ......................................................................................... 6
1.3 Tujuan Penelitian ........................................................................................... 7
1.3.1 Tujuan Umum ........................................................................................... 7
1.3.2 Tujuan Khusus .......................................................................................... 7
1.4 Manfaat Penelitian ......................................................................................... 8
1.4.1 Manfaat Teoritis ........................................................................................ 8
1.4.2 Manfaat Praktis ......................................................................................... 8
BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA .................................................................................. 9
2.1 Osteosarkoma ................................................................................................ 9
2.1.1 Diagnosis Osteosarkoma ........................................................................... 10
2.1.2 Staging dan Penilaian Risiko ……............................................................ 11
2.1.3 Terapi …………………............................................................................ 13
2.2 Biomarker pada Osteosarcoma ...................................................................... 14
2.2.1 Lactat Dehydrogenase (LDH) …………………………………………... 15
2.2.2 Alkaline Phospatase ……………………………………………….…….. 15
2.3 Osteosarcoma dan Metastasis pada Paru ...................................................... 15
2.4 Klasifikasi Osteosarcoma ………………………………………………............... 17
2.4.1 Konvensional Osteoscarcoma..................................................................... 17
2.5 Cancer Stem Cell............................................................................................. 17
2.6 Cancer Stem Cells in Osteosarcoma ……………………………………………… 18
2.6.1 Isolasi dan Karakteristik Fungsional Cancer Stem Cell dari Osteosarcoma... 19
2.6.2 Isolasi Berdasarkan Permukaan Marker ……………………………………. 19
2.6.3 Isolasi berdasarkan sifat seluler intrinsic …………………………………… 20
2.6.3.1 Dye Retension ……………………………………………………… 20
2.6.3.2 Dye Exclusion dan Side Population ………………………………... 20
2.6.4 Limiting Dilution Assay (LDA) ……..……………………………………... 20
2.6.5 Multipotency …………………..……..……………………………………... 21
2.7 Faktor signaling yang mempengaruhi Osteosarcoma CSCs ……………………... 22
BAB 3 KERANGKA KONSEPTUAL ……………………………............................ 24
3.1 Kerangka Konseptual .................................................................................... 24
3.2 Hipotesis …………......................................................................................... 25
BAB 4 METODE & MATERIAL ................................................................................ 27
4.1 Rancangan Penelitian .................................................................................... 27
4.2 Materi Penelitian ............................................................................................ 28
4.3 Besar Sampel ….............................................................................................. 28
4.4 Teknik Rekomendasi ....................................................................................... 28

vi
 vii

4.5 Variabel Penelitian .. ...................................................................................... 28

4.5.1 Variabel bebeas (Independent Variable) ………………………………… 28
4.5.2 Variabel Tergantung (Dependent Variable) ………………………..…… 29
4.5.3 Variabel Kendali ………………………… ………..………………….… 29
4.6 Definisi Operasional ...................................................................................... 29
4.7 Tempat dan Waktu Penelitian.......................................................................... 30
4.8 Alur Pelaksanaan penelitian ........................................................................... 31
4.9 Prosedur Penelitian ………............................................................................. 32
4.10 Pengumpulan Data ………............................................................................. 32
DAFTAR PUSTAKA .................................................................................................. 35

vii
 DAFTAR GAMBAR

Gambar 2.1 Distribusi dan metastasis pada Osteosarcoma....................................... 12

Gambar 2.2 Skematik dari Mesenchymal Stem Cell (MSCs) differentiation to another,
soft tissue…………………………………………….. ........................ 21
Gambar 2.3 Skematik dari Mesenchymal Stem Cell (MSCs) dan Progressi dari
linear...................................................................................................... 23
Gambar 3.1 Keranga Konseptual ............................................................................. 36
Gambar 4.1 Pola Rancangan Penelitian .................................................................... 40
Gambar 4.2 Alur Penelitian ...................................................................................... 45

viii
 DAFTAR SINGKATAN

APAF-1 : Apoptotic Protease-Activating Factor-1

CSC : Cancer Stem Cells
CSF : Colonie Stimulating Factor
DISC : Death Inducing Signalling Complex
DNA : Deoxyribonucleic Acid
DSBs : Double Strand Breaks
ELISA : Enzyme-Linked Immunosorbent Assay
EDTA : Ethylenediaminetetraacetic Acid
FADD : Fas-Associated Death Domain
HSP : Heat Shock Protein
OS-MSCs : Mesenchymal Stem Cell Osteosarcoma
PBMCs : Peripheral Blood Mesenchymal Stem Cells
ROS : Reactive Oxygen Species
SCRDC : Stem Cell Research and Development Center
ITD : Institute of Tropical Disease
TRADD : Tumor Related Death Domain
TNF : Tumor Necrosis Alfa

ix